来源于竹子的天然物饲料添加剂.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201310013756.5

申请日:

20130114

公开号:

CN103070289B

公开日:

20140813

当前法律状态:

有效性:

有效

法律详情:

IPC分类号:

A23K1/14,A23K1/16

主分类号:

A23K1/14,A23K1/16

申请人:

浙江大学

发明人:

张英,黄骆镰,吴晓琴,李栋,姜文进

地址:

310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号

优先权:

CN201310013756A

专利代理机构:

杭州中成专利事务所有限公司

代理人:

金祺

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内容摘要

本发明公开了一种来源于竹子的天然物饲料添加剂,由以下质量份的成分组成:竹叶提取物1~4份、竹笋提取物1~2份和竹茹提取物1~2份;或者按照如下方法制备而得:按照干基质量比将竹叶1~4份、竹笋1~2份和竹茹1~2份混合后,得竹子混合物;将竹子混合物进行提取,所得的提取物为饲料添加剂。该饲料添加剂为黄色、棕黄色或浅黄色的粉末或颗粒制剂,带有竹子芳香,总酚含量8%~30?%,多糖含量5?%~15?%,三萜含量为3?%~10?%。该饲料添加剂兼具抗氧化剂、营养强化剂、免疫增强剂、脂代谢调节剂、动物产品品质改良剂、增味剂、防腐剂、诱食剂等多种功能。

权利要求书

1.来源于竹子的天然物饲料添加剂,其特征是:由以下质量份的成分组成:竹叶提取物、竹笋提取物和竹茹提取物各1份;该饲料添加剂用于肉鸡养殖,从而提高肉鸡的品质;竹叶提取物的制备方法为:取秋冬季节采集的含水率≤14%的毛竹干青叶粉碎至10目,每50kg加入纯净水500L热回流提取1.5h,过滤后将所得的滤液于真空度0.09Mpa和温度≤55℃的条件下真空浓缩至固形物质量含量为25%,于进风温度185℃和出风温度90℃的条件下喷雾干燥,得竹叶提取物4.1kg,为棕黄色粉末,总酚含量29.02%,多糖含量8.21%;竹笋提取物的制备方法为:取水煮笋罐头加工副产物――笋壳和笋头干粉,每50kg加入纯净水500L热回流提取2h,过滤后将所得的滤液真空浓缩至固形物含量30%,于真空度0.09Mpa和温度≤65℃的条件下真空干燥,得竹笋提取物5.3kg,为浅褐色粉末,含多糖23.31%,三萜2.30%;所述笋壳和笋头干粉为30目,含水率≤12%,笋壳和笋头的干重比为1:1.5;竹茹提取物的制备方法为:取竹材加工的副产物――竹刨花干燥成含水率≤10%后粉碎至10-20目,每50kg加入乙醇体积浓度为93-94%的食用酒精500L于10~25℃的常温浸提48h,过滤后将所得的滤液于真空度0.09Mpa和温度≤45℃的条件下真空浓缩回收溶剂,于功率密度为1w/g~2w/g、真空度为0.08Mpa和干燥时间为2h~3h的条件下真空微波干燥,得竹茹提取物2.38kg,为浅绿色粉末,含三萜11.76%,总酚8.90%。 2.来源于竹子的天然物饲料添加剂,其特征是:由以下质量份的成分组成:竹叶提取物1、竹笋提取物1份和竹茹提取物2份;该饲料添加剂用于蛋鸡养殖,从而提高鸡蛋的品质;竹叶提取物的制备方法为:取秋冬季节采集的含水率≤14%的毛竹干青叶粉碎至10目,每50kg加入纯净水500L热回流提取1.5h,过滤后将所得的滤液于真空度0.09Mpa和温度≤55℃的条件下真空浓缩至固形物质量含量为25%,于进风温度185℃和出风温度90℃的条件下喷雾干燥,得竹叶提取物4.1kg,为棕黄色粉末,总酚含量29.02%,多糖含量8.21%;竹笋提取物的制备方法为:取水煮笋罐头加工副产物――笋壳和笋头干粉,每50kg加入纯净水500L热回流提取2h,过滤后将所得的滤液真空浓缩至固形物含量30%,于真空度0.09Mpa和温度≤65℃的条件下真空干燥,得竹笋提取物5.3kg,为浅褐色粉末,含多糖23.31%,三萜2.30%;所述笋壳和笋头干粉为30目,含水率≤12%,笋壳和笋头的干重比为1:1.5;竹茹提取物的制备方法为:取竹材加工的副产物――竹刨花干燥成含水率≤10%后粉碎至10-20目,每50kg加入乙醇体积浓度为93-94%的食用酒精500L于10~25℃的常温浸提48h,过滤后将所得的滤液于真空度0.09Mpa和温度≤45℃的条件下真空浓缩回收溶剂,于功率密度为1w/g~2w/g、真空度为0.08Mpa和干燥时间为2h~3h的条件下真空微波干燥,得竹茹提取物2.38kg,为浅绿色粉末,含三萜11.76%,总酚8.90%。 3.来源于竹子的天然物饲料添加剂,其特征是:由以下质量份的成分组成:竹叶提取物1份、竹笋提取物2份和竹茹提取物1份;该饲料添加剂用于黄鱼养殖,从而提高黄鱼的品质;竹叶提取物的制备方法为:取秋冬季节采集的含水率≤14%的毛竹干青叶粉碎至10目,每50kg加入纯净水500L热回流提取1.5h,过滤后将所得的滤液于真空度0.09Mpa和温度≤55℃的条件下真空浓缩至固形物质量含量为25%,于进风温度185℃和出风温度90℃的条件下喷雾干燥,得竹叶提取物4.1kg,为棕黄色粉末,总酚含量29.02%,多糖含量8.21%;竹笋提取物的制备方法为:取水煮笋罐头加工副产物――笋壳和笋头干粉,每50kg加入纯净水500L热回流提取2h,过滤后将所得的滤液真空浓缩至固形物含量30%,于真空度0.09Mpa和温度≤65℃的条件下真空干燥,得竹笋提取物5.3kg,为浅褐色粉末,含多糖23.31%,三萜2.30%;所述笋壳和笋头干粉为30目,含水率≤12%,笋壳和笋头的干重比为1:1.5;竹茹提取物的制备方法为:取竹材加工的副产物――竹刨花干燥成含水率≤10%后粉碎至10-20目,每50kg加入乙醇体积浓度为93-94%的食用酒精500L于10~25℃的常温浸提48h,过滤后将所得的滤液于真空度0.09Mpa和温度≤45℃的条件下真空浓缩回收溶剂,于功率密度为1w/g~2w/g、真空度为0.08Mpa和干燥时间为2h~3h的条件下真空微波干燥,得竹茹提取物2.38kg,为浅绿色粉末,含三萜11.76%,总酚8.90%。

说明书

技术领域

本发明涉及一种来源于竹子的天然物饲料添加剂,属于动物饲料和养 殖技术领域。

背景技术

我国的饲料工业起步于19世纪70年代,到2011年饲料产量已超过1.5亿 吨。随着我国家禽、家畜、水产养殖业集约化程度的提高和疫病的频 发,以抗生素、合成药物和类固醇激素为代表的化学品普遍在饲料行 业中使用,虽在一定程度上提高了养殖业的生产效率,但也带来了许 多负面影响,如使养殖对象产生抗药性,并导致其免疫功能降低,食 用品质显著下降。同时,产品中大量抗生素、激素和化学药物的残留 威胁到人类健康,引起全球范围内对动物产品安全性的担忧。随着人 们“回归自然”、“天然环保”、“绿色消费”的理念渐成大势,对 开发天然、安全、营养、多功能的饲料添加剂的呼声越来越高,市场 也正在不断扩大。

中国素有“竹子王国”之称,拥有十分丰富的竹类资源,竹类产品在 我国乃至亚洲有着悠久的食用和药用历史。发明人自上世纪90年代初 开始研究竹子有效成分,从竹子不同部位中研发了以速溶竹叶粉、竹 叶黄酮、竹叶抗氧化物、竹茹三萜、竹笋甾醇和竹笋氨基酸肽为代表 的“竹取物”系列,已在食品、饮品、保健(功能)食品、天然药物 、以及食品添加剂和化妆品添加剂等领域得到广泛应用。近十年来, 对竹子化学素的科学研究和产品开发引起了业界的广泛重视,含有竹 子有效成分的各类健康产品不断涌现。

大量的研究表明,竹叶提取物以多酚类物质为主,其特征性化合物包 括以荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷为代表的碳苷黄酮和以对 香酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸为代表的植物酚酸,具有显著的生物 抗氧化活性和自由基清除能力,能有效调节机体的脂质代谢和能量代 谢,具有广谱抗菌、抑菌活性,同时带有典型的竹叶清香;竹笋提取 物主要含多糖、寡肽、氨基酸、矿物质和微量元素,具有显著的免疫 促进作用和品质改良效果,同时伴有典型竹笋的鲜香滋味;竹茹提取 物则主要以三萜和多糖类物质为主,其代表性的五环三萜类化合物为 木栓酮和羽扇豆烯酮,具有显著的抗疲劳、抗应激和抗癌活性。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种安全、经济、有效的来源于竹子 的天然物饲料添加剂,该天然物饲料添加剂兼具营养强化剂等功能。

为了解决上述技术问题,本发明提供一种来源于竹子的天然物饲料添 加剂:

由以下质量份的成分组成:竹叶提取物1~4份、竹笋提取物1~2份和 竹茹提取物1~2份;或者按照如下方法制备而得:

按照干基质量比将竹叶1~4份、竹笋1~2份、竹茹1~2份混合后,得 竹子混合物;将竹子混合物进行提取,所得的提取物为饲料添加剂。

作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的改进:该饲料添加剂 为黄色、棕黄色或浅黄色的粉末或颗粒制剂,带有竹子芳香,总酚含 量8%~30 %,多糖含量5 %~15 %,三萜含量为3 %~10 %;上述 %为质量%。

作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进:竹为毛 竹或毛金竹。

备注说明:本发明所述的竹子,是指禾本科、竹亚科、刚竹属的品种 ,优选毛竹(别名楠竹、孟宗竹、苗竹、猫儿竹等)Phyllostachys  heterocycla var.pubescens (Mazel) Ohwi和毛金竹(别名:金 毛竹,淡竹等)Phyllostachys nigra var. hnonis (Bean) St epf ex Rendle。

作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进:

竹叶提取物为以水作为提取溶剂获得的竹叶提取物,

竹笋提取物为以水作为提取溶剂获得的竹笋提取物,

竹茹提取物为以醇(甲醇或乙醇均可)作为提取溶剂获得的竹茹提取 物;

竹子混合物采用以下工艺进行提取:

以体积浓度为28~32%(较佳为30%)的乙醇水溶液为提取剂,提取方式 为热回流提取或逆流浸提,所得的提取物为饲料添加剂。

作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进:竹子混 合物在以热回流提取或逆流浸提方式进行提取时,采用微波或超声波 进行辅助提取。

作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进:作为原 料的竹笋为竹全笋,作为原料的竹茹为竹子的外表皮;优选为:作为 原料的竹笋为笋壳、笋头和笋液中的至少一种,作为原料的竹茹为竹 粉和竹刨花中的至少一种。

即,本发明所述的作为原料的竹子不同部位,具体阐述如下:

作为原料的竹笋既可以采用全笋,更佳地是采用笋加工的副产物—— 笋壳、笋头和笋液;作为原料的竹茹是指竹子的外表皮,更佳地是采 用竹材加工的副产物,即竹材刮青处理时的下脚料——竹粉或竹刨花 。

作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进:由以下 质量份的成分组成:竹叶提取物、竹笋提取物和竹茹提取物各1份;该 饲料添加剂用于肉鸡养殖,从而提高肉鸡的品质。

作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进:由以下 质量份的成分组成:竹叶提取物1、竹笋提取物1份和竹茹提取物2份; 该饲料添加剂用于蛋鸡养殖,从而提高鸡蛋的品质。

作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进:由以下 质量份的成分组成:竹叶提取物1份、竹笋提取物2份和竹茹提取物1份 ;该饲料添加剂用于黄鱼养殖,从而提高黄鱼的品质。

在本发明中:

竹叶提取物、竹笋提取物、竹茹提取物均能通过市购的形式获得;也 能通过已经公开发表的方法进行制备:

竹叶提取物可按照中国发明专利《张英,从竹叶中提取黄酮类化合物 浸膏或粉剂的生产方法》(ZL 98 104564.2)进行制备,竹笋提取 物可按照中国发明专利《张英等,竹笋氨基酸肽类组合物及其制备方 法和用途》(ZL 200510025443.7)进行制备,竹茹提取物可按照中 国发明专利《张英等,从竹子中提取的三萜总皂甙元的组合物、制法 及用途》(ZL 02154401.8)进行制备。

具体而言:竹叶和竹笋以水作为提取溶剂,竹茹采用醇提(甲醇或乙 醇均可);当竹子不同部位混合提取时,采用30%的乙醇-水溶液提取 。提取工艺以热回流提取和逆流浸提为主,同时可采用微波或超声波 辅助提取。

本发明根据不同养殖对象的营养特点和代谢特征,将源自竹子不同部 位(竹叶、竹笋、竹茹)的有效成分(竹叶多酚、竹笋多糖和竹茹三 萜,即竹叶提取物、竹笋提取物和竹茹提取物)进行有机组合,得到 不同配比的功能饲料添加剂系列。本发明的饲料添加剂为黄色、棕黄 色或浅黄色的粉末或颗粒制剂,带有竹子芳香,总酚含量8%~30 %, 多糖含量5 %~15 %,三萜含量为3 %~10 %,是一种优良的天然 抗氧化剂、免疫促进剂、脂代谢调节剂及品质改良剂,并具有一定的 诱食性。

本发明的饲料添加剂兼具抗氧化剂、营养强化剂、免疫增强剂、脂代 谢调节剂、动物产品品质改良剂、增味剂、防腐剂、诱食剂等多种功 能,在饲料中的添加量一般为0.1%~0.6%(重量比),可广泛应用于高 品质家畜、家禽和鱼类的人工养殖中。同时,还有利于防止高脂饲料 的氧化,延长饲料的货架寿命。本发明同时具有有益人类健康、绿色 环保和可持续发展的优点。

综上所述,本发明基于对竹子化学素的长期研究和开发所积累的丰富 经验,依据不同养殖对象的营养特点和代谢特征,将竹子不同部位获 得的提取物进行有机组合和配伍研究,获 得了一种天然、安全、营养、多功能的饲料添加剂,应用到动物全价 配合饲料中,兼具抗氧化剂、营养强化剂、免疫增强剂、脂代谢调节 剂、动物产品品质改良剂、增味剂、防腐剂、诱食剂等多种功能。同 时,可根据不同养殖对象的特殊需求,对产品中的活性成分配比进行 调正。

具体实施方式

下面结合实例进一步阐明本发明的内容,其目的在于方便人们更好地 理解本发明的内容,而非限制本发明的保护范围。

此外,涉及实施例中几个共性的问题阐述如下。

1总酚的测定方法

1.1原理

福林(Folin)试剂在碱性条件下极不稳定,可使酚类化合物还原而呈 蓝色。在没食子酸浓度为0.5~16 μg/mL范围内,其浓度与吸光度的 关系符合比尔定律,可以没食子酸为对照进行定量比色测定得试样的 总酚含量。

1.2标准曲线绘制

精密称取没食子酸对照10.0 mg于100 mL量瓶中,30 %乙醇溶液溶 解并稀释至刻度,即得标准溶液;精密吸取标准溶液0、0.05、0.10、 0.20、0.30、0.40、0.50 mL于25 mL具塞试管中,分别用水纯净水 稀释至6.0 mL,0.5~8.0 min内各加入福林试剂0.5 mL和20 %  Na2CO3水溶液1.5 mL,用水稀释至10 mL,试管在40 ℃水浴上加热 2 h,迅速冷却(冰浴),用1 cm的比色杯,在765 nm的波长处测 定吸光度。以吸收度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。

1.3样品测定

取适量样品溶解于甲醇溶液中,过滤后定容至100 mL。取待测液0.5 0 mL于25 mL具塞试管中,按“标准曲线绘制”方法进行,在765nm 波长下测定吸光度。

1.4结果计算

根据标准曲线,求出相当于试样吸光度的对没食子酸的含量,按下式 求出样品总酚含量:

总酚含量(%)=(m1×V2)/ (m×V1)× 100 

式中:

m1——依据标准曲线计算出被测液中酚类含量(mg);

m ——样品取样量(mg);

V1 ——待测液分取的体积(mL);

V2 ——待测液的总体积(mL)。

2多糖的测定方法

2.1原理

采用苯酚-硫酸法测定。分子量大于10000道尔顿的多糖经80 %乙醇沉 淀后,在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物, 然后与苯酚生成橙黄色化合物,再以比色法测定。

2.2标准曲线绘制

精密称取25.0 mg葡萄糖,用蒸馏水溶解并定容至100 mL。移取上 述葡萄糖溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL于25 mL比色管 中,均用纯净水补至2.0 mL,摇匀,加入苯酚试剂1.0 mL,浓硫 酸试剂5.0 mL,立即摇匀,冷却30 min。同时以2.0 mL纯净水加 苯酚试剂1.0 mL和浓硫酸试剂5.0 mL作空白。在490 nm波长处测 定吸光度。

2.3样品测定

取1~2 g样品溶于100 mL 80 %的乙醇溶液中,放入冰箱静置过夜 。4000 rpm离心10 min,弃去上清液,残渣用纯净水定容于50 mL 容量瓶中。取待测液0.1~0.5 mL取代标准溶液于25 mL比色管中, 按“标准曲线绘制”方法,测定490 nm波长处的吸光度。

2.4结果计算

根据标准曲线,求出相当于试样吸光度的葡萄糖的含量,按下式求出 样品的多糖含量:

多糖含量(%)=(m1×V2)/(m×V1)× 100 

式中:

m1——依据标准曲线计算出被测液中葡萄糖含量(mg);

m ——样品取样量(mg);

V1 ——待测液分取的体积(mL);

V2 ——待测液的总体积(mL)。

3三萜的测定方法

3.1原理

采用香草醛-冰醋酸、高氯酸显色法,显色原理主要是使三萜类化合 物的羧基脱水,形成双键结构,再经双键移位、双分子缩合等反应生 成共轭双键系统,并在酸作用下形成阳离子盐而显色。

3.2标准曲线绘制

精密称取人参皂苷标准品10.0 mg于100 mL量瓶中,加无水乙醇溶解 并稀释至刻度。从中吸取标准品溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、 1.0 mL,于加热状态下用氮气吹干溶剂,分 别加入5 %香草醛-冰醋酸0.5 mL,然后加入高氯酸0.8 mL,混匀后 于65 ℃水浴反应15 min,取出放置冰水中迅速冷却至室温后,加冰 醋酸5 mL,振荡混匀;以零管为空白,用1 cm的比色杯在560 nm( 人参皂甙)处测定吸光度,以人参皂甙的微克数为横坐标、吸光度为 纵坐标绘制标准曲线。

3.3样品测定

取1~2 g样品于200 mL圆底烧瓶中,加入无水乙醇100 mL,于80  ℃水浴中搅拌提取2 h(可辅以超声波处理),趁热过滤得滤液并定 容至250 mL。取待测液0.5~1.0 mL取代标准溶液于25 mL比色管 中,按“标准曲线绘制”方法,测定560 nm处测定吸光度。

3.4结果计算

根据标准曲线,求出相当于试样吸光度的人参皂苷含量,按下式求出 样品总三萜含量,单位为克每百克(g/100 g)

三萜含量=(m×V)/(V1×M)×10-6×100

式中:

m——依据标准曲线计算出反应液中的人参皂苷量(μg);

V——提取液总体积(mL);

V1——待测液移取的体积(mL);

M——样品取样量(g)。

实施例1、一种来源于竹子的饲料添加剂,依次进行如下步骤:

1)取秋冬季节采集的毛竹干青叶(含水率≤14 %)粉碎至10目左右 ,每50 kg加入纯净水500 L热回流提取1.5 h,过滤后将所得的滤 液真空浓缩(真空度0.09 Mpa, 温度≤55 ℃)至固型物含量为25  %(质量%)左右,喷雾干燥(进风温度185 ℃,出风温度90 ℃) ,得竹叶提取物4.1 kg(棕黄色粉末,总酚含量29.02 %, 多糖含 量8.21 %)。

2)取水煮笋罐头加工副产物――笋壳和笋头干粉(30目左右,含水率 ≤12 %,笋壳和笋头的干重比为1:1.5),每50 kg加入纯净水500  L热回流提取2 h,过滤后将所得的滤液真空浓缩至固型物含量30  % 左右,真空干燥(真空度0.09 Mpa, 温度≤65 ℃),得竹笋提 取物5.3 kg (浅褐色粉末, 含多糖23.31 %, 三萜2.30 % )。

3)取竹材加工的副产物――竹刨花干燥后(含水率≤10 %)粉碎至 10-20目,每50 kg加入食用酒精(乙醇体积浓度为93-94 %)500  L常温(10~25℃)浸提48 h,过滤后将所得的滤液真空浓缩(真空度 0.09 Mpa, 温度≤45 ℃ )回收溶剂,真空微波干燥(功率密度 为1w/g~2w/g;真空度为0.08 Mpa;干燥时间为2h~3h),得竹茹提 取物2.38 kg(浅绿色粉末, 含三萜11.76 %,总酚8.90 %)。

将以上竹叶提取物、竹笋提取物和竹茹提取物组合成以下配方: 

配方1#:取竹叶提取物、竹笋提取物和竹茹提取物各1份组成饲料添加 剂,所得饲料添加剂中含总酚12.31 %、多糖10.51 %、三萜4.69  %。

配方2#:取竹叶提取物1、竹笋提取物1份和竹茹提取物2份,所得饲料 添加剂中总酚含量为11.46 %,多糖含量为7.88 %,总三萜含量为6 .46 %。

配方3#:取竹叶提取物2份、竹笋提取物和竹茹提取物各1份组成饲料 添加剂,所得饲料添加剂中含总酚16.24 %、多糖9.93 %、三萜3.5 2 %。

配方4#:取竹叶提取物3份、竹笋提取物和竹茹提取物各0.5份,所得 饲料添加剂中总酚含量为23.24 %,多糖含量为11.99 %,总三萜含 量为3.52 %。

配方5#:取竹叶提取物1份、竹笋提取物2份和竹茹提取物1份组成饲料 添加剂,所得饲料添加剂中含总酚9.23 %、多糖13.71 %、三萜4.0 9 %。

实施例2

按照干基质量比,取毛金竹的干青叶(含水率≤14 %)3份、笋壳和 笋头干粉(含水率≤12 %,笋壳和笋头的干重比为1:1.5)2份和竹 刨花粉(含水率≤10 %)1份混匀,每50 kg加入500 L的30 % ( v/v)乙醇-水溶液,热回流提取2 h,滤液真空浓缩至固型物含量在 30 % 左右,真空干燥(真空度0.09 Mpa, 温度≤ 65 ℃)后, 得本发明的饲料添加剂4.3 kg(棕黄色粉末,总酚含量23.28 %,多 糖含量12.13 %,三萜含量为6.24 %)。记作配方6#。

实验1

本发明将实施例1中的饲料添加剂配方1#用于高品质肉鸡养殖。

1、试验设计

用石岐胡须鸡(香港现代农业有限公司杂交培育的一种黄羽肉鸡)作 为试验对象。方法如下:选用360只26日龄的健康仔鸡,初始体重为( 375.12 ± 8.30)g,随机分成4组,每组3个重复,每个重复30只。 对照组饲喂不添加该添加剂的基础日粮(基础日粮为粉状配合饲料, 参考美国NRC(1994)肉鸡营养需要配制)。低、中、高三个剂量的试 验组分别在日粮中添加0.15 %、0.30 %和0.60 %的配方1#的添加剂 。采用笼养,养殖试验周期为49 天,至75日龄时抽样检验。

2、试验结果

(1)免疫促进作用

日粮中添加0.15 %~0.60%的本发明的饲料添加剂(配方1#),可显 著提高肉鸡的胸腺指 数、法氏囊指数、血清溶菌酶活力以及血清中免疫球蛋白IgA和IgM的 含量。表明其起到了显著的免疫促进作用,结果如表1所示。肉鸡免疫 功能的提高可有效减少抗生素及其他化学药物的使用。

表1  对肉鸡免疫指标的影响

注:同行数据肩标,不同小写字母表示差异显著(P<0.05),相同或 无字母表示差异不显著(P>0.05)。下同。

(2)调节脂质代谢

日粮中添加0.15 %~0.6 %的配方1#,可显著降低肉鸡的腹脂率、皮 下脂肪厚度、肝脏脂肪含量以及血清TG的含量,结果见表2。表明肉鸡 日粮中添加本发明的饲料添加剂起到了显著的降脂减肥作用,有利于 生产高品质的瘦肉型鸡。

表2 对肉鸡体脂沉积的影响

(3)改善肉品品质

日粮中添加0.15 %~0.6 %的配方1#,可显著提高胸肌的脂肪含量、 粘附性、弹性以及宰杀45 min后胸肉的pH值,显著降低鸡肉的滴水损 失率和硬度,结果详见表3。表明本发明的饲料添加剂可显著改善鸡肉 的食用品质。

表3  对鸡肉品质指标的影响

(4)提高营养价值

日粮中添加0.15 %~0.6 %的配方1#显著提高了鸡肉中必需脂肪酸的 比例和总氨基酸含量,以及钾、钙、镁、铁、锌等碱金属元素的含量 ,结果如表4所示。表明,本发明的饲料添加剂可显著提高肉鸡的营养 价值。

表4  对鸡肉营养指标的影响

为了充分证明本发明的创造性所在,发明人还进行了如下的对比实验 :

将上述饲料添加剂均设定为中剂量(即在肉鸡日粮中的添加0.30%), 对照组仍为基础日粮。每组样本数为30只,笼养。试验结束后,每组 随机抽取10只,取鸡血,测定免疫功能;其余等同于实验1。

对比例1-1~对比例1-7:

将实验1中所用的“饲料添加剂配方1#”分别改成“饲料添加剂配方3 #”、“饲料添加剂配方4#”、“饲料添加剂配方5#”、“饲料添加剂 配方6#”,按照上述对比实验进行检测,从而分别得对比例1-1~对比 例1-4;

取竹叶提取物和竹笋提取物各1.5份组成饲料添加剂,以该饲料添加剂 替代实验1中所用的“饲料添加剂配方1#”,按照上述对比实验进行检 测,从而分别得对比例1-5;

取竹叶提取物和竹茹提取物各1.5份组成饲料添加剂,以该饲料添加剂 替代实验1中所用的“饲料添加剂配方1#”,按照上述对比实验进行检 测,从而分别得对比例1-6;

取竹笋提取物和竹茹提取物各1.5份组成饲料添加剂,以该饲料添加剂 替代实验1中所用的“ 饲料添加剂配方1#”,按照上述对比实验进行 检测,从而分别得对比例1-7。

所得的实验结果如下:

当肉鸡日粮中添加0.30%本发明的饲料添加剂后,与对照组相比,各组 的免疫指标均有不同程度的增强,但均不如饲料添加剂配方1#,结果 如表5所示。

表5  对肉鸡免疫指标的影响

实验2

本发明将实施例1中的饲料添加剂配方2#用于高品质蛋鸡养殖。

1、试验设计

选用360只180日龄的黄羽蛋鸡,随机分成4组,每组3个重复,每个重 复30只。对照组饲喂不加该添加剂的基础日粮,试验组在基础日粮中 添加0.60 %的配方2#。试验周期为20天。本试验在江西南昌周边地区 进行,试验结束时,抽取当地农户的土鸡蛋样品进行比较。

2、试验结果

结果如表6所示。日粮中添加0.6 %的配方2#喂养蛋鸡20天后,分别测 定试验组和空白组鸡蛋的各项品质指标,表明本发明的饲料添加剂可 使蛋重、蛋壳强度、溶菌酶活力、鸡蛋比重、蛋白质高度、哈氏单位 显著增大,表明日粮中添加本发明的饲料添加剂可显著改善鸡蛋的品 质。

表6 对鸡蛋品质的影响

实验3

本发明将实施例1中的饲料添加剂配方3#、4#、5#和实施例2中的配方 6#用于高品质大黄鱼的人工养殖。

1、试验设计

选择平均体重为 (150.06±11.35 g) 的大黄鱼鱼种3600尾,随机 分成6组(每组3个重复,每个重复200尾大黄鱼)。对照组采用传统的 养殖方法饲喂冰鲜或小杂鱼虾。试验组饲喂大黄鱼全价膨化颗粒饲料 (鱼粉、虾蟹类加工副产物、鱼油、维生素及矿物质预混料和大豆卵 磷脂油),该饲料的配方中分别添加0.30 %剂量的实施例1中的配方 3#、4#、5#和实施例2中的配方6#,同时设一阳性对照组(日粮中添加 0.10 %虾青素),各组大黄鱼饲料成分测定见表7。养殖试验周期为 13周(从6月初至10月底),每月采样一次,每组抽取10条试样进行分 析测试。

2、试验结果

(1)免疫促进作用

饲料中添加0.30 %的配方3#、4#、5#和6#,可显著提高大黄鱼血清的 白细胞吞噬指数、溶菌酶活力、补体活力,以配方5#的效果为最佳, 结果如表7所示。表明本发明的饲料添加剂起到了显著的免疫促进作用 ,其效果普遍优于虾青素的阳性对照。养殖大黄鱼免疫功能的提高有 助于减少抗生素及其他化学药物的使用。

表7  对养殖大黄鱼免疫指标的影响

(2)减少脂肪沉积

饲料中添加0.30 %的配方3#、4#、5#、6#可显著降低大黄鱼鱼肉和肝 脏的脂肪含量,以以配方5#的效果最为显著,结果如表8所示。表明本 发明的饲料添加剂可有效调节大黄鱼的脂质代谢,减少体内脂肪沉积 ,防治养殖大黄鱼的肝胆综合征,显著提升品质。

表8  对大黄鱼脂肪沉积的影响

指标 对照组 配方3#组 配方4#组 配方5#组 配方6#组 虾青素组 鱼肉/% 6.33±0.42a 4.62±0.10b 4.21±0.32bc 3.79±0.17c 4.79±0.36b 3.63±0.48c 肝脏/% 15.31±0.89a 9.67±0.40b 8.97±0.23bc 7.74±0.75c 9.98±0.81b 8.15±0.66c

对比例3-1~对比例3-4、

将实验3中所用的“饲料添加剂”改成“饲料添加剂配方1#”、其余同 实验3,从而得对比例3-1;

取竹叶提取物和竹笋提取物各2份组成饲料添加剂,以该饲料添加剂替 代实验3中所用的“饲料添加剂”,其余同实验3,从而分别得对比例 3-2;

取竹叶提取物和竹茹提取物各2份组成饲料添加剂,以该饲料添加剂替 代实验3中所用的“饲料添加剂”,其余同实验3,从而分别得对比例 3-3;

取竹笋提取物和竹茹提取物各2份组成饲料添加剂,以该饲料添加剂替 代实验3中所用的“饲料添加剂”,其余同实验3,从而分别得对比例 3-4。

所得的实验结果如下:

(1)免疫促进作用

大黄鱼配合饲料中添加0.30%的饲料添加剂配方1#后(对比例3-1), 与冰鲜对照组相比,各项免疫指标有一定增强。而竹叶提取物、竹笋 提取物和竹茹提取物三者两两组合配伍的效果却明显逊色(对比例3- 2~3-4),结果如表9所示。但均不如配方5#组。

表9  对养殖大黄鱼免疫指标的影响

(2)减少脂肪沉积

大黄鱼配合饲料中添加0.30%本发明的饲料添加剂配方1#后(对比例3 -1),与对照组相比,大黄鱼背肌和肝脏中的脂肪含量有一定下降, 而竹叶提取物、竹笋提取物和竹茹提取物三者两两组合配伍的效果却 明显逊色(对比例3-2~3-4),结果如表10所示。但均不如配方5#组。

表10  对大黄鱼脂肪沉积的影响

指标 冰鲜对照组 对比例3-1 对比例3-2 对比例3-3 对比例3-4 鱼肉/% 6.33±0.42a 4.76±0.10c 5.21±0.33b 5.73±0.21b 5.13±0.28b 肝脏/% 15.31±0.89a 9.87±0.40c 11.89±0.21b 12.05±0.42b 12.33±0.38b

最后,还需要注意的是,以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例 。显然,本发明不限于以上实施例,还可以有许多变形。本领域的普 通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形,均 应认为是本发明的保护范围。

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1、(10)授权公告号 CN 103070289 B (45)授权公告日 2014.08.13 CN 103070289 B (21)申请号 201310013756.5 (22)申请日 2013.01.14 A23K 1/14(2006.01) A23K 1/16(2006.01) (73)专利权人 浙江大学 地址 310027 浙江省杭州市西湖区浙大路 38 号 (72)发明人 张英 黄骆镰 吴晓琴 李栋 姜文进 (74)专利代理机构 杭州中成专利事务所有限公 司 33212 代理人 金祺 CN 102038078 A,2011.05.04, 权利要求 1, 说明书第 1 页第 0015 段 。

2、. CN 1287848 A,2001.03.21,说明书第2页第 2-3 段, 第 3 页第 1 段 . CN 101380061 A,2009.03.11, 全文 . CN 101919493 A,2010.12.22, 全文 . JP 特开2005-151928 A,2005.06.16,全文. (54) 发明名称 来源于竹子的天然物饲料添加剂 (57) 摘要 本发明公开了一种来源于竹子的天然物饲料 添加剂, 由以下质量份的成分组成 : 竹叶提取物 1 4 份、 竹笋提取物 1 2 份和竹茹提取物 1 2 份 ; 或者按照如下方法制备而得 : 按照干基质量 比将竹叶 1 4 份、 竹笋 。

3、1 2 份和竹茹 1 2 份 混合后, 得竹子混合物 ; 将竹子混合物进行提取, 所得的提取物为饲料添加剂。该饲料添加剂为黄 色、 棕黄色或浅黄色的粉末或颗粒制剂, 带有竹子 芳香, 总酚含量8%30 %, 多糖含量5 %15 %, 三萜含量为 3 % 10 %。该饲料添加剂兼具抗氧 化剂、 营养强化剂、 免疫增强剂、 脂代谢调节剂、 动 物产品品质改良剂、 增味剂、 防腐剂、 诱食剂等多 种功能。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 单珊 权利要求书 2 页 说明书 13 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书2页 说明书13页 (10)授权公告。

4、号 CN 103070289 B CN 103070289 B 1/2 页 2 1. 来源于竹子的天然物饲料添加剂, 其特征是 : 由以下质量份的成分组成 : 竹叶提取物、 竹笋提取物和竹茹提取物各 1 份 ; 该饲料添加 剂用于肉鸡养殖, 从而提高肉鸡的品质 ; 竹叶提取物的制备方法为 : 取秋冬季节采集的含水率 14% 的毛竹干青叶粉碎至 10 目, 每 50kg 加入纯净水 500L 热回流提取1.5h, 过滤后将所得的滤液于真空度0.09Mpa和温度55的条件下真空浓缩 至固形物质量含量为 25%, 于进风温度 185和出风温度 90的条件下喷雾干燥, 得竹叶提 取物 4.1kg, 为。

5、棕黄色粉末, 总酚含量 29.02%, 多糖含量 8.21% ; 竹笋提取物的制备方法为 : 取水煮笋罐头加工副产物笋壳和笋头干粉, 每 50kg 加入纯净水 500L 热回流提取 2h, 过滤后将所得的滤液真空浓缩至固形物含量30%, 于真空度0.09Mpa和温度65的条 件下真空干燥, 得竹笋提取物 5.3kg, 为浅褐色粉末, 含多糖 23.31%, 三萜 2.30% ; 所述笋壳和笋头干粉为 30 目, 含水率 12%, 笋壳和笋头的干重比为 1 : 1.5 ; 竹茹提取物的制备方法为 : 取竹材加工的副产物竹刨花干燥成含水率 10% 后粉碎至 10-20 目, 每 50kg 加入 乙。

6、醇体积浓度为 93-94% 的食用酒精 500L 于 10 25的常温浸提 48h, 过滤后将所得的滤 液于真空度 0.09Mpa 和温度 45的条件下真空浓缩回收溶剂, 于功率密度为 1w/g 2w/ g、 真空度为0.08Mpa和干燥时间为2h3h的条件下真空微波干燥, 得竹茹提取物2.38kg, 为浅绿色粉末, 含三萜 11.76%, 总酚 8.90%。 2. 来源于竹子的天然物饲料添加剂, 其特征是 : 由以下质量份的成分组成 : 竹叶提取物 1、 竹笋提取物 1 份和竹茹提取物 2 份 ; 该饲料 添加剂用于蛋鸡养殖, 从而提高鸡蛋的品质 ; 竹叶提取物的制备方法为 : 取秋冬季节采。

7、集的含水率 14% 的毛竹干青叶粉碎至 10 目, 每 50kg 加入纯净水 500L 热回流提取1.5h, 过滤后将所得的滤液于真空度0.09Mpa和温度55的条件下真空浓缩 至固形物质量含量为 25%, 于进风温度 185和出风温度 90的条件下喷雾干燥, 得竹叶提 取物 4.1kg, 为棕黄色粉末, 总酚含量 29.02%, 多糖含量 8.21% ; 竹笋提取物的制备方法为 : 取水煮笋罐头加工副产物笋壳和笋头干粉, 每 50kg 加入纯净水 500L 热回流提取 2h, 过滤后将所得的滤液真空浓缩至固形物含量30%, 于真空度0.09Mpa和温度65的条 件下真空干燥, 得竹笋提取物 。

8、5.3kg, 为浅褐色粉末, 含多糖 23.31%, 三萜 2.30% ; 所述笋壳和笋头干粉为 30 目, 含水率 12%, 笋壳和笋头的干重比为 1 : 1.5 ; 竹茹提取物的制备方法为 : 取竹材加工的副产物竹刨花干燥成含水率 10% 后粉碎至 10-20 目, 每 50kg 加入 乙醇体积浓度为 93-94% 的食用酒精 500L 于 10 25的常温浸提 48h, 过滤后将所得的滤 液于真空度 0.09Mpa 和温度 45的条件下真空浓缩回收溶剂, 于功率密度为 1w/g 2w/ g、 真空度为0.08Mpa和干燥时间为2h3h的条件下真空微波干燥, 得竹茹提取物2.38kg, 为。

9、浅绿色粉末, 含三萜 11.76%, 总酚 8.90%。 3. 来源于竹子的天然物饲料添加剂, 其特征是 : 权 利 要 求 书 CN 103070289 B 2 2/2 页 3 由以下质量份的成分组成 : 竹叶提取物 1 份、 竹笋提取物 2 份和竹茹提取物 1 份 ; 该饲 料添加剂用于黄鱼养殖, 从而提高黄鱼的品质 ; 竹叶提取物的制备方法为 : 取秋冬季节采集的含水率 14% 的毛竹干青叶粉碎至 10 目, 每 50kg 加入纯净水 500L 热回流提取1.5h, 过滤后将所得的滤液于真空度0.09Mpa和温度55的条件下真空浓缩 至固形物质量含量为 25%, 于进风温度 185和出风。

10、温度 90的条件下喷雾干燥, 得竹叶提 取物 4.1kg, 为棕黄色粉末, 总酚含量 29.02%, 多糖含量 8.21% ; 竹笋提取物的制备方法为 : 取水煮笋罐头加工副产物笋壳和笋头干粉, 每 50kg 加入纯净水 500L 热回流提取 2h, 过滤后将所得的滤液真空浓缩至固形物含量30%, 于真空度0.09Mpa和温度65的条 件下真空干燥, 得竹笋提取物 5.3kg, 为浅褐色粉末, 含多糖 23.31%, 三萜 2.30% ; 所述笋壳和笋头干粉为 30 目, 含水率 12%, 笋壳和笋头的干重比为 1 : 1.5 ; 竹茹提取物的制备方法为 : 取竹材加工的副产物竹刨花干燥成含水。

11、率 10% 后粉碎至 10-20 目, 每 50kg 加入 乙醇体积浓度为 93-94% 的食用酒精 500L 于 10 25的常温浸提 48h, 过滤后将所得的滤 液于真空度 0.09Mpa 和温度 45的条件下真空浓缩回收溶剂, 于功率密度为 1w/g 2w/ g、 真空度为0.08Mpa和干燥时间为2h3h的条件下真空微波干燥, 得竹茹提取物2.38kg, 为浅绿色粉末, 含三萜 11.76%, 总酚 8.90%。 权 利 要 求 书 CN 103070289 B 3 1/13 页 4 来源于竹子的天然物饲料添加剂 技术领域 0001 本发明涉及一种来源于竹子的天然物饲料添加剂, 属于动。

12、物饲料和养殖技术领 域。 背景技术 0002 我国的饲料工业起步于 19 世纪 70 年代, 到 2011 年饲料产量已超过 1.5 亿吨。随 着我国家禽、 家畜、 水产养殖业集约化程度的提高和疫病的频发, 以抗生素、 合成药物和类 固醇激素为代表的化学品普遍在饲料行业中使用, 虽在一定程度上提高了养殖业的生产效 率, 但也带来了许多负面影响, 如使养殖对象产生抗药性, 并导致其免疫功能降低, 食用品 质显著下降。同时, 产品中大量抗生素、 激素和化学药物的残留威胁到人类健康, 引起全球 范围内对动物产品安全性的担忧。随着人们 “回归自然” 、“天然环保” 、“绿色消费” 的理念 渐成大势, 。

13、对开发天然、 安全、 营养、 多功能的饲料添加剂的呼声越来越高, 市场也正在不断 扩大。 0003 中国素有 “竹子王国” 之称, 拥有十分丰富的竹类资源, 竹类产品在我国乃至亚洲 有着悠久的食用和药用历史。发明人自上世纪 90 年代初开始研究竹子有效成分, 从竹子不 同部位中研发了以速溶竹叶粉、 竹叶黄酮、 竹叶抗氧化物、 竹茹三萜、 竹笋甾醇和竹笋氨基 酸肽为代表的 “竹取物” 系列, 已在食品、 饮品、 保健 (功能) 食品、 天然药物、 以及食品添加剂 和化妆品添加剂等领域得到广泛应用。近十年来, 对竹子化学素的科学研究和产品开发引 起了业界的广泛重视, 含有竹子有效成分的各类健康产品。

14、不断涌现。 0004 大量的研究表明, 竹叶提取物以多酚类物质为主, 其特征性化合物包括以荭草苷、 异荭草苷、 牡荆苷、 异牡荆苷为代表的碳苷黄酮和以对香酸、 绿原酸、 咖啡酸、 阿魏酸为代表 的植物酚酸, 具有显著的生物抗氧化活性和自由基清除能力, 能有效调节机体的脂质代谢 和能量代谢, 具有广谱抗菌、 抑菌活性, 同时带有典型的竹叶清香 ; 竹笋提取物主要含多糖、 寡肽、 氨基酸、 矿物质和微量元素, 具有显著的免疫促进作用和品质改良效果, 同时伴有典 型竹笋的鲜香滋味 ; 竹茹提取物则主要以三萜和多糖类物质为主, 其代表性的五环三萜类 化合物为木栓酮和羽扇豆烯酮, 具有显著的抗疲劳、 抗。

15、应激和抗癌活性。 发明内容 0005 本发明要解决的技术问题是提供一种安全、 经济、 有效的来源于竹子的天然物饲 料添加剂, 该天然物饲料添加剂兼具营养强化剂等功能。 0006 为了解决上述技术问题, 本发明提供一种来源于竹子的天然物饲料添加剂 : 0007 由以下质量份的成分组成 : 竹叶提取物 1 4 份、 竹笋提取物 1 2 份和竹茹提取 物 1 2 份 ; 或者按照如下方法制备而得 : 0008 按照干基质量比将竹叶 1 4 份、 竹笋 1 2 份、 竹茹 1 2 份混合后, 得竹子混 合物 ; 将竹子混合物进行提取, 所得的提取物为饲料添加剂。 0009 作为本发明的来源于竹子的天然。

16、物饲料添加剂的改进 : 该饲料添加剂为黄色、 棕 说 明 书 CN 103070289 B 4 2/13 页 5 黄色或浅黄色的粉末或颗粒制剂, 带有竹子芳香, 总酚含量 8% 30 %, 多糖含量 5 % 15 %, 三萜含量为 3 % 10 % ; 上述 % 为质量 %。 0010 作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进 : 竹为毛竹或毛金 竹。 0011 备注说明 : 本发明所述的竹子, 是指禾本科、 竹亚科、 刚竹属的品种, 优选毛竹 (别 名楠竹、 孟宗竹、 苗竹、 猫儿竹等) Phyllostachys heterocycla varpubescens (Mazel)。

17、 Ohwi 和毛金竹 (别名 : 金毛竹, 淡竹等) Phyllostachys nigra var. hnonis (Bean) Stepf ex Rendle。 0012 作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进 : 0013 竹叶提取物为以水作为提取溶剂获得的竹叶提取物, 0014 竹笋提取物为以水作为提取溶剂获得的竹笋提取物, 0015 竹茹提取物为以醇 (甲醇或乙醇均可) 作为提取溶剂获得的竹茹提取物 ; 0016 竹子混合物采用以下工艺进行提取 : 0017 以体积浓度为 2832%(较佳为 30%) 的乙醇水溶液为提取剂, 提取方式为热回流提 取或逆流浸提, 所得的提。

18、取物为饲料添加剂。 0018 作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进 : 竹子混合物在以热 回流提取或逆流浸提方式进行提取时, 采用微波或超声波进行辅助提取。 0019 作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进 : 作为原料的竹笋为 竹全笋, 作为原料的竹茹为竹子的外表皮 ; 优选为 : 作为原料的竹笋为笋壳、 笋头和笋液中 的至少一种, 作为原料的竹茹为竹粉和竹刨花中的至少一种。 0020 即, 本发明所述的作为原料的竹子不同部位, 具体阐述如下 : 0021 作为原料的竹笋既可以采用全笋, 更佳地是采用笋加工的副产物笋壳、 笋头 和笋液 ; 作为原料的竹茹是指竹子。

19、的外表皮, 更佳地是采用竹材加工的副产物, 即竹材刮青 处理时的下脚料竹粉或竹刨花。 0022 作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进 : 由以下质量份的成 分组成 : 竹叶提取物、 竹笋提取物和竹茹提取物各 1 份 ; 该饲料添加剂用于肉鸡养殖, 从而 提高肉鸡的品质。 0023 作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进 : 由以下质量份的成 分组成 : 竹叶提取物1、 竹笋提取物1份和竹茹提取物2份 ; 该饲料添加剂用于蛋鸡养殖, 从 而提高鸡蛋的品质。 0024 作为本发明的来源于竹子的天然物饲料添加剂的进一步改进 : 由以下质量份的成 分组成 : 竹叶提取物1。

20、份、 竹笋提取物2份和竹茹提取物1份 ; 该饲料添加剂用于黄鱼养殖, 从而提高黄鱼的品质。 0025 在本发明中 : 0026 竹叶提取物、 竹笋提取物、 竹茹提取物均能通过市购的形式获得 ; 也能通过已经公 开发表的方法进行制备 : 0027 竹叶提取物可按照中国发明专利 张英, 从竹叶中提取黄酮类化合物浸膏或粉剂 的生产方法 (ZL 98 104564.2) 进行制备, 竹笋提取物可按照中国发明专利 张英等, 竹 笋氨基酸肽类组合物及其制备方法和用途 (ZL 200510025443.7) 进行制备, 竹茹提取物 说 明 书 CN 103070289 B 5 3/13 页 6 可按照中国发。

21、明专利 张英等, 从竹子中提取的三萜总皂甙元的组合物、 制法及用途 (ZL 02154401.8) 进行制备。 0028 具体而言 : 竹叶和竹笋以水作为提取溶剂, 竹茹采用醇提 (甲醇或乙醇均可) ; 当竹 子不同部位混合提取时, 采用 30% 的乙醇 - 水溶液提取。提取工艺以热回流提取和逆流浸 提为主, 同时可采用微波或超声波辅助提取。 0029 本发明根据不同养殖对象的营养特点和代谢特征, 将源自竹子不同部位 (竹叶、 竹 笋、 竹茹) 的有效成分 (竹叶多酚、 竹笋多糖和竹茹三萜, 即竹叶提取物、 竹笋提取物和竹茹 提取物) 进行有机组合, 得到不同配比的功能饲料添加剂系列。本发明的。

22、饲料添加剂为黄 色、 棕黄色或浅黄色的粉末或颗粒制剂, 带有竹子芳香, 总酚含量 8% 30 %, 多糖含量 5 %15 %, 三萜含量为3 %10 %, 是一种优良的天然抗氧化剂、 免疫促进剂、 脂代谢调节剂 及品质改良剂, 并具有一定的诱食性。 0030 本发明的饲料添加剂兼具抗氧化剂、 营养强化剂、 免疫增强剂、 脂代谢调节剂、 动物产品品质改良剂、 增味剂、 防腐剂、 诱食剂等多种功能, 在饲料中的添加量一般为 0.1%0.6%(重量比) , 可广泛应用于高品质家畜、 家禽和鱼类的人工养殖中。同时, 还有利 于防止高脂饲料的氧化, 延长饲料的货架寿命。 本发明同时具有有益人类健康、 绿。

23、色环保和 可持续发展的优点。 0031 综上所述, 本发明基于对竹子化学素的长期研究和开发所积累的丰富经验, 依据 不同养殖对象的营养特点和代谢特征, 将竹子不同部位获得的提取物进行有机组合和配伍 研究, 获得了一种天然、 安全、 营养、 多功能的饲料添加剂, 应用到动物全价配合饲料中, 兼 具抗氧化剂、 营养强化剂、 免疫增强剂、 脂代谢调节剂、 动物产品品质改良剂、 增味剂、 防腐 剂、 诱食剂等多种功能。同时, 可根据不同养殖对象的特殊需求, 对产品中的活性成分配比 进行调正。 具体实施方式 0032 下面结合实例进一步阐明本发明的内容, 其目的在于方便人们更好地理解本发明 的内容, 而。

24、非限制本发明的保护范围。 0033 此外, 涉及实施例中几个共性的问题阐述如下。 0034 1 总酚的测定方法 0035 1.1 原理 0036 福林 (Folin) 试剂在碱性条件下极不稳定, 可使酚类化合物还原而呈蓝色。在没 食子酸浓度为0.516 g/mL范围内, 其浓度与吸光度的关系符合比尔定律, 可以没食子 酸为对照进行定量比色测定得试样的总酚含量。 0037 1.2 标准曲线绘制 0038 精密称取没食子酸对照10.0 mg于100 mL量瓶中, 30 %乙醇溶液溶解并稀释至刻 度, 即得标准溶液 ; 精密吸取标准溶液 0、 0.05、 0.10、 0.20、 0.30、 0.40。

25、、 0.50 mL 于 25 mL 具 塞试管中, 分别用水纯净水稀释至 6.0 mL, 0.5 8.0 min 内各加入福林试剂 0.5 mL 和 20 % Na2CO3水溶液1.5 mL, 用水稀释至10 mL, 试管在40 水浴上加热2 h, 迅速冷却 (冰浴) , 用 1 cm 的比色杯, 在 765 nm 的波长处测定吸光度。以吸收度为纵坐标、 浓度为横坐标绘制 标准曲线。 说 明 书 CN 103070289 B 6 4/13 页 7 0039 1.3 样品测定 0040 取适量样品溶解于甲醇溶液中, 过滤后定容至100 mL。 取待测液0.50 mL于25 mL 具塞试管中, 按。

26、 “标准曲线绘制” 方法进行, 在 765nm 波长下测定吸光度。 0041 1.4 结果计算 0042 根据标准曲线, 求出相当于试样吸光度的对没食子酸的含量, 按下式求出样品总 酚含量 : 0043 总酚含量 (%) =(m1V2) / (mV1) 100 0044 式中 : 0045 m1依据标准曲线计算出被测液中酚类含量 (mg) ; 0046 m 样品取样量 (mg) ; 0047 V1 待测液分取的体积 (mL) ; 0048 V2 待测液的总体积 (mL) 。 0049 2 多糖的测定方法 0050 2.1 原理 0051 采用苯酚 - 硫酸法测定。分子量大于 10000 道尔顿。

27、的多糖经 80 % 乙醇沉淀后, 在 硫酸的作用下先水解成单糖, 并迅速脱水生成糖醛衍生物, 然后与苯酚生成橙黄色化合物, 再以比色法测定。 0052 2.2 标准曲线绘制 0053 精密称取 25.0 mg 葡萄糖, 用蒸馏水溶解并定容至 100 m 。移取上述葡萄糖溶 液 0.1、 0.2、 0.4、 0.6、 0.8、 1.0 m 于 25 m 比色管中, 均用纯净水补至 2.0 m , 摇匀, 加 入苯酚试剂 1.0 m , 浓硫酸试剂 5.0 m , 立即摇匀, 冷却 30 min。同时以 2.0 m 纯净 水加苯酚试剂 1.0 m 和浓硫酸试剂 5.0 m 作空白。在 490 nm。

28、 波长处测定吸光度。 0054 2.3 样品测定 0055 取 1 2 g 样品溶于 100 mL 80 % 的乙醇溶液中, 放入冰箱静置过夜。4000 rpm 离心 10 min, 弃去上清液, 残渣用纯净水定容于 50 m 容量瓶中。取待测液 0.1 0.5 mL 取代标准溶液于 25 m 比色管中, 按 “标准曲线绘制” 方法, 测定 490 nm 波长处的吸光度。 0056 2.4 结果计算 0057 根据标准曲线, 求出相当于试样吸光度的葡萄糖的含量, 按下式求出样品的多糖 含量 : 0058 多糖含量 (%) =(m1V2) /(mV1) 100 0059 式中 : 0060 m1。

29、依据标准曲线计算出被测液中葡萄糖含量 (mg) ; 0061 m 样品取样量 (mg) ; 0062 V1 待测液分取的体积 (mL) ; 0063 V2 待测液的总体积 (mL) 。 0064 3 三萜的测定方法 0065 3.1 原理 0066 采用香草醛冰醋酸、 高氯酸显色法, 显色原理主要是使三萜类化合物的羧基脱 水, 形成双键结构, 再经双键移位、 双分子缩合等反应生成共轭双键系统, 并在酸作用下形 说 明 书 CN 103070289 B 7 5/13 页 8 成阳离子盐而显色。 0067 3.2 标准曲线绘制 0068 精密称取人参皂苷标准品10.0 mg于100 mL量瓶中, 。

30、加无水乙醇溶解并稀释至刻 度。 从中吸取标准品溶液0、 0.1、 0.2、 0.4、 0.6、 0.8、 1.0 mL, 于加热状态下用氮气吹干溶剂, 分别加入 5 % 香草醛 - 冰醋酸 0.5 mL, 然后加入高氯酸 0.8 mL, 混匀后于 65 水浴反应 15 min, 取出放置冰水中迅速冷却至室温后, 加冰醋酸 5 mL, 振荡混匀 ; 以零管为空白, 用 1 cm 的比色杯在 560 nm(人参皂甙) 处测定吸光度, 以人参皂甙的微克数为横坐标、 吸光度为 纵坐标绘制标准曲线。 0069 3.3 样品测定 0070 取 1 2 g 样品于 200 mL 圆底烧瓶中, 加入无水乙醇 。

31、100 mL, 于 80 水浴中搅 拌提取 2 h(可辅以超声波处理) , 趁热过滤得滤液并定容至 250 mL。取待测液 0.5 1.0 mL 取代标准溶液于 25 m 比色管中, 按 “标准曲线绘制” 方法, 测定 560 nm 处测定吸光度。 0071 3.4 结果计算 0072 根据标准曲线, 求出相当于试样吸光度的人参皂苷含量, 按下式求出样品总三萜 含量, 单位为克每百克 (g/100 g) 0073 三萜含量 =(mV) /(V1M) 10-6100 0074 式中 : 0075 m依据标准曲线计算出反应液中的人参皂苷量 (g) ; 0076 V提取液总体积 (mL) ; 007。

32、7 V1待测液移取的体积 (mL) ; 0078 M样品取样量 (g) 。 0079 实施例 1、 一种来源于竹子的饲料添加剂, 依次进行如下步骤 : 0080 1) 取秋冬季节采集的毛竹干青叶 (含水率 14 %) 粉碎至 10 目左右, 每 50 kg 加 入纯净水500 L热回流提取1.5 h, 过滤后将所得的滤液真空浓缩 (真空度0.09 Mpa, 温度 55 ) 至固型物含量为 25 %(质量 %) 左右, 喷雾干燥 (进风温度 185 , 出风温度 90 ) , 得竹叶提取物 4.1 kg(棕黄色粉末, 总酚含量 29.02 %, 多糖含量 8.21 %) 。 0081 2) 取水。

33、煮笋罐头加工副产物笋壳和笋头干粉 (30 目左右, 含水率 12 %, 笋 壳和笋头的干重比为1 : 1.5) , 每50 kg加入纯净水500 L热回流提取2 h, 过滤后将所得的 滤液真空浓缩至固型物含量 30 % 左右, 真空干燥 (真空度 0.09 Mpa, 温度 65 ) , 得竹 笋提取物 5.3 kg ( 浅褐色粉末 , 含多糖 23.31 %, 三萜 2.30 % )。 0082 3) 取竹材加工的副产物竹刨花干燥后 (含水率 10 %) 粉碎至 10-20 目, 每 50 kg 加入食用酒精 (乙醇体积浓度为 93-94 %) 500 L 常温 (1025) 浸提 48 h,。

34、 过滤后将 所得的滤液真空浓缩 (真空度 0.09 Mpa, 温度 45 ) 回收溶剂, 真空微波干燥 (功率密 度为 1w/g 2w/g ; 真空度为 0.08 Mpa ; 干燥时间为 2h 3h) , 得竹茹提取物 2.38 kg(浅 绿色粉末, 含三萜 11.76 %, 总酚 8.90 %) 。 0083 将以上竹叶提取物、 竹笋提取物和竹茹提取物组合成以下配方 : 0084 配方 1#: 取竹叶提取物、 竹笋提取物和竹茹提取物各 1 份组成饲料添加剂, 所得饲 料添加剂中含总酚 12.31 %、 多糖 10.51 %、 三萜 4.69 %。 0085 配方 2#: 取竹叶提取物 1、 。

35、竹笋提取物 1 份和竹茹提取物 2 份, 所得饲料添加剂中 说 明 书 CN 103070289 B 8 6/13 页 9 总酚含量为 11.46 %, 多糖含量为 7.88 %, 总三萜含量为 6.46 %。 0086 配方 3#: 取竹叶提取物 2 份、 竹笋提取物和竹茹提取物各 1 份组成饲料添加剂, 所 得饲料添加剂中含总酚 16.24 %、 多糖 9.93 %、 三萜 3.52 %。 0087 配方 4#: 取竹叶提取物 3 份、 竹笋提取物和竹茹提取物各 0.5 份, 所得饲料添加剂 中总酚含量为 23.24 %, 多糖含量为 11.99 %, 总三萜含量为 3.52 %。 008。

36、8 配方 5#: 取竹叶提取物 1 份、 竹笋提取物 2 份和竹茹提取物 1 份组成饲料添加剂, 所得饲料添加剂中含总酚 9.23 %、 多糖 13.71 %、 三萜 4.09 %。 0089 实施例 2 0090 按照干基质量比, 取毛金竹的干青叶 (含水率 14 %) 3 份、 笋壳和笋头干粉 (含水 率 12 %, 笋壳和笋头的干重比为 1 : 1.5) 2 份和竹刨花粉 (含水率 10 %) 1 份混匀, 每 50 kg 加入 500 L 的 30 % (v/v) 乙醇 - 水溶液, 热回流提取 2 h, 滤液真空浓缩至固型物含量 在 30 % 左右, 真空干燥 (真空度 0.09 M。

37、pa, 温度 65 ) 后, 得本发明的饲料添加剂 4.3 kg (棕黄色粉末, 总酚含量 23.28 %, 多糖含量 12.13 %, 三萜含量为 6.24 %) 。记作配方 6#。 0091 实验 1 0092 本发明将实施例 1 中的饲料添加剂配方 1#用于高品质肉鸡养殖。 0093 1、 试验设计 0094 用石岐胡须鸡 (香港现代农业有限公司杂交培育的一种黄羽肉鸡) 作为试验对象。 方法如下 : 选用360只26日龄的健康仔鸡, 初始体重为 (375.12 8.30) g, 随机分成4组, 每组 3 个重复, 每个重复 30 只。对照组饲喂不添加该添加剂的基础日粮 (基础日粮为粉状 。

38、配合饲料, 参考美国 NRC(1994) 肉鸡营养需要配制) 。低、 中、 高三个剂量的试验组分别在 日粮中添加 0.15 %、 0.30 % 和 0.60 % 的配方 1#的添加剂。采用笼养, 养殖试验周期为 49 天, 至 75 日龄时抽样检验。 0095 2、 试验结果 0096 (1) 免疫促进作用 0097 日粮中添加0.15 %0.60%的本发明的饲料添加剂 (配方1#) , 可显著提高肉鸡的 胸腺指数、 法氏囊指数、 血清溶菌酶活力以及血清中免疫球蛋白 IgA 和 IgM 的含量。表明其 起到了显著的免疫促进作用, 结果如表 1 所示。肉鸡免疫功能的提高可有效减少抗生素及 其他化。

39、学药物的使用。 0098 表 1 对肉鸡免疫指标的影响 0099 说 明 书 CN 103070289 B 9 7/13 页 10 0100 注 : 同行数据肩标, 不同小写字母表示差异显著 (P 0.05) , 相同或无字母表示差 异不显著 (P 0.05) 。下同。 0101 (2) 调节脂质代谢 0102 日粮中添加0.15 %0.6 %的配方1#, 可显著降低肉鸡的腹脂率、 皮下脂肪厚度、 肝脏脂肪含量以及血清 TG 的含量, 结果见表 2。表明肉鸡日粮中添加本发明的饲料添加剂 起到了显著的降脂减肥作用, 有利于生产高品质的瘦肉型鸡。 0103 表 2 对肉鸡体脂沉积的影响 0104 。

40、0105 (3) 改善肉品品质 0106 日粮中添加0.15 %0.6 %的配方1#, 可显著提高胸肌的脂肪含量、 粘附性、 弹性 以及宰杀 45 min 后胸肉的 pH 值, 显著降低鸡肉的滴水损失率和硬度, 结果详见表 3。表明 本发明的饲料添加剂可显著改善鸡肉的食用品质。 说 明 书 CN 103070289 B 10 8/13 页 11 0107 表 3 对鸡肉品质指标的影响 0108 0109 (4) 提高营养价值 0110 日粮中添加 0.15 % 0.6 % 的配方 1#显著提高了鸡肉中必需脂肪酸的比例和总 氨基酸含量, 以及钾、 钙、 镁、 铁、 锌等碱金属元素的含量, 结果如。

41、表 4 所示。表明, 本发明的 饲料添加剂可显著提高肉鸡的营养价值。 0111 表 4 对鸡肉营养指标的影响 0112 说 明 书 CN 103070289 B 11 9/13 页 12 0113 为了充分证明本发明的创造性所在, 发明人还进行了如下的对比实验 : 0114 将上述饲料添加剂均设定为中剂量 (即在肉鸡日粮中的添加 0.30%) , 对照组仍为 基础日粮。每组样本数为 30 只, 笼养。试验结束后, 每组随机抽取 10 只, 取鸡血, 测定免疫 功能 ; 其余等同于实验 1。 0115 对比例 1-1 对比例 1-7 : 0116 将实验 1 中所用的 “饲料添加剂配方 1#” 。

42、分别改成 “饲料添加剂配方 3#” 、“饲料添 加剂配方 4#” 、“饲料添加剂配方 5#” 、“饲料添加剂配方 6#” , 按照上述对比实验进行检测, 从 而分别得对比例 1-1 对比例 1-4 ; 0117 取竹叶提取物和竹笋提取物各 1.5 份组成饲料添加剂, 以该饲料添加剂替代实验 1 中所用的 “饲料添加剂配方 1#” , 按照上述对比实验进行检测, 从而分别得对比例 1-5 ; 0118 取竹叶提取物和竹茹提取物各 1.5 份组成饲料添加剂, 以该饲料添加剂替代实验 1 中所用的 “饲料添加剂配方 1#” , 按照上述对比实验进行检测, 从而分别得对比例 1-6 ; 0119 取竹。

43、笋提取物和竹茹提取物各 1.5 份组成饲料添加剂, 以该饲料添加剂替代实验 说 明 书 CN 103070289 B 12 10/13 页 13 1 中所用的 “ 饲料添加剂配方 1#” , 按照上述对比实验进行检测, 从而分别得对比例 1-7。 0120 所得的实验结果如下 : 0121 当肉鸡日粮中添加 0.30% 本发明的饲料添加剂后, 与对照组相比, 各组的免疫指 标均有不同程度的增强, 但均不如饲料添加剂配方 1#, 结果如表 5 所示。 0122 表 5 对肉鸡免疫指标的影响 0123 0124 实验 2 0125 本发明将实施例 1 中的饲料添加剂配方 2#用于高品质蛋鸡养殖。 。

44、0126 1、 试验设计 0127 选用 360 只 180 日龄的黄羽蛋鸡, 随机分成 4 组, 每组 3 个重复, 每个重复 30 只。 对照组饲喂不加该添加剂的基础日粮, 试验组在基础日粮中添加 0.60 % 的配方 2#。试验周 期为 20 天。本试验在江西南昌周边地区进行, 试验结束时, 抽取当地农户的土鸡蛋样品进 行比较。 0128 2、 试验结果 0129 结果如表 6 所示。日粮中添加 0.6 % 的配方 2#喂养蛋鸡 20 天后, 分别测定试验 组和空白组鸡蛋的各项品质指标, 表明本发明的饲料添加剂可使蛋重、 蛋壳强度、 溶菌酶活 力、 鸡蛋比重、 蛋白质高度、 哈氏单位显著。

45、增大, 表明日粮中添加本发明的饲料添加剂可显 著改善鸡蛋的品质。 0130 表 6 对鸡蛋品质的影响 0131 说 明 书 CN 103070289 B 13 11/13 页 14 0132 实验 3 0133 本发明将实施例1中的饲料添加剂配方3#、 4#、 5#和实施例2中的配方6#用于高品 质大黄鱼的人工养殖。 0134 1、 试验设计 0135 选择平均体重为 (150.0611.35 g) 的大黄鱼鱼种3600尾, 随机分成6组 (每组 3 个重复, 每个重复 200 尾大黄鱼) 。对照组采用传统的养殖方法饲喂冰鲜或小杂鱼虾。试 验组饲喂大黄鱼全价膨化颗粒饲料 (鱼粉、 虾蟹类加工副。

46、产物、 鱼油、 维生素及矿物质预混 料和大豆卵磷脂油) , 该饲料的配方中分别添加0.30 %剂量的实施例1中的配方3#、 4#、 5#和 实施例 2 中的配方 6#, 同时设一阳性对照组 (日粮中添加 0.10 % 虾青素) , 各组大黄鱼饲料 成分测定见表 7。养殖试验周期为 13 周 (从 6 月初至 10 月底) , 每月采样一次, 每组抽取 10 条试样进行分析测试。 0136 2、 试验结果 0137 (1) 免疫促进作用 0138 饲料中添加 0.30 % 的配方 3#、 4#、 5#和 6#, 可显著提高大黄鱼血清的白细胞吞噬指 数、 溶菌酶活力、 补体活力, 以配方 5#的效。

47、果为最佳, 结果如表 7 所示。表明本发明的饲料 添加剂起到了显著的免疫促进作用, 其效果普遍优于虾青素的阳性对照。养殖大黄鱼免疫 功能的提高有助于减少抗生素及其他化学药物的使用。 0139 表 7 对养殖大黄鱼免疫指标的影响 0140 说 明 书 CN 103070289 B 14 12/13 页 15 0141 (2) 减少脂肪沉积 0142 饲料中添加0.30 %的配方3#、 4#、 5#、 6#可显著降低大黄鱼鱼肉和肝脏的脂肪含量, 以以配方 5#的效果最为显著, 结果如表 8 所示。表明本发明的饲料添加剂可有效调节大黄 鱼的脂质代谢, 减少体内脂肪沉积, 防治养殖大黄鱼的肝胆综合征,。

48、 显著提升品质。 0143 表 8 对大黄鱼脂肪沉积的影响 0144 指标对照组配方 3#组配方 4#组配方 5#组配方 6#组虾青素组 鱼肉 /%6.330.42a4.620.10b4.210.32bc3.790.17c4.790.36b3.630.48c 肝脏 /%15.310.89a9.670.40b8.970.23bc7.740.75c9.980.81b8.150.66c 0145 对比例 3-1 对比例 3-4、 0146 将实验 3 中所用的 “饲料添加剂” 改成 “饲料添加剂配方 1#” 、 其余同实验 3, 从而 得对比例 3-1 ; 0147 取竹叶提取物和竹笋提取物各 2 份组成饲料添加剂, 以该饲料添加剂替代实验 3 中所用的 “饲料添加剂” , 其余同实验 3, 从而分别得对比例 3-2 ; 0148 。

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