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1、10申请公布号CN104116963A43申请公布日20141029CN104116963A21申请号201410291143222申请日20140618A61K36/8994200601G01N30/02200601G01N30/90200601A61P39/0620060171申请人华南农业大学地址510642广东省广州市天河区五山路483号72发明人邓亚利崔明汉54发明名称一种用于抗氧化延缓衰老的五指毛桃复方制剂及其制备方法57摘要本发明公开了一种复方五指毛桃的组方，其特征在于以重量份计，包括以下份数的物质五指毛桃1550；大枣530；茯苓530；当归020；薏苡仁530。五味中药可以是。
2、药材、药材粉末、饮片或提取物组合。本发明提供了这种复方五指毛桃的提取物稠膏的制备方法和质量标准。制备方法包括五指毛桃95乙醇提取补骨脂素类成分后，药渣中再加入茯苓、当归、薏苡仁、大枣，加水提取多糖类成分。该复方提取物稠膏或粉末，采用薄层色谱法分别对五指毛桃、茯苓、大枣进行定性鉴别；采用高效液相色谱法对五指毛桃中的补骨脂素进行定量分析。该稠膏亦可用于常用口服剂型的制备，该质量标准亦适用于多种剂型的质量控制。本发明提供的这种复方具有抗氧化延缓衰老的功效。51INTCL权利要求书2页说明书12页附图1页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书2页说明书12页附图1页10申请公布号C。
3、N104116963ACN104116963A1/2页21一种由五味中药组成的中药组合物，其特征在于以重量份计，包括以下份数的物质五指毛桃1550；大枣530；茯苓530；当归020；薏苡仁530。2如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于可以是单味药材按比例组合、单味药材分别粉碎后组合、单味药材按比例组合后粉碎成粉末、单味药材分别提取后组合、某一味或几味药材提取后与其他药材组合。3如权利要求1所述的中药组合物，五味中药可以是药材、药材粉末、饮片或提取物。4如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于提取物的制备包括如下步骤称取处方量的五指毛桃干燥药材粉碎成粗粉，用10倍量95乙醇浸泡1H后，冷凝。
4、回流2H，趁热滤取药液；药渣再加8倍量95乙醇回流提取1H，合并两次滤液，减压浓缩至稠膏13013580备用。五指毛桃药渣中，再加入处方量之茯苓、当归、薏苡仁，三味药材粗粉，再称取处方量之大枣于三味药材粗粉中，加12倍量水重量与体积比，煎煮3小时，过滤；滤渣再加入10倍量水重量与体积比，煎煮2小时，过滤，合并两次滤液，减压浓缩至相对密度为13013580的稠膏。将上述两种稠膏混匀，即得；或将两种稠膏混匀后干燥后的干粉即得；或将两种稠膏分别干燥成干粉后混匀即得。5如权利要求4所述的提取物，用于制备颗粒、胶囊、片剂、粉剂、滴丸剂、汤剂等常用口服剂型。6如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于采用薄。
5、层色谱法对五指毛桃、茯苓和大枣进行定性鉴别。采用高效液相色谱法对五指毛桃中所含的补骨脂素进行含量测定。7如权利要求14所述的提取物，其中五指毛桃的定性鉴别方法如下进行如权利要求4所制备的提取物稠膏，精密称取稠膏3G，加醋酸乙酯50ML，超声25MIN，滤过，滤液浓缩至干，加醋酸乙酯2ML于2ML量瓶中，作为供试品溶液。另取五指毛桃对照药材5G，同法制成对照药材溶液。另取补骨脂素对照品，加醋酸乙酯溶解，制成每1ML含2MG的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法中国药典2010年版一部附录VIB试验，吸取上述三种溶液各3L，分别点于同一硅胶G薄层板上，正己烷三氯甲烷乙酸乙酷甲酸204507饱和10分。
6、钟后展开，展开前沿至薄层板边缘1CM左右时取出，晾干，置紫外光灯365NM下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。再喷以10硫酸乙醇溶液，置于105烘箱中显色加热至斑点清晰在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。8如权利要求14所述的提取物，其中茯苓的定性鉴别方法如下进行如权利要求4所制备的提取物稠膏，精密称取稠膏1G，加丙酮100ML回流提取1小时，过滤，取滤液水浴浓缩至约05ML，作为供试品溶液。另取茯苓对照药材1G，加丙酮20ML回流提取1小时，过滤，滤液浓缩至约05ML，作为对照药材溶液。照薄层色谱法中国药典2010年版一部附录VIB试验，吸取。
7、上述两种溶液各1520L，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚6090乙醚11为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10磷钼酸乙醇溶液，在100加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。9如权利要求14所述的提取物，其中大枣的定性鉴别方法如下进行权利要求书CN104116963A2/2页3如权利要求4所制备的提取物稠膏，精密称取稠膏1G，加水40ML使溶解，过滤，取滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ML，合并正丁醇液，用正丁醇饱和水洗涤2次，每次20ML，分取正丁醇液蒸干，残渣加1ML甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取大枣对照药材2。
8、G，加水煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20ML，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法中国药典2010年版一部附录VIB试验，吸取上述两种溶液各5L，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇冰醋酸水3105为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10硫酸乙醇溶液，在100加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同的褐色斑点。10如权利要求14所述的提取物，稠膏中五指毛桃中补骨脂素的含量测定按如下方法进行液相色谱条件采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，流动相为甲醇与水6040，检测波长为254NM，流速为1ML/MIN，温度为30，进样量为10L。对。
9、照品溶液的制备精密称取补骨脂素对照品20MG至10ML容量瓶中，加甲醇约5ML，微热溶解，冷却室温，加甲醇稀释刻度，摇匀。精密吸取浓储备液2ML至10ML容量瓶中，加甲醇稀释刻度，摇匀加甲醇稀释刻度，摇匀，用022M微孔滤膜过滤，即得对照品溶液浓度40G/ML。样品溶液的制备如权利要求4所制备的提取物稠膏，精密称取稠膏05G，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇100ML，精密称定重量，超声提取40MIN，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，用022M微孔滤膜过滤，作为样品溶液备用。11如权利要求1所述的中药组合物具有益气、补血、利湿的功效，用于气血不足、。
10、脾失健运所致的病症，具有抗氧化、延缓衰老的作用。权利要求书CN104116963A1/12页4一种用于抗氧化延缓衰老的五指毛桃复方制剂及其制备方法技术领域0001本发明涉及以五指毛桃为君药，大枣、当归、茯苓、薏苡仁五味中药组成的复方五指毛桃处方，以及复方稠膏的制备工艺、质量标准及其应用。背景技术0002五指毛桃RADIXFICIHIRTAE为桑科植物粗叶榕FICUSHIRTAVAHL的干燥根，味辛、甘，性平，具有益气健脾补肺、利湿舒筋的功效，属补益类中药。为岭南常用中药，又名牛奶木、土黄芪、南芪、五爪龙、五爪毛桃等。其药用始载于清代何克谏生草药性备要，其后吴其浚的植物名实图考、肖步丹的岭南采药。
11、录等均有记载。五指毛桃又是一种被多民族使用的药食同源的植物，在广东民间被称为“广东人参”，也是民间流传甚广的“煲汤料”，其应用历史悠久，保健作用广为认可。0003五指毛桃水提物具有调节免疫功能、抗应激及补血的作用，水提液含有多糖类成分。有文献报道证明补骨脂素为五指毛桃的主要活性成分之一，分离鉴定出的补骨脂素为呋喃香豆素类化合物，具有抗菌、抗病毒、抗凝血、抑制肿瘤、免疫调节等作用，并对红细胞系统的造血有一定的促进作用，而乙醇提取法能有效提取补骨脂素和佛手内酯等成分。0004大枣，又名红枣、干枣、枣子，起源于中国，在中国已有八千多年的种植历史，自古以来就被列为“五果”栗、桃、李、杏、枣之一。红枣富。
12、含蛋白质、脂肪、糖类、胡萝卜素、B族维生素、维生素C、维生素P以及钙、磷、铁和环磷酸腺苷等营养成分。其中维生素C的含量在果品中名列前茅，有维生素王之美称，其中，环磷酸腺苷，更是人体细胞能量代谢的必需成分，能够增强肌力、消除疲劳、扩张血管、增加心肌收缩力、改善心肌营养，对防治心血管系统疾病有良好的作用；中医中药理论认为，红枣具有补虚益气、养血安神、健脾和胃等作用，红枣对慢性肝炎、肝硬化、贫血、过敏性紫癜等病症有较好疗效；红枣含有三萜类化合物及环磷酸腺苷，有较强的抗癌、抗过敏作用。大枣能润心肺、止咳、补五脏、治虚损、除肠胃癖气，还能安中养脾、平胃气、通九窍、助十二经等。大枣中含有50多种化学物质，。
13、内含有多糖、蛋白质、脂肪、碳水化合物，维生素A、B、B2、C、E、P，有机酸和包括硒在内36种微量元素。采用水提工艺，可有效提取多糖类、水溶性维生素等成分。0005当归味甘而重，故专能补血，其气轻而辛，故又能行血，补中有动，行中有补，为血中之要药。因而，它既能补血，又能活血，既可通经，又能活络。现代研究表明当归具有清除自由基的作用，当归中阿魏酸具有抗脂质过氧化作用，能直接消除自由基，抑制氧化反应和自由基反应，并能与生物膜磷脂结合，保护膜脂质拮抗自由基对组织的损害。当归抗老化作用，当归煎剂对小鼠学习记忆具有明显的影响，用迷宫法测定，当归能改善三氯化铝所致的痴呆，降低痴呆小鼠脑的过氧化酯质水准，和。
14、B型单胺氧化的活性，能治疗老年痴呆症。0006茯苓，为多孔菌科真菌茯苓的菌核，出自神农本草经，俗称云苓、松苓、茯灵。产于云南、安徽、湖北、河南、四川等地。古人称茯苓为“四时神药”，因为它的功效非常广泛，不分四季，将它与各种药物配伍，不管寒、温、风、湿诸疾，都能发挥其独特功效。茯苓味甘、淡、说明书CN104116963A2/12页5性平，入药具有利水渗湿、益脾和胃、宁心安神之功用。0007茯苓能增强机体免疫功能，茯苓多糖有明显的抗肿瘤及保肝脏作用。也可作为食材用，有茯苓饼，茯苓粥，很有营养，口味平和。与琼珍灵芝配合煮水，有助于治疗糖尿病，肿瘤等慢性病。0008薏苡仁为禾本科植物薏苡COIXLAC。
15、RYMAJOBILVARMAYUENROMANSTAPF的干燥成熟种仁。主产湖南、河北、江苏、福建等省。味甘、淡，性微寒。有健脾利湿、清热排脓功能。用于脾虚泄泻水肿脚气、白带、湿、关节疼痛、肠痈、肺痿等症。薏苡种仁是我国传统的食品资源之一，可做成粥、饭、各种面食供人们食用。尤其对老弱病者更为适宜。其主要成分包括脂类、不饱和脂肪酸、糖类等成分，薏苡仁糖类含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖。其水提物对小鼠有降血糖作用，其活性成分为三种多糖。0009因此，本处方中以药食同源的五味中药组成，五指毛桃为君药，益气健脾补肺，益气作用明显，大枣、当归为臣药，具有补虚益气、养血安神、健脾和胃的功效，。
16、补血功效显著；茯苓、薏苡仁，为佐药，共达补气燥湿健脾之效，适用于气血不足、脾失营运、湿气阻滞所致的病症。0010本发明比较了单味五指毛桃与复方在抗氧化、延缓衰老方面的作用，结果表明复方作用优于单味药材，提示中药复方制剂的协同作用。0011本发明采用醇提法对五指毛桃中的补骨脂素类成分进行了提取，药渣再与其他几味药材采用水提工艺提取多糖类成分，更好的发挥多糖类成分的补益作用。本发明对复方中的三味药材采用薄层色谱法进行定性鉴别，采用高效液相色谱法对君药五指毛桃的香豆素类成分进行含量测定，从而保证了大生产工艺的可控性，成品质量的稳定性。发明内容0012本发明的首要目的在于提供一种由五味中药组成的中药组。
17、合物，其具有抗氧化延缓衰老的作用。0013本发明的另一目的在于提供一种复方五指毛桃组合物稠膏的制备方法和质量标准，及其在口服制剂中的应用。0014本发明的目的通过以下方式实现00151、复方五指毛桃处方0016五指毛桃1550；大枣530；茯苓530；当归020；薏苡仁530。00172、复方五指毛桃稠膏的制备方法0018步骤一、处方中的五味药材按中国药典2010年版一部各药项下有关规定净选或炮制，备用。五指毛桃净选。0019步骤二、取五指毛桃干燥药材粉碎成粗粉，用10倍量95乙醇浸泡1H后，冷凝回流2H，趁热滤取药液；再加8倍量95乙醇回流提取1H，合并两次滤液，减压浓缩至稠膏备用。保留药渣。
18、，用于与另外四味药材一起煎煮。0020步骤三、将除大枣外的三味药材粉碎成粗粉，大枣直接加入，与上一步保留的药渣合并，加水煎煮二次，第一次3小时，12倍量水；第二次2小时，10倍量水。0021步骤四、合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为13013580的稠膏。00223、复方五指毛桃稠膏的质量标准说明书CN104116963A3/12页600231薄层色谱法鉴别中药组合物中五指毛桃所含补骨脂素0024精密称取稠膏3G，加醋酸乙酯50ML，超声25MIN，滤过，滤液浓缩至干，加醋酸乙酯2ML于2ML量瓶中，作为供试品溶液。另取五指毛桃对照药材5G，同法制成对照药材溶液。另取补骨脂素对照品，加醋。
19、酸乙酯溶解，制成每1ML含2MG的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法中国药典2010年版一部附录VIB试验，吸取上述三种溶液各3L，分别点于同一硅胶G薄层板上，正己烷三氯甲烷乙酸乙酷甲酸204507饱和10分钟后展开，展开前沿至薄层板边缘1CM左右时取出，晾干，置紫外光灯365NM下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。再喷以10硫酸乙醇溶液，置于105烘箱中显色加热至斑点清晰在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点见说明书附图1和附图2，图中标号1为补骨脂素标准品；2为药材对照品、3为稠膏样品A；4为稠膏样品B；5为稠膏样品C；6为阴性对照品。0025。
20、2薄层色谱法鉴别中药组合物中的茯苓0026精密称取稠膏1G，加丙酮100ML回流提取1小时，过滤，取滤液水浴浓缩至约05ML，作为供试品溶液。另取茯苓对照药材1G，加丙酮20ML回流提取1小时，过滤，滤液浓缩至约05ML，作为对照药材溶液。照薄层色谱法中国药典2010年版一部附录VIB试验，吸取上述两种溶液各1520L，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚6090乙醚11为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10磷钼酸乙醇溶液，在100加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点见说明书附图3，图中标号1为药材对照品；2为稠膏样品A、3为。
21、稠膏样品B；4为稠膏样品C；6为阴性对照品。00273薄层色谱法鉴别中药组合物中的大枣0028精密称取稠膏1G，加水40ML使溶解，过滤，取滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ML，合并正丁醇液，用正丁醇饱和水洗涤2次，每次20ML，分取正丁醇液蒸干，残渣加1ML甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取大枣对照药材2G，加水煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20ML，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法中国药典2010年版一部附录VIB试验，吸取上述两种溶液各5L，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇冰醋酸水3105为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10硫酸乙醇溶液，在100加热至斑。
22、点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同的褐色斑点见说明书附图4，图中标号1为药材对照品；2为稠膏样品A、3为稠膏样品B；4为稠膏样品C；6为阴性对照品。00294高效液相色谱法测定中药组合物中五指毛桃所含补骨脂素的含量0030液相色谱条件采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，流动相为甲醇与水6040，检测波长为254NM，流速为1ML/MIN，温度为30，进样量为10L。0031对照品溶液的制备精密称取补骨脂素对照品20MG至10ML容量瓶中，加甲醇约5ML，微热溶解，冷却室温，加甲醇稀释刻度，摇匀。精密吸取浓储备液2ML至10ML容量瓶中，加甲醇稀释刻度，摇匀。
23、加甲醇稀释刻度，摇匀，用025M微孔滤膜过滤，即得对照品溶液浓度004MG/ML。0032样品溶液的制备精密称取稠膏05G，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇100ML，精密称定重量，超声提取40MIN，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤说明书CN104116963A4/12页7过，弃去初滤液，取续滤液，用025M微孔滤膜过滤，作为样品溶液备用。附图说明0033图1是365NM紫外光下五指毛桃的薄层色谱图0034图2是五指毛桃采用10硫酸乙醇显色后的薄层色谱图0035图3是茯苓的薄层色谱图0036图4是大枣的薄层色谱图0037图5是254NM波长下对照品补骨脂素的色谱图0038。
24、图6是254NM波长下水提取的五指毛桃药材稠膏样品色谱图0039图7是254NM波长下醇提取的五指毛桃药材稠膏样品色谱图0040图8是254NM波长下复方五指毛桃的稠膏样品色谱图具体实施方式0041实施例1五指毛桃药材提取工艺研究004211五指毛桃药材水提稠膏与醇提稠膏的制备0043五指毛桃水稠膏的制备方法称取五指毛桃药材200G，用10倍量M/V蒸馏水浸泡1H后，加热煮沸1H，趁热滤取药液；再加8倍量水，煮沸30MIN，合并两次滤液，浓缩至稠膏备用相对密度为13013580。0044五指毛桃醇稠膏的制备方法称取五指毛桃干燥药材200G，用10倍量95乙醇浸泡1H后，加热回流提取2H，趁热滤。
25、取药液；药渣再加8倍量95乙醇回流提取1H，合并两次滤液，用旋转蒸发仪减压浓缩至稠膏备用相对密度为13013580。004512两种稠膏中补骨脂素的含量测定0046采用高效液相色谱法测定，色谱条件采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，流动相为甲醇与水6040，检测波长为254NM，流速为1ML/MIN，温度为30，进样量为10L。0047对照品溶液的制备精密称取补骨脂素对照品20MG至10ML容量瓶中，加甲醇约5ML，微热溶解，冷却室温，加甲醇稀释刻度，摇匀。精密吸取浓储备液2ML至10ML容量瓶中，加甲醇稀释刻度，摇匀加甲醇稀释刻度，摇匀，用022M微孔滤膜过滤，即得对照品溶液浓度004。
26、MG/ML。0048样品溶液的制备分别精密称取水提稠膏、醇提稠膏各05G，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加甲醇100ML，精密称定重量，超声提取40MIN，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，用022M微孔滤膜过滤，作为样品溶液备用。0049两种稠膏中补骨脂素的含量测定结果见表1采用外标一点法计算药材中补骨脂素的提取率，结果表明同一批药材，采用95乙醇回流提取，有效成分补骨脂素的提取率高于水提的稠膏。0050表1五指毛桃不同提取工艺补骨脂素含量结果0051说明书CN104116963A5/12页8005213两种稠膏中多糖类成分的含量测定0053采用紫。
27、外分光光度法检测不同提取方法制备的稠膏中，多糖类成分的含量。0054标准曲线试验精密称取葡萄糖105干燥3H15MG置25ML容量瓶中，加蒸馏水至刻度，配成浓度为06MG/ML的葡萄糖标准品溶液。精密吸取上述溶液05、12、19、26、33ML分别置25ML容量瓶中，分别加水至刻度，再分别移取2ML置10ML容量瓶中，再加入4苯酚溶液1ML，摇匀后迅速加入7ML浓硫酸，摇匀后于40水浴中保温30MIN，取出，置冰水浴中5MIN，取出，摇匀后静置10MIN，在490NM测吸收度。结果见表2，以吸光度为纵坐标，以浓度G/ML为横坐标，进行线性回归，得回归方程为Y00383X01096R209995。
28、，表明浓度在2401584G/ML之间，与吸收度相关性良好。0055表2标准曲线结果005600570058样品的制备精密称取水提取稠膏2G，分别加入80乙醇50ML，超声510MIN使稠膏完全混悬，避光静置过夜，过滤，滤渣置红外干燥箱干燥，干燥后秤取重量。再加适量水加热溶解，定容置50ML容量瓶中，再吸取05ML定容置25ML容量瓶中，吸取2ML置10ML容量瓶中，然后加人4苯酚溶液1ML，摇匀后迅速加人7ML浓硫酸，摇匀后于40水浴中保温30MIN，取出，置冰水浴中5MIN，取出，摇匀后静置10MIN，在490NM测吸收度。0059水提稠膏的测定结果见表4。醇提稠膏因为采用的是95的乙醇回。
29、流提取，而多糖类成分在80的乙醇中沉淀析出，故乙醇提取的稠膏中不含有多糖类成分。0060表4水提稠膏中多糖类成分含量0061说明书CN104116963A6/12页90062从上述试验结果可知采用95乙醇回流提取的五指毛桃稠膏中，补骨脂素的含量高于水提取稠膏，但水提的稠膏中含有大量多糖类成分，而多糖类成分具有较好的补益作用。因此，为了有效提取五指毛桃中补骨脂素和多糖类成分，应根据两种不同极性类成分采用不同的溶剂，分步提取，先用乙醇提取极性较小的补骨脂素等香豆素类成分，再采用水提取极性较大的多糖类成分，更好地利用药材的有效成分，发挥其疗效。0063实施例2复方五指毛桃稠膏的制备及其中补骨脂素、多。
30、糖的含量测定006421复方五指毛桃稠膏的制备0065根据实施例1中五指毛桃药材提取研究的结果，复方五指毛桃的稠膏制备工艺如下0066步骤一、处方中的五味药材按中国药典2010年版一部各药项下有关规定净选或炮制，备用。五指毛桃净选。0067步骤二、取五指毛桃干燥药材粉碎成粗粉，用10倍量95乙醇浸泡1H后，冷凝回流2H，趁热滤取药液；再加8倍量95乙醇回流提取1H，合并两次滤液，减压浓缩至稠膏备用。保留药渣，用于与另外四味药材一起煎煮。0068步骤三、将除大枣外的三味药材粉碎成粗粉，大枣直接加入，与上一步保留的药渣合并，加水煎煮二次，第一次3小时，12倍量水；第二次2小时，10倍量水。0069。
31、步骤四、合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为13013580的稠膏。007022复方五指毛桃稠膏中补骨脂素的含量测定0071色谱条件、样品溶液的制备依照实施例1中12项，三批样品测定结果为03526、04123、03827MG/G。007223复方五指毛桃稠膏中多糖的含量测定0073样品的制备方法依照实施例1中13项进行，并采用13项下的标准曲线计算吸光度如果超过线性范围可适当稀释。结果见表5。0074表5复方稠膏中多糖类成分的含量结果00750076实施例3采用氧化时间法测定抗氧化能力0077比较五指毛桃水提取物、醇提物与复方制剂的抗氧化、抗衰老作用。007831对照品制备精密称取维生素。
32、C粉末005G，置50ML锥形瓶中，加水10ML，搅拌至溶解，转移置50ML容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，备用。007932样品制备分别取水提、醇提、复方稠膏约05G，精密称定，共3份，置50ML锥形瓶。分别加入50乙醇10ML，50超声提取30MIN，取出，冷却，滤过，滤液置50ML量瓶中，加水至刻度，摇匀。稀释2倍后备用。008033测定方法精密吸取对照品溶液、样品溶液各10ML，置50ML具塞锥形瓶中，立说明书CN104116963A7/12页10即加入20硫酸溶液2ML，振摇1MIN，立即加入002MOLL1高锰酸钾溶液005ML，计时，当溶液的紫红色完全消退时，记录时间。00813。
33、4试验结果及数据0082氧化时间测定结果见表6，氧化时间依次是复方稠膏样品水提稠膏维生素C乙醇提取的稠膏，说明五指毛桃再组成复方后抗氧化能力比单味药材有所提高。0083表6氧化时间法测定结果008400850086实施例4采用普鲁士蓝法测定抗氧化能力0087通过对还原力的测定，比较五指毛桃水提取物、醇提物与复方制剂的抗氧化、抗衰老作用。0088分别精密吸取实施例3中对照品溶液、样品溶液01ML，加入25ML磷酸盐缓冲液02M，PH66，02MNA2HPO402MNAH2PO4375625及50ML1W/V铁氰化钾K3FECN6溶液，于50水浴反应20MIN后迅速冷却，加入25ML10W/V的三。
34、氯乙酸TCA溶液，混匀，3000RMP离心10MIN，取上清液25ML，加入25ML蒸馏水和05ML01W/V的氯化铁溶液，混合均匀，10MIN后于700NM处测定其吸光值，以蒸馏水为空白，吸光值越大表示还原力越强，结果与维生素C的还原力做对照试验结果见表7。结果表明还原力依次为维生素C复方稠膏水提稠膏醇提稠膏。0089表7还原力法测定结果00900091实施例5复方五指毛桃颗粒的制备0092【处方】0093说明书CN104116963A108/12页110094【工艺】0095称取处方量的五指毛桃干燥药材粉碎成粗粉，用10倍量95乙醇浸泡1H后，冷凝回流2H，趁热滤取药液；药渣再加8倍量95。
35、乙醇回流提取1H，合并两次滤液，减压浓缩至稠膏13013580备用。0096五指毛桃药渣中，再加入处方量之茯苓、当归、薏苡仁，三味药材粗粉，再称取处方量之大枣于三味药材粗粉中，加12倍量水重量与体积比，煎煮3小时，过滤；滤渣再加入10倍量水重量与体积比，煎煮2小时，过滤，合并两次滤液，减压浓缩至相对密度为13013580的稠膏。0097将上述两种稠膏混匀，加入淀粉、糖粉，混匀，制备软材，过14目筛制粒，60干燥，14目整粒，装入铝塑袋，即得，每袋装量为25G。0098实施例6复方五指毛桃颗粒的制备工艺考察009961粉碎工艺考察0100以出粉率为考察指标，对需粉碎的四味药材按处方比例，进行了考。
36、察，结果见表8如下0101表8、粉碎工艺考察0102010362水提取工艺考察0104吸水率试验按处方比例50G称取需加水煎煮的五味药材，加水12倍量，浸泡过夜，称取药渣湿重为197G。则吸水率19765/651002260105提取工艺试验按处方比例500G称取需加水煎煮的五味药材，分别加入不同量的水煎煮，合并煎液，浓缩成稠膏，干燥成干膏，对出膏率进行考察，以确定其最佳提取工艺。试验结果见表9。从试验结果可知，试验1号与试验2号的出膏率相当，但是试验2号总加水量较少，易于浓缩，适于大生产。故选择加水量为12倍、10倍。0106表9、提取工艺研究结果01070108工艺验证实验对提取工艺分别进。
37、行三批验证5KG药材，扩大处方量10倍，结果表10。结果表明，按处方量放大10倍，验证试验结果表明，与小试试验结果一致，且三批说明书CN104116963A119/12页12试验重复性良好，收率稳定。由此确定水提最佳工艺条件为处方量之药材加水煎煮二次，加水量分别为12倍、10倍，煎煮时间分别为3小时、2小时。0109表10、水提取工艺验证试验结果表0110011163浓缩与干燥工艺0112分别进行常压浓缩和减压浓缩，常压浓缩费时、劳动效率低，浓缩时间长对有效成分容易破坏，故采用减压浓缩。减压浓缩008MPA，65至相对密度为13013580的稠膏后，备用。011364成型工艺研究0114润湿剂。
38、的选择稠膏加入淀粉、糖粉混合均匀，因为本品中浸膏量较大，如果以水为润湿剂则容易粘筛，所以分别以不同浓度的乙醇为润湿剂进行筛选50乙醇、75乙醇、水少量，过14目筛制粒，湿颗粒60干燥。过14目筛整粒。以颗粒的完整性、是否容易通过筛网为评价指标，进行比较，结果见表11。通过比较，选择了75乙醇为润湿剂用于制粒。0115表11、润湿剂选择试验结果01160117颗粒流动性考察用固定漏斗法测定休止角，以确定本品的流动性。经过10次的测定，其休止角的平均值为358，表明流动性较好。0118颗粒影响因素考察本品颗粒中，浸膏的比重较大，故湿度对颗粒的影响较大，进行不同湿度条件下的吸湿增重实验，实验结果见表。
39、12实验结果表明，湿度对颗粒影响较大，制成颗粒后应及时灌装；生产时应注意调节室内湿度，控制在60以下。0119表12颗粒吸湿增重实验结果0120012165中试放大试验0122按拟定生产工艺条件进行三批放大20倍量生产，考察本品生产工艺的合理性，结说明书CN104116963A1210/12页13果见表7。结果表明，本工艺适于大生产，工艺合理，重复性良好。0123表13、中试生产工艺参数012401250126实施例7复方五指毛桃颗粒的质量标准0127复方五指毛桃颗粒0128FUFANGWUZHIMAOTAOKELI0129【处方】01300131【制法】0132称取处方量的五指毛桃干燥药材粉。
40、碎成粗粉，用10倍量95乙醇浸泡1H后，冷凝回流2H，趁热滤取药液；药渣再加8倍量95乙醇回流提取1H，合并两次滤液，减压浓缩至稠膏13013580备用。五指毛桃药渣中，再加入处方量之茯苓、当归、薏米，三味药材粗粉，再称取处方量之大枣于三味药材粗粉中，加12倍量水重量与体积比，煎煮3小时，过滤；滤渣再加入10倍量水重量与体积比，煎煮2小时，过滤，合并两次滤液，减压浓缩至相对密度为13013580的稠膏。将上述两种稠膏混匀，加入淀粉、糖粉，混匀，制备软材，过14目筛制粒，60干燥，14目整粒，装入铝塑袋，即得，每袋装量为25G。0133【性状】本品为颗粒剂，内容物为棕褐色的颗粒和粉末；味淡、微甘。
41、。0134【鉴别】01351、精密称取颗粒内容物3G，加醋酸乙酯50ML，超声25MIN，滤过，滤液浓缩至干，加醋酸乙酯2ML于2ML量瓶中，作为供试品溶液。另取五指毛桃对照药材5G，同法制成对照药材溶液。另取补骨脂素对照品，加醋酸乙酯溶解，制成每1ML含2MG的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法中国药典2010年版一部附录VIB试验，吸取上述三种溶液各3L，分别点于同一硅胶G薄层板上，正己烷三氯甲烷乙酸乙酷甲酸204507饱和10分钟后展开，展开前沿至薄层板边缘1CM左右时取出，晾干，置紫外光灯365NM下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。再喷以10硫说明。
42、书CN104116963A1311/12页14酸乙醇溶液，置于105烘箱中显色加热至斑点清晰在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。01362、精密称取颗粒内容物1G，加丙酮100ML回流提取1小时，过滤，取滤液水浴浓缩至约05ML，作为供试品溶液。另取茯苓对照药材1G，加丙酮20ML回流提取1小时，过滤，滤液浓缩至约05ML，作为对照药材溶液。照薄层色谱法中国药典2010年版一部附录VIB试验，吸取上述两种溶液各1520L，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚6090乙醚11为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10磷钼酸乙醇溶液，在100加热至斑点显色清晰。供。
43、试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。01373、精密称取颗粒内容物1G，加水40ML使溶解，过滤，取滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ML，合并正丁醇液，用正丁醇饱和水洗涤2次，每次20ML，分取正丁醇液蒸干，残渣加1ML甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取大枣对照药材2G，加水煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至20ML，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法中国药典2010年版一部附录VIB试验，吸取上述两种溶液各5L，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇冰醋酸水3105为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10硫酸乙醇溶液，在100加热至斑点显色清晰。供试。
44、品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个相同的褐色斑点。0138【检查】应符合颗粒剂项下有关的各项规定中国药典2010年版一部附录。0139【含量测定】照高效液相色谱法中国药典2010年版一部附录VID测定。0140色谱条件与系统适用性试验采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，流动相为甲醇与水6040，检测波长为254NM，流速为1ML/MIN，柱温为30。理论塔板数按补骨脂素计算不低于3000。0141对照品溶液的制备精密称取补骨脂素对照品适量，加甲醇制成每1ML含40G的溶液，即得。0142供试品溶液的制备精密称取颗粒内容物1G，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇100ML，精。
45、密称定重量，超声提取40MIN，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用022M微孔滤膜过滤，即得。0143测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10L，注入液相色谱仪，测定，即得。0144本品每袋含五指毛桃以补骨脂素计，不得少于030MG。0145【用法与用量】一次1袋，放入温水中或肉汤中。0146【规格】铝塑袋包装，每袋装25G0147【贮藏】密封。0148【有效期】2年。0149实施例8复方五指毛桃滴丸剂的制备015081根据权力14的复方提取物稠膏，作为药物提取物。015182基质聚乙二醇1500，2000，4000，6000，8000，10000，2000。
46、0、硬脂酸聚烃氧40酯、倍他环糊精、泊洛沙姆、甲基淀粉钠、十二烷基硫酸钠、硬脂酸、硬脂酸钠、甘油明胶、聚乙烯吡咯烷酮、虫胶等可药用载体，基质以任意两种或两种以上，按11110配比说明书CN104116963A1412/12页15配成混合基质，调整丸剂的硬度、溶出时限、外观等考察指标，以确定为最佳配比。015283配比以G或KG为单位，按重量份计，药物提取物基质1119。015384制备过程包括按照配方所给出的比例，准确称取药物提取物和基质，将其置于加热容器内边搅拌边加热，直至得到含有药物提取物和基质的熔融液和/或乳浊液和/或混悬液备用。0154采用自制的或通用的滴丸机，并调整滴丸机的温度控制系统，使滴丸机的滴头温度加热并保持在5090，冷凝剂的温度冷却并保持在510冷凝剂是甲基硅油或/和液体石蜡或/和植物油；将含有药物提取物和基质的熔融液和/或乳浊液和/或混悬液，倒入滴丸机的滴头罐内，按一定的速度滴制，保证丸型完整即得。015585基质的最佳配比为聚乙二醇6000与聚乙二醇10000按照64混合；药物与基质的最佳配比为12。生产得到的滴丸，圆整度、成形性、硬度均好，平均丸重为003834G，崩解时限为3MIN，丸重差异及崩解时限符合中国药典2010版规定。说明书CN104116963A151/1页16图1图2图3图4图5图6图7图8说明书附图CN104116963A16。