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1、10申请公布号CN104107273A43申请公布日20141022CN104107273A21申请号201410192480622申请日20140508A61K36/82200601A61K36/61200601A61P31/04200601A01N65/28200901A01P1/00200601A61K31/194200601A61K31/353200601A61K31/375200601A61K31/522200601A61K31/35520060171申请人长沙玄黄生物科技有限公司地址410000湖南省长沙市芙蓉区人民东路516号西街花园B28栋115房72发明人何小解何思懿74专利。
2、代理机构广州凯东知识产权代理有限公司44259代理人姚迎新54发明名称一种天然复方抗炎抑菌剂及应用57摘要本发明涉及一种天然复方抗炎抑菌剂，其特征在于由下述重量百分比的原料组成水溶性茶多酚1020，脂溶性茶多酚1020，维生素C24，咖啡因1020，维生素E0103，NACL2030，壳聚糖15，环糊精36，柠檬酸1015，丁香0103，薰衣草005015，迷迭香005015，鼠尾草002006,百里香003006。本发明从茶叶中提取茶多酚，制成既能抑菌，又能消炎且无副作用的产品，而实现抑菌抗炎的作用。51INTCL权利要求书1页说明书7页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要。
3、求书1页说明书7页10申请公布号CN104107273ACN104107273A1/1页21一种天然复方抗炎抑菌剂，其特征在于由下述重量百分比的原料组成水溶性茶多酚1020，脂溶性茶多酚1020，维生素C24，咖啡因1020，维生素E0103，NACL2030，壳聚糖15，环糊精36，柠檬酸1015，丁香0103，薰衣草005015，迷迭香005015，鼠尾草002006,百里香003006。2权利要求1所述的抑菌剂在制备治疗感染性疾病药物中活性成分的应用。3权利要求1所述的抑菌剂在制备治疗炎症药物中活性成分的应用。4根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述抑菌剂在制备治疗妇科炎症药物中活性成。
4、分的应用。5权利要求1所述的抑菌剂在餐具消毒中的应用。权利要求书CN104107273A1/7页3一种天然复方抗炎抑菌剂及应用技术领域0001本发明涉及由天然产物提取的抗炎抑菌剂，以及该抗炎抑菌剂在各种领域的应用。背景技术0002周围的病菌，时时刻刻在侵害我们的身体，大多数的时候，我们体内的免疫系统，都可以应付这些病菌的入侵。但如果病菌突然大量繁殖，超过了防御系统所能应付的范围，我们就会生病。因此，就预防医学的角度来看，抑制细菌的滋生是很重要的。抑菌剂就是能抑制细菌生长的物质。抑菌剂的种类很多，常用的抑菌剂有对羟基苯甲酸酯类，如羟苯甲酯，羟苯乙酯等；阳离子表面活性剂，如苯扎氯铵，苯扎溴铵等；醇。
5、类，如三氯叔丁醇；有机汞类，如硫柳汞，硝酸汞；酸类如山梨酸；抗菌药物类，抗菌药物是一种重要、也最常用的一类抑菌剂，一般是指具有杀菌或抑菌活性的药物，包括各种抗生素、磺胺类、咪唑类、硝基咪唑类、喹诺酮类等化学合成药物。是一类由细菌、放线菌、真菌等微生物经培养而得到的某些产物，或用化学半合成法制造的相同或类似的物质，也可化学全合成。抗菌药物在一定浓度下对病原体有抑制和杀灭作用。0003具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应为炎症。从进化角度看，血管反应是炎症过程的中心环节。在炎症过程中，一方面损伤因子直接和/或间接造成组织和细胞的破坏，另一方面通过炎症充血和渗出反应，以稀释、杀伤和包围损。
6、伤因子。同时通过实质和间质细胞的再生使受损伤的组织得以修复和愈合。因此可以说炎症是损伤与抗损伤的统一过程。任何能够引起组织损伤的因素都可成为炎症的原因。虽然致炎因子种类繁多，但可归纳为以下几大类。00041物理性因子高热、低温、放射线及紫外线等。00052化学性因子包括外源性和内源性化学物质。外源性化学物质有强酸、强碱等腐蚀性物质及松节油、芥子气等。内源性化学毒物如坏死组织的分解产物及在某些病理条件下堆积于体内的代谢产物如尿素等。00063机械性因子如切割、撞击、挤压等。00074生物性因子细菌、病毒、立克次体、支原体、真菌、螺旋体和寄生虫等为炎症最常见的原因。它们通过在体内繁殖，产生、释放毒。
7、素直接导致细胞和组织损伤，而且还可通过其抗原性诱发免疫反应导致炎症。00085免疫反应各型变态反应均能造成组织和细胞损伤而导致炎症型变态反应如过敏性鼻炎、荨麻疹；型变态反应如抗基底膜性肾小球肾炎；型变态反在如免疫复合物性肾小球肾炎和型变态反应如结核、伤寒等等；此外还有某些自身免疫性疾病如淋巴性甲状腺炎、溃疡性结肠炎等。0009炎症的局部临床特征是红、肿、痛和功能障碍。红、热是由于炎症局部血管扩张、血流加快所致。肿是由于局部炎症性充血、血液成分渗出引起。由于渗出物压迫和某些炎症介质直接作用于神经末梢而引起疼痛。炎症所引起的全身反应包括发热和末梢血白细胞说明书CN104107273A2/7页4计数。
8、增多。发热在感染性炎症，特别是当病原体蔓延入血时常表现很突出。白细胞所产生的白细胞介素1和肿瘤坏死因子，以及前列腺素E均可引起交感神经兴奋，使皮肤血管收缩，散热降低而造成发热。在细菌感染引起的炎症时，末梢血白细胞计数可达1510920109/L，甚至更高，这主要是由于白细胞介素1和肿瘤坏死因子所引起的骨髓中白细胞储存库释放加速，而且相对不成熟的杆状核中性粒细胞所占比例增加，这就是临床上所称的“核左移”。持续稍久的感染还可以通过集落刺激因子的产生而促进骨髓造血前体细胞的增殖。某些病毒性疾病和伤寒等炎症还能出现末梢血白细胞计数降低。0010炎症是机体的防御性反应，通常对机体是有利的，如果没有炎症反。
9、应，人们将不能长期生存于这个充满致炎因子的自然环境中。但是炎症对机体也有潜在的很大危害性，严重的过敏反应可危及病人的生命；心包腔内纤维素性渗出物机化可形成缩窄性心包炎，进而影响心功能；发生于脑实质或脑膜的炎症可引起颅内压升高，甚至形成脑疝致使生命中枢受压而造成病人死亡；此外声带急性炎症水肿可导致窒息，等等。因此在一定情况下应采取措施控制炎症反应。0011炎症通常可依病程经过分为两大类急性炎症ACUTEINFLAMMATION和慢性炎症CHRONICINFLAMMATION。急性炎症起病急骤，持续时间短，仅几天到一个月，以渗出病变为其特征，炎症细胞浸润以粒细胞为主。慢性炎症持续时间较长，常数月到。
10、数年，常以增生病变为主，其炎症细胞浸润则以巨噬细胞和淋巴细胞为主。0012炎症主要应用消炎药进行治疗，值得注意的是，消炎药不是抗菌药，抗菌药物不是消炎药。消炎药主要有非甾体类和甾体类。非甾体类药物包括阿司匹林、对乙酰氨基芬、双氯芬酸、消炎痛吲哚美辛、布洛芬、芬布芬、等等。甾体类主要就是肾上腺皮质激素类药物，即糖皮质激素。0013通常，在现实生活中，感染可以诱发炎症，炎症也可导致感染，二者有时是相辅相存的，因此，在临床治疗中，常将二者结合在一起进行综合考虑与治疗。大多数情况下，抑菌药物与抗炎药物需要同时使用，这就难以避免一些药物的不良作用出现，抗生素的大量使用对细菌来说会产生耐药性，从而使抗生素。
11、的抗菌作用减弱或消失，结果是药物疗效降低，疾病更难治；外用或口服皮质类固醇类似可的松药物有助于减轻炎症肿胀、瘙痒和潮红，但由于它们抗细菌或真菌感染的效果较差，通常不用于感染部位或伤口。有时皮质类固醇与抗真菌剂联合用于减轻真菌引起的瘙痒。皮质类固醇若与抗生素联合使用，则增加了并发过敏反应的危险。特别是当应用肾上腺皮质激素类药物消炎时，由于其能抑制机体的免疫功能，从而使机体自身抗细菌或真菌感染的能力下降。发明内容0014针对上述技术问题，本发明提供一种由天然产物提取出来的、无毒副作用的、可以食用的复方抗炎抑菌剂。0015本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为一种天然复方抗炎抑菌剂，其特征在于由下。
12、述重量百分比的原料组成水溶性茶多酚1020，脂溶性茶多酚1020，维生素C24，咖啡因1020，维生素E0103，NACL2030，壳聚糖15，环糊精36，柠檬酸1015，丁香0103，薰衣草005015，迷迭香005015，鼠尾草002006,百里香003006。本发明从茶叶中提取茶多酚，制成既能抑菌，又能消说明书CN104107273A3/7页5炎且无副作用的产品，而实现抑菌抗炎的作用。0016本发明的抑菌剂在制备治疗感染性疾病药物中活性成分的应用。0017本发明的抑菌剂在制备治疗炎症药物中活性成分的应用。0018进一步的，所述抑菌剂在制备治疗妇科炎症药物中活性成分的应用。0019本发明的。
13、抑菌剂在餐具消毒中的应用。0020茶多酚是从茶叶中提取出来的一种天然复方抗氧化剂，除了具有抗氧化的作用外,它还具有抗菌消炎的生物活性；茶多酚抑菌的结构基础主要是其分子中的酚羟基。茶多酚分子中的众多酚羟基可与蛋白质分子中的氨基或羧基结合,其疏水性的苯环结构也可与蛋白质发生疏水结合,茶多酚与蛋白质之间的这种多点结合作用阻止了细菌的侵染,使其具有抑菌性。茶多酚对19个细菌类群中的12个类群近百种细菌均有抑制作用,其抑菌能力与浓度呈正相关。茶多酚对细菌的最小抑制浓度MIC一般仅为每千克数百毫克,对食品中常见的几种微生物如金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌和志贺氏痢疾杆菌等MIC均未超过1000MG。
14、/KG,对众多肠道致病菌的MIC大多为400500MG/KG,因此，茶多酚对细菌具有广谱抑制作用和较强的抑制能力。此外茶多酚对口腔链球菌突变株SMUTANS也有抗菌的效果。在茶叶提取物中加入如维生素C,维生素E或植酸等，其抗氧化效果会增强,酒石酸、柠檬酸和EDTA乙二胺四乙酸分子中具有很多羟基结构,显酸性,有利于茶多酚的稳定,其质子可释放出来用于还原茶多酚,使茶多酚恢复抗氧化能力；另一方面,有机酸中的多羟基结构能螯合金属离子,阻断金属离子的助氧化作用。0021茶多酚和脂溶性茶多酚联合使用的抗氧化作用显著高于茶多酚和脂溶性茶多酚单独使用，原因是抗氧化剂可以更加均匀地分布于乳化体系中,从而提高其抗。
15、氧化能力。另一方面,在热力学上由于界面力的作用,极性抗氧化物质在油脂中的分散是不稳定的,容易被排斥至油/气界面上,有利于形成保护油脂的屏障。而非极性抗氧化剂却极易分布于油/水界面。正是由于极性抗氧化剂和非极性抗氧化剂在抗氧化功能上的互补性,使茶多酚和脂溶性茶多酚联合使用抗氧化作用显示显著的协同增效作用。添加环糊精、壳聚糖可增强茶多酚的保鲜效果。食盐能增强茶多酚的抑菌活性,并随食盐质量浓度的增加,茶多酚抑菌活性呈量效关系。咖啡因对食品常见污染菌有明显的抑菌作用,且具有热稳定性强、抑菌浓度低、及抑菌PH范围广。同时，丁香、薰衣草、迷迭香、鼠尾草和百里香等精油，抑菌效果较好。具体实施方式0022实施。
16、例10023取水溶性茶多酚6000MG,脂溶性茶多酚6000MG,维生素C1200MG,咖啡因6000MG,维生素E100MG,NACL9000MG,壳聚糖450MG,环糊精2000MG,柠檬酸5000MG,丁香100MG、薰衣草50MG、迷迭香50MG、鼠尾草20MG和百里香30MG等共36克，充分混匀备用。0024细菌金黄色葡萄球菌STAPHYLOCOCCUSAUREUS,S、大肠杆菌ECHERICHIACOLI,E、枯草芽孢杆菌BACILLUSSUBTILIS,B、汉逊氏酵母HANSENULASP,H、青霉菌PENICILLIUM,P，分别简写为S、E、B、H、P和A。0025用上述材料。
17、配制含15、12、09茶多酚的溶液见下表1说明书CN104107273A4/7页60026采用牛肉膏蛋白胨培养基进行常规培养，用滤纸片扩散法测定不同质量分数15、12、09茶多酚的茶多酚溶液的抑菌效果。0027表1茶多酚溶液配制表00280029将培养基制成平板，细菌用牛肉膏蛋白胨培养基，酵母及霉菌用马铃薯培养基。用无菌生理盐水将各种细菌配制成106107个/L孢子悬液，取02ML均匀涂抹到灭菌平板上。然后将浸过茶多酚溶液的滤纸放到每个涂有菌液的平板上，等距离放3片，每个试验平行6次。以无菌水作对照。结果见表2当茶多酚浓度为12时，抑菌效果最好，15时抑菌效果反而有所下降，因此浓度为12的茶多。
18、酚即可达到较好的抑菌效果。0030表2不同浓度茶多酚的抑菌效果00310032注表示无抑菌效果。0033实施例20034配方水溶性茶多酚8200MG,脂溶性茶多酚8200MG,VC1000MG,咖啡因4100MG,VE100MG,NACL7400MG,壳聚糖450MG,环糊精1000MG,柠檬酸5000MG,丁香200MG、薰衣草150MG、迷迭香150MG、鼠尾草20MG和百里香30MG。0035研究了大中小剂量分别为09、12、15茶多酚的抗炎作用,由表3可见,大、中、小剂量茶多酚溶液对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀均有一定的抑制作用,并呈剂量相关性；茶多酚对足跖肿胀的抑制效果与阿斯匹林相近,彼此。
19、间无显著差异P005。说明此茶多酚有显著抗炎作用。0036表3茶多酚溶液对角叉胶诱发大鼠足跖肿胀的影响0037说明书CN104107273A5/7页70038注P005,P001,与CK比。0039实施例30040配方水溶性茶多酚7000MG,脂溶性茶多酚7000MG,VC1200MG,咖啡因6000MG,VE100MG,NACL9000MG,壳聚糖450MG,环糊精2000MG,柠檬酸5000MG,丁香10MG、薰衣草5MG、迷迭香100MG、鼠尾草10MG和百里香50MG。0041处方茶多酚混合物60G,明胶225G,甘油90G,纯化水45ML,共制备40粒每粒含茶多酚60MG0042制备。
20、方法取明胶加适量纯化水使浸润溶胀,加甘油,搅拌均匀,另准确称取茶多酚,加纯化水搅拌使溶解,合并入基质中,混匀后置恒温箱中,70E恒温脱泡2H,取出后灌注于事先涂有液状石蜡的阴道栓模具中,待凝固好,脱模,包装,即得。0043菌种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、白色念珠菌、厌氧菌。0044方法采用药物琼脂平皿法制备含茶多酚及洁尔阴分别为150、100、50、10、5、25MG/ML的培养基和不含药物的培养基,即药物营养琼脂平皿、药物沙氏培养基及药物厌氧菌培养基。取一接种大肠杆菌18H的培养液分别接种于不同浓度的药物营养琼脂平皿中,同法将金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、乙型溶。
21、血性链球菌接种于药物沙氏培养基中,将白色念珠菌、厌氧菌接种于药物厌氧菌培养基中；另相应各接种一套不含药物的培养基作对照。置于37下培养并于不同时间进行观察,结果详见表4、表5。0045表4茶多酚对阴道致病菌的体外抑菌试验结果00460047表5洁尔阴对阴道致病菌的体外抑菌试验结果0048说明书CN104107273A6/7页80049表45中,“”表示抑菌环小于12MM或无抑菌环；”表示抑菌环在1218MM；“”表示最低抑菌浓度。0050结果一定浓度茶多酚和洁尔阴对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、白色念珠菌和厌氧菌等阴道致病菌均有抑制作用。50MG/ML茶多酚对白色葡萄球菌和白色念珠菌有抑制作用。
22、；对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、厌氧菌,10MG/ML茶多酚即有较强抑制作用；对大肠杆菌，5MG/ML茶多酚即有较强抑制作用,而洁尔阴对上述各菌的有效抑菌浓度为100150MG/ML。说明茶多酚对阴道致病菌有较强的抑菌作用,且效果优于洁尔阴。0051实施例40052配方水溶性茶多酚7500MG,脂溶性茶多酚7500MG,VC1200MG,咖啡因4000MG,VE100MG,NACL9000MG,壳聚糖450MG,环糊精1000MG,柠檬酸7000MG,丁香5MG、薰衣草5MG、迷迭香100MG和百里香10MG，加蒸馏水，配制成1公斤溶液，使用时10倍稀释。0053将80件餐具碗随机分成三。
23、组，每组20件，第一组用常规法洗涤与消毒高温消毒臭氧消毒,第二组用本发明配制的清洗液洗涤与消毒高温消毒臭氧消毒,第三组用本发明配制的清洗液洗涤后，常温烘干，第四组用常规法洗涤后，常温烘干。每组采样10件,每件贴纸片4张,每张纸片面积25CM25CM5CM用无菌生理盐水湿润大肠菌群检测用纸片后,立即贴于食具内侧表面,30S后取下，2张放入无菌塑料袋内，另外2张放入10ML的无菌生理盐水中浸泡10分钟。0054大肠菌群检验方法将已采样的纸片置37培养1618H，若纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。0055致病菌检验方法在无菌操作的前提条件下,吸取。
24、1ML的原液加入到9CM的平皿里,在倒入35ML37的营养琼脂,在37的温箱里培养24小时,取出来计算它的菌落单位总数0056洗消剂残留量采样与检验0057采样方法消毒食饮具碗、盘、碟、口杯、酒杯，用蒸馏水100ML冲洗整个内表面，至少23次；匙不包括匙柄、筷下段置入100ML蒸馏水中，充分振荡20次，制成样液。立即取样测定余氯，余下样液装入50ML试管中，做烷基苯磺酸钠含量测定。采样同时计算被检食饮具的表面。0058检验方法按GB5750执行。0059结果如下说明书CN104107273A7/7页900600061注“”表示未能检出。0062上述实施方式仅供说明本发明之用，而并非是对本发明的限制，有关技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明精神和范围的情况下，还可以作出各种变化和变型，因此所有等同的技术方案也应属于本发明的范畴。说明书CN104107273A。