一种木腐食用菌母种培养基及配制方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201610918212.7

申请日:

2016.10.20

公开号:

CN106431697A

公开日:

2017.02.22

当前法律状态:

实审

有效性:

审中

法律详情:

实质审查的生效IPC(主分类):C05G 3/00申请日:20161020|||公开

IPC分类号:

C05G3/00

主分类号:

C05G3/00

申请人:

广西玉林市和兴农业科技有限公司

发明人:

文雪妮; 谭小红

地址:

537000 广西壮族自治区玉林市江南区金港路金港国际名城1幢2单元1421房

优先权:

专利代理机构:

北京天盾知识产权代理有限公司 11421

代理人:

易晓钰

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内容摘要

本发明提供一种木腐食用菌母种培养基及配制方法,所述木腐食用菌母种培养基主要以去皮凉薯、茅草、狗粪、杉树皮、桂圆干、梧桐子、鸭蛋壳、松果、琼脂和水为原料制成。本发明还提供了所述培养基的配制方法,其步骤包括原料处理、配制培养基、分装、封口、捆扎、灭菌、摆斜面。本发明培养基经多年使用,所转接培养的木腐食用菌菌种不论是纯化、复壮或继代培养,其菌丝生长浓密度、整齐度及生长速度均优于传统培养基PDA,特别是用冰箱低温保藏的母种,在使用硅胶塞情况下,保藏1~2年后转接,其成活率仍可达到96%以上,且无品种退化、变异等现象发生。

权利要求书

1.一种木腐食用菌母种培养基,其特征在于:所述木腐食用菌母种培养基主要以去皮
凉薯、茅草、狗粪、杉树皮、桂圆干、梧桐子、鸭蛋壳、松果、琼脂和水为原料制成;所述水为凉
开水或纯净水。
2.如权利要求1所述的木腐食用菌母种培养基,其特征在于:所述木腐食用菌母种培养
基主要由如下重量份的原料制成:去皮凉薯40-60份、茅草20-30份、狗粪10-15份、杉树皮
10-15份、桂圆干20-25份、梧桐子4-7份、鸭蛋壳3-6份、松果7-10份、琼脂20-25份和水1100-
1200份。
3.如权利要求2所述的木腐食用菌母种培养基,其特征在于:所述木腐食用菌母种培养
基主要由如下重量份的原料制成:去皮凉薯50份、茅草25份、狗粪13份、杉树皮13份、桂圆干
23份、梧桐子5份、鸭蛋壳5份、松果9份、琼脂23份和水1150份。
4.如权利要求1所述的木腐食用菌母种培养基的配制方法,其特征在于:所述木腐食用
菌母种培养基的配制方法包括以下步骤:
(1)按要求拣取所述原料;
(2)原料处理:将去皮凉薯切成1-2cm的小块,将茅草和杉树皮铡成1-2cm长度;
(3)制作:①煮料:将狗粪和100份水加热煮沸后继续小火煮15-20min,而后趁热用6层
纱布过滤,将滤液装在烧杯内,放于3℃以下低温处静置过夜,然后吸取上清液;将桂圆干、
梧桐子、鸭蛋壳、松果和步骤(2)处理后的去皮凉薯、茅草、杉树皮分别反复冲洗干净并沥
干,混合放入煎煮锅中,再倒入剩余的水加热煮沸后继续小火煮30-40min,而后趁热用4-6
层纱布过滤,取滤液,得煎煮液;②配制:将步骤①所得上清液和煎煮液与琼脂混合放入煎
煮锅中中火加热,直至琼脂完全融化,停止加热,而后趁热用4-6层纱布过滤,取滤液,得配
制液;
(4)分装、封口和捆扎:将步骤(3)所得配制液分装入试管中,每个试管的装入量为试管
长度的2/5,用硅胶塞封口,将封口后的试管每10支扎成一捆,每捆上部用牛皮纸包裹;
(5)灭菌和摆斜面:将步骤(4)中捆扎后的试管放入高压灭菌锅内,关闭放气阀,通电
后,待压力上升到0.05MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀,
通电,压力表压力上升至0.1MPa时,开始计时,维持压力0.1~0.15MPa 20min,然后切断电
源,待压力降到0.5MPa再将放气阀打开,使锅内热蒸汽连同冷空气一同排出,当压力降到零
后,开盖,取出培养基,将试管摆成斜面,斜面长度为试管总长度的1/2,以待冷凝。

说明书

一种木腐食用菌母种培养基及配制方法

【技术领域】

本发明涉及食用菌母种培养领域,尤其是一种木腐食用菌母种培养基及其配制方
法。

【背景技术】

目前,食用菌的营养早已被人们接受,已经成为家家餐桌上的日常菜肴,市场需求
量越来越大,因此,种植面积也越来越大。食用菌按其栽培所需的原材料可分为草腐菌和木
腐菌,草腐菌所需栽培主要原料为作物秸秆以及禾木科秸秆原料,木腐菌栽培的主要原料
为阔叶树的木屑和棉籽壳。用作物秸秆为主要原料栽培的品种和棉籽壳栽培的品种的培养
料必须要经过堆制发酵。木腐食用菌是指生于枯木或活立木的死部分,分解吸收其养分,破
坏其结构,导致木材腐朽的食用菌。由于木腐食用菌是从动植物尸体或无生命的有机物质
中获取养料,所以木腐型食用菌较易培养,当前人工栽培食用菌中绝大多数,例如香菇、杏
鲍菇、白灵菇、黑木耳、金耳、银耳、榆耳、槐耳、平菇、金针菇等,都是木腐型食用菌。

传统的木腐食用菌的母种分离和继代培养,多采用马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂
20g、水1000ml的PDA培养基,亦有在此基础上加入MgSO(分析纯)1.5g、4KHPO(分析纯)3g的
综合PDA培养基用于母种低温保存。实践证明,在生产中若长期使用该类培养基,部分食用
菌品种易出现菌丝生长细弱、品种抗逆性降低或品种退化现象,给食用菌菌种生产、保存产
生严重的影响。

【发明内容】

针对现有技术中的问题,本发明的目的是要提供一种新的木腐食用菌母种培养基
及其制备方法,该母种培养基适宜平菇、香菇、金针菇、黑木耳、灵芝等多种木腐食用菌的母
种分离和继代培养,且无菌丝生长不良、品种抗逆性降低和退化现象发生。

为达到上述目的,本发明采用如下技术方案:一种木腐食用菌母种培养基,所述木
腐食用菌母种培养基主要以去皮凉薯、茅草、狗粪、杉树皮、桂圆干、梧桐子、鸭蛋壳、松果、
琼脂和水为原料制成;所述水为凉开水或纯净水。

进一步地,所述木腐食用菌母种培养基主要由如下重量份的原料制成:去皮凉薯
40-60份、茅草20-30份、狗粪10-15份、杉树皮10-15份、桂圆干20-25份、梧桐子4-7份、鸭蛋
壳3-6份、松果7-10份、琼脂20-25份和水1100-1200份。

进一步地,所述木腐食用菌母种培养基主要由如下重量份的原料制成:去皮凉薯
50份、茅草25份、狗粪13份、杉树皮13份、桂圆干23份、梧桐子5份、鸭蛋壳5份、松果9份、琼脂
23份和水1150份。

另外,本发明还提供了所述木腐食用菌母种培养基的配制方法,该配制方法包括
以下步骤:

(1)按要求拣取所述原料;

(2)原料处理:将去皮凉薯切成1-2cm的小块,将茅草和杉树皮铡成1-2cm长度;

(3)制作:①煮料:将狗粪和100份水加热煮沸后继续小火煮15-20min,而后趁热用
6层纱布过滤,将滤液装在烧杯内,放于3℃以下低温处静置过夜,然后吸取上清液;将桂圆
干、梧桐子、鸭蛋壳、松果和步骤(2)处理后的去皮凉薯、茅草、杉树皮分别反复冲洗干净并
沥干,混合放入煎煮锅中,再倒入剩余的水加热煮沸后继续小火煮30-40min,而后趁热用4-
6层纱布过滤,取滤液,得煎煮液;需要注意,在煮料过程中,需不停轻轻搅拌,防止粘锅、溢
锅或焦底;②配制:将步骤①所得上清液和煎煮液与琼脂混合放入煎煮锅中中火加热,直至
琼脂完全融化,停止加热,而后趁热用4-6层纱布过滤,取滤液,即得配制液;

(4)分装、封口和捆扎:将步骤(3)所得配制液分装入试管中,每个试管的装入量为
试管长度的2/5,用硅胶塞封口,将封口后的试管每10支扎成一捆,每捆上部用牛皮纸包裹;

(5)灭菌和摆斜面:将步骤(4)中捆扎后的试管放入高压灭菌锅内,关闭放气阀,通
电后,待压力上升到0.05MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气
阀,通电,压力表压力上升至0.1MPa时,开始计时,维持压力0.1~0.15MPa 20min,然后切断
电源,待压力降到0.5MPa再将放气阀打开,使锅内热蒸汽连同冷空气一同排出,当压力降到
零后,开盖,取出培养基,将试管摆成斜面,斜面长度为试管总长度的1/2,以待冷凝;该过程
需要注意,打开放气阀时应缓慢打开,注意不要使压力降低太快,以致引起激烈的减压沸
腾,使容器中的液体四溢。

本发明的有益效果:

本发明中凉薯使用部分为肥大的块根,富含糖类、蛋白质、碳水化合物、维生素和
硫胺素,还含有钙、铁、锌、硒、磷、钾、钠、铜、镁、锰等矿质元素,营养物质丰富,含有的硫胺
素是菌丝生长的必需因子,不需额外添加;茅草、杉树皮和松果,含有丰富的纤维素、木质素
和矿质元素,为菌丝生长提供丰富的碳源和矿质元素;狗粪含有蛋白质、无机物、脂肪、尿
素、维生素K、维生素B等,提供丰富的氮源和生长因子;桂圆干含碳水化合物、蛋白质、脂肪、
粗纤维、维生素C、烟酸和维生素K等多种营养成分,同时还含有菌丝生长所需的大量元素
钙、磷、镁和钾等;梧桐子富含蛋白质、磷和碳水化合物,提供碳源和氮源;鸭蛋壳主要以碳
酸钙形式存在,其余还有少量的镁、钾、铜和微量铁,提供大量元素镁、钾、钙和微量元素铁;
琼脂是以藻类的石花菜属及江蘺属制成的明胶产品,作为培养基的凝固剂。

综上所述,与现有技术相比,本发明的有益效果为:本发明培养基所转接培养的木
腐食用菌菌种不论是纯化、复壮或继代培养,其菌丝生长浓密度、整齐度及生长速度均优于
传统培养基PDA,特别是用冰箱低温保藏的母种,在使用硅胶塞情况下,保藏1~2年后转接,
其成活率仍可达到96%以上,且无品种退化、变异等现象发生。

【具体实施方式】

下面的实施例可以帮助本领域的技术人员更全面的理解本发明,但不可以以任何
方式限制本发明。

实施例1:

一种木腐食用菌母种培养基,主要由以下重量份的原料制得:去皮凉薯40份、茅草
20份、狗粪10份、杉树皮10份、桂圆干20份、梧桐子7份、鸭蛋壳6份、松果10份、琼脂25份和水
1200份。其中,所述水为凉开水或纯净水。具体制备方法包括以下步骤:

(1)按要求拣取所述原料;

(2)原料处理:将去皮凉薯切成1-2cm的小块,将茅草和杉树皮铡成1-2cm长度;

(3)制作:①煮料:将狗粪和100份水加热煮沸后继续小火煮15-20min,而后趁热用
6层纱布过滤,将滤液装在烧杯内,放于3℃以下低温处静置过夜,然后吸取上清液;将桂圆
干、梧桐子、鸭蛋壳、松果和步骤(2)处理后的去皮凉薯、茅草、杉树皮分别反复冲洗干净并
沥干,混合放入煎煮锅中,再倒入剩余的水加热煮沸后继续小火煮30-40min,而后趁热用4-
6层纱布过滤,取滤液,得煎煮液;需要注意,煮料过程需不停轻轻搅拌,防止粘锅、溢锅或焦
底;②配制:将步骤①所得上清液和煎煮液与琼脂混合放入煎煮锅中中火加热,直至琼脂完
全融化,停止加热,而后趁热用4-6层纱布过滤,取滤液,即得配制液;

(4)分装、封口和捆扎:将步骤(3)所得配制液分装入试管中,每个试管的装入量为
试管长度的2/5,用硅胶塞封口,将封口后的试管每10支扎成一捆,每捆上部用牛皮纸包裹;

(5)灭菌和摆斜面:将步骤(4)中捆扎后的试管放入高压灭菌锅内,关闭放气阀,通
电后,待压力上升到0.05MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气
阀,通电,压力表压力上升至0.1MPa时,开始计时,维持压力0.1~0.15MPa 20min,然后切断
电源,待压力降到0.5MPa再将放气阀打开,使锅内热蒸汽连同冷空气一同排出,当压力降到
零后,开盖,取出培养基,将试管摆成斜面,斜面长度为试管总长度的1/2,以待冷凝;该过程
需要注意,打开放气阀时应缓慢打开,注意不要使压力降低太快,以致引起激烈的减压沸
腾,使容器中的液体四溢。

实施例2:

一种木腐食用菌母种培养基,主要由以下重量份的原料制得:去皮凉薯50份、茅草
25份、狗粪13份、杉树皮13份、桂圆干23份、梧桐子5份、鸭蛋壳5份、松果9份、琼脂23份和水
1150份。其中,所述水为凉开水或纯净水。具体制备方法与实施例1相同。

实施例3:

一种木腐食用菌母种培养基,主要由以下重量份的原料制得:去皮凉薯60份、茅草
30份、狗粪15份、杉树皮15份、桂圆干25份、梧桐子4份、鸭蛋壳3份、松果7份、琼脂20份和水
1100份。其中,所述水为凉开水或纯净水。具体制备方法与实施例1相同。

对比试验:

对比组1:原料未采用桂圆干,其他原料、用量和制作方法同实施例2;

对比组2:原料采用马铃薯代替凉薯,且马铃薯取50份,其他原料、用量和制作方法
同实施例2;

对比组3:铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml的PDA培养基。制作方法按照常
规方法。

分别取生长状态相同的平菇、金针菇、香菇3种经过活化的菌种,接到上述实施例
1-3和对比组1-3的斜面培养基上,每个菌种每个培养基接10支试管,25℃恒温培养,当菌丝
萌发后表现出良好的生长状态时,每天定时在试管壁上划线并观察菌丝生长密度。菌丝的
日均生长速度=(第3~10d共8天的生长长度)/8,其中,第3~10d共8天的生长长度等于第3
天和第10天试管壁上划线的距离。各菌株在6种培养基上的生长如下表1所示:

表1各菌株在6种培养基上的生长





注:“++++”表示菌丝浓密,“+++”表示菌丝较密,“++”表示菌丝稀疏,“+”表示菌丝
极稀。

由上表1可见,相对于改变本发明的原料组成(未采用本发明桂圆干、将凉薯换为
具有相同功效的马铃薯),采用与实施例2相同的制作方法制得的培养基,本发明实施例2制
得的培养基菌丝密度和生长速度都高于对比组1和对比组2,改变原料种类,甚至是采用相
同功效的原料进行替换,对菌丝的生长有一定的影响;由实施例2与对比组3对比可以看出,
本发明培养基培养的菌丝生长浓密度、整齐度及生长速度均优于传统培养基PDA。

虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在
本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因
此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。

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本发明提供一种木腐食用菌母种培养基及配制方法,所述木腐食用菌母种培养基主要以去皮凉薯、茅草、狗粪、杉树皮、桂圆干、梧桐子、鸭蛋壳、松果、琼脂和水为原料制成。本发明还提供了所述培养基的配制方法,其步骤包括原料处理、配制培养基、分装、封口、捆扎、灭菌、摆斜面。本发明培养基经多年使用,所转接培养的木腐食用菌菌种不论是纯化、复壮或继代培养,其菌丝生长浓密度、整齐度及生长速度均优于传统培养基PDA,特别是用。

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