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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201510972978.9 (22)申请日 2015.12.23 A01K 61/00(2006.01) (71)申请人 孙欣 地址 116001 辽宁省大连市中山区港兴路 6 号万达中心写字楼 27 层 (72)发明人 孙欣 (54) 发明名称 一种贝类家系育种标记对照方法 (57) 摘要 本发明属于水生生物选择育种标记技术领 域， 涉及贝类家系育种过程中海上中间育成和养 成阶段的标记对照方法， 具体涉及一种贝类家系 育种标记对照方法。本发明采用环保塑料垫板 作为几何形状标记牌的材料， 在标记牌上裁剪不 同几何形状孔及标记牌颜色作为标。
2、记方式， 成本 低廉， 标记简洁清晰， 在异物附着情况下， 也可以 准确辨别， 识别度高， 符合生产需求 ； 且标记牌制 作方便， 易携带， 可广泛、 重复使用， 标记保存时间 上， 保存率高 ； 使用塑料扎带将标记牌绑系于养 殖网笼上进行标记， 不会造成贝类生理损伤， 且标 记稳定不易脱落、 丢失， 稳定高。本发明标记率和 可读率均为 100%， 符合规模化贝类家系育种产业 发展要求， 对贝类产业良种繁育具有重要意义。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书5页 附图1页 CN 105532529 A 2016.05.04 。
3、CN 105532529 A 1.一种贝类家系育种标记对照方法， 其特征在于， 以彩色几何形状的标记牌进行家系 育种标记， 步骤如下： (1)建立标记牌对照统计表 根据育种家系建立序列并标记序列， 每个家系序列建立家系标号并分别录入标记牌对 照统计表， 所述的家系序列即对应家系编制记录编码， 记录编码包括育种年份、 育种批次和 家系组数信息； （2） 建立标记牌 对应每个家系序列， 建立一个几何形状的标记牌， 与标记牌对照统计表进行对应记录， 所述的标记牌为彩色， 标记牌的颜色与标记对照记录表中的育种批次相对应， 即相同批次 的家系序列用相同颜色标记牌标记； 在标记牌上沿一定方向的不同位置裁剪。
4、不同几何形状 的孔作为标记代码， 不同位置、 不同几何形状的孔代表不同的数量级别， 标记代码所代表的 数量与标记牌对照统计表中的育种家系序列记录编码的家系组数相对应； （3） 标记牌绑系于养殖网笼上进行标记 在苗种出库阶段， 同一家系苗种使用同样的标记牌， 标记牌依据家系序列苗种数量及 投放附着基数量制作多个， 每片附着基制作一个标记牌， 苗种出库阶段与附着基一同放入 育苗网袋内进行标记； 在苗种装入网笼后， 用塑料扎带为绑系工具， 将扎带线由标记牌内部圆孔穿入， 与标记 家系网笼吊绳相连接， 连接后扎带穿入卡扣， 完成标记。 2.根据权利要求1所述的一种贝类家系育种标记对照方法， 其特征在于。
5、， 所述的记录编 码为： 选择八位阿拉伯数字对应方法记录不同年份不同批次的贝类育种家系， 以前四位阿 拉伯数字代表育种年份； 以第五位阿拉伯数字代表育种批次； 以最后三位阿拉伯数字作为 家系组数标记代码， 与家系序列对应标记牌上不同几何形状的孔所示标记相对应。 3.根据权利要求1所述的一种贝类家系育种标记对照方法， 其特征在于， 所述建立一个 几何形状的标记牌的几何形状， 不包括全对称几何图形。 4.根据权利要求1所述的一种贝类家系育种标记对照方法， 其特征在于， 所述的标记牌 选择环保型塑料垫板为材料。 5.根据权利要求1所述的一种贝类家系育种标记对照方法， 其特征在于， 所述的在标记 牌上。
6、沿一定方向的不同位置裁剪不同几何形状的孔作为标记代码， 其几何形状可采用圆形 和半圆形， 或者三角形缺口， 圆形和半圆形缺口用办公打孔器完成， 标记牌边沿的三角形缺 口用剪刀裁剪。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 105532529 A 2 一种贝类家系育种标记对照方法 技术领域 0001 本发明属于水生生物选择育种标记技术领域， 涉及贝类家系育种过程中海上中间 育成和养成阶段的标记对照方法， 具体涉及一种贝类家系育种标记对照方法。 背景技术 0002 选择育种是新品种培育的有效方法， 已经在动植物育种中取得广泛成功。 其中， 建 立家系并进行系统选育是选择育种的重要手段。 目前， 。
7、国内外已有很多关于系统 （家系） 选 育的报道。 优良的家系可以通过逐代筛选， 家系内纯化和家系间杂交的方式， 固定群体内经 济性状的加性基因， 增加群体内具有经济价值的基因频率， 最终获得人们需求的新品种。 而 大量家系的构建， 往往需要进行区分， 以确保家系间种质信息不被混杂， 家系标记技术应运 而生。 目前， 较为普遍的家系标记技术主要包括甲壳类中的剪附肢、 纹身、 深层组织活体染 色、 线标、 荧光色素标记、 荧光牌标记、 眼标、 烙印等； 鱼类中的包括剪鳍、 芯片、 闭环塑料标 签标记等标记类型； 贝类产业作为我国产量最高的水产养殖产业， 其育种规模不断扩大， 在 家系标记过程中， 。
8、不能采用体内或体表标记方法逐个个体进行标记， 而主要采用体外整体 养殖网笼的贴牌标记， 烙印、 划痕或记号笔书写标记， 但在养殖过程中， 特别是在海域海水 养殖过程中， 标记牌易脱落丢失， 且标记牌上的标记在海水的冲刷下易模糊， 污损生物附着 条件下难辨认， 识别度及可读率低， 直接影响贝类家系育种的结果。 目前尚未发现适于规模 化育种， 较为方便快捷且识别度高、 可读性强的的标记方法。 发明内容 0003 本发明的目的是： 在贝类家系育种过程中， 通过设计一种简单、 方便、 实用的贝类 家系育种标记牌， 并完成标记牌对照统计表的相关记录形成系统有效的标记方法。 0004 为实现上述目的， 本。
9、发明的技术方案是： 一种贝类家系育种标记对照方法， 以彩色 几何形状的标记牌进行家系育种标记， 步骤如下： （1） 建立标记牌对照统计表 根据育种家系建立序列并标记序列， 每个家系序列建立家系标号并分别录入标记牌对 照统计表， 所述的家系序列即对应家系编制记录编码， 记录编码包括育种年份、 育种批次和 家系组数信息。 0005 所述记录编码为： 选择八位阿拉伯数字对应方法记录不同年份不同批次的贝类育 种家系， 以前四位阿拉伯数字代表育种年份； 以第五位阿拉伯数字代表育种批次； 以最后三 位阿拉伯数字作为家系组数标记代码， 与家系序列对应标记牌上不同几何形状的孔所示标 记相对应。 0006 （2。
10、） 建立标记牌 对应每个家系序列， 建立一个几何形状的标记牌， 与标记牌对照统计表进行对应记录， 所述的标记牌为彩色， 标记牌的颜色与标记对照记录表中的育种批次相对应， 即相同批次 的家系序列用相同颜色标记牌标记； 在标记牌上沿一定方向的不同位置裁剪不同几何形状 说 明 书 1/5 页 3 CN 105532529 A 3 的孔作为标记代码， 不同位置、 不同几何形状的孔代表不同的数量级别， 标记代码所代表的 数量与标记牌对照统计表中的育种家系序列记录编码的家系组数相对应。 0007 所述建立一个几何形状的标记牌的几何形状不包括圆形等全对称几何图形。 0008 所述的标记牌选择环保型塑料垫板为。
11、材料。 0009 所述的在标记牌上沿一定方向的不同位置裁剪不同几何形状的孔作为标记代码， 其几何形状可采用圆形和半圆形， 或者三角形缺口， 圆形和半圆形缺口用办公打孔器完成， 标记牌边沿的三角形缺口用剪刀裁剪。 0010 （3） 标记牌绑系于养殖网笼上进行标记 在苗种出库阶段， 同一家系苗种使用同样的标记牌， 标记牌依据家系序列苗种数量及 投放附着基数量制作多个， 每片附着基制作一个标记牌， 苗种出库阶段与附着基一同放入 育苗网袋内进行标记。 0011 在苗种装入网笼后， 用塑料扎带为绑系工具， 将扎带线由标记牌内部圆孔穿入， 与 标记家系网笼吊绳相连接， 连接后扎带穿入卡扣， 完成标记。 0。
12、012 本发明在贝类家系育种过程中， 通过建立标记牌对照统计表和制作简单易读的标 记牌对贝类育种家系进行标记。 此方法能清晰分辨不同家系序列， 使贝类育种标记方便快 捷且识别度高、 可读性强， 方便后期家系育种值及相关遗传参数的估算， 在育种标记180天 后， 对家系标记牌进行统计， 其家系的标记率和可读率均为100%， 且家系标记牌对贝类生 长、 存活无影响， 利于配种时定向交配， 既可防止近交衰退又能快速提高后代的主要经济性 状表现。 0013 本发明的有益效果是： 采用环保塑料垫板作为几何形状标记牌的材料， 在标记牌 上裁剪不同几何形状孔及标记牌颜色作为标记方式， 成本低廉， 标记简洁清。
13、晰， 在异物附着 情况下， 也可以准确辨别， 识别度高， 符合生产需求； 且标记牌制作方便， 易携带， 可广泛、 重 复使用， 标记保存时间上， 保存率高； 使用塑料扎带将标记牌绑系于养殖网笼上进行标记， 不会造成贝类生理损伤， 且标记稳定不易脱落、 丢失， 稳定高。 本发明标记率和可读率均为 100%， 符合规模化贝类家系育种产业发展要求， 对贝类产业良种繁育具有重要意义。 附图说明 0014 图1为本发明实施例1标记牌的结构示意图； 图中： 每个圆孔代表1， 每个半孔代表5， 每个半孔代表10； 每个三角代表 50， 每个三角代表100。 具体实施方式 0015 下面结合具体实施例对本发明。
14、进行详细说明。 0016 实施例1 以申请人2013年虾夷扇贝春季家系育种实验为例， 介绍贝类家系育种标记对照方法， 步骤如下： （1） 建立标记牌对照统计表 2013年虾夷扇贝家系育种实验于1月11日种贝入库阶段正式开始， 经过室内升温促熟 于2月22日进行产卵、 排精、 授精， 然后建立家系， 标记序列， 2013年家系育种实验总计完成 说 明 书 2/5 页 4 CN 105532529 A 4 一个批次的家系育种实验， 建立家系200组并对200组家系进行标记， 即对应200组家系序列 建立记录编码包括育种年份、 育种批次和育种数量进行标记， 家系序列记录编码为： 选择八 位阿拉伯数字。
15、对应方法记录不同年份不同批次的贝类育种家系， 以前四位阿拉伯数字代表 育种年份， 本实施例中年份为2013； 以第五位阿拉伯数字代表育种批次， 本实施例中仅一个 批次， 即为1； 以最后三位阿拉伯数字作为标记数字代码， 本实验中为001至200， 与家系序列 对应标记牌上不同几何形状的孔所示标记相对应。 0017 对应每个家系序列建立家系标号， 即建立家系标号200个。 将标记家系序列建立的 记录编码和家系标号分别录入标记牌对照统计表， 使之家系标号与实验序号相对应， 详见 表1， 并依据不同家系标号收集育种扇贝父母本， 记录育种家系交配策略和父母本主要表型 性状指标： 壳高、 壳长、 壳宽、。
16、 湿重等信息。 本实验中记录家系父母本信息400条， 另计入父母 本信息表中。 0018 （2） 建立标记牌 育种家系经孵化、 选育、 幼虫培养、 稚贝培养后， 进而出库进行海上中间育成。 在虾夷扇 贝实验家系出库前， 对应每个家系序列建立一个几何形状的标记牌， 与标记牌对照统计表 进行对应记录， 标记牌采用环保型塑料垫板为原料， 此次试验仅一个批次， 家系200组， 故标 记牌选用同一个颜色即可， 标记牌的不同颜色代表不同批次， 选择制作相同颜色-蓝色的 200个标记牌。 为清楚标记， 在苗种出库阶段， 同一家系苗种使用同样的标记牌， 标记牌依据 家系序列苗种数量及投放附着基数量制作多个， 。
17、每片附着基制作一个标记牌， 出苗种库阶 段与附着基一同放入育苗网袋内进行标记。 在标记牌上沿一定方向的不同位置裁剪不同几 何形状的孔作为标记代码， 不同位置、 不同几何形状的孔代表不同的数量级别， 标记代码所 代表的数量与标记牌对照统计表中的育种家系序列记录编码的家系组数相对应， 本实施例 中此阶段至少制作200个标记牌， 相应在家系标记牌统计表上记录苗种出库网袋数量。 0019 本实施例中的塑料垫板原料的长为29.8cm， 宽为19.8cm， 将塑料垫板按照4行8列 方式裁成长为4.95cm、 宽为3.725cm的长方形小块， 即标记牌； 如图1所示， 在此标记牌上采 用圆形孔和半圆、 三角。
18、形缺口进行打孔标记， 圆形孔和标记牌边沿的半圆缺口用办公打孔 器完成， 标记牌边沿的三角形缺口用剪刀裁剪； 对应1-5组家系的标记牌， 沿标记牌左侧上 部分别打1-5个圆孔进行标记， 每个圆孔代表的数量级为1， 见图1中； 对应6-10组的家系 的标记牌， 首先在标记牌左侧边沿打半圆缺口， 此位置半圆缺口代表的数量级为5， 见图1中 ， 然后沿标记牌左侧上部打圆孔， 使标记牌面上圆孔代表的数量加左侧半圆缺口代表的 数量之和为6-10； 当家系序列中家系组数标记代码大于10时， 以标记牌上部边沿打半圆缺 口进行标记， 此位置半圆缺口代表的数量级为10， 见图1中； 当家系序列中家系组数标记 代码。
19、大于50时， 在标记牌右侧裁剪三角形缺口进行标记， 此位置三角形缺口代表的数量级 为50， 见图1中； 当家系序列中家系组数标记代码大于100时， 在标记牌下部边沿裁剪三角 形缺口进行标记， 此位置三角形缺口代表的数量级为100， 见图1中； 依此可得图1标记牌 代表家系序列为20131200， 具体分析为标记牌上5个圆形孔代表5， 左侧边沿1个半圆缺口代 表5， 5+5=10； 标记牌上部边沿有4个半圆缺口代表40； 右侧边沿1个三角形缺口代表50， 下部 边沿1个三角形缺口代表100， 因此， 10+40+50+100=200， 此标记牌代表家系序列代码为 20131200。 0020 图。
20、1家系序列对应的标记对照记录表的记录编码为20131200， 代表2013年第一批 说 明 书 3/5 页 5 CN 105532529 A 5 育种第200号家系序列， 即为此家系查询记录编码， 其最后3位标记数字代码与对应的标记 牌标记家系序列组数标记相同； 方便核对查询。 0021 （3） 标记牌绑系于养殖网笼上进行标记 在苗种装入网笼后， 用塑料扎带为绑系工具， 将扎带线由标记牌内部圆孔穿入， 与标 记家系网笼吊绳相连接， 连接后扎带穿入卡扣， 完成标记； 养殖网笼经标记牌标记， 用扎带 绑系， 在自然环境条件下可以做到不脱落， 不变色， 可辨识， 可在贝类家系苗种培育过程中 长期使用。
21、。 0022 2013年申请人进行虾夷扇贝春季大规模家系育种实验， 苗种经受精、 孵化， 发育至 D型幼虫； 后期经浮游幼虫培养， 壳顶变态至200um左右出现眼点， 开始投放附着基； 眼点幼 虫经附着变态， 逐渐生长为稚贝； 稚贝在室内生长至600um左右， 从室内移出至60目网袋并 于外海近海海区中中间育成。 为标记不同实验家系， 防止家系间混杂， 在苗种出库前， 依次 做好实验标记牌， 将标记牌放入出库网袋中， 与被标记苗种共同转移至海上养殖， 此时， 同 时进行标记牌对照统计表相关记录； 6月中旬， 苗种回运进行分苗， 将标记牌清理干净， 与标 记家系苗种共同进行换袋； 7月份， 当苗种生长至1cm左右， 将家系苗种进笼， 进笼后， 标记牌 使用塑料扎带进行绑系， 标记实验家系， 后期倒笼等操作， 进行标记牌的回收、 增加、 清理、 补充等工作。 标记牌使用年限最高为4年， 标记率100%， 在自然环境下会产生破损， 但因制作 容易， 可以现做现补， 且成本低廉， 平均成本不足0.1元， 因此可广泛推广使用。 0023 表1. 标记牌对照统计表 说 明 书 4/5 页 6 CN 105532529 A 6 说 明 书 5/5 页 7 CN 105532529 A 7 图1 说 明 书 附 图 1/1 页 8 CN 105532529 A 8 。