技术领域
本发明涉及通过6-(吡咯基)嘌呤类化合物的N-9区域选择性和N-9 区域专一性糖基化制备用作药物的嘌呤衍生物的方法。
背景技术
可以选择性掺杂到病毒DNA或RNA中以抑制病毒DNA或RNA的复 制的核苷衍生物是非常高效的治疗病毒感染性疾病的药物，所述病毒感 染性疾病例如是疱疹病毒、带状疱疹、AIDS、肝炎、巨细胞病毒等类似 的。同样地，核苷衍生物这种向癌细胞的DNA或RNA中的掺杂可以造成 肿瘤细胞死亡并有效治疗肿瘤性疾病。尤其有用的是嘌呤衍生物，它们 在9位具有取代基。这些嘌呤衍生物包括大量的具有抗病毒活性的著名 已知化合物，例如无环鸟苷、更昔洛韦、法昔洛韦等。还具有抗癌活性 的是嘌呤衍生物例如克拉屈滨(2-CdA)、氟达拉滨、克罗法拉滨 (clofarabine)等。
达到嘌呤衍生物在9位上的区域专一性和立体选择性糖基化很困 难。其中2-去氧糖部分与糖苷配基偶联的糖基化方法始终能够得到端基 异构混合物和位置异构体，这可能造成所需核苷的收率降低并且常常需 要繁琐的纯化方案。人们非常需要一种能够区域专一的N-9糖基化的简 便方法。
已经有许多尝试来提高N-9区域选择性糖基化。Gupta等(美国专利 申请2004/0039190)描述了6-(酰胺基)嘌呤类化合物的糖基化，但注 解称所公开的方法也制备N-7糖基化产物。其他人认为在嘌呤环的C-6引 入较大的取代基可以从简单的烷基化反应得到较高比例的N-9：N-7异构 体产物(Tetrahedron 1990，46，6903)。Alarcon等(Tetrahedron Lett.2000， 41，7211)制备了2-氨基-6-(1，2，4-三唑-4-基)嘌呤，并且报道称其钠 盐在DMF中用碘甲烷或1-溴丙烷的烷基化反应得到简单的N-9烷基异构 体。Alarcon等认为这种选择性归因于在嘌呤环的C-6位引入了较大的易 水解基团。已经进行了6-(酰胺基)嘌呤类化合物与糖衍生物在偶联反 应中的应用。Gupta等使用6-(酰胺基)嘌呤类化合物的钾盐来制备嘌呤 类化合物的9-糖基衍生物，其被少量的7-糖基异构体污染。糖基与嘌呤 钠盐在极性非质子溶剂例如DMF中偶联已知由于卤代糖中间体的大量 异构化导致生成了核苷类化合物的端基异构混合物。这样的条件产生立 体-和区域异构混合物以及大量的糖分解产物。Gupta等使用无水THF作 为溶剂和强碱六甲基二叠氮硅化钾(KHMDS)在甲苯中生成6-(酰胺基) 嘌呤类化合物的钾盐，随后通过糖基氯化物衍生物的加成反应。没有公 开试图提高6-(酰胺基)嘌呤和糖衍生物各自的溶解度。
发明概述
本发明提供区域专一性和高度立体选择性合成的9-β端基异构嘌呤 核苷的制备方法，包括2′-脱氧，3′-脱氧，2′-脱氧-2′-卤代-阿拉伯和2′，3′- 二脱氧-2′-卤代-苏型嘌呤核苷类似物，该方法收率高且不形成7-位区域 异构体。
在一实施方式中，本发明提供一种方法包括(a)在N-9位糖基化6- (吡咯基)嘌呤和(b)用亲核性试剂置换得自步骤(a)的糖基化物中 的6-(吡咯基)基团生成N-9嘌呤核苷。
在另一实施方式中，本发明提供一种方法包括(a)将(吡咯基) 引入到嘌呤的6位，(b)在N-9位糖基化得自步骤(a)的嘌呤和(c) 用亲核性试剂置换得自步骤(a)的6-(吡咯基)基团生成N-9嘌呤核苷。
本发明还提供了一种方法包括(a)使式I的6-(吡咯基)-取代嘌呤
与糖基化试剂在碱的存在下接触，其中各个W、W和W″独立地选自-N-， -CH-和CR2，和其中R1，R2，和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧 基，C1-10烷硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和杂芳基，(b)烷基化得自步骤(a)的6-取代嘌呤核 苷上所附的6-(吡咯基)环，(c)使步骤(b)的烷基化6-取代嘌呤核 苷与氨接触得到式III的核苷
其中R6是糖基。
在某些实施方式中，本发明的一种方法包括式XV的6-(咪唑-1-基) 嘌呤
其中R4选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和杂芳基。
在某些实施方式中，本发明的一种方法包括式XXII的6-(1，2，4-三唑 -4-基)-取代嘌呤。
在某些实施方式中，一种制备2-氯-2′-脱氧腺苷(2-CdA，克拉屈滨)的 方法包括(a)使具有式XXVIII的化合物
其中各个W，W′和W″独立地选自-N-，-CH-和CR2，其中R2和R5独立地选 自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨 基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基和杂芳基，与碱在第一极性溶 剂中接触，随后与活化且羟基-保护的2-脱氧-α-D-赤型-呋喃戊糖基化合 物在第二低极性溶剂中接触生成糖基化产物，(b)使步骤(a)的糖基 化产物与氨在第三溶剂中接触得到克拉屈滨。
在某些实施方式中，一种制备2-氯-2′-脱氧腺苷(2-CdA，克拉屈滨) 的方法包括(a)使具有式XXVIII的化合物
其中各个W，W′和W″独立地选自-N-，-CH-和CR2，和其中R2和R5独立地 选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基，卤素，氨基，C1-10烷基 氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和杂芳基，与碱在第一极 性溶剂中接触，随后与活化的和羟基-保护的2-脱氧-α-D-赤型-呋喃戊糖 基化合物在第二低极性溶剂中接触生成糖基化物产物，(b)烷基化得 自步骤(a)的6-取代嘌呤核苷上所附的6-(吡咯基)环，(c)使步骤 (b)制备的烷基化糖基化物产物与氨在第三溶剂中接触得到克拉屈滨。
在某些实施方式中，一种制备克拉屈滨的方法包括具有式XXIX的 化合物。
在某些实施方式中，一种制备克拉屈滨的方法包括具有式XXX的化 合物。
在某些实施方式中，一种制备6-(吡咯基)-取代嘌呤的方法包括(a) 在嘌呤核苷的6位引入吡咯基环和(b)裂解步骤(a)的核苷的糖苷键 生成6-(吡咯基)嘌呤。
在某些实施方式中，一种制备式I的嘌呤的方法
其中各个W，W′和W″独立地选自-N-，-CH-和CR2，和其中R1，R2，和 R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基，卤素，氨基， C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和杂芳基，包括 使式XXXI的化合物：
其中R10，R11和R12是羟基-保护基，与脱糖基试剂接触。
在本发明的某些实施方式中，一种制备式XV的嘌呤的方法
其中R1，R2，R4，和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷 硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳 基，和杂芳基，包括式XXXII的化合物
其中R10，R11和R12是羟基保护基，与脱糖基试剂接触。
在本发明的某些实施方式中，一种制备式XXII的嘌呤的方法
其中R1，R2，和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基， 卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和 杂芳基，包括使式XXXIII的化合物
其中R10，R11和R12是羟基保护基，与脱糖基试剂接触。
在本发明的某些实施方式中，描述了式I的化合物
其中各个W，W′和W″独立地选自-N-，-CH-和CR2，和其中W，W′和W″ 中的至少一个是-N-，R1，R2，和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧 基，C1-10烷硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和杂芳基和这些化合物的药学可接受盐，条件是(1) 当R1是氨基和W和W′均是N时，则R5不是氢，(2)当R1是氢和W′和W″ 是CH时，则R5不是氢，(3)当R1是氢和R5是甲基时，则W′和W″不是 CH，(4)当R1和R5是氢和W′是CCH3时，则W″不是CH，(5)当R1和 R5是氢和W′是CH时，则W″不是N，(6)当R1和R5是氢和W″是N时，则 W和W′不是CH，(7)当R1和R5是氢和W″是N时，则W不是CCH3，和(8) 当R1和R5是氢和W″是N，则W不是CCH3。
在本发明的某些实施方式中，描述了式XV的化合物
其中R1，R2，R4，和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷 硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳 基，和杂芳基和这些化合物的药学可接受盐，条件是(1)当R1，R2和 R4是氢时，则Rs不是氢，(2)当R1，R2和R5是氢时，则R4不是甲基， 和(3)当R1，R4和R5是氢时，则R2不是甲基。
在本发明的某些实施方式中，公开了式XXII的化合物
其中R1，R2，和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基， 卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和 杂芳基和这些化合物的药学可接受盐，条件是当R1是氨基时，则R2和R5中的至少一个不是氢。
在本发明的某些实施方式中，式XXXVI的化合物
其中各个W，W′和W″独立地选自-N-，-CH-和CR2，和其中W，W′和W″ 的至少一个是-N-，和其中R2和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基， C1-10烷硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨 基，芳基，和杂芳基和这些化合物的药学可接受盐。
发明详述
在此使用的术语“烷基”是指直连或支链的、在链的碳原子上带有 或不带有其他取代基的链烷烃、链烯烃和链炔烃家族的脂族碳取代基， 并且还包括所述类别的环-“烷基”取代基。
在此使用的术语“糖苷配基”是指糖苷分子的非糖组成。糖苷的水 解可以产生糖苷配基和糖化合物。
在此使用的术语“糖基”是指通过脱除被保护或未保护单糖或低级 低聚糖的半缩醛官能的羟基得到的结构。
在此使用的术语“糖苷”是指糖基与非酰基的连接，特别是N-糖苷。 糖基与非酰基之间的价键称作糖苷或糖基键。
在此使用的术语“核苷”是指由杂环含氮核组成的，特别是嘌呤的 含有与糖，特别是戊糖的N-糖苷键的分子。核苷包括L-和D-核苷两种对 映异构体。为了简化，在所有附图中只给出了D对映异构体的结构；对 映异构的L结构是所示D异构体的镜像。
在此使用的术语“呋喃核糖基核苷”是指L-或D-β-呋喃核糖构型中 含有2′-羟基的核苷或核苷类似物。
在此使用的术语“阿拉伯呋喃糖基核苷”是指L-或D-β-阿拉伯呋喃 糖构型中含有2′-羟基的核苷或核苷类似物。
在此使用的术语“亲核性试剂”是指电子对供体(含有未共享电子 对)并与碳原子形成新键的富电子试剂。亲核性试剂可以是阴离子或中 性的。实例包括，但不限于，负碳离子，负氧离子，负卤离子，负硫离 子，负氮离子，氮键，醇类，氨，水，和硫醇。
在此使用的术语“离去基团”是指由碳释放的并且共享与碳原子键 合的价键电子对的弱碱性化学实体。离去基团可以是可以被亲核性取代 基置换的化学官能团。实例包括，但不限于，卤化物包括氯化物、溴化 物和碘化物，烷基磺酸酯类，取代烷基磺酸酯类，芳基磺酸酯类，取代 芳基磺酸酯类，杂环磺酸酯类，和三氯乙酰胺盐基团。优选的离去基团 包括，但不限于，氯化物、溴化物、碘化物、对硝基苯磺酸酯(硝苯磺 酸酯)、对-(2，4-二硝基苯氨基)苯磺酸酯，苯磺酸酯，甲基磺酸酯(甲 磺酸酯)，对甲基苯磺酸酯(甲苯磺酸酯)，对溴苯磺酸酯(溴苯磺酸 酯)，三氟甲基磺酸酯(三氟甲磺酸酯)，2，2，2-三氟乙磺酸酯，咪唑磺 酸酯，三氯乙酰胺盐，三氟乙酸盐和其他酰化物，和2，4，6-三氯酚盐。
在此使用的同义术语“羟基保护基”和“醇-保护基”是指通常用于 在化合物的其他官能团反应时阻断或保护醇官能团的与醇基的氧连接 的取代基。此类醇保护基的实例包括2-四氢吡喃基，2-(二乙酰氧基乙 氧基)甲基，三苯甲基，三氯乙酰基，碳酸类阻断基团例如苄氧基羰基， 三烷基甲硅烷基，此类的实例是三甲基甲硅烷基、叔丁基甲硅烷基、叔 丁基二苯基甲硅烷基、苯基二甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基和1，1，2- 三甲基丙基二甲基甲硅烷基，酯基，此类的实例是甲酰基，(C1-C10) 烷酰基任选地被(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、卤代、芳基、芳氧 基或卤代芳氧基一-、二-或三-取代，芳酰基包括在环碳上任选地被卤素、 (C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基一-、二-或三-取代，其中芳基是苯基， 2-呋喃基，碳酸酯，磺酸酯，和醚例如苄基，对甲氧基苄基，甲氧基甲 基，2-乙氧基乙基等。所用醇保护基的选择没有严格规定，只要衍生的 醇基队员在该式的化合物的其他位置上的后续反应条件下保持稳定且 可以在所需点脱除且不会破坏分子的其余部分。上述术语所指的基团的 其他实例公开在J.W.Barton，“Protective Groups在Organic Chemistry”， J.G.W.McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，N.Y.，1973，和T.W. Greene和P.G.M Wuts，“Protective Groups在Organic Synthesis”，Wiley， New York，N.Y.，1999，它们在此引入作为参考。有关术语“保护的羟 基”或“保护的醇”定义为被上述羟基保护基取代的羟基。
在此使用的术语“暂时性保护”是指用保护基掩蔽核苷的一个或多 个糖羟基的实践，例如通过形成三甲基甲硅烷基醚，在引入核酸碱基保 护基例如酰基之前，随后水解保护基恢复(未掩蔽)的一个或多个游离 羟基。
在此使用的术语“吡咯”和“吡咯基”是指具备(1)“吡咯型” 三价氮原子，(2)或者1、2或3“吡啶型”芳香三价氮，(3)五员环， 和(4)芳香性的含氮芳香化合物。许多吡咯基团满足这项条件，包括 取代和未取代的吡唑类，取代和未取代的咪唑类，取代和未取代的三唑 类(包括1，2，3-和1，2，4-三唑类)和取代和未取代的四唑类。
在此使用的术语“酰基”是指含有通式R-C(O)-的化学实体，其 中R表示任何脂族、脂环族或芳香族集体并且C(O)代表羰基。
在此使用的术语“酰化”是指任何通过酸或酸衍生物例如酰卤或酸 酐使羟基转化为酯，或者使胺转化为酰胺的方法。
在此使用的术语“卤素”或“卤代”是指氟、氯、溴和碘，和术语 “卤化物”是指氟化物、氯化物、溴化物和碘化物。
在此使用的术语“氮保护基”是指本领域已知的易于引入到氮原子 上并从氮原子上脱除掉的基团。氮保护基的实例包括乙酰基(Ac)，三 氟乙酰基，Boc，Cbz，苯甲酰基(Bz)，三苯甲基和苄基(Bn)。还 参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“Protective Groups在Organic Synthesis”，Wiley，New York，N.Y.，1999和有关文献。
在此使用的术语“扭转角”是指在原子A-B-C-D的链中含有原子A、 B、C的平面与含有B、C、D的平面之间的双面角。对应扭转角0°和±90° 之间的立体化学排列称作顺式(syn)(s)，那些对应于扭转角±90°和 180°之间的立体化学排列称作反式(anti)(a)。同样地，对应于扭转 角30°和150°之间或-30°和-150°之间的排列称作错式(clinal)(c)和那 些在0°和30°或150°和180°之间的排列称作叠式(periplanar)(p)。两 类术语可以组合使用由此定义扭转角的四个范围；0°至30°顺叠(sp)； 30°至90°和-30°至-90°顺错(sc)；90°至150°和-90°至-150°反错(ac)； ±150°至180°反叠(ap)。
本发明所述的化合物以及本发明方法所用或制备的化合物可以含 有一个或多个不对称碳原子(手性中心)，致使所述化合物可能存在不 同的立体异构形式。这些化合物可以是例如外消旋混合物，旋光非外消 旋混合物或非对映异构体。在这些情形中，单一对映异构体，即光学纯 形式，可以提高不对称合成或者外消旋混合物的拆分获得。外消旋混合 物的拆分可以通过例如常规方法完成，例如在拆分剂的存在下结晶，色 谱法，使用例如手性HPLC柱，或外消旋混合物用拆分试剂衍生化生成 非对映异构体，经色谱法分离非对映异构体，和除去拆分剂得到对映异 构体纯形式的起始化合物。任何上述方法可以进行重复以提高化合物的 对映异构纯度。
一方面，提供一种制备N-9嘌呤核苷的新方法。在一实施方式，一 种制备N-9嘌呤核苷的方法，包括步骤：
(a)在N-9位糖基化6-(吡咯基)嘌呤；和，
(b)用亲核性试剂置换得自步骤(a)中的糖基化物的吡咯基生成 N-9嘌呤核苷。
在某些实施方式中，所述方法达到高区域选择性糖基化，并且在某 些实施方式中，所述方法达到区域专一性糖基化。
在某些实施方式中，所述方法得到基本上纯的区域异构体，和在某 些实施方式中，所述方法得到基本上纯的区域-和立体异构体。
在某些实施方式中，6-吡咯基取代基选自未取代的咪唑和未取代的 三唑。在某些实施方式中，6-吡咯基取代基选自取代的咪唑类和取代的 三唑类。在某些实施方式中，6-吡咯基取代基选自未取代的咪唑和取代 的咪唑。在某些实施方式中，6-吡咯基取代基选自未取代的三唑和取代 的三唑类。在某些实施方式中，6-吡咯基取代基选自1，2，3-和1，2，4-三唑 类和取代的1，2，3-和1，2，4-三唑类。
在某些实施方式中，步骤(b)中的亲核性试剂是通过后续的转化 反应转化为氨基取代基的含氮亲核性试剂(例如，叠氮化物随后进行还 原，苄基胺随后进行氢解，等等)。
在一实施方式中，步骤(b)中的亲核性试剂是氨。
在其他实施方式中，步骤(b)中的亲核性试剂是氧-或硫-亲核性试 剂。
另一方面，一种制备N-9嘌呤核苷的方法，包括步骤：
(a)将吡咯基引入到嘌呤的6位；
(b)在步骤(a)的6-(吡咯基)嘌呤产物的N-9位上糖基化；和，
(c)用亲核性试剂置换6-吡咯基生成N-9嘌呤核苷。
在某些实施方式中，所述的方法达到高区域选择性糖基化，并且在 某些实施方式中，所述方法达到区域专一性糖基化。
在某些实施方式中，所述方法得到基本上纯的区域异构体，并且在 某些实施方式中，所述方法得到基本上纯的区域-和立体异构体。
在某些实施方式中，6-吡咯基取代基选自未取代的咪唑和未取代的 三唑。在某些实施方式中，6-吡咯基取代基选自取代的咪唑类和取代的 三唑类。在某些实施方式中，6-吡咯基取代基选自未取代的咪唑和取代 的咪唑类。在某些实施方式中，6-吡咯基取代基选自未取代的三唑和取 代的三唑类。在某些实施方式中，6-吡咯基取代基选自1，2，3-和1，2，4-三 唑类和取代的1，2，3-和1，2，4-三唑类。
在某些实施方式中，步骤(b)中的亲核性试剂是通过后续的转化 反应转化为氨基取代基的含氮亲核性试剂(例如，叠氮化物随后进行还 原，苄基胺随后进行氢解，等等)。在一实施方式中，步骤(c)中的 亲核性试剂是氨。
在其他实施方式中，步骤(b)中的亲核性试剂是氧-或硫-亲核性试 剂。
在某些实施方式中通过使嘌呤在亲核性置换条件下与吡咯接触可 以将吡咯基取代基引入到嘌呤的6位。另外，通过6-氨基嘌呤与吖嗪或取 代的肼的环化可以在嘌呤的6位上形成吡咯。
适合将吡咯基引入到6位带有离去基团的6-取代嘌呤中的试剂包括 取代和未取代的咪唑类和取代和未取代的三唑类。亲核性置换反应可以 在约15℃至约100℃下蒸发极性非反应性溶剂，例如二甲基甲酰胺或乙 腈。
适合将吡咯基引入到6-氨基嘌呤的环化反应的试剂，例如，1，2-二 [(二甲基氨基)亚甲基]肼，1，2-二甲酰基肼，和其他1，2-二酰基肼类。 环化反应可以在极性非反应性溶剂例如二甲基甲酰胺中在约35℃至约 200℃中蒸发。
适合将吡咯基增加到6位上带有羰基的嘌呤(例如鸟嘌呤和次黄嘌 呤碱基)的6位的试剂包括取代和未取代的咪唑类，取代和未取代的三 唑类。此类反应可以用三苯基膦(Ph3P)，碘(I2)，和非质子碱例如 二异丙基乙基胺(EtN(Z-Pr)2)在非质子溶剂例如甲苯中、于约35℃ 至约120℃的高温下进行。
在某些实施方式中，通过使糖基化试剂在非反应性溶剂与阴离子性 6-(吡咯基)嘌呤盐接触来进行所述糖基化步骤，其中6-位的吡咯基环 基本上与嘌呤环共面或叠面(periplanar)。
适合糖基化6-(吡咯基)嘌呤的糖基化试剂包括，但不限于，呋喃 戊糖基类，2-脱氧呋喃戊糖基类，3-脱氧呋喃戊糖基类，2，3-二脱氧呋喃 戊糖基类，取代的呋喃戊糖基，取代的2-脱氧呋喃戊糖基类，取代的3- 脱氧呋喃戊糖基和取代的2，3-二脱氧呋喃戊糖基类，和上述类型的呋喃 糖环氧原子被硫原子替代的所有碳水化合物衍生物的类似物，所有带有 保护醇(OH)基团的。优选地，活性糖选自活性和O-保护糖包括，但 不限于，2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-或L-呋喃核糖基氯化物，2，3，5-三-O-苯 甲酰基-β-D-或L-呋喃核糖基溴化物，2-脱氧-3，5-二-O-甲苯酰基-α-D-或 L-赤型-呋喃戊糖基氯化物，3-脱氧-2，5-二-O-苯甲酰基-β-D-或L-赤型-呋 喃戊糖基氯化物，2-脱氧-2-氟-3，5-二-O-苯甲酰基-α-D-或L-阿拉伯呋喃 糖基溴化物，2，3-二脱氧-2-氟-5-O-p-甲苯酰基-α-D-或L-甘油-呋喃戊糖基 氯化物(称作2，3-二脱氧-2-氟-5-O-甲苯酰基-α-D-或L-阿拉伯呋喃糖基氯 化物)，2-脱氧-2，2-二氟-3，5-二-O-苯甲酰基-β-D-或L-赤式-O-呋喃戊糖 基三氟甲基磺酸酯和2，3，5-三-O-苄基-α-D-或L-阿拉伯呋喃糖基溴化物， 和其呋喃糖环氧原子被硫原子替代的类似物。在这些实施方式中，氯化 物和溴化物是离去基团。其他离去基团科研替代氯化物或溴化物离去基 团包括，但不限于，氟化物，碘化物，三氟甲基磺酸酯，甲磺酸酯，甲 苯磺酸酯，三氯乙酰胺，乙酸酯，苯甲酸酯，和其他酰化物，等等。其 他本领域技术人员熟知的羟基保护基可以替代所述的乙酰基、苯甲酰 基、对甲苯酰基等基团。
适当的糖基化试剂还可以用式XXXVIII表示
其中Lg是离去基团；R7，R8和R9各自独立地选自氢，保护羟基，卤素包 括氟、氯、溴和碘，烷基(C1-C6)，烷氧基(C1-C6)，保护的氮；和X 是氧，硫或具有键合的氢原子的氮原子，烷基(C1-C6)或酰基。
可以用糖基化试剂以及暂时性保护羟基进行糖基化。
糖基化可以在混合溶剂与少量高极性(较高的介电常数)非反应性 溶剂例如乙腈或二甲基甲酰胺的溶液中进行以便提高阴离子性6-(吡咯 基)嘌呤盐的溶解度，和低极性(较低的介电常数)非反应性溶剂例如 氯仿，二氯甲烷，四氢呋喃，或甲苯。被保护和活化的糖衍生物可以溶 于低极性溶剂并且此类溶剂的低极性(较低的介电常数)强烈延迟糖基 -离去基团键的电离，由此减小(或消除)活化糖衍生物的正位异构化并 最大地形成所需的核苷非对映异构体。
或者，可以在单一溶剂中进行糖基化。糖基化也可以在三种或多种 溶剂中进行以微调联合形式的极性(平均介电常数)和选择溶解特性。 单一和多种溶剂联合形式的溶剂可以是无水的。
糖基化可以与6-(吡咯基)嘌呤的金属盐一起蒸发，首先通过用氢 化物碱例如氢化钠或氢化钾、强碱例如六甲基二硅叠氮化钠或六甲基二 硅叠氮化钾，或碱金属碳酸盐例如碳酸钠和碳酸钾处理6-(吡咯基)嘌 呤就地生成。在极性溶剂体系中进行的糖基化可以部分或完全溶解得到 的6-(吡咯基)嘌呤的金属盐。
任选地，具有有机阳离子和阴离子组成的强碱可以用来提高所得嘌 呤盐在极性溶剂中的溶解性。当使用具有有机阳离子和阴离子组成的强 碱时，糖基化使用阴离子性6-(吡咯基)嘌呤盐的糖基化可以在单一溶 剂中进行。
任选地，可以包括催化剂例如碘化钠。所述糖基化可以在约0℃至 约50℃下进行。该糖基化在0℃可以非常缓慢地进行。糖基化可以在约 室温(～25℃)下的温度下进行。
在某些实施方式中，所带的6-(吡咯基)环和嘌呤环具有在约0°和 约3°之间的双面角。在其他实施方式中，所带的6-(吡咯基)环和嘌呤 环具有在约0°和约5°之间的双面角。在其他实施方式中，所带的6-(吡 咯基)环和嘌呤环具有在约0°和约10°之间的双面角。在其他实施方式中， 所带的6-(吡咯基)环和嘌呤环具有在约0°和约15°之间的双面角。在其 他实施方式中，所带的6-(吡咯基)环和嘌呤环具有在约0°和约20°之间 的双面角。在其他实施方式中，所带的6-(吡咯基)环和嘌呤环具有在 约0°和约25°之间的双面角。在其他实施方式中，所带的6-(吡咯基)环 和嘌呤环具有在约0°和约30°之间的双面角。在其他实施方式中，所带的 6-(吡咯基)环和嘌呤环具有在约0°和约35°之间的双面角。在其他实施 方式中，所带的6-(吡咯基)环和嘌呤环具有在约0°和约45°之间的双面 角。在其他实施方式中，所带的6-(吡咯基)环和嘌呤环具有在约0°和 约90°之间的双面角。
当区域专一性是不必要的(或不希望的)时，如果双面角在约0°和 约90°或约0°和约45°之间可能达到高度区域选择性糖基化。
在某些实施方式中，糖基化之后，可能通过用反应性烷基化试剂活 化所带6-(吡咯基)环来完成步骤(c)，随后将烷基化的6-(吡咯基) 基团进行亲核性置换。在某些实施方式中，6-(吡咯基)和任何O-保护 基的平行置换可以通过在6位的直接氨解进行。
可使用的反应性烷基化试剂包括烯丙类烷基卤化物和苄基卤化物， α-烷氧基烷基卤化物，等等。烷基化6-(吡咯基)-取代的核苷通过在相 对于室温更高的温度下，例如约100℃，加热核苷在含有氨的溶剂中的 溶液来进行氨解，直至该反应达到完全，通常反应时间为约5至约12小 时。在一实施方式中，含有氨的溶剂是甲醇，常优选氨的甲醇溶液。
在某些实施方式中，糖基化之后，所带6-(吡咯基)环被氢氧化物 亲核性试剂置换得到相应的6-氧代嘌呤化合物。在某些实施方式中，通 过碱催化的6位水解可以进行6-(吡咯基)和任何O-保护基的置换。
在某些实施方式中，糖基化之后，所带6-(吡咯基)环被氮-、氧- 或硫-基亲核性试剂的置换得到相应的6-(取代-氨基)-，6-(二取代-氨 基)-，6-(取代-氧基)-或6-(取代-硫烷基)嘌呤化合物，其中氮、氧 或硫上的取代基选自包括，但不限于，氢，烷基(C1-C6)，芳基，杂芳 基和芳基烷基的基团。在某些实施方式中，出现6-(吡咯基)基团和任 何O-保护基的并行置换。
N-9区域专一性糖基化方法提供了获得9-β-D-或L-嘌呤核苷的有效 方法，包括腺苷类、鸟苷类、肌苷类和其取代衍生物，和脱氧核苷包括 脱氧腺苷类、脱氧鸟苷类、脱氧肌苷类和其取代衍生物。特定核苷和脱 氧核苷包括，但不限于，2′-脱氧腺苷类，2′-脱氧-α-或β-2′-卤代-脱氧腺 苷类，3′-脱氧腺苷类，2′，3′-二脱氧腺苷类，2′-脱氧-2′-β-F-腺苷类(例如 2-氯-2′-脱氧-2′-F-araA，clofarabine)，2′，3′-二脱氧-2′-β-F-腺苷类，阿糖 腺苷类例如阿糖腺苷(araA)和2-F-araA(氟达拉滨)等。
在一实施方式中，嘌呤类化合物的区域专一性N-9糖基化的方法包 括使式I的6-(吡咯基)-取代嘌呤
与碱在较高极性溶剂中接触，并且所得阴离子盐用式R6-Lg的糖基化试剂 处理，其中各个W，W′和W″独立地选自-N-，-CH-和-CR2-，和其中W， W′和W″的至少一个是-N-，和其中R1，R2，和R5独立地选自氢，C1-10烷 基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷 基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和杂芳基，和其中R6是糖基，和Lg是离去 基团。该方法可以随后进行所带6-(吡咯基)环的烷基化得到活化的式 II的活化6-(吡咯鎓(azolium))盐
其中W，W′，和W″独立地选自-N-，-NR13-，-CH-和-CR2-，和其中W， W′，和W″是-NR13-和R13是烷基或烷基芳基，并且其中X是抗衡阴离子。 活化的核苷可以进行氨解得到式III的核苷。
在一种此类方法中，是通过用2-脱氧-3，5-二-O-p-甲苯酰基-α-D-或L- 赤型-呋喃戊糖基氯化物糖基化衍生自式I的嘌呤的阴离子性6-(吡咯基) 嘌呤盐制备9-β-D-或L-嘌呤2′-脱氧核苷，包括脱氧腺苷类。
所得式IV的化合物
可以任选地烷基化以活化所带的6-(吡咯基)环，随后可以任选地通过 在C-6和醇保护基处氨解生成式V的2′-脱氧核苷。
其中该糖基化试剂是3-脱氧-2，5-二-O-苯甲酰基-β-D-或L-赤型-呋喃戊糖 基氯化物，糖基化反应得到式VI的化合物。
式VI的化合物可以任选地烷基化以活化所带的6-(吡咯基)环，随 后在C-6和醇保护基处氨解生成式VII的3′-脱氧核苷。
其中该糖基化试剂是3，5-二-O-苯甲酰基-2-脱氧-2-氟-α-D-或L-呋喃阿糖 溴化物，糖基化生成式VIII的化合物。
式VIII的化合物可以任选地烷基化以活化所带的6-(吡咯基)环， 随后在C-6和醇保护基处氨解生成式IX的2′-脱氧-2′-氟阿糖核苷。
其中该糖基化试剂是2，3-二脱氧-2-氟-5-O-p-甲苯酰基-α-D-或L-苏型-呋 喃戊糖基氯化物，糖基化反应生成式X的化合物。
式X的化合物可以任选地烷基化以活化所带的6-(吡咯基)环，随 后在C-6和醇保护基处氨解生成式XI的2′，3′-二脱氧-2′-氟苏型核苷。
其中该糖基化试剂是2，3，5-三-O-苄基-α-D-或L-阿拉伯呋喃糖基溴化物， 糖基化生成式XII的化合物。
式XII的化合物可以任选地烷基化以活化所带的6-(吡咯基)环，随 后在C-6处氨解并除去醇保护基得到式XIII的核苷。
在某些实施方式中W″是CR2和具体式XIV。
得自上述方法的2-氯-2′-脱氧腺苷(克拉屈滨)和2′-脱氧腺苷产物是 有效的细胞毒性剂并且是用于制备2′-脱氧腺苷类似物的脱氧核苷 (Cancer Res.1982，42，3911)。3′-脱氧腺苷(虫草素)是具有康肿瘤 活性的核苷抗生素(Suhadolnik，R.J.核苷Antibiotics：New York， Wiley-Interscience)。2-氯-3′-脱氧腺苷是克拉屈滨的直接类似物(一种 有效的细胞毒性剂)。2′-F-2′-脱氧-araA是2-氯-2′-F-2′-脱氧-araA的类似物 (clofarabine，一种康不同人细胞系的细胞毒性剂；鼠科白血病L 1210 和小鼠中的P388白血病；J.Med.Chem.1992，35，397).2-氯-2′-F-2′，3′- 二脱氧-araA是2′-F-2′，3′-二脱氧-araA的类似物(一种康-HIV药物，J.Med. Chem 1990，33，978)。2-氟-araA(氟达拉滨)是合成氟达拉滨磷酸盐 的前体，一种FDA批准的治疗顽固性慢性淋巴细胞白血病的产品。
在另一实施方式中，一种嘌呤类化合物的区域专一性N-9糖基化的 方法包括使衍生自式XV的6-(咪唑-1-基)-取代嘌呤的阴离子性6-(咪 唑-1-基)嘌呤盐
与式R6-Lg的糖基化试剂接触。该方法可以随后烷基化所带的6-(咪唑-1- 基)环以得到活化的式XVI的6-(3-烷基咪唑鎓-1-基)嘌呤核苷
并氨解得到式III的核苷
其中R1，R2，R4，R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫 基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基， 和杂芳基，R6是糖基和Lg是离去基团，R13是烷基或烷基芳基，和X是抗 衡阴离子。
在一所述方法中，通过用2-脱氧-3，5-二-O-p-甲苯酰基-α-D-或L-赤型 -呋喃戊糖基氯化物糖基化衍生自式XV的嘌呤阴离子性6-(吡咯基)嘌 呤盐来制成9-β-D-或L-嘌呤2′-脱氧核苷，包括脱氧腺苷类。
所得式XVII的化合物
可以任选地烷基化从而活化所带的6-(吡咯基)环，随后在C-6和醇保护 基处氨解生成式V的2′-脱氧核苷。
其中该糖基化试剂是3-脱氧-2，5-二-O-苯甲酰基-β-D-或L-赤型-呋喃戊糖 基氯化物，糖基化得到式XVIII的化合物。
式XVIII的化合物可以任选地烷基化从而活化所带的6-(吡咯基)环， 随后在C-6和醇保护基处氨解生成式VII的3′-脱氧核苷。
其中该糖基化试剂是3，5-二-O-苯甲酰基-2-脱氧-2-氟-α-D-或L-阿拉伯呋 喃糖基溴化物，糖基化生成式XIX的化合物。
式XIX的化合物可以任选地烷基化从而活化所带的6-(吡咯基)环， 随后在C-6和醇保护基处氨解生成式IX的2′-脱氧-2′-氟阿糖核苷.
其中该糖基化试剂是2，3-二脱氧-2-氟-5-O-p-甲苯酰基-α-D-或L-苏型-呋 喃戊糖基氯化物，糖基化生成式XX的化合物。
式XX的化合物可以任选地烷基化从而活化所带的6-(吡咯基)环， 随后在C-6和醇保护基处氨解生成式XI的2′，3′-二脱氧-2′-氟苏型核苷。
其中该糖基化试剂是2，3，5-三-O-苄基-α-D-或L-阿拉伯呋喃糖基溴化物， 糖基化生成式XXI的化合物。
式XXI的化合物可以任选地烷基化从而活化所带的6-(吡咯基)环 随后在C-6处氨解并脱除醇保护基生成式XIII的核苷。
在某些实施方式中，2-氯-6-(咪唑-1-基)嘌呤类化合物的钠盐可以 与2-脱氧-3，5-二-O-(ρ-甲苯酰基)-α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物按照反 应路线(1)偶联。在某些实施方式中，该糖基化在二元溶剂混合物中 进行并且较高极性(较高的介电常数)溶剂用于溶解嘌呤盐并且非极性 溶剂(低介电常数)用于溶解糖衍生物并且减少糖基卤化物的正位异构 化。在其他实施方式中，糖基化在单一溶剂中进行。不同的实施方式在 表1中给出。
合成路线1
表1
R2，R4，R5 1-β∶1-α ％收率 H，H，H 1.85∶1 71 CH2CH2CH3(丙基)，H，H 1∶0 83-95 CH(CH3)2(异丙基)，H，H 98∶2-1∶0 100 CH2CH2CH2CH3(丁基)，H， H 96∶4-97∶3 86 CH2CH2CH2CH2CH3 (戊基)，H，H 1∶0 100 CH2CHPhCH3(2- 苯丙基)，H，H 1∶0 99 H，Ph，Ph 1∶0 100 CH2Ph(苄基)，H，H 1∶0 85
反应路线1的β端基异构体(1-β)可以用苄基碘烷基化从而活化6- (咪唑-1-基)基团，随后按照反应路线2在C-6和醇保护基处氨解生成克 拉屈滨产物。
反应路线2
位阻6-(咪唑-1-基)嘌呤类化合物的苄基化可以得到苄基化和非苄 基化产物产物的混合物，例如当苄基化时得到2-氯-9-[-脱氧-3，5-二-O-(p- 甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(4，5-二苯基咪唑-1-基)嘌呤，2- 氯-9-[-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基)-6-(2-异 丙基咪唑-1-基)嘌呤。部分分解也困难得到6-(2-苄基咪唑-1-基)-2- 氯-9-[2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基嘌呤。
在另一实施方式中，嘌呤类化合物的区域专一性N-9糖基化的方法 包括使衍生自式XXII的6-(1，2，4-三唑-4-基)-取代嘌呤的阴离子性6- (1，2，4-三唑-4-基)嘌呤盐
与式R6-Lg的糖基化试剂接触。该方法可以随后进行氨解得到式III的核苷
其中R1，R2和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基， 卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和 杂芳基，R6是糖基和Lg是离去基团。
在一此类方法中，通过用2-脱氧-3，5-二-O-p-甲苯酰基-α-D-或L-赤型 -呋喃戊糖基氯化物糖基化衍生自式XXII的6-(1，2，4-三唑-4-基)嘌呤的 阴离子性6-(1，2，4-三唑-4-基)嘌呤盐可制备9-β-D-或L-嘌呤2′-脱氧核苷， 包括脱氧腺苷类。
所得式XXIII的化合物
可以在C-6和醇保护基处进行氨解生成式V的2′-脱氧核苷。
其中该糖基化试剂是3-脱氧-2，5-二-O-苯甲酰基-β-D-或L-赤型-呋喃戊糖 基氯化物，糖基化得到式XXIV的化合物。
式XXIV的化合物可以任选地烷基化从而活化所带的6-(吡咯基)环， 随后在C-6和醇保护基处氨解生成VII的3′-脱氧核苷式。
其中该糖基化试剂是3，5-二-O-苯甲酰基-2-脱氧-2-氟-α-D-或L-阿拉伯呋 喃糖基溴化物，糖基化生成式XXV的化合物。
式XXV的化合物可以任选地烷基化从而活化所带的6-(吡咯基)环， 随后在C-6和醇保护基处氨解生成式IX的2′-脱氧-2′-氟阿糖核苷。
其中该糖基化试剂是2，3-二脱氧-2-氟-5-O-p-甲苯酰基-α-D-或L-苏型-呋 喃戊糖基氯化物，糖基化生成式XXVI的化合物。
式XXVI的化合物可以在C-6和醇保护基处氨解生成式XI的2′，3′-二 脱氧-2′-氟苏型核苷
其中该糖基化试剂是2，3，5-三-O-苄基-α-D-或L-阿拉伯呋喃糖基溴化物， 糖基化生成式XXVII的化合物。
式XXVII的化合物在C-6处进行氨解并脱除醇保护基生成式XIII的 核苷。
在使用6-(咪唑-1-基)-和6-(1，2，4-三唑-4-基)-取代的嘌呤类化合 物的实施方式中，R2和R5两者可以被C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫 基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基， 和杂芳基取代从而提高6-(吡咯基)-取代嘌呤类化合物的溶解性。
在一实施方式中，一种制备克拉屈滨(2-CdA)的方法包括：
(a)式XXVIII的化合物：
其中各个W，W′和W″独立地选自-N-，-CH-和CR2，R2和R5各自独立地选 自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨 基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和杂芳基，与碱在第一极性 溶剂中接触，随后与活化的和羟基-保护的2-脱氧-α-D-赤型-呋喃戊糖基 化合物在第二低极性溶剂中接触生成核苷产物，
(b)烷基化得自步骤(a)的核苷产物所带的6-(吡咯基)环从而 活化以便于剽呤环C-6处的亲核性置换，
(c)得自步骤(b)的烷基化6-(吡咯鎓)盐与氨在第三溶剂中接 触得到2-CdA。
在另一实施方式中，一种制备克拉屈滨(2-CdA)的方法包括：
(a)式XXVIII的化合物：
其中各个W，W′和W″独立地-N-，-CH-或CR2，R2和R5各自独立地选自氢， C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二 -C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和杂芳基，与碱在第一极性溶剂中 接触，随后通过使活化和羟基-保护的2-脱氧-α-D-赤型-呋喃戊糖基化合 物在第二低极性溶剂中接触形成核苷产物，
(b)使得自步骤(a)的核苷产物与氨在溶剂中接触得到2-CdA。
在一实施例中，一种制备2-CdA(克拉屈滨)的方法包括：
(a)使式XXIX的6-(咪唑-1-基)嘌呤化合物：
其中R2，R4和R5各自独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫 基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基 和杂芳基，与碱在第一极性溶剂接触，随后通过使活化和羟基-保护的2- 脱氧-α-D-赤型-呋喃戊糖基化合物在第二低极性溶剂接触生成核苷产 物，
(b)烷基化得自步骤(a)的核苷产物所带的6-(咪唑-1-基)环从 而激活在嘌呤环C-6处的亲核性置换，
(c)使步骤(b)的烷基化6-(咪唑鎓)盐与氨在第三溶剂中接触 得到2-CdA。
在另一实施例中，一种制备2-CdA(克拉屈滨)的方法包括：
(a)具有式XXIX的6-(咪唑-1-基)嘌呤化合物：
其中R2，R4和R5各自独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫 基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基， 和杂芳基，与碱在第一极性溶剂中接触，随后使活化和羟基-保护的2- 脱氧-α-D-赤型-呋喃戊糖基化合物在第二低极性溶剂中接触生成核苷产 物，
(b)得自步骤(a)的6-(咪唑-1-基)嘌呤核苷产物与氨在第三溶 剂中接触得到2-CdA。
在另一实施例中，一种制备2-CdA(克拉屈滨)的方法包括：
(a)式XXX的6-(1，2，4，-三唑-4-基)嘌呤化合物：
其中R2和R5各自独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基， 卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和 杂芳基，与碱在第一溶剂中接触，随后使活化和羟基-保护的2-脱氧-α-D- 赤型-呋喃戊糖基化合物在第二低极性溶剂中接触生成核苷产物，
(b)烷基化得自步骤(a)的核苷产物所带的6-(咪唑-1-基)环从 而激活在嘌呤环C-6处的亲核性置换，
(c)使得自步骤(b)的烷基化6-(三唑鎓)盐与氨在第三溶剂中 接触得到2-CdA。
在又一实施例中，一种制备2-CdA(克拉屈滨)的方法包括：
(a)式XXX的6-(1，2，4，-三唑-1-基)嘌呤化合物：
其中R2和R5各自独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基， 卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和 杂芳基，与碱在第一溶剂中接触，随后与活化和羟基-保护的2-脱氧-α-D- 赤型-呋喃戊糖基化合物在第二低极性溶剂中反应生成核苷产物，
(b)使步骤(a)的6-(1，2，4-三唑-4-基)嘌呤核苷产物与氨在第三 溶剂中接触得到2-CdA。
在某些实施方式中，第一极性溶剂是单一溶剂或二元溶剂混合物并 且平均介电常数介于约5约40之间。在其他实施方式中，该第一极性溶 剂具有约20的平均介电常数。在某些实施方式中，第一极性溶剂是乙腈。 在其他实施方式中，第一极性溶剂是乙腈和二氯甲烷的混合物。在其他 实施方式中，第一极性溶剂是三种溶剂的混合物，例如乙腈、丙酮，四 氢呋喃、甲苯等。
本发明的另一方面，提供一种新的制备6-(吡咯基)嘌呤类化合物 的方法。在一实施方式中，本发明提供一种从天然核苷源合成6-(吡咯 基)-取代嘌呤类化合物的方法，包括步骤：
(a)将吡咯基取代基引入到嘌呤核苷的C-6；和，
(b)使得自步骤(a)的6-(吡咯基)-核苷的糖苷键裂解生成6-(吡 咯基)-取代的嘌呤。
在某些实施方式中，当糖基部分具有临时性保护的羟基时引入6-(吡 咯基)基团。
在某些使用6-(吡咯基)取代基的实施方式中，通过使嘌呤衍生物 与吡咯在亲核性置换条件下接触将吡咯基环引入到嘌呤的C-6位。离去 基团可能已经位于C-6处或可以在反应介质中就地生成。或者，可以通 过6-氨基嘌呤与吖嗪或1，2-二酰基-取代的肼进行环化来得到所述的吡 咯。
适合于向在6位已带有离去基团的嘌呤的C-6引入吡咯的试剂包括， 但不限于，取代和未取代的咪唑类，和取代和未取代的三唑类。亲核性 置换反应适宜在极性非反应性溶剂例如二甲基甲酰胺或乙腈中、在约15 ℃至约100℃下进行。
适合进行环化反应以修饰6-氨基嘌呤的C-6位吡咯基环的试剂包括， 2-二[(二甲基氨基)亚甲基]肼，1，2-二甲酰基肼，1，2-二酰基肼类等。 所述的环化反应适宜在极性反应性溶剂例如二甲基甲酰胺在约35℃至 约200℃下蒸发。
当嘌呤在6位具有羰基(例如鸟嘌呤和hypothanine)时适合用吡咯 基环替代氧代基团的试剂包括，但不限于，取代和未取代的咪唑类，取 代和未取代的三唑类等。此类反应使用三苯基膦(Ph3P)，碘(I2)和 非质子碱例如二异丙基乙基胺(EtN(i-Pr)2)，在非质子溶剂例如甲 苯和约35℃至约120℃的高温下进行。
适合裂解核苷的糖苷键(脱糖基化试剂)的试剂包括有机酸，有机 酸的混合物，酰氯化物类，和有机酸和有机氯化物的混合物。在某些实 施方式中，乙酸，乙酰氯，或乙酸和乙酰氯的混合物可以用来裂解糖苷 键。此类试剂划分为“脱糖基化试剂”。
在一实施例中，一种制备6-(吡咯基)-取代的嘌呤类化合物的方法 包括用脱糖基化试剂使式XXXI的核苷脱糖基化
其中W，W′和W″各自独立地-N-，-CH-或CR2并且W，W′和W″中至少一 个是-N-，R1，R2和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫 基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基， 和杂芳基，R10，R11和R12各自是羟基保护基。在某些实施例中，羟基保 护基可以是酰基、乙缩醛、酮缩醛、烯丙基或乙烯基“烷基”，取代的 甲硅烷基(例如叔丁基二甲基甲硅烷基)和其他本领域技术人员熟知的 基团。
在一实施方式中，一种制备6-(咪唑-1-基)-取代嘌呤类化合物的方 法包括将式XXXII的核苷用脱糖基化试剂脱糖基化
其中R1，R2，R4和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫 基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基 和杂芳基，和R10，R11和R12各自是羟基保护基。在某些实施例中，羟基 保护基可以是酰基、乙缩醛、酮缩醛、烯丙基或乙烯基“烷基”，取代 的甲硅烷基(例如叔丁基二甲基甲硅烷基)和其他本领域技术人员熟知 的基团。
6-(咪唑-1-基)嘌呤类化合物可以由肌苷按照反应路线3所示的方 法制备。取代的咪唑类化合物可以通过烷基化反应或环化反应制备。
(a)Ac2O，吡啶，0℃-室温；(b)2-取代的咪唑，Ph3P，I2，EtN(i-Pr)2，甲苯，95℃； (c)AcOH，AcCl，65℃；(d)0.1N NaOH，CO2。
2-氯-6-(咪唑-1-基)嘌呤类化合物可以由鸟苷按照反应路线4所示 的方法制备。取代的咪唑类化合物可以通过烷基化反应或环化反应制 备。
反应路线4
(a)Ac2O，DMF，吡啶，75℃；(b)POCl3，PhNMe2，BnEt3NCl，乙腈，回流；(c) TMSCl，TEBANO2，二氯甲烷，室温；(d)咪唑类，乙腈，室温；(e)AcCl，AcOH，65℃。
按照反应路线4制备的2-氯-6-(取代-咪唑-1-基)嘌呤类化合物的实 施例在表2中给出。步骤a-c的总收率是74％。
表2
R2，R4，R5 ％收率(步骤d和e的和) CH(CH3)2(异丙基)，H，H 54 CH2CH2CH3(丙基)，H，H 82 CH2CH2CH2CH3(丁基)，H，H 57 CH2CH2CH2CH2CH3(戊基)，H，H 48 CH2CHPhCH3(2-苯丙基)，H，H 62 H，Ph，Ph 61 CH2Ph(苄基)， H，H 62
在另一实施方式中，一种制备6-(1，2，4-三唑-4-基)-取代嘌呤类化 合物的方法包括式XXXIII的核苷与脱糖基化试剂接触
其中各个R基团定义如上。
本发明的另一方面，提供一种新的制备6-取代嘌呤类化合物的方法。 在一实施方式中，本发明提供一种由嘌呤源合成6-取代的嘌呤类化合物 的方法，包括将吡咯基环引入到嘌呤的6位。6-取代的嘌呤可以具有式I
其中W，W，W″和R基团具有如上定义。
在某些使用6-(吡咯基)嘌呤的实施方式中，吡咯环通过使嘌呤与 吡咯在类似于上述的亲核性置换条件下接触引入到嘌呤的C-6。或者， 可以通过6-氨基嘌呤与吖嗪或取代的肼采用类似于上述的条件环化来生 成吡咯。
在某些实施方式中，6-(咪唑-1-基)嘌呤类化合物可以由次黄嘌呤 按照反应路线5所示方法制备。2-取代的咪唑类化合物可以通过烷基化反 应或环化反应来制备。
反应路线5
(a)HMDS，(NH4)2SO4回流，24h；(b)4.24eq.Ph3CCl，CH3CN，回流；(c) NaHCO3/H2O/MeOH/CH2Cl2，12小时；(d)2-取代的咪唑类，Ph3P，I2，Hunigs碱，甲苯，95℃； (e)CF3CO2H/H2O，室温或AcOH/H2O，6O℃。
在另一实施例中，可以通过2，6-二氯嘌呤与2取代的咪唑类化合物在 DMF中65℃下接触来制备2-氯-6-(2-烷基咪唑-1-基)嘌呤类化合物。
在另一实施例中，2-氨基-6-(咪唑～1-基)嘌呤和2-乙酰胺基-6-(咪 唑-1-基)嘌呤可以按照下面反应路线6所述的方法制备。
反应路线6
(a)HMDS，(NH4)2SO4，回流，24h；(b)4.24eq.Ph3CCl，CH3CN，回流；(c) NaHCO3/H2O/MeOH/CH2Cl2，12小时；(d)2，4，5-取代的咪唑类化合物，Ph3P，I2，Hunigs碱，甲 苯，95℃；(e)CF3CO2H/H2O，室温或AcOH/H2O，60℃；(f)Ac2O5 DMF 150℃；(g)MeOH， 回流，或NaHCO3/H2O饱和的，室温EtOH，回流。
嘌呤环与所带吡咯环在C-6位的平面之间所容许的仍然达到区域专 一性糖基化的最大双面角取决于亲电性试剂(糖基化试剂)的性质。亲 电性试剂越大和反应性越高，6-(吡咯基)环越远离共平面性并且嘌呤 环可能仍然生成区域专一性产物。亲电性试剂越小且反应性越低，这些 环越接近共平面性，必然得到区域专一性产物。例如，2-氯-6-(4，5，-二 苯基咪唑-1-基)嘌呤的钠盐用大的和反应性2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰 基)-α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物糖基化得到N-9糖基化产物且产物唯 一，收率定量，而2-氯-6-(4，5，-二苯基咪唑-1-基)嘌呤用较小且低反应 性碘乙烷在DMF中处理得到两种N-9和N-7烷基化产物，两者比例为约 5∶1(N-9∶N-7)，收率定量。
本发明的另一方面，提供新的6-(吡咯基)嘌呤化合物。6-(吡咯 基)基团用于直接区域专一性和区域选择性N-9糖基化反应从而得到治 疗剂。
在一实施例中，提供式I的化合物
其中各个W，W′和W″独立地选自-N-，-CH-和CR2，和其中W，W′和W″ 的至少一个是-N-，和其中R1，R2，和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基， C1-10酰氨基，芳基和杂芳基，和这些化合物的药学可接受盐，条件是：
(1)当R1是氨基和W和W′两者是N时，则R5不是氢；
(2)当R1是氢和W和W″是CH时，则R5不是氢；
(3)当R1是氢和R5是甲基时，则W′和W″不是CH；
(4)当R1和R5是氢和W′是CCH3时，则W″不是CH；
(5)当R1和R5是氢和W′是CH时，则W″不是N；
(6)当R1和R5是氢和W″是N时，则W和W′不是CH；
(7)当R1和R5是氢和W″是N时，则W不是CCH3；
(8)当R1和R5是氢和W″是N时，则W′不是CCH3。
在另一实施例中，提供式XV的化合物
其中R1，R2，R4和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫 基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基， 和杂芳基，和这些化合物的药学可接受盐，条件是：
(1)当R1，R2和R4是氢时，则R5不是氢；
(2)当R1，R2和R5是氢时，则R4不是甲基；
(3)当R1，R4和R5是氢时，则R2不是甲基。
在又一实施例中，提供式XXII的化合物
其中R1，R2，和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基， 卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和 杂芳基，和这些化合物的药学可接受盐；条件是当R1是氨基时，则R2和 R5的至少一个不是氢。
在另一实施例中，提供式XXXIV的化合物
其中R1，R2，和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基， 卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和 杂芳基，和这些化合物的药学可接受盐；条件是当R1是氢时，则R2和R5之一不是氢。
在另一实施例中，提供式XXXV的化合物
其中R1，R2，R4和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫 基，卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基 和杂芳基，和这些化合物的药学可接受盐；条件是：
(1)当R1是氢时，则R2，R4和R5的至少一个不是氢；
(2)当R1，R2和R5是氢时，则R4不是甲基；
(3)当R1，R4和R5是氢时，则R2不是甲基。
在另一实施例中，提供式XXXVI的化合物
其中各个W，W′和W″独立地选自-N-，-CH-或CR2和W，W′和W″的至少 一个是-N-，R2和R5独立地选自氢，C1-10烷基，C1-10烷氧基，C1-10烷硫基， 卤素，氨基，C1-10烷基氨基，二-C1-10烷基氨基，C1-10酰氨基，芳基，和 杂芳基，和这些化合物的药学可接受盐。
实施例
通用方法1.(6-(吡咯基)嘌呤糖基化)：
6-(吡咯基)嘌呤(1mmol)和氢化钠(0.06g，60％w/w混悬液， 1.5mmol)在干燥极性溶剂(A)中在室温和N2下搅拌2小时。用注射器 加入2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物(1.8 mmol)在低极性干燥溶剂(B)中的溶液。将该混合物搅拌22小时，并 且真空蒸发挥发物。
通用方法2.(6-(吡咯基)嘌呤糖基化)：
6-(2-烷基咪唑-1-基)-2-氯嘌呤(1mmol)和氢化钠(60％w/w混 悬液，1.5mmol)在干燥CH3CN(10mL)中的混合物在室温和N2下搅拌 8小时。将该溶液冷冻至0℃，并且用注射器加入2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲 苯酰基)-α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物(1.8mmol)在冷却的干燥CH2Cl2(10mL，0℃)中的溶液。将该反应混合物随后搅拌22小时，并且使其 逐渐冷却至室温。真空蒸发挥发物，残余物进行层析(25g硅胶， MeOH/CH2Cl2，1∶30)。
通用方法3(6-(吡咯基)环的烷基化和氨解)：
将6-(2-烷基咪唑-1-基)-2-氯-9-[2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D- 赤型-呋喃戊糖基]嘌呤(1mmol)加入到0.3M BnI/CH3CN(40mL，12 mmol)中，其由Na(15g，94mmol)和BnCl(3.5mL，3.85g，30.4mmol) 在CH3CN(100mL)中就地制成。将该混合物在60℃搅拌1.5小时。除 去挥发物和层析(MeOH/CH2Cl2，1∶90→1∶30)得到碘化苄基咪唑鎓盐， 其为黄色泡沫，将其转移到耐压瓶中并冷却至-4℃。加入冷的NH3/MeOH (26％，50mL)，将密封的混合物在60℃下搅拌11小时。蒸发挥发物， 并且残余物层析[Dowex 1×2(OH-)树脂，H2O/MeOH，1∶0→3∶2]得到 2-氯-2′-脱氧腺苷。
2-丙基咪唑的制备
向NH4HCO3(16.45g，208.1mmol)在H2O(10mL)中的混悬液内 加入丁醛(9.2mL，7.52g，104mmol)和乙二醛/H2O(40％w/w，11.9 mL，15.09g，104.0mmol)。将混合物室温下搅拌过夜，并且蒸发挥发 物。残余物用THF萃取。合并萃取液，并且蒸发挥发物得到粗原料(11g， 96％)，其进行层析(CH2Cl2→MeOH/CH2Cl2，1∶60→1∶30)得到2-丙基 咪唑(7.45g，65％)：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ11.50(s，1H)， 6.96(s，2H)，2.72(t，J＝7.4Hz，2H)，1.77(sext，J＝7.4Hz，2H)， 0.98(t，J＝7.4Hz，3H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ149.1，121.4， 30.7，22.3，14.0。
6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤的制备
2′，3′，5′-三-O-乙酰基肌苷(1.58g，4.0mmol)，2-丙基咪唑(1.60g， 14.4mmol)，Ph3P(2.58g，9.6mmol)，I2(2.14g，8.32mmol)和EtN (i-Pr)2(3.6mL，2.67g，20.2mmol)在干燥甲苯(40mL)中的混悬 液在95℃下搅拌4小时。真空蒸发挥发物，残余物用沸腾的EtOAc萃取。 合并的萃取液蒸发至干，残余物进行层析(CH2Cl2/MeOH，1∶40)得到 被Ph3PO污染的固体。将该原料溶解在AcOH(160mL)中，并且加入 AcCl(2.2mL，2.43g，31mmol)。将该溶液在65℃过夜，并且真空蒸 发挥发物。将残余物溶解在CH2Cl2并用0.1N NaOH/H2O萃取。洗涤水层 (CH2Cl2)，和用CO2沉淀，随后过滤并彻底洗涤(H2O)得到固体(0.66 g，72％)。将原料溶解在MeOH中并用碳脱色。重结晶(MeOH)得到 6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤，其为无色固体：mp 242.5-243.5℃；UV(MeOH) max 278 nm(ε5000)，min 235 nm(ε5000)；1H NMR(300MHz5 DMSO-d6)δ13.90(brs，1H)，8.86(s，1H)，8.69(s，1H)，8.36 (s，1H)，7.07(d，J＝1.5Hz，1H)，3.18(t，J＝7.3Hz，2H)，1.72 (sext，J＝7.3Hz，2H)，0.93(t，J＝7.3Hz，3H)；13C NMR(75MHz， CDCl3)δ155.5，152.0，149.8，146.9，145.8，128.5，123.6，121.4， 32.2，21.5，14.5；HRMS m/z 228.1109(M+[C11H12N6]＝228.1123).分析 计算C11H12N6：C，57.88；H，5.30；N，36.82.实测值：C，58.09；H， 5.19；N，37.00。
2-氯-6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤的制备
方法1：
将2，6-二氯嘌呤(0.38g，2mmol)和2-丙基咪唑(1.32g，12mmol) 溶解在新蒸馏的DMF(10mL)，并且将该混合物在65℃下搅拌20小时。 真空蒸发挥发物，将残余物溶解在0.1N NaOH/H2O//CH2Cl2(100mL/50 mL)。有机相用0.1N NaOH/H2O(3×50mL)萃取。合并的水相用CH2Cl2(2×50mL)洗涤且用CO2中和。过滤沉淀的固体并洗涤(H2O)得到 2-氯-6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤(0.38g，72％)：mp 224.5-225℃；UV (MeOH)max 215，288nm(ε25800，16700)，min332，241nm(ε 2500，4500)；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ14.04(brs，1H)， 8.69(s，1H)，8.43(s，1H)，7.06(s，1H，)，3.12(t，J＝7.5Hz， 2H)，1.72(sext，J＝7.3Hz，2H)，0.95(t，J＝7.3Hz，3H)；13C NMR (125MHz，DMSO-d6)δ157.3，151.7，150.2，147.2，146.6，128.9， 122.5，121.1，32.4，21.5，14.5；HRMS m/z 262.0723 (M+[C11H11ClN6]＝262.0734).分析计算C11H11ClN6：C，50.29；H，4.22； N，31.99.实测值：C，50.02；H，4.28；N，31.64.
方法2：
9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)-2-氯-6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤的制备
方法A：
将2′，3′，5′-三-O-乙酰基-2-N-三苯甲基鸟苷(5.92g，9.1mmol)，I2(11.55g，45.5mmol)，Ph3P(11.93g，45.5mmol)和2-丙基咪唑(5.01 g，45.5mmol)在甲苯(180mL)中在95℃搅拌15分钟。加入DIPEA(15.9 mL，11.80g，91.3mmol)，将该混合物在95℃下搅拌过夜。真空除去 挥发物之后，残余物用沸腾的EtOAc萃取。合并的EtOAc萃取液蒸发至 干，残余物在真空下干燥。所得材料在TFA/H2O(9∶1，250mL)中0℃ 下搅拌4小时。真空蒸发挥发物，残余物进行层析 (CH2Cl2→MeOH/CH2Cl2，1∶12)。这种固体原料用碳在MeOH处理。 真空蒸发挥发物，残余物溶解在CH2Cl2中并洗涤(NaHCO3/H2O，盐水) 和干燥(Na2SO4)得到9-(2，3，5-三-0-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)-2-氨基 -6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤，其为有色固体(3.20g，81％，用Ph3PO污 染)。
向9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)-2-氨基-6-(2-丙基咪唑 -1-基)嘌呤(2.37g，4.72mmol)在CH2Cl2(120mL)中的搅拌溶液内 在N2下滴加TMSCl(5.3mL，4.54g，42.5mmol)，随后滴加在CH2Cl2(40mL)中的BTEANO2(7.1g，29.8mmol)。观察到放出气体，当停 止放气时，加入附加的TMSCl(5.3mL)。该混合物随后在室温下搅拌3 小时。该溶液用CH2Cl2稀释并洗涤(NaHCO3/H2O，2×200mL+100mL)， 水层用CH2Cl2萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)，真空蒸发挥发物。 残余物进行层析(MeOH/CH2Cl2，1∶99-1∶90)得到粗产物(1.40g，57％， 被Ph3PO污染)，将其重结晶(i-PrOH)得到9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D- 呋喃核糖基)-2-氯-6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤：mp 126-127.5℃；UV (MeOH)max 217，287nm(ε25300，15000)，min238，261nm(ε 4200，6200)；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.57(d，J＝1.8Hz，1H)， 8.25(s，1H)，7.11(d，J＝1.5Hz，1H)，6.27(d，J＝5.5Hz，1H)， 5.83(t，J＝5.5Hz，1H)，5.60-5.62(m，1H)，4.49-4.51(m，1H)， 4.43-4.44(m，2H)，3.29(t，J＝7.7Hz，2H)，2.19(s，3H)，2.17 (s，3H)，2.11(s，3H)，1.86(sext，J＝7.6Hz，2H)，1.07(t，J＝7.7 Hz，3H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ170.5，169.9，169.7，154.6， 153.8，151.6，148.4，142.5，129.3，123.0，120.5，86.6，81.0，73.5， 70.8，63.2，33.2，21.6，21.1，20.8，20.7，14.2；HRMS m/z 520.1476 (M+[C22H25ClN6O7]＝520.1473)。分析计算C22H25ClN6O7：C，50.73； H，4.84；N，16.13.实测值：C，50.58；H，4.87；N，16.15。
方法B：
将9-(2，3，5-三-(9-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)-2，6-二氯嘌呤(1.12g， 2.5mmol)和2-丙基咪唑(2.20g，20mmol)的混合物溶解在CH3CN(30 mL)中并在65℃和N2下搅拌2小时(反应完全，TLC)。除去挥发物后， 将残余物溶解在CH2Cl2(200mL)且洗涤(H2O，3×50mL)。该水相 用CH2Cl2萃取，并且将合并的有机相干燥(Na2SO4)和蒸发至干。残余 物进行层析(MeOH/CH2Cl2，1∶95)得到9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋 喃核糖基)-2-氯-6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤(977mg，93％)。
长的反应时间(20h)使二-取得产物的生成减少：LRMS m/z 594 (M+[C28H34N8O7]＝594)。
将9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)-2-氯-6-(2-丙基咪唑-1- 基)嘌呤(4.99g，9.6mmol)溶解在HOAc(400mL)中。在密封烧瓶 中向该溶液加入AcCl(4.0mL，4.42g，56.3mmol)，将该混合物在65 ℃下搅拌1.5小时(反应几乎完全，TLC)。真空蒸发挥发物，洗涤残余 物(CH2Cl2)，溶于0.1N NaOH/H2O。用CO2沉淀得到2-氯-6-(2-丙基咪 唑-1-基)嘌呤(2.20g，88％)。重结晶(MeOH)得到纯物质(1.93g， 77％)。
2-氯-6-(2-异丙基咪唑-1-基)嘌呤的制备.
将9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃戊糖基)-2-氯-6-(2-异丙基咪唑 -1-基)嘌呤(2.96g，5.7mmol，被2-异丙基咪唑污染)溶解在HOAc(190 mL)中。向该溶液加入AcCl(1.9mL，2.10g，26.7mmol)，在密封烧 瓶中该混合物在65℃下搅拌20小时(反应达到完全，TLC)。真空蒸发 挥发物，洗涤残余物(CH2Cl2)并溶于0.1N NaOH/H2O(200mL)。用 CO2沉淀得到2-氯-6-(2-异丙基咪唑-1-基)嘌呤(0.675g，54％)。洗 涤此固体(沸腾的MeOH/iPrOH)得到标题化合物(0.60g，48％)：mp 268-268.5℃；UV(MeOH)max 213，254，288nm(ε26 100，4600， 13 100)，min239，257nm(ε3700，4600)；1H NMR(500MHz，DMSO-d6) δ14.06(s，1H)，8.71(s，1H)，8.36(s，1H)，7.07(d，J＝1.6Hz， 1H)，3.93(br s，1H)，1.29(d，J＝6.8Hz，6H)；13C NMR(125MHz， DMSO-d6)δ156.4，154.3，151.0，146.5，145.8，127.9，122.0，120.4， 27.7，21.6；HRMS m/z 285.0626(MNa+[C11H11ClN6Na]＝285.0631)。分 析计算C11H11ClN6：C，50.29；H，4.22；N，31.99.实测值：C，50.12； H，4.27；N，32.16。
6-(2-丁基咪唑-1-基)-2-氯嘌呤的制备
将9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃戊糖基)-2，6-二氯嘌呤(2.41g， 5.4mmol)和2-丁基咪唑(6.68g，54mmol)在CH3CN(60mL)中的 溶液在65℃和N2下搅拌32小时(反应完全，TLC)。真空蒸发挥发物， 残余物进行层析(MeOH/CH2Cl2，1∶90)得到粗9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D- 呋喃核糖基)-6-(2-丁基咪唑-1-基)-2-氯嘌呤(3.33g，污染有2-丁基 咪唑)：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.56(s，1H)，8.24(s，1H)， 7.10(s，1H)，6.26(d，J＝5.8Hz，1H)，5.83(t，J＝5.6Hz，1H)， 5.61(t，J＝5.6Hz，1H)，4.43-4.51(m，3H)，3.31(t，J＝7.9Hz，2H)， 2.18(s，3H)，2.16(s，3H)，2.11(s，3H)，1.81(quint，J＝7.7Hz， 2H)，1.50(sext，J＝7.7Hz，2H)，0.98(t，J＝7.3Hz，3H)；HRMS m/z 535.1702(MH+[C23H28ClN6O7]＝535.1708)。
将粗9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)-6-(2-丁基咪唑-1-基) -2-氯-嘌呤(2.16g，4mmol)溶解在乙酸(167mL)中。向该溶液加入 AcCl(1.67mL，1.84g，23.5mmol)，并且在密封烧瓶内将混合物在65 ℃下搅拌23小时(反应完全，TLC)。真空蒸发挥发物，并且洗涤残余 物(CH2Cl2)且溶于0.1N NaOH/H2O(130mL)。用CO2沉淀得到固体 (0.76g，57％)，将其重结晶(MeOH)得到6-(2-丁基咪唑-1-基)-2- 氯嘌呤(0.58g，44％)：mp 247-247.5℃；UV(MeOH)max 214，254， 288nm(ε25 600，4700，13 900)，min239，257nm(ε3800，4600)； 1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ14.05(s，1H)，8.71(s，1H)，8.44 (s，1H)，7.07(d，J＝1.5Hz，1H)，3.17(t，J＝7.7Hz，2H)，1.70 (quint，J＝7.6Hz，2H)，1.39(sext，J＝7.6Hz，2H)，0.91(t，J＝7.4 Hz，3H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ156.3，151.0，149.5， 146.4，145.7，128.1，121.7，120.3，29.5，29.3，21.9，13.6；HRMS m/z 277.0973(MNa+[C12H14ClN6Na]＝277.0968).分析计算C12H14ClN6：C， 52.08；H，4.74；N，30.37.实测值：C，51.96；H，4.85；N，30.52。
2-氯-6-(2-己基咪唑-1-基)嘌呤的制备
将2，6-二氯嘌呤(0.19g，1mmol)和2-己基咪唑(0.97g，6.36mmol) 的样品溶解在新蒸馏的DMF(20mL)中，并且将该混合物在65℃下搅 拌20小时(反应不完全，TLC).真空蒸发挥发物，将残余物溶解在HOAc (5mL)，并且蒸发挥发物。残余物进行层析(MeOH/CH2Cl2，1∶30) 得到固体，该固体污染有两种起始原料。此固体用CH2Cl2彻底洗涤时， 随后用饱和NaHCO3/H2O洗涤得到2-氯-6-(2-己基咪唑-1-基)嘌呤(0.17 g，56％)：mp 192-193℃；UV(MeOH)max214，288nm(ε25 900， 41200)，min 240nm(ε4500)；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ14.03 (br，1H)，8.70(s，1H)，8.42(s，1H)，7.06(s，1H)，3.16(t， J＝7.7Hz，2H)，1.69(quint，J＝7.3Hz，2H)，1.39-1.33(m，2H)， 1.22-1.30(m，4H)，0.84(t，J＝7.0Hz，3H)；13C NMR(50O MHz DMSO-d6) δ157.3，151.7，150.3，147.2，146.7，128.9，122.6，121.1，31.7，31.4， 30.4，29.2，28.2.22.7；HRMS m/z 304.1185(M+[C14H17ClN6]＝304.1203)。
2-氯-6-[-(2-苯基丙基)咪唑-1-基]嘌呤的制备
将9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)-2，6-二氯嘌呤(0.98g， 2.19mmol)和2-(2-苯基丙基)咪唑(4.07g，21.9mmol)在CH3CN(20 mL)中的混合物在65℃下搅拌17小时(反应完全，TLC)。真空蒸发挥 发物，残余物进行层析(MeOH/CH2Cl2，1∶90)得到非对映异构体的混 合物(定量，污染有2-(2-苯基丙基)咪唑)。将混合物溶解在HOAc (91mL)，向该溶液加入AcCl(0.92mL，1.00g，12.8mmol)。在密 封烧瓶内将混合物在65℃下搅拌25.5小时(反应完全，TLC)。真空蒸 发挥发物，残余物溶解在0.1N NaOH/H2O(300mL)和CHCl3(150mL) 中。将该混合物搅拌2小时，随后用CO2中和。分离有机相，水相用CH2Cl2萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)和浓缩至干。洗涤残余物(H2O)， 悬浮于EtOH中，过滤得到2-氯-6-[-(2-苯基丙基)咪唑-1-基]嘌呤(0.46 g，62％)的物质。将母液蒸发至干，残余物进行层析(MeOH/CH2Cl2， 1∶30→1∶12)得到固体，将其洗涤(H2O)得到第二批(0.18g，总共86％)。 合并的固体溶解在0.1N NaOH/H2O(300mL)。用CO2沉淀得到2-氯-6-[- (2-苯基丙基)咪唑-1-基]嘌呤，其为对映异构体的混合物(0.59g，80％)： mp 258.5-259℃；UV(MeOH)max254，289nm(ε12 000，4100)， min240，256nm(ε3600，4100)；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ14.00 (s，1H)，8.68(s，1H)，8.35(s，1H)，7.13-7.14(m，4H)，7.07 (d，J＝1.9Hz，1H)，7.00-7.04(m，1H)，3.58(dd，J＝14.4，6.7Hz， 1H)，3.43(dd，J＝14.2，7.7Hz，1H)，3.30(sext，J＝7.0Hz，1H)， 1.23(1.22)(s，3H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ156.4，150.9， 147.9，146.4，145.8，145.7，128.2，127.9，126.6，125.7，121.7，120.5， 38.3，37.7，21.0；HRMS m/z 361.0935(MNa+[C11H15ClN6Na]＝361.0944) 分析计算C17H15ClN6：C，60.27；H，4.46；N，24.81.实测值：C，60.12； H，4.60；N，24.66.
2-氯-6-(4，5-二苯基咪唑-1-基)嘌呤的制备
将9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)-2，6-二氯嘌呤(0.45g， 1.0mmol)和4，5-二苯基咪唑(2.21g，10mmol)在DMF(15mL)中的 溶液在65℃和N2下搅拌67小时(反应几乎完全，TLC).真空蒸发挥发物， 和残余物进行层析(MeOH/CH2Cl2，1∶90)得到9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D- 呋喃核糖基)-2-氯-6-(4，5-二苯基咪唑-1-基)嘌呤(0.53g，83％)和4，5- 二苯基咪唑(19mg)和该标题化合物(52mg，总91％)的混合物。重 结晶(iPrOH)得到9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃戊糖基)-2-氯-6-(4，5- 二苯基咪唑-1-基)嘌呤：mp 146-146.5℃；UV(MeOH)max 279nm(ε 18300)，min 267nm(ε16800)；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.03 (s，1H)，8.22(s，1H)，7.55-7.57(m，2H)，7.35-7.40(m，4H)， 7.21-7.27(m，4H)，6.21(d，J＝5.5Hz，1H)，5.80(“t”，J＝5.6Hz3 IH)，5.58(“t”，J＝5.1Hz，1H)，4.41-4.48(m，3H)，2.16(s， 3H)，2.15(s，3H)，2，09(s，3H)；13C NMR(125MHz，CDCl3) δ170.2，169.5，169.4，154.3，153.5，147.4，142.9，140.5，139.2，133.5， 131.1，131.0，128.33，128.28，128.17，127.5，127.2，124.1，86.4，80.7， 73.2，70.5，62.9，20.8，20.5，20.4；HRMS m/z 631.1694 (MNa+[C31H28ClN6O7Na]＝631.1708).分析计算C31H28ClN6O7：C，59.00； H，4.31；N，13.32.实测值：C，58.89；H，4.45；N，13.24。
将9-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)-2-氯-6-(4，5-二苯基咪 唑-1-基)嘌呤(1.41g，1.7mmol)溶解在HOAc(69mL)中。向该溶 液加入AcCl(0.68mL，0.75g，9.6mmol)，在密封烧瓶内将该混合物 在65℃下搅拌60小时(反应完全，TLC)。真空蒸发挥发物，并且洗涤 残余物(CH2Cl2)和溶于0.1N NaOH/H2O。用CO2沉淀得到物质(0.41g， 67％)，将其重结晶(MeOH)得到2-氯-6-(4，5-二苯基咪唑-1-基)嘌呤： mp 277.5-278℃；UV(MeOH)max 277nm(ε16 100)，min 264nm(ε 14800)；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ14.04(s，1H)，8.84(s， 1H)，8.73(s，1H)，7.20-7.49(m，10H)；13C NMR(125MHz， DMSO-d6)δ157.2，151.6，147.4，146.2，139.7，139.5，134.3，131.3， 131.1，129.02，128.98，128.92，128.08，127.8，127.6，124.0；HRMS m/z 395.0792(MNa+[C20H13ClN6Na]＝395.0788)分析计算C20H13ClN6：C， 64.43；H，3.51；N，22.54.实测值：C，64.29；H，3.78；N，22.53。
2-氨基-6-(咪唑-1-基)嘌呤的制备
将新活化的鸟嘌呤(0.45g，3mmol)和(NFLi)2SO4(60mg)在 HMDS(50mL)中回流搅拌24小时得到澄清溶液。真空蒸发挥发物， 将残余物溶解在干燥CH3CN(50mL)中。加入三苯基氯(3.5g，12.6 mmol)，将该容易在回流下搅拌48小时。真空蒸发挥发物，残余物溶解 在CH2Cl2(10mL)中。加入NH3/H2O(28-30％，30mL)，观察到立刻 出现沉淀。将该混合物室温下搅拌过夜。真空蒸发挥发物，并且洗涤残 余物(H2O，CH2Cl2)得到2-N，9-二三苯甲基鸟嘌呤，其为固体(1.37g， 72％)，其通过溶于MeOH/CH2Cl2(1∶15)并过滤进一步得到纯化：1H NMR (500MHz，DMSO-d6)δ10.75(s，1H)，7.35(s，1H)，7.08-7.19 (m，19H)，6.87(d，J＝7.4Hz，6H)，6.81(d，J＝7.3Hz，6H)； 13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ157.3，151.8，151.0，145.3，142.4， 139.6，129.6，128.8，128.5，128.3，127.6，126.9，120.3，75.4，71.1； HRMS m/z 635.2675(M+[C43H33N5O]＝635.2685)。
将2-N，9-二-三苯甲基鸟嘌呤(1.90g，3mmol)、I2(3.88g，15mmol)、 Ph3P(3.99g，15mmol)和咪唑(1.10g，15mmol)的混合物在甲苯(150 mL)中95℃下搅拌15分钟，加入DIPEA(2.9mL，2.15g，16.6mmol)。 将该混合物在95℃下搅拌过夜。除去挥发物后，残余物与EtOAc(3x) 沸腾并热过滤。将合并的EtOAc萃取液蒸发至干。残余物溶解在 TFATH2O(9∶1，60mL)，将该溶液在0℃下搅拌4小时。真空蒸发挥发 物，残余物溶解在0.1N NaOH/H2O//CH2Cl2(100mL/100mL)中。有机 层用0.1N NaOH/H2O(50mL×2)萃取，合并水相，洗涤[CH2Cl2(2×50 mL)]，用CO2中和。真空蒸发挥发物，并且洗涤残余物(H2O，CH2Cl2) 得到2-氨基-6-(咪唑-1-基)嘌呤(0.40g，69％)：UV(MeOH)max 222， 320nm(ε29800，8700)，min 207，280nm(ε16100，1500)；1H NMR (500MHz，DMSO-d6)δ12.89(s，1H)，8.94(s，1H)，8.25(s， 1H)，8.16(s，1H)，7.18(s，1H)，6.67(s，2H)；13C NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ160.7，157.5，145.4，141.9，137.2，130.5，117.7， 115.4；HRMS m/z 201.0753(M+[C8H7N7]＝201.0763)。
9-(2，3，5-三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-6-咪唑-1-基)嘌呤的制备
将6-(咪唑-1-基)嘌呤(52mg，0.28mmol)悬浮于1-(9-乙酰基-2，3，5- 三-O-苯甲酰基-β-D-呋喃戊糖(160mg，0.32mmol)在干燥CH3CN(10 mL)中的溶液内。加入氯化锡(0.10mL，0.22g，0.85mmol)，混合 物非常快地变为澄清溶液。将该溶液在室温下搅拌4小时。依次加入 NaHCO3(0.8g)和H2O(0.1mL)，混悬液搅拌1小时。分离澄清溶液 层，残余物用CH3CN萃取。合并萃取液和溶液，真空蒸发挥发物。残余 物进行层析(CH2Cl2/MeOH，1∶90→1∶15)得到9-(2，3，5-三-O-苯甲酰基 -β-D-呋喃核糖基)-6-(咪唑-1-基)嘌呤(179mg，定量)：1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ4.72(dd，J＝4.3，12.2Hz，1H)，4.88(br s，1H)， 4.95(dd，J＝3.0，12.3Hz，1H)，6.29(“t”，J＝5.2Hz，1H)56.47-6.50 (m，2H)，7.24(s，1H)，7.35-7.60(m，9H)，7.93(d，J＝7.6Hz， 2H)，8.03(d，J＝7.6Hz，2H)，8.07(d，J＝7.6Hz，2H)，8.28(s， 1H)，8.35(s，1H)，8.65(s，1H)，9.13(s，1H)；13C NMR(125 MHz，CDCCl3)δ165.0，164.3，164.1，152.1，151.5，144.9，142.2， 136.6，132.9，132.8，132.4，129.7，128.8，128.7，128.2，127.5，127.2， 122.0，116.3，86.4，79.9，72.9，70.3，62.3；HRMS m/z 653.1749 (MNa+[C34H26N6O7Na]＝653.1761)。
9-[-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤的制备
将在干燥CH3CN(5mL)中的6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤的钠盐(55 mg，0.24mmol)用在甲苯(5mL)中的2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基) -α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物(0.15g，0.39mmol)利用通用方法1处理。 将残余物进行层析(25g硅胶，MeOH/CH2Cl2，1∶12)得到两种非对映 异构体[定量，含有痕量的α-端基异构体(α/β～1∶34)]。重结晶(EtOAc) 得到9-[2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(2-丙 基咪唑-1-基)嘌呤(68.7mg，53％)：mp 197-197.5℃；UV(MeOH) max 242，276nm(ε31200，12500)，min 223，263nm(ε16400， 9700)；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.80(s，1H)，8.41(s，1H)， 8.28(s，1H)，8.00(d，J-8.3Hz，2H)，7.89(d，J＝8.3Hz，2H)， 7.31(d，J＝8.3Hz，2H)，7.21(d，J＝8.3Hz，2H)，7.12(s，1H) 6.65(dd，J＝6.2，8.1Hz，1H)，5.85-5.87(m，1H)，4.68-4.83(m， 3H)，3.30(t，J＝7.3Hz5 2H)，3.17-3.23(m，1H)，2.91-2.95(m， 1H)，2.47(s，3H)，2.39(s，3H)，1.85(sext，J＝7.5Hz，2H)， 1.03(t，J＝7.3Hz，3H)；NOE差：在H1′照射达到增强了H4′(小)、 H8和H2′，2″信号；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ166.4，166.2，153.1， 152.1，151.0，148.1，144.9，144.6，142.4，130.1，129.8，129.6，129.5， 128.8，126.8，126.5，124.6，120.8，85.5，83.6，75.2，64.1，38.3，32.8， 22.0，21.9，21.5，14.3；HRMS m/z 603.2347 (MNa+[C32H32N6O5Na]＝603.2332)；分析计算C32H32N6O5：C，66.20； H，5.56；N，14.47.实测值：C，66.59；H，5.67；N，14.62。
用6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤在DMF(342mg，1.5mmol)中利用 通用方法1重复该反应。真空蒸发挥发物，和残余物进行层析(EtOAc/ 己烷-1∶1→7∶3)得到α-(114mg)和β-核苷(54mg，污染有α-核苷，1∶7.3)， 和a混合物(321mg，1∶1.3；总共56％，α/β，1.14∶1)。
α-核苷：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.79(s，1H)，8.47(s， 1H)，8.44(S5 IH)，7.97(d，J＝8.2Hz，2H)，7.55(d，J＝8.2Hz， 2H)，7.29(d，J＝8.0Hz，2H)，7.14(s，1H)，7.12(d，J＝8.0Hz， 2H)，6.71(dd，J＝1.5，7.0Hz，1H)，5.71-5.73(m，1H)，4.94-4.97 (m，1H)，4.61-4.68(m，2H)，3.30(t，J＝7.3Hz，2H)，3.07-3.21 (m，2H)，2.44(s，3H)，2.35(s，3H)，1.84(sext，J＝7.5Hz， 2H)，1.01(t，J＝7.3Hz，3H)。
2-氯-9-[-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(4，5-二苯基咪唑-1-基)嘌呤的制备
将在干燥CH3CN(10mL)中的2-氯-6-(4，5-二苯基咪唑-1-基)嘌呤 的钠盐(94mg，0.25mmol)用在CH2Cl2(10mL)中的2-脱氧-3，5-二-O- (p-甲苯酰基)-α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物(0.334g，0.86mmol)采 用通用方法2处理。反应混合物的样品利用1H NMR(500MHz)测定显 示没有α-核苷。真空蒸发挥发物，残余物进行层析(25g硅胶，EtOAc/ 己烷，3∶7→1∶1)得到β-端基异构体(定量)。重结晶(EtOAc/己烷) 得到2-氯-9-[-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(4，5- 二苯基咪唑-1-基)嘌呤：UV(MeOH)max240，275nm(ε53400，19 300)，min223，270nm(ε42 000，19 100)；1H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.97(s，1H)，8.25(s，1H)，7.97(d，J＝7.9Hz，2H)， 7.86(d，J＝7.9Hz，2H)，7.55(d，J＝8.2Hz，2H)，7.19-7.40(m， 13H)，6.56(t，J＝7.0Hz，1H)，5.77-5.78(m，1H)，4.76-1.79(m， 1H)，4.65-4.69(m，2H)，2.92-2.96(m，2H)，2.45(s，3H)，2.40 (s，3H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ166.06，165.94，154.03， 153.17，147.13，144.71，144.45，142.81，140.38，139.24，133.50，131.02， 129.85，129.55，129.37，129.34，128.25，128.17，127.47，127.17，126.41， 126.18，124.00，85.11，83.52，74.85，63.84，38.57，21.78，21.71； HRMS m/z 747.2100(MNa+[C41H33ClN6O5Na]＝747.2099)。
6-(2-丁基咪唑-1-基)-2-氯-9-[2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]嘌呤的制备
将在干燥CH3CN(10mL)中的6-(2-丁基咪唑-1-基)-2-氯嘌呤的 钠盐(0.139g，0.5mmol)用在CH2Cl2(10mL)中的2-脱氧-3，5-二-(9- (p-甲苯酰基)-α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物(0.334g，0.86mmol)采 用通用方法2处理。反应混合物的样品利用1H NMR(500MHz)测定显 示出痕量的α-核苷(1∶24)。真空蒸发挥发物，残余物进行层析(25g 硅胶，EtOAc/己烷，3∶7→EtOAc)得到β-端基异构体(274mg，86％) 和痕量的α-端基异构体。重结晶(EtOAc/己烷)得到6-(2-丁基咪唑-1- 基)-2-氯-9-[-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]嘌呤： UV(MeOH)max223，241，287nm(ε29 900，33 400，13 200)， min230，265nm(ε28100，7500)；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.51 (s，1H)，8.26(s，1H)，7.98(d，J＝8.0Hz，2H)，7.84(d，J＝8.0 Hz，2H)，7.30(d，J＝8.0Hz，2H)，7.19(d，J＝8.0Hz，2H)，7.09 (s，1H)，6.60(t，J＝6.9Hz，1H)，5.80(brs，1H)，4.78-4.81(m， 1H)，4.66-4.70(m，2H)，3.31(t，J＝7.8Hz，2H)，2.97-3.00(m， 2H)，2.46(s，3H)，2.37(s，3H)，1.80(quint，J＝7.4Hz，2H)， 1.50(sext，J＝7.4Hz，2H)，0.97(t，J＝7.5Hz，3H)；13C NMR(125 MHz，CDCl3)δ166.05，165.98，154.13，153.17，151.43，147.92，144.71， 144.39，142.18，129.87，129.53，129.35，129.31，128.91，126.38，126.20， 122.70，120.33，85.20，83.57，74.94，63.87，38.61，30.70，30.07，22.64， 21.79，21.66，13.91；HRMS m/z 629.2270 (MH+[C33H34ClN6O5＝629.2279])。
α-端基异构体：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.59(s，1H)，8.41 (s，1H)，7.97(d，J＝8.3Hz，2H)，7.57(d，J＝8.3Hz，2H)，7.30 (d，J＝8.0Hz，2H)，713-7.14(m，3H)，6.67(dd，J＝1.8，6.4Hz， 1H)，5.72-5.73(m，1H)，4.96^1.97(m，2H)，4.62-4.70(m，2H)， 3.31(t，J＝7.8Hz，2H)，3.06-3.15(m，2H)，2.46(s，3H)，2.14 (s，3H)，1.80(quint，J＝7.4Hz，2H)，1.50(sext，J＝7.4Hz，2H)， 0.97(t，J＝7.3Hz，3H)。
2-氯-9-[2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(2-异丙基咪唑-1-基)嘌呤的制备
将在干燥CH3CN(10mL)中的2-氯-6-(2-异丙基咪唑-1-基)嘌呤 的钠盐(0.132g，0.5mmol)用在CH2Cl2(10mL)中的2-脱氧-3，5-二-O- (p-甲苯酰基)-α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物(0.334g，0.86mmol)采 用通用方法2处理1小时(反应完全，TLC)。反应结束时取得的反应混 合物样品通过1H NMR(500MHz)测定显示没有α-核苷。残余物进行层 析(25g硅胶，EtOAc/己烷～1∶1)得到2-氯-9-[-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯 酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(2-异丙基咪唑-1-基)嘌呤(定量)。 重结晶(EtOAc)得到所述化合物(0.22g，70％)：UV(MeOH)max 223，241，285nm(ε32 100，35 400，14 800)，min230，265nm(ε30 300，9200)；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.42(d，J＝1.0Hz，1H)， 8.26(s，1H)，7.99(d，J＝7.8Hz，2H)，7.85(d，J＝8.3Hz，2H)， 7.30(d，J＝7.8Hz，2H)，7.20(d，J＝8.8Hz，2H)，7.11(d，J＝1.0Hz， 1H)，6.60(t，J＝6.8Hz，1H)，5.81(brs，1H)，4.78-4.83(m，1H)， 4.67-4.71(m，2H)，4.08(sept，J＝6.8Hz，1H)，2.97-3.01(m，2H)， 2.46(s，3H)，2.37(s，3H)，1.43(d，J＝6.8Hz，3H)，1.41(d， J＝6.8Hz，3H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ166.05，165.99，156.18， 154.20，153.21，148.15，144.72，144.40，142.25，129.88，129.55，129.36， 129.33，128.82，126.44，126.26，123.00，120.38，85.23，83.59，74.93， 63.87，38.63，28.81，21.78，21.61；HRMS m/z 637.1931 (MNa+[C32H31ClN6O5Na＝637.1942])。
大规模的重复该反应将在干燥CH3CN(70mL)中的2-氯-6-(2-异 丙基咪唑-1-基)嘌呤的钠盐(902mg，3.43mmol)用在CH2Cl2(70mL) 中的2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物(2.62 g，6.73mmol)采用通用方法2处理5小时。反应混合物的样品通过1H NMR (500MHz)测定显示痕量的α-核苷(＜1∶20)。柱色谱(EtOAc/己烷， 1∶1→7∶3)得到β-端基异构体(定量，痕量的α-核苷)。重结晶(EtOAc) 得到β-端基异构体2-氯-9-[-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃 戊糖基]-6-(2-异丙基咪唑-1-基)嘌呤(1.76g，84％)。
2-氯-9-[2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤的制备
将在干燥CH3CN(10mL)中的2-氯-6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤的 钠盐(0.13g，0.5mmol)用在CH2Cl2(10mL)中的2-脱氧-3，5-二-O-(p- 甲苯酰基)-α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物(0.30g，0.8mmol)采用通用 方法2处理。通过1H NMR检测没有α-核苷。进行2次柱色谱(25g硅胶， MeOH/CH2Cl2，1∶30，和EtOAc/己烷，1∶1)得到2-氯-9-[2-脱氧-3，5-二-O- (p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(2-丙基咪唑-1-基)嘌呤(0.26 g，83％)，将其重结晶(EtOAc)得到分析纯的物质(0.17g，55％)： mp 192-193℃；UV(MeOH)max220，239，287nm(ε40 700，38 300， 16700)，min231，265nm(ε35 900，10 300)；1H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.52(s，1H)，8.27(s，1H)，8.00(d，J＝7.8Hz，2H)， 7.86(d，J＝7.8Hz，2H)，7.32(d，J＝7.8Hz，2H)，7.28(d，J＝7.8Hz， 2H)，7.20(s，1H)，6.61(t，J＝7.1Hz，1H)，5.82-5.83(m，1H)， 4.84-4.68(m，3H)，3.29(t，J＝7.8Hz，2H)，2.98-3.01(m，2H)， 2.47(s，3H)，2.38(s，3H)，1.86(sext，J＝7.5Hz，2H)，1.07(t， J＝7.3Hz，3H)；NOE差：照射H1′，观察到增强了H4′(小)、H8和H2′，2″ 信号；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ166.29，166.23，154.38，153.42， 151.47，148.18，144.97，144.65，142.40，130.12，129.78，129.61，129.56， 129.20，126.63，126.44，122.95，120.57，85.46，83.82，75.19，64.12， 38.88，33.12，22.03，21.91，21.60，14.25；HRMS m/z 637.1940 (MNa+[C32H31ClN6O5Na＝637.1942]).分析计算C32H31ClN6O5：C，62.49； H，5.08；N，13.66.实测值：C，62.44；H，5.18；N，13.72。
大规模重复此反应将在干燥CH3CN(100mL)中的2-氯-6-(2-丙基 咪唑-1-基)嘌呤的钠盐(1.54g，5.87mmol)用在CH2Cl2(100mL)中 的2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-α-D-赤型-呋喃戊糖基氯化物(3.74g， 9.62mmol)采用通用方法2处理5小时(反应完全，TLC)。在不同反应 时间取样通过1H NMR(500MHz)测定显示没有α-核苷。蒸发挥发物， 残余物溶解在CH2Cl2。洗涤该溶液(H2O)和干燥(Na2SO4)，真空蒸 发挥发物。残余物进行层析(EtOAc/己烷，1∶1→7∶3)得到2-氯-9-[-脱氧 -3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(2-丙基咪唑-1-基) 嘌呤(3.42g，95％)。EtOAc重结晶得到β-端基异构体(2.75g，76％)。
3-苄基-1-(2-氯-9-[2-脱氧-3.5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]嘌呤-6-基-2-丙基咪唑鎓碘化物的制备
2-氯-9-[-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6-(2- 丙基咪唑-1-基)嘌呤(0.615g，1mmol)用BnI在CH3CN(0.3M，40mL， 12mmol)中的溶液通过方法3得到3-苄基-1-{2-氯-9-[2-脱氧-3，5-二-O-(p- 甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]嘌呤-6-基}-2-丙基咪唑鎓碘化物(0.83 g，粗)：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.94(s，1H)，8.49(s，1H)， 8.00(d，J＝8.5Hz，2H)，7.88(d，J＝8.0Hz，2H)，7.81(s，1H)， 7.46-7.50(m，5H)，7.32(d，J＝8.0Hz，2H)，7.25(d，J＝8.0Hz， 2H)，6.67(t，J＝7.3Hz，1H)，5.75-5.85(m，3H)，4.71-4.82(m， 3H)，3.67-3.74(m，2H)，2.99-3.02(m，2H)，2.47(s，3H)，2.42 (s，3H)，1.75-1.81(m，2H)，1.17(t，J＝7.5Hz，3H)；HRMS m/z 705.2606(M+[C39H38ClN6O5＝705.2592])。
6-氨基-2-氯-9-(2-脱氧-β-D-赤型-呋喃戊糖基)嘌呤(2-氯-2′-脱氧腺苷)(克拉屈滨)的制备
3-苄基-1-{2-氯-9-[-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊 糖基]嘌呤-6-基}-2-丙基咪唑鎓碘化物(0.83g，粗)用NH3MeOH(26％， 50mL)在60℃下采用方法3处理，随后通过离子交换色谱(Dowex 1×2 [OHT]，H2O/MeOH)得到克拉屈滨(0.31g，定量)。由EtOH重结晶得 到白色固体(0.153g，54％)，将母液得到的残余物由H2O重结晶得到 第二批(0.015g，总共59％)：mp＞300℃；UV(MeOH)max 212，265 nm(ε24000，14600)，min 229nm(ε2000)；1H NMR(500MHz， DMSO-d6)δ8.36(s，1H)，7.83(br，2H)，6.26(t，J＝6.7Hz，1H)， 5.32(d，J-4.3Hz，1H)，4.97(t，J＝5.5Hz，1H)，4.38(S，1H)， 3.85(s，1H)，3.57-3.61(m，1H)，3.48-3.53(m，1H)，2.62-2.67 (m，1H)，2.25-2.29(m，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ157.5， 153.6，150.8，140.5，118.8，88.6，84.2，71.4，62.3，38.0；HRMS m/z 285.0615(M+[C10H12ClN5O3]＝285.0629).分析计算C10H12ClN5O3：C， 42.04；H，4.23；N，24.51.实测值：C，41.87；H，4.50；N，24.39。
6-氨基-2-氯-9-(2-脱氧-β-D-赤型-呋喃戊糖基)嘌呤(2-氯-2′-脱氧腺苷)(克拉屈滨)的制备
将2-氯-9-[2-脱氧-3，5-二-O-(p-甲苯酰基)-β-D-赤型-呋喃戊糖基]-6- (2-戊基咪唑-1-基)嘌呤(0.35g，0.55mmol)在甲醇氨(14％)中的 溶液在80℃下搅拌13小时。蒸发挥发物，油性残余物用CH2Cl2(10mL) 萃取除去亲脂性副产物。将半固体残余物溶解在丙酮(并且加入少量的 MeOH-如果必要)，蒸发挥发物，使该半固体结晶(～1h)。此物质用 CH2Cl2(10mL)萃取并干燥。所得2-氯-2′-脱氧腺苷(白色粉末；113mg， 70％)通过1H NMR分析纯化。由浓缩萃取液通过色谱 (EtOAc→EtOAc/MeOH，10∶1)、随后通过类似的萃取程序回收附加量 的克拉屈滨(～24mg，15％；含有痕量的α-端基异构体)。