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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610164260.1 (22)申请日 2016.03.22 A61K 36/8884(2006.01) A61K 36/185(2006.01) A61P 15/08(2006.01) (71)申请人 吴正锋 地址 325300 浙江省温州市文成县百丈漈镇 篁庄村 (72)发明人 吴正锋 (54) 发明名称 一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取物 (57) 摘要 本发明公开了一种提高母牛繁殖性能的中药 续断提取物, 该续断提取物通过如下方法制备 : (a) 将干燥的续断和雪里见混合, 粉碎, 用 70 80乙醇溶液热回流提取, 合并。
2、提取液, 浓缩至无 醇味得到乙醇提取浓缩液 ; (b)将步骤(a)所得乙 醇提取浓缩液用水稀释, 依次用石油醚、 乙酸乙酯 和水饱和的正丁醇萃取, 减压浓缩, 分别得到石油 醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物 ; (c) 正丁醇萃取物用水溶解, 过滤, 用 D101 型大孔树 脂富集活性成分, 先用 5 15乙醇冲洗 6 10 个柱体积除去大极性成分, 再用7080乙醇洗 脱 8 12 个柱体积, 收集 70 80乙醇洗脱液, 减压浓缩 ; 其中, 雪里见占续断与雪里见总重的 5 15。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 。
3、说明书4页 CN 105560669 A 2016.05.11 CN 105560669 A 1.一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取物, 其特征在于, 通过如下方法制备: (a)将 干燥的续断和雪里见混合, 粉碎, 用7080乙醇溶液热回流提取, 合并提取液, 浓缩至无 醇味得到乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释, 依次用石油醚、 乙 酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取, 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁 醇萃取物; (c)正丁醇萃取物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用5 15乙醇冲洗610个柱体积除去大极性成分, 再用70。
4、80乙醇洗脱812个柱体积, 收 集7080乙醇洗脱液, 减压浓缩; 其中, 雪里见占续断与雪里见总重的515。 2.根据权利要求1所述的中药续断提取物, 其特征在于, 通过如下方法制备: (a)将干燥 的续断和雪里见混合, 粉碎, 用75乙醇溶液热回流提取, 合并提取液, 浓缩至无醇味得到 乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释, 依次用石油醚、 乙酸乙酯和 水饱和的正丁醇萃取, 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取 物; (c)正丁醇萃取物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用10乙醇冲洗 8个柱体积除去大极性成分, 。
5、再用75乙醇洗脱10个柱体积, 收集75乙醇洗脱液, 减压浓 缩; 其中, 雪里见占续断与雪里见总重的10。 3.根据权利要求1所述的中药续断提取物, 其特征在于, 通过如下方法制备: (a)将干燥 的续断和雪里见混合, 粉碎, 用70乙醇溶液热回流提取, 合并提取液, 浓缩至无醇味得到 乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释, 依次用石油醚、 乙酸乙酯和 水饱和的正丁醇萃取, 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取 物; (c)正丁醇萃取物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用5乙醇冲洗 10个柱体积除去大极性成分, 再用。
6、70乙醇洗脱12个柱体积, 收集70乙醇洗脱液, 减压浓 缩; 其中, 雪里见占续断与雪里见总重的5。 4.根据权利要求1所述的中药续断提取物, 其特征在于, 通过如下方法制备: (a)将干燥 的续断和雪里见混合, 粉碎, 用80乙醇溶液热回流提取, 合并提取液, 浓缩至无醇味得到 乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释, 依次用石油醚、 乙酸乙酯和 水饱和的正丁醇萃取, 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取 物; (c)正丁醇萃取物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用15乙醇冲洗 6个柱体积除去大极性成分, 再用80乙。
7、醇洗脱8个柱体积, 收集80乙醇洗脱液, 减压浓 缩; 其中, 雪里见占续断与雪里见总重的15。 5.权利要求14任一所述中药续断提取物在提高母牛繁殖性能方面的应用。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 105560669 A 2 一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取物 技术领域 0001 本发明属于畜牧业, 涉及兽药, 具体涉及一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取 物, 该提取物可明显提高母牛的繁殖性能。 背景技术 0002 在繁殖母牛饲养过程当中, 繁殖母牛饲料中蛋白质、 维生素和矿物质等营养物质 缺乏或者营养不均衡, 造成母牛子宫壁变薄、 子宫收缩减弱、 卵巢变小并呈静止状态、 不发 。
8、情。 通过饲喂中药提取物可以提高母牛的营养水平和发情、 排卵。 0003 中药续断为川续断的根。 810月采挖, 洗净泥沙, 除去根头、 尾梢及细根, 阴干或 炕干。 原植物川续断为多年生草本, 高6090厘米。 根长锥形, 主根明显, 或数条并生, 外皮 黄褐色, 具细长须根。 茎直立, 多分枝, 具棱和浅槽, 生细柔毛, 棱上疏生刺毛。 叶对生; 基生 叶有长柄, 叶片羽状深裂, 先端裂片较大, 叶端惭尖, 边缘有粗锯齿; 茎生叶多为3裂, 中央裂 片最大, 椭圆形至卵状披针形, 长1113厘米, 宽46厘米, 两侧裂片较小, 边缘有粗锯齿, 两面被白色贴伏柔毛; 茎梢的叶3裂或全缘, 具。
9、短柄, 毛较少。 花小, 多数, 成球形头状花序; 总苞片数枚, 狭披针形, 每花外有一苞片, 阔倒卵形; 副萼具4钝齿, 密生柔毛; 萼浅盘状具4 齿, 略呈卵状三角形; 花冠白色或浅黄色, 具4枚较深的裂片, 花冠管基部渐狭, 外侧密被下 向的长柔毛; 雄蕊4, 着生于花冠管之上部, 花丝细长, 伸出花冠外; 雌蕊1, 柱头短杆状而扁。 瘦果椭圆楔形, 通常外被萼片, 有明显4棱, 淡褐色。 花期89月。 果期910月。 野生于山野 及路旁。 主要分布于四川、 湖北、 湖南、 云南、 西藏等地。 0004 雪里见为天南星科植物雪里见的块茎。 初春采收。 原植物雪里见为多年生草本, 高 20。
10、40厘米。 块茎长圆形, 周围有肉芽, 有多数须状根。 块茎顶部生1叶, 有长叶鞘; 叶柄肉 质, 有紫斑; 叶片为鸟趾状, 5小叶, 初为3小叶, 小叶片长椭圆形或卵状披针形, 长1214厘 米, 宽66.5厘米, 先端锐尖, 基部圆形或阔楔形, 下面有紫斑。 花单性, 雌雄异株; 肉穗花 序; 具佛焰苞, 雄花细小多数; 雌花密集序上, 子房1室。 结浆果。 生于深山岩洞口。 分布贵州 等地。 发明内容 0005 本发明的目的是提供一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取物, 该提取物可明显 提高母牛的繁殖性能。 0006 上述目的是通过如下技术方案得以实现的: 0007 一种提高母牛繁殖性能的。
11、中药续断提取物, 通过如下方法制备: (a)将干燥的续断 和雪里见混合, 粉碎, 用7080乙醇溶液热回流提取, 合并提取液, 浓缩至无醇味得到乙 醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释, 依次用石油醚、 乙酸乙酯和水 饱和的正丁醇萃取, 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物; (c)正丁醇萃取物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用515乙醇冲洗 610个柱体积除去大极性成分, 再用7080乙醇洗脱812个柱体积, 收集7080乙 说 明 书 1/4 页 3 CN 105560669 A 3 醇洗脱液, 减压浓缩; 其中。
12、, 雪里见占续断与雪里见总重的515。 0008 进一步地, 所述的中药续断提取物通过如下方法制备: (a)将干燥的续断和雪里见 混合, 粉碎, 用75乙醇溶液热回流提取, 合并提取液, 浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释, 依次用石油醚、 乙酸乙酯和水饱和的正丁醇 萃取, 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物; (c)正丁醇萃取 物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用10乙醇冲洗8个柱体积除去大 极性成分, 再用75乙醇洗脱10个柱体积, 收集75乙醇洗脱液, 减压浓缩; 其中, 雪里见占 续断与。
13、雪里见总重的10。 0009 进一步地, 所述的中药续断提取物通过如下方法制备: (a)将干燥的续断和雪里见 混合, 粉碎, 用70乙醇溶液热回流提取, 合并提取液, 浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释, 依次用石油醚、 乙酸乙酯和水饱和的正丁醇 萃取, 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物; (c)正丁醇萃取 物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用5乙醇冲洗10个柱体积除去大 极性成分, 再用70乙醇洗脱12个柱体积, 收集70乙醇洗脱液, 减压浓缩; 其中, 雪里见占 续断与雪里见总重的5。 0。
14、010 进一步地, 所述的中药续断提取物通过如下方法制备: (a)将干燥的续断和雪里见 混合, 粉碎, 用80乙醇溶液热回流提取, 合并提取液, 浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释, 依次用石油醚、 乙酸乙酯和水饱和的正丁醇 萃取, 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物; (c)正丁醇萃取 物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用15乙醇冲洗6个柱体积除去大 极性成分, 再用80乙醇洗脱8个柱体积, 收集80乙醇洗脱液, 减压浓缩; 其中, 雪里见占 续断与雪里见总重的15。 0011 上述中药续断提。
15、取物在提高母牛繁殖性能方面的应用。 0012 本发明的优点: 0013 本发明提供的提高母牛繁殖性能的中药续断提取物制备方法简单, 可工业化生 产; 该提取物可明显提高母牛的繁殖性能。 具体实施方式 0014 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容, 但并不以此限定本发明保护范 围。 尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明, 本领域的普通技术人员应当理解, 可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换, 而不脱离本发明技术方案的实质和范围。 0015 实施例1: 续断提取物的制备 0016 (a)将5kg干燥的续断和雪里见(占总重10)混合, 粉碎, 用75乙醇溶液热回流 提取(20L3次。
16、), 合并提取液, 浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇 提取浓缩液用水稀释(3L), 依次用石油醚(3L3次)、 乙酸乙酯(3L3次)和水饱和的正丁 醇萃取(3L3次), 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物; (c)正丁醇萃取物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用10乙醇冲洗8个 柱体积除去大极性成分, 再用75乙醇洗脱10个柱体积, 收集75乙醇洗脱液, 减压浓缩即 得。 说 明 书 2/4 页 4 CN 105560669 A 4 0017 实施例2: 续断提取物的制备 0018 (a)将5kg干燥的续断和雪里。
17、见(占总重5)混合, 粉碎, 用70乙醇溶液热回流提 取(20L3次), 合并提取液, 浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇提 取浓缩液用水稀释(3L), 依次用石油醚(3L3次)、 乙酸乙酯(3L3次)和水饱和的正丁醇 萃取(3L3次), 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物; (c) 正丁醇萃取物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用5乙醇冲洗10个柱 体积除去大极性成分, 再用70乙醇洗脱12个柱体积, 收集70乙醇洗脱液, 减压浓缩即 得。 0019 实施例3: 续断提取物的制备 0020 (a)将5kg干燥的续。
18、断和雪里见(占总重15)混合, 粉碎, 用80乙醇溶液热回流 提取, 合并提取液(20L3次), 浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇 提取浓缩液用水稀释(3L), 依次用石油醚(3L3次)、 乙酸乙酯(3L3次)和水饱和的正丁 醇(3L3次)萃取, 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物; (c)正丁醇萃取物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用15乙醇冲洗6个 柱体积除去大极性成分, 再用80乙醇洗脱8个柱体积, 收集80乙醇洗脱液, 减压浓缩即 得。 0021 实施例4: 实施例1的对比, 不添加雪里见 0022 (。
19、a)将5kg干燥的续断粉碎, 用75乙醇溶液热回流提取(20L3次), 合并提取液, 浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释(3L), 依 次用石油醚(3L3次)、 乙酸乙酯(3L3次)和水饱和的正丁醇萃取(3L3次), 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物; (c)正丁醇萃取物用水溶解, 过 滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用10乙醇冲洗8个柱体积除去大极性成分, 再用 75乙醇洗脱10个柱体积, 收集75乙醇洗脱液, 减压浓缩即得。 0023 实施例5: 实施例1的对比, 雪里见占总重的20 0024 (a)将。
20、5kg干燥的续断和雪里见(占总重20)混合, 粉碎, 用75乙醇溶液热回流 提取(20L3次), 合并提取液, 浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液; (b)将步骤(a)所得乙醇 提取浓缩液用水稀释(3L), 依次用石油醚(3L3次)、 乙酸乙酯(3L3次)和水饱和的正丁 醇萃取(3L3次), 减压浓缩, 分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物; (c)正丁醇萃取物用水溶解, 过滤, 用D101型大孔树脂富集活性成分, 先用10乙醇冲洗8个 柱体积除去大极性成分, 再用75乙醇洗脱10个柱体积, 收集75乙醇洗脱液, 减压浓缩即 得。 0025 实施例6: 对母牛繁殖性能的影响 002。
21、6 一、 材料与方法 0027 1、 试验样品: 分别按照实施例15制备提取物15。 0028 2、 方法 0029 2.1 试验动物、 分组及饲养方法 0030 选择虽无生殖系统疾病、 无生殖系统畸形但却因营养不良导致卵巢呈静止状态、 不发情的中国西门塔尔母牛72头, 随机分成6组, 对照组12头, 试验组15每组12头。 对照组 饲喂基础草料, 试验组15分别在基础草料的基础上分别添加250g/t的提取物15。 说 明 书 3/4 页 5 CN 105560669 A 5 0031 试验为期1个月。 0032 2.2 统计指标 0033 统计试验期限内各组母牛发情数量和发情受配量, 计算各。
22、组母牛发情率和发情受 配率。 0034 二、 结果 0035 由表1可以看出, 试验组13与对照组相比, 母牛发情率和发情受配率均显著提 高, 差异显著(P0.05); 试验组4和5与对照组相比, 母牛发情率和发情受配率无显著性差 异(P0.05)。 具体见表1。 0036 表1 提取物对母牛发情率和发情受配率的影响 0037 0038 结果表明, 本发明提供的提取物可以显著提高母牛发情率和发情受配率。 0039 本发明提取物的上述作用与是否添加雪里见以及雪里见的加入量有关。 0040 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容, 但并不以此限定本发明的保护 范围。 本领域的普通技术人员应当理解, 可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换, 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。 说 明 书 4/4 页 6 CN 105560669 A 6 。