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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201510947462.9 (22)申请日 2015.12.17 A23K 50/80(2016.01) A23K 20/00(2016.01) (71)申请人 宁波大学 地址 315211 浙江省宁波市江北区风华路 818 号 (72)发明人 丁立云 周歧存 孙蓬 陆游 袁野 马红娜 (74)专利代理机构 宁波奥圣专利代理事务所 ( 普通合伙 ) 33226 代理人 何仲 (54) 发明名称 一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的 饲料添加剂及其应用 (57) 摘要 本发明公开了一种促进三疣梭子蟹卵巢发 育及卵黄发生的饲料添加剂及其应。
2、用， 特点是由 下述重量份数的原料均匀混合配制而成 ： DHA 乙 酯油 15-20， EPA 乙酯油 5-10， 维生素 E 醋酸酯 10-15， 胆固醇 5-10， 大豆卵磷脂 5-10， 甘油磷脂 酰胆碱 2-5， 虾青素 1-3， 大豆异黄酮 1-3， 木脂素 1-3， 海藻粉 20-25， 缢蛏粉 10-15， 该添加剂在投 喂的饲料中的质量百分比含量为 0.8-1.0%， 优点 是使三疣梭子蟹成活率可提高 20-23%， 性腺指数 可提高 40-50%， 卵黄蛋白原含量可提高 35-45%， 卵黄蛋白原分子表达量可提高 60-80%， 平均体重 可提高 25-30%， 养殖产量提高。
3、 20-22%。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书4页 CN 105533266 A 2016.05.04 CN 105533266 A 1.一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加剂， 其特征在于： 由下述重量 份数的原料均匀混合配制而成： DHA乙酯油 15-20， EPA乙酯油 5-10， 维生素E醋酸酯 10- 15， 胆固醇5-10， 大豆卵磷脂5-10， 甘油磷脂酰胆碱2-5， 虾青素1-3， 大豆异黄酮1-3， 木脂素 1-3， 海藻粉20-25， 缢蛏粉10-15。 2.根据权利要求1所述的一种促进。
4、三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加剂， 其 特征在于由下述重量份数的原料均匀混合配制而成： DHA乙酯油 18， EPA乙酯油 8， 维生素E 醋酸酯 13， 胆固醇8， 大豆卵磷脂8， 甘油磷脂酰胆碱3， 虾青素2， 大豆异黄酮2， 木脂素2， 海 藻粉23， 缢蛏粉13。 3.根据权利要求1所述的一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加剂， 其 特征在于： 所述的DHA乙酯油与所述的EPA乙酯油的重量比为1.53。 4.一种根据权利要求1-3所述的一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加 剂的应用， 其特征在于： 该添加剂在投喂的饲料中的质量百分比含量为0.8-1.0%。 。
5、权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 105533266 A 2 一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加剂及其 应用 技术领域 0001 本发明涉及三疣梭子蟹的饲料添加剂， 尤其是涉及一种促进三疣梭子蟹卵巢发育 及卵黄发生的饲料添加剂及其应用。 背景技术 0002 三疣梭子蟹养殖过程中多采用低值小杂鱼和贝类直接投喂， 不仅鲜活饵料供求矛 盾日益突出, 而且极易造成养殖水域环境污染， 病害频发。 更为突出的是， 养殖三疣梭子蟹 出现了卵巢发育不良， 蟹膏色泽明显变淡 （或不红） ， 肌肉和蟹膏的肥满度差等品质下降的 问题以及抱卵量少和子代发育不良等现象。 卵黄发生(vitelloge。
6、nesis)是指各种蛋白质、 脂类、 碳水化合物等卵黄物质的形成及其在卵母细胞中的积累， 是卵母细胞发育成熟的必 要前提， 它以血淋巴中卵黄蛋白原浓度的大量增加和卵巢的发育为特征。 卵黄发生对于动 物的生殖周期也有着决定性作用， 是生命得以繁衍的至关重要因素， 动物卵子的卵黄形成 为后续的个体发育提供物质和能源， 卵黄的合成、 集聚、 多寡、 分布以及组分等对其胚胎和 幼体至关重要。 国内外研究表明， 营养是决定虾蟹亲体性腺发育及卵黄发生的关键因素。 为 此， 深入研究三疣梭子蟹卵黄发生机制， 探寻养殖三疣梭子蟹的卵巢发育不良的营养解决 方案， 成为解决这一问题的必由之路。 0003 中国国家。
7、知识产权局网站公布了一种促进三疣梭子蟹雌体育膏的配合饲料及其 制 备 方 法 （C N 2 0 1 3 1 0 7 1 5 2 2 6 .5） 和 一 种 梭 子 蟹 育 红 膏 饲 料 及 其 制 备 方 法 （CN201310438934.9） 。 上述专利通过在配合饲料中添加胡萝 卜素、 虾青素、 红藻粉等增添色 泽的物质来强化上市前的育膏， 未从营养生理生化和卵黄形成的角度， 综合考虑蟹膏的营 养价值和口感， 以及梭子蟹整个生殖周期的卵巢发育和产卵质量。 目前国内外还没有公开 任何关于促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加剂的相关研究报道。 发明内容 0004 本发明所要解决的技术。
8、问题是提供一种蟹膏品质较好的促进三疣梭子蟹卵巢发 育及卵黄发生的添加剂及其应用， 该饲料添加剂使三疣梭子蟹成活率可提高20-24%， 性腺 指数可提高40-50%， 卵黄蛋白原含量可提高35-45%， 卵黄蛋白原分子表达量可提高60-80%， 平均体重可提高40-41.8%。 0005 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为： 一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及 卵黄发生的饲料添加剂， 由下述重量份数的原料均匀混合配制而成： DHA乙酯油 15-20， EPA 乙酯油 5-10， 维生素E醋酸酯 10-15， 胆固醇5-10， 大豆卵磷脂5-10， 甘油磷脂酰胆碱2-5， 虾青素1-3， 大豆异黄。
9、酮1-3， 木脂素1-3， 海藻粉20-25， 缢蛏粉10-15。 0006 优选由下述重量份数的原料均匀混合配制而成： DHA乙酯油 18， EPA乙酯油 8， 维 生素E醋酸酯 13， 胆固醇8， 大豆卵磷脂8， 甘油磷脂酰胆碱3， 虾青素2， 大豆异黄酮2， 木脂素 2， 海藻粉23， 缢蛏粉13。 说 明 书 1/4 页 3 CN 105533266 A 3 0007 所述的DHA乙酯油与所述的EPA乙酯油的重量比为1.53。 DHA/EPA比例为1.53 时， 卵巢发育最好， 性腺指数和肝胰腺指数最大， 更有利于营养物质储存和卵黄发生。 0008 一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生。
10、的饲料添加剂的应用， 该添加剂在投喂 的饲料中的质量百分比含量为0.8-1.0%。 0009 与现有技术相比， 本发明的优点在于： 本发明一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵 黄发生的饲料添加剂及其应用， 其中复合添加剂所选用的原料： EPA和DHA在蟹体内不能合成或合成量不足， 该成分的添加可显著促进蟹的卵巢发育， 提高幼体质量， 具有抗过敏和免疫的作用； 维生素E具有抗氧化的作用， 其水解产物为生育酚， 能促进性激素分泌， 雌性激素浓度 增高， 提高生育能力， 预防流产； 胆固醇可促进甲壳动物的生长及蜕壳， 是制造激素的重要原料， 而激素是诱导动物卵 黄发生及性腺发育的重要信号物质； 磷脂和磷脂。
11、酰胆碱是梭子蟹卵黄中主要的脂类物质， 同时可促进脂肪酸、 胆固醇等脂 类物质的转运； 虾青素是一种存在于甲壳纲动物、 绿藻和红酵母等生物中的一种天然色素， 属于类胡 萝 卜素的一种， 可显著提高蟹膏的光泽和口感； 大豆异黄酮是由天然大豆中提取的植物有效成分,因它与雌激素的分子结构非常相 似,能够与雌激素受体相结合， 诱导性腺发育和卵黄发生， 异黄酮没有外源性雌激素的毒副 作用， 易于分解， 不会在体内堆积； 木脂素存在于植物中， 属于一种植物雌激素， 具有清除体内自由基， 抗氧化的作用； 海藻粉能够改善饲料的营养结构， 提高饲料利用率， 调节养殖动物的机体代谢， 提高免 疫力与抗病力， 促进生。
12、长。 0010 缢蛏粉含有丰富的高不饱和脂肪酸等营养物质， 也具有较强的诱食作用。 0011 该添加剂根据三疣梭子蟹生长和生殖期营养生理特点， 通过激素诱导和营养物质 强化， 促进营养物质在梭子蟹体内的转化。 加速梭子蟹的卵巢发育和卵黄发生， 提高存活 率， 改善生长， 增进蟹膏的营养价值和色泽风味。 该复合添加剂比单一添加脂类或激素类促 卵黄发生和卵巢发育的添加剂更为显著， 且脂类营养物质和激素能相互促进， 具有显著提 高生长， 促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的功效。 0012 综上所述， 本发明一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加剂， 在各 成分的协同配合作用下， 在投喂的饲料。
13、中的添加量仅为为0.8-1.0%， 就显著促进三疣梭子 蟹卵巢发育及卵黄发生， 还可提高三疣梭子蟹全周期养殖的成活率， 成活率可提高20-24%， 性腺指数可提高40-50%， 卵黄蛋白原含量及分子表达量可分别提高35-45%、 60-80%， 平均体 重可提高40-41.8%。 具体实施方式 0013 以下结合实施例对本发明作进一步详细描述 一、 具体实施例 一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加剂， 由下述重量份数的原料均匀 混合配制而成： DHA乙酯油 15-20， EPA乙酯油 5-10， 维生素E醋酸酯 10-15， 胆固醇5-10， 大 说 明 书 2/4 页 4 CN 1。
14、05533266 A 4 豆卵磷脂5-10， 甘油磷脂酰胆碱2-5， 虾青素1-3， 大豆异黄酮1-3， 木脂素1-3， 海藻粉20-25， 缢蛏粉10-15。 0014 实施例1 一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加剂， 按以下重量份数称取： DHA乙 酯油 18， EPA乙酯油 8， 维生素E醋酸酯 13， 胆固醇8， 大豆卵磷脂8， 甘油磷脂酰胆碱3， 虾青 素2， 大豆异黄酮2， 木脂素2， 海藻粉23， 缢蛏粉13。 将上述各原料均匀混合， 制备成促进卵巢 发育和卵黄发生的饲料添加剂。 0015 实施例2 一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加剂， 与实施例1基本相。
15、同， 所不同 的只是原料配方中： DHA乙酯油 15， EPA乙酯油 5， 维生素E醋酸酯 15， 胆固醇10， 大豆卵磷 脂10， 甘油磷脂酰胆碱2， 虾青素1， 大豆异黄酮1， 木脂素1， 海藻粉25， 缢蛏粉10。 将上述各原 料均匀混合， 制备成促进卵巢发育和卵黄发生的饲料添加剂。 0016 实施例3 一种促进三疣梭子蟹卵巢发育及卵黄发生的饲料添加剂， 与实施例1基本相同， 所不同 的只是原料配方中： DHA乙酯油 20， EPA乙酯油 10， 维生素E醋酸酯 10， 胆固醇5， 大豆卵磷 脂5， 甘油磷脂酰胆碱5， 虾青素3， 大豆异黄酮3， 木脂素3， 海藻粉20， 缢蛏粉15。 。
16、将上述各原 料均匀混合， 制备成促进卵巢发育和卵黄发生的饲料添加剂。 0017 二、 试验实施例 养殖品种： 平均体重150克三疣梭子蟹600尾， 随机分配为4组， 每组3个重复， 每个水泥 池 （规格为7.5m4m1m， 长宽深） 养殖三疣梭子蟹50只， 实验各组初始体重相同； 养殖 条件如环境因素、 化学因素和生物因素基本相同。 0018 养殖管理： 其它条件基本相同， 所不同只是水泥池1每天投喂的饲料 （原料配方z重 量份数配比为： 鱼粉40、 豆粕25、 面粉23.5、 胆固醇0.5、 氯化胆碱0.5、 海藻酸钠2、 鱼油 1、 大 豆卵磷脂4、 多维1.0、 多矿1.5、 磷酸二氢钙。
17、1.0） 中添加有0.8% （重量） 实施例1的三疣梭子蟹 的饲料添加剂； 水泥池2每天投喂的饲料中添加有0.8% （重量） 实施例2的三疣梭子蟹的饲料 添加剂； 水泥池3每天投喂的饲料中添加有0.8% （重量） 实施例3的三疣梭子蟹的饲料添加 剂； 水泥池4每天投喂的饲料中未添加三疣梭子蟹的促卵巢发育和卵黄发生的饲料添加剂； 该添加剂在投喂的饲料中的质量百分比含量也可以为0.9%或者1%。 0019 结果比较： 养殖8周后， 计算成活率和增重率。 每水泥池取10-15只规格一致的梭子 蟹， 抽血后解剖获得卵巢、 肝胰腺及肌肉， 统计肝胰腺指数和卵巢指数， 测定血淋巴卵黄蛋 白原含量和卵巢中卵。
18、黄蛋白原的相对分子表达量。 性腺指数 (GSI): GSI=(weight of gonad / body weight) 100。 卵黄蛋白原含量采用试剂盒检测 （上海源叶） ， 单位为ng/ ml； 各组的卵巢样品的总RNA采用Trizol进行提取 (北京全式金)， 反转录采用First- Strand Synthesis System for RT-PCR Kit (北京全式金)， 实时荧光定量PCR均采用罗氏 公司试剂盒 (Roche, Switzerland)进行。 0020 实验结果如表1所示。 从表1中可以看出， 水泥池1、 2、 3成活率比未添加组提高20- 24%， 性腺指数。
19、提高40-50%， 卵黄蛋白原含量及分子表达量可分别提高35-45%、 60-80%， 平均 体重提高40-41.8%。 说明本发明的三疣梭子蟹的饲料添加剂能显著促进卵巢发育和卵黄发 生， 并且能提高三疣梭子蟹的成活率和加快三疣梭子蟹生长速度的优点。 说 明 书 3/4 页 5 CN 105533266 A 5 0021 表1： 各水泥池的三疣梭子蟹生长性能及血淋巴卵黄蛋白原含量 0022 当然， 上述说明并非对本发明的限制， 本发明也并不限于上述举例。 本技术领域的 普通技术人员在本发明的实质范围内， 作出的变化、 改型、 添加或替换， 也应属于本发明的 保护范围。 说 明 书 4/4 页 6 CN 105533266 A 6 。