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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201310525705.0 (22)申请日 2013.10.31 (73)专利权人 青岛文创科技有限公司 地址 266061 山东省青岛市崂山区香港东 路248号创业园、 生物园239房间 (72)发明人 苏建丽 (74)专利代理机构 北京一格知识产权代理事务 所(普通合伙) 11316 代理人 滑春生 赵永伟 (51)Int.Cl. A01H 4/00(2006.01) (56)对比文件 JP 特开2000-308427 A,2000.11.07,全文. CN 101138324。
2、 A,2008.03.12,全文. CN 101356895 A,2009.02.04,全文. 李鸿雁.紫色甘薯组培快繁体系的建立. 信 阳师范学院硕士学位论文 .2011,正文摘要. 韩宏义等.黑甘薯脱毒快繁技术研究. 杂粮 作物 .2008,第28卷(第2期),第94-95页， 尤其是 第1、 3节. 审查员 王佳妹 (54)发明名称 一种紫薯丛生芽的诱导方法 (57)摘要 本发明公开了一种紫薯丛生芽的诱导方法， 该方法包括外植体消毒、 配置培养基、 接种和培 养步骤， 其中培养基以MS为基础培养基， 1L培养 基中溶解2,4-D 0.5-1mg、 NAA 1-2mg、 6-BA 0.1-。
3、 0.3mg、 KT 0.3-0.5mg； 本发明的有益效果是一个 紫薯的茎尖分生组织可以诱导出12个芽， 诱导效 率达到1200%， 显著提高组培效率； 利用一个紫薯 茎尖分生组织诱导出丛生芽， 得到大量同质无性 系， 提高紫薯茎尖培养的繁殖系数， 易于工厂化 生产紫薯组培苗。 权利要求书1页 说明书3页 CN 103598094 B 2016.08.17 CN 103598094 B 1.一种紫薯丛生芽的诱导方法： 其特征在于， 包括如下步骤： (1)外植体消毒： 以紫薯茎尖为外植体， 无菌水清洗干净后置于50%的乙醇溶液中浸泡 20s， 取出置于体积分数为1.5%的次氯酸钠溶液中消毒5m。
4、in， 最后用无菌水清洗干净后放于 无菌操作台内； (2)配置诱导培养基： 将2,4-二氯苯氧乙酸2,4-D、 萘乙酸NAA、 6-苄基嘌呤6-BA、 激动素 KT溶解于基本培养基MS中， 高压灭菌冷却至室温后待用， 其中各组份用量为： MS 1L、 2,4-D 0.5-1mg、 NAA 1-2mg、 6-BA 0.1-0.3mg、 KT 0.3-0.5mg； (3)接种： 在无菌操作台内， 将消毒后的紫薯茎尖接种于诱导培养基上， 每个培养皿接 种一个茎尖分生组织； (4)诱导丛生芽： 将接种好的茎尖分生组织在无菌、 温度18-22、 光强 2000-3000 Lx、 每天光照8小时的条件下培。
5、养3-4周至丛生芽形成。 2.根据权利要求1所述的紫薯丛生芽诱导方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述的诱导培 养基中， 各组份含量为： MS 1L、 2,4-D 0.5mg、 NAA 1mg、 6-BA 0.1mg、 KT 0.3mg。 3.根据权利要求1所述的紫薯丛生芽诱导方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述的诱导培 养基中， 各组份含量为： MS 1L、 2,4-D 0.6mg、 NAA 1.2mg、 6-BA 0.2mg、 KT 0.4mg。 4.根据权利要求1所述的紫薯丛生芽诱导方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述的诱导培 养基中， 各组份含量为： MS 1L、 2,4-D 1m。
6、g、 NAA 2mg、 6-BA 0.3mg、 KT 0.5mg。 5.根据权利要求1所述的紫薯丛生芽诱导方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述的诱导培 养基中， 各组份含量为： MS 1L、 2,4-D 0.5mg、 NAA 1mg、 6-BA 0.3mg、 KT 0.5mg。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 103598094 B 2 一种紫薯丛生芽的诱导方法 技术领域 0001 本发明涉及一种紫薯丛生芽的诱导方法， 属于植物组织培养技术领域。 背景技术 0002 紫薯 （Solanum tuberdsm） 又叫黑薯， 薯肉呈紫色至深紫色。 富含蛋白质质、 淀粉、 果胶、 纤维素。
7、、 氨基酸、 维生素及多种矿物质， 同时还富含硒元素和花青素。 紫薯营养丰富具 特殊保健功能， 其中的蛋白质、 氨基酸都是极易被人体消化和吸收； 富含的维生素A可以改 善视力和皮肤的粘膜上皮细胞， 维生素C 可使胶元蛋白正常合成， 防治坏血病的发生； 花 青素是天然强效自由基清除剂。 紫薯的深加工， 主要是提取花青素， 花青素是一种天然紫色 素添加剂， 它安全无毒副作用， 虽然比人工合成的色素价格贵， 但仍然畅销于国际市场； 紫 红薯还可去皮烘干粉碎后加工成全粉， 色泽美观， 营养丰富， 是极好的食品加工原料， 可作 为各种糕点主料和配料， 目前韩国每年要从中国进口紫色红薯全粉500吨左右； 。
8、另外， 以紫 红薯为原料制作的炸薯片、 冷冻薯饼和粉丝等， 以营养丰富、 口感好， 颇受市场青睐； 紫薯在 国际、 国内市场上十分走俏， 发展前景非常广阔。 0003 我国目前已育成的紫色红薯品种有： 济薯18号， 该品种为山东省农科院作物研究 所育成， 亩产量3000公斤以上； 广薯135， 该品种为广东省农科院育成， 亩产量为2000公斤 2500公斤， 宁紫4号。 该品种为江苏省农科院粮油作物研究所育成， 亩产量为500公斤左右。 以上3个品种还可鲜食， 而且均具有抗旱、 耐瘠薄、 适应性强、 产量较高、 薯块均匀、 薯皮光 滑、 色泽鲜艳和肉质细腻等特点， 适宜广大红薯产区种植。 传统。
9、的薯类秧苗育种时间周期 长， 育种条件不一控制， 而秧苗的质量不高， 导致亩产量也不高。 0004 马铃薯、 甘薯等薯类通过组织培养技术进行繁殖已经是非常成熟的技术， 不但可 以在短时间内繁殖出大量的愈伤组织或者丛生芽， 且再生的植株与原始植株没有遗传差异 性； 而诱导丛生芽的组织培养方式， 繁殖系数很高， 可以达到事半功倍的效果， 是最有效的 组织培养技术。 紫薯与马铃薯、 甘薯同属于旋花科的植物， 但是目前没有任何紫薯组织培养 方面的报道， 是否可以对紫薯进行组织培养技术快速育种还是一个全新的课题。 发明内容 0005 本发明提供一种紫薯丛生芽的诱导方法， 一方面弥补现有技术中紫薯组织培养。
10、研 究的空白， 另一方面提供一种紫薯快速的育种方法， 可以短时间内繁殖出大量的紫薯丛生 芽， 大大提高紫薯的繁殖系数。 0006 本发明的技术方案如下： 一种紫薯丛生芽的诱导方法： 包括如下步骤： 0007 （1） 外植体消毒： 以紫薯茎尖为外植体， 无菌水清洗干净后置于50%的乙醇溶液中 浸泡20s， 取出置于体积分数为1.5%的次氯酸钠溶液中消毒5min， 最后用无菌水清洗干净后 放于无菌操作台内； 0008 （2） 配置诱导培养基： 将2,4-二氯苯氧乙酸 2,4-D、 萘乙酸 NAA、 6-苄基嘌呤 6- BA、 激动素KT溶解于基本培养基MS中， 高压灭菌冷却至室温后待用， 其中各组。
11、份用量为： 说 明 书 1/3 页 3 CN 103598094 B 3 MS1L、 2,4-D 0.5-1mg、 NAA 1-2mg、 6-BA 0.1-0.3mg、 KT 0.3-0.5mg； 0009 （3） 接种： 在无菌操作台内， 将消毒后的紫薯茎尖接种于培养基上， 每个培养皿接 种一个茎尖分生组织； 0010 （4） 诱导丛生芽： 将接种好的茎尖分生组织在无菌、 温度18-22、 光强2000-3000 Lx、 每天光照8小时的条件下培养3-4周至丛生芽形成。 0011 进一步的， 步骤2中所述的培养基中， 各组分含量为： MS 1L、 2,4-D 0.5mg、 NAA 1mg、 。
12、6-BA 0.1mg、 KT 0.3mg。 0012 进一步的， 步骤2中所述的培养基中， 各组分含量为： MS 1L、 2,4-D 0.6mg、 NAA 1.2mg、 6-BA 0.2mg、 KT 0.4mg。 0013 进一步的， 步骤2中所述的培养基中， 各组分含量为： MS 1L、 2,4-D 1mg、 NAA 2mg、 6-BA 0.3mg、 KT 0.5mg。 0014 进一步的， 步骤2中所述的培养基中， 各组分含量为： MS 1L、 2,4-D 0.5mg、 NAA 1mg、 6-BA 0.3mg、 KT 0.5mg。 0015 本发明所述的紫薯丛生芽诱导方法， 一个紫薯的茎尖。
13、分生组织可以诱导出12个 芽， 诱导效率达到1200%， 显著提高组培效率。 利用一个紫薯茎尖分生组织诱导出丛生芽， 得 到大量同质无性系， 提高紫薯茎尖培养的繁殖系数， 易于工厂化生产紫薯组培苗。 具体实施方式 0016 以下通过实施例进一步阐述本发明的有益效果： 0017 实施例1： 0018 （1） 外植体消毒： 以紫薯茎尖为外植体， 无菌水清洗干净后置于50%的乙醇溶液中 浸泡20s， 取出置于体积分数为1.5%的次氯酸钠溶液中消毒5min， 最后用无菌水清洗干净后 放于无菌操作台内； 0019 （2） 配置诱导培养基： 将2,4-二氯苯氧乙酸 2,4-D、 萘乙酸 NAA、 6-苄基。
14、嘌呤 6- BA、 激动素KT溶解于基本培养基MS中， 高压灭菌冷却至室温后待用， 其中各组份用量为： MS 1L、 2,4-D 0.5mg、 NAA 1mg、 6-BA 0.1mg、 KT 0.3mg； 0020 （3） 接种： 在无菌操作台内， 将消毒后的紫薯茎尖接种于培养基上， 每个培养皿接 种一个茎尖分生组织； 0021 （4） 诱导丛生芽： 将接种好的茎尖分生组织在无菌、 温度18-22、 光强2000-3000 Lx、 每天光照8小时的条件下培养3-4周至丛生芽形成。 一个紫薯的茎尖分生组织可以诱导 出9个芽诱导效率达到900%。 0022 实施例2： 0023 与实施例1操作基本。
15、相同， 所不同的是， 步骤2中， 培养基的配方为MS 1L、 2,4-D 0.6mg、 NAA 1.2mg、 6-BA 0.2mg、 KT 0.4mg， 一个紫薯的茎尖分生组织可以诱导出12个芽诱 导效率达到1200%。 0024 实施例3： 0025 与实施例1操作基本相同， 所不同的是， 步骤2中， 培养基的配方为MS 1L、 2,4-D 1mg、 NAA 2mg、 6-BA 0.3mg、 KT 0.5mg， 一个紫薯的茎尖分生组织可以诱导出10个芽诱导效 率达到1000%。 说 明 书 2/3 页 4 CN 103598094 B 4 0026 实施例4： 0027 与实施例1操作基本相同， 所不同的是， 步骤2中， 培养基的配方为MS 1L、 2,4-D 0.5mg、 NAA 1mg、 6-BA 0.3mg、 KT 0.5mg， 一个紫薯的茎尖分生组织可以诱导出9个芽诱导效 率达到900%。 0028 上述实例只是为说明本发明的技术构思以及技术特点， 并不能以此限制本发明的 保护范围。 凡根据本发明的实质所做的等效变换或修饰， 都应该涵盖在本发明的保护范围 之内。 说 明 书 3/3 页 5 CN 103598094 B 5 。