吲哚芳砜类衍生物及其制备方法与应用技术领域
本发明涉及一种衍生物及其制备方法与应用，特别涉及吲哚芳砜类衍生物及其制
备方法与应用，属于医药技术领域。
背景技术
在HIV复制周期中，其自身多功能性蛋白逆转录酶(RT)发挥着至关重要的作用，负
责完成RNA指导的DNA合成、RNA的水解以及DNA指导的DNA合成等多个关键环节。因此，以RT
作为药物设计的靶点来防治艾滋病具有抑制活性高、选择性好、毒副作用小等优势，是目前
研发抗HIV/AIDS药物的重要策略。根据作用机制及化学结构的不同，HIV-1逆转录酶抑制剂
主要可分为核苷(酸)(nucleos(t)ide reverse transcriptase inhibitors,N(t)RTIs)和
非核苷(Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors,NNRTIs)两类。其中，
NNRTIs的作用机制是与距离RT催化活性中心的变构性口袋(NNIBP)特异性结合，进而
导致RT重要功能的丧失来抑制病毒的复制。由于其结合的特异性，NNRTIs通常具有高效、低
毒的优点，因而已成为HAART的重要组成部分。目前FDA批准上市的该类药物有5个
(nevirapine,delavirdine,efavirine,etravirine,rilpivirine)。但是由于NNRTIs结合
口袋的氨基酸极易发生突变而导致耐药病毒株的产生与蔓延，加之现有药物生物利用度低
以及长期用药带来的严重毒副作用使得该类药物的临床应用受到极大威胁。因此，寻找新
型抗耐药低毒的NNRTIs仍是当前抗艾滋病药物研发的重要课题。
吲哚芳砜类化合物(indolylaryl-sulfone,IAS)最早是由Merk实验室的Williams
等人报道的一类具有很好活性的HIV-1NNRTIs结构骨架。先导化合物L-737,126对野生型
(WT)RT抑制作用可达到3nM，同时对临床常见变异病毒株K103N、Y181C的抑制作用也可达到
亚微摩尔水平。在随后的结构改造中，多个化合物的抗HIV-1的活性都明显提高，特别是针
对临床常见的耐药病毒株均具有很强的抑制作用，如化合物EFF对野生型HIV-1的EC50值为
2nM，对多种常见突变病毒株Y181C、K103N、L100I和E138K的抑制活性保持纳摩尔水平。因
此，以吲哚芳砜类化合物为模板，进行广泛的结构修饰，对发现高效广谱、生物利用度好且
具有自主知识产权的新型抗HIV药物具有重要意义。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种吲哚芳砜类衍生物，本发明还提供上述
化合物的制备方法以及活性筛选结果和应用。
本发明的技术方案如下：
一、吲哚芳砜类衍生物
本发明的吲哚芳砜类衍生物或其药学上可接受的盐或前药，具有如下通式I所示
的结构：
其中，
吲哚5-位的取代基X为卤素，CF3或NO2；
n等于0、1、2或3；
m,w各自单独等于1或2；
R为(C1-6)烷基-R1、(C3-7)环烷基-R1、(C2-6)链烯基-R1、-C(O)R1、-C(O)OR1、-S(O)-
R1、-SO2-R1、NH-R1、苯基、5-或6-元芳杂环、稠合的苯基-不饱和的或饱和的5-或6-元碳环、
或稠合的苯基-5-或6-元芳杂环；
其中R1选自H、OH、SH、NH2、O-(C1-4)烷基、S-(C1-4)烷基或NH-(C1-4)烷基；所述的苯
基、5-或6-元芳杂环、稠合的苯基-不饱和的或饱和的5-或6-元碳环、或稠合的苯基-5-或6-
元芳杂环各自依次任选被1至3个独立选自下列的取代基所取代：(C1-6)烷基、卤素、CF3、
OCF3、OH、NO2、CN、SO2NH2、SO2-(C1-3)烷基、C(O)NH2、C(O)(C1-3)烷基、NH(C1-3)烷基；
根据本发明优选的，
吲哚5-位的取代基X为Cl或Br；
n等于0或1；
m和w同时等于2；
R为CH2OH、CH2COOCH2CH3、取代的苯基、吡啶基、呋喃基、噻吩基或取代的三唑基。
根据本发明，进一步优选的，通式I化合物为下列结构的化合物之一：
二、吲哚芳砜类衍生物的制备方法
本发明吲哚芳砜类衍生物的制备以5-位取代的吲哚甲酸乙酯(1)为起始原料，与
3,5-二甲基苯硫酚反应制得中间体化合物2，中间体经间氯过氧苯甲酸氧化得到中间体化
合物3，将中间体化合物3的乙酯基水解得到中间体化合物4，中间体化合物4经过酰化反应
并脱去BOC保护基得到母环6，不同的取代基对母环6进行取代制得吲哚芳砜类衍生物I；
合成路线如下：
试剂和条件:(i)3,5-二甲基苯硫酚,1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛
烷二(四氟硼酸)盐,乙腈；(ii)间氯过氧苯甲酸,二氯甲烷,0℃；(iii)氢氧化锂,水,四氢呋
喃,50℃；(iv)Boc保护的含氮环烷基-氨基,2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲
六氟磷酸酯,1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐,三乙胺,N,N-二甲基甲酰胺；
(v)三氟乙酸,二氯甲烷；(vi)碳酸钾,N,N-二甲基甲酰胺,卤苄，卤素取代的烷基；(vi)取代
的甲醛,冰乙酸,氰基硼氢化钠,四氢呋喃/乙腈.
其中，X、n、m、w、R的定义同上通式I所述。
根据本发明优选的，吲哚芳砜类衍生物的制备方法，包括如下步骤：
本发明吲哚芳砜类衍生物的制备以5-氯/溴取代的吲哚甲酸乙酯(1’)为起始原
料，与3,5-二甲基苯硫酚反应制得中间体化合物2’，中间体化合物2’经间氯过氧苯甲酸氧
化的到中间体化合物3’，氢氧化锂将中间体化合物3’的乙酯基水解得到中间体化合物4’，
中间体化合物4’与1-Boc-4-氨基哌啶或1-Boc-4-(氨甲基)-哌啶经过酰化反应得到中间体
化合物5’，并在三氟乙酸作用下脱去Boc保护基得到母环6’，不同的取代基对母环6’进行取
代制得吲哚芳砜类衍生物I；
合成路线如下：
试剂和条件:(i)3,5-二甲基苯硫酚,1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛
烷二(四氟硼酸)盐,乙腈；(ii)间氯过氧苯甲酸,二氯甲烷,0℃；(iii)氢氧化锂,水,四氢呋
喃,50℃；(iv)1-BOC-4-氨基哌啶或1-Boc-4-(氨甲基)-哌啶,2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,
N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯,1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐,三乙胺,N,N-
二甲基甲酰胺；(v)三氟乙酸,二氯甲烷；(vi)碳酸钾,N,N-二甲基甲酰胺,卤苄或卤素取代
的烷基；(vi)取代的甲醛,冰乙酸,氰基硼氢化钠,四氢呋喃/乙腈；
其中，X为氯或溴，n等于0或1，R为CH2OH、CH2COOCH2CH3、取代的苯基、吡啶基、呋喃
基、噻吩基或取代的三唑基。
具体的制备方法详见实施例1-24。
三、吲哚芳砜类衍生物的应用
本发明通式I的吲哚芳砜类衍生物在抑制HIV复制的细胞试验(MT-4细胞)中表现
出显著的抗病毒活性、较高的选择性以及抗耐药性。因此，本发明还提供：
通式I的吲哚芳砜类衍生物在制备抗HIV的药物中的应用。
一种抗HIV药物组合物，包含本发明所述化合物或其药学上可接受的盐以及一种
或多种药学上可接受载体或赋形剂。
本发明化合物既可以其本身也可以其药学上可接受的盐或溶剂化物的形式使用。
通式I化合物的药学上可接受的盐包括与药学上可接受的无机酸或有机酸、或者无机碱或
有机碱形成的常规盐。合适的酸加成盐的例子包括与盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、氢溴酸、高氯
酸、富马酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、羟基乙酸、甲酸、乳酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、扑酸、丙二
酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、苯
磺酸、羟基苯甲酸、氢碘酸、苹果酸、鞣酸等形成的盐。合适的碱加成盐的例子包括与钠、锂、
钾、镁、铝、钙、锌、N,N’-二苄基乙二胺、氯代普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡糖
按和普鲁卡因等形成的盐。本文中涉及到本发明化合物时，包括通式I化合物及其药学上可
接受的盐或溶剂化物。
根据本发明，本发明式I化合物可与常规药物载体或赋形剂组成药物组合物。该药
物组合物可通过口服或非肠道途径给药。本发明的药物组合物可按本领域常规方法制备成
各种剂型，包括但不限于片剂、胶囊、溶液、悬浮液、颗粒剂或注射剂等，经口服或非肠道途
径给药。
本发明在对吲哚芳砜类先导化合物的结合方式和药效团模型以及晶体研究和分
子模拟研究全面分析的基础上，设计了一系列针对第二通道的新型吲哚芳砜衍生物。运用
骨架跃迁的药物设计原理将DAPY类NNRTIs的N-取代哌啶基团引入到吲哚芳砜分子中，使延
伸的基团作用于第二通道，希望哌啶上氮原子可以与周围氨基酸(G138)形成氢键作用。同
时末端的取代基采用结构多样的基团，但基本都包括一个亲水性基团，如亲水性短链和亲
水性取代基取代的苄基等，以适应蛋白/溶剂开口区的微环境并借此改善化合物的水溶性。
活性结果显示所有化合物都具有显著的的抗野生型HIV-1作用，EC50值范围为0.62μM到
0.006μM。并且大部分化合物对多种单突变株也显示出了良好的抑制活性，如变异病毒株
L100I、K103N、Y181C、E138K。I-2和I-12是该系列中抑制活性较为突出的两个化合物，对野
生型HIV-1的EC50值分别为0.006μM和0.009μM,SI为1005和1476。构效关系分析发现哌啶上
亲水性的体积较小的基团更有利于活性提高。而增强与保守性氨基酸W229的相互作用，降
低对于氨基酸Y181、Y188的依赖性，是下一步修饰中提高对突变病毒株活性的策略之一。因
此，吲哚芳砜类衍生物具有较大的开发价值。在本发明的化合物上进行新的结构修饰及深
入研究有助于开发出新的抗HIV药物。
具体实施方式
通过下述实施例有助于理解本发明，但是不能限制本发明的内容。
实施例1：N-(1-(3-甲氧基苯基)哌啶-4-基)-5-溴-3-(3,5-二甲基苯酚砜基)-1H-
吲哚-2-甲酰胺(I-1)的制备
5-溴吲哚甲酸乙酯(1’)(0.10g,0.373mmol)置于圆底烧瓶中，加入乙腈10mL，室温
搅拌下依次加入3,5-二甲基苯硫酚(0.0516g,0.373mmol,50μL)，1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮
杂双环[2.2.2]辛烷二(四氟硼酸)盐(0.10g,0.373mmol)。反应液继续反应6小时。蒸干乙
腈，加入水30mL，二氯甲烷萃取(3×10mL)，有机相合并，饱和食盐水洗涤后无水硫酸镁干
燥。过滤浓缩，柱层析纯化(乙酸乙酯：石油醚＝1:8)。所得白色固体乙酸乙酯/石油醚重结
晶得2’。产率50.5％.
中间体2’(0.10g,0.247mmol)置于圆底烧瓶中用10mL二氯甲烷溶解，冰浴搅拌下
慢慢加入间氯过氧苯甲酸(0.128g,0.742mmol)，30分钟后转为室温反应3小时至反应完全。
反应液中加入二氯甲烷稀释后，依次用亚硫酸氢钠和碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤3次，无水
硫酸镁干燥，过滤浓缩，乙酸乙酯重结晶得白色固体3’。产率：68.8％.mp:205-207℃.ESI-
MS:m/z 436.3(M+1).C19H18BrNO4S[435.01].
上步制得中间体3’(0.10g,0.229mmol)称于圆底烧瓶中，加入混合试剂THF/H2O
(6mL/6mL)，室温搅拌下加入氢氧化锂(0.0165g,0.687mmol)，反应液转为50℃反应24小时。
反应液蒸干THF,加入蒸馏水稀释，稀盐酸调pH至酸性(pH＝2-3)，析出大量白色固体，过滤
并干燥，得中间体4’。产率：66.5％.mp:215-217℃.ESI-MS:m/z 425.3(M+18).C17H14BrNO4S
[406.98]。
中间体4’(1.0g,2.45mmol)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷
酸酯(1.39g,3.67mmol)，Boc-4-氨基哌啶(0.735g,3.67mmol)共称于圆底烧瓶中，加入N,N-
二甲基甲酰胺10mL，室温搅拌下加入二异丙基乙胺(0.949g,7.35mmol,1.3mL)，反应液继续
反应24小时。蒸干大部分溶剂，四氢呋喃100mL复溶，饱和的食盐水的氢氧化钠水溶液洗涤3
次，四氢呋喃层无水硫酸镁干燥，过滤浓缩柱层析纯化(乙酸乙酯：石油醚＝1:4)得白色固
体5’，产率：47.5％。
中间体5’(0.5g,0.848mmol)置于圆底烧瓶中，加入干燥的二氯甲烷2mL，室温搅拌
下加入三氟乙酸1mL。4小时后反应液出现出现大量白色沉淀，过滤并二氯甲烷洗涤，得中间
体IVa-6’。产率：75.4％.mp:230-231℃,ESI-MS:m/z 490.4(M+1)C22H24BrN3O3S[489.07]。
中间体6’(0.30g,0.496mmol)和碳酸钾(0.274g,1.98mmol)共置于圆底烧瓶中，加
入N,N-二甲基甲酰胺10mL。室温搅拌下10分钟后加入1-(溴甲基)-3-甲氧基苯(0.274g,
0.5992mmol)，继续室温搅拌4小时。蒸干大部分N,N-二甲基甲酰胺，加水50mL，乙酸乙酯萃
取(3×10mL)，有机相合并，饱和食盐水洗涤后无水硫酸镁干燥。过滤浓缩，柱层析纯化(乙
酸乙酯：石油醚＝1:2)。所得白色固体四氢呋喃/乙酸乙酯重结晶得I-1。产率：43.2％.mp:
175-177℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.02(s,1H,Indole-NH),8.95(s,1H,CONH),
8.09(s,1H,Indole-H),7.62(s,2H,Ph-H),7.50(q,2H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.26(t,2H,J
＝8.00Hz,Ph’-H),6.88(s,2H,Ph’-H),6.83(d,1H,J＝8.00Hz,Ph-H),3.86(s,1H,
piperidine-H),3.73(s,3H,OCH3),3.46(s,2H,benzyl-CH2),2.79(s,2H,piperidine-H),
2.31(s,6H,2×CH3),2.14(s,2H,piperidine-H),1.93(s,2H,piperidine-H),1.59(s,2H,
piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:159.73(C＝O),158.99,143.05,140.74,
139.43(2×C),137.73,135.14,133.58,129.67,127.60,126.34,124.10(2×C),122.36,
121.34,115.70(2×C),114.58,112.74,111.53,62.49(CH2),55.40(2×CH2),52.07(O-
CH3),47.28,31.65(2×CH2),21.24(2×CH3).ESI-MS:m/z 610.3(M+1).C30H32BrN3O4S
[609.13].
实施例2：5-溴-3-(3,5-二甲基苯砜基)-N-(1-(2-羟乙基)哌啶-4-基)-1H-吲哚-
2-乙酰胺(I-2)的制备
I-2的制备方法同I-1,所不同的是使用溴乙醇(0.5992mmol)代替1-(溴甲基)-3-
甲氧基苯。产率：40.1％.mp:220-222℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.20-12.59(b,
1H,Indole-NH),8.95(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),8.08(s,1H,Indole-H),7.63(s,2H,Ph-H),
7.50(q,2H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.26(s,1H,Ph-H),4.44(s,1H,OH),3.86(s,1H,
piperidine-H),3.34(s,2H,CH2),2.91(s,2H,piperidine-H),2.45(s,2H,CH2),2.31(s,6H,
2×CH3),2.22(s,2H,piperidine-H),1.91(s,2H,piperidine-H),1.60(s,2H,piperidine-
H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:159.08(C＝O),143.10,139.41(2×C),137.89,
135.11,133.66,127.53,126.34,124.11(2×C),122.33,115.73,115.65,111.49,60.59
(CH2),58.98(CH2),52.54(2×CH2),47.13,31.47(2×CH2),21.25(2×CH3).ESI-MS:m/z
534.3(M+1).C24H28BrN3O4S[533.1].
实施例3：N-(1-(4-磺酰胺苯基)哌啶-4-基)-5-溴-3-(3,5-二甲基苯酚砜基)-1H-
吲哚-2-甲酰胺(I-3)的制备
I-3的制备方法同I-1,所不同的是使用4-溴甲基苯磺酰胺(0.5992mmol)代替1-
(溴甲基)-3-甲氧基苯。产率：42.1％.mp:170-171℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.01
(s,1H,Indole-NH),8.97(s,1H,CONH),8.09(s,1H,Indole-H),7.80(d,2H,J＝8.00Hz,Ph’-
H),7.62(s,2H,Ph-H),7.51-7.44(m,4H,Indole-H,Ph’-H),7.32(s,2H,SONH2),7.27(s,1H,
Ph-H),3.87(s,1H,piperidine-H),3.56(s,2H,benzyl-CH2),2.81(d,2H,J＝12.00Hz,
piperidine-H),2.31(s,6H,2×CH3),2.20(t,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.93(d,2H,
J＝8.00Hz,piperidine-H),1.63(q,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H).13C NMR(100MHz,
DMSO-d6,ppm)δ:158.99(C＝O),143.39,143.20,143.03,139.44(2×C),137.70,135.16,
133.54,129.41(2×C),127.63,126.30,126.11(2×C),124.10(2×C),122.36,115.71,
115.69,111.55,61.88(CH2),52.10(2×CH2),47.23(CH),31.65(2×CH2),21.25(2×CH3)
.ESI-MS:m/z 659.4(M+1).C29H31BrN4O5S2[658.09].
实施例4：N-(1-(4-氯苯基)哌啶-4-基)-5-溴-3-(3,5-二甲基苯酚砜基)-1H-吲
哚-2-甲酰胺(I-4)的制备
I-4的制备方法同I-1,所不同的是使用1-溴甲基-4-氯苯(0.5992mmol)代替1-(溴
甲基)-3-甲氧基苯。产率：46.2％.mp:229-230℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.07-
12.94(br,1H,Indole-NH),8.97(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),8.09(s,1H,Indole-H),7.62(s,
2H,Ph-H),7.50(q,2H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.30(d,2H,J＝8.00Hz,Ph’-H),7.35(d,2H,J
＝8.00Hz,Ph’-H),7.26(s,1H,Ph-H),3.86(s,1H,piperidine-H),3.48(s,2H,benzyl-
CH2),2.80(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.31(s,6H,2×CH3),2.17(t,2H,J＝
12.00Hz,piperidine-H),1.93(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.61(q,2H,J＝
12.00Hz,piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:158.99(C＝O),143.02,139.43
(2×C),138.12,137.71,135.15,133.54,131.84,130.93(2×C),128.62(2×C),127.62,
126.29,124.10(2×C),122.35,115.71,115.68,111.55,61.60(CH2),51.99(2×CH2),47.24
(CH),31.64(2×CH2),21.24(2×CH3).ESI-MS:m/z 614.3(M+1).C29H29BrClN3O3S[613.08].
实施例5：N-(1-(3-氰苯基)哌啶-4-基)-5-溴-3-(3,5-二甲基苯酚砜基)-1H-吲
哚-2-甲酰胺(I-5)的制备
I-5的制备方法同I-1,所不同的是使用1-溴甲基-3-氰基苯(0.5992mmol)代替1-
(溴甲基)-3-甲氧基苯。产率：42.3％.mp:223-236℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.03
(s,1H,Indole-NH),8.97(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),8.09(s,1H,Indole-H),7.76(d,2H,J＝
12.00Hz,Ph’-H),7.69(d,1H,J＝8.00Hz,Ph’-H),7.63(s,2H,Ph-H),7.58(t,1H,J＝
8.00Hz,Ph’-H),7.50(q,2H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.26(s,1H,Ph-H),3.87(s,1H,
piperidine-H),3.56(s,2H,benzyl-CH2),2.81(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.31
(s,6H,2×CH3),2.21(t,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.94(d,2H,J＝12.00Hz,
piperidine-H),1.63(q,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:
158.98(C＝O),143.01,139.43(2×C),137.67,135.16,134.05,133.58,133.52,132.48,
131.28,129.95,127.64,126.29,124.11(2×C),122.36,119.38,115.72,115.67,111.69,
111.57,61.36(CH2),51.95(2×CH2),47.18(CH),31.61(2×CH2),21.24(2×CH3).ESI-MS:
m/z 605.4(M+1).C30H29BrN4O3S[604.11].
实施例6：5-溴-3-(3,5-二甲基苯苯砜基)-N-(1-(吡啶-3-基甲基)哌啶-4-基)-
1H-吲哚-2-甲酰胺(I-6)的制备
I-6的制备方法同I-1,所不同的是使用3-(溴甲基)吡啶盐酸盐(0.5992mmol)代替
1-(溴甲基)-3-甲氧基苯。产率：47.8％.mp:220-221℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:
13.02(s,1H,Indole-NH),8.97(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),8.51(s,1H,pyridine-H),8.48(d,
1H,J＝4.00Hz,pyridine-H),8.09(s,1H,Indole-H),8.48(d,1H,J＝8.00Hz,pyridine-H),
7.63(s,2H,Ph-H),7.50(q,2H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.38(dd,1H,J1＝8.00Hz,J2＝
4.00Hz,pyridine-H),7.26(s,1H,Ph-H),3.86(s,1H,piperidine-H),3.52(s,2H,benzyl-
CH2),2.81(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.31(s,6H,2×CH3),2.19(t,2H,J＝
12.00Hz,piperidine-H),1.93(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.61(q,2H,J＝
12.00Hz,piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:159.01(C＝O),150.43,148.74,
143.02,139.42(2×C),137.73,136.90,135.14,134.38,133.54,127.61,126.28,124.11(2
×C),123.90,122.35,115.70,115.68,111.55,59.67(CH2),51.97(2×CH2),47.22(CH),
31.62(2×CH2),21.24(2×CH3).ESI-MS:m/z 581.1(M+1).C28H29BrN4O3S[580.11].
实施例7：5-溴-3-(3,5-二甲基苯苯砜基)-N-(1-(吡啶-4-基甲基)哌啶-4-基)-
1H-吲哚-2-甲酰胺(I-7)的制备
I-7的制备方法同I-1,所不同的是使用4-(溴甲基)吡啶盐酸盐(0.5992mmol)代替
1-(溴甲基)-3-甲氧基苯。产率：46.6％.mp:243-244℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:
13.03(s,1H,Indole-NH),8.98(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),8.53(d,2H,J＝4.00Hz,pyridine-
H),8.09(s,1H,Indole-H),7.63(s,2H,Ph-H),7.50(q,2H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.35(d,
2H,J＝8.00Hz,pyridine-H),7.27(s,1H,Ph-H),3.88(s,1H,piperidine-H),3.53(s,2H,
benzyl-CH2),2.81(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.31(s,6H,2×CH3),2.21(t,2H,J＝
8.00Hz,piperidine-H),1.94(d,2H,J＝8.00Hz,piperidine-H),1.61(q,2H,J＝8.00Hz,
piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:159.01(C＝O),150.02(2×C),148.27,
143.01,139.43(2×C),137.70,135.16,133.52,127.64,126.27,124.11(4×C),122.35,
115.72,115.67,111.57,61.15(CH2),52.13(2×CH2),47.14(CH),31.60(2×CH2),21.14(2
×CH3).ESI-MS:m/z 581.3(M+1).C28H29BrN4O3S[580.11].
实施例8：N-(1-(4-氨基甲酰基苯基)哌啶-4-基)-5-溴-3-(3,5-二甲基苯砜基)-
1H-吲哚-2-甲酰胺(I-8)的制备
I-8的制备方法同I-1,所不同的是使用4-(溴甲基)苯酰胺(0.5992mmol)代替1-
(溴甲基)-3-甲氧基苯。产率：48.1％.mp:175-176℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.02
(s,1H,Indole-NH),8.97(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),8.09(s,1H,Indole-H),7.94(s,1H,
NH2),7.86(d,2H,J＝8.00Hz,Ph’-H),7.63(s,2H,Ph-H),7.50(q,2H,J＝8.00Hz,Indole-
H),7.40(d,2H,J＝8.00Hz,Ph’-H),7.33(s,1H,NH2),7.27(s,1H,Ph-H),3.86(s,1H,
piperidine-H),3.54(s,2H,benzyl-CH2),2.81(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.31
(s,6H,2×CH3),2.18(t,2H,J＝8.00Hz,piperidine-H),1.93(d,2H,J＝8.00Hz,
piperidine-H),1.62(q,2H,J＝8.00Hz,piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:
168.23(C＝O),158.99(C＝O),143.02,142.50,139.43(2×C),137.71,135.15,133.53,
133.46,128.86(2×C),127.93(2×C),127.62,126.29,124.11(2×C),122.36,115.71,
115.68,111.55,60.23(CH2),52.09(2×CH2),47.25(CH),31.65(2×CH2),21.24(2×CH3)
.ESI-MS:m/z 623.1(M+1).C30H31BrN4O4S[622.12].
实施例9：N-(1-(4-磺甲基苯基)哌啶-4-基)-5-氯-3-(3,5-二甲基苯酚砜基)-1H-
吲哚-2-甲酰胺(I-9)的制备
I-9的制备方法同I-1,所不同的是起始原料使用5-氯-吲哚甲酸乙酯(0.373mmol)
代替5-溴-吲哚甲酸乙酯，最后一步取代基使用4-溴甲基苯磺酰胺(0.5992mmol)代替1-(溴
甲基)-3-甲氧基苯。产率：55.1％.mp:179-180℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.01(s,
1H,Indole-NH),8.98(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),7.94(s,1H,Indole-H),7.91(d,2H,J＝
8.00Hz,Ph’-H),7.63(s,2H,Ph-H),7.61(d,2H,J＝8.00Hz,Ph’-H),7.55(d,1H,J＝8.00Hz,
Indole-H),7.56(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.26(s,1H,Ph-H),3.87(s,1H,piperidine-
H),3.61(s,2H,benzyl-CH2),3.21(s,2H,SO2CH3),2.81(d,2H,J＝8.00Hz,piperidine-H),
2.31(s,6H,2×CH3),2.22(t,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.94(d,2H,J＝8.00Hz,
piperidine-H),1.61(q,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:
159.03(C＝O),145.49,143.04,139.86,139.44(2×C),137.87,135.15,133.29,129.76(2
×C),127.68,127.43(2×C),125.71,125.10,124.12(2×C),119.34,115.33,111.72,
61.80(CH2),52.11(2×CH2),47.19(CH),44.08(CH3),31.65(2×CH2),21.25(2×CH3).ESI-
MS:m/z 614.3.4(M+1).C30H32ClN3O5S2[613.15].
实施例10：5-氯-3-(3,5-二甲基苯基砜基)-N-(1-(吡啶-3-基甲基)哌啶-4-yl)-
1H-吲哚-甲酰胺(I-10)的制备
I-10的制备方法同I-9,所不同的是使用3-溴甲基吡啶盐酸盐(0.5992mmol)代替
4-溴甲基苯磺酰胺。产率：50.0％.mp:224-225℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.01(s,
1H,Indole-NH),8.97(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),8.51(s,1H,pyridine-H),8.48(d,1H,J＝
4.00Hz,pyridine-H),7.95(s,1H,Indole-H),7.73(d,1H,J＝8.00Hz,pyridine-H),7.63
(s,2H,Ph-H),7.55(d,1H,J＝8.00Hz,pyridine-H),7.38(q,2H,J＝8.00Hz,Indole-H),
7.26(s,1H,Ph-H),3.86(s,1H,piperidine-H),3.53(s,2H,benzyl-CH2),2.81(d,2H,J＝
8.00Hz,piperidine-H),2.31(s,6H,2×CH3),2.19(t,2H,J＝8.00Hz,piperidine-H),1.93
(d,2H,J＝8.00Hz,piperidine-H),1.62(q,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H).13C NMR
(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:159.02(C＝O),150.43,148.74,143.04,139.42(2×C),137.87,
136.90,135.14,134.39,133.29,127.68,125.71,125.09,124.12(2×C),123.89,119.35,
115.33,111.73,59.67(CH2),51.97(2×CH2),47.22(CH),31.62(2×CH2),21.24(2×CH3)
.ESI-MS:m/z 537.4(M+1).C28H29ClN4O3S[536.16].
实施例11：5-氯-3-(3,5-二甲基苯基砜基)-N-(1-(吡啶-3-基甲基)哌啶-4-yl)-
1H-吲哚-甲酰胺(I-11)的制备(原始记录见0002466-43)
I-11的制备方法同I-9,所不同的是使用4-溴甲基吡啶盐酸盐(0.5992mmol)代替
4-溴甲基苯磺酰胺。产率：50.5％.mp:240-241℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.02(s,
1H,Indole-NH),8.98(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),8.52(d,2H,J＝4.00Hz,pyridine-H)7.95
(s,1H,Indole-H),7.63(s,2H,Ph-H),7.55(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.35(d,3H,J＝
8.00Hz,Indole-H,pyridine-H),7.26(s,1H,Ph-H),3.87(s,1H,piperidine-H),3.53(s,
2H,benzyl-CH2),2.81(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.31(s,6H,2×CH3),2.22(t,2H,
J＝12.00Hz,piperidine-H),1.93(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.62(q,2H,J＝
12.00Hz,piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:159.03(C＝O),150.02(2×C),
148.26,143.03,139.43(2×C),137.85,135.15,133.28,127.69,125.71,125.11,124.12(2
×C),124.09(2×C),119.55,115.33,111.74,61.16(CH2),52.13(2×CH2),47.15(CH),
31.62(2×CH2),21.24(2×CH3).ESI-MS:m/z 537.6(M+1).C28H29ClN4O3S[536.16].
实施例12：5-氯-3-(3,5-二甲基苯基砜基)-N-(1-((4-甲基-5-氧-4,5-二氢-1H-
1,2,4-三唑-3-基)甲基)哌啶-4-基)-1H-吲哚-甲酰胺(I-12)的制备
I-12的制备方法同I-9,所不同的是使用5-(溴甲基)-4-甲基-2氢-1,2,4-三唑基-
3(4氢)(0.5992mmol)代替4-溴甲基苯磺酰胺。产率：53.1％.mp:274-275℃.1H NMR
(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.02(s,1H,Indole-NH),11.52(s,1H,triazole-NH),8.95(d,
1H,J＝8.00Hz,CONH),7.94(s,1H,Indole-H),7.63(s,2H,Ph-H),7.55(d,1H,J＝8.00Hz,
Indole-H),7.36(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.26(s,1H,Ph-H),3.85(s,1H,piperidine-
H),3.41(s,2H,benzyl-CH2),3.17(s,3H,CH3),2.81(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),
2.31(s,6H,2×CH3),2.24(t,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.93(d,2H,J＝12.00Hz,
piperidine-H),1.62(q,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:
159.04(C＝O),155.89(C＝O),145.35,143.03,139.43(2×C),137.84,135.15,133.28,
127.68,125.70,125.09,124.12(2×C),119.35,115.32,111.73,53.41(CH2),51.79(CH2),
49.07(CH2),47.05(CH),31.52(2×CH2),27.28(CH3),21.23(2×CH3).ESI-MS:m/z 557.3(M
+1).C26H29ClN6O4S[556.17].
实施例13：N-(1-(4-磺酰胺苯基)哌啶-4-基)-5-氯-3-(3,5-二甲基苯酚砜基)-
1H-吲哚-2-甲酰胺(I-13)的制备
I-13的制备方法同I-9,所不同的是使用4-溴甲基苯磺酰胺(0.5992mmol)代替4-
溴甲基苯磺酰胺。产率：52.1％.mp:215-217℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.01(s,
1H,Indole-NH),8.97(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),7.94(s,1H,Indole-H),7.81(d,2H,J＝
8.00Hz,Ph’-H),7.63(s,2H,Ph-H),7.55-7.50(m,3H,Indole-H,SONH2),7.36-7.32(m,3H,
Ph’-H,SONH2),7.26(s,1H,Ph-H),3.87(s,1H,piperidine-H),3.57(s,2H,benzyl-CH2),
2.81(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.31(s,6H,2×CH3),2.20(t,2H,J＝12.00Hz,
piperidine-H),1.94(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.63(q,2H,J＝12.00Hz,
piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:159.01(C＝O),143.20,143.03,139.44(2
×C),137.84,135.15,133.29,129.41(2×C),127.69,126.11(2×C),125.72,125.10,
124.11(2×C),119.35,115.34,111.72,61.87(CH2),52.10(2×CH2),47.22(CH),31.65(2×
CH2),21.24(2×CH3).ESI-MS:m/z 615.3(M+1).C29H31ClN4O5S2[614.14].
实施例14：N-(1-(4-氨基甲酰基苯基)哌啶-4-基)-5-氯-3-(3,5-二甲基苯砜基)-
1H-吲哚-2-甲酰胺(I-14)的制备
I-14的制备方法同I-9,所不同的是使用4-(溴甲基)苯酰胺(0.5992mmol)代替4-
溴甲基苯磺酰胺。产率：56.6％.mp:153-155℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.01(s,
1H,Indole-NH),8.97(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),7.94(s,2H,Indole-H),7.86(d,2H,J＝
8.00Hz,Ph’-H),7.63(s,2H,Ph-H),7.55-7.53(d,1H,Indole-H),7.40-7.32(m,4H,Ph’-H,
CONH2),7.26(s,1H,Ph-H),3.87(s,1H,piperidine-H),3.54(s,2H,benzyl-CH2),2.81(d,
2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.31(s,6H,2×CH3),2.18(t,2H,J＝12.00Hz,
piperidine-H),1.94(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.63(q,2H,J＝12.00Hz,
piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:168.25(C＝O),159.01(C＝O),143.03,
139.43(2×C),137.87,135.15,133.46,133.28,128.87,127.93(4×C),127.68,125.70,
125.10,124.12(2×C),119.35,115.33,111.72,60.22(CH2),52.09(2×CH2),47.25(CH),
31.64(2×CH2),21.24(2×CH3).ESI-MS:m/z 615.3(M+1).C30H31ClN4O4S[578.18].
实施例15：5-氯-3-(3,5-二甲基苯基砜基)-N-(1-(噻吩-3-甲基)哌啶-4-基)-1H-
吲哚-2-甲酰胺(I-15)的制备
中间体6’称于圆底烧瓶中加入混合溶剂四氢呋喃/甲醇(1/2)30mL后加热至溶液
澄清，30-40℃搅拌下滴入乙酸至pH为4-5，加入3-噻吩-甲醛(0.060g,0.535mmol)反应40分
钟，随后加入氰基硼氢化钠(0.056g,0.89mmol)，继续反应10小时。反应液直接浓缩柱层析
纯化(乙酸乙酯)。产率：70.2％.mp:230-231℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:12.92(s,
1H,Indole-NH),8.99(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),7.94(s,1H,Indole-H),7.63-7.54(m,4H,
thiophene-H,Ph-H),7.44(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.24(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-
H),7.15-7.13(m,2H,thiophene-H,Ph-H),4.21(s,2H,thiophene-CH2),3.99(s,1H,
piperidine-H),3.34(s,2H,piperidine-H),3.00(s,2H,piperidine-H),2.20(s,6H,2×
CH3),2.04(s,2H,piperidine-H),1.64(s,2H,piperidine-H).ESI-MS:m/z 542.4(M+1)
.C27H28ClN3O3S2[541.13].
实施例16：5-氯-3-(3,5-二甲基苯基砜基)-N-(1-(噻吩-2-甲基)哌啶-4-基)-1H-
吲哚-2-甲酰胺(I-16)的制备
I-16的制备方法同I-15,所不同的是使用2-噻吩-甲醛(0.535mmol)代替3-噻吩-
甲醛。产率：69.6％.mp:225-256℃.ESI-MS:m/z 542.4(M+1).C27H28ClN3O3S2[541.13].
实施例17：N-(1-(4-(三氟甲基)苯基)哌啶-4-基)-5-氯-3-(3,5-二甲基苯砜基)-
1H-吲哚-2-甲酰胺(I-17)的制备
I-17的制备方法同I-15,所不同的是使用4-(三氟甲基)苯甲醛(0.535mmol)代替
3-噻吩-甲醛。产率：69.8％.mp:209-210℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.00(s,1H,
Indole-NH),8.97(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),7.95(s,1H,Indole-H),7.70(d,2H,J＝8.00Hz,
Ph’-H),7.63(s,2H,Ph-H),7.56-7.53(m,3H,J＝8.00Hz,Indole-H,Ph’-H),7.35(d,1H,J＝
8.00Hz,Indole-H),7.26(s,1H,Ph-H),3.88(s,1H,piperidine-H),3.59(s,2H,benzyl-
CH2),2.81(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.31(s,6H,2×CH3),2.21(t,2H,J＝
12.00Hz,piperidine-H),1.94(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.64(q,2H,J＝
12.00Hz,piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:159.02(C＝O),144.21,143.05,
139.43(2×C),137.87,135.14,133.31,129.71(2×C),128.18,127.87,127.68,126.61,
125.73,125.47,125.08,124.11(2×C),119.35,115.34,111.72,61.83(CH2),52.08(2×
CH2),47.21(CH),31.66(2×CH2),21.23(2×CH3).ESI-MS:m/z 604.4(M+1).C30H29ClF3N3O3S
[603.16].
实施例18：5-氯-3-(3,5-二甲基苯基砜基)-N-(1-(呋喃-3-甲基)哌啶-4-基)-1H-
吲哚-2-甲酰胺(I-18)的制备
I-18的制备方法同I-15,所不同的是使用3-呋喃-甲醛(0.535mmol)代替3-噻吩-
甲醛。产率：68.8％.mp:223-224℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:12.91(s,1H,Indole-
NH),8.98(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),7.79(s,1H,Indole-H),7.72(s,1H,furan-H),7.53(s,
2H,Ph-H),7.44(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.24(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.14(s,
1H,Ph-H),6.57(s,1H,furan-H),6.46(s,1H,furan-H),4.24(s,2H,thiophene-CH2),3.98
(s,1H,piperidine-H),3.31(s,2H,piperidine-H),2.98(s,2H,piperidine-H),2.20(s,
6H,2×CH3),2.00(s,2H,piperidine-H),1.65(s,2H,piperidine-H).ESI-MS:m/z 526.2(M
+1).C27H28ClN3O4S[525.15].
实施例19：N-(1-(4-硝基苯基)哌啶-4-基)-5-氯-3-(3,5-二甲基苯砜基)-1H-吲
哚-2-甲酰胺(I-19)的制备
I-19的制备方法同I-15,所不同的是使用3-硝基-苯甲醛(0.535mmol)代替3-噻
吩-甲醛。产率：65.6％.mp:258-259℃，分解。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.01(s,1H,
Indole-NH),8.97(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),8.21(d,2H,J＝8.00Hz,Ph’-H),7.94(s,1H,
Indole-H),7.63-7.60(m,4H,Ph-H,Ph’-H),7.55(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.35(d,1H,
J＝8.00Hz,Indole-H),7.26(s,1H,Ph-H),3.88(s,1H,piperidine-H),3.63(s,2H,benzyl-
CH2),2.81(d,2H,J＝8.00Hz,piperidine-H),2.31(s,6H,2×CH3),2.23(t,2H,J＝8.00Hz,
piperidine-H),1.95(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.64(q,2H,J＝8.00Hz,
piperidine-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6,ppm)δ:159.01(C＝O),147.59,147.01,143.03,
139.43(2×C),137.84,135.15,133.29,130.02(2×C),127.68,125.71,125.10,124.11(2
×C),123.85(2×C),119.35,115.53,111.72,61.55(CH2),52.08(2×CH2),47.14(CH),
31.65(2×CH2),21.24(2×CH3).ESI-MS:m/z 581.4(M+1).C29H29ClN4O5S[580.15].
实施例20：5-氯-3-(3,5-二甲基苯基砜基)-N-((1-(2-羟乙基)哌啶-4-基)甲基)-
1H-吲哚-2-甲酰胺(I-20)的制备
I-20的制备方法同I-9,所不同的是中间体IVa-6由1-叔丁氧羰基-4-氨甲基哌啶
(3.67mmol)代替Boc-4-氨基哌啶制得，最后一步取代基使用溴乙醇(0.5992mmol)代替4-溴
甲基苯磺酰胺。产率：50.0％.mp:255-256℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.02(s,1H,
Indole-NH),9.08(d,1H,J＝4.00Hz,CONH),7.88(s,1H,Indole-H),7.65(s,2H,Ph-H),7.55
(s,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.35(s,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.27(s,1H,Ph-H),5.28
(s,1H,OH),3.37(s,2H,CH2),3.50(s,2H,CH2),3.40(s,2H,CH2),3.11(s,2H,CH2),2.31(s,
6H,2×CH3),2.29(s,2H,CH2),1.98(s,2H,CH2),1.86(s,1H,CH),1.53(s,2H,CH2).ESI-MS:
m/z 504.3(M+1).C25H30ClN3O4S[503.16].
实施例21：N-((1-(4-氨基甲酰苯基)哌啶-4-基)甲基)-5-氯-3-(3,5-二甲基苯砜
基)-1H-吲哚-2-甲酰胺(I-21)的制备
I-21的制备方法同I-20,所不同的是使用4-(溴甲基)苯甲酰氨基(0.5992mmol)代
替溴乙醇。产率：52.3％.mp:259-260℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:12.93(s,1H,
Indole-NH),8.98(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),7.92-7.90(m,2H,Indole-H,NH2),7.83(d,2H,J
＝8.00Hz,Ph’-H),7.61(s,2H,Ph-H),7.54(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.37-7.52(m,5H,
Indole-H,NH2Ph-H,Ph’-H),3.50(s,2H,benzyl-CH2),3.32-3.24(m,2H,CONH-CH2),2.83(d,
2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.30(s,6H,2×CH3),1.98(t,2H,J＝8.00Hz,piperidine-
H),1.76(d,2H,J＝8.00Hz,piperidine-H),1.57(s,1H,piperidine-H),1.62(q,2H,J＝
8.00Hz,piperidine-H).ESI-MS:m/z 593.5(M+1).C31H33ClN4O4S[592.19].
实施例22：N-((1-(2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)-5-氯-3-(3,5-二甲基苯砜基)-
1H-吲哚-2-甲酰胺(I-22)的制备
I-22的制备方法同I-20,所不同的是使用4-(溴甲基)-2-氟苯(0.5992mmol)代替
溴乙醇。产率：46.5％.mp:193-194℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.00(s,1H,Indole-
NH),8.97(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),7.92(d,1H,J＝12.00Hz,Indole-H),7.61(s,2H,Ph-H),
7.54(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.37-7.31(m,2H,Indole-H,Ph’-H),7.26(s,1H,Ph-H),
7.14-7.04(m,3H,Ph’-H),3.47(s,2H,benzyl-CH2),3.27(t,2H,J＝8.00Hz,CONH-CH2),2.82
(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.30(s,6H,2×CH3),1.97(t,2H,J＝12.00Hz,
piperidine-H),1.94(d,2H,J＝2.00Hz,piperidine-H),1.57(s,1H,piperidine-H),1.30
(q,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H).ESI-MS:m/z 568.5(M+1).C30H31ClFN3O3S[567.18].
实施例23：N-((1-(2-氰基苯基)哌啶-4-基)甲基)-5-氯-3-(3,5-二甲基苯砜基)-
1H-吲哚-2-甲酰胺(I-23)的制备
I-23的制备方法同I-20,所不同的是使用4-(溴甲基)苯甲腈(0.5992mmol)代替溴
乙醇。产率：52.6％.mp:213-214℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.00(s,1H,Indole-
NH),8.96(d,1H,J＝8.00Hz,CONH),7.92(s,1H,Indole-H),7.80(d,1H,J＝4.00Hz,Ph’-H),
7.68(t,1H,J＝8.00Hz,Ph’-H),7.61(s,2H,Ph-H),7.57-7.30(m,4H,Indole-H,Ph’-H),
7.24(s,1H,Ph-H),3.63(s,2H,benzyl-CH2),3.26(t,2H,J＝8.00Hz,CONH-CH2),2.82(d,2H,
J＝12.00Hz,piperidine-H),2.30(s,6H,2×CH3),2.06(t,2H,J＝12.00Hz,piperidine-
H),1.76(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.59(s,1H,piperidine-H),1.29(q,2H,J＝
12.00Hz,piperidine-H).ESI-MS:m/z 575.5(M+1).C31H31ClN4O3S[574.18].
实施例24：乙基3-(4-((5-氯-3-(3,5-二甲基苯砜基)1H-吲哚-2-甲酰胺)甲基)哌
啶-1-基)丙酸(I-24)的制备
I-24的制备方法同I-20,所不同的是使用乙基3-溴乙酸(0.5992mmol)代替溴乙
醇。产率：45.6％.mp:194-195℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ:13.01(s,1H,Indole-NH),
8.96(s,1H,CONH),7.92(s,1H,Indole-H),7.61(s,2H,Ph-H),7.80(d,1H,J＝8.00Hz,
Indole-H),7.34(d,1H,J＝8.00Hz,Indole-H),7.26(s,1H,Ph-H),4.07(q,2H,J＝4.00Hz,
O-CH2),3.25(t,2H,J＝4.00Hz,CO-CH2),2.82(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),2.57(d,
2H,J＝8.00Hz,CH2),2.46(d,2H,J＝8.00Hz,CH2),2.31(s,6H,2×CH3),1.98(t,2H,J＝
12.00Hz,piperidine-H),1.75(d,2H,J＝12.00Hz,piperidine-H),1.56(s,1H,
piperidine-H),1.25-1.15(m,5H,piperidine-H,CH3).ESI-MS:m/z 560.4(M+1)
.C28H34ClN3O5S[559.19].
实施例25：抗HIV活性实验(MT-4细胞模型)
术语解释：
MT-4细胞：人急性淋巴母细胞白血病细胞。
MTT分析法：MTT即为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻
唑蓝。
Nevirapine：抗艾滋病上市药物奈韦拉平。
Efavirenz：抗艾滋病上市药物依法韦仑。
Delavirdine：抗艾滋病上市药物地拉韦啶。
Etravirine：抗艾滋病上市药物依曲韦林。
DMSO：二甲基亚砜。
测试原理
由于HIV感染的MT-4细胞在一定时间内(5-7天)会发生病变，因此向HIV感染的MT-
4细胞悬浊液中加入适当浓度的待检测化合物溶液，经过一段时间(5-7天)的培养后，用MTT
分析法测定MT-4细胞活力，得到保护50％细胞免于细胞病变的药物浓度(EC50)即可得出目
标化合物的抗HIV的活性。同时得到目标化合物使50％未感染HIV的细胞发生病变的浓度
(CC50)，计算出选择系数(selectivity index，SI＝CC50/EC50)。
MTT分析法原理：MTT即溴化-3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基四唑氮,可与
活的细胞内琥珀酸脱氢酶相结合，而不与死亡细胞发生反应。目前MTT法是一种快速、简洁
反映细胞活力的酶分析方法。
测试材料和方法
(1)HIV-1(IIIB)、HIV-2(ROD)毒株、HIV-1双突变(K103N/Y181C)耐药株RES056：由
比利时Leuven大学Rega研究院微生物与免疫学研究所提供。
(2)MT-4细胞：由比利时Leuven大学Rega研究院微生物与免疫学研究所提供。
(3)MTT：购自美国Sigma公司。
(4)样品处理：样品临用前溶于DMSO配成适当浓度，并用双蒸水作5倍稀释，各5个
稀释度。
(5)阳性对照药：Nevirapine(NVP)、Efavirenz(EFV)、Delavirdine(DLV)、
Etravirine(ETV)。
(6)测试方法：样品稀释后加入到HIV感染MT-4细胞悬浊液中，经过一段时间后用
MTT比色法测定细胞活力，于酶标仪中，在590nm下记录吸光度(A)值,计算出EC50、CC50以及
SI。
(7)MTT染色法：加入样品培养一段时间后，再向每孔加入MTT溶液(5mg/mL)20μL，
继续培养若干小时，弃染色液，并向每孔加入150μL DMSO，充分混合，于酶标仪中，在590nm
下记录吸光度。
具体操作如下：将化合物用DMSO或水溶解后用磷酸盐缓冲液稀释，将3×105MT-4
细胞与100μL不同浓度的化合物溶液在37℃共同预孵育1h。然后向该混合物中加入100μL适
当浓度的病毒稀释液，将细胞于37℃孵育1h。洗涤三次后，将细胞再次分别悬浮于含有或不
含化合物的培养基质中。接着将细胞在5％CO2环境中，于37℃下再孵育7天，并于感染后的
第三天用含有或不含化合物的培养基质补充原培养液。每种培养条件都重复操作两次。对
病毒的细胞病变作用每天都用反向光学显微镜监控。一般来讲，本实验中所用的病毒稀释
液常常会在病毒感染后第五天发生细胞病变。药物抑制浓度以药物对病毒致细胞病变作用
产生50％抑制作用而同时对细胞无直接毒性的浓度(EC50)表示。值得强调的是，当化合物水
溶性较差，需要用DMSO才能溶解时，DMSO体积比浓度相对于水来讲，一般会低于10％(DMSO
在MT-4细胞培养介质中最终浓度小于2％)。因为DMSO能影响测试化合物抗病毒活性，对含
有相同浓度DMSO溶液的抗病毒活性对比空白实验也应该平行操作进行。另外，DMSO最终浓
度(1/1000)远远低于影响HIV-1在MT-4细胞中复制所需浓度。
目标化合物的体外抗HIV-1(IIIB)及HIV-1双突变RES056耐药株活性筛选数据由
比利时Leuven大学Rega研究院微生物与免疫学研究所提供，所有的活性数据都经过至少两
次独立、平行的实验测得，结果见表1，2，3。
表1 化合物抗野生型HIV-1(IIIB)及双突变株(F227L/V106A,RES056)的细胞活性
和毒性
a:半数有效浓度；b:野生型HIV-1毒株；c:双突变HIV-1毒株；d:半数致死浓度.
表2 化合物抗HIV-1单突变株(L100I，K103N，Y181C，Y188L，E138K)的细胞活性
a:同表1；e:单突变型HIV-1毒株.
表3 化合物抗野生型HIV-1(IIIB)及多种单(L100I,K103N,Y181C,Y188L,E138K)
或双(F227L/V106A,RES056)突变株的选择指数(SI)
b，c，e:同表1；f:治疗指数。
实施例26：抗逆转录酶活性测试实验
本实验采用色度法逆转录酶活性测定实验，所使用试剂盒Reverse
Transcriptase Assay,colorimetric Version 13.0购自罗氏公司，阳性对照药物选用奈
韦拉平和依曲伟林。(参见①Hofman,A.D.&Banapour,B.&Levy,J.A.(1985)Virology 147,
326–335.②Ukkonen,P.et al.(1988)Eur.J.Clin.Microbiol.&Infect.Dis.7,518–523.)
测试原理
色度法逆转录酶活性测定使用模板/引物聚合物poly(A)×oligo(dT)作为起始原
料，并用地高辛和生物素标记的核苷酸代替用放射性同位素[3H]-或[32P]-标记的核苷酸，
这些是此方法的优势之处。所合成出的DNA是测定逆转录酶活性的重要参数，检测和定量
DNA使用了以下三明治式的ELISA测定方法：生物素标记的DNA能够与包被了抗生物素链霉
菌素的微版模块(MP)的表面进行结合。在接下来的一步中，聚合了过氧化物酶的地高辛抗
体需要结合到地高辛标记的DNA上。最终，加入过氧化物酶的底物2,2-联氮-二(3-乙基-苯
并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)，使它们在酶的催化作用下分解，产生带有明显颜色的产物。
通过酶标仪测定载有样品的微板吸光度，此吸光度值与逆转录酶的活性呈现直接的关联，
通过公式计算可得到化合物对逆转录酶的抑制浓度。
测试方法
(1)首先配置各种工作溶液，并将样品用适量二甲基亚砜(DMSO)溶解，并用裂解缓
冲液稀释成5个浓度梯度。在各个不同的反应管中，将4–6ng重组HIV-1-RT用裂解缓冲液(20
μL/well)稀释。同时，准备只有裂解缓冲液而没有RT的阴性对照组。然后每个反应罐加入20
μL含有不同浓度所测试样品的缓冲溶液以及20μL反应物混合液，在37摄氏度下孵育一个小
时。
(2)准备足够的微版模块，按照方向牢固地安装在框架内。将孵育好的样品(60μL)
转移到微板的孔中，用薄膜覆盖好后第二次37摄氏度孵育一小时。
将溶液移除，每孔用洗液仔细地冲洗5遍，每遍用250μL，保留30秒。每孔加入200μL
抗地高辛-过氧化物酶聚合物，将微板用薄膜覆盖好后第三次在37摄氏度下孵育一小时。
(3)将溶液移除，每孔用洗液仔细地冲洗5遍，每遍用250μL，保留30秒。每孔加入
200μL ABTS溶液，在15-25摄氏度下孵育，直到绿颜色出现并足够通过光度检测(一般为10-
30分钟)。
(4)用酶标仪测定载有样品在波长405nm处的吸光度值，通过以下公式计算可得化
合物对逆转录酶的抑制浓度。
抑制率％＝(阳性对照荧光强度-样品荧光强度)/(阳性对照荧光强度-背景荧光
强度)×100％进行线性回归，将抑制率带入线性方程，求得的浓度C既是IC50，单位是(μg/
mL)，再根据化合物分子量转化为μM，此实验选取了一个细胞活性最好的代表性化合物，以
及阳性对照药奈韦拉平(NVP)和依曲韦林(ETV)，实验结果见表4。
表4代表化合物对HIV-1逆转录酶抑制活性
上述实验结果表明：具有本发明通式I的化合物是一类具有新型结构骨架的HIV-1
抑制剂，如上表I所示，所有系列IVa的化合物都具有显著的的抗野生型HIV-1作用，EC50值范
围为0.62μM到0.006μM。并且大部分化合物对多种单突变株也显示出了良好的抑制活性，如
变异病毒株L100I、K103N、Y181C、E138K。化合物I-2和I-12抑制活性较突出，对野生型HIV-1
的EC50值分别为0.006μM和0.009μM,SI为1005和1476，优于上市药物NVP和DLV，与上市药物
EFV、ETV及先导化合物EFF属于同一数量级。I-2和I-12对L100I、K103N、Y181C、E138K和
F227L/V106A等单或双突变株都保持亚微摩尔以上的活性，普遍优于上市药物NVP和DLV。而
对于某些单突变病毒株如L100I和K103N，I-2的抑制作用略强于上市药物EFV，且与先导化
合物EFF处于同一水平。特别强调的是，对吲哚芳砜类化合物非常敏感的Y188L突变病毒株，
I-12的EC50值为0.84μM，优于先导化合物EFF(EC50＝1.3μM)，取得了意想不到的效果。此外，
I-14对临床最严重的双突变病毒株Y181C/K103N的抑制活性优于上市药物DLV，与先导EFF
和上市药物NVP处于同一水平。鉴于本发明所涉及的吲哚芳砜类衍生物结构的新颖性、对野
生型以及多种突变型HIV-1的显著的抑制活性以及相对某些现有化合物的进步性，因而具
有较大的开发价值。在此基础上进行新的结构修饰及深入研究有助于获得更加优异的效
果，并具有发展成为一类全新结构抗HIV新药的潜力。