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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810141569.8 (22)申请日 2018.02.11 (71)申请人 云南省烟草农业科学研究院 地址 650031 云南省昆明市圆通街33号 (72)发明人 白戈 谢贺 杨爱国 姚恒 杨大海 肖炳光 张谊寒 刘贯山 (74)专利代理机构 昆明知道专利事务所(特殊 普通合伙企业) 53116 代理人 谢乔良 张玉 (51)Int.Cl. A01H 1/06(2006.01) A01C 1/00(2006.01) (54)发明名称 一种EMS诱变延迟烟草花期的方法 (5。
2、7)摘要 本发明属于烟草育种技术领域， 具体涉及一 种采用EMS （甲基磺酸乙酯） 诱变剂诱变延迟烟草 花期的方法。 该方法包括预处理烟草种子， EMS处 理， 诱变后代种植、 M4代特性鉴定等步骤。 本发明 可用于烟草突变体库的构建、 丰富烟草遗传育种 资源、 可直接用于新品种选育。 权利要求书1页 说明书3页 CN 108293875 A 2018.07.20 CN 108293875 A 1.一种EMS诱变延迟烟草花期的方法， 其特征在于， 步骤如下所示： （1） 预处理烟草种子： 选择粒大饱满的烟草种子， 取10000粒浸入1L水中， 抽真空4 min； （2） EMS溶液处理： 将浸。
3、透的种子放入0.5%的EMS溶液中振荡浸泡16 h， 再用水冲洗4 h， 自然晾干， 得到EMS诱变M1代种子； （3） 诱变后代种植： 将所述M1代种子播种至田间， 经过2代自交得到M4 代突变体家系； （4） M4代特性鉴定： 将所述M4代突变体家系种子种植到盆中， 待长出2片真叶假植到假 植盘中， 在温室中培养至4-5叶期， 转移到人工气候室中进行低温处理， 再转移到温室常规 管理10天后， 移栽至大田， 常规管理， 记录开花时间， 筛选出开花时间推迟的突变体家系。 2.根据权利要求1所述的EMS诱变延迟烟草花期的方法， 其特征在于， 步骤 （4） 所述的低 温处理为12 ， 处理14天。
4、。 3.根据权利要求1所述的EMS诱变延迟烟草花期的方法， 其特征在于， 所述烟草种子的 品种为红花大金元。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 108293875 A 2 一种EMS诱变延迟烟草花期的方法 技术领域 0001 本发明属于烟草育种技术领域， 具体涉及一种采用EMS （甲基磺酸乙酯） 诱变剂EMS 诱变延迟烟草花期的方法。 背景技术 0002 低温是限制农作物生产的最主要的环境因素之一， 低温胁迫可以改变植物的花 期， 从而影响作物产量及一些花卉植物的经济价值。 在我国南部地区， 低温胁迫诱导的烟草 早花现象严重影响烟叶生产和农民增收。 0003 烟草起源于南美洲， 是典型。
5、喜温短日作物， 生长发育适温为25-28， 在零下2-3 时， 烟株就会死亡， 地下部最适宜的生长温度是31。 烟草在6-7叶龄时， 如果受到两周左右 的12低温胁迫就会发生早花现象 （项目组田间数据） 。 烟草早花指烟草植株未能达到正常 生长应具有的高度和叶数， 花芽就提早分化， 现蕾开花的现象。 发生早花的烟株过早地从营 养生长转入生殖生长， 导致生长势弱， 叶片数减少， 叶片窄小， 叶片的产量和质量降低。 因 此， 烟草早花将给烟农带来重大经济损失， 影响边远山区农民收入。 0004 目前生产上主要通过农艺措施 （如打顶留杈） 来解决低温胁迫诱导花芽提前分化 的问题， 但这仅是一种极为耗。
6、费人力的补救措施。 解决低温胁迫诱导早花的根本途径是通 过对低温胁迫诱导烟草早花的分子机理研究， 培育出耐低温抗早花的烟草新品种。 0005 目前针对烟草育种主要是通过常规育种的手段， 常规育种主要是通过品种与资源 的反复杂交， 回交最终获得优异的品种， 但常规育种面临着育种周期较长， 而且资源狭窄的 问题。 0006 因此， 本发明旨在研发一种高效简便的在低温胁条件下延迟烟草开花时期的方 法。 发明内容 0007 本发明的目的在于提供一种EMS诱变延迟烟草花期的方法， 步骤如下所示： （1） 预处理烟草种子： 选择粒大饱满的烟草种子， 取10000粒浸入1L水中， 抽真空4 min； （2）。
7、 EMS溶液处理： 将浸透的种子放入0.5 %的EMS溶液中振荡浸泡16 h， 再用水冲洗4 h， 自然晾干， 得到EMS诱变M1代种子； （3） 诱变后代种植： 将所述M1代种子播种至田间， 经过2代自交得到M4 代突变体家系； （4） M4代特性鉴定： 将所述M4代突变体家系种子种植到盆中， 待生产出两片真叶假植到 假植盘中， 在温室中培养至4-5叶期， 转移到人工气候室中进行低温处理， 再转移到温室常 规管理10天后， 移栽至大田， 常规管理， 记录开花时间， 筛选出开花时间推迟的突变体家系。 具体实施方式 0008 下面结合对本发明作进一步的说明， 但不以任何方式对本发明加以限制， 基。
8、于本 发明教导所作的任何变换或替换， 均属于本发明的保护范围。 说 明 书 1/3 页 3 CN 108293875 A 3 0009 本发明所述的一种EMS诱变延迟烟草花期的方法， 步骤如下所示： （1） 预处理烟草种子： 选择粒大饱满的烟草种子， 取10000粒浸入1L水中， 抽真空4 min； （2） EMS溶液处理： 将浸透的种子放入0.5%的EMS溶液中振荡浸泡16 h， 再用水冲洗4 h， 自然晾干， 得到EMS诱变M1代种子； （3） 诱变后代种植： 将所述M1代种子播种至田间， 经过2代自交得到M4 代突变体家系； （4） M4代特性鉴定： 将所述M4代突变体家系种子种植到盆中。
9、， 待长出两片真叶假植到假 植盘中， 在温室中培养至4-5叶期， 转移到人工气候室中进行低温处理， 再转移到温室常规 管理10天后， 移栽至大田， 常规管理， 记录开花时间， 筛选出开花时间推迟的突变体家系。 0010 作为本发明的一种优选， 低温处理为12 ， 处理14天。 所述烟草种子的品种为红 花大金元。 0011 本发明所述的EMS诱变延迟烟草花期的方法对烟草主栽品种红花大金元效果最 佳。 红花大金元是烟草的主栽品种， 具有种植面积大、 高产稳产、 综合抗性好、 适应性广等优 点。 0012 本发明的有益效果如下： 本发明方法针对烟草传统育种耗时较长， 同时低温胁迫钝感烟草资源比较有限。
10、的缺 陷， 采用EMS化学诱变使烟草发生变异， 从中选育出株型较好并且能够克服低温胁迫诱导烟 草提早开花的材料。 本发明可操作性强、 简便高效， 通过直接筛选延迟开花的突变体， 节省 了大量的工作量， 大大提供了选育的效率和准确性。 0013 实施例1： EMS溶液处理烟草品种红花大金元种子 挑选粒大、 饱满的红花大金元种子约10000粒， 浸入1L水中， 抽真空4min， 然后在0.5 % 的EMS中振荡浸泡16 h， 接着用大量的水冲洗4h， 自然晾干， 得到EMS诱变M1代种子。 0014 实施例2： 诱变后代种植 诱变后代种植： 将所述M1代种子单粒点播至田间， 分单株收获， 经过2代。
11、自交， 遗传上相 对稳定后， 按株系收获， 获得1200个M4 代突变体家系。 0015 实施例3： M4代特性鉴定 2016年3月20日， 将1200份 （每份20粒） M4代种子以及10份 （每份20粒） 对照品种红花大 金元播种在小花盆中， 按常规方法管理； 4月21日出苗后将假植到假植盘中， 每份材料假植7 株， 在温室中培养至4-5叶期； 5月20日将培养好的8400株突变体试验材料放置到人工气候 室中， 人工气候室的温度设置为12， 连续低温处理14天； 6月6日低温处理完成后将试验材 料放置在温室中常规管理10天； 6月16日将试验材料种植到试验田中， 每份材料挑选长势整 齐的种。
12、植4株， 共4800株， 另设未低温处理的红花大金元对照5组， 每组4株， 共使用试验田5 亩， 按常规方法管理。 0016 待烟株长大至开花后统计开花时间， 并对获得的4个突变体单株的开花时间计算 平均值并与非突变的红花大金元植株开花时间相比。 结果如表1所示： 5组对照材料红花大 金元花期基本一致， 在8月12日开始现蕾， 8月16日开始开花， 8月22日左右达到盛花。 而突变 体试验材料从7月26日开始陆续现蕾开花， 大部分试验材料花期早于对照材料。 调查记录了 花期明显迟于对照的材料32份 （表1） 。 从结果可以看出： 非突变的红花大金元植株从播种到 开开花共计需要145天， 而EMS诱变后的红花大金元材料从播种到开花共计需要165天到202 天。 突变材料开花时间显著较非突变材料开花时间延迟。 说 明 书 2/3 页 4 CN 108293875 A 4 0017 综上所述， 本发明能够简便、 快速、 准确、 高效延迟烟草花期， 为烟草株型改良提供 育种中间材料。 0018 表1 EMS诱变后烟草红花大金元开花期 说 明 书 3/3 页 5 CN 108293875 A 5 。