相关申请
本申请要求主张2007年9月4日申请的日本特愿2007-228788的优先权，通过参照其整体引用成为本申请的一部分。
技术领域
本发明涉及可以用于处理狭窄的血管系统的药物缓释性支架、其制造方法以及调整从支架释放药物的速度的方法。更详细地，涉及搭载不会阻碍内皮细胞增殖的血管内膜肥厚抑制剂的支架、其制造方法以及调整从支架释放药物的速度的方法。
背景技术
近年来，支架疗法快速普及，成为患者的福音，该支架疗法是通过气囊导管，将由于动脉硬化的进行而变狭窄的动脉患部机械扩张，在其内腔留放金属制支架，试图恢复血流。对狭窄、封闭导致生命危险的可能性高的冠状动脉来说，即使留放支架，不久血管内膜就会肥厚，好容易由于留放支架确保的内腔又变狭窄，必须再次治疗的概率达到20～30％。因此，为了抑制支架内狭窄，在支架表面搭载可以起到抑制狭窄效果的药物，在血管内缓慢释放出药物，试图抑制狭窄，使用西罗莫司(シロリムス：免疫抑制剂)和紫杉醇(パクリタキセル：抗癌药)的药物释放支架(以下，有时也称作DES)已经开始使用。但是，这些药物对血管细胞(内皮细胞、平滑肌细胞)的细胞周期起作用，具有停止增殖的作用，所以平滑肌细胞的过度增殖不仅抑制血管内膜肥厚，而且还抑制支架 留放时剥落的内皮细胞的增殖，产生血管内壁修复、治愈延缓这样的副作用。血管内壁没有覆盖内皮细胞的部分容易产生血栓，所以服用抗血栓剂必须经过半年以上的很长时间，而且即使服用抗血栓剂，也有可能产生晚期血栓症，有突然猝死的危险性。
由血管内留放支架，导致支架内狭窄的因果关系的最初现象是“支架留放时对血管的伤害，特别是对内皮细胞的伤害”，接着，依次产生在伤害部位“生成血栓”、“白血球向血管的粘接、浸润”、“炎症”“平滑肌细胞的增殖”、“狭窄”这样的因果关系。因此，为了抑制“血栓生成”，从有效抑制狭窄的对策推测，其开发的初期阶段集中精力研究肝素、水蛭素等抗血栓药的药物释放支架的应用，但是还没有在临床中确认有效性。使用西罗莫司这样的紫杉醇的药物释放支架已经普及的今天，涂敷抗血栓药的支架还是少数。目前，搭载不阻碍内皮细胞增殖的血管内膜肥厚抑制剂的药物缓释性支架还无法实用。
另一方面，在专利文献1中，记载了释放出阿加曲班(アルガトロバン：抗凝血剂)和西洛他唑(シロスタゾ一ル：抗血小板剂)这两种药物的支架的实施例。另外，在专利文献2中，记载了从在磷酸缓冲溶液(pH7.4)中浸渍3周时间的含有阿加曲班的聚合物薄膜释放药物的速度。但是，还没有发现在搭载在支架的状态下有显著的抑制内膜肥厚的效果。
专利文献1：日本特开2001-190687
专利文献2：WO2007/058190
发明内容
本发明的目的在于提供可以搭载不阻碍内皮细胞增殖的血管内膜肥厚抑制剂而且可以缓释该药物的支架及其制造方法。
另外，本发明的其它目的是提供调整从支架释放药物的速度 的方法。
本发明的第1组成是一种支架，其包含具有外表面和内表面的圆筒状支架主体；至少覆盖前述支架主体的外表面的第1覆盖层；以及基本上完全覆盖前述第1覆盖层的第2覆盖层，前述第1覆盖层由第1组合物形成，该第1组合物含有聚合物和不会阻碍内皮细胞增殖的血管内膜肥厚抑制剂，前述聚合物和前述血管内膜肥厚抑制剂的重量组成比例是聚合物比血管内膜肥厚抑制剂为(8～3)∶(2～7)的范围，前述第2覆盖层由聚合物单独形成，或者由第2组合物形成，该第2组合物含有聚合物和药物，且相对于聚合物为80重量％的情形，药物的重量组成比例不足20重量％。
在上述本发明中，所述的“支架”是在血管或其它生物体内的管腔狭窄或堵塞时，为了扩张该狭窄部等，确保有必要的管腔区域，而留放在该部位的管状医疗器械。支架是在直径小时插入体内，在狭窄部位扩展，直径变大，在该管腔部保持扩展地使用。
在本发明中，所述的“聚合物”是使用包含均聚物、共聚物或聚合物的混合物的术语。
在本发明中，“第1组合物”和“第2组合物”包含聚合物和药物，药物是指在聚合物组织(包括致密组织或多孔组织)中分子分散或微细固体状微分散的药物。如后所述，在第1组合物中，药物(阿加曲班)优选为在聚合物组织中微分散形成的药物；在第2组合物中聚合物组织优选为致密组织。在本发明中，所述的“致密组织”是指通过光学显微镜观察，在组织内几乎没有观察到空隙的组织。
在本发明中，作为不阻碍内皮细胞增殖的血管内膜肥厚抑制剂，可以列举出阿加曲班(Argatroban)、希美加群(Ximelagatran)、美拉加群(Melagatran)、达比加群(Dabigatran)、达比加群酯(Dabigatran etexilate)等，它们之中优选阿加曲班，所以在下文中，以阿加曲班为例进行说明，
在本发明中，“阿加曲班”是下述化学结构式表示的(2R，4R)-4-甲基-1-[N2-((RS)-3-甲基-1，2，3，4-四氢-8-喹啉磺酰基)-L-精氨酰]-2-哌啶甲酸·水合物的通用名。阿加曲班已经作为具有抗凝血酶作用的化合物而公知(专利文献1和2)。
[化1]
在本发明第1的组成中，前述第1覆盖层的厚度优选为1～20μm的范围内，前述第2覆盖层的厚度优选为0.5～5μm的范围内。
前述第1覆盖层的阿加曲班优选在聚合物中微分散。
前述第1覆盖层中优选不含阿加曲班以外的其它药物。
前述第2覆盖层优选由聚合物单独形成。
前述第2覆盖层由第2组合物形成时，第2组合物的药物优选为阿加曲班、雷帕霉素、依维莫司、Biolimus A9、佐他莫司(Zotarolimus)、他克莫司、多西紫杉醇或他汀。
形成前述第1组合物和/或第2覆盖层的聚合物优选为生物分解性聚合物。
前述生物分解性聚合物优选为聚乳酸、聚(乳酸-乙醇酸)、聚乙醇酸、聚(乳酸-ε-己内酯)或聚(乙醇酸-ε-己内酯)。
前述支架主体优选由金属材料、陶瓷或高分子材料形成。此外，优选在支架主体表面形成金刚石样薄膜。
本发明的第2组成是一种支架的制造方法，该方法使用前述 第1组合物溶解到低级烷基酮-甲醇混合溶剂、低级烷基酯-甲醇混合溶剂或低级卤代烃-甲醇混合溶剂中形成溶液，使用该溶液，至少覆盖支架主体的外表面，覆盖后，除去溶剂，形成第1覆盖层。
本发明的第3组成是调节阿加曲班从支架释放的速度的方法，其特征在于：在上述本发明的第1组成的支架中，通过将前述第2覆盖层的厚度选择为在0.5～5.0μm的范围内的规定厚度，在37℃的磷酸缓冲生理盐水中，从前述支架浸渍时起第1天和第2天，阿加曲班的释放速度分别调节为3μg/cm2·天以上。
在上述本发明的第1组成的支架中，通过将前述第2覆盖层的厚度选择为在0.5～5.0μm的范围内的规定的厚度，在37℃的磷酸缓冲生理盐水中，从前述支架浸渍时起第2天，阿加曲班的释放速度优选为3～100μg/cm2·天的范围。
在上述本发明的第1组成的支架中，通过将前述第2覆盖层的厚度选择为在0.5～5.0μm的范围内的规定的厚度，在37℃的磷酸缓冲生理盐水中，从前述支架浸渍时起第3天到第7天，阿加曲班的释放速度优选调节为2～50μg/cm2·天的范围。
在前述第1组合物中，优选将阿加曲班在聚合物中微分散，调节阿加曲班的释放速度。
优选从低级烷基酯-甲醇混合溶剂、低级烷基酮-甲醇混合溶剂或低级卤代烃-甲醇混合溶剂中选择溶解前述第1组合物的溶剂，使用由选择的溶剂溶解前述第1组合物得到的溶液来覆盖支架主体的表面，覆盖后，除去前述溶剂，形成第1覆盖层，调节阿加曲班的释放速度。
前述第2覆盖层的聚合物优选为聚(乳酸-乙醇酸)共聚物，通过改变乳酸和乙醇酸的共聚比例，来调节阿加曲班的释放速度。
本发明的第4组成是一种抑制血管内膜肥厚的方法，该方法是将本发明的第1组成的支架留放在血管内，从前述支架释放阿 加曲班，不会阻碍内皮细胞增殖。
根据本发明的第1组成，可以得到下述支架：第1覆盖层由不会阻碍内皮细胞增殖的血管内膜肥厚抑制剂(优选阿加曲班)和聚合物构成，其重量组成比例为聚合物比血管内膜肥厚抑制剂为(8～3)∶(2～7)的范围，第1覆盖层大量含有血管内膜肥厚抑制剂，在其上，第2覆盖层由聚合物单独形成，或者由包含聚合物和药物，且相对于聚合物为80重量％的情形，药物的重量比例不足20重量％的第2组合物形成，前述血管内膜肥厚抑制剂可以以适当的释放速度持续地释放，所以不会阻碍内皮细胞的增殖，可以发挥出血管内膜肥厚抑制效果。特别是，第2覆盖层由于不含药物，或即使含有也是少量含有，尤其，第2覆盖层不含药物时，构成第2覆盖层的聚合物组织为了保持致密性，抑制第1覆盖层中含有的药物(阿加曲班)的释放，持续释放的效果增大。
此外，根据上述本发明的第1组成的支架，第1覆盖层厚度为1～20μm的范围，第2覆盖层厚度是0.5～5μm的范围，两层一起也是25μm以下，优选为20μm以下的厚度，尤其在防止狭窄方面是希望的。
在本发明的第2组成中，作为溶解第1组合物的溶剂使用的低级烷基酮、低级烷基酯或低级卤代烃是溶解聚合物的溶剂，甲醇是溶解药物(阿加曲班)的溶剂。具有下述特征：通过使用混合溶剂，可以将聚合物和药物(阿加曲班)两者都溶解，由使用该混合溶剂形成的聚合物-药物(阿加曲班)组合物形成的第1覆盖层中，药物(阿加曲班)不会在覆盖层的聚合物中溶解(分子分散)，而是微分散，所以通过控制第2覆盖层的厚度等，可以容易地控制药物的释放速度。
根据本发明的第3组成，在本发明的第1组成的支架中，特别是通过将含有高浓度的阿加曲班(优选是阿加曲班在第1覆盖层 的聚合物中微分散)的第1覆盖层上形成的第2覆盖层的厚度控制为0.1～5μm的范围内的适当的厚度，阿加曲班的释放速度可以调节为上述范围内。由此，可以得到所希望的释放速度。
根据本发明的第3组成，在支架主体上形成的覆盖层中的阿加曲班将支架在血管内、特别是动脉内留放后，经过至少2天时间，以3μg/cm2·天以上的速度释放。由此，显现出释放的阿加曲班的药理效果(血管内膜肥厚抑制)，有效地抑制支架内狭窄。此外，该支架留放1个月后，内皮细胞覆盖内膜表面整体，从而起到血栓症、特别是晚期血栓症的发病率比已有的药物释放支架更少这样的显著的效果。
本发明的药物缓释性支架可以在冠状动脉的支架治疗中有效地使用，在脑动脉、肾动脉、末梢动脉的支架治疗中也是有效的。
附图说明
该发明可以通过参考下述附图的以下合适的实施方案的说明，明确地理解。然而，实施方案和附图只是单纯的图示和说明，不能用于确定该发明的范围。该发明的范围通过附上的权利要求确定。
图1是表示本发明中使用的支架主体的形状的1个例子的立体图。
图2是表示DES2的血管剖面的病理标本的图。
图3是表示DES5的血管剖面的病理标本的图。
具体实施方式
(支架)
构成支架主体的材料没有特别的限定，可以使用目前已知的金属材料、陶瓷或高分子材料，特别优选高刚性且耐腐蚀性的金 属。作为具体例子，可以列举出不锈钢、钽、镍-钛合金(包括镍钛诺)、镁合金和钴合金(包括钴-铬-镍合金)等。作为支架主体的结构包括具有外表面和内表面的圆筒形状，可以是气球扩展型、自扩展型和它们的组合。图1是表示本发明中使用的，特别是作为药物释放支架使用的支架主体的形状的一个例子的立体图。支架主体的网格图案和支柱的形状只要是有助于支架内部狭窄的主要原因，例如血管内壁附近的血流紊乱或者支柱弯曲部的突出导致张开现象产生对血管的机械刺激为平均值以下，就没有特别的限定。作为该支架的主体，可以使用以日本第3654627号专利、日本第3605388号专利公开的钴合金作为材料的支架主体，通过这里的引用，将上述专利说明书的内容引入本说明书中。另外，像日本第4066440号专利公开的那样，在上述支架主体的表面涂敷金刚石样薄膜，改善了生物适应性的支架主体也可以在本发明中使用，通过这里的引用，也将上述专利的说明书引入本说明书中。具有规定形状的支架主体通过激光加工器等加工，通过研磨完成表面加工，从而形成。
(对支架主体的覆盖)
在本发明中，在上述的支架主体的圆筒形表面的至少外表面，优选对外表面和内表面两面，形成聚合物覆盖层，在该聚合物覆盖层中搭载药物，形成第1覆盖层。作为在支架表面搭载药物的方法，可以列举出将药物和聚合物溶解在适当的溶剂中，调配成涂敷液，将支架浸渍在涂敷液中，捞起，将溶剂干燥的浸渍法；将溶解了药物和聚合物的溶液雾化，吹附到支架上的喷雾法；将药物和聚合物分别溶解到不同的溶剂中，从2根喷嘴同时吹附到支架上的二重同时喷雾法等；在本发明中，可以使用上述任意的方法，在支架表面形成分散药物(包括分子分散)的聚合物的涂敷层的方法由于容易控制药物的释放速度，所以优选。特别是，如后 所述，在形成第1覆盖层的第1组合物中，药物(阿加曲班)优选在聚合物中微分散。
(第1覆盖层和第2覆盖层)
本发明的支架的基本结构由(a)支架主体；(b)至少在支架主体的外表面形成的包含聚合物和药物(优选阿加曲班)的第1覆盖层，和(c)在第1覆盖层上形成的聚合物单独形成的，或者相对于聚合物为80重量％的情形以重量组成比例不足20重量％含有药物的第2覆盖层构成。在第1覆盖层中搭载高浓度的药物(阿加曲班)(在聚合物中分子分散或者纳米、亚微米级的粒子状微分散保持)，通过第2覆盖层抑制药物(阿加曲班)的释放，从而在很长时间内赋予缓释性。根据第1覆盖层的厚度、第1覆盖层中的聚合物中的药物(阿加曲班)的搭载状态、第2覆盖层的厚度、第2覆盖层的聚合物组成、组织等的选择，可以控制从支架表面释放药物(阿加曲班)的速度。因此，必须形成第2覆盖层，以基本完全覆盖第1覆盖层。
(形成第1覆盖层的第1组合物)
第1覆盖层如上所述由含有聚合物和药物(阿加曲班)的第1组合物形成。第1组合物中的聚合物和药物(阿加曲班)的重量组成比例是聚合物比药物(阿加曲班)为(8～3)∶(2～7)(两者总共为10)，药物(阿加曲班)的比例不足2时，从涂层释放药物(阿加曲班)的速度过慢，如果超过7，则涂层变得脆弱，难以密合到支架基材上。第1组合物中除了聚合物和药物(阿加曲班)以外，还可以含有专利文献2中公开的释放助剂(羧酸酯、甘油的单酯、二酯，优选为酒石酸二甲酯、酒石酸二乙酯等)。在第1组合物中，如上所述，聚合物通过搭载高浓度的药物(阿加曲班)，可以长时间释放出药物(阿加曲班)。因此，为了使第1组合物的聚合物不会阻碍药物(阿加曲班)的搭载，第1组合物优选不含血管内膜肥厚抑制剂(阿加曲班)以外的药物。在第1组合物中，药物(阿加曲班)在聚合物中微分散，或 者分子分散，可以通过差示热分析确认有无结晶熔融热峰(有：微分散，无：分子分散)。
(第1组合物中的药物(阿加曲班)的搭载状态)
如上所述，重要的是插入血液中，特别是动脉中，经过规定时间后，维持从支架释放药物(阿加曲班)，在本发明的支架中，在37℃的磷酸缓冲生理盐水中，从前述支架的浸渍时间起第1天和第2天的药物(阿加曲班)的释放速度分别调节为3μg/cm2·天以上。为了使药物(阿加曲班)的释放速度为上述这样的速度，第1组合物中的药物(阿加曲班)与在聚合物中溶解，或者分子分散相比，优选为如上所述的微细分散(纳米、亚微米级的粒子状微分散)。第1组合物的聚合物中溶解药物(阿加曲班)时，插入第2覆盖层，难以在规定时间内释放出必要量。第1组合物中，形成容易释放药物(阿加曲班)的搭载状态下，通过第2覆盖层抑制为规定的释放速度，有效地控制药物(阿加曲班)的释放速度。
(构成第1组合物的聚合物)
在本发明中，着重点是在一定时间持续释放出抑制狭窄有效量的药物(阿加曲班)，因此，在第1组合物中，作为搭载药物(阿加曲班)的基质聚合物优选使用柔性聚合物，该柔性聚合物在药物(阿加曲班)容易通过扩散在该聚合物层中移动，且玻璃化转变温度(Tg)为-100～50℃的范围。作为这种柔性聚合物，可以例示硅橡胶、聚氨酯橡胶、氟树脂、聚丙烯酸丁酯(-54℃)、聚甲基丙烯酸丁酯(20℃)、丙烯酸橡胶、天然橡胶、乙烯-醋酸乙烯酯共聚物、苯乙烯-丁二烯嵌段共聚物、苯乙烯-异戊二烯嵌段共聚物、苯乙烯-异丁烯嵌段共聚物等。上述柔性聚合物在导入血管内时是不分解的，在本发明中，要求早期恢复由聚合物引起的慢性炎症产生的血管组织时，优选使用生物分解性聚合物，特别是在半年以内在生物体内分解、消失的聚合物进行覆盖。作为生物分解性聚合物的具 体例子，可以列举出聚乳酸、聚(乳酸-乙醇酸)、聚乙醇酸、聚(乳酸-ε-己内酯)、聚(乙醇酸-ε-己内酯)、聚对二氧杂环己酮、聚(乙醇酸-碳酸1，3-丙二酯)、聚-β-羟基丁酸等。特别是，聚(乳酸-乙醇酸)、聚(乳酸-ε-己内酯)、聚(乙醇酸-ε-己内酯)的玻璃化转变温度为-20～50℃的范围，而且生物分解速度是在生物体内在半年内分解消失的速度，所以在本发明中优选使用。这些聚合物的分子量从确保涂敷层的强度、涂敷作业效率的观点出发，合适的是20,000～500,000。
(聚合物的选择和药物释放速度)
一般来说，从涂层释放药物的速度在非分解性聚合物中，依赖于药物在聚合物中的扩散速度，在生物分解性聚合物中依赖于药物的扩散速度和聚合物的分解速度。因此，为了控制药物释放速度，可以适当选择聚合物种类，根据需要，可以组合不同种类的聚合物。由此，通过调节聚合物中的药物扩散速度、聚合物的分解速度这2个参数，可以控制药物释放速度。为了增大药物在聚合物中的扩散速度，合适的是选择橡胶状的聚合物；为了增大生物分解性速度，合适的是选择乙醇酸的共聚比例大的共聚物。
(生物分解性聚合物的选择和药物释放速度)
使用生物分解性聚合物作为第1组合物的聚合物时，上述生物分解性聚合物中，聚(乳酸-乙醇酸)(共聚比＝100∶0～0∶100)、聚(乳酸-ε-己内酯)(共聚比＝100∶0～25∶75)对人体有使用实效，在安全性方面是优选的。由于生物分解性聚合物的分解速度依赖于构成聚合物的单体的化学结构、共聚比、分子量，所以为了适合目标的药物释放速度，优选调节这些参数。在为聚(乳酸-乙醇酸)时，如果增加乙醇酸的比例，则分解速度变快，摩尔比为50∶50的共聚物在生物体内，在3个月左右分解消失。如果使用这种聚合物，药物在2个月内释放完。
(添加溶出助剂产生的药物释放速度的调节)
第1组合物如上所述又由聚合物和药物(阿加曲班)构成，此外，组合物中，根据需要，混合溶出助剂作为第3成分，可以加快扩散速度。适合在本发明中使用的溶出助剂如专利文献2所公开，是酒石酸二甲酯和酒石酸二乙酯。这些溶出助剂可以单独使用，或者也可以将2种组合使用。作为调节药物(阿加曲班)的释放速度优选的方案可以在生物分解性聚合物涂层中加入酒石酸二甲酯和/或酒石酸二乙酯。添加量可以根据药物(阿加曲班)的释放速度，适当设定，希望是聚合物的重量的约5～60phr的范围内。在该范围内可以得到良好的添加效果。
(第1覆盖层的厚度)
从释放适当量药物(阿加曲班)的观点出发，每单位表面积的支架(1cm2)，涂层的厚度必须是1～25μm的范围内的厚度。通常优选为2～20μm的范围。如果含有第2覆盖层，而覆盖层超过20μm，则可能增大支架内狭窄，所以作为第1覆盖层的厚度，优选不超过15μm。因此，为了满足这些涂敷条件，可以选择涂敷液组成和涂敷条件。第1涂敷层可以形成单层，也可以在上述范围内形成多层。
(第2组合物)
第2覆盖层可以由聚合物单独形成，也可以是相对于聚合物为80重量％的情形，含有不足20重量％范围的抗凝血酶药(阿加曲班等)、免疫抑制剂(雷帕霉素、依维莫司、Biolimus A9、佐他莫司、他克莫司等)、抗癌药(多西紫杉醇等)、降胆固醇药(他汀等)等药物作为聚合物以外的成分的组合物。另外，酒石酸二甲酯、酒石酸二乙酯等溶出助剂、糖类、多糖类、氨基酸类、无机-有机盐类、蛋白质等生物成分等成分起到抑制药物(阿加曲班)从第1覆盖层透过第2覆盖层(顶涂层)的速度的作用，根据情况，起到抑制 血小板凝聚、抑制血栓形成、抑制平滑肌增殖、促进血管内皮治愈等，所以可以在不超过20重量％的范围内添加适当量。
(构成第2覆盖层的聚合物)
在本发明中，在由第1组合物形成的第1覆盖层(底涂层)上，单独涂敷聚合物或者涂敷由第2组合物形成的第2覆盖层(顶涂层)，抑制药物从第1覆盖层释放的速度，赋予缓释性。作为第2组合物的构成成分优选为使用药物(阿加曲班)通过扩散在顶涂层中，以适当的速度移动的物质。作为满足这种条件的物质，合适的是分子量为10000～500000且玻璃化转变温度为-100℃～60℃的柔性聚合物。作为该聚合物的具体例子，可以例示硅橡胶、聚氨酯橡胶、氟树脂、聚丙烯酸丁酯(-54℃)、聚甲基丙烯酸丁酯(20℃)、丙烯酸橡胶、天然橡胶、乙烯-醋酸乙烯酯共聚物、苯乙烯-丁二烯嵌段共聚物、苯乙烯-异丁烯嵌段共聚物、苯乙烯-异丁烯嵌段共聚物等非分解性聚合物。在要求初期恢复来自聚合物引起的慢性炎症的血管组织时，优选使用生物分解性聚合物，此外，更优选在半年内，在生物体内分解、消失的聚合物。作为在本发明中使用的生物分解性聚合物的具体例子，可以列举出聚乳酸、聚(乳酸-乙醇酸)、聚乙醇酸、聚(乳酸-ε-己内酯)、聚(乙醇酸-ε-己内酯)、聚对二氧杂环己酮、聚(乙醇酸-碳酸1，3-丙二酯)、聚-β-羟基丁酸等，尤其聚(乳酸-乙醇酸)、聚(乳酸-ε-己内酯)、聚(乙醇酸-ε-己内酯)的玻璃化转变温度为-20～60℃的范围，而且，在半年内在生物体内分解消失，所以优选在本发明中使用。这些聚合物的分子量从确保第2覆盖层的强度、涂敷作业效率的观点出发，合适的是10,000～500,000的范围。第2覆盖层的聚合物和第1覆盖层的聚合物可以相同，也可以不同。
(第2覆盖层的厚度)
第2覆盖层的膜厚优选为0.5～5μm的范围。不足0.5μm时， 无法确定膜的均匀性，无法发挥出抑制药物(阿加曲班)的释放的功能。反之，如果厚度超过5μm，则有药物(阿加曲班)的释放速度过慢的危险。第2覆盖层可以是单层，也可以在上述范围内形成多层。
(第1覆盖层的形成方法)
为了将搭载药物(阿加曲班)的基质聚合物涂敷到基质主体表面，将该药物和聚合物溶解到易挥发性溶剂(例如，氟类醇)中，形成的溶液喷雾到支架表面，或者将该支架主体浸渍到该溶液中，涂敷到支架主体上，干燥形成。在本发明中，含有药物(阿加曲班)的第1组合物至少涂敷到圆筒形的支架主体的外表面(和血管壁接触的面)。在这种情况下，涂敷优选将第1组合物溶解到溶剂中，形成的溶液喷雾到支架主体的外表面而进行。另外，不仅是外表面，还在内表面进行时，优选对内外两个表面喷雾，或者将支架主体浸渍到溶液中进行。涂敷后的溶剂适合通过减压、送风、加热等方法除去。
(支架主体的表面处理)
在支架表面涂敷上述涂敷液时，由于溶液挥发后残留的覆盖层必须密合到支架表面，所以支架主体表面在涂敷作业前，根据需要优选进行洗涤或表面活化处理。作为表面处理方法，可以列举出用氧化剂和氟气等进行的化学试剂处理、表面接枝聚合、等离子放电处理、电晕放电处理、UV/臭氧处理、电子束照射等。
(用于形成第1组合物的溶剂的选择)
作为可以溶解药物(阿加曲班)，涂敷后可以容易除去的沸点不足100℃的挥发性溶剂，可以列举出甲醇、乙醇、三氟乙醇、六氟异丙醇和含有这些醇的混合溶剂。作为聚合物，可以使用上述例示的聚合物，特别是，极性高的聚(乳酸-乙醇酸)、聚(乳酸-ε-己内酯)在对上述溶剂的溶解性方面是优选的。作为溶解药物(阿加曲班) 和上述聚合物这两者，适合提供药物的缓释性的溶剂，除了例示三氟乙醇、六氟异丙醇以外，还可以例示乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸丁酯等低级烷基酯(碳原子数：6以下)和甲醇的混合溶剂，丙酮、甲乙酮等低级烷基酮(碳原子数：6以下)和甲醇的混合溶剂，二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷等低级卤代烃(碳原子数：4以下)和甲醇的混合溶剂等。其中，从药物(阿加曲班)在聚合物中微分散，提供药物缓释性的观点出发，优选低级烷基酯和甲醇的混合溶剂、低级烷基酮和甲醇的混合溶剂以及低级卤代烃和甲醇的混合溶剂。使用这些混合溶剂形成覆盖层除去溶剂时，将药物(阿加曲班)在聚合物中微分散搭载，在其上形成第2覆盖层，则形成有希望的药物(阿加曲班)释放速度的产品。
(第2覆盖层的形成)
第2覆盖层通过将聚合物溶解到溶剂中形成的溶液或者溶解了由聚合物和其它构成成分形成的第2组合物的溶液，涂敷到第1覆盖层上形成。涂敷方法和形成第1覆盖层的相同。
(第2组合物的形成)
作为用于形成含有形成第2覆盖层的聚合物或含有聚合物和其它构成成分的第2组合物的溶剂，可以使用形成上述第1组合物的溶剂，但是使用不溶解阿加曲班，而溶解聚合物或其它成分的溶剂(低级烷基酯、低级烷基酮、低级卤代烃等)涂敷的方法，在可以精确地控制药物释放速度方面是优选的。在这种情况下，第2组合物不含阿加曲班。
(药物释放速度的调节)
本发明的药物缓释性支架为了明显地抑制支架内狭窄，如实施例部分记载的动物实验结果所示，本发明人发现必须调节释放速度，以使支架浸渍在37℃的磷酸缓冲生理盐水(pH7.4)中后，至少2天时间内，阿加曲班以3μg/cm2·天以上，优选为4μg/cm2·天 以上，更优选为6μg/cm2·天以上的速度释放。另外，该释放速度的上限从抑制狭窄效果的观点出发，虽然还不明确，但是如果药物量过多，则可能会导致出血等副作用，而且使用必要量以上的药物量从制造成本方面出发也不合适，所以合适的是500μg/cm2·天，通常为300μg/cm2·天。另外，第3天以后的释放速度不一定是必须抑制支架内狭窄的条件，但是还希望第3天以后继续释放阿加曲班进一步提高抑制狭窄的效果，所以2μg/cm2·天以上的药物释放速度在第3天以后，还希望持续1～2周。作为将支架留放在动脉内，在最初的至少2天内，阿加曲班以3μg/cm2·天以上的释放速度释放的方法，特别优选本发明的药物涂层。也就是，为了由20～70重量％阿加曲班和80～30重量％聚合物形成的第1组合物至少在圆筒形支架主体的外表面，均匀地涂敷为厚度1～15μm的范围，而且基本完全覆盖由第1组合物形成的第1覆盖层的表面，由单独含有聚合物或含有聚合物和药物，相对于聚合物为80重量％的情形，药物的重量组成比例不足20重量％的第2组合物形成的第2覆盖层均匀地涂敷，所形成的支架可以实现调节阿加曲班的释放速度，以使在37℃的磷酸缓冲生理盐水(pH7.4)中浸渍支架后，至少2天时间内，阿加曲班以3μg/cm2·天以上、优选为4μg/cm2·天以上、更优选为6μg/cm2·天以上的速度释放。
药物(阿加曲班)的释放速度可以通过在第1组合物的聚合物中搭载高浓度的药物(阿加曲班)，第2覆盖层是由单独含有聚合物或由即使含有药物，其含量也不足20重量％的少量的组合物形成致密聚合物层的厚度在0.5～5μm的范围内存在，从而抑制第1覆盖层中含有的药物(阿加曲班)的释放，提供缓释性。特别是，在第1覆盖层中药物(阿加曲班)优选以微分散的状态搭载在聚合物中。为了使药物(阿加曲班)以微分散的状态搭载，如上所述，可以通过 选择调节含有聚合物和药物(阿加曲班)的组合物时使用的溶剂进行。
药物(阿加曲班)的释放速度受到构成第1组合物、第2覆盖层的聚合物的影响，通过使用的聚合物在上述范围内改变覆盖层的厚度，进行控制。特别是，优选乳酸和乙醇酸的共聚聚合物。
(实施例)
以下，通过实施例对本发明进行具体说明，但是这些实施例并不是试图对本发明进行限定。实施例中使用的材料、用量、浓度、处理温度等数值条件、处理方法等不过是本发明的范围内的合适的例子。
[制造例1]
将140mg阿加曲班和160mg的聚D,L-乳酸/乙醇酸共聚物(摩尔比：50/50)溶解到20mL的2,2,2-三氟乙醇中，调配为均匀的溶液(涂敷液)。具有图1所示的图案的加工时外径=1.55mmΦ、扩展后内径=3mmΦ、长17mm、全部表面积=0.70cm2的支架主体(称作支架1)，安装在喷雾式涂敷装置的心轴中。前述涂敷液以20μL/分钟的速度从喷嘴喷射，在喷嘴之下9mm的位置，边将支架主体以每分钟120转的速度旋转，边进行往返运动，经过约4分钟，在从该支架主体的端部到中央的表面进行涂敷。涂敷结束后10分钟期间，将支架在氮气流中干燥，然后，涂敷剩下的一半。全部涂敷结束的支架风干约1小时后，在真空恒温干燥器中，60℃下干燥17小时，完全除去溶剂。在相同条件下，对30根支架主体进行涂敷。用精密天平称量到μg的单位，所得的支架中平均涂敷619μg阿加曲班和前述共聚物的混合物(第1覆盖层的平均厚度5.2μm)。以下，将该支架称作DES1。
[制造例2]
将300mg的聚D,L-乳酸/乙醇酸共聚物(摩尔比：50/50)溶解到20mL的氯仿中，调配为均匀的溶液(涂敷液)。将制造例1制造的DSE1安装在喷雾式涂敷装置的心轴中。前述涂敷液以20μL/分钟的速度从喷嘴喷射，在喷嘴之下9mm的位置，边将支架以每分钟120转的速度旋转，边进行往返运动，经过约100秒钟，在从该支架的端部到中央的表面进行涂敷。涂敷结束后10分钟期间，将支架在氮气流中干燥，然后，涂敷剩下的一半。全部涂敷结束的支架风干约1小时后，在真空恒温干燥器中，60℃下干燥17小时，完全除去溶剂。在相同条件下，对15根支架进行涂敷。用精密天平称量得到的支架中，前述共聚物平均涂敷103μg(第2覆盖层平均厚度0.9μm)。以下，将该涂敷2层的支架(涂敷总量722μg，覆盖层平均厚度6.0μm)支架称作DES2。
[制造例3]
将120mg阿加曲班和180mg的聚D,L-乳酸/乙醇酸共聚物(摩尔比：50/50)溶解到20mL的2,2,2-三氟乙醇中，调配为均匀的溶液 (涂敷液)。将前述支架1安装在喷雾式涂敷装置的心轴中。上述涂敷液以20μL/分钟的速度从喷嘴喷射，在喷嘴之下9mm的位置，边将支架主体以每分钟120转的速度旋转，边进行往返运动，经过约4分钟，在从该支架主体的端部到中央的表面进行涂敷。涂敷结束后10分钟期间，将支架在氮气流中干燥，然后，涂敷剩下的一半。全部涂敷结束的支架风干约1小时后，在真空恒温干燥器中，60℃下干燥17小时，完全除去溶剂。在相同条件下，对30根支架主体进行涂敷。用精密天平称量到μg的单位，所得的支架中平均涂敷493μg阿加曲班和前述共聚物的混合物(第1覆盖层的平均厚度4.1μm)。以下，将该支架称作DES3。
[制造例4]
将300mg的聚D,L-乳酸/乙醇酸共聚物(摩尔比：50/50)溶解到20mL的氯仿中，调配为均匀的溶液(涂敷液)。将DSE3安装在喷雾式涂敷装置的心轴中。前述涂敷液以20μL/分钟的速度从喷嘴喷射，在喷嘴之下9mm的位置，边将支架以每分钟120转的速度旋转，边进行往返运动，经过约100秒钟，在从该支架的端部到中央的表面进行涂敷。涂敷结束后10分钟期间，将支架在氮气流中干燥，然后，涂敷剩下的一半。全部涂敷结束的支架风干约1小时后，在真空恒温干燥器中，60℃下干燥17小时，完全除去溶剂。在相同条件下，对15根支架进行涂敷。用精密天平称量得到的支架中，前述共聚物平均涂敷148μg(第2覆盖层平均厚度1.2μm)。以下，将该涂敷2层的支架(涂敷总量641μg，覆盖层平均厚度5.3μm)支架称作DES4。
[制造例5]
将120mg阿加曲班和180mg的聚D,L-乳酸溶解到20mL的丙酮/甲醇混合溶剂(体积比：7:3)中，调配为均匀的溶液(涂敷液)。将前述支架1安装在喷雾式涂敷装置的心轴中。前述涂敷液以20μL/分钟的速度从喷嘴喷射，在喷嘴之下9mm的位置，边将支架主体以每分钟120转的速度旋转，边进行往返运动，经过约4分钟，在从该支架主体的端部到中央的表面进行涂敷。涂敷结束后10分钟期间，将支架在氮 气流中干燥，然后，涂敷剩下的一半。全部涂敷结束的支架风干约1小时后，在真空恒温干燥器中，60℃下干燥17小时，完全除去溶剂。在相同条件下，对30根支架主体进行涂敷。用精密天平称量到μg的单位，所得的支架中平均涂敷583μg阿加曲班和前述共聚物的混合物。以下，将该支架(第1覆盖层的平均厚度4.9μm)称作DES5。
[制造例6]
将300mg的聚D,L-乳酸/乙醇酸共聚物(摩尔比：50/50)溶解到20mL的乙酸乙酯中，调配为均匀的溶液(涂敷液)。将DSE5安装在喷雾式涂敷装置的心轴中。前述涂敷液以20μL/分钟的速度从喷嘴喷射，在喷嘴之下9mm的位置，边将支架以每分钟120转的速度旋转，边进行往返运动，经过约100秒钟，在从该支架的端部到中央的表面进行涂敷。涂敷结束后10分钟期间，将支架在氮气流中干燥，然后，涂敷剩下的一半。全部涂敷结束的支架风干约1小时后，在真空恒温干燥器中，60℃下干燥17小时，完全除去溶剂。在相同条件下，对15根支架进行涂敷。用精密天平称量到μg的单位，所得的支架中平均涂敷255μg前述共聚物的混合物(第2覆盖层平均厚度2.1μm)。以下，将该涂敷2层的支架(涂敷总量838μg，覆盖层平均厚度7.0μm)支架称作DES6。
[制造例7]
将300mg的聚D,L-乳酸/乙醇酸共聚物(摩尔比：50/50)溶解到20mL的2,2,2-三氟乙醇中，调配为均匀的溶液(涂敷液)。将支架1安装在喷雾式涂敷装置的心轴中。前述涂敷液以20μL/分钟的速度从喷嘴喷射，在喷嘴之下9mm的位置，边将支架主体以每分钟120转的速度旋转，边进行往返运动，经过约4分钟，在从该支架主体的端部到中央的表面进行涂敷。涂敷结束后10分钟期间，将支架在氮气流中干燥，然后，涂敷剩下的一半。全部涂敷结束的支架风干约1小时后，在真空恒温干燥器中，60℃下干燥17小时，完全除去溶剂。在相同条件下，对10根支架进行涂敷。用精密天平称量到μg的单位，所得的支架中平均涂敷487μg前述共聚物。以下，将该支架(覆盖层的平均厚 度4.1μm)称作PCS1。
<药物释放试验1>
从制造例1～6表示的6类涂敷药物的支架测定药物释放速度。各支架安装在直径3mm、长20mm的气囊导管上，用环氧乙烷气体(EOG)杀菌。杀菌后，将气囊导管在约12大气压下加压30秒钟，将支架直径扩展到3mm。将3根支架放入清洁密闭的玻璃容器中，加入30mL的pH7.4的磷酸缓冲生理盐水。在支架整体浸渍到在液 体中的状态下，在37℃的恒温容器内震荡。
每隔规定时间通过紫外可视分光光度计UV-2450(岛津制造)测定溶出液的UV吸收(331nm)，测定阿加曲班的吸光度。使用阿加曲班浓度0.001％、浓度0.0001％的磷酸缓冲生理盐水，制造检测线，将吸光度换算为浓度，求得溶出的每1cm2支架表面积中，阿加曲班的释放量。结果如表1所示。
[表1]
DES1～6的药物释放速度
支架的 种类 浸渍0～24小时 的释放量 (μg/cm2·天) 浸渍24～48小时 的释放量 (μg/cm2·天) 浸渍48～72小时 的释放量 (μg/cm2·天) 浸渍72～96小时 的释放量 (μg/cm2·天) DES1 374 1 0 0 DES2 153 6 4 3 DES3 131 0 0 0 DES4 77 4 2 2 DES5 301 0 0 0 DES6 241 21 6 1
从表1中，2层涂敷的药物涂敷支架(DES2、DES4和DES6)中，在浸渍24小时以内都没有发现大量的激素释放，浸渍24～48小时的时间内阿加曲班的释放量为4μg/cm2·天以上，显示出阿加曲班的释放性。
<动物试验1>
将制造例1、2、4、6制造的药物释放支架、DES1、2、4、6以及制造例7的只涂敷聚合物的PCS1、支架1这6类支架各6根，总计36根，埋入18只Clawn系微型猪(クラウン系ミニブタ)(体重25～40kg)的冠状动脉(LAD、LCX)中，1个月后，通过定量冠状动脉造影法(QCA)评价支架内狭窄的程度。
将各支架安装在气囊导管中，进行EOG杀菌。各支架在全身 麻醉下，使用导管鞘从微型猪的右大腿动脉，使用6Fr的导引导管插入冠状动脉中。为了相对于原先的血管直径，使埋入支架后的血管直径(近端部)收缩为1.0～1.2的范围内，选择埋植部位和支架扩张压埋植支架。从埋植3天前到摘除支架的33天内，混合给药100mg阿司匹林(アスピリン)和50mg氯吡格雷(クロピドグレル)。
埋植30天后，通过X射线造影法，在支架埋植部位，测定支架的近端部、中央部位、远端部总计3个位置的血管内腔直径。狭窄率通过以下的计算式算出。
血管直径狭窄率＝(埋植之后的内腔直径-1个月后的内腔直径)/埋植后的内腔直径×100
算出的平均血管直径狭窄率(％)如表2所示。
[表2]
药物释放量和埋植30天后的狭窄率的关系
留放在微型 猪中的支架 的种类 实施方案 的区分 24～48小时内的 药物释放量 (μg/cm2·天) 平均血管 直径狭窄率(％) (N＝6) DES1 比较例1 1 65 DES2 实施例1 6 29 DES4 实施例2 4 36 DES6 实施例3 21 27 PCS1 比较例2 0 62 支架1 比较例3 - 41
从表2可以知道，24～48小时期间的药物释放量为4μg/cm2·天以上的DES4(实施例2)与支架1(比较例3)相比，狭窄率小。相对于此，为1μg/cm2·天以下的DES1(比较例1)与不含药物的PCS1(比较例2)相比，显示出大致相同的狭窄率，完全没有确认有抑制狭窄的效果，此外与非覆盖的支架(支架1)(比较例3) 相比，狭窄率变大，只显示出没有涂敷聚合物所产生的不良影响。
<动物试验2>
将6根制造例2制造的支架(DES2)和6根制造例5制造的支架(DES5)(比较例4)，根据动物试验1的顺序，埋入6只Clawn系微型猪(体重25～36kg)的12根冠状动脉(LAD、LCX)中，28天后病理解剖摘出心脏，用福尔马林固定。从该心脏切出埋植支架的血管组织，用丙烯酸树脂固定后，在支架中央、两端所处的3个位置进行切断，制造厚度6μm的薄切片。通过苏木紫-曙红染色和弹力纤维(Elastica van Gieson)染色而染色，评价面积狭窄率(％)和内皮细胞覆盖率(％)。对DES2来说，面积狭窄率为28±8％，和实施例1的平均血管狭窄率大致一致。内皮细胞的覆盖率为100％，完全治愈埋植支架时的血管内壁的伤害。对DES5来说，面积狭窄率为64±16％，与比较例1和比较例2的平均血管直径狭窄率大致一致。为了进行比较，在图2中表示DES2的病理标本的一个例子，在图3中表示DES5的病理标本的一个例子。
搭载在动脉用支架的表面的阿加曲班为了在37℃的磷酸缓冲生理盐水(pH7.4)中，从该支架的浸渍时间起至少2天内以3～300μg/cm2·天的速度释放，制造调节阿加曲班的释放速度的药物缓释性动脉支架。将其留放在动脉中时，释放的阿加曲班可以有效地抑制血管内膜肥厚，而且支架留放1个月以内，血管内壁几乎完全覆盖内皮细胞，这可以从以上的药物溶出试验和动物试验的结果表示。
[制造例8]
将140mg阿加曲班和160mg的聚D,L-乳酸/乙醇酸共聚物(摩尔比：65/35)溶解到20mL的丙酮/甲醇混合溶剂(体积比=7：3)中，调配为均匀的溶液(涂敷液)。对和前述支架1相同形状的涂敷金刚石样薄膜的钴合金制造的支架进行等离子放电处理后，安装在喷雾式涂敷装置的心轴上。前述涂敷液以20μL/分钟的速度从喷嘴喷射，在喷嘴之下9mm的位置，边将支架主体以每分钟120转的速度旋转，边进行往返运动，经过约4分钟，在从该支架主体的端部到中央的表面进行涂敷。涂敷结束后10分钟期间，将支架在氮气流中干燥，然后，涂敷剩下的一半。全部涂敷结束的支架风干约1小时后，在真空恒温干燥器中，60℃下干燥17小时，完全除去溶剂。在相同条件下，对10根支架主体进行涂敷。用精密天平称量到μg的单位，所得的支架中平均涂敷阿加曲班和前述共聚物的643μg混合物(第1覆盖层的平均厚度5.4μm)。以下，将该支架称作DES7。
[制造例9]
将150mg的聚D,L-乳酸/乙醇酸共聚物(摩尔比：65/35)溶解到20mL的前述丙酮-甲醇混合溶剂中，调配为均匀的溶液(涂敷液)。将制造例8制造的DES7安装在喷雾式涂敷装置的心轴中。前述涂敷液以20μL/分钟的速度从喷嘴喷射，在喷嘴之下9mm的位置，边将支架以每分钟120转的速度旋转，边进行往返运动，经过约180秒钟，在从该支架的端部到中央的表面进行涂敷。涂敷结束后10分钟期间，将支架在氮气流中干燥，然后，涂敷剩下的一半。全部涂敷结束的支架风干约1小时后，在真空恒温干燥器中，60℃下干燥17小时，完全除去溶剂。在相同条件下，对10根支架进行涂敷。用精密天平称量，则得到的支架中，前述共聚物平均涂敷241μg(厚度2.0μm)。以下，将该涂敷2层的支架(涂敷总量884μg，覆盖层平均厚度7.4μm)支架称作DES8。
[实施例4]
<药物释放试验2>
从制造例8表示的涂敷药物的支架测定药物释放速度。各支架安装在直径3mm、长20mm的气囊导管上，用环氧乙烷气体(EOG) 杀菌。杀菌后，将气囊导管在约12大气压下加压30秒钟，将支架直径扩展到直径3mm。将3根支架放入清洁密闭的玻璃容器中，加入30mL的pH7.4的磷酸缓冲生理盐水。在支架整体浸渍到在液体中的状态下，在37℃的恒温容器内震荡。
在每隔规定时间通过紫外可视分光光度计UV-2450(岛津制造)测定溶出液的UV吸收(331nm)，测定阿加曲班的吸光度。使用阿加曲班0.001％、0.0001％的磷酸缓冲生理盐水，制作检测线，将吸光度换算为浓度，求得释放出的每1cm2支架表面积，阿加曲班的释放量。结果如表3所示。
[表3]
DES8的药物释放速度
支架的 种类 浸渍0～24小时 的释放量 (μg/cm2·天) 浸渍24～48小时 的释放量 (μg/cm2·天) 浸渍48～72小时 的释放量 (μg/cm2·天) 浸渍72～96小时 的释放量 (μg/cm2·天) DES8 165 54 24 13
从表3表示，2层涂敷的药物涂敷支架(DES8)中，在浸渍24小时以内都没有发现大量的爆发式的急剧释放，浸渍24～48小时的时间内阿加曲班的释放量为46μg/cm2·天以上，显示出阿加曲班的释放性。
[实施例5～8]
将30mg阿加曲班和90mg的聚D，L-乳酸/乙醇酸共聚物(摩尔比：65/35)溶解到5mL表4所示的4类有机溶剂中，浇注在玻璃板上。将其在室温下下风干6小时后，在60℃下真空干燥17小时，回收含有阿加曲班的聚合物覆膜。该覆膜通过DSC装置(差示扫描热量测定)进行热分析。从室温到210℃以每分钟5℃的速度升温，测定阿加曲班的结晶熔融温度(吸热峰温度)。结果如表4所示。使用2，2，2-三氟乙醇进行涂敷时，从室温到210℃之间没有发现吸热峰，推测阿加曲班在聚合物中分子分散。另一方面，使用丙酮-甲 醇混合溶剂、乙酸乙酯-甲醇混合溶剂以及1，2-二氯乙烷-甲醇混合溶剂时，在178℃附近发现阿加曲班的结晶熔融的吸热峰。由此，可以判定根据使用的溶剂不同，进入聚合物中的阿加曲班的分散状态不同。
将前述浇注薄膜切出表面3cm2的切片，加入30mL的pH7.4的磷酸缓冲生理盐水。在支架整体浸入溶液中的状态下，在37℃恒温器内振荡。通过紫外可视分光光度计UV-2450(岛津制造)测定从开始浸渍的第2天到第7天溶出液的UV吸收(331nm)，测定阿加曲班的吸光度。使用阿加曲班0.001％、0.0001％的磷酸缓冲生理盐水，制作检测线，将吸光度换算为浓度，求得每1cm2释放的支架表面积的阿加曲班的释放量。结果如表4所示。与没有显现出吸热峰的实施例5相比，显现出吸热峰的实施例5、6和7的阿加曲班的释放量为10倍以上。
[表4]
使用不同的溶剂制膜的药物涂层的吸热性质
涂敷使用的溶剂 吸热峰(℃) 释放量(μg/cm2) 实施例5 2，2，2-三氟乙醇 无 8 实施例6 丙酮-甲醇混合溶剂(体积比＝7∶3) 178 101 实施例7 乙酸乙酯-甲醇混合溶剂(7∶3) 178 87 实施例8 1，2-二氯乙烷-甲醇混合溶剂2(7∶3) 178 83
<动物试验3>
将10根制造例8制造的支架(DES8)和10根使用雷帕霉素(免疫抑制剂)作为内膜肥厚抑制剂的市售的药物释放支架“Cyper”(Johnson&Johnson株式会社)，根据动物试验1的顺序，埋入8只Clawn系微型猪(体重27～43kg)的20根冠状动脉(LAD、LCX、RCA)中，90天后病理解剖，摘出的心脏，用福尔马林固定。从该心脏切出埋植支架的血管组织，用丙烯酸树脂固定后，在支架中 央、两端所处的3个位置进行切断，制造厚度6μm的薄切片。通过苏木紫-曙红染色和弹力纤维(Elastica van Gieson)染色而染色，评价面积狭窄率(％)和内皮细胞覆盖率(％)。对DES8来说，面积狭窄率为30±13％，内皮细胞的覆盖率为100％，完全治愈埋植支架时的血管内壁的伤害。对Cypher来说，面积狭窄率为54±22％，内皮细胞覆盖率为95％。
对本发明的药物缓释性支架来说，在将支架埋植微型猪1个月后，血管内皮完全修复，但是对Cypher来说，即使经过3个月，血管内壁有一部分没有被内皮细胞覆盖。
对本发明的特定的实施方案进行说明，但是本领域的技术人员明白可以容易地修正本说明书中记载的上述实施方案。因此，本发明并不限于说明书中表示的特定的实施方案。其它任意的修改、变化、对实施方案的利用也是合适的，因此，其它所有的修改、变化、实施方案应当视为在本发明的精神和范围之内。