一种牛樟菌的液体发酵培养基.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410471663.1

申请日:

2014.09.17

公开号:

CN104212726A

公开日:

2014.12.17

当前法律状态:

实审

有效性:

审中

法律详情:

实质审查的生效IPC(主分类):C12N 1/14申请日:20140917|||公开

IPC分类号:

C12N1/14; C12R1/645(2006.01)N

主分类号:

C12N1/14

申请人:

中山安荞生物科技有限公司

发明人:

刘巴宁; 郑安乔

地址:

528437 广东省中山市火炬开发区会展东路16号数码大厦1403号房

优先权:

专利代理机构:

东莞市中正知识产权事务所 44231

代理人:

侯来旺

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内容摘要

本发明涉及一种牛樟菌的液体发酵培养基。所述的培养基包含以下重量份的组分:沉水樟木屑25%-50%,碳源0.5%-5%,氮源0.05%-0.5%,硫酸镁0.05-0.1%,磷酸二氢钾0.1%-0.3%,PH调节剂0.5%-2%,二次蒸馏水余量,所述的碳源选自果糖、葡萄糖、麦芽糖或乳糖中的一种或多种,所述的氮源选自酵母粉、酵母膏、蛋白胨或豆饼粉中的一种或多种,所述的培养基的PH为5-6。本发明将果糖及葡萄糖等作为牛樟芝的碳源,将蛋白胨、豆饼粉等作为其氮源,利于樟芝菌丝体的发酵及生长,不仅樟芝菌丝体产量高,且培养时间也可明显缩短,此外,发酵培养液的初始PH调节为5-6时,菌丝体生物量及胞内三萜含量均达到最高。

权利要求书

1.  一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的培养基包含以下重量份的组分:
沉水樟木屑              25%-50%,
碳源                    0.5%-5%,
氮源                    0.05%-0.5%,
硫酸镁                  0.05-0.1%,
磷酸二氢钾              0.1%-0.3%,
PH调节剂               0.5%-2%,
二次蒸馏水               余量。

2.
  根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的培养基放置在250ml的三角瓶中,所述的三角瓶中的装液量为100-120ml。

3.
  根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的沉水樟木屑的含水量为50-60%。

4.
  根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的沉水樟木屑的含水量为为59%。

5.
  根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的碳源选自果糖、葡萄糖、麦芽糖或乳糖中的一种或多种。

6.
  根据权利要求1所述的牛樟菌的培养基,其特征在于,所述的氮源选自酵母粉、酵母膏、蛋白胨或豆饼粉中的一种或多种。

7.
  根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的碳源含量为40g/L,氮源为6g/L,硫酸镁为0.5g/L,磷酸二氢钾为1g/L。

8.
  根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的PH调节剂选自盐酸或氢氧化钠中的一种,所述的培养基的PH为5-6。

说明书

一种牛樟菌的液体发酵培养基
技术领域
本发明涉及一种真菌培养基,具体涉及一种牛樟菌的液体发酵培养基。
背景技术
樟芝Antrodia camphorata 又称牛樟芝或牛樟菇,主要分布在我国台湾地区海拨450-2000m之前的牛樟腐朽的心材内壁,具有黄樟香味。研究发现樟芝成分复杂,含有很多生理活性物质具有多种生理活性,如抗氧化、保肝、抗癌、解毒、消炎等,对食物中毒等危急病症具有神奇的疗效。其中最主要的活性成分是多糖和三萜类化合物。其中三萜类化合物是樟芝子实体中含有的成分,可抑制癌细胞生成,用于癌症的辅助治疗。多糖也具有抗肿瘤活性,还具有抗菌、抗病毒、保肝、降血糖、平喘、提高动物对缺氧的耐受性及降低血粘度等作用。牛樟芝在台湾亦被称为森林中的红宝石,一直盛有”灵芝之王”的美誉。
由于牛樟芝具有多种生理活性,使其成为一种极具开发潜力和应用前景的药用真菌,近年来,牛樟芝也成为国内外学者研究的热点,目前,随着牛樟芝药理作用研究的深入及其应用的增加,其需求量也急剧上升。但牛樟芝专一寄生于牛樟树上,野生采集的数量明显满足不了人们的需求,其价格也十分昂贵。研究显示,樟菌菌丝体含有与子实体同等的营养成分,因此,利用现代发酵工程技术来获得大量樟芝菌丝体,并生产总三萜类有效物质,是樟芝开发及造福人类、最环保的方法。目前已有相关文献报道樟芝发酵培养基优化等研究,但采用这些培养基对樟芝进行发酵培养时,存在总三萜类含量低等缺点。为此,本发明提供一种总三萜类含量高的樟芝液体发酵培养基。
发明内容
针对上述现有技术的不足,本发明提供一种可获得高三萜含量的牛樟菌的液体发酵培养基。
本发明的技术方案如下:
一种牛樟菌的液体发酵培养基,所述的培养基包含以下重量份的组分:
沉水樟木屑              25%-50%,
碳源                    0.5%-5%,
氮源                    0.05%-0.5%,
硫酸镁                  0.05-0.1%,
磷酸二氢钾              0.1%-0.3%,
PH调节剂               0.5%-2%,
二次蒸馏水               余量。
所述的培养基放置在250ml的三角瓶中,所述的三角瓶中的装液量为100-120ml。
优选的,所述的沉水樟木屑的含水量为50-60%。
优选的,所述的沉水樟木屑的含水量为为59%。
优选的,所述的碳源选自果糖、葡萄糖、麦芽糖或乳糖中的一种或多种。
优选的,所述的氮源选自酵母粉、酵母膏、蛋白胨或豆饼粉中的一种或多种。
优选的,所述的碳源含量为40g/L,氮源为6g/L,硫酸镁为0.5g/L,磷酸二氢钾为1g/L。
优选的,所述的PH调节剂选自盐酸或氢氧化钠中的一种,所述的培养基的PH为5-6。
本发明与现有技术相比,有益效果体现在以下几点:
1.研究显示,樟芝对果糖及葡萄糖等单糖利用率较高,对蛋白胨、豆饼粉等氮源利用率较高,因此,本发明将上述碳源及氮源作为樟芝菌液体发酵培养的主要组分,利于樟芝菌丝体的发酵及生长,不仅樟芝菌丝体产量高,且培养时间也可明显缩短。
2.研究显示,在采用本发明中的碳源及氮源进行樟芝菌液体发酵培养时,发酵培养液的初始PH调节为5-6时,菌丝体生物量及胞内三萜含量均达到最高,因此,本发明中将发酵液的PH调节为5-6,提高了樟芝菌丝体及其胞内总三萜的产量。
3.本发明在对樟芝菌进行摇瓶发酵培养时,在250ml的三角瓶中装液量为100-150ml时更有利于樟芝菌丝体及三萜类产量的提高。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
一种牛樟菌的液体发酵培养基,所述的培养基包含以下重量份的组分:
沉水樟木屑              25%,
碳源                    0.5%,
氮源                    0.05%,
硫酸镁                  0.05,
磷酸二氢钾              0.1%,
PH调节剂               0.5%,
二次蒸馏水               余量。
所述的培养基放置在250ml的三角瓶中,所述的三角瓶中的装液量为100ml。
所述的沉水樟木屑的含水量为50%。
所述的碳源为果糖,所述的氮源为酵母粉。
所述的PH调节剂为盐酸,所述的培养基的PH为5。
 
实施例2
一种牛樟菌的液体发酵培养基,所述的培养基包含以下重量份的组分:
沉水樟木屑              50%,
碳源                    5%,
氮源                    0.5%,
硫酸镁                  0.1%,
磷酸二氢钾              0.3%,
PH调节剂               2%,
二次蒸馏水              余量。
所述的培养基放置在250ml的三角瓶中,所述的三角瓶中的装液量为120ml。
所述的沉水樟木屑的含水量为60%。
所述的碳源为葡萄糖,所述的氮源为酵母膏。
所述的碳源含量为40g/L,氮源为6g/L,硫酸镁为0.5g/L,磷酸二氢钾为1g/L。
所述的PH调节剂为氢氧化钠,所述的培养基的PH为6。
 
实施例3
一种牛樟菌的液体发酵培养基,所述的培养基包含以下重量份的组分:
沉水樟木屑             35%,
碳源                   
氮源                   
硫酸镁                  
磷酸二氢钾              
PH调节剂              1%,
二次蒸馏水             余量。
所述的培养基放置在250ml的三角瓶中,所述的三角瓶中的装液量为110ml。
所述的沉水樟木屑的含水量为为59%。
所述的碳源为麦芽糖,所述的氮源为蛋白胨,所述的麦芽糖含量为40g/L,蛋白胨含量为6g/L,硫酸镁为0.5g/L,磷酸二氢钾为1g/L。
所述的PH调节剂为盐酸,所述的培养基的PH为5.5。
上述实施例仅为本发明的优选实施方式,并不应理解为对本发明的限定,本领域技术人员根据本发明的揭示,不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。

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资源描述

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1、10申请公布号CN104212726A43申请公布日20141217CN104212726A21申请号201410471663122申请日20140917C12N1/14200601C12R1/64520060171申请人中山安荞生物科技有限公司地址528437广东省中山市火炬开发区会展东路16号数码大厦1403号房72发明人刘巴宁郑安乔74专利代理机构东莞市中正知识产权事务所44231代理人侯来旺54发明名称一种牛樟菌的液体发酵培养基57摘要本发明涉及一种牛樟菌的液体发酵培养基。所述的培养基包含以下重量份的组分沉水樟木屑2550,碳源055,氮源00505,硫酸镁00501,磷酸二氢钾010。

2、3,PH调节剂052,二次蒸馏水余量,所述的碳源选自果糖、葡萄糖、麦芽糖或乳糖中的一种或多种,所述的氮源选自酵母粉、酵母膏、蛋白胨或豆饼粉中的一种或多种,所述的培养基的PH为56。本发明将果糖及葡萄糖等作为牛樟芝的碳源,将蛋白胨、豆饼粉等作为其氮源,利于樟芝菌丝体的发酵及生长,不仅樟芝菌丝体产量高,且培养时间也可明显缩短,此外,发酵培养液的初始PH调节为56时,菌丝体生物量及胞内三萜含量均达到最高。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104212726ACN104212726A1/1页21一种牛樟菌的液。

3、体发酵培养基,其特征在于,所述的培养基包含以下重量份的组分沉水樟木屑2550,碳源055,氮源00505,硫酸镁00501,磷酸二氢钾0103,PH调节剂052,二次蒸馏水余量。2根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的培养基放置在250ML的三角瓶中,所述的三角瓶中的装液量为100120ML。3根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的沉水樟木屑的含水量为5060。4根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的沉水樟木屑的含水量为为59。5根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的碳源选自果糖、葡。

4、萄糖、麦芽糖或乳糖中的一种或多种。6根据权利要求1所述的牛樟菌的培养基,其特征在于,所述的氮源选自酵母粉、酵母膏、蛋白胨或豆饼粉中的一种或多种。7根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的碳源含量为40G/L,氮源为6G/L,硫酸镁为05G/L,磷酸二氢钾为1G/L。8根据权利要求1所述的一种牛樟菌的液体发酵培养基,其特征在于,所述的PH调节剂选自盐酸或氢氧化钠中的一种,所述的培养基的PH为56。权利要求书CN104212726A1/3页3一种牛樟菌的液体发酵培养基技术领域0001本发明涉及一种真菌培养基,具体涉及一种牛樟菌的液体发酵培养基。背景技术0002樟芝ANTR。

5、ODIACAMPHORATA又称牛樟芝或牛樟菇,主要分布在我国台湾地区海拨4502000M之前的牛樟腐朽的心材内壁,具有黄樟香味。研究发现樟芝成分复杂,含有很多生理活性物质具有多种生理活性,如抗氧化、保肝、抗癌、解毒、消炎等,对食物中毒等危急病症具有神奇的疗效。其中最主要的活性成分是多糖和三萜类化合物。其中三萜类化合物是樟芝子实体中含有的成分,可抑制癌细胞生成,用于癌症的辅助治疗。多糖也具有抗肿瘤活性,还具有抗菌、抗病毒、保肝、降血糖、平喘、提高动物对缺氧的耐受性及降低血粘度等作用。牛樟芝在台湾亦被称为森林中的红宝石,一直盛有”灵芝之王”的美誉。0003由于牛樟芝具有多种生理活性,使其成为一种。

6、极具开发潜力和应用前景的药用真菌,近年来,牛樟芝也成为国内外学者研究的热点,目前,随着牛樟芝药理作用研究的深入及其应用的增加,其需求量也急剧上升。但牛樟芝专一寄生于牛樟树上,野生采集的数量明显满足不了人们的需求,其价格也十分昂贵。研究显示,樟菌菌丝体含有与子实体同等的营养成分,因此,利用现代发酵工程技术来获得大量樟芝菌丝体,并生产总三萜类有效物质,是樟芝开发及造福人类、最环保的方法。目前已有相关文献报道樟芝发酵培养基优化等研究,但采用这些培养基对樟芝进行发酵培养时,存在总三萜类含量低等缺点。为此,本发明提供一种总三萜类含量高的樟芝液体发酵培养基。发明内容0004针对上述现有技术的不足,本发明提。

7、供一种可获得高三萜含量的牛樟菌的液体发酵培养基。0005本发明的技术方案如下一种牛樟菌的液体发酵培养基,所述的培养基包含以下重量份的组分沉水樟木屑2550,碳源055,氮源00505,硫酸镁00501,磷酸二氢钾0103,PH调节剂052,二次蒸馏水余量。0006所述的培养基放置在250ML的三角瓶中,所述的三角瓶中的装液量为100120ML。0007优选的,所述的沉水樟木屑的含水量为5060。0008优选的,所述的沉水樟木屑的含水量为为59。0009优选的,所述的碳源选自果糖、葡萄糖、麦芽糖或乳糖中的一种或多种。说明书CN104212726A2/3页40010优选的,所述的氮源选自酵母粉、酵。

8、母膏、蛋白胨或豆饼粉中的一种或多种。0011优选的,所述的碳源含量为40G/L,氮源为6G/L,硫酸镁为05G/L,磷酸二氢钾为1G/L。0012优选的,所述的PH调节剂选自盐酸或氢氧化钠中的一种,所述的培养基的PH为56。0013本发明与现有技术相比,有益效果体现在以下几点1研究显示,樟芝对果糖及葡萄糖等单糖利用率较高,对蛋白胨、豆饼粉等氮源利用率较高,因此,本发明将上述碳源及氮源作为樟芝菌液体发酵培养的主要组分,利于樟芝菌丝体的发酵及生长,不仅樟芝菌丝体产量高,且培养时间也可明显缩短。00142研究显示,在采用本发明中的碳源及氮源进行樟芝菌液体发酵培养时,发酵培养液的初始PH调节为56时,。

9、菌丝体生物量及胞内三萜含量均达到最高,因此,本发明中将发酵液的PH调节为56,提高了樟芝菌丝体及其胞内总三萜的产量。00153本发明在对樟芝菌进行摇瓶发酵培养时,在250ML的三角瓶中装液量为100150ML时更有利于樟芝菌丝体及三萜类产量的提高。具体实施方式0016下面结合实施例对本发明做进一步说明。0017实施例1一种牛樟菌的液体发酵培养基,所述的培养基包含以下重量份的组分沉水樟木屑25,碳源05,氮源005,硫酸镁005,磷酸二氢钾01,PH调节剂05,二次蒸馏水余量。0018所述的培养基放置在250ML的三角瓶中,所述的三角瓶中的装液量为100ML。0019所述的沉水樟木屑的含水量为5。

10、0。0020所述的碳源为果糖,所述的氮源为酵母粉。0021所述的PH调节剂为盐酸,所述的培养基的PH为5。0022实施例2一种牛樟菌的液体发酵培养基,所述的培养基包含以下重量份的组分沉水樟木屑50,碳源5,氮源05,硫酸镁01,磷酸二氢钾03,PH调节剂2,二次蒸馏水余量。说明书CN104212726A3/3页50023所述的培养基放置在250ML的三角瓶中,所述的三角瓶中的装液量为120ML。0024所述的沉水樟木屑的含水量为60。0025所述的碳源为葡萄糖,所述的氮源为酵母膏。0026所述的碳源含量为40G/L,氮源为6G/L,硫酸镁为05G/L,磷酸二氢钾为1G/L。0027所述的PH调。

11、节剂为氢氧化钠,所述的培养基的PH为6。0028实施例3一种牛樟菌的液体发酵培养基,所述的培养基包含以下重量份的组分沉水樟木屑35,碳源氮源硫酸镁磷酸二氢钾PH调节剂1,二次蒸馏水余量。0029所述的培养基放置在250ML的三角瓶中,所述的三角瓶中的装液量为110ML。0030所述的沉水樟木屑的含水量为为59。0031所述的碳源为麦芽糖,所述的氮源为蛋白胨,所述的麦芽糖含量为40G/L,蛋白胨含量为6G/L,硫酸镁为05G/L,磷酸二氢钾为1G/L。0032所述的PH调节剂为盐酸,所述的培养基的PH为55。0033上述实施例仅为本发明的优选实施方式,并不应理解为对本发明的限定,本领域技术人员根据本发明的揭示,不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。说明书CN104212726A。

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