技术领域
本发明涉及一种去除寄生于植株体内的内生菌的方法,特别是一种植物内生菌脱除方 法。
背景技术
在植物组织培养中,首先应采取某一种植物的茎、芽、叶等作为外植体进行表面消毒 处理后接种于试管中培养,初期培养中经常不断观察,凡有杂菌污染的应即时去除,最后 留下的纯培养可继续培养后建立该植物的无菌系进入组培扩繁生产。但表面消毒处理只能 对外植体表面的各种细菌、真菌等有害微生物进行杀灭,而对寄生于植株体内的部分细菌 和真菌等内生菌是无效的。在木本植物和长期人工剪枝常规扦插的植物中,内生菌的侵染 更为严重,仅采用表面消毒一般无法得到纯培养。从而限制了组培扩繁试验和育苗生产的 开展。
发明内容
本发明的目的在于提供一种植物内生菌脱除方法,采用该方法能有效地杀灭寄生在植 物植株内的有害菌,保证植物的组培扩繁得以成功实现。
本发明的目的是这样实现的:一种植物内生菌脱除方法,将需组培的植物栽入花盆中, 放入大棚室内培养成活,然后每隔5-7天用600倍的多菌灵杀菌剂溶液对植株进行灌根 和喷雾处理,药剂处理期间不能浇水喷水,连续处理三次后,即可开始采外植体进行组培。
采用本发明的方法对内生菌侵染严重的植物植株进行处理后,在采外植体组培接种 中,植株内生菌污染率降至10%以下,能顺利地得到植株纯培养物。本发明的方法简单实 用,效果显著,突破了内生菌侵染限制某些植物不能进行组培扩繁的难点。
具体实施方式
实施例:植物内生菌脱除方法如下:
(一)带土挖取三个品种的木本植物,每品种两株,栽入大花盆中,放在大棚室内培 育成活。
(二)用600倍多菌灵溶液12升,每株(共6株)灌根1.5升,同时用余下3升药 液将6株植株的枝、叶全部喷雾处理。
(三)按上述方法每5-7天处理一次,以土壤发干植株需浇水为准,处理期间不能喷 灌清水或其他营养液等。
(四)连续处理三次后分别采三品种外植体组培,内生菌污染率分别降为31%、20%、 12.7%,处理效果十分显著,已比较顺利的得到了三个植物品种的纯培养。
(五)继续处理到七次后再分别采外植体组培,内生菌污染率已分别下降为10.5%、 6.1%、4.3%,处理效果极其显著。
对三个品种茶树进行了植物的组培试验中,未用本发明的方法就采外植体做了三次试 验,内生菌污染率为99.6%,余下的几株也慢慢褐化死亡。按本发明的方法对三个品种茶 树连续处理三次后采外植体组培接种,三品种内生菌污染率分别降为31%、20%、12.7 %,连续处理到第七次后再采外植体组培时,内生菌污染率降至10%以下,很顺利地得到 了纯培养物。其三品种茶树内生菌污染试验比较见表一。
表一 三品种茶树内生菌污染比较
在连续两年的花卉组培中,凡是内生菌侵染严重的品种,首先经本发明的技术方法处 理3-5次后再采外植体组培,均能比较顺利地获得纯培养物。