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1、(10)授权公告号 CN 102771350 B (45)授权公告日 2014.11.05 CN 102771350 B (21)申请号 201210251884.9 (22)申请日 2012.07.10 A01G 17/00(2006.01) A01G 1/06(2006.01) A01G 7/06(2006.01) A01G 9/10(2006.01) (73)专利权人 青岛农业大学 地址 266019 山东省青岛市城阳区长城路 700 号 (72)发明人 原永兵 刘润进 刘成连 CN 1836491 A,2006.09.27, 全文 . CN 101516805 A,2009.08.26。
2、, 全文 . CN 102057833 A,2011.05.18, 全文 . 马国辉 . 早熟梨生草及菌根效应研究 . 西 南大学硕士论文 .2006, 第 15 页第 1-8 行 . 原永兵等 .欧洲苹果矮化自根砧苗木繁育 技术 .烟台果树 .2010,( 第 2 期 ), 第 1 页第 1 栏第 5-6 段 . 刘润进， 罗新书 .接种期与培育条件对苹果 菌根着生状况的影响 . 莱阳农学院学报 .1988, 第 5 卷 ( 第 2 期 ), 全文 . 高克祥等 .苹果组培苗形成丛枝菌根的过 程 .东北林业大学学报 .1999, 第 27 卷 ( 第 2 期 ), 全文 . 谢兆森， 吴晓春。
3、 .添加不同氮量对木屑发酵 腐熟的影响 .中国土壤与肥料 .2009,( 第 1 期 ), 第 1 页第 1 栏第 1 6 段， 表 1， 图 1. (54) 发明名称 一种繁育菌根化苗木的方法 (57) 摘要 本发明提供一种繁育菌根化苗木的方法， 所 述的方法包括下列步骤 ： a) 春季用混有高效 AMF 的基质覆盖砧木新梢基部 ； b)在步骤a)所述的基 质上撒播三叶草 (Trifolium) 种子 ； c) 秋季将砧 木苗分株， 贮藏 ； d) 翌年春季嫁接育苗。本发明 的方法借助苗木营养系砧木压条繁育方法， 在新 梢上覆盖清洁的木屑基质， 可保持水分， 且透气性 好， 基本不含土壤杂菌。
4、， 不用消毒， 经过腐熟后即 可使用， 根据具体苗木种类在育苗伊始就有针对 性地接种各种高效 AMF， 不但可提高苗木定植后 的成活率， 批量化生产优质菌根化苗木， 而且可使 苗木终生受益， 操作简便， 适于普遍推广， 同时所 用木屑基质可多年重复使用， 经济节约。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 彭小珍 权利要求书 1 页 说明书 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书4页 (10)授权公告号 CN 102771350 B CN 102771350 B 1/1 页 2 1. 一种繁育菌根化苗木的方法， 其特征在于， 所述的方法。
5、包括下列步骤 ： a) 春季用混有高效 AMF 的基质覆盖砧木新梢基部 ； b) 在步骤 a) 所述的基质上撒播三叶草 (Trifolium) 种子 ； c) 秋季将砧木苗分株， 贮藏 ； d) 翌年春季嫁接育苗， 所述的用混有高效 AMF 的基质覆盖新梢基部的时机是新梢长至 20-30cm 时， 且所述的 基质是随着新梢的生长分 2-3 次覆盖新梢基部至厚度 25-30cm ； 所述的基质和高效 AMF 的 比例是每立方米基质加入高效 AMF80-120 万接种势单位。 2. 根据权利要求 1 所述的方法， 其特征在于， 所述的基质是经腐熟的木屑。 3. 根据权利要求 2 所述的方法， 其特。
6、征在于， 所述的木屑是通过下述方法腐熟的 ： 清洁 木屑， 加入质量分数 2的尿素水至手握成团不滴水、 轻触即散 ； 自然发酵 1 个月左右待温 度升至 50以上 ； 再待温度回落低于 30即可使用。 4.根据权利要求要求6所述的方法， 其特征在于， 所述的分2-3次覆盖之间的时间间隔 是依据新梢生长速率， 间隔 1 周左右。 5. 根据权利要求 1 所述的方法， 其特征在于， 所述的苗木是 M9T337 优质苹果苗木。 6. 根据权利要求 5 所述的方法， 其特征在于， 所述的高效 AMF 是摩西球囊霉 Glomus mosseae。 权 利 要 求 书 CN 102771350 B 2 1。
7、/4 页 3 一种繁育菌根化苗木的方法 【技术领域】 0001 本发明涉及苗木育种技术领域， 具体地说， 是一种通过繁育高度菌根化的优质苗 木的方法。 【背景技术】 0002 泡囊 - 丛枝状菌根真菌， 简称 AMF， 是一种和果树生长密切相关的有益共生真菌。 自然界和果园， 凡是果树能健康生长的土壤中都分布着大量 AMF。众多研究表明， AMF 对果 树的生长发育具有多种效应， 包括促进磷、 氮、 钙、 锌、 铜等各种矿质元素的吸收利用、 提高 苗木成活率、 促进生长、 增加产量、 改善品质、 增强树体的抗旱、 抗病等各种抗逆能力。 然而， 不同 AMF 菌种效果不同， 同时 AMF 难以大。
8、量离体培养， 目前 AMF 菌剂的纯培养技术尚未成 熟， 该菌剂的生产多采取 “盆栽培养法” ， 此法管理费时费力， 且效率低下， 仅适合科研上的 少量使用， 其它生产 AMF 菌剂的方法包括静止液培法、 流动液培法、 喷雾液培法等， 在我国 尚未产业化， 另外由于土壤中存在大量的各种微生物， 会与 AMF 菌剂竞争， 也会减少 AMF 对 根系的侵染， 这些均阻碍 AMF 在生产上的应用。 0003 目前， 大多数苹果、 梨等落叶果树砧木苗是通过种子繁育的。 这种砧木苗和果树嫁 接苗的繁育通常都是在自然土壤里进行的， 如果对其接种， 因要进行土壤消毒， 因而非常困 难。 所以， 目前通常的果。
9、树苗木可能只带有自然的或多或少的菌根， 但远远达不到人工接种 高效 AMF 对果树营养、 水分利用率和生长发育的促进效果， 没有发挥出高效菌根对果树营 养、 水分利用率和生长发育的促进效果。但是如上所述， 因 AMF 菌剂制备困难和土壤杂菌的 干扰， 对果园施用 AMF 菌肥仍然是一个理想。 0004 中国专利文献 CN 200910218716.8， 申请日 2009 日 10 月 30 日， 公开了一种与根菌 共生的芽砧嫁接培育板栗苗木的方法， 该方法是采用芽苗砧嫁和断根接种根菌的方法繁育 根系与根菌共生的板栗容器苗， 采用现有的经过稀释的板栗菌根液或板栗菌根剂， 在断根 之后接种后， 一。
10、方面使得侧根生长发达， 另一方面使得根系与根菌共生然后将容器苗移入 温棚中大规模培育， 育苗成功后的苗木直接移植到大田。 但是该方法操作繁琐， 并不适用于 繁育菌根化苗木的普遍推广， 且苗木菌根化效率低， 因此亟需一种高效、 可靠、 操作简单、 便 于推广的繁育菌根化苗木的方法。本发明是借助果树营养系砧木压条繁育方法， 通过木屑 基质有效接种 AMF， 从而繁育获得高度菌根化的菌根化苗木。 【发明内容】 0005 本发明的目的是克服现有技术中的不足， 提供一种高效、 可靠、 操作简单、 便于推 广的繁育菌根化苗木的方法。 0006 为实现上述目的， 本发明采取如下的技术方案 ： 0007 一种。
11、繁育菌根化苗木的方法， 所述的方法包括下列步骤 ： 0008 a) 春季用混有高效 AMF 的基质覆盖砧木新梢基部 ； 0009 b) 在步骤 a) 所述的基质上撒播三叶草 (Trifolium) 种子 ； 说 明 书 CN 102771350 B 3 2/4 页 4 0010 c) 秋季将砧木苗分株， 贮藏 ； 0011 d) 翌年春季嫁接育苗。 0012 所述的基质是经腐熟的木屑。 0013 所述的木屑是通过下述方法腐熟的 ： 清洁木屑， 加入质量分数 2的尿素水至手 握成团不滴水、 轻触即散 ； 自然发酵 1 个月左右待温度升至 50以上 ； 再待温度回落低于 30即可使用。 0014 。
12、所述的用混有高效 AMF 的基质覆盖新梢基部的时机是新梢长至 20-30cm 时。 0015 所述的用混有高效 AMF 的基质覆盖新梢基部的厚度是 25-30cm。 0016 所述的基质是随着新梢的生长分 2-3 次覆盖新梢基部至厚度 25-30cm。 0017 所述的分 2-3 次覆盖之间的时间间隔是依据新梢生长速率， 间隔 1 周左右。 0018 所述的基质和高效 AMF 的比例是每立方米基质加入高效 AMF 80-120 万接种势单 位。 0019 所述的苗木是 M9T337 优质苹果苗木。 0020 所述的高效 AMF 是摩西球囊霉 Glomus mosseae。 0021 本发明优点。
13、在于 ： 0022 1、 借助苗木营养系砧木压条繁育方法， 在新梢上覆盖清洁的木屑基质， 可保持水 分， 且透气性好， 基本不含土壤杂菌， 不用消毒， 经过腐熟后即可使用， 根据具体苗木种类有 针对性地接种各种高效 AMF， 在育苗伊始就对苗木根系接种上高效的 AMF， 不但可提高苗木 定植后的成活率， 批量化生产优质果树菌根化苗木， 而且可使果树终生受益， 操作简便， 适 于普遍推广。 0023 2、 所用木屑基质可多年重复使用， 随着使用年限的延长， 其 AMF 的数量也越来越 多， 对新生根系的侵染就越多， 菌根就越发达， 一是克服了生产 AMF 菌剂的困难， 二是克服 了果园自然土壤中。
14、各种杂菌对施用高效 AMF 的干扰， 经济节约。 【具体实施方式】 0024 下面结合具体实施例对本发明作进一步描述。 0025 实施例 1 0026 一、 材料 0027 M9T337 优质苹果矮化砧木母本 ； 清洁木屑， 加入质量分数 2的尿素水至手握成 团不滴水、 轻触即散为宜， 以调整 C/N 比， 自然发酵 1 个月左右后， 温度升至 50以上， 随着 时间的延长温度逐渐回落， 当温度低于 30后即可使用 ； 摩西球囊霉 (Glomus mossea) 菌 种， 购于上海富众 ( 亚平宁 ) 生物科技发展有限公司 ； 三叶草种子。 0028 二、 方法与结果 0029 1、 M9T3。
15、37 优质苹果矮化砧木母本， 春季新梢长至 20 厘米时， 按照每立方米木屑加 入 AMF 120 万接种势单位的比例用腐熟好的木屑混以高效 AMF 摩西球囊霉， 覆盖新梢基部， 同时在木屑上播种三叶草 (Trifolium) 种子以促进 AMF 繁殖 ； 0030 2、 随着新梢生长， 依据新梢生长速率， 分2次覆盖木屑至25厘米厚， 每次之间间隔 1 周左右 ； 0031 3、 从覆盖基质开始 3 个月后， 检测木屑中的 AMF 孢子密度， 检测结果为 482 个 说 明 书 CN 102771350 B 4 3/4 页 5 /20mL 基质， 同时新梢基部发生新根， 并检测菌根侵染率， 。
16、平均为 30.7 ； 0032 4、 秋季将带有菌根的砧木苗分株， 贮藏， 待翌年春季嫁接育苗 ； 同时将含有大量 AMF 的木屑收集起来贮藏， 待翌年再用 ； 0033 5、 翌年春季室内枝接品种定植， 或定植砧木苗， 生长季芽接品种， 获得菌根化优质 苗木 ； 而收集贮藏的含有大量 AMF 的木屑用于再压条繁育菌根化的砧木苗。 0034 实施例 2 0035 M26 优质苹果矮化砧木母本 ； 清洁木屑， 加入质量分数 2的尿素水至手握成团不 滴水、 轻触即散为宜， 以调整 C/N 比， 自然发酵 1 个月左右后， 温度升至 50以上， 随着时间 的延长温度逐渐回落， 当温度低于 30后即可。
17、使用 ； 摩西球囊霉 (Glomus mossea) 菌种， 购 于上海富众 ( 亚平宁 ) 生物科技发展有限公司 ； 三叶草种子。 0036 二、 方法与结果 0037 1、 M26 优质苹果矮化砧木母本， 春季新梢长至 25 厘米时， 按照每立方米木屑加入 AMF 80万接种势单位的比例用腐熟好的木屑混以高效AMF摩西球囊霉， 覆盖新梢基部， 同时 在木屑上播种三叶草 (Trifolium) 种子以促进 AMF 繁殖 ； 0038 2、 随着新梢生长， 依据新梢生长速率， 分3次覆盖木屑至28厘米厚， 每次之间间隔 1 周左右 ； 0039 3、 从覆盖基质开始 4 个月后， 检测木屑中的。
18、 AMF 孢子密度， 检测结果为 513 个 /20mL 基质， 同时新梢基部发生新根， 并检测菌根侵染率， 平均为 35.5 ； 0040 4、 秋季将带有菌根的砧木苗分株， 贮藏， 待翌年春季嫁接育苗 ； 同时将含有大量 AMF 的木屑收集起来贮藏， 待翌年再用 ； 0041 5、 翌年春季室内枝接品种定植， 或定植砧木苗， 生长季芽接品种， 获得菌根化优质 苗木 ； 而收集贮藏的含有大量 AMF 的木屑用于再压条繁育菌根化的砧木苗。 0042 实施例 3 0043 “B9” 优质苹果矮化砧木母本 ； 清洁木屑， 加入质量分数 2的尿素水至手握成团 不滴水、 轻触即散为宜， 以调整 C/N。
19、 比， 自然发酵 1 个月左右后， 温度升至 50以上， 随着时 间的延长温度逐渐回落， 当温度低于 30后即可使用 ； 摩西球囊霉 (Glomus mossea) 菌种， 购于上海富众 ( 亚平宁 ) 生物科技发展有限公司 ； 三叶草种子。 0044 二、 方法与结果 0045 1、“B9” 优质苹果矮化砧木母本， 春季新梢长至 30 厘米时， 按照每立方米木屑加入 AMF 100 万接种势单位的比例用腐熟好的木屑混以高效 AMF 摩西球囊霉， 覆盖新梢基部， 同 时在木屑上播种三叶草 (Trifolium) 种子以促进 AMF 繁殖 ； 0046 2、 随着新梢生长， 依据新梢生长速率， 。
20、分3次覆盖木屑至30厘米厚， 每次之间间隔 1 周左右 ； 0047 3、 从覆盖基质开始 3.5 个月后， 检测木屑中的 AMF 孢子密度， 检测结果为 496 个 /20mL 基质， 同时新梢基部发生新根， 并检测菌根侵染率， 平均为 36.4 ； 0048 4、 秋季将带有菌根的砧木苗分株， 贮藏， 待翌年春季嫁接育苗 ； 同时将含有大量 AMF 的木屑收集起来贮藏， 待翌年再用 ； 0049 5、 翌年春季室内枝接品种定植， 或定植砧木苗， 生长季芽接品种， 获得菌根化优质 苗木 ； 而收集贮藏的含有大量 AMF 的木屑用于再压条繁育菌根化的砧木苗。 说 明 书 CN 10277135。
21、0 B 5 4/4 页 6 0050 需要说明的是， 实施例 1-3 所述的砧木苗分株、 贮藏、 室内枝接品种定植、 定植砧 木苗、 芽接品种均为本领域果树压条繁育苗木的常规操作方法， 具体参考 果树栽培学 ( 张 玉星， 中国农业科学技术出版社 ) ； 用清洁的木屑基质覆盖新梢基部， 可促进新梢基部发出 根系 ； 在木屑上撒播三叶草种子， 促进 AMF 大量繁殖 ； 待压条基部生出新根， 木屑中大量的 AMF 就会侵染新根形成菌根， 从而就形成了带有高效 AMF 的砧木苗。 0051 以上所述仅是本发明的优选实施方式， 应当指出， 对于本技术领域的普通技术人 员， 在不脱离本发明原理的前提下， 还可以做出若干改进和补充， 这些改进和补充也应视为 本发明的保护范围。 说 明 书 CN 102771350 B 6 。