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1、(10)授权公告号 CN 102919602 B (45)授权公告日 2013.09.18 CN 102919602 B *CN102919602B* (21)申请号 201210448432.X (22)申请日 2012.11.12 A23K 1/18(2006.01) A23K 1/14(2006.01) A23K 1/175(2006.01) A23K 1/00(2006.01) (73)专利权人 宁波市鄞州锐坚化工科技有限公 司 地址 315100 浙江省宁波市鄞州区天童北路 1388 号 408 室 (72)发明人 刘云香 (54) 发明名称 一种家禽饲料及其制备方法 (57) 摘要。
2、 本发明一种家禽饲料及其制备方法, 将收集 的微藻湿菌体依次经过热水和离心处理, 得到上 清液 A 和沉淀 A ; 沉淀 A 依次经过加酶和离心处 理, 得到上清液 B 和沉淀 B ; 将上清液 A 和上清液 B混合后进行浓缩, 并加4冷乙醇静置12小时以 上, 将混合液进行过滤得到粗多糖沉淀 ; 所得粗 多糖沉淀加水溶解, 脱蛋白处理, 分离成蛋白沉淀 和脱蛋白的多糖溶液, 蛋白沉淀通过冷冻干燥或 烘干得到粗蛋白产品, 从沉淀 B 中分离出含高蛋 白产物的中间菌体, 按照以下质量比例进行混合 制成家禽饲料 :5-10 份得到的粗蛋白产品和 / 或 5-10 份中间菌体经过干燥后的高蛋白产物、。
3、 5-22 份豆粕、 30-40 份玉米粉、 4-8 份大青叶粉、 1-3 份 葡萄糖、 4-5 份大蒜素、 1-2 份食盐、 1-2 份碳酸钙 以及 0.5-1 份乳酸。 (51)Int.Cl. 审查员 陈斌 权利要求书 1 页 说明书 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书4页 (10)授权公告号 CN 102919602 B CN 102919602 B *CN102919602B* 1/1 页 2 1. 一种家禽饲料制备方法, 包括以下步骤 : 步骤 1 : 将微藻湿菌体依次经过热水处理和离心处理, 得到上清液 A 和沉淀 A ; 其中,。
4、 热 水与微藻湿菌体的质量比为 2030 : 1 ; 步骤 2 : 沉淀 A 依次经过加酶处理和离心处理, 得到上清液 B 和沉淀 B ; 其中, 沉淀 A 和 酶的质量比为 40-100 : 1 ; 步骤3 : 将上清液A和上清液B混合后进行浓缩, 并加4冷乙醇混合12小时以上, 将混 合液进行过滤得到粗多糖沉淀 ; 其中, 上清液 A 和上清液 B 的总体积浓缩到原体积的 1/5 1/4, 加冷乙醇的体积是浓缩后上清液 A 和上清液 B 总体积的 3-5 倍 ; 步骤 4 : 步骤 3 中所得粗多糖沉淀加水溶解, 脱蛋白处理, 分离成蛋白沉淀和脱蛋白的 多糖溶液, 蛋白沉淀通过冷冻干燥或烘。
5、干得到粗蛋白产品 ; 步骤 5 : 将步骤 2 中所得沉淀 B 的菌悬液调节 pH 值为 10-12 后, 70-80保温 1-2h, 然 后加入 0.8% 浓度的氯化钠溶液以及正己烷与乙醇的混合液, 最终使正己烷 : 乙醇 : 水的体 积比为 2 : 4 : 1.5, 震荡 10min, 静置分成三层从上至下依次为 : 正己烷相 A、 中间菌体相以及 醇水相 ; 步骤 6 : 按照以下质量比例进行混合制成家禽饲料 :5-10 份步骤 4 得到的粗蛋白产品 和/或5-10份步骤5中间菌体经过干燥后的高蛋白产物、 5-22份豆粕、 30-40份玉米粉、 4-8 份大青叶粉、 1-3 份葡萄糖、 。
6、4-5 份大蒜素、 1-2 份食盐、 1-2 份碳酸钙以及 0.5-1 份乳酸。 2. 根据权利要求 1 所述家禽饲料制备方法, 其特征在于 : 微藻湿菌体为小球藻菌体、 螺 旋藻菌体或栅藻菌体。 3. 根据权利要求 1 所述家禽饲料制备方法, 其特征在于 : 步骤 1 中的热水温度和处理 时间分别为 90-100和 0.5-2h。 4. 根据权利要求 1 所述家禽饲料制备方法, 其特征在于 : 步骤 2 中的酶选自中性蛋白 酶、 碱性蛋白酶以及纤维素酶中的一种或多种组合 ; 纤维素酶酶活为 1200-1500U/g, 中性 蛋白酶酶活为 59000-60000U/g, 碱性蛋白酶酶活为 21。
7、05-2.02105U/g。 5. 根据权利要求 1 至 4 中任何一项所述家禽饲料制备方法, 其特征在于 : 在步骤 6 最 终所得的家禽饲料中还添加微量元素。 6. 根据权利要求 5 所述家禽饲料制备方法, 其特征在于 : 微量元素的质量份数按照以 下比例 : 0.30.5 份硫酸铁、 0.2-1.3 份硫酸锰、 0.2-0.9 份氯化钻、 0.4-2 份硫酸锌以及 0.11 份碘酸钙。 7. 一种根据权利要求 1 至 6 任何一项制备方法制得的家禽饲料。 8. 权利要求 7 所述的家禽饲料, 其特征在于 : 所述家禽饲料适用对象为鸡、 鸭或鹅。 权 利 要 求 书 CN 10291960。
8、2 B 2 1/4 页 3 一种家禽饲料及其制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种家禽饲料及其制备方法, 尤其是一种可以供猪、 牛或羊食用的家 禽饲料及其制备方法。 背景技术 0002 家禽饲料向用麦子、 稻谷或米糠、 麸皮。60 年代后, 集体禽场始用配合饲料, 一般 饲料组成 : 能量饲料, 米糠、 豆萁糠、 柴糠和麸皮等, 占 50 60; 植物性蛋白质饲料, 豆饼、 菜籽饼和棉仁饼, 占 10 20 ; 家禽性蛋白质饲料。用下脚海鱼煮熟拌入, 占 2 3 ; 维 生素, 拌以青菜、 菜皮、 青草等。实际配料无严格标准, 大致以饲料供应情况而定。引进白洛 克、 罗斯鸡种后, 配料标。
9、准要求严格 : 玉米、 小麦粉、 大麦粉、 碎米等能量饲料, 占 60 70, 加下脚油 3, 弥补粮食饲料能量不足 ; 植物性蛋白质饲料, 豆饼为主, 辅以棉仁饼或菜饼, 占 15 25; 家禽性蛋白质饲料, 改用鱼粉、 血粉、 蚕蛹粉等, 占 7 10; 矿物质, 骨粉、 贝 壳粉、 石粉等, 占 2 7 ; 维生素, 50 公斤饲料加 5 克, 不用青饲料, 另加微量元素。1 0003 但是, 现有家禽饲料原料主要都是来自于粮食作物, 没有使用藻类作为原材料, 造 成了大量的粮食浪费, 不利于人类生存长期的需求。 发明内容 0004 本发明设计了一种家禽饲料及其制备方法, 其解决的技术问。
10、题是 (1) 为了保证现 有家禽饲料中的蛋白含量需要使用大量的豆饼和玉米, 并且不易被家禽充分吸收。 (2) 现有 家禽饲料都是来自于粮食作物, 没有来自于藻类, 造成了大量的粮食浪费, 不利于人类生存 的需求。 0005 为了解决上述存在的技术问题, 本发明采用了以下方案 : 0006 一种家禽饲料制备方法, 包括以下步骤 : 0007 步骤 1 : 将微藻或微藻湿菌体依次经过热水处理和离心处理, 得到上清液 A 和沉淀 A ; 其中, 热水与微藻或微藻湿菌体的质量比为 2030 : 1 ; 0008 步骤 2 : 沉淀 A 依次经过加酶处理和离心处理, 得到上清液 B 和沉淀 B ; 其中。
11、, 沉淀 A 和酶的质量比为 40-100 : 1 ; 0009 步骤 3 : 将上清液 A 和上清液 B 混合后进行浓缩, 并加 4冷乙醇混合 12 小时以 上, 将混合液进行过滤得到粗多糖沉淀 ; 其中, 上清液 A 和上清液 B 的总体积浓缩到原体积 的 1/51/4, 加冷乙醇的体积是浓缩后上清液 A 和上清液 B 总体积的 3-5 倍 ; 0010 步骤 4 : 步骤 3 中所得粗多糖沉淀加水溶解, 脱蛋白处理, 分离成蛋白沉淀和脱蛋 白的多糖溶液, 蛋白沉淀通过冷冻干燥或烘干得到粗蛋白产品 ; 0011 步骤5 : 将步骤2中所得沉淀B的菌悬液调节pH值为10-12后, 70-80。
12、保温1-2h, 然后加入 0.8% 浓度的氯化钠溶液以及正己烷与乙醇的混合液, 最终使正己烷 : 乙醇 : 水的 体积比为 2 : 4 : 1.5, 震荡 10min, 静置分成三层从上至下依次为 : 正己烷相 A、 中间菌体相以 及醇水相 ; 说 明 书 CN 102919602 B 3 2/4 页 4 0012 步骤 6 : 按照以下质量比例进行混合制成家禽饲料 :5-10 份步骤 4 得到的粗蛋白 产品和 / 或 5-10 份步骤 5 中间菌体经过干燥后的高蛋白产物、 5-22 份豆粕、 30-40 份玉米 粉、 4-8份大青叶粉、 1-3份葡萄糖、 4-5份大蒜素、 1-2份食盐、 1。
13、-2份碳酸钙以及0.5-1份乳 酸。 0013 进一步, 微藻为为小球藻、 螺旋藻或栅藻 ; 微藻湿菌体为小球藻菌体、 螺旋藻菌体 或栅藻菌体。 0014 进一步, 步骤 1 中的热水温度和处理时间分别为 90-100和 0.5-2h。 0015 进一步, 步骤 2 中的酶选自中性蛋白酶、 碱性蛋白酶以及纤维素酶中的一种或多 种组合 ; 纤维素酶酶活为 1200-1500U/g, 中性蛋白酶酶活为 59000-60000U/g, 碱性蛋白酶 酶活为 2105-2.02105U/g。 0016 进一步, 在步骤 6 最终所得的家禽饲料中还添加微量元素。 0017 进一步, 微量元素的质量份数按照。
14、以下比例 : 0.30.5 份硫酸铁、 0.2-1.3 份硫酸 锰、 0.2-0.9 份氯化钻、 0.4-2 份硫酸锌以及 0.11 份碘酸钙。 0018 该发明还包括通过上述 6 种制备方法制得的家禽饲料。 0019 该发明制得的家禽饲料适用对象为鸡、 鸭或鹅。 0020 该家禽饲料及其制备方法与传统家禽饲料及其制备方法相比, 具有以下有益效 果 : 0021 (1) 本发明通过从藻类中分离出粗蛋白产品和高蛋白产物, 使得家禽饲料中的蛋 白含量高于传统饲料, 为家禽饲养提供足够的蛋白质, 同时该蛋白质的来源与藻类, 因而可 以减少玉米和豆粕使用量。 0022 (2) 本发明设计用热水处理作为。
15、预处理手段, 增大细胞通透性, 适当破坏细胞壁结 构, 减少酶法酶法作用时间和酶的使用量, 通过热水抽提和酶解作用, 得到产品多糖和少量 的粗蛋白。 0023 (3) 本发明除了生产家禽饲料之外, 其副产品脱蛋白后的多糖溶液中可以进行脱 色得到精制多糖。 0024 (4) 本发明除了生产家禽饲料之外, 其副产品正己烷相中可以得到黄色素。 0025 (5) 本发明中增加微量元素可以满足家禽生长发育对各种矿物质元素的需要, 尤 其可以使家禽不受鸡瘟影响。 具体实施方式 0026 结合下列实施例, 对本发明做进一步说明 : 0027 实施例 1 : 选用小球藻。 0028 将小球藻发酵液以 4000。
16、rpm/min 离心 10min, 去除上清液获得小球藻湿菌体, 称取 小球藻湿菌体 1.0g 于 100ml 三角烧瓶中, 加入 25ml 去离子水, 90加热 1.5h, 冷却, 离心 得上清液 A 和沉淀 A。称取 0.065g 纤维素酶, 0.035g 中性蛋白酶, 纤维素酶酶活为 1200U/ g, 中性蛋白酶酶活为 60000U/g, 加入 pH=5 的柠檬酸 - 柠檬酸钠缓冲溶液, pH=5 是实验中选 定的最优酶作用的 pH 反应体系。定容至 100ml, 取 25ml 酶溶液加入到小球藻湿菌体沉淀 A 中, 水解温度为 42, 搅拌 4h, 90灭酶 10min。将水解后的悬。
17、浊液进行 4000r/min 下离心 10min, 得到上清液 B 和沉淀 B。 说 明 书 CN 102919602 B 4 3/4 页 5 0029 合并上清液 A 和上清液 B, 浓缩该上清混合液至原体积的 1/5, 加入 3 倍体积的冷 乙醇 4震荡混合均匀, 静置 12h, 过滤得粗多糖沉淀。 0030 取 10ml 水溶解粗多糖沉淀, 用三氯乙酸调节 pH 到 3, 混匀, 静置 2h, 加入 15 倍三 氯乙酸体积的正丁醇, 搅拌, 静置 1h, 离心, 水溶液回收多糖, 重复 2 次。多糖提取率 82.3%。 用水溶解多糖, 以 2BV/h 的流速对 2.5mg/ml 的粗多糖。
18、溶液进行吸附脱色, 测得色素脱除率 92.4%, 多糖保留率为 88.97%。pH=3 时蛋白质溶解度较低且多糖损失较小, 是最优反应体 系。正丁醇的使用也是为了降低蛋白质的水溶性, 粗蛋白产品从而和多糖分离。此处单独 使用 TCA 方法也可以, 增加重复提取的次数。 0031 沉淀 B 的菌悬液用 2mol/L 的氢氧化钠调节 pH 为 11, 70反应 60min, 冷却, 加入 适量 0.8% 的氯化钠溶液和正己烷与乙醇的混合液正己烷与乙醇的体积比为 2 : 4, 使最终正 己烷 : 乙醇 : 水的体积比为 2 : 4 : 1.5, 震荡 10min, 收集正己烷相, 再加入初始 1/3。
19、 体积的正 己烷重复两次, 正己烷相 A 加无水硫酸钠去除微量水, 回收溶剂并得到胡萝卜素等黄色素。 中间层悬浮的菌体经干燥后的高蛋白产物其粗蛋白含量为 38.7%, 十八水解氨基酸含量充 分, 完全可以作为富含蛋白、 氨基酸的成分当作蛋白饲料成为家禽膳食饲料的部分替代品。 0032 选取 5 份粗蛋白产品、 10 份高蛋白产物、 20 份豆粕、 30 份玉米粉、 5 份大青叶粉、 3 份葡萄糖、 4份大蒜素、 2份食盐、 1份碳酸钙以及1份乳酸, 通过搅拌装置使得它们进行充分 混合, 即可成为优质的家禽饲料。 0033 实施例 2 : 选用栅藻。 0034 将栅藻发酵液以 4000rpm/m。
20、in 离心 10min, 去除上清获得栅藻菌体, 称取栅藻湿菌 体1.0g于100ml三角烧瓶中, 加入25ml去离子水, 90加热1.5h, 冷却, 离心得上清液A和 沉淀 A。称取 0.075g 纤维素酶, 0.025g 碱性蛋白酶, 纤维素酶酶活为 1200U/g, 碱性蛋白酶 酶活为 2105U/g, 加入 pH=4 的柠檬酸 - 柠檬酸钠缓冲溶液定容至 100ml, 取 25ml 酶溶液 加入到栅藻湿菌体沉淀A中, 水解温度为40, 搅拌4h, 90灭酶10min, 将水解后的悬浊液 进行 4000r/min 下离心 10min, 得到上清液 B 和沉淀 B。 0035 合并上清液 。
21、A 和上清液 B, 浓缩该上清混合液至原体积的 1/5, 加入 3 倍体积的冷 乙醇 4震荡混合均匀, 静置 12h, 过滤得粗多糖沉淀。 0036 取 10ml 水溶解粗多糖沉淀, 用三氯乙酸调节 pH 到 3, 混匀, 静置 2h, 加入 15 倍三 氯乙酸体积的正丁醇, 搅拌, 静置 1h, 离心, 水溶液回收多糖, 重复 2 次。多糖提取率 82.3%。 用水溶解多糖, 以 2BV/h 的流速对 2.5mg/ml 的粗多糖溶液进行吸附脱色, 测得色素脱除率 92.4%, 多糖保留率为 88.97%。pH=3 时蛋白质溶解度较低且多糖损失较小, 是最优反应体 系。正丁醇的使用也是为了降低。
22、蛋白质的水溶性, 粗蛋白产品从而和多糖分离。此处单独 使用 TCA 方法也可以, 增加重复提取的次数。 0037 沉淀 B 的菌悬液用 2mol/L 的氢氧化钠调节 pH 为 11, 70反应 60min, 冷却, 加入 适量 0.8% 的氯化钠溶液和正己烷与乙醇的混合液正己烷与乙醇的体积比为 2 : 4, 使最终正 己烷 : 乙醇 : 水的体积比为 2 : 4 : 1.5, 震荡 10min, 收集正己烷相, 再加入初始 1/3 体积的正 己烷重复两次, 正己烷相 A 加无水硫酸钠去除微量水, 回收溶剂并得到胡萝卜素等黄色素。 中间层悬浮的菌体经干燥后的高蛋白产物其粗蛋白含量为 38.7%,。
23、 十八水解氨基酸含量充 分, 完全可以作为富含蛋白、 氨基酸的成分当作蛋白饲料成为家禽膳食饲料的部分替代品。 0038 选取 10 份高蛋白产物、 22 份豆粕、 40 份玉米粉、 7 份大青叶粉、 2 份葡萄糖、 4 份大 说 明 书 CN 102919602 B 5 4/4 页 6 蒜素、 1 份食盐、 2 份碳酸钙以及 1 份乳酸, 通过搅拌装置使得它们进行充分混合, 即可成为 优质的家禽饲料。 0039 实施例 3 : 选用螺旋藻。 0040 将螺旋藻发酵液以 4000rpm/min 离心 10min, 去除上清获得螺旋菌体, 称取螺旋湿 菌体 0.8g 于 100ml 三角烧瓶中, 。
24、加入 25ml 去离子水, 90加热 1.5h, 冷却, 离心得上清液 A 和沉淀 A。称取 0.067g 中性蛋白酶, 碱性蛋白酶酶活为 60000U/g, 加入 pH=7 的柠檬酸 - 柠 檬酸钠缓冲溶液定容至100ml, 取20ml酶溶液加入到栅藻湿菌体中, 水解温度为42, 搅拌 6h, 90灭酶 10min。将水解后的悬浊液进行 4000r/min 下离心 10min, 得到上清液 B 和沉 淀 B。 0041 合并上清液 A 和上清液 B, 浓缩该上清混合液至原体积的 1/5, 加入 3 倍体积的冷 乙醇 4震荡混合均匀, 静置 12h, 过滤得粗多糖沉淀。 0042 取 10ml。
25、 水溶解粗多糖沉淀, 用三氯乙酸调节 pH 到 3, 混匀, 静置 2h, 加入 15 倍三 氯乙酸体积的正丁醇, 搅拌, 静置 1h, 离心, 水溶液回收多糖, 重复 2 次。多糖提取率 82.3%。 用水溶解多糖, 以 2BV/h 的流速对 2.5mg/ml 的粗多糖溶液进行吸附脱色, 测得色素脱除率 92.4%, 多糖保留率为 88.97%。pH=3 时蛋白质溶解度较低且多糖损失较小, 是最优反应体 系。正丁醇的使用也是为了降低蛋白质的水溶性, 粗蛋白产品从而和多糖分离。此处单独 使用 TCA 方法也可以, 增加重复提取的次数。 0043 沉淀 B 的菌悬液用 2mol/L 的氢氧化钠调。
26、节 pH 为 11, 70反应 60min, 冷却, 加入 适量 0.8% 的氯化钠溶液和正己烷与乙醇的混合液正己烷与乙醇的体积比为 2 : 4, 使最终正 己烷 : 乙醇 : 水的体积比为 2 : 4 : 1.5, 震荡 10min, 收集正己烷相, 再加入初始 1/3 体积的正 己烷重复两次, 正己烷相 A 加无水硫酸钠去除微量水, 回收溶剂并得到胡萝卜素等黄色素。 中间层悬浮的菌体经干燥后的高蛋白产物其粗蛋白含量为 38.7%, 十八水解氨基酸含量充 分, 完全可以作为富含蛋白、 氨基酸的成分当作蛋白饲料成为家禽膳食饲料的部分替代品。 0044 选取 10 份高蛋白产物、 20 份豆粕、 35 份玉米粉、 8 份大青叶粉、 1 份葡萄糖、 8 份大 蒜素、 2 份食盐、 1 份碳酸钙、 0.8 份乳酸、 0.3 份硫酸铁、 0.2 份硫酸锰、 0.2 份氯化钻、 0.4 份 硫酸锌以及 0.1 份碘酸钙, 通过搅拌装置使得它们进行充分混合, 即可成为优质的家禽饲 料。 0045 上面结合实施例对本发明进行了示例性的描述, 显然本发明的实现并不受上述方 式的限制, 只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种改进, 或未经改进将本发 明的构思和技术方案直接应用于其它场合的, 均在本发明的保护范围内。 说 明 书 CN 102919602 B 6 。