L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量检测方法技术领域
本发明涉及L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量检测技术领域。
背景技术
L-丙氨酰-L-丙氨酸是重要的生化试剂和化工中间体，同时也是一种正在开发的
氨基酸类药物，为了能够利用L-丙氨酰氨基丙酸，就需要对其含量进行检测，从而判断产品
质量情况。但是，目前为止，现有技术中还没有一种检测L-丙氨酰-L-丙氨酸含量的方法。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量检测方法，采用
高效液相色谱外标法，能够快速、准确的测定化工生产产物中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量，
适于工业生产中使用。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量检
测方法，使用高效液相色谱法检测，所用色谱柱为氨基键合硅胶柱，柱温为30℃；以乙腈-
0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液645:350为流动相，其磷酸二氢钾缓冲盐用磷酸调PH=4.0，
流速为0.7ml/min；检测波长为215nm；
检测步骤为：
1）将待测样品用流动相稀释制备成为样品待测液，将L-丙氨酰-L-丙氨酸标准品溶于
流动相制备成为标准溶液；
2）将样品待测液、标准溶液分别采用相同的检测条件用高效液相色谱仪检测，得到样
品待测液色谱图、标准溶液色谱图，通过外标法测算出待测样品中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含
量。
所述外标法测算待测样品中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量方法为：
X=C样×待测样品的稀释倍数=(C对×A样/A对)×待测样品的稀释倍数，
式中：C对为标准溶液中L-丙氨酰-L-丙氨酸的浓度，单位为mg/ml；
A对为标准溶液色谱图的峰面积或峰高；
A样为样品待测液色谱图的峰面积或峰高；
C样为样品待测液中待测溶液的浓度，单位为mg/ml。
进一步地，样品待测液和标准溶液的色谱柱进样量均为20μl。
进一步地，样品待测液和标准溶液均经过0.45μm的有机滤膜过滤
采用上述技术方案所产生的有益效果在于：本发明能够简便、快速、准确的测定化工生
产产物中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量，可以检测化工生产中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量，从
而有针对性的对L-丙氨酰-L-丙氨酸进行回收，从而起到提高收益的积极效果，具有显著的
社会效益，适于工业生产中使用。
具体实施方式
为了解决现有技术化工生产中没有一种快速、准确检测L-丙氨酰-L-丙氨酸含量
的方法，导致不能对化工产品或中间产物中L-丙氨酰-L-丙氨酸含量的有效检测和控制，本
发明提供了一种L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量检测方法，采用高效液相色谱外标法，能够快
速、准确的测定化工生产产物中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量，适于工业生产中使用，便于对
化工产品或中间产物中L-丙氨酰-L-丙氨酸进行监测，从而调整生产工艺，提高生产效益。
下面对本发明作进一步详细的说明。
一种L-丙氨酰-L-丙氨酸的检测方法，其步骤如下：
1）标准溶液的制备：称取标品L-丙氨酰-L-丙氨酸固体25mg至25ml容量瓶中，用流动
相定容；将溶液用0.45μm的有机滤膜过滤，取1ml滤液至100ml容量瓶中并用流动相定
容，即得标准溶液。
2）样品待测溶液的制备：将液相待测样品用0.45μm的有机滤膜过滤，然后用流动
相稀释为样品待测溶液。
3）将标准溶液和样品待测溶液分别用高效液相色谱法检测，检测条件为：
用氨基键合硅胶柱为填充剂，以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（645:350）为流动相，
检测波长为215nm，其磷酸二氢钾缓冲盐用磷酸调PH=4.0，柱温为30℃，流速为0.7ml/min；
4）含量计算：待测样品液中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量为：
X=C样×待测样品的稀释倍数=(C对×A样/A对)×待测样品的稀释倍数，
式中：C对为标准溶液中L-丙氨酰-L-丙氨酸的浓度，单位为mg/ml；
A对为标准溶液色谱图的峰面积或峰高；
A样为样品待测液色谱图的峰面积或峰高；
C样为样品待测液中待测溶液的浓度，单位为mg/ml。
实施例1-3
实施例1-3分别取不同的L-丙氨酰-L-丙氨酸样品，按上述方法测量，测量数据见下表。