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1、(10)申请公布号 CN 102599061 A (43)申请公布日 2012.07.25 CN 102599061 A *CN102599061A* (21)申请号 201210086761.4 (22)申请日 2012.03.29 A01H 4/00(2006.01) (71)申请人 常熟市海虞茶叶有限公司 地址 215522 江苏省苏州市常熟市海虞镇福 山 (72)发明人 窦祥龙 (74)专利代理机构 苏州广正知识产权代理有限 公司 32234 代理人 汪发春 (54) 发明名称 一种红瑞木组培快繁方法 (57) 摘要 本发明涉及一种红瑞木的组培快繁方法， 通 过外植体选取、 清洗处理、。
2、 初代培养、 继代培养、 生 根培养步骤实现， 并针对初代、 继代和生根培养选 择了专用的培养基组成， 达到了繁殖系数高， 繁殖 效果好的目的。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 2 页 1/1 页 2 1. 一种红瑞木组培快繁方法， 其特征在于 , 包括以下步骤 ： 步骤 (1) 外植体的选取 ： 5 月上旬， 从母株上剪取红瑞木刚抽出嫩梢不久的茎段 ； 步骤 (2) 外植体处理 ： 用 75的酒精溶液浸泡 60s， 无菌水冲洗 3 次， 沥干， 再放入 0.1的 HgCl2溶液。
3、中消毒 5 分钟， 无菌水冲洗 3 次， 再切取茎尖， 备用 ； 步骤 (3) 初代培养 ： 将步骤 (2) 切取的茎尖， 接种在初代培养基上， 进行初代培养， 初 代培养基成分为 MS+GA3 0.4mg/l+BA2mg/l+IAA 0.6mg/l+ 2蔗糖 ； 初代培养光照强度 800Lux， 培养温度 222， 培养时间 302 天， 使茎尖基部周围逐渐形成丛生芽， 当芽丛长 至 3cm 时， 将其切成单芽苗， 备用 ； 步骤(4)继代 ： 将步骤(3)切下的单芽苗移入装有继代培养基的密封容器中， 进行继代 培养 ； 继代培养基成分为MS+ GA3 0.6mg/l +BA 0.5mg/l。
4、+IAA 0.15mg/l +2蔗糖 ； 培养温 度 232， 光照时间 16h/d， 培养基 pH 值 5.8 6.0， 培养 35 天， 形成 6cm 长的具有 4-5 个 茎节的芽条， 将其切成带茎节的切段， 每个芽条分割成 2 段 ； 每 35 天如此继代一次， 扩繁试 管苗 ； 步骤 (5) 生根培养 ： 将步骤四扩繁的试管苗取出， 移入装有生根培养基的密闭容器中， 进行生根培养， 生根培养基成分为 1/2MS+ GA3 0.5mg/l +IBA 0.5mg/l+BA 0.01mg/l+10 蔗糖 ； 试管苗在生根培养基中光照强度为3000Lux， 培养温度252， 培养至20天， 。
5、试管苗 在培养基中根长至 0.5cm 的新根时， 出瓶移栽。 权 利 要 求 书 CN 102599061 A 2 1/2 页 3 一种红瑞木组培快繁方法 技术领域 0001 本发明涉及园艺领域， 具体涉及一种红瑞木的组培快繁方法。 背景技术 0002 红瑞木 （Cornus alba） 是山茱萸科梾木属灌木， 高可达 3 米 ； 树皮紫红色 ； 幼枝有 淡白色短柔毛， 后即秃净而被蜡状白粉， 老枝红白色， 散生灰白色圆形皮孔及略为突起的环 形叶痕。 花期6-7月 ； 果期8-10月。 红瑞木是园林中应用的观干树种， 秋叶鲜红， 小果洁白， 落叶后枝干红艳如珊瑚， 是少有的观茎植物， 园林中多。
6、丛植草坪上或与常绿乔木相间种植， 得红绿相映之效果。红瑞木种子含油量约为 30%， 可供工业用。近年来， 园林建设中对于红 瑞木的需求逐渐增加， 但其繁殖手段主要集中在播种、 扦插、 压条繁殖上， 未有过多的关于 组培快繁的研究， 影响了其推广应用速度。 发明内容 0003 本发明主要解决的技术问题是提供一种红瑞木的快速繁殖方法， 以弥补园林中对 于红瑞木资源的源源不断的需求。 0004 为解决上述技术问题， 本发明的目的是这样实现的 ： 一种红瑞木组培快繁方法， 其特征在于 , 包括以下步骤 ： 步骤 (1) 外植体的选取 ： 5 月上旬， 从母株上剪取红瑞木刚抽出嫩梢不久的茎段 ； 步骤 。
7、(2) 外植体处理 ： 用 75的酒精溶液浸泡 60s， 无菌水冲洗 3 次， 沥干， 再放入 0.1的 HgCl2溶液中消毒 5 分钟， 无菌水冲洗 3 次， 再切取茎尖， 备用 ； 步骤 (3) 初代培养 ： 将步骤 (2) 切取的茎尖， 接种在初代培养基上， 进行初代培养， 初 代培养基成分为 MS+GA3 0.4mg/l+BA2mg/l+IAA 0.6mg/l+ 2蔗糖 ； 初代培养光照强度 800Lux， 培养温度 222， 培养时间 302 天， 使茎尖基部周围逐渐形成丛生芽， 当芽丛长 至 3cm 时， 将其切成单芽苗， 备用 ； 步骤(4)继代 ： 将步骤(3)切下的单芽苗移入。
8、装有继代培养基的密封容器中， 进行继代 培养 ； 继代培养基成分为MS+ GA3 0.6mg/l +BA 0.5mg/l+IAA 0.15mg/l +2蔗糖 ； 培养温 度 232， 光照时间 16h/d， 培养基 pH 值 5.8 6.0， 培养 35 天， 形成 6cm 长的具有 4-5 个 茎节的芽条， 将其切成带茎节的切段， 每个芽条分割成 2 段 ； 每 35 天如此继代一次， 扩繁试 管苗 ； 步骤 (5) 生根培养 ： 将步骤四扩繁的试管苗取出， 移入装有生根培养基的密闭容器中， 进行生根培养， 生根培养基成分为 1/2MS+ GA3 0.5mg/l +IBA 0.5mg/l+B。
9、A 0.01mg/l+10 蔗糖 ； 试管苗在生根培养基中光照强度为3000Lux， 培养温度252， 培养至20天， 试管苗 在培养基中根长至 0.5cm 的新根时， 出瓶移栽。 0005 本发明的有益效果是 ： 本发明的红瑞木的组培快繁育苗方法使红瑞木试管苗月增 长系数达到 4 左右， 一年从一个外植体增殖可达 2 3 株左右的试管苗。这样既保护了母 株， 又可满足红瑞木的规模化生产需求。 说 明 书 CN 102599061 A 3 2/2 页 4 具体实施方式 0006 下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述， 以使本发明的优点和特征能更易于被 本领域技术人员理解， 从而对本发明的保护范。
10、围做出更为清楚明确的界定。 0007 本发明实施例包括 ： 一种红瑞木组培快繁方法， 其特征在于 , 包括以下步骤 ： 步骤 (1) 外植体的选取 ： 5 月上旬， 于晴天从母株上剪取红瑞木刚抽出嫩梢不久的茎 段 ； 步骤 (2) 外植体处理 ： 将选取的茎段先在 1% 洗衣粉水中洗涤 5min， 再在自来水龙头下 流水冲洗 15min， 用纱布吸净水分， 至于无菌操作台上用 75的酒精溶液浸泡 60s， 无菌水 冲洗 3 次， 沥干， 再放入 0.1的 HgCl2溶液中消毒 5 分钟， 无菌水冲洗 3 次， 每次 2min， 纱 布吸干表面水分， 再切取茎尖， 备用 ； 步骤 (3) 初代培。
11、养 ： 将步骤 (2) 切取的茎尖， 接种在初代培养基上， 进行初代培养， 初 代培养基成分为 MS+GA3 0.4mg/l+BA2mg/l+IAA 0.6mg/l+ 2蔗糖 ； 初代培养光照强度 800Lux， 培养温度 222， 培养时间 302 天， 使茎尖基部周围逐渐形成丛生芽， 当芽丛长 至 3cm 时， 将其切成单芽苗， 备用 ； 步骤(4)继代 ： 将步骤(3)切下的单芽苗移入装有继代培养基的密封容器中， 进行继代 培养 ； 继代培养基成分为MS+ GA3 0.6mg/l +BA 0.5mg/l+IAA 0.15mg/l +2蔗糖 ； 培养温 度 232， 光照时间 16h/d，。
12、 培养基 pH 值 5.8 6.0， 培养 35 天， 形成 6cm 长的具有 4-5 个 茎节的芽条， 将其切成带茎节的切段， 每个芽条分割成 2 段 ； 以后每 35 天如此继代一次， 扩 繁试管苗 ； 步骤 (5) 生根培养 ： 待步骤 (4) 的试管苗扩繁到一定数量后， 将扩繁的试管苗取出， 移 入装有生根培养基的密闭容器中， 进行生根培养， 生根培养基成分为 1/2MS+ GA3 0.5mg/l +IBA 0.5mg/l+BA 0.01mg/l+10蔗糖 ； 试管苗在生根培养基中光照强度为 3000Lux， 培养 温度 252， 培养至 20 天， 试管苗在培养基中根长至 0.5cm 的新根时， 出瓶移栽。移栽管 理技术与常规木本组培苗相同。 0008 以上所述仅为本发明的实施例， 并非因此限制本发明的专利范围， 凡是利用本发 明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换， 或直接或间接运用在其他相关的技术领 域， 均同理包括在本发明的专利保护范围内。 说 明 书 CN 102599061 A 4 。