技术领域
本发明属于农药技术领域，具体涉及的是一种含二氯噁菌唑和丁子香酚的农药组合物。
背景技术
二氯噁菌唑是由贵州大学发现的一种新型噁唑砜类杀菌剂。化学名称为：2-甲基砜基-5-(2,4-二氯苯基)-1,3,4-噁二唑，分子式：C9H6Cl2N2O3S，相对分子质量为293.1。二氯噁菌唑是一种新型杀菌剂，对由卵菌纲病原菌引起的病害如晚疫病、霜霉病等有很好的防治效果，是低毒、安全的绿色化学农药。
丁子香酚，英文名称eugenol，又名邻丁香酚，属于植物源低毒杀菌剂。丁子香酚是从丁香、百部等十多种中草药中提取出的杀菌成分。对霜霉病、灰霉病、叶霉病及晚疫病等多种真菌具有非常好的预防和治疗作用。商品名有灰霜特、施立克，主要剂型是0.3％可溶性液剂。
丁子香酚为溶菌性化合物，主要是通过破坏病菌细胞膜壁的形成，对卵菌生活史的各个阶段都有破坏作用，在孢子嚢梗和卵孢子的形成阶段尤为敏感，从而达到抑制杀菌的作用。丁子香酚可由植物的叶、茎、根部吸收，有强渗透性和内吸性，并有向上传导功能。药效治疗迅速，持效期长，广谱、高效、安全，兼具预防和治疗双重作用。同时，作为一种新型植物源农药，其与环境兼容性好，低毒、低残留，对病原菌的选择压力小，是农产品有机基地和绿色无公害农产品生产基地的首选良药。
目前作物霜霉病的防治难度越来越大，一方面，随着种植结构的改变，瓜果、蔬菜等经济作物种植面积逐步扩大，病害发生程度、发生数量、频率均有所提高，在防治上难度加大；另一方面，由于长期不科学合理地用药，病原菌的抗性在持续的药剂选择压力下逐年上升，单剂的防治效果大打折扣。在广东，蔬菜霜霉病已经对市面上常见的杀菌成份如：霜霉威、烯酰吗啉等产生了严重的抗性，农户用药周期从以前的15-20天一次药到现在5-7天用一次药，还无法有效控制霜霉病的发生。
作物疫病一直以来就是黄瓜、番茄、辣椒种植者的噩梦。其发生范围广，发生速度快，如果不及时控制，对农户来说是毁灭性的打击。现在市面上防治疫病的用药存在速效性差，抗药性大，用药量超标等缺陷，急需新的防治药剂出现。
不同作用机理的杀菌剂混配使用有扩大防治谱、增强防效、延缓病原菌抗药性等诸多优势，因此我们在农药应用中，一直试图找寻理想的混配药剂和配比剂量。本申请的发明人经过大量的室内测定和田间试验，发现将二氯噁菌唑和丁子香酚复配后，与现有的单一制剂相比，协同增效作用显著，杀菌效果优秀，杀菌谱广，持效期长，对农作物安全，同时减少了农药使用量，省时省力，降低了农药在农作物上的残留量，减轻了对环境的污染，延缓了病原菌抗药性的产生，延长了农药使用寿命。后期经过进一步的实验室和大田研究验证并完成了本发明。经全面检索，尚未发现关于二氯噁菌唑和丁子香酚复配的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种高效、低毒、能够延缓病原菌抗药性产生和减少农药使用量的协同增效杀菌组合物。
为实现上述技术问题，本发明采用如下技术方案:
一种增效杀菌组合物，它的活性成分至少包括二氯噁菌唑和丁子香酚，其中二氯噁菌唑与丁子香酚重量比为1-80:80-1，进一步优选为1-20:50-1。
进一步的，所述农药组合物中活性成分占组合物的质量百分比为5-80％，优选为10-60％。
进一步的，本发明的农药组合物中还可含有其它农用活性成分。
进一步的，本发明的增效杀菌组合物除去活性成分之外，还包含农药制剂加工中常规的助剂和/或载体。
进一步的，所述助剂可以为常规的表面活性剂，例如乳化剂、分散剂、润湿剂、渗透剂，也可以其它常规辅助成分如增稠剂、消泡剂、防冻剂、稳定剂、PH调节剂等中的一种或一种以上。
进一步的，所述杀菌组合物与已知的助剂和赋形剂复配成农药上允许的剂型，包括但不限于乳油、可湿性粉剂、水分散粒剂、水乳剂、微乳剂、悬浮剂、种衣剂、干悬浮等。
本发明的农药组合物对果蔬、经济作物、大田作物等多种作物上的霜霉病、疫病、灰霉病、叶霉病等均具有优良防效。
与现有技术相比，本发明的有益效果为:(1)本发明提供的杀菌组合物，在一定配比范围内对黄瓜霜霉病、马铃薯晚疫病表现出明显的增效作用，组合物的防治效果比单剂有了明显提高，减少使用次数，降低了农药的使用剂量，省时、省力，降低了用药成本，减少了农药对生态环境的不利影响；(2)本发明提供的农药组合物的两种有效成分作用机制各不相同，可以克服长期单一使用药剂容易产生抗性的缺点，可延长药剂的使用寿命；(3)对作物安全性好，符合农药制剂安全性的要求。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，本发明用以下具体实施例进行说明，但本发明绝非限于这些例子。以下所述仅为本发明较好的实施例，仅仅用于解释本发明，但不能因此理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的时，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
一、制剂实施例
1、实施例1：20％二氯噁菌唑·丁子香酚悬浮剂
称取100克丁子香酚、100克二氯噁菌唑，50克烷基聚氧乙烯醚磺酸钠、10克羧甲基纤维素、茶枯粉30克、8克黄原胶、30克聚乙二醇、8克硅油，去离子水加至1000克重量份。上述原料经混合，高速剪切分散30min，用砂磨机砂磨至粒径D90小于10微米后制得20％二氯噁菌唑·丁子香酚悬浮剂。
2、实施例2：49％二氯噁菌唑·丁子香酚水分散粒剂
称取280克丁子香酚，210克二氯噁菌唑，50克聚羧酸盐，70克木质素磺酸钠，20克十二烷基硫酸钠，50克硫酸铵，白炭黑补足至1000g。上述原料经常规制取水分散粒剂的方法即混合、超微气流粉碎、混合、造粒步骤制取49％二氯噁菌唑·丁子香酚水分散粒剂。
3、实施例3：50％二氯噁菌唑·丁子香酚可湿性粉剂
称取400克二氯噁菌唑，100克二氯噁菌唑，30克烷基硫酸盐，30克聚羧酸盐，110克白炭黑，膨润土补足。上述原料经混合、超微气流粉碎、混合工艺步骤制备得60％二氯噁菌唑·丁子香酚可湿性粉剂。4、实施例4：33％二氯噁菌唑·丁子香酚水分散粒剂
称取300克丁子香酚，30克二氯噁菌唑，50克聚羧酸盐，60克NNO，40克十二烷基硫酸钠，50克膨润土，高岭土补足至1000g。上述原料经常规制取水分散粒剂的方法即混合、超微气流粉碎、混合、造粒步骤制取33％二氯噁菌唑·丁子香酚水分散粒剂。
5、实施例5：21％二氯噁菌唑·丁子香酚悬浮剂
称取10克丁子香酚、200克二氯噁菌唑，40克十二烷基聚氧乙烯醚磷酸酯、20克木质素磺酸钠、30克十二烷基硫酸钠、8克羧乙基纤维素、35克乙二醇、8克硅油，去离子水加至1000克重量份。上述原料经混合，高速剪切分散30min，用砂磨机砂磨至粒径D90小于10微米后制得21％二氯噁菌唑·丁子香酚悬浮剂。
6、实施例6：54％二氯噁菌唑·丁子香酚可湿性粉剂
称取90克丁子香酚，450克二氯噁菌唑，40克NNO，25克木质素磺酸钠，110克白炭黑，膨润土补足。上述原料经混合、超微气流粉碎、混合工艺步骤制备得54％二氯噁菌唑·丁子香酚可湿性粉剂。
7、实施例7：22％二氯噁菌唑·丁子香酚悬浮剂
称取20克丁子香酚、200克二氯噁菌唑，45克聚羧酸钠、15克拉开粉BX、6克硅酸铝镁、30克十二烷基硫酸钠、40克乙二醇、8克硅油，去离子水加至1000克重量份。上述原料经混合，高速剪切分散30min，用砂磨机砂磨至粒径D90小于10微米后制得22％二氯噁菌唑·丁子香酚悬浮剂。
8、实施例8：42％二氯噁菌唑·丁子香酚微乳剂
称取300克丁子香酚、120克二氯噁菌唑，55克农乳600#，35克斯盘-60#，50克农乳1601，100克甲苯、40克乙醇、15克亚磷酸三苯酯，经溶解完全并混合均匀，去离子水加至1000克重量份，搅拌后制得42％二氯噁菌唑·丁子香酚微乳剂。
二、生物测定实施例
1、防治黄瓜霜霉病的室内毒力测定与田间药效测试
室内毒力测定
为了了解二氯噁菌唑与丁子香酚组合混配对黄瓜霜霉病的确切毒力，本发明对于其配比进行了筛选。
试验靶标：黄瓜霜霉病致病菌古巴假霜霉菌(Pseudoperonospora Cubensis)
本试验采用盆栽法。选取长势一致的两片真叶期黄瓜苗，每个处理选用5盆供试瓜苗，编号备用。用Potter喷雾塔在50PSI压力下喷雾，每盆5mL。每个药剂设置5个浓度梯度，以喷施等量清水的为空白对照。药剂处理24h后喷雾接种黄瓜霜霉病菌孢子囊悬浮液，孢子囊悬浮液的配置过程如下：取采自田间带有黄瓜霜霉病致病菌古巴假霜霉菌的黄瓜叶片，用毛笔蘸取10℃左右的蒸馏水洗下背面的孢子囊，配成浓度为3×105个/mL的孢子囊悬浮液。接种后将黄瓜苗置于人工气候箱中(相对湿度100％，温度15-20℃)培养，24h后保持温度15-24℃、相对湿度90％左右保湿诱发，10d后调查记载发病情况，计算病情指数和防治效果。
用DPS统计分析软件进行统计分析，计算各药剂的EC50，并根据孙云沛法计算混剂的共毒系数(CTC值)。
实测毒力指数(ATI)＝(标准药剂EC50/供试药剂EC50)×100。
理论毒力指数(TTI)＝A药剂毒力指数×混剂中A的百分含量+B药剂毒力指数×混剂中B的百分含量。
共毒系数(CTC)＝[混剂实测毒力指数(ATI)/混剂理论毒力指数(TTI)]×100。
划分标准：共毒系数(CTC)≥120表现为增效作用；共毒系数(CTC)≤80表现为拮抗作用；80＜共毒系数(CTC)＜120表现为相加作用。
表1二氯噁菌唑与丁子香酚不同配比对黄瓜霜霉病的室内毒力测定结果
药剂名称及配比(重量比) EC50(mg/L) 共毒系数(CTC) 二氯噁菌唑(A) 0.3983 - 丁子香酚(B) 0.0671 - A:B(1:1) 0.1535 151.6 A:B(3:4) 0.1274 164.1 A:B(5:1) 0.2632 130.4 A:B(10:1) 0.2463 156.7 A:B(20:1) 0.2011 194.5 A:B(1:5) 0.0495 247.1 A:B(1:10) 0.0307 316.6
由表1可知，本发明的组合物共毒系数均大于120，即本发明组合物二氯噁菌唑(A)和丁子香酚(B)以不同配比对黄瓜霜霉病具有明显的协同增效性，其效果均好于单剂品种。可见，二氯噁菌唑和丁子香酚复配具有合理性和可行性。
田间药效测试
试验处理:本试验根据各个成分的不同分别设两个药剂用量，药剂用量是有效成分二氯噁菌唑(A)和丁子香酚(B)的质量和。对照药剂分别是20％二氯噁菌唑悬浮剂和0.3％丁子香酚可溶性液剂及空白清水试验。试验地点为广东省佛山市高明区更合镇白石工业区附近的农田。
试验方法:每个小区面积为66.7m2，重复3次；施药前调查及防治后的调查药效方法为:在试验处理区内随机取样5点，常规喷雾。施药器械为卫士WS-16型手动喷雾器，圆锥雾喷头喷雾，工作压力0.2-0.4MPa，流量0.65-0.88L/min。按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。试验结果见下表:
表2不同农药制剂对黄瓜霜霉病的田间药效试验结果
田间药效结果表明，由表2可知，本发明组合物具有明显的协同增效作用，组合物的防治效果优良，防治效果均好于单剂品种。另外，在用药范围内，未发现本发明的农药组合物对黄瓜霜霉病有药害产生，表明本发明的农药组合物安全性好，值得推广应用。
2、防治马铃薯晚疫病的室内毒力测定与田间药效测试
室内毒力测定
为了了解二氯噁菌唑与丁子香酚组合混配对马铃薯晚疫病的确切毒力，本发明对于其配比进行了筛选。
试验靶标：马铃薯晚疫病致病菌致病疫霉(Phytophthora infestans)。马铃薯晚疫病分离自重庆市潼南县周边，纯化培养后经柯赫氏法则验证其致病性。
试验参考《农药室内生物测定试验准则NY/T1156.2-2006》采用菌丝生长速率法。取5mL配制好的药液加入到装有45mL热培养基(黑麦培养基，45-50℃。黑麦培养基配方：黑麦60g，蔗糖20g，琼脂粉12g，加水至1000mL)的锥形瓶中，摇匀后，迅速倒入直径90mm玻璃培养皿，每个培养皿倒入带药培养基10mL，以含有适量的丙酮和吐温80的灭菌水溶液作对照，每个处理4个重复，水平静置，冷却后制成平板。
采用菌丝生长速率法测定二氯噁菌唑与丁子香酚以及二者组合物对马铃薯晚疫病菌菌丝生长的影响，设定二者重量配比为2:5，5:3，5:1，10:1，20:1，1:5，1:10，以及各单剂共9种药剂处理，各处理设定0.125，0.25，0.5，1，2，4，8，16，32mg/L共9个浓度梯度制成PDA平板，设置无药剂为对照，每浓度重复3次，在无菌条件下将打好的直径0.4cm菌饼一个倒置于各个处理PDA平板中央后，将平板置于25℃，90％湿度恒温培养箱中黑暗培养，待菌丝生长直径达到培养皿直径50％左右时(10d左右)调查结果。采用十字交叉法测量并记录各处理的菌落直径，计算抑制率。
按照下述公式计算抑制率，并借助DPS数据统计软件推算各个药剂处理至毒力回归方程、相关系数、EC50以及复配共毒系数。在室内采用菌丝生长速率法，测定不同药剂对菌株的EC50，采用共毒系数计算方法，计算出混剂的共毒系数(CTC)，确定混剂的增效性，具体计算方法如下:
用DPS统计分析软件进行统计分析，计算各药剂的EC50，并根据孙云沛法计算混剂的共毒系数(CTC值)。
实测毒力指数(ATI)＝(标准药剂EC50/供试药剂EC50)×100。
理论毒力指数(TTI)＝A药剂毒力指数×混剂中A的百分含量+B药剂毒力指数×混剂中B的百分含量。共毒系数(CTC)＝[混剂实测毒力指数(ATI)/混剂理论毒力指数(TTI)]×100。
增效作用判断标准：CTC>120时为增效作用；CTC<80时为拮抗作用；80≤CTC≤120时为相加作用。
表3二氯噁菌唑与丁子香酚不同配比对马铃薯晚疫病的室内毒力测定结果
药剂名称及配比(重量比) EC50(mg/L) 共毒系数(CTC) 二氯噁菌唑(A) 0.3512 - 丁子香酚(B) 0.0812 - A:B(5:3) 0.1532 141.1 A:B(10:1) 0.1164 169.2 A:B(2:5) 0.1837 166.7 A:B(1:5) 0.2352 142.8 A:B(1:10) 0.1695 203.9 A:B(20:1) 0.1038 121.6 A:B(5:1) 0.0231 457.8
由表3可知，本发明的组合物共毒系数均大于120，即本发明组合物二氯噁菌唑(A)和丁子香酚(B)以不同配比对马铃薯晚疫病具有明显的协同增效性，其效果均好于单剂品种。可见，二氯噁菌唑和丁子香酚复配具有合理性和可行性。
田间药效测试
试验处理:本试验根据两个活性成分的不同分别设多个药剂用量，药剂用量是有效成分二氯噁菌唑(A)和丁子香酚(B)的质量和。对照药剂分别是20％二氯噁菌唑悬浮剂和0.3％丁子香酚可溶性液剂及空白清水试验。试验地点为广东省佛山市高明区更合镇白石工业区附近的农田。
试验方法:每个小区面积为66.7m2，重复3次；施药前调查及防治后的调查药效方法为:在试验处理区内随机取样5点，常规喷雾。施药器械为卫士WS-16型手动喷雾器，圆锥雾喷头喷雾，工作压力0.2-0.4MPa，流量0.65-0.88L/min。按照国家田间试验相关标准进行病情分级，计算防效。试验结果如表4所示:
表4不同农药制剂对马铃薯晚疫病的田间药效试验结果
由表4可知，从田间药效结果看，本发明组合物具有明显的协同增效作用，组合物的防治效果优良，防治效果均好于单剂品种。另外，在用药范围内，未发现本发明的农药组合物对马铃薯晚疫病有药害产生，表明本发明的农药组合物安全性也较好，值得推广应用。