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1、(10)授权公告号 CN 103262912 B (45)授权公告日 2014.10.15 CN 103262912 B (21)申请号 201310235621.3 (22)申请日 2013.06.15 A23D 9/04(2006.01) (73)专利权人 杭州鹏龙科技有限公司 地址 310051 浙江省杭州市滨江区西兴街道 三江商厦 34 号 (72)发明人 李卫旗 WO 03057727 A1,2003.07.17, 全文 . CN 1493722 A,2004.05.05, 全文 . CN 101095494 A,2008.01.02, 全文 . JP 昭 58-179491 A,1。
2、983.10.20, 全文 . CN 101709244 A,2010.05.19, 全文 . CN 103005564 A,2013.04.03, 全文 . 张海涛 . 提取因素对木瓜籽油提取率的影 响 .安徽农业科学 .2012, 第 40 卷 ( 第 2 期 ), 第 1026-1027 页 . T. PUANGSRI， 等 .PROPERTIES OF CARICA PAPAYA L.(PAPAYA) SEED OIL FOLLOWING EXTRACTIONS USING SOLVENT AND AQUEOUS ENZYMATIC METHODS.Journal of Food Li。
3、pids .2005,( 第 12 期 ), 第 62-76 页 . (54) 发明名称 一种新型营养保健食用油的生产工艺 (57) 摘要 本发明一种新型营养保健食用油的生产工 艺， 通过 ： 1、 木瓜籽原料的酸法预处理。2、 复合酶 制剂的配制。 3、 木瓜籽油的水相复合酶酶解提取。 4、 油脂的提取。5、 彩色茧丝提取物的制作。6、 成 品油的配制等步骤获得具有良好抗氧化性能的营 养保健食用油成品。本发明在二次资源的利用和 降低生产成本上与同类产品有明显优势。具有处 理条件温和、 工艺简单、 能耗低、 能得到优质的植 物油脂和纯度高等优点。 显著减少了酶的使用量， 使油脂提取效率更加提高。
4、。 抗氧化性能好， 获取途 径简单， 成本低廉， 同时这种抗氧化剂组分在食用 油中的加入， 本身又丰富了食用油的营养组成， 使 其保健营养功能更为完善。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 王艳 权利要求书 1 页 说明书 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书4页 (10)授权公告号 CN 103262912 B CN 103262912 B 1/1 页 2 1. 一种新型营养保健食用油的生产工艺， 其特征在于 ： 1） 木瓜籽原料的酸法预处理 ： 将木瓜籽洗净晒干， 用粉碎机粉碎至 40-70 目， 过筛后 备用 ； 将木瓜籽粉。
5、倒入浓度为 2 - 5mol/L 的盐酸溶液中， 其盐酸溶液与木瓜籽粉质量比为 5-15:1， 搅拌震荡至混合均匀， 静置1-2.5小时后将其放进沸水浴中5-15分钟， 之后迅速放 置 -20的低温中冷却 20-35 分钟 ； 加入氢氧化钠溶液调 pH 至 4.0-5.5 ； 2） 复合酶制剂的配制 ： 将酶比活力为 3000U/g 的纤维素酶、 酶比活力为 18000U/g 果胶 酶和酶比活力为 45000U/g 酸性蛋白酶以 5:10:1 的质量比混合配制 ； 3） 木瓜籽油的水相复合酶酶解提取 ： 在木瓜籽原料的酸法预处理液中加入复合酶制 剂， 加入量为木瓜籽原料质量的 1.0 - 2.。
6、5%， 酶解温度为 40-50、 pH 值 4.0-5.5， 酶解 时间 6-10 小时 ； 酶解过程中进行搅拌以利于酶对物料充分酶解 ； 酶解完成后将温度升至 90-100， 灭酶 1 小时， 同时使油脂充分溶出 ； 4） 油脂的提取 ： 用 2 层细纱布过滤提取液， 收集滤液， 在 4000r/min 下离心 5-10min 破 乳， 然后向离心液中加入木瓜籽原料 3-6 倍质量的正己烷溶剂萃取油脂， 萃取 3-4 次， 合 并萃取液， 旋转蒸发出萃取溶剂， 获得木瓜籽油 ； 5） 彩色茧丝提取物的制作 ： 将晒干的彩色丝茧的茧衣、 茧壳粉碎为 1-3mm 大小的碎 片， 量取原料质量 3。
7、0-60 倍的蒸馏水， 将原料碎片浸渍于水溶液中， 使茧衣壳充分膨润 20-50min, 然后在常压下煮沸 , 使茧衣壳中的丝胶蛋白部分洗脱到溶液中， 并一定程度水 解， 当溶液体积浓缩至原来的 1/10-1/5 时， 停止加热， 冷却至常温 ； 在溶液中加入茧衣壳 质量 1.5-2.5% 的中性蛋白酶进行酶解， 酶解温度为 20-35， pH 值为 6.8-7.7， 持续酶解 120-240min， 使溶液中的丝胶蛋白水解为平均分子量为 2000-5000Da 的活性丝胶多肽 ； 然 后将溶液加热到沸腾维持10-30min， 灭酶活。 将不能溶解的蚕丝残渣捞出， 并用少量蒸馏水 洗涤 2-5。
8、 遍， 并将洗涤水合并到水解液中 ； 将丝茧水解液在 60-90温度下加热， 浓缩至原 来体积的 1/4-1/2， 自然冷却至常温后， 获茧丝的浓缩液 ； 然后在溶液中加入同体积的 95% 乙醇， 充分混合 5-30 min， 使活性肽等组分絮凝沉淀， 将沉淀过滤收集， 真空干燥至恒重， 粉 碎至 100-200 目， 即得到富含活性多肽、 黄酮类及胡萝卜素类成分的天然彩色丝茧提取物 ； 6） 成品油的配制 ： 常温下在木瓜籽油中加入 0.1-0.5% 质量的丝茧提取物， 充分混合均 匀， 即可获得具有良好抗氧化性能的营养保健食用油成品。 权 利 要 求 书 CN 103262912 B 2 。
9、1/4 页 3 一种新型营养保健食用油的生产工艺 技术领域 0001 本发明涉及一种木瓜籽油的生产工艺， 特别是涉及以冷热酸法破壁和酶法水解方 式提取木瓜籽油并且以天然彩色茧丝提取物作为抗氧化剂生产新型营养保健食用油的一 种新型营养保健食用油的生产工艺， 属油脂生产技术领域。 背景技术 0002 作为食品范畴中的一个重要分支 , 食用油脂对人类健康的重大影响也越来越引 起人们的重视。 近几十年来, 人们不断开发新油源, 尤其是一些富含油脂的农产品弃料, 价格十分低廉， 经加工后 , 增值幅度比较大 , 能给企业带来较好的经济效益。而这些特定 的油脂产品 , 往往因含有多种活性物质而对人体健康有。
10、益， 质量不亚于高端食用油产品。 0003 油脂如果长时间暴露在空气中， 易被氧化生成有害人体健康的过氧化物。为防止 油脂氧化， 可采用密封、 避光、 低温或充入惰性气体等方式保藏， 但要求条件高， 对批量的食 用油脂和富含油脂的食品很难做到。目前最简便可行的方法是添加抗氧化剂。目前食品 工业主要使用人工合成抗氧化剂， 但由于安全性原因， 已被许多国家禁止使用， 所以具有安 全性高、 抗氧化能力强、 无副作用、 防腐保鲜好等特点的天然食品抗氧化剂日益受到重视。 天然抗氧化剂的来源非常广泛， 普遍取自天然可以食用的物质， 它们主要可分为酚类、 活性 肽、 植酸、 多糖、 花色苷类色素以及酶和维生。
11、素等物质。 天然抗氧化剂用作食用油添加剂， 既 能防止或减慢食油发生氧化作用， 又有消除自由基或阻抑自由基的活动， 从而起到防老抗 衰、 抑制肿瘤的发生、 防止心脑血管疾病、 增强免疫功能的作用， 使产品的复合营养保健功 能大大增强。 发明内容 0004 本发明的目的， 就是设计出一种以木瓜籽为主要原料， 经冷热温差酸法细胞破壁 后酶解处理提取木瓜油， 并加入经特定酶解处理获得的具有抗氧化性等生物活性天然彩色 茧丝提取物作为抗氧化剂， 生产出一种新型营养保健食用油。 0005 本产品原料之一是木瓜籽。木瓜属蔷薇科木瓜属落叶灌木或小乔木， 别名皱皮木 瓜、 铁脚梨、 宣木瓜。木瓜果实富含有机酸、。
12、 皂甙、 胡萝卜素、 维生素等， 营养和保健价值高。 因此， 木瓜在食品工业中被加工成饮料、 酒等多种产品， 但在木瓜中将近一半是木瓜籽， 目 前木瓜产品加工中产生的大量木瓜籽都作为废物处理， 而木瓜籽含有丰富的油脂， 富含有 油酸、 棕榈酸、 亚油酸、 硬脂酸和亚麻酸等多种脂肪酸。木瓜籽油中， 不饱和脂肪酸含量高， 尤其是油酸含量很高， 油酸作为单不饱和脂肪， 易于被人体消化吸收， 对减少膳食脂肪和胆 固醇摄人量有重要作用。 木瓜籽油中， 各种脂肪酸组成比例合理， 是一种理想的营养保健食 用油。 因此， 为充分开发利用木瓜籽资源， 对木瓜籽中油脂进行提取加工有重要经济和环境 效益。 0006。
13、 本发明中的抗氧化剂原料来自于天然彩色丝茧丝。 天然彩色茧的色素物质均源于 桑叶或蚕体自身的合成， 为黄酮类和类胡萝卜素物质， 天然彩色茧中丰富的丝胶蛋白经水 说 明 书 CN 103262912 B 3 2/4 页 4 解成为活性多肽具有如下的功能 ： 抗氧化活性 、 抑制络氨酸酶促进细胞的再生、 抗衰老等 护肤美容等功效。天然彩色茧丝富含的黄酮类、 类胡萝卜素等天然色素也是良好的天然抗 氧化剂， 有较强的分解自由基活性、 抗菌等保健功能， 因此从天然彩色丝茧中获得的提取物 是一种理想的食用油天然复合抗氧化剂。 0007 现介绍一种以冷热酸法破壁和酶法水解方式提取木瓜籽油并且以天然彩色茧丝 。
14、提取物作为抗氧化剂生产新型营养保健食用油的工艺方法 ： 0008 1. 木瓜籽原料的酸法预处理 ： 将木瓜籽洗净晒干， 用粉碎机粉碎至 40-70 目， 过筛 后备用。将木瓜籽粉倒入浓度为 2 - 5mol/L 的盐酸溶液中 （盐酸溶液与木瓜籽粉质量比为 5-15:1） ， 搅拌震荡至混合均匀， 静置 1-2.5 小时后将其放进沸水浴中 5-15 分钟， 之后迅速 放置 -20的低温中冷却 20-35 分钟。加入氢氧化钠溶液调 pH 至 4.0-5.5。 0009 2. 复合酶制剂的配制 ： 将纤维素酶 （3000U/g） 、 果胶酶 （18000U/g） 和酸性蛋白酶 （45000U/g） 。
15、以 5:10:1 的质量比混合配制。 0010 3. 木瓜籽油的水相复合酶酶解提取 ： 在木瓜籽原料的酸法预处理液中加入复合 酶制剂， 加入量为木瓜籽原料质量的1.0 - 2.5%， 酶解温度为40-50、 pH值4.0-5.5， 酶解 时间 6-10 小时。酶解过程中进行搅拌以利于酶对物料充分酶解。酶解完成后将温度升至 90-100， 灭酶 1 小时， 同时使油脂充分溶出。 0011 4. 油脂的提取 ： 用 2 层细纱布过滤提取液， 收集滤液， 在 4000r/min 下离心 5-10min 破乳， 然后向离心液中加入木瓜籽原料 3-6 倍质量的正己烷溶剂萃取油脂， 萃取 3-4 次， 合。
16、并萃取液， 旋转蒸发出萃取溶剂， 获得木瓜籽油。 0012 5. 彩色茧丝提取物的制作 ： 将晒干的彩色丝茧的茧衣、 茧壳粉碎为 1-3mm 大小的 碎片， 量取原料质量 30-60 倍的蒸馏水， 将原料碎片浸渍于水溶液中， 使茧衣壳充分膨润 20-50min, 然后在常压下煮沸 , 使茧衣壳中的丝胶蛋白部分洗脱到溶液中， 并一定程度水 解， 当溶液体积浓缩至原来的 1/10-1/5 时， 停止加热， 冷却至常温。在溶液中加入茧衣壳 质量 1.5-2.5% 的中性蛋白酶进行酶解， 酶解温度为 20-35， pH 值为 6.8-7.7， 持续酶解 120-240min， 使溶液中的丝胶蛋白水解为。
17、平均分子量为 2000-5000Da 的活性丝胶多肽。然 后将溶液加热到沸腾维持10-30min， 灭酶活。 将不能溶解的蚕丝残渣捞出， 并用少量蒸馏水 洗涤 2-5 遍， 并将洗涤水合并到水解液中。将丝茧水解液在 60-90温度下加热， 浓缩至原 来体积的 1/4-1/2， 自然冷却至常温后， 获茧丝的浓缩液。然后在溶液中加入同体积的 95% 乙醇， 充分混合 5-30 min， 使活性肽等组分絮凝沉淀， 将沉淀过滤收集， 真空干燥至恒重， 粉 碎至 100-200 目， 即得到富含活性多肽、 黄酮类及胡萝卜素类成分的天然彩色丝茧提取物。 0013 6. 成品油的配制 ： 常温下在木瓜籽油中。
18、加入 0.1-0.5% 质量的丝茧提取物， 充分混 合均匀， 即可获得具有良好抗氧化性能的营养保健食用油成品。 0014 本发明的主要优点为 ： 0015 1. 木瓜籽油的营养价值和保健功能与橄榄油及山茶油等高端食用油相当， 但所用 的主要原料是废弃的木瓜籽， 其成本仅为橄榄油及山茶油原料的 10%， 这在二次资源的利用 和降低生产成本上与同类产品有明显优势。 0016 2. 传统的植物油提取工艺多为压榨法、 浸出法等， 压榨法存在出油率低 , 劳动强 度大 , 生产效低等缺点， 油料资源综合利用率低 ； 浸提法获得的毛油含非油物质较多 , 质 量较差 , 且浸出所用溶剂易燃易爆并有一定毒性 。
19、, 会造成油脂中溶剂的残留， 产品安全性 说 明 书 CN 103262912 B 4 3/4 页 5 差。本发明采用了水相酶法提取工艺， 它将酶制剂应用于油脂分离 , 通过对油料细胞壁的 破碎作用和酶的降解作用提高油脂的提取率 , 与传统提油工艺相比具有处理条件温和、 工 艺简单、 能耗低、 能得到优质的植物油脂和纯度高等优点。 0017 此外， 针对木瓜籽原料纤维组织较为致密的特点， 本发明在使用酶法水解之前， 对 原料进行了冷热酸解处理， 采用盐酸破坏细胞壁中的蛋白质和糖， 使密致紧凑的细胞壁变 得琉松， 然后对原料进行沸水浴和速冻处理， 进一步破坏细胞壁的完整性， 大大减轻了后期 酶解。
20、工艺的压力， 显著减少了酶的使用量， 使油脂提取效率更加提高。 0018 3. 为防止油脂氧化， 传统做法是采用密封、 避光、 低温或充入惰性气体保藏， 但要 求条件高， 对批量的食用油脂很难实现。 另外的方法是添加抗氧化剂， 主要使用人工合成抗 氧化剂如二丁基经基甲苯 (BHT) 、 丁基羟基茵香醚 (BHA) 、 没食子酸丙醋 (PG) 等， 但人工 合成抗氧化剂存在安全隐患。本发明以天然彩色茧丝提取物作为抗氧化剂， 具备了活性多 肽、 黄酮类、 类胡萝卜素等多种抗氧化组分， 抗氧化性能好， 获取途径简单， 成本低廉， 是一 种全新的食用油天然抗氧化剂。同时这种抗氧化剂组分在食用油中的加入。
21、， 本身又丰富了 食用油的营养组成， 使其保健营养功能更为完善。 具体实施方式 0019 将新鲜的木瓜籽洗净晒干， 取 1000g 用粉碎机粉碎至 70 目， 过筛。将木瓜籽粉倒 入浓度为 3mol/L 的盐酸溶液中 （盐酸溶液与木瓜籽粉质量比为 10:1） ， 搅拌震荡至混合均 匀， 在静置2小时后将其放进沸水浴中10分钟， 之后迅速放置-20的低温中冷却30分钟。 加入氢氧化钠溶液调 pH 至 4.5。 0020 将纤维素酶 （3000U/g） 、 果胶酶 （18000U/g） 和酸性蛋白酶 （45000U/g） 以5:10:1的 质量比混合配制成复合酶制剂。 0021 在木瓜籽原料的酸法。
22、预处理液中加入复合酶制剂， 加入量为木瓜籽原料质量的 2.0%， 酶解温度为 45、 酶解时间 8 小时。酶解过程中进行搅拌以利于酶对物料充分酶解。 酶解完成后将温度升至 95， 灭酶 1 小时， 同时使油脂充分溶出。 0022 用 2 层细纱布过滤提取液， 收集滤液， 在 4000r/min 下离心 10min 破乳， 然后向离 心液中加 5000g 的正己烷溶剂萃取油脂， 萃取 3 次， 合并萃取液， 旋转蒸发出萃取溶剂， 获 得木瓜籽油。 0023 将晒干的彩色茧的茧衣、 茧壳粉碎为 1-3mm 大小的碎片， 然后量取原料质量 50 倍 的蒸馏水， 使茧衣壳充分膨润 40min, 在常压。
23、下煮沸 , 使茧壳中的丝胶蛋白部分洗脱到溶 液中， 并一定程度水解， 当溶液体积浓缩至原来的 1/10 时， 停止加热， 冷却至常温。在溶液 中加入茧衣壳质量 2.0% 的中性蛋白酶进行酶解， 酶解温度为 25， pH 值为 7.5， 持续酶解 200min， 使溶液中的丝胶蛋白水解为平均分子量为 2000-5000Da 的活性丝胶多肽。然后将 溶液加热到沸腾维持 30min， 灭酶活。将不能溶解的蚕丝残渣捞出， 并用少量蒸馏水洗涤 3 遍， 将洗涤水合并到水解液中。将丝茧水解液在 80温度下加热， 浓缩至原来体积的 1/4， 自然冷却至常温后， 获丝茧的浓缩提取液。然后在溶液中加入同体积的 95% 乙醇， 充分混合 20 min， 使活性肽等组分絮凝沉淀， 将沉淀过滤收集， 真空干燥至恒重， 粉碎至 200 目， 即得 到富含活性多肽、 黄酮类及胡萝卜素类成分的天然彩色丝茧提取物。 0024 于常温下在木瓜籽油中加入 0.3% 质量的丝茧提取物， 充分混合均匀， 即可获得具 说 明 书 CN 103262912 B 5 4/4 页 6 有良好抗氧化性能的营养保健食用油成品。 说 明 书 CN 103262912 B 6 。