一些 2- 吡嗪酮衍生物和它们作为嗜中性白细胞弹性蛋白 酶抑制剂的用途 【技术领域】
本发明涉及 2- 吡嗪酮衍生物、 它们的制备方法、 含它们的药物组合物和它们在治 疗中的用途。背景技术
弹性蛋白酶可能是体内最有破坏性的酶， 其具有降解几乎全部结缔组织组分的能 力。许多病理症状都已经暗含了由弹性蛋白酶引起的非受控蛋白水解降解作用。人嗜中 性白细胞弹性蛋白酶 (Human neutrophil elastase， hNE) 是丝氨酸蛋白酶胰凝乳蛋白酶 超家族中的一员， 所述人嗜中性白细胞弹性蛋白酶是一种贮存在嗜中性嗜苯胺蓝颗粒中的 33-KDa 酶。 在嗜中性白细胞中， NE 的浓度超过 5mM 并且其总细胞量据估计高达 3pg。 一旦激 活， NE 迅速从颗粒释放进入细胞间隙中， 有一部分与嗜中性白细胞细胞质膜保持结合 ( 参 见 Kawabat 等人 .2002， Eur.J.Pharmacol.451， 1-10)。NE 主要的胞内生理功能是降解由嗜 中性白细胞吞噬的外来有机分子， 而胞外弹性蛋白酶的主要靶标是弹性蛋白 (Janoff and Scherer， 1968， J.Exp.Med.128， 1137-1155)。与其它蛋白酶 ( 例如， 蛋白酶 3) 相比， NE 能 够降解几乎所有的胞外基质和关键血浆蛋白， 在这一点上， 它是独一无二的 ( 参见 Kawabat 等人， 2002， Eur.J.Pharmacol.451， 1-10)。它降解多种胞外基质蛋白质， 例如弹性蛋白、 3 型和 4 型胶原、 层粘连蛋白、 纤连蛋白、 细胞因子等等 (Ohbayashi， H.， 2002， Expert Opin. Investig.Drugs， 11， 965-980)。 NE 是在慢性肺病 ( 包括上皮损伤 ) 中所观察到多种病变的 主要共同介质 (common mediator)(Stockley， R.A.1994， Am.J.Resp.Crit.Care Med.150， 109-113)。
NE 的破坏性角色几乎在 40 多年前就已经确定下来， 当时 Laurell 和 Eriksson 报 道了慢性病气流阻塞和肺气肿与血清 α1- 抗胰蛋白酶缺陷有关 (Laurell and Eriksson， 1963， Scand.J.Clin.Invest.15， 132-140)。随后， α1- 抗胰蛋白酶被确定为最重要的人 NE 的内源性抑制剂。人们认为， 人 NE 和内源性抗蛋白酶之间的失恒是导致肺组织中存在过量 人 NE 的原因， 而过量人 NE 被认为是慢性阻塞性肺病 (COPD) 的主要致病因素。如同主要在 肺气肿中所观察到的那样， 过量的人 NE 表现出显著的破坏性行为 (destructiveprofile)， 主动参与破坏正常的肺结构， 接着不可逆地扩大呼吸气腔 (respiratory airspace)。在 α1- 蛋白酶抑制剂缺陷小鼠中， 肺中嗜中性白细胞募集度增加， 这种增加与增加的肺弹性 蛋白酶负担和肺气肿相关 (Cavarra 等人， 1996， Lab.Invest.75， 273-280)。支气管肺泡灌 洗液中 NEα1- 蛋白酶抑制剂复合物水平较高的个体与较低水平的个体相比， 前者在肺功能 方面显示出显著加速的衰退 (Betsuyaku 等人， 2000， Respiration， 67， 261-267)。经由气 管在大鼠中滴注人 NE 会导致肺出血、 急性期间 (acute phase) 的嗜中性白细胞积聚和慢性 期间 (chronic phase) 的肺气肿性改变 (Karaki 等人， 2002， Am.J.Resp.Crit.Care Med.， 166， 496-500)。研究已经表明， 可通过用 NE 抑制剂进行预处理来抑制由 NE 引起的仓鼠的 急性期肺气肿和肺出血 (Fujie 等人， 1999， Inflamm.Res.48， 160-167)。COPD 的主要病理特征是嗜中性白细胞主导的气道炎症和气道粘液阻塞， 包括囊 性纤维化和慢性支气管炎。NE 破坏粘蛋白的产生， 导致气道的粘液阻塞。据报道， NE 增加 主要呼吸性粘蛋白基因即 MUC5AC 的表达 (Fischer， B.M&Voynow， 2002， Am.J.Respir.Cell Biol.， 26， 447-452)。经气雾剂向豚鼠给予 NE， 在接触的 20 分钟之内会产生大范围的上 皮损伤 (Suzuki 等人， 1996， Am.J.Resp.Crit.Care Med.， 153， 1405-1411)。此外， NE 在体 外会降低人呼吸上皮纤毛的搏动频率 (beat frequency)(Smallman 等人， 1984， Thorax， 39， 663-667)， 这与在 COPD 患者中观察到的粘液纤毛清除降低相一致 (Currie 等人， 1984， Thorax， 42， 126-130)。在仓鼠气道中滴注 NE 导致粘液腺增生 (Lucey 等人， 1985， Am.Resp. Crit.Care Med.， 132， 362-366)。在哮喘的分泌亢进中同样暗含了 NE 的作用。在变应原 致敏的豚鼠急性哮喘模型中， NE 抑制剂阻止了杯状细胞脱粒和粘液分泌亢进 (Nadel 等人， 1999， Eur.Resp.J.， 13， 190-196)。
同样已经表明， NE 在肺纤维化的发病机理中起了一定作用。在肺纤维化患者的血 清中， NE ： α1- 蛋白酶抑制剂复合物增加， 这与这些患者的临床参数相关联 (Yamanouchi 等 人， 1998， Eur.Resp.J.， 11， 120-125)。 在人肺纤维化的鼠科模型中， NE 抑制剂降低了博来霉 素诱导的肺纤维化 (Taooka 等人， 1997， Am.J.Resp.Crit.Care Med.， 156， 260-265)。进一 步地， 研究者已经证明， NE 缺陷小鼠对博来霉素诱导的肺纤维化具有抗性 (Dunsmore 等人， 2001， Chest， 120， 35S-36S)。已经发现， 在发展成为 ARDS 的患者中， 血浆 NE 水平升高， 这暗 示了 NE 在早期 ARDS 疾病发病机理中的重要性 (Donnelly 等人， 1995， Am.J.Res.Crit.Care Med.， 151， 428-1433)。 在肺癌区域中， 抗蛋白酶和与抗蛋白酶复合的 NE 增加 (Marchandise 等人， 1989， Eur.Resp.J.2， 623-629)。近期研究已经证明， NE 基因启动子区域的多形性与 肺癌的发展相关 (Taniguchi 等人， 2002， Clin.Cancer Res.， 8， 1115-1120)。
由内毒素引起的试验动物急性肺损伤与 NE 水平的上升有关 (Kawabata， 等人， 1999， Am.J.Resp.Crit.Care.， 161， 2013-2018)。 已 经 证 明， 由气管内注入脂多糖引起 的小鼠急性肺炎提高了支气管肺泡灌洗液中 NE 的活性， 通过 NE 抑制剂可以显著地抑制 所 述 活 性 (Fujie 等 人， 1999， Eur.J.Pharmacol.， 374， 117-125 ； Yasui， 等 人， 1995， Eur. Resp.J.， 8， 1293-1299)。在由肿瘤坏死因子 α(TNFα) 和 ( 肉豆蔻酸佛波醇酯 ) 醋酸酯 (phorbol myristate acetate， PMA) 导致的离体灌注兔肺急性肺损伤模型中观察到嗜中性 白细胞诱导的肺微血管渗透性增加， NE 同样在其中扮演了重要角色 (Miyazaki 等人， 1998， Am.J.Respir.Crit.Care Med.， 157， 89-94)。
同样， 已经有人提出 NE 在野百合碱诱导的肺血管壁增厚和心脏肥大中扮演角色 (Molteni 等人， 1989， Biochemical Pharmacol 38， 2411-2419)。丝氨酸弹性蛋白酶抑制 剂能逆转野百合碱诱导的肺动脉高血压和大鼠肺动脉的重塑 (Cowan 等人， 2000， Nature Medicine.， 6， 698-702)。近期研究已经表明， 丝氨酸弹性蛋白酶即 NE 或血管弹性蛋白酶是 香烟烟雾 (cigarate smoke) 诱导的豚鼠小肺动脉肌化中的重要因素 (Wright 等人， 2002， Am.J.respir.Crit.CareMed.， 166， 954-960)。
NE 在实验性脑缺血损伤 (Shimakura 等人， 2000， Brain Research.， 858， 55-60)、 局部缺血 - 再灌注性肺损伤 (Kishima 等人， 1998， Ann.Thorac.Surg.65， 913-918) 以及大 鼠心脏心肌缺血 (Tiefenbacher 等人， 1997， Eur.J.Physiol.， 433， 563-570) 中扮演了重要 角色。在炎症性肠病中， 例如， 在克罗恩氏病 (Crohn’ s disease) 和溃疡性结肠炎中， 人 NE在血浆中的水平显著高于正常水平 (Adeyemi 等人， 1985， gut， 26， 1306-1311)。此外， 也有 人已经提出类风湿性关节炎发病机理中有 NE 参与的假设 (Adeyemi 等人， 1986， Rheumatol. Int.， 6， 57)。胶原诱导的小鼠关节炎发展可由 NE 抑制剂来抑制 (Kakimoto 等人， 1995， Cellular Immunol.165， 26-32)。
因而， 人 NE 是已知的最具破坏性的丝氨酸蛋白酶之一， 其涉及各种炎症性疾 病。人 NE 的重要内源性抑制剂是 α1- 抗胰蛋白酶。人们认为， 人 NE 和抗蛋白酶之间 的失衡会产生过量的人 NE， 这导致非受控的组织破坏。可通过降低 - 抗胰蛋白酶可用性 (availability) 来扰乱蛋白酶 / 抗蛋白酶的平衡， 所述 α1- 抗胰蛋白酶可用性的降低即可 以通过用氧化剂 ( 例如香烟烟雾 ) 灭活来实现， 也可以因遗传上不能产生足够的血清水平 而产生。人 NE 已经牵涉多种疾病的促进或恶化， 这些疾病例如肺气肿、 肺纤维化、 成人呼吸 窘迫综合征 (ARDS)、 局部缺血再灌注损伤、 类风湿性关节炎以及肺动脉高压。
我们现在披露一组化合物， 所述化合物是人 NE 的有效抑制剂以及具有有利的药 代动力学和物理性质。 附图说明 图 1 是 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲 基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A 的 X- 射线粉末衍射图 ；
图 2 是 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲 基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 B 的 X- 射线粉末衍射图 ；
图 3 是 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲 基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 C 的 X- 射线粉末衍射图 ；
图 4 是 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲 基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 D 的 X- 射线粉末衍射图 ；
图 5 是 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲 基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 E 的 X- 射线粉末衍射图。
发明内容 根据本发明， 其因此提供选自以下的化合物或其任何一个的可药用盐 ：
6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 ；
6-[1-(4- 氯苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 ；
6-[1-(5- 氯吡啶 -2- 基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 ；
6-[1-(4- 氰基苯基 )-3- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟 甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 ；
4-(3- 氰 基 苯 基 )-6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-N- 环 丙 基 -5- 甲 基 -3- 氧代 -3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 ； 和
6-(1-(4- 氰基苯基 )-4， 4- 二甲基 -4， 5- 二氢 -1H- 咪唑 -2- 基 )-5- 甲基 -3- 氧
代 -4-(3-( 三氟甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺。
在一种实施方式中， 所述化合物是 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 ； 或其可药用盐。
在一种实施方式中， 所述化合物是 6-[1-(4- 氯苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 ； 或其可药用盐。
在 一 种 实 施 方 式 中，所 述 化 合 物 是 6-[1-(5- 氯 吡 啶 -2- 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 ； 或其 可药用盐。
在 一 种 实 施 方 式 中， 所 述 化 合 物 是 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-3- 甲 基 -1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 ； 或其 可药用盐。
在一种实施方式中， 所述化合物是 4-(3- 氰基苯基 )-6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-N- 环丙基 -5- 甲基 -3- 氧代 -3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 ； 或其可药用盐。
在一种实施方式中， 所述化合物是 6-(1-(4- 氰基苯基 )-4， 4- 二甲基 -4， 5- 二 氢 -1H- 咪唑 -2- 基 )-5- 甲基 -3- 氧代 -4-(3-( 三氟甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲 酰胺 ； 或其可药用盐。
使用软件 ACD Labs version 6.00 生成化合物名称。相应的分子结构示于实施例部分。 本发明还提供如上列举的化合物或其可药用盐的制备方法。
用于制备如上列举的每一化合物的具体方法在本说明书的实施例部分中披露。 该 方法形成本发明的一个方面。
必需的起始物料是可商购的、 在文献中已知的或可以使用已知技术制备。用于制 备某些关键起始物料的具体方法在本说明书的实施例部分中披露， 并且该方法形成本发明 的一个方面。
某些中间体可能是新的。该新中间体形成本发明的另一方面。
本领域技术人员将认识到， 在本发明的方法中， 某些官能团如羟基或氨基可能需 要通过保护基团保护起来。因此， 如上列举的化合物的制备可能在适当阶段涉及一个或多 个保护基团的引入和 / 或除去。
官能团的保护和脱保护描述于′ Protective Groups in Organic Chemistry′， edited by J.W.F.McOmie ，Plenum Press(1973) 和 ′ Protective Groups in OrganicSynthesis′， 3rd edition， T.W.Greene 和 P.G.M.Wuts， Wiley-Interscience(1999) 中。
可将如上列举的化合物转化为其可药用盐， 优选转化成酸加成盐， 例如盐酸盐、 氢 溴酸盐、 硫酸盐、 磷酸盐、 醋酸酯、 富马酸盐、 马来酸盐、 酒石酸盐、 乳酸盐、 柠檬酸盐、 丙酮酸 盐、 琥珀酸盐、 草酸盐、 甲磺酸盐或对甲苯磺酸盐。
应理解的是， 在当存在异构形式时， 本发明包括如上列举的化合物的所有几何异 构体和光学异构体 ( 包括阻转异构体 ) 及其混合物的用途。互变异构体及其混合物的用途 也形成本发明的一个方面。
多晶形性 (Polymorphism) 可以称为具体的化合物以不同晶体变化形式结晶同
时维持相同化学结构式的能力。给定物质的多晶型物为化学等同的， 其含有以相同方式 互相键合的相同原子， 但它们的晶体变化形式不同， 这会影响一种或多种物理性质， 诸如 溶出速率 (dissolution rate)、 熔点、 堆积密度 (bulk density)、 稳定性、 流动性质等等。 如本申请说明书所使用的， 对特定化合物而言， 术语 “多晶型物 (polymorph)” 、 “晶体变化 形 式 (crystalmodification)” 、 “晶 形 (crystal form)” 、 “结 晶 变 化 形 式 (crystalline modification)” 和 “结晶形式 (crystalline form)” 将被理解为是同义的。
在一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其 被称为形式 A 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射 (XPRD) 图 ： 8.0、 15.9 和 17.8° 2θ， 以及其中所述 XPRD 图是使用 CuKα 辐射测量的。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其被称为形式 A 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射 (XPRD) 图 ： 7.4、 8.0、 10.7、 15.9、 16.2、 17.6、 17.8、 21.6、 22.8 和 24.9° 2θ， 以及其中所述 XPRD 图是使用 CuKα 辐射测量的。 在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其 被称为形式 A 且特征在具有与图 1 中所示图基本相同的 X- 射线粉末衍射 (XPRD) 图， 以及 其中所述 XPRD 图是使用 CuKα 辐射测量的。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二 氢 吡 嗪 -2- 甲 酰 胺 的 一 种 结 晶 变 化 形 式， 其被称为形式 B 且特征在具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射图 ： 18.0、 18.2 和 24.7° 2θ。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其被称为形式 B 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射图 ： 12.5、 14.3、 14.4、 15.7、 17.5、 18.0、 18.2、 18.8、 22.2 和 24.7° 2θ。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其 被称为形式 B 且特征在于具有与图 2 中所示图基本相同的 X- 射线粉末衍射图。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二 氢 吡 嗪 -2- 甲 酰 胺 的 一 种 结 晶 变 化 形 式， 其被称为形式 C 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射图 ： 7.6、 20.1 和 22.9° 2θ。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其 被称为形式 C 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射图 ： 7.6、 8.6、 10.7、 12.1、 16.6、 17.1、 20.1、 20.2、 22.7 和 22.9° 2θ。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲
基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其 被称为形式 C 且特征在于具有与图 3 中所示图基本相同的 X- 射线粉末衍射图。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二 氢 吡 嗪 -2- 甲 酰 胺 的 一 种 结 晶 变 化 形 式， 其被称为形式 D 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射图 ： 7.4、 10.6 和 18.2° 2θ。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其被称为形式 D 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射图 ： 7.4、 10.6、 17.3、 18.2、 18.5、 21.4、 22.8、 23.1、 24.8 和 24.9° 2θ。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其 被称为形式 D 且特征在于具有与图 4 中所示图基本相同的 X- 射线粉末衍射图。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二 氢 吡 嗪 -2- 甲 酰 胺 的 一 种 结 晶 变 化 形 式， 其被称为形式 E 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射图 ： 7.4、 10.1 和 19.0° 2θ。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其 被称为形式 E 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射图 ： 6.9、 7.4、 10.1、 14.7、 15.0、 15.7、 16.4、 19.0、 19.3 和 22.5° 2θ。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的一种结晶变化形式， 其 被称为形式 E 且特征在于具有与图 5 中所示图基本相同的 X- 射线粉末衍射图。
应该理解， X 射线粉末衍射 (XPRD) 图中峰的相对强度可根据试验中样本的取向而 变化， 并随使用的仪器的类型和设置而变化， 因此包括在本申请中的 XPRD 迹线中的强度在 这种意义上讲为示例性的， 而并非意图用于绝对比较。
本 发 明 的 结 晶 变 化 形 式 或 结 晶 形 式 优 选 为 基 本 上 纯 的， 意思是化合物 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二 氢吡嗪 -2- 甲酰胺的每种结晶变化形式或结晶形式包含少于 10wt％， 优选少于 5wt％， 优选 少于 3wt％， 优选少于 1wt％的杂质， 包括所述化合物的其它结晶变化形式或结晶形式。
因 此，在 一 种 实 施 方 式 中，本 发 明 提 供 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的基 本纯的结晶变化形式， 其被称为形式 A 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射 (XPRD) 图 ： 8.0、 15.9 和 17.8° 2θ， 以及其中所述 XPRD 图是使用 CuKα 辐射测量的。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的基本纯的结晶变化形 式， 其被称为形式 A 且特征在于具有包含以下特征峰的 X- 射线粉末衍射 (XPRD) 图 ： 7.4、 8.0、 10.7、 15.9、 16.2、 17.6、 17.8、 21.6、 22.8 和 24.9° 2θ， 以及其中所述 XPRD 图是使用CuKα 辐射测量的。
在另一种实施方式中， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺的基本纯的结晶变化形 式， 其被称为形式 A 且特征在于具有与图 1 中所示图基本上相同的 X- 射线粉末衍射 (XPRD) 图， 以及其中所述 XPRD 图是使用 CuKα 辐射测量的。
当将 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲 基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺用 N， N- 二甲基乙酰胺或甲基异丁基酮在约 50 至 60℃结晶或重结晶时， 可再现地制备 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A。形式 A 作为白色结晶粉 末获得， 通过 X- 射线粉末衍射测量测定， 所述晶体粉末基本上为 100％结晶。差示扫描量 热法 (DSC) 显示， 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟 甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A 是高熔点固体， 在 270℃开始熔化以及峰值 在 275 ℃。6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A 为非吸湿性的， 在 0 至 80％的相对湿度 (RH) 和在 25℃显示出小于 0.2wt％的吸水率。 当 在 环 境 条 件 使 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺在水中浆化时， 形成 6-[1-(4- 氰基 苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲 酰胺形式 B。形式 B 是高熔点固体， 在 264℃开始熔化以及峰值在 267℃。然后其可以重结 晶成形式 A 并随后再次在约 270℃开始熔化。 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 B 为非吸湿性的， 在 0 至 80％ RH 和在 25℃显示出小于 0.2wt％的吸水率。
当 在 环 境 条 件 将 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺用甲醇结晶或重结晶时， 形成 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢比嗪 -2- 甲酰胺形式 C。未观察到形式 C 的熔点， 这是由于一经加热， 其在约 150℃ 转化成形式 A。
当 在 环 境 条 件 使 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺在水中浆化时， 形成 6-[1-(4- 氰基 苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲 酰胺形式 D。未观察到形式 D 的熔点， 这是由于一经加热， 其在约 210℃转化成形式 A。
当 在 环 境 条 件 使 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺在羟丙基甲基纤维素 (HPMC)/ 水中 ( 例如， 在 0.5％ HPMC/ 水中 ) 浆化时， 形成 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二 氢 吡 嗪 -2- 甲 酰 胺 形 式 E。 未 观 察 到 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 E 的熔点， 这是由于一经加热， 其在约 220℃转化成形式 A。
当加热 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲 基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A 至 E 中的任意一种时， 在熔化或固态转化 ( 例
如上面概述的那些 ) 之前， 未观察到溶剂损失和任何其它热事件 (thermal event)。
通过使用本申请披露的操作， 在小规模、 中规模或大规模合成后， 能够可再现地制 备 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A。
6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A 具有优异的和非常有利的固态性质。它是高度结晶 性和非吸湿性的， 以及在 260℃以下是热稳定的， 在熔化前未显示溶剂损失和任何其它热事 件。
在一方面， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A。
在另一方面， 本发明提供用于制备 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A 的方法。因此， 在一方面， 本发明提供用于制备 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A 的方法， 所述方法牵涉用 N， N- 二甲基乙酰胺结晶或重结晶。在另一方面， 本发明提供用于制备 6-[1-(4- 氰基苯 基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲 酰胺形式 A 的方法， 所述方法牵涉用甲基异丁基酮结晶或重结晶。 如上列举的化合物和它们的可药用盐具有作为药物的活性， 具体地， 作为丝氨酸 蛋白酶如蛋白酶 3 和胰弹性蛋白酶以及尤其是人嗜中性白细胞弹性蛋白酶的调节剂， 因此 可用于炎性疾病和病症的治疗或预防。
如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗呼吸道疾病， 例如气道阻塞性疾 病， 包括哮喘， 包括支气管哮喘、 变应性哮喘、 内源性哮喘、 外源性哮喘、 运动诱发性哮喘、 药 物诱发性 ( 包括阿司匹林和 NSAID 诱发的 ) 哮喘， 以及粉尘诱发性哮喘， 既包括间歇性的又 包括持续性的， 以及各种严重度的哮喘， 及其它原因引起的气道高反应性 ； 慢性阻塞性肺病 (COPD) ； 支气管炎， 包括传染性支气管炎和嗜酸性支气管炎 ； 肺气肿 ； 支气管扩张 ； 囊性纤 维化 ； 结节病 ； 农民肺及相关疾病 ； 超敏感性肺炎 ； 肺纤维化， 包括隐原性纤维化肺泡炎、 特 发性间质性肺炎、 抗肿瘤治疗和慢性感染 ( 包括结核病和曲霉病及其它真菌感染 ) 并发的 纤维化 ； 肺移植的并发症 ； 肺血管的血管炎和血栓形成疾病及肺动脉高压 ； 镇咳活性， 包括 治疗与气道炎症和分泌情况相关的慢性咳嗽及医源性咳嗽 ； 急性鼻炎和慢性鼻炎， 包括药 物性鼻炎及血管运动性鼻炎 ； 常年性 (perennial) 和季节性 ( 过敏性 ) 鼻炎， 包括神经性鼻 炎 ( 花粉症 ) ； 鼻息肉病 ； 急性病毒感染， 包括普通感冒和由呼吸道合胞病毒、 流行性感冒、 冠状病毒 ( 包括 SARS) 和腺病毒引起的感染。
如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗骨和关节疾病如与骨关节炎 / 骨关节病相关或包括骨关节炎 / 骨关节病的关节炎， 包括原发性和继发性关节炎， 例如先 天性髋关节发育不良 ； 颈和腰脊椎炎及腰背痛和颈部疼痛 ； 类风湿性关节炎和斯蒂尔病 (Still’ s disease) ； 血清阴性脊柱关节病， 包括强直性脊柱炎、 牛皮癣性关节炎、 反应性 关节炎和未分化脊柱关节病 ； 脓毒性关节炎和其它感染相关的关节病和骨疾病， 例如结核 病， 包括波特病 (Potts’ disease) 和蓬塞综合征 (Poncet’ s syndrome) ； 晶体诱发的急 性和慢性滑膜炎， 包括尿酸盐沉积病、 焦磷酸钙沉积病和钙磷灰石相关的腱、 粘液囊和滑
膜炎症 ； 贝切特病 (Behcet’ s disease) ； 原发性和继发性斯耶格伦综合征 (Sjogren’ s syndrome) ； 全身性硬化和局限性硬皮病 ； 系统性红斑狼疮、 混合性结缔组织病和未分 化结缔组织病 ； 炎性肌病， 包括皮肌炎和多肌炎 ； 风湿性多肌痛 ； 幼年型关节炎， 包括分 布在任何关节的特发性炎性关节炎及相关综合征和风湿热及其全身性并发症 ； 血管炎 (vasculitis)， 包括巨细胞性动脉炎、 高安动脉炎 (Takayasu’ s arteritis)、 丘 - 施综合征 (Churg-Strausssyndrome)、 结节性多动脉炎、 显微镜性多动脉炎和与病毒感染、 超敏反应、 冷球蛋白和异蛋白相关的血管炎 ； 腰背痛 ； 家族性地中海热、 穆 - 韦综合征 (Muckle-Wells syndrome) 和家族性爱尔兰热 (FamilialHibernian Fever)、 菊池病 (Kikuchi disease) ； 药物诱发性关节痛、 腱炎和肌病。
如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗由损伤 ( 例如运动损伤 ) 或疾 病引起的疼痛和结缔组织再造的肌肉骨骼疾病 ： 关节炎 ( 例如类风湿性关节炎、 骨关节炎、 痛风或晶体性关节病 )、 其它关节疾病 ( 例如椎间盘变性或颞下颌关节变性 )、 骨再造疾病 ( 例如骨质疏松、 佩吉特病 (Paget’ s disease) 或骨坏死 )、 多软骨炎、 硬皮病、 混合性结缔 组织病、 脊椎关节病或牙周病 ( 例如牙周炎 )。
如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗皮肤疾病如牛皮癣、 特应性皮 炎、 接触性皮炎或其它湿疹性皮肤病及迟发型超敏反应 ； 植物性和光照性皮炎 ； 脂溢性皮 炎、 疱疹样皮炎、 扁平苔癣、 萎缩性硬化性苔癣、 坏疽性脓皮症、 皮肤结节病、 盘状红斑狼 疮、 天疱疮、 类天疱疮、 大疱性表皮松解、 荨麻疹、 血管性水肿、 血管炎、 中毒性红斑、 皮肤 嗜酸粒细胞增多、 斑秃、 男性型脱发、 斯威特综合征 (Sweet’ s syndrome)、 韦 - 克综合征 (Weber-Christian syndrome)、 多形性红斑 ； 蜂窝组织炎， 包括传染性和非传染性蜂窝组织 炎； 脂膜炎 ； 皮肤淋巴瘤、 非黑素瘤皮肤癌和其它发育不良性损伤 ； 药物诱发的疾病， 包括 固定性药疹。
如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗眼科疾病如睑炎 ； 结膜炎， 包括 常年性过敏性结膜炎或春季过敏性结膜炎 ； 虹膜炎 ； 前色素层炎和后色素层炎 ； 脉络膜炎 ； 自身免疫 ； 影响视网膜的变性或炎性疾病 ； 眼炎， 包括交感性眼炎 ； 结节病 ； 感染， 包括病 毒、 真菌和细菌感染。
如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗胃肠道疾病如舌炎、 龈炎、 牙周 炎； 食管炎， 包括返流 ； 嗜酸性胃肠炎、 肥大细胞增多、 克罗恩病 (Crohn’ s disease)、 结肠 炎包括溃疡性结肠炎、 直肠炎、 肛门瘙痒 ； 腹部疾病、 肠应激综合征、 非炎性腹泻， 以及具有 远离肠作用的食物相关的变态反应 ( 例如偏头痛、 鼻炎或湿疹 )。
如上列举的化合物和它们的可药用盐也可用于治疗心血管系统疾病如影响冠脉 和外周循环的动脉粥样硬化 ； 心包炎 ； 心肌炎 ； 炎性和自身免疫性心肌病， 包括心肌结节 病； 缺血性再灌注损伤 ； 心内膜炎、 心瓣炎和主动脉炎， 包括传染性 ( 例如梅毒性 ) 的 ； 血管 炎； 近端和外周静脉的疾病， 包括静脉炎和血栓形成包括深静脉血栓形成及静脉曲张的并 发症。
如上列举的化合物和它们的可药用盐也可用于治疗肿瘤如对一般癌症的治疗， 包 括前列腺、 乳腺、 肺、 卵巢、 胰腺、 肠和结肠、 胃、 皮肤和脑肿瘤及影响骨髓 ( 包括白血病 ) 和 淋巴增生系统 ( 例如何杰金 (Hodgkin’ s) 和非何杰金淋巴瘤 ) 的恶性肿瘤 ； 包括对转移性 疾病和肿瘤复发及瘤外综合征的预防和治疗。具体地， 如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗成人呼吸窘迫综合征 (ARDS)、 囊性纤维化、 肺气肿、 支气管炎包括慢性支气管炎、 支气管扩张、 慢性阻塞性肺病 (COPD)、 肺动脉高压、 哮喘包括顽固性哮喘 (refractive asthma)、 鼻炎、 牛皮癣、 缺血 - 再 灌注损伤、 类风湿性关节炎、 骨关节炎、 系统性炎性反应综合征 (SIRS)、 慢性创伤、 癌症、 动 脉粥样硬化、 消化性溃疡、 克罗恩氏病、 溃疡性结肠炎以及胃粘膜损伤。
更具体地， 如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗治疗慢性阻塞性肺病 (COPD)、 囊性纤维化、 支气管扩张症、 哮喘和鼻炎。
甚至更具体地， 如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗慢性阻塞性肺病 (COPD)。
甚至更具体地， 如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗囊性纤维化。
甚至更具体地， 如上列举的化合物和它们的可药用盐可用于治疗支气管扩张症。
因此， 本发明提供如上列举的化合物或其可药用盐或如上文定义的形式， 用于治 疗。
在另一方面， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺或其可药用盐， 用于治疗。
在另一方面， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A， 用于治疗。
在另一方面， 本发明提供 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 B， 用于治疗。
在另一方面， 本发明提供如上列举的化合物或其可药用盐或如上文定义的形式在 制备用于治疗的药物中的用途。
在另一方面， 本发明提供如上列举的化合物或其可药用盐或如上文定义的形式在 制备用于治疗对嗜中性白细胞弹性蛋白酶活性的调节是有益的人类疾病或病症的药物中 的用途。
在另一方面， 本发明提供如上列举的化合物或其可药用盐或如上文定义的形式在 制备用于治疗炎性疾病或病症的药物中的用途。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺或其可 药用盐在制备用于治疗炎性疾病或病症的药物中的用途。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A 在制备用于治疗炎性疾病或病症的药物中的用途。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 B 在制备用于治疗炎性疾病或病症的药物中的用途。
在另一方面， 本发明提供如上列举的化合物或其可药用盐或如上文定义的形式在 制备用于治疗以下疾病的药物中的用途 ： 成人呼吸窘迫综合征 (ARDS)、 囊性纤维化、 肺气 肿、 支气管炎包括慢性支气管炎、 支气管扩张、 慢性阻塞性肺病 (COPD)、 肺动脉高压、 哮喘包 括顽固性哮喘 (refractiveasthma)、 鼻炎、 牛皮癣、 缺血 - 再灌注损伤、 类风湿性关节炎、 骨关节炎、 系统性炎性反应综合征 (SIRS)、 慢性创伤、 癌症、 动脉粥样硬化、 消化性溃疡、 克罗 恩氏病、 溃疡性结肠炎或胃粘膜损伤。
在另一方面， 本发明提供如上列举的化合物或其可药用盐或如上文定义的形式在 制备用于治疗慢性阻塞性肺病 (COPD) 的药物中的用途。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺或其可 药用盐在制备用于治疗慢性阻塞性肺病 (COPD) 的药物中的用途。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A 在制备用于治疗慢性阻塞性肺病 (COPD) 的药物中的用途。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 B 在制备用于治疗慢性阻塞性肺病 (COPD) 的药物中的用途。
在另一方面， 本发明提供如上文定义的如上列举的化合物或其可药用盐， 用于治 疗对嗜中性白细胞弹性蛋白酶的活性的调节是有益的人类疾病或病症。
在另一方面， 本发明提供如上文定义的如上列举的化合物或其可药用盐， 用于治 疗炎性疾病或病症。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺或其可 药用盐， 用于治疗炎性疾病或病症。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A， 用于治疗炎性疾病或病症。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 B， 用于治疗炎性疾病或病症。
在另一方面， 本发明提供如上文定义的如上列举的化合物或其可药用盐， 用于治 疗成人呼吸窘迫综合征 (ARDS)、 囊性纤维化、 肺气肿、 支气管炎包括慢性支气管炎、 支气管 扩张、 慢性阻塞性肺病 (COPD)、 肺动脉高压、 哮喘包括顽固性哮喘、 鼻炎、 牛皮癣、 缺血 - 再 灌注损伤、 类风湿性关节炎、 骨关节炎、 系统性炎性反应综合征 (SIRS)、 慢性创伤、 癌症、 动 脉粥样硬化、 消化性溃疡、 克罗恩氏病、 溃疡性结肠炎以及胃粘膜损伤。
在另一方面， 本发明提供如上文定义的如上列举的化合物或其可药用盐， 用于治 疗慢性阻塞性肺病 (COPD)。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺或其可 药用盐， 用于治疗慢性阻塞性肺病 (COPD)。
在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A， 用于治疗慢性阻塞性肺病 (COPD)。在 另 一 方 面，本 发 明 提 供 如 上 文 定 义 的 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 B， 用于治疗慢性阻塞性肺病 (COPD)。
本说明书的上下文中， 除非存在相反的具体说明， 术语″治疗″还包括″预防″。 术语″治疗的″和″治疗地″也应相应解释。
预防被预期与遭受被考虑疾病或病症先前事件或者以其它方式被认为处于其危 险性升高的人的治疗特别相关。 具有形成特定疾病或病症风险的人群通常包括那些具有该 疾病或病症历史的人群或者那些已通过基因测试证实或筛选特别容易形成该疾病或病症 的人群。
本发明还提供治疗对嗜中性白细胞弹性蛋白酶活性的抑制是有益的疾病或病症 或者降低对嗜中性白细胞弹性蛋白酶活性的抑制是有益的疾病或病症的风险的方法， 所述 方法包括该向有此需要的患者给予治疗有效量的如上文定义的如上列举的化合物或其可 药用盐或其形式。
本发明仍然进一步提供治疗炎性疾病或病症或者降低炎性疾病或病症的风险的 方法， 所述方法包括向有此需要的患者给予治疗有效量的如上文定义的如上列举的化合物 或其可药用盐或其形式。 本发明仍然进一步提供治疗炎性疾病或病症或者降低炎性疾病或病症的风险的 方法， 所述方法包括向有此需要的患者给予治疗有效量的如上文定义的 6-[1-(4- 氰基苯 基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲 酰胺或其可药用盐。
本发明仍然进一步提供治疗炎性疾病或病症或者降低炎性疾病或病症风险的方 法， 所述方法包括向有此需要的患者给予治疗有效量的如上文定义的 6-[1-(4- 氰基苯 基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲 酰胺形式 A。
本发明仍然进一步提供治疗炎性疾病或病症或者降低炎性疾病或病症风险的方 法， 所述方法包括向有此需要的患者给予治疗有效量的如上文定义的 6-[1-(4- 氰基苯 基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲 酰胺形式 B。
本发明仍然进一步提供治疗如下疾病的方法， 或降低如下疾病危险的方法 ： 成人 呼吸窘迫综合征 (ARDS)、 囊性纤维化、 肺气肿、 支气管炎包括慢性支气管炎、 支气管扩张、 慢 性阻塞性肺病 (COPD)、 肺动脉高压、 哮喘包括顽固性哮喘、 鼻炎、 牛皮癣、 缺血 - 再灌注损 伤、 类风湿性关节炎、 骨关节炎、 系统性炎性反应综合征 (SIRS)、 慢性创伤、 癌症、 动脉粥样 硬化、 消化性溃疡、 克罗恩氏病、 溃疡性结肠炎以或胃粘膜损伤， 所述方法包括向有此需要 的患者给予如上文定义的如上列举的化合物或其可药用盐或其形式。
本发明仍然进一步提供治疗慢性阻塞性肺病 (COPD) 或者降低慢性阻塞性肺病 (COPD) 风险的方法， 所述方法包括向有此需要的患者给予治疗有效量的如上文定义的如上 列举的化合物或其可药用盐或其形式。
本发明仍然进一步提供治疗慢性阻塞性肺病 (COPD) 或者降低慢性阻塞性肺病 (COPD) 风险的方法， 所述方法包括向有此需要的患者给予治疗有效量的如上文定义的
6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺或其可药用盐。
本发明仍然进一步提供治疗慢性阻塞性肺病 (COPD) 或者降低慢性阻塞性肺病 (COPD) 风险的方法， 所述方法包括向有此需要的患者给予治疗有效量的如上文定义的 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A。
本发明仍然进一步提供治疗慢性阻塞性肺病 (COPD) 或者降低慢性阻塞性肺病 (COPD) 风险的方法， 所述方法包括向有此需要的患者给予治疗有效量的如上文定义的 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 B。
对于以上的治疗用途， 所给予的剂量当然会随着所使用的化合物、 给药方式、 所需 的治疗和适应症而变化。本发明化合物的日剂量可以在 0.05mg/kg 至 100mg/kg 范围内。
如上列举的化合物或其可药用盐或其形式可以单独使用， 但通常以药物组合物的 形式给药， 在药物组合物中， 所述化合物 / 盐 / 形式 ( 活性成分 ) 与可药用助剂、 稀释剂或 载体相结合。 选择和制备适合的药物制剂的常规操作描述在， 例如″ Pharmaceuticals-The Science of Dosage D 形式 esigns″， M.E.Aulton， Churchill Livingstone， 1988 中。 根据给药方式， 所述药物组合物优选含有 0.05 至 99w％ ( 重量百分比 ) 的活性成 分， 更优选 0.05 至 80w％， 仍然更优选 0.10 至 70w％， 以及甚至更优选 0.10 至 50％ w 的活 性成分， 所有重量百分比都以组合物的总重量计。
本发明还提供药物组合物， 该组合物含有如上文定义的如上列举的化合物或其可 药用盐或其形式， 以及含有可药用助剂、 稀释剂或载体。
在 另 一 方 面， 本 发 明 提 供 药 物 组 合 物， 所 述 组 合 物 含 有 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲 酰胺。
在 另 一 方 面， 本 发 明 提 供 药 物 组 合 物， 所 述 组 合 物 含 有 6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲 酰胺形式 A。
本发明进一步提供制备本发明药物组合物的方法， 所述方法包括将如上文定义的 如上列举的化合物或其可药用盐或其形式与可药用助剂、 稀释剂或载体混合。
所述药物组合物可以如下形式来局部给药 ( 例如给药至皮肤或至肺和 / 或气道 ) ：
乳膏剂、 溶液剂、 混悬剂、 七氟烷 (HFA) 气雾剂或干粉制剂 ( 例如置于已知为 的吸入装置中的制剂 ) ； 或所述化合物全身给药， 例如采用如下形式经口服给药 ： 片剂、 胶 囊剂、 糖浆剂、 散剂或颗粒剂 ； 或以溶液剂或混悬剂的形式通过非经肠给药 ； 或以栓剂的形 式通过直肠给药 ； 或皮下给药。药物组合物可以采用如下形式局部给药 ( 例如给药至皮肤 或肺和 / 或气道 ) ： 例如， 乳膏剂、 溶液、 悬浮剂、 七氟烷烃 (HFA) 气雾剂和干粉制剂， 例如， 在称为 的吸入装置中的制剂 ； 或者全身给药， 例如采用如下形式口服给药 ： 片 剂、 胶囊剂、 糖浆剂、 粉末剂或颗粒剂 ； 或者以溶液或混悬剂的形式非肠道给药 ； 或者皮下 给药 ； 或者以栓剂的形式直肠给药 ； 或者经皮给药。
本发明化合物的干粉制剂和加压的 HFA 气雾剂可经口服或鼻吸入来给药。对于吸入给药， 化合物理想地为经微细分散的。经微细分散的化合物优选具有小于 10μm 的质量 中位直径 (mass median diameter)， 并可在分散剂辅助下悬浮于抛射剂混合物中， 所述的 分散剂诸如 C8-C20 脂肪酸或其盐 ( 例如， 油酸 )、 胆汁酸盐、 磷脂、 烷基糖、 全氟化的表面活性 剂或多乙氧基化的表面活性剂， 或其它可药用分散剂。
本发明化合物还可借助于干粉吸入器给药。吸入器可为单剂量或多剂量吸入器， 并且可以是呼吸启动 (breath actuated) 的干粉吸入器。
一种可能性是将微细分散的本发明化合物和载体物质混合， 所述载体物质为例 如， 单糖、 二糖或多糖、 糖醇或另一种多元醇。 合适的载体为糖， 例如， 乳糖、 葡萄糖、 棉子糖、 松三糖、 乳糖醇、 麦芽糖醇、 海藻糖、 蔗糖、 甘露醇 ； 和淀粉。可选择地， 可以用另一种物质对 微细分散的化合物包衣。也可以将粉末混合物分装在硬明胶胶囊中， 每个胶囊含有所需剂 量的活性化合物。
另一可能性为将微细分散的粉末加工成会在吸入操作过程中分解的球。 可将该球 状粉末装入多剂量吸入器 ( 例如， 已知为 的吸入器， 其中剂量单位量取被患者 吸入的期望的剂量 ) 的药物贮器中。有了该系统， 将含有或不含载体物质的活性成份递送 至患者。
对于口服给药， 可将本发明化合物与辅料或载体混合， 然后压制成片剂， 所述辅料 或载体例如乳糖、 蔗糖、 山梨醇、 甘露醇 ； 淀粉， 例如马铃薯淀粉、 玉米淀粉或支链淀粉 ； 纤 维素衍生物 ； 粘合剂， 例如明胶或聚乙烯吡咯烷酮 ； 和 / 或润滑剂， 例如硬脂酸镁、 硬脂酸 钙、 聚乙二醇、 蜡、 石蜡等等。若需要包衣片， 可将如上描述制备的核心用浓的糖溶液包衣， 所述的浓的糖溶液可含有， 例如阿拉伯胶、 明胶、 滑石、 二氧化钛等等。可可选择地， 可将片 剂用溶于易挥发的有机溶剂中的适合的聚合物包衣。
对于制备软明胶胶囊而言， 可将本发明化合物与例如植物油或聚乙二醇混合。硬 明胶胶囊可含有使用了以上提及的用于片剂的任意赋形剂的化合物颗粒。 还可将本发明化 合物的液态和半固态制剂装入硬明胶胶囊中。
用于口服用的液体制剂可以如下形式存在 ： 糖浆剂或混悬剂， 例如含有本发明化 合物的溶液剂， 该溶液剂的其它成分为糖以及乙醇、 水、 甘油和丙二醇的混合物。所述液态 制剂可任选含有着色剂、 调味剂和 / 或作为增稠剂的羧甲基纤维素或本领域技术人员已知 的其它赋形剂。
本发明化合物也可以与其它用于治疗上述病症的化合物联合给药。 因此， 本发明进一步涉及联合疗法， 其中将本发明化合物或其可药用盐或其形式， 或者含本发明化合物的药物组合物或制剂与另一种或多种治疗剂同时或顺序给药， 或者以 联合制剂的形式给药， 以用于治疗一种或更多种所列的病症。具体地， 就炎性疾病的治疗 而言， 例如 ( 但不限于 ) 类风湿性关节炎、 骨关节炎、 哮喘、 过敏性鼻炎、 慢性阻塞性肺病 (COPD)、 牛皮癣和炎症性肠病， 本发明化合物可以与以下药物联用。
非甾族抗炎剂 ( 以下称为 NSAID)， 包括非选择性的环氧合酶 COX-1/COX-2 抑制 剂， 不论局部或全身应用 ( 例如吡罗昔康， 双氯芬酸， 丙酸类例如萘普生、 氟比洛芬、 非诺 洛芬、 酮洛芬和布洛芬， 芬那酸例如甲芬那酸、 消炎痛 (Indomethacin)、 舒林酸， 阿扎丙酮 (azapropazone)， 吡唑酮例如保泰松， 水杨酸盐例如阿斯匹林 ) ； 选择性 COX-2 抑制剂 ( 例 如美洛昔康， 塞来考昔， 罗非考昔， 伐地考昔， 鲁马考昔 (lumarocoxib)， 帕来考昔和依托考
昔)； 环氧合酶抑制一氧化氮供体 (CINOD) ； 糖皮质类固醇 ( 无论通过局部、 口服、 肌内、 静 脉内或关节内的路径给药 ) ； 甲氨蝶呤， 来氟米特 ； 羟氯喹， d- 青霉胺， 金诺芬或其它非肠道 的或口服的黄金制剂 ； 镇痛药 ； 双醋瑞因 (diacerein) ； 关节内疗法例如透明质酸衍生物 ； 和营养增补剂例如葡糖胺。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列细胞因子或细 胞因子功能激动剂或拮抗剂 ( 包括作用于细胞因子信号传导途径例如 SOCS 系统调节剂 的药物 ) 的联用 ： 包括 α-、 β- 和 γ- 干扰素 ； 胰岛素类生长因子 I 型 (IGF-1) ； 白介素 (IL) 包括 IL1 至 23， 和白介素拮抗剂或抑制剂例如阿那白滞素 ； 肿瘤坏死因子 α(TNF-α) 抑制剂例如抗肿瘤坏死因子单克隆抗体 ( 例如英夫利昔单抗 (infliximab) ； 阿达木单抗 (adalimumab)， 和 CDP-870) 和 TNF 受体拮抗剂包括免疫球蛋白分子 ( 例如依那西普 ) 和低 分子量药物例如己酮可可碱 (pentoxyfylline)。
另外， 本发明涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与靶向 B- 淋巴细胞 ( 例如 CD20( 利妥昔单抗 (rituximab))、 MRA-aIL16R) 和 T- 淋巴细胞 (CTLA4-Ig、 HuMax I1-15) 的单克隆抗体的联用。
本发明进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列趋化因子受体 功能调节剂的联用， 例如 CCR1、 CCR2、 CCR2A、 CCR2B、 CCR3、 CCR4、 CCR5、 CCR6、 CCR7、 CCR8、 CCR9、 CCR10 和 CCR11(C-C 家族 ) ； CXCR1、 CXCR2、 CXCR3、 CXCR4 和 CXCR5(C-X-C 家族 ) ； 和 CX3CR1(C-X3-C 家族 ) 的拮抗剂。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列抑制剂的联 用： 基质金属蛋白酶抑制剂， 即溶基质蛋白酶 (stromelysins)、 胶原酶和明胶酶以及蛋 白 聚 糖 酶 (aggrecanase) 的 抑 制 剂 ； 特 别 是 胶 原 酶 -1(MMP-1)， 胶 原 酶 -2(MMP-8)， 胶 原 酶 -3(MMP-13)， 溶 基 质 蛋 白 酶 -1(MMP-3)， 溶 基 质 蛋 白 酶 -2(MMP-10) 和 溶 基 质 蛋 白 酶 -3(MMP-11) 和 MMP-9 和 MMP-12， 包括药物例如多西环素等。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物联用 ： 白细 胞三烯生物合成抑制剂， 5- 脂肪氧合酶 (5-LO) 抑制剂或 5- 脂肪氧合酶活化蛋白 (FLAP) 拮 抗剂例如 ： 弃留通 ； ABT-761 ； 芬留顿 ； 替泊沙林 ； Abbott-79175 ； Abbott-85761 ； N-(5- 取代 的 )- 噻吩 -2- 烷基磺酰胺 ； 2， 6- 二叔丁基酚腙 ； 甲氧基四氢吡喃例如 Zeneca ZD-2138 ； 化 合物 SB-210661 ； 吡啶基 - 取代的 2- 氰基萘化合物例如 L-739， 010 ； 2- 氰基喹啉化合物例 如 L-746， 530 ； 吲哚和喹啉化合物例如 MK-591， MK-886 和 BAYx1005。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与选自下列 的 白 细 胞 三 烯 (LT)B4、 LTC4、 LTD4、 和 LTE4 的 受 体 拮 抗 剂 的 联 合 ： 吩 噻 嗪 -3- 酮 (phenothiazin-3-1s) 例 如 L-651， 392 ； 脒 基 化 合 物 例 如 CGS-25019c ； 苯并噁胺 (benzoxalamine) 例如昂唑司特 ； 苯甲脒 (benzenecarboximidamides) 例如 BIIL 284/260 ； 化合物例如扎鲁司特、 阿鲁司特、 孟鲁司特、 普仑司特、 维鲁司特 (MK-679)、 RG-12525、 Ro-245913、 伊拉司特 (CGP 45715A) 和 BAYx7195。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的联用 ： 磷 酸二酯酶 (PDE) 抑制剂例如甲基黄嘌呤 (methyl xanthanines) 包括茶碱和氨茶碱 ； 和选择 性的 PDE 同工酶抑制剂， 包括 PDE4 抑制剂和同工型 PDE4D 的抑制剂， 或 PDE5 的抑制剂。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的联用 ： 组胺 1 型受体拮抗剂， 例如西替立嗪、 氯雷他定、 地氯雷他定、 非索非那定、 阿伐斯丁、 特非那 定、 阿司咪唑、 氮卓斯汀、 左卡巴斯汀、 扑尔敏、 普鲁米近、 赛克利嗪 (cyclizine) 或咪唑斯 汀； 口服、 局部或非肠道施用。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与质子泵抑制剂 ( 例 如奥美拉唑 ) 或胃保护组胺 2 型受体拮抗剂的联用。
本发明进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与组胺 4 型受体拮抗剂 的联用。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的 联用 ： α-1/α-2 肾 上 腺 素 受 体 激 动 剂， 血 管 收 缩 剂， 拟 交 感 神 经 药 物， 例如丙己君 (propylhexedrine)、 去氧肾上腺素、 苯丙醇胺、 麻黄碱、 伪麻黄碱、 盐酸萘甲唑啉、 盐酸羟甲 唑啉、 盐酸四氢唑啉、 盐酸木甲唑啉、 盐酸曲马唑啉或盐酸乙基去甲肾上腺素。
本发明进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与抗胆碱能药物的联用， 所述抗胆碱能药剂包括毒蕈碱受体 (M1、 M2 和 M3) 拮抗剂， 例如阿托品、 东莨菪碱、 格隆溴 铵、 异丙托溴铵、 噻托溴铵、 氧托溴铵、 哌仑西平或替仑西平。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的联 用： β- 肾 上 腺 素 受 体 激 动 剂 ( 包 括 β 受 体 亚 型 1-4)， 例 如 异 丙 肾 上 腺 素、 柳丁氨醇 (salbutamol)、 福莫特罗、 沙美特罗、 特布他林 (terbutaline)、 间羟异丙肾上腺素、 甲磺酸 比托特罗 (bitolterol mesylate) 或吡布特罗， 或它们的手性对映异构体。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与色酮例如色甘酸二 钠或奈多罗米钠的联用。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的联用 ： 糖 皮质激素， 例如氟尼缩松、 曲安奈德、 二丙酸倍氯米松、 布地奈德、 丙酸氟替卡松、 环索奈德 或糠酸莫美松。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与调节核激素受体例 如 PPAR 的药物的联用。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的联用 ： 免 疫球蛋白 (Ig) 或 Ig 制剂或拮抗剂或调节 Ig 功能的抗体例如抗 IgE( 例如奥马珠单抗 )。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与其它全身施用 或 局 部 施 用 的 抗 炎 药 物 例 如 沙 利 度 胺 (thalidomide) 或 其 衍 生 物、 类 视 黄 醇、 蒽三酚 (dithranol) 或卡泊三醇 (calcipotriol) 的联用。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的联用 ： 氨 基水杨酸盐和磺胺吡啶例如柳氮磺吡啶、 美沙拉嗪、 巴柳氮和奥沙拉秦 ； 和免疫调节药物例 如硫代嘌呤 (thiopurines) 和皮质甾族例如布地奈德。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的联用 ： 抗 菌药物， 如青霉素衍生物、 四环素、 大环内酯、 β- 内酰胺、 氟喹诺酮、 甲硝唑和吸入用氨基糖 苷类 ； 和抗病毒药， 包括阿昔洛韦、 泛昔洛韦、 伐昔洛韦、 更昔洛韦、 西多福韦 ； 金刚烷胺， 金 刚乙胺 ； 病毒唑 ； 扎那米韦 (zanamavir) 和特敏服 (oseltamavir) ； 蛋白酶抑制剂， 例如茚 地那韦、 奈非那韦、 利托那韦和沙奎那韦 ； 核苷逆转录酶抑制剂， 例如去羟肌苷、 拉夫米定、 司他夫定 (stavudine)、 扎西他滨或齐多夫定 ； 或非核苷逆转录酶抑制剂， 例如奈韦拉平(nevirapine) 或依法韦仑 (efavirenz)。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的联用 ： 心 血管药物， 例如钙通道阻断剂， β- 肾上腺素受体阻断剂， 血管紧张素 - 转化酶 (ACE) 抑制 剂， 血管紧张素 -2 受体拮抗剂 ； 降脂类药物， 例如抑制素或贝特类 (fibrae) ； 血细胞形态调 节剂， 例如配妥西菲林 ； 溶栓剂， 或抗凝血剂， 包括血小板聚集抑制剂。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的联用 ： CNS 药物， 例如抗抑郁药 ( 例如舍曲林 )， 抗帕金森氏病的药物 ( 例如丙炔苯丙胺、 左旋多 巴、 罗匹尼罗、 普拉克索， MAOB 抑制剂例如司兰吉兰 (selegine) 和雷沙吉兰， comP 抑制 剂例如托卡朋 (tasmar)， A-2 抑制剂， 多巴胺再摄取抑制剂， NMDA 拮抗剂， 烟碱激动剂， 多 巴胺激动剂或神经元一氧化氮合酶的抑制剂 (inhibitors of neuronal nitric oxide synthase))， 或抗阿尔茨海默药物例如多奈哌齐 (donepezil)、 利凡斯的明、 他克林， COX-2 抑制剂， 丙戊茶碱或美曲膦酯。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与治疗急性和慢性疼 痛的药物的联用， 如中枢和外周作用止痛剂 ( 例如阿片样物质或其衍生物 )， 卡马西平， 苯 妥英， 丙戊酸钠， 阿米替林 (amitryptiline) 或其它抗抑郁药， 扑热息痛或非甾族抗炎剂。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与胃肠外或局部施用 ( 包括吸入 ) 的局部麻醉剂例如利诺卡因 (lignocaine) 或其衍生物的联用。
本发明化合物或其可药用盐或其形式也可以与抗骨质疏松症药物包括激素药物 例如雷诺昔芬， 或双膦酸盐 (biphosphonate) 例如阿伦膦酸盐 (alendronate) 的联用。
本发明更进一步涉及本发明化合物或其可药用盐或其形式与下列药物的联用 ： (i) 类胰蛋白酶抑制剂 ； (ii) 血小板活化因子 (PAF) 拮抗剂 ； (iii) 白介素转换酶 (ICE) 抑 制剂 ； (iv)IMPDH 抑制剂 ； (v) 粘附分子抑制剂包括 VLA-4 拮抗剂 ； (vi) 组织蛋白酶 ； (vii) 激酶抑制剂， 包括酪氨酸激酶抑制剂 ( 例如 Btk， Itk， Jak3 或 MAP， 抑制剂的例子可以包括 吉非替尼 (Gefitinib) 或甲磺酸伊马替尼 )， 丝氨酸 / 苏氨酸激酶抑制剂 ( 例如， MAP 激酶 例如 p38、 JNK、 蛋白激酶 A、 B 和 C 或 IKK 的抑制剂 )， 或涉及细胞周期调节的激酶 ( 例如， 细 胞周期蛋白依赖性激酶 ) 的抑制剂 ； (viii) 葡萄糖 -6 磷酸脱氢酶抑制剂 ； (ix) 激肽 B1 或 激肽 B2 受体拮抗体 ； (x) 抗痛风剂， 例如， 秋水仙碱 ； (xi) 黄嘌呤氧化酶抑制剂， 例如， 别嘌 呤醇 ； (xii) 排尿酸剂， 例如丙磺舒或磺砒酮或苯溴马隆 ； (xiii) 生长激素促分泌剂 ； (xiv) 转化生长因子 (TGFβ) ； (xv) 血小板衍生生长因子 (PDGF) ； (xvi) 成纤维细胞生长因子， 例如基本成纤维细胞生长因子 (bFGF) ； (xvii) 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF) ； (xviii) 辣椒素油 (capsaicin cream) ； (xix) 速激肽 NK1 或 NK3 受体拮抗剂， 例如 NKP-608C、 SB-233412( 他奈坦 ) 或 D-4418 ； (xx) 弹性蛋白酶抑制剂， 例如 UT-77 或 ZD-0892 ； (xxi) TNF-α 转化酶抑制剂 (TACE) ； (xxii) 诱导的一氧化氮合成酶 (iNOS) 抑制剂 ； 或 (xxiii) TH2 细胞上表达的化学引诱物受体同源分子 ( 例如 CRTH2 拮抗剂 ) ； (xxiv)P38 的抑制剂 ； (xxv) 调节 Toll 样受体 (TLR) 功能的药物， 和 (xxvi) 调节嘌呤能受体活性的药物， 例如 P2X7 ； 或 (xxvii) 转录因子活化的抑制剂， 例如 NFkB、 API 或 STATS。
本发明化合物或其可药用盐或其形式还可以与治疗癌症的现有治疗剂联用， 例如 合适的治疗剂包括 ：
(i) 如用于医学肿瘤学的抗增殖 / 抗肿瘤药或其组合， 例如烷基化剂 ( 如顺铂、 卡铂、 环磷酰胺、 氮芥、 美法仓、 苯丁酸氮芥、 白消安或亚硝基脲 ) ； 抗代谢物 ( 例如抗叶酸剂， 如氟代嘧啶如 5- 氟尿嘧啶或替加氟、 雷替曲塞、 甲氨喋呤、 阿糖胞苷、 羟基脲、 吉西他滨或 紫杉醇 ； 抗肿瘤抗生素 ( 例如蒽环类抗生素， 如阿霉素、 博来霉素、 多柔比星、 柔红霉素、 表 柔比星、 伊达比星、 丝裂霉素 -C、 更生霉素或光辉霉素 ) ； 抗有丝分裂剂 ( 例如长春花属生 物碱类， 如长春新碱、 长春花碱、 长春地辛或长春瑞滨， 或紫杉烷类， 如紫杉醇或多西他赛 ) ； 或拓扑异构酶抑制剂 ( 例如表鬼臼毒素类， 如依托泊苷和替尼泊苷、 安沙可林、 拓扑替康或 喜树碱类 ) ；
(ii) 细胞生长抑制剂如抗雌激素药 ( 例如他莫昔芬、 托瑞米芬、 雷洛昔芬、 屈洛昔 芬或 iodoxyfene)、 雌激素受体负调节剂 ( 如氟维司群 )、 抗雄激素药 ( 例如比卡鲁胺、 氟他 胺、 尼鲁米特或醋酸环丙氯地孕酮 )、 LHRH 拮抗剂或 LHRH 激动剂 ( 例如戈舍瑞林、 亮丙瑞林 或布舍瑞林 )、 孕激素类 ( 如醋酸甲地孕酮 )、 芳香酶抑制剂 ( 例如阿纳托唑、 来曲唑、 伏氯 唑 (vorazole) 或依西美坦 ) 或 5α- 还原酶抑制剂如非那雄胺 ；
(iii) 抑制癌细胞入侵的药物 ( 例如金属蛋白酶抑制剂如马立马司他或尿激酶纤 维蛋白溶酶原激活剂受体功能的抑制剂 ) ；
(iv) 生 长 因 子 功 能 抑 制 剂， 例如诸如下述的抑制剂 ： 生长因子抗体 ( 例如 抗 -erbb2 抗体曲妥单抗或抗 -erbb1 抗体西妥昔单抗 [C225])、 法尼基转移酶抑制剂、 酪 氨酸激酶抑制剂或丝氨酸 / 苏氨酸激酶抑制剂， 表皮生长因子家族的抑制剂 ( 例如 EGFR 家族酪氨酸激酶抑制剂， 如 N-(3- 氯 -4- 氟苯基 )-7- 甲氧基 -6-(3- 吗啉代丙氧基 ) 喹唑 啉 -4- 胺 ( 吉非替尼， AZD1839)、 N-(3- 乙炔基苯基 )-6， 7- 二 (2- 甲氧基乙氧基 ) 喹唑 啉 -4- 胺 (erlotinib， OSI-774) 或 6- 丙烯酰基氨基 -N-(3- 氯 -4- 氟苯基 )-7-(3- 吗啉代 丙氧基 ) 喹唑啉 -4- 胺 (CI 1033))， 血小板衍生的生长因子家族的抑制剂或肝细胞生长因 子家族的抑制剂 ；
(v) 抗血管生成剂， 例如那些抑制血管内皮生长因子作用的药物， ( 例如抗 - 血 管 内 皮 生 长 因 子 抗 体 贝 伐 单 抗， 例 如 在 国 际 专 利 申 请 WO 97/22596、 WO 97/30035、 WO 97/32856 或 WO 98/13354 中公开的那些化合物 ) 或者以其它机制起作用的化合物 ( 例如利 诺胺、 整联蛋白 αvβ3 功能的抑制剂或血管生长抑素 ) ；
(vi) 脉管损坏剂如考布他汀 A4 或国际专利申请 WO 99/02166、 WO00/40529、 WO 00/41669、 WO 01/92224、 WO 02/04434 或 WO 02/08213 中公开的化合物 ；
(vii) 在反义治疗中使用的药物， 例如定向于上面列出靶点的那些物质如 ISIS 2503、 抗 -ras 反义物 ；
(viii) 基因治疗方法中使用的药物， 例如以下方法中使用的药物 ： 代替异常基因 如异常 p53 或异常 BRCA1 或 BRCA2 的方法、 GDEPT( 基因定向的酶前药治疗 ) 方法例如那些 使用胞嘧啶脱氨酶、 胸苷激酶或细菌硝基还原酶的方法和增加患者对化学治疗或放射治疗 耐受性的方法例如多元抗药性基因治疗 ； 或者
(ix) 用在以下免疫治疗方法中的药物， 包括例如在体外和体内增加患者肿瘤细胞 免疫原性的方法， 如用细胞因子如白介素 2、 白介素 4 或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子转 染、 减少 T- 细胞无反应性的方法、 使用转染的免疫细胞如转染了细胞因子的树突细胞的方 法、 使用细胞因子转染的肿瘤细胞系的方法和使用抗独特型抗体的方法。
具体地， 本发明的化合物可以与选自如下的第二活性成分联合给药 ：a)PDE4 抑制剂， 包括同工型 PDE4D 抑制剂 ；
b)β- 肾上腺素受体激动剂， 例如间羟异丙基肾上腺素、 异丙基去甲肾上腺素 (isoproterenol)、 异丙肾上腺素 (isoprenaline)、 沙丁胺醇、 柳丁氨醇、 福莫特罗、 沙美特 罗、 特布他林、 奥西那林、 甲磺酸比托特罗、 吡布特罗或茚达特罗 ；
c) 毒蕈碱受体拮抗体 ( 例如 M1、 M2 或 M3 拮抗剂， 例如选择性 M3 拮抗剂 )， 例如异 丙托溴铵、 噻托溴铵、 氧托溴铵、 哌仑西平或替仑西平 ；
d) 趋化因子受体功能调节剂 ( 例如 CCR1 或 CCR8 受体拮抗体 ) ；
e) 激酶功能抑制剂 ；
f) 非甾体类糖皮质激素受体激动剂 ；
g) 甾体类糖皮质激素受体激动剂 ； 以及
h) 蛋白酶抑制剂 ( 例如 MMP12 或 MMP9 抑制剂 ) ；
现在， 将参照以下说明性实施例进一步解释本发明。
一般方法
X- 射线粉末衍射 (XPRD)
在 使 用 镍 过 滤 的 CuK- 辐 射 (45kV， 40mA) 和 X ′ Celerator 检 测 器的 PANalytical X’ Pert PRO MPD θ-θ 系统上收集 X- 射线粉末衍射 (XRPD) 图。使用 提供 10mm 辐射长度的可程序控制的发散狭缝和可程序控制的防散射狭缝。在 2° 2θ 和 40° 2θ 之间以连续扫描模式收集衍射图。扫描速度为 4° /min， 增量为 0.016°。测量在 环境条件进行。 在平的硅零背景板 (flat silicon zero background plates) 上使用 Teflon 棒 制备薄的平样品。样品板安装在样品架 (sample holders) 中并且在测量期间在水平位置 中旋转。
使用安装在上述仪器上的 Anton Paar TTK450 热处理室 (temperaturechamber) 收集在高温时的 XRPD 图。使用提供 10mm 辐射长度的可程序控制的发散狭缝和可程序控制 的抗散射狭缝。衍射图在 2° 2θ 和 40° 2θ 之间以连续扫描模式收集。扫描速度为 6° / min， 增量为 0.016°。在标准实验中， 样品温度以 10℃的步幅增加， 并且一旦达到目标温度 立即收集 XRPD 图。以此方式， 对每一测试样品， 收集一系列 XRPD 图， 直到最终熔点。
X- 射线粉末衍射领域的技术人员明白的是， 峰的相对强度能够受例如以下因素影 响： 粒度大于约 30 微米的颗粒和非均一纵横比 (non-unitary aspectratios)， 其可以影响 样品的分析。而且， 应理解的是， 强度可以取决于实验条件和样品制备 ( 例如在样品中粒子 的优选取向 ) 而变动。自动或固定的发散狭缝的使用也将影响相对强度计算。当比较衍射 图时， 本领域技术人员能够处理该影响。
技术人员还将明白的是， 反射位置能够受样品在衍射仪中所处的精确高度和衍射 仪的校零影响。样品的表面平面性 (surface planarity) 也可以具有小影响。因此， 不应 将提供的衍射图数据视为绝对值。
量热法 (DSC)
使 用 标 准 方 法， 例 如 在G.W.H.et al(1996)， DifferentialScanningCalorimetry， Springer， Berlin 中 所 述 的 方 法， 使 用 TA Instruments Q2000Modulated Temperature Differential Scanning Calorimeter(MTDSC) 研究试验样品对升高温度的量热响应。测量在 15 和 300℃之间进行， 使用在 40 秒的间隔中 ±0.50℃ 的调幅和 5℃ / 分钟的升温速率 (ramp rate) 进行。将约 1 至 5mg 的实验样品置于在氮气 气氛下的具有盖子 ( 没有卷边 (crimping)) 的铝杯中。
公知的是， DSC 开始温度和峰值温度可以根据样品纯度和仪器参数 ( 尤其是温度 扫描速率 ) 而变化。本领域技术人员能够使用常规的优化 / 校准来设定差示扫描量热计的 仪器参数， 从而可收集与本申请提供的数据相当的数据。
重量分析 (TGA)
使用 Q500Thermal Gravimetric Analyser(TGA)(TA Instruments) 研究了实验样 品对升高温度的重量响应。在氮气流中加热样品， 加热速率为 10℃ /min。
将约 1 至 3mg 的实验样品置于杯中并加热至约 300℃。
湿度相互作用
使 用 TGA 5000(TA Instruments)Gravimetrical Vapour Sorption(GVS) 研 究 实验样品对湿度变化的重量响应。在两个循环中， 相对湿度 (RH) 以 5％的步幅升至 90％ RH 并降回至 0 ％ RH。保持每一 RH 水平， 直到达到平衡条件 ( 每 10 分钟的样品重量变化 ＜ 0.01wt％ )。测量通常在 25℃进行。将约 5mg 的实验样品放置在杯中并评价。将吸湿 性计算为在第二个循环期间在两个条件即 0％ RH 和 80％ RH 之间样品在重量方面的相对变 化。
在 Varian Inova 400MHz 或 Varian Mercury-VX 300MHz 波 谱 仪 上 记 录 1HNMR 和 13CNMR 波 谱。 使 用 氯 仿 -d(δH 7.27ppm)、 二 甲 亚 砜 -d6(δH 2.50ppm)、 乙 腈 -d3(δH 1.95ppm) 或甲醇 -d4(δH 3.31ppm) 的中央峰作为内标。使用硅胶 (0.040-0.063mM， Merck) 进行柱色谱分析。除非另有说明， 起始物料是可商购的。所有溶剂和商业试剂都是实验室 级的并且按原样使用。
使用以下方法进行 LC/MS 分析 ：
仪器 ： Agilent 1100 ； 柱： Waters Symmetry 2.1x30mM ； 质量 ： APCI ； 流速 ： 0.7ml/ 分钟 ； 波长 ： 254nM ； 溶剂 A ： 水 +0.1％ TFA ； 溶剂 B ： 乙腈 +0.1％ TFA ； 梯度 ： 历时 8 分钟从 15 至 95％ /B， 95％ B 保持 1 分钟。
在 Symmetry C18- 柱 (2.1x30mM， 粒 度 3.5) 上 进 行 分 析 性 色 谱 法， 用乙腈 / 水 /0.1％三氟乙酸作为流动相， 梯度为历时 8 分钟从 5％至 95％乙腈， 流速为 0.7ml/ 分钟。
实施例中所使用的缩写或术语具有以下含义 ：
THF ： 四氢呋喃
DCM ： 二氯甲烷
TFA ： 三氟乙酸
DMF ： N， N- 二甲基甲酰胺
EtOAc ： 乙酸乙酯
DMSO ： 二甲基亚砜
MTBE ： 叔丁基甲基醚
SM ： 起始物料
RT ： 室温
Eq ： 当量实施例 16-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺
在 65℃和在空气气氛下， 在 100mL 圆底烧瓶中， 在甲醇 (25mL) 和水 (2.5ml) 中搅 拌 6-(3， 3- 二乙氧基丙 -1- 炔基 )-5- 甲基 -3- 氧代 -4-(3-( 三氟甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢吡 嗪 -2- 羧酸甲酯 (SM2， 1.136g， 2.59mmol) 和 4- 肼基苯甲腈盐酸盐 (0.508g， 3.00mmol)。在 1 小时后， 使混合物冷却至 45℃， 加入水 (50ml)， 然后使混合物冷却至室温。 搅拌 30 分钟之 后， 过滤出固体， 用水 (100ml) 洗涤， 然后风干得到 6-(3-(2-(4- 氰基苯基 ) 肼叉 ) 丙 -1- 炔 基 )-5- 甲基 -3- 氧代 -4-(3-( 三氟甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (1.18g， 95％ )， 其为黄色固体。 1
H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ2.21(s， 3H)， 3.83(s， 3H)， 7.01(s， 1H)， 7.32(d， 2H)， 7.66(d， 2H)， 7.78-8.00(m， 4H)， 10.55(s， 1H)。 +
APCI-MS m/z ： [MH ＝ 480]， LC 显示具有 M+H ＝ 480 的 2 个峰 - 顺式和反式异构 体。
使 6-(3-(2-(4- 氰基苯基 ) 肼叉 ) 丙 -1- 炔基 )-5- 甲基 -3- 氧代 -4-(3-( 三氟 甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (1.713g， 3.57mmol) 与浓度为 7.0M 的于甲醇中 的氨 (35ml， 1624.56mmol) 混合， 分成两份并且每份在 Biotage Initiator 中在 20ml 微波 瓶 (microwave vial) 中于 120℃单独运行 20 分钟。在反应期间观察到 10 巴压强。将所述 两份反应混合物合并并且蒸发， 得到暗棕色残留物 (1.756g)， 将该残留物溶解在小体积的 MeCN 中， 装载到干燥二氧化硅柱 2.5( 长度 )x 7( 直径 )cm 上并在抽吸条件下用 0 ∶ 10 至 4 ∶ 6 的 MeCN( 乙腈 ) ： 叔丁基甲基醚洗脱。蒸发纯馏分， 得到棕色物质 (1.29g)， 将该棕色 物质溶解在温热的无水乙醇 (13ml) 中， 在 50℃搅拌半小时， 然后在室温搅拌过夜。过滤出 固体并干燥， 得到 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟 甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 (0.9699g， 58.5％ )。 1
H NMR(400MHz， CD3Cl)δ8.31(s， 1H)， 7.90(d， J ＝ 7.6Hz， 1H)， 7.83(m， 2H)， 7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.62(m， 4H)， 6.68(d， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 6.28(s， 1H)， 1.86(s， 3H)。 +
APCI-MS m/z ： 465.0[MH ]。
实施例 1a
6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺形式 A
在 氮 气 气 氛 中， 将 氨 溶 液 (1.12L， 浓 度 为 7M 于 MeOH 中， 10 当 量 ) 加 入 至 6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (377g) 和 MeOH(3.8L， 10 体积 ) 中。将所得悬浮液在环境温度搅 拌 36 小时。然后将混合物过滤， 用 MeOH(2x754ml) 洗涤并真空干燥。将粗物质溶解在 45℃ 的丙酮 (10.7L) 中， 并过滤以除去颗粒物。将滤液浓缩至约 3.8L 的体积。通过加入甲基异 丁基酮 (10L) 稀释所得的浆液， 并且通过蒸馏进一步除去 3.2L 溶剂。加入更多的甲基异丁 基酮 (7.8L) 以实现总共约 53 的相对体积 ( 相对于底物 )。 将所得浆液加热至 53-60℃并保 持在该温度范围内， 直到过程中测试 (in-processes testing)(DSC) 显示已经得到了希望 的多晶型物 ( 对于该具体批次， 62 小时 )。历时 4 小时将浆液冷却至 25℃， 然后在 20-25℃ 保持 36 小时。过滤收集产物， 并用甲基异丁基酮 (1.9L) 洗涤滤饼。在真空烘箱中于 55℃ 干燥滤饼， 直到达到恒定重量。在干燥后， 得到标题化合物 (310.8g， 87％ )， 其为浅黄色结 晶固体。 1
H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.31(s， 1H)， 7.90(d， J ＝ 7.6Hz， 1H)， 7.83(m， 2H)， 7.78(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.62(m， 4H)， 6.68(d， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 6.28(s， 1H)， 1.86(s， 3H)。 +
APCI-MS m/z ： 465.0[MH ]。
氧代 {[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 氨基 } 乙酸乙酯
将 3- 三氟甲基苯胺 (350g， 1 当量 )、 三乙胺 (351g， 1.6 当量 ) 和乙酸乙酯 (4.55L) 装入烧瓶中， 置于氮气气氛下并冷却至 0℃。滴加乙二酸单乙酯单酰氯 (356g， 1.2 当量 )， 同时保持反应温度为 5-10℃。使反应混合物升温至 16℃并在 16-19℃保持 2.5 小时。然 后用水 (2.33L) 淬灭反应。分离水层并用乙酸乙酯 (1.05L) 萃取。合并有机层， 并用 2M HCl(0.88L) ； 水 (0.88L) ； 饱和碳酸氢钠水溶液 (0.58L) ； 和水 (0.88L) 洗涤。将有机层浓 缩至干， 以得到标题化合物 (568.2g， 100％ )， 其为橙色 / 黄色固体。
H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ11.09(s， 1H)， 8.19(s， 1H)， 8.03(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.61(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.51(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 4.32(q， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 1.32(t， J＝ 7.0Hz， 3H)。
APCI-MS m/z ： 262.0[MH+]。
N-(2- 羟基丙基 )-N′ -[3-( 三氟甲基 )- 苯基 ] 乙二酰胺
1将乙醇 (1.27L) 和氧代 {[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 氨基 } 乙酸乙酯 (243.15g， 1当 量 ) 加热至回流。将在乙醇 (0.29L) 中的 1- 氨基 -2- 丙醇 (73.2g， 1.05 当量 ) 历时 1 小时 加入至反应混合物中。将反应混合物在回流温度再保持 3 小时， 然后冷却至 20-25℃。在旋 转蒸发器上除去溶剂并将所得的白色固体溶解在乙酸乙酯 (1.6L) 中。通过在大气压蒸馏 使溶液的体积减少 80％。然后加入庚烷 (1.29L)， 产物沉淀出来。将混合物再冷却至 0-5℃ 并在此温度保持 1 小时。过滤混合物并用庚烷 (0.24L) 洗涤滤饼。在真空烘箱中在 50℃干 燥潮湿产物， 持续 16 小时。分离出标题化合物 (227.88g， 84.3％ )， 其为白色结晶固体。 1
H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ10.99(bs， 1H)， 8.77(t， J ＝ 6.3Hz， 1H)， 8.29(s， 1H)， 8.11(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 7.60(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.49(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 4.91(d， J＝ 4.9Hz， 1H)， 3.78(p， J ＝ 5.7Hz， 1H)， 3.20-3.12(m， 2H)， 1.05(d， J ＝ 6.3Hz， 3H)。 +
APCI-MS m/z ： 273.1[MH -18]。
N-(2- 氧代丙基 )-N′ -[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 乙二酰胺
将乙腈 (3.06L) 和 N-(2- 羟基丙基 )-N ′ -[3-( 三氟甲基 )- 苯基 ] 乙二酰胺 (200g， 1 当量 ) 装入反应容器中， 得到白色浆液。将氯化钌水合物 (2.33g， 0.02 当量 ) 在水 (0.21L) 中的浆液装入反应器中。将溴酸纳 (114.4g， 1.1 当量 ) 溶解在水 (0.48L) 中并历 时 2 小时滴加至暗棕色溶液中， 同时保持反应温度在 20-25℃。然后使反应在 20-25℃再保 持 4 小时。将水 (3.4L) 加入至混合物中并过滤收集产物。将滤饼用水 (0.84L) 洗涤并在 65℃干燥。分离出标题化合物 (177.2g， 89.2％ )， 其为浅灰色蓬松固体。 1
H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ11.04(s， 1H)， 9.08(t， J ＝ 6.0Hz， 1H)， 8.29(s， 1H)， 8.12(d， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.61(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.50(d， J ＝ 7.9Hz， 1H)， 4.09(d， J＝ 6.0Hz， 2H)， 2.14(s， 3H)。
MS m/z ： 289[MH+]。
6- 甲基 -1-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-1， 4- 二氢吡嗪 -2， 3- 二酮
将 浓 硫 酸 (2.35L) 加 热 至 50-55 ℃， 然 后 历 时 2 小 时 逐 份 加 入 N-(2- 氧 代 丙 基 )-N′ -[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 乙二酰胺 (200g， 1 当量 ))， 得到澄清棕色溶液。在 3.25 小时之后， 将反应混合物冷却至 20 ℃。然后将反应混合物加入水 (6L) 中， 保持温度低于 10℃。然后， 将白色浆液在 0-5℃再搅拌 1 小时， 然后过滤。用水 (2L) 洗涤滤饼并将潮湿产 物重新装入烧瓶中。加入水 (0.85L) 并将混合物搅拌 30 分钟。过滤混合物并用水 (0.25L) 洗涤滤饼。分离标题化合物， 其为水湿性灰白色固体 (228.0g， 水含量＝ 26.5％， 校准质量
为 168.0g， 90％ )。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ11.24(bs， 1H)， 7.87-7.81(m， 2H)， 7.77(t， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.67(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 6.30(d， J ＝ 5.2Hz， 1H)， 1.61(d， J ＝ 1.1Hz， 3H)。 +
APCI-MS m/z ： 271.0[MH ]。
3- 溴 -6- 甲基 -1-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 吡嗪 -2(1H)- 酮
将 6- 甲基 -1-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-1， 4- 二氢吡嗪 -2， 3- 二酮 (289.34g@100％， 1 当量 ) 和甲苯 (3L) 装入烧瓶中并将浆液加热至回流。收集共沸的水 (53ml) 并将浆液冷 却至 25℃。然后将在减压下在＜ 50℃除去甲苯， 得到灰白色粉末状物。然后将该物质加入 至乙腈 (2.95L) 中并将反应混合物加热至 64-67℃。在单独的 2L 3 颈烧瓶中， 将三溴氧磷 (368.4g， 1.2 当量 ) 溶解在乙腈 (1.475L) 中。 然后历时 45 分钟在 64-67℃将 POBr3/ 乙腈溶 液加入至最初的烧瓶中。 然后将反应混合物在 64-67℃保持 4.5 小时， 之后冷却至 20-25℃。 历时 30 分钟加入于水 (10.3L) 中的饱和碳酸氢钠以淬灭反应。 然后将混合物在 20-25℃搅 拌 6 小时。接着过滤出固体并用水 (2x 0.55L) 洗涤滤饼， 以得到标题化合物， 其为水湿性 固体 (486.4g， 74.3％ @100％ )。
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ7.96(s， 1H)， 7.92(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.83(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.77(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.27(s， 1H)， 1.84(s， 3H)。 +
APCI-MS m/z ： 232.9 和 234.9[MH ]。
5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯
1将 3- 溴 -6- 甲基 -1-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 吡嗪 -2(1H)- 酮 (750g)、 二乙氧基 钯 (3g， 0.006 当量 )、 1， 3- 双 ( 二苯基膦 ) 丙烷 (6.6g， 0.007 当量 ) 和三乙胺 (600ml) 溶 解在甲醇 (3.15L) 中。将反应混合物用一氧化碳 (10 巴 ) 脱气， 加热至 65℃并在此温度保 持 12 小时。将反应混合物浓缩至其体积的三分之二并冷却至 0℃。将产物过滤， 用甲醇和 乙醚 (1L) 洗涤三次。将标题化合物在水 (2L) 中浆化， 过滤并真空干燥， 得到 590g(85％ )。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ7.97(s， 1H)， 7.92(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.83(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.77(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.52(s， 1H)， 3.80(s， 3H)， 1.94(s， 3H)。 +
APCI-MS m/z ： 313.0[MH ]。
6- 溴 -5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯
将 5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二 氢 吡 嗪 -2- 甲 酸 甲 酯 (400g， 1 当量 ) 溶解在 DMF( 二甲基甲酰胺， 3L) 中并在 17-20℃搅拌。将 N- 溴琥珀酰亚胺 (229.3g， 1 当量 ) 溶解在 DMF(1L) 中， 并历时 1 小时加入至酯溶液中。在加入后， 将反应混 合物在 17-20℃搅拌 10 小时。一边搅拌， 一边将反应混合物加入至水 (15L) 中。将所得的 浆液在 20-25℃搅拌过夜。过滤收集标题化合物。滤饼用水 (1L) 和庚烷 (1L) 洗涤， 然后在 40℃干燥至恒重， 得到 456g(91％ )。 1
H NMR(299.947MHz， DMSO-d6)δ7.94(d， J ＝ 6.9Hz， 2H)， 7.86(t， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.76(d， J ＝ 7.9Hz， 1H)， 3.83(s， 3H)， 2.11(s， 3H)。
4-(1H- 吡唑 -1- 基 )- 苯甲腈
将在 DMF(1110ml) 中的 4- 氟苯甲腈 (204.2g)、 吡唑 (138.6g， 1.22 当量 ) 和碳酸 钾 (281.5g， 1.22 当量 ) 在 120℃加热 7 小时。将悬浮液冷却至 25℃并加入水 (2920ml)。 用 MTBE(3x1460ml) 萃取反应混合物并用水 (3x1460ml) 和饱和氯化钠水溶液 (1460ml) 洗 涤合并的萃取液。在大气压条件下浓缩有机相， 直到锅温 (pot temperature) 升至 65℃。 在 60-65℃历时 30 分钟加入庚烷 (1700ml)， 然后再收集 300ml 馏出物。将溶液在 60-65℃ 搅拌 15 分钟， 然后冷却至＜ 5℃。 过滤浆液并用庚烷 (2x200ml) 洗涤， 在真空条件下干燥至 恒定重量， 得到标题化合物， 其为固体 (245.3g， 87％ )。 1
H NMR(400MHz， CDCl3)δ ： 6.51(q， 1H)， 7.71(d， 2H)， 7.75(d， 1H)， 7.81(d， 2H)， 7.98(d， 1H)。
4-[5-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -[1， 3， 2] 二氧杂硼杂环戊烷 -2- 基 )- 吡唑 -1- 基 ]- 苯 甲腈
将 2， 2， 6， 6- 四甲基哌啶 (623.4ml， 1.25 当量 ) 和 THF(2.5L) 加入至烧瓶中并 冷却至 -20±2 ℃。历时 140 分钟加入己基锂 (2.3M， 1.542L， 1.2 当量 )， 同时维持内温 在 -20±2℃。在加入结束后， 将反应混合物在 -20±2℃搅拌 30 分钟。然后将混合物冷却 至 -50±2℃， 然后历时 143 分钟缓慢加入苯甲腈 (325ml) 于 THF(2.4L) 中的溶液， 同时保持 温度在 -50±2℃。在加入结束后， 将混合物在 -50±2℃搅拌 2.5 小时。将异丙醇频哪醇硼 酸酯 (2- 异丙氧基 -4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂环戊烷 )(753.4ml， 1.25 当量 ) 历 时 66 分钟加入至反应混合物中， 同时保持温度在 -50±2℃， 然后进行 THF(0.3L) 的线性洗
涤 (line-wash)。在加入结束后， 将混合物搅拌 45 分钟。然后使混合物温热至 -15℃。历 时 45 分钟加入乙酸 (0.51L， 1 当量 )， 同时保持温度＜ 0℃。然后在 0 至 -5℃将混合物搅拌 30 分钟。接着历时 1.5 小时加入水 (1.5L)， 同时保持温度在 0 和 -5℃之间， 接着又历时 1 小时加入水 (4.5L)。在水加入结束后， 将混合物在 0 和 -5℃之间搅拌 30 分钟。过滤固体， 用冷水 (1000ml) 洗涤四次， 然后在真空烘箱中于 40℃干燥至恒重， 得到 4-[5-(4， 4， 5， 5- 四 甲基 -[1， 3， 2] 二氧杂硼杂环戊烷 -2- 基 )- 吡唑 -1- 基 ]- 苯甲腈 (566g， 64％ )。 1
H NMR(300MHz， CDCl3) ： 1.30(s， 12H)， 6.97(d， 1H)， 7.73(m， 5H)。
6-[1-(4- 氰基苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯
在 惰 性 气 氛 中，将 4-[5-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -[1， 3， 2] 二 氧 杂 硼 杂 环 戊 烷 -2- 基 )- 吡唑 -1- 基 ]- 苯甲腈 (503g， 1.536 当量 )、 6- 溴 -5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟 甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯、 乙酸钠 (273.1g， 3 当量 )、 二氯化 1， 1- 二 ( 二叔 丁基膦 ) 二茂铁钯 (dichloro 1， 1-bis(di-tert-butylphosphino)ferrocenepalladium) (36.1g， 0.05 当量 ) 和 DMF(4.35L) 装入反应容器， 并加热至 50 ℃。一旦达到温度， 加入 水 (20ml， 1 当量 )， 并将混合物搅拌 9 小时。使反应混合物冷却至 20-25℃， 然后历时 2 小 时加入至水 (21.8L)。将混合物在 20-25℃搅拌 30 分钟， 然后过滤分离产物。将滤饼用水 (2x4.3L) 和叔丁基甲基醚 (2x4.3L) 洗涤， 然后在真空条件下于 20-25℃干燥过夜， 得到粗 制标题化合物 (493g)。
通过如下方式对粗制产物 (493g) 进行进一步纯化 ： 将所述粗制产物溶解在乙腈 (9.7L) 中并经过两个 CUNO 过滤器 (CUNO filters)。用乙腈 (2x5L) 洗涤过滤器。将合并
的有机相用 (
111 净化剂 (98.6g) 处理， 在 50℃搅拌 10 小时， 然后过滤通过硅胶230-400 目， 2.46Kg)。再用乙腈 (2x4.9L) 洗涤所述硅胶。将合并的乙腈溶液浓缩至约 2.5L。加入叔丁基甲基醚 (5L)， 然后通过蒸馏除去。 将该过程重复两次。过滤所得的浆液， 并用叔丁基甲基醚 (1L) 洗涤产物， 得到纯的标题化 合物 (398.5g， 73％ )。 1
H NMR(300MHz， CDCl3)δ7.82-7.80(m， 2H)， 7.75-7.70(m， 3H)， 7.58-7.53(m， 2H)， 7.44(s， 1H)， 7.34(d， J ＝ 7.9Hz， 1H)， 6.63(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 3.92(s， 3H)， 1.82(s， 3H)。
实施例 2
6-[1-(4- 氯苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺
根据 Cristau et al.， Eur.J Org.Chem.2004， 4， 695-709 的操作由 1- 溴 -4- 氯苯 和吡唑制备 1-(4- 氯苯基 )-1H- 吡唑。
1H NMR(400MHz， DMSO-d6)8.53(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.88(d， J ＝ 9.6Hz， 2H)，7.76(d， J ＝ 2.1Hz， 1H)， 7.55(d， J ＝ 9.2Hz， 2H)， 6.56(t， J ＝ 2.1Hz， 1H)ppm。 +
APCI-MS m/z 179.1( 主要碎片 )[MH ]。
在干燥烧瓶中， 在氩气气氛中和在 -76℃， 将在无水 THF(10ml) 中的 2， 2， 6， 6- 四 甲基哌啶 (0.30ml， 1.8mmol) 用浓度为 1.6M 的正丁基锂的己烷溶液 (1.1ml， 1.8mmol) 处 理 2 分钟。在 -76 ℃搅拌 5 分钟之后， 历时 4 分钟加入 1-(4- 氯苯基 )-1H- 吡唑 (0.21g， 1.1mmol) 于无水 THF(2ml) 中的溶液。在 -76℃搅拌 20 分钟之后， 一次性加入三丁基氯化 锡 (0.30ml， 1.11mmol)。 将所得的混合物在 -76℃搅拌 10 分钟并且在环境温度搅拌 5 分钟， 然后通过加入甲醇 (1ml) 淬灭。通过旋转蒸发浓缩混合物， 将残留物吸收在水 (20ml) 中并 用乙酸乙酯 (20ml) 洗涤。分离有机相， 用盐水 (10ml) 洗涤， 经无水硫酸钠干燥， 过滤并通 过旋转蒸发浓缩。通过快速色谱法在硅胶上用乙酸乙酯 / 正庚烷 (1 ∶ 7) 作为洗脱剂纯化 粗制产物， 得到 1-(4- 氯苯基 )-5- 三丁基甲锡烷基 -1H- 吡唑 (0.20g， 40％ )， 其为无色油 状物。
1H NMR(300MHz， DMSO-d6)7.77(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 7.62(d， J ＝ 8.7Hz， 2H)，7.42(d， J ＝ 8.7Hz， 2H)， 6.54(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 1.40-1.10(m′ s， 12H)， 0.97-0.85(m， 6H)， 0.79(t， J ＝ 7.2Hz， 9H)ppm。
APCI-MS m/z 469.1( 主要碎片 )[MH+]。
在 微 波 反 应 器 (Biotage) 中， 在 130 ℃， 将 小 瓶 中 的 6- 碘 -5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二 氢 吡 嗪 -2- 甲 酸 甲 酯 (SM1， 0.133g， 0.304mmol)、 1-(4- 氯苯基 )-5- 三丁基甲锡烷基 -1H- 吡唑 (0.16g， 0.33mmol)、 双 ( 三苯基膦 ) 氯化钯 (II)(0.011g， 0.015mmol) 和无水 THF(1.5ml) 连续加热三次 ( 总共 55 分钟 )， 直到大多数的 碘代 SM 已消耗掉。 将所得黑色溶液与硅胶一起浓缩至干并施加至硅胶柱上。 进行快速色谱 法 ( 用乙酸乙酯 / 正庚烷 (1 ∶ 4 至 2 ∶ 1))， 得到 6-[2-(4- 氯苯基 ) 吡唑 -3- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (0.0915g， 62％ )， 其 为灰白色固体。
1H NMR(400MHz， CD3CN) 7.88(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.80(t， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.76(d，J ＝ 2.1Hz， 1H)， 7.66(br s， 1H)， 7.58(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.44(m， 4H)， 6.61(d， J ＝ 2.1Hz， 1H)， 3.81(s， 3H)， 1.83(s， 3H)ppm。
APCI-MS m/z 489.0( 主要碎片 )[MH+]。将 6-[1-(4- 氯 苯 基 )- 吡 唑 -5- 基 ]-5- 甲 基 -3- 氧 代 -4-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (0.0915g， 0.187mmol) 溶解在浓度为 7M 的氨的甲醇溶液 (4.0ml， 28mmol) 中并在微波反应器 (Biotage) 中于 60℃加热 7 分钟。 通过旋转蒸发浓缩紫 色溶液。通过半制备反相 -HPLC(Kromasil C18 柱 ) 用乙腈 - 水 (60 至 97％ MeCN) 作为洗 脱剂纯化粗制产物， 得到 6-[1-(4- 氯苯基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三 氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺 (0.0636g， 72％ )， 其为浅黄色固体。1
H NMR(400MHz， CD3CN)8.33(br s， 1H)， 7.89(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.81(t， J＝8.0Hz， 1H)， 7.78(d， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 7.64(br s， 1H)， 7.56(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.43(br s， 4H)， 6.63(d， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 6.28(br s， 1H)， 1.82(s， 3H)ppm。 +
APCI-MS m/z 473.9( 主要碎片 )[MH ]。
实施例 3
6-[1-(5- 氯吡啶 -2- 基 )-1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺
使用与对实施例 1 所述的路线相似的路线合成标题化合物。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.47(d， J ＝ 2.5Hz， 1H)， 8.25(bs， 1H)， 8.09(dd， J＝ 8.1/2.5Hz， 1H)， 7.99-7.79(m， 7H)， 7.72(bs， 1H)， 6.73(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 1.85(s， 3H)。 +
APCI-MS m/z ： 475.0[MH ]。
实施例 4
6-[1-(4- 氰基苯基 )-3- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 ]-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟 甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺
使用与对实施例 1 所述的路线相似的路线合成标题化合物。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.07(bs， 1H)， 7.96-7.83(m， 5H)， 7.77(d， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.69(bs， 1H)， 7.62(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 6.57(s， 1H)， 2.33(s， 3H)， 1.85(s， 3H)。 +
APCI-MS m/z ： 479.1[MH ]。
实施例 5
4-(3- 氰 基 苯 基 )-6-[1-(4- 氰 基 苯 基 )-1H- 吡 唑 -5- 基 ]-N- 环 丙 基 -5- 甲 基 -3- 氧代 -3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺
使用与对实施例 2 所述的路线相似的路线合成标题化合物。 1
H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ0.42(dt， 2H)， 0.68(td， 1H)， 1.90(s， 2H)， 2.76( 五 重 峰， 1H)， 3.32(s， 3H)， 6.75(d， 1H)， 7.65(dt， 2H)， 7.77-7.93(m， 4H)， 8.02(d， 1H)， 8.06(dt， 1H)， 8.65(d， 1H)。
APCI-MS m/z ： 462.1[MH+]。
实施例 6
6-(1-(4- 氰基苯基 )-4， 4- 二甲基 -4， 5- 二氢 -1H- 咪唑 -2- 基 )-5- 甲基 -3- 氧 代 -4-(3-( 三氟甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酰胺
在微波反应器 (Biotage) 中， 将 4- 氟苯甲腈 (7.0g， 58mmol) 和 2- 甲基丙烷 -1， 2- 二胺 (14g， 160mmol) 分两批在密封小瓶中于 180℃加热 25 分钟。将每一批次溶解在甲 醇 (50ml) 中， 然后与硅胶一起浓缩至干。用纯净乙腈和 2％三乙胺的乙腈溶液作为洗脱剂 对每一批次进行硅胶快速色谱法， 得到 4-(2- 氨基 -2- 甲基丙基氨基 ) 苯甲腈 (9.58g， 88％ 合并收率 )， 其为白色固体。
1H NMR(400MHz， DMSO-d6)7.41(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 6.71(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)，6.49(t， J ＝ 6.0Hz， 1H)， 2.93(d， J ＝ 6.0Hz， 2H)， 1.04(s， 6H)ppm。 +
APCI-MS m/z 190.0[MH ]。
在装配有内圆筒形玻璃容器 (internal cylindrical glass vessel) 和磁力搅拌 器的不锈钢弹管 (bomb tube)(Parr) 中， 将 6- 碘 -5- 甲基 -3- 氧代 -4-(3-( 三氟甲基 ) 苯 基 )-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (SM1， 1447mg， 3.3mmol)、 4-(2- 氨基 -2- 甲基丙基氨基 ) 苯甲腈 (750mg， 4.0mmol)、 三乙胺 (3.2ml， 23mmol) 和乙腈 (35ml) 混合。将混合物用氩气 吹洗 10 分钟。在加入双 ( 三丁基膦 ) 钯 (120mg， 0.23mmol) 之后， 将弹管密封， 排空并用 一氧化碳回填， 连续进行五次。将弹管内容物在一氧化碳 (6.5 巴 ) 下和在 50℃搅拌 9 小 时。LC-MS 显示约 50％转化成所需产物和未反应的 SM。将暗红棕色溶液浓缩至干， 溶解在 乙酸乙酯 (200ml) 中， 用水 (2x50ml) 洗涤， 用无水硫酸钠干燥， 过滤并与硅胶一起浓缩至干。在硅胶上用乙酸乙酯 / 正庚烷 (1 ∶ 3 和 1 ∶ 1) 作为洗脱剂进行的快速色谱法得到 6-(1-(4- 氰基苯基氨基 )-2- 甲基丙烷 -2- 基氨基 )-5- 甲基 -3- 氧代 -4-(3-( 三氟甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (0.38g， 22％ )， 其为黄色固体。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ.7.93(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.92(br s， 1H)， 7.85(t， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.75(br s， 1H)， 7.74(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.42(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 6.76(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 6.67(t， J ＝ 6.4Hz， 1H)， 3.82(s， 3H)， 3.48(d， J ＝ 6.4Hz， 2H)， 2.36(s， 3H)， 1.41(s， 6H)ppm。
APCI-MS m/z 528.0( 主要碎片 )[MH+]。
在氩气气氛中和在 60℃， 将五氧化二磷 (0.81g， 5.7mmol) 一次性地加入至搅拌的 6-(1-(4- 氰基苯基氨基 )-2- 甲基 ( 丙烷 -2- 基 ) 氨基甲酰基 )-5- 甲基 -3- 氧代 -4-(3-( 三 氟甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (0.50g， 0.95mmol) 和无水乙腈 (10ml) 的溶液 中。1.5 小时后， 将反应混合物冷却至环境温度并倒入搅拌的乙酸乙酯 (50ml)、 饱和碳酸氢 钠 (30ml) 和水 (10ml) 的混合物中。分离有机相， 水相用乙酸乙酯 (3x50ml) 重复洗涤。合 并有机相， 用盐水 (1x40ml) 洗涤， 经无水硫酸钠干燥， 过滤并浓缩至干， 得到浅褐色玻璃体 状物 (0.633g)。 通过制备 HPLC(Xbridge 柱 ) 纯化 ( 使用 40 至 95％乙腈的水溶液作为洗脱 剂 )， 得到 6-(1-(4- 氰基苯基 )-4， 4- 二甲基 -4， 5- 二氢 -1H- 咪唑 -2- 基 )-5- 甲基 -3- 氧 代 -4-(3-( 三氟甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (0.259g， 54％ )， 其为米色固体。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ.8.06(br s， 1H)， 8.02(br s， 1H)， 7.96(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.87(t， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.82(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.69(br s， 1H)， 7.61(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 6.96(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 3.836(d， JAB ＝ 9.6Hz， 1H)， 3.782(d， JBA ＝ 9.6Hz， 1H)， 2.10(s， 3H)， 1.33(s， 3H)， 1.31(s， 3H)ppm。
APCI-MS m/z 510.0( 主要碎片 )[MH+]。
在密封玻璃管中， 在 60℃， 将于甲醇 (5ml) 中的 6-(1-(4- 氰基苯基 )-4， 4- 二甲 基 -4， 5- 二氢 -1H- 咪唑 -2- 基 )-5- 甲基 -3- 氧代 -4-(3-( 三氟甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢 吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (0.26g， 0.51mmol) 和浓度为 7.0M 的氨的甲醇溶液 (14ml， 98mmol) 搅拌 60 分钟并且在室温搅拌 45 分钟。通过旋转蒸发浓缩溶液， 得到粗制产物， 其为暗红色膜状 TM 物 (dark-red film)。通过制备反相 -HPLC(Xterra 柱 ) 用乙腈 - 水 ( 添加了氨 ) 作为洗 脱剂进行纯化， 得到黄色固体 (0.156g)。将产物与无水乙醇 (2.8ml) 在密封小瓶中于 60℃ 搅拌 3.5 小时， 于 40℃搅拌过夜， 并且在室温搅拌过夜。过滤出固体产物， 用小体积的无水 乙醇洗涤， 并在 65℃和 0.1mmHg 干燥过夜， 得到 6-(1-(4- 氰基苯基 )-4， 4- 二甲基 -4， 5- 二 氢 -1H- 咪唑 -2- 基 )-5- 甲基 -3- 氧代 -4-(3-( 三氟甲基 ) 苯基 )-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲 酰胺 (0.116g， 48％ )， 其为浅黄色固体。HPLC- 纯度 ： 99-100％。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ.8.03(br s， 1H)， 8.02(br s， 1H)， 7.96(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.87(t， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.82(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.69(br s， 1H)， 7.61(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 6.96(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 3.847(d， JAB ＝ 9.6Hz， 1H)， 3.795(d， JBA ＝ 9.6Hz， 1H)， 2.10(s， 3H)， 1.33(s， 3H)， 1.31(s， 3H)ppm。
1APCI-MS m/z 495.1( 主要碎片 )[MH+]。 起始物料 SM1 6- 碘 -5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯将 3- 三氟甲基苯胺 (5.0g， 31mmol) 和三乙胺 (3.54g， 35mmol) 溶解在 DCM(60ml， 无水 ) 中。将混合物在冰上冷却并且向搅拌的该溶液中滴加乙二酸单乙酯单酰氯 (4.36g， 32mmol) 于 DCM(15ml) 中的溶液。在加入结束后， 将反应混合物放置 10 分钟。将反应混合 物用水 (50ml) 洗涤， 然后用盐水 (30ml) 洗涤， 并且有机相用 Na2SO4 干燥。过滤并蒸发得到 氧代 {[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 氨基 } 乙酸乙酯 (8.04g， 99％ )， 其为白色固体。 1
H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ11.09(s， 1H)， 8.19(s， 1H)， 8.03(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.61(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.51(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 4.32(q， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 1.32(t， J＝ 7.0Hz， 3H) ；
APCI-MS m/z ： 262.0[MH+]。
将氧代 {[3-( 三氟甲基 )- 苯基 ] 氨基 } 乙酸乙酯 (8.04g， 30.7mmol) 溶解在乙醇 (50ml， 99.5 ％ ) 中。向搅拌的该溶液中一次性加入 1- 氨基 -2- 丙醇 ( 外消旋物， 2.32g， 31mmol)， 将混合物加热至回流并保持 90 分钟。使混合物冷却并蒸干， 得到 N-(2- 羟基丙 基 )-N′ -[3-( 三氟甲基 )- 苯基 ] 乙二酰胺 (8.80g， 99％ )， 其为白色固体。 1
H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ10.99(bs， 1H)， 8.77(t， J ＝ 6.3Hz， 1H)， 8.29(s， 1H)， 8.11(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 7.60(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.49(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 4.91(d， J＝ 4.9Hz， 1H)， 3.78(p， J ＝ 5.7Hz， 1H)， 3.20-3.12(m， 2H)， 1.05(d， J ＝ 6.3Hz， 3H) ； +
APCI-MS m/z ： 273.1[MH -18]。
将 N-(2- 羟基丙基 )-N ′ -[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]- 乙二酰胺 (2.2g， 7.58mmol) 溶解在 CH3CN(50ml) 和水 (7ml) 中。向搅拌的该溶液中加入 NaBrO3(1.15g， 7.58mmol) 和 RuCl3xH2O 的乙腈 (3ml) 溶液。将混合物搅拌 1 小时， 通过 LC-MS 和 TLC 监测反应。将有机 溶剂真空除去， 并使残留物在 DCM(200ml) 和水 (200ml) 之间分配。用 Na2SO4 干燥有机相， 过滤和蒸发后得到 N-(2- 氧代丙基 )-N′ -[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 乙二酰胺 (2.0g， 91％ )， 其为灰 - 白色固体。 1
H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ11.04(s， 1H)， 9.08(t， J ＝ 6.0Hz， 1H)， 8.29(s， 1H)， 8.12(d， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.61(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.50(d， J ＝ 7.9Hz， 1H)， 4.09(d， J＝ 6.0Hz， 2H)， 2.14(s， 3H)。
将 N-(2- 氧代丙基 )-N′ -[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 乙二酰胺 (1.6g， 5.5mmol) 和冰 乙酸 (15ml) 置于小瓶 (20ml) 中。向该溶液中加入浓硫酸 (40 滴 )， 将烧瓶密封并且在搅拌 下加热至 100℃， 保持 90 分钟。加入另外 40 滴硫酸， 并使反应再进行 90 分钟。使反应混 合物冷却并且真空除去乙酸。使残留物在 EtOAc(60ml) 和水 (40ml) 之间分配。通过加入 NaOH 溶液将水相中和至 pH6 至 7。干燥有机相， 过滤和蒸发后得到粗制产物， 在硅胶上纯化 所述粗制产物， 得到 6- 甲基 -1-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-1， 4- 二氢吡嗪 -2， 3- 二酮 (1.1g， 74％ )， 其为浅黄色固体。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ11.24(bs， 1H)， 7.87-7.81(m， 2H)， 7.77(t， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.67(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 6.30(d， J ＝ 5.2Hz， 1H)， 1.61(d， J ＝ 1.1Hz， 3H) ； +
APCI-MS m/z ： 271.0[MH ]。
将 6- 甲 基 -1-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ]-1， 4- 二 氢 吡 嗪 -2， 3- 二 酮 (0.52g， 1.92mmol) 和 1， 2- 二氯乙烷 (10ml) 置于小瓶 (20ml) 中。向所得的悬浮液小心地加入乙 二酰溴 (0.53ml， 1.24g， 5.75mmol)。在加入过程中形成泡沫， 并且当泡沫消退时开始搅拌。加入 DMF(3 滴 )， 将瓶密封并将混合物搅拌过夜。加入另一份乙二酰溴 (0.2ml， 0.46g， 2.23mmol) 和 DMF(3 滴 )， 并使反应再进行 24 小时。使混合物在 DCM(20ml) 和水 (20ml) 之 间分配并干燥有机相。 过滤并蒸发得到粗制产物， 在硅胶上纯化粗制产物， 得到 3- 溴 -6- 甲 基 -1-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ] 吡嗪 -2(1H)- 酮 (0.59g， 93％ )。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ7.96(s， 1H)， 7.92(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.83(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.77(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.27(s， 1H)， 1.84(s， 3H) ； +
APCI-MS m/z ： 232.9 和 234.9[MH ]。
向具有 CO- 气体入口的高压钢反应器 (Parr) 中装入 3- 溴 -6- 甲基 -1-[3-( 三 氟 甲 基 ) 苯 基 ] 吡 嗪 -2(1H)- 酮 (0.25g， 0.75mmol)、 Pd(OAc)2(0.015g， 0.067mmol)、 PPh3(0.030g， 0.11mmol) 和甲醇 (25ml)。 向该混合物中加入三乙胺 (0.5ml， 0.36g， 3.6mmol) 和磁力搅拌子 (magnetic stirrer bar)。向反应器中通入 CO， 并且向该体系施加 6 个大气 压的 CO- 压力。 将反应器在搅拌下加热至 90℃， 并且将混合物剧烈搅拌， 使反应进行 4 个小 时。真空除去挥发物， 并且在硅胶上纯化粗制产物， 得到 5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲 基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (0.11g， 47％ )， 其为固体。 1
H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ7.97(s， 1H)， 7.92(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.83(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.77(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.52(s， 1H)， 3.80(s， 3H)， 1.94(s， 3H) ； +
APCI-MS m/z ： 313.0[MH ]。
将 5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (1.5g， 4.8mmol)、 无水 DCM(7.0ml)、 三氟乙酸 (3.0ml) 和 N- 碘代琥珀酰亚胺 (1.0g， 4.5mmol) 混合 并在室温避光 ( 烧瓶覆盖有铝箔 ) 搅拌。5 小时后， 加入水 (5ml)， 通过旋转蒸发浓缩混合 物。再次加入水 (3ml)， 并如上所述浓缩混合物。将所得的混合物用乙腈稀释至总体积为 50ml。通过制备 HPLC 进行纯化 ( 乙腈 - 水作为洗脱剂 ( 中性洗脱剂 ))， 得到 6- 碘 -5- 甲 基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯 (0.905g， 46％ )， 其为 黄色结晶固体。
1H NMR(400MHz， DMSO-d6)7.93(br s， 1H)， 7.92(d， J ＝ 7.6Hz， 1H)， 7.84(t， J＝7.6Hz， 1H)， 7.75(d， J ＝ 7.6Hz， 1H)， 3.82(s， 3H)， 2.14(s， 3H)。 +
APCI-MS m/z 438.8(MH )。
起始物料 SM2
6-(3， 3- 二乙氧基丙 -1- 炔基 )-5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸甲酯
搅拌 6- 碘 -5- 甲基 -3- 氧代 -4-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-3， 4- 二氢吡嗪 -2- 甲酸 甲酯 (SM1， 1.2g， 2.8mmol)、 烯丙基氯化钯 (II) 二聚体 (0.0072g)、 于己烷 (2.1ml) 中的 10 重量％三 ( 叔丁基 ) 膦和无水 DMF(3.0ml)， 直到获得澄清溶液。加入于无水 DMF(2.3ml) 中的丙炔醛缩二乙醇 (0.44ml， 3.1mmol)， 接着分小份加入 1， 4- 二氮杂二环 [2.2.2] 辛烷 (0.63g， 5.6mmol)。将所得红色溶液用干燥氩气吹洗 5 分钟， 然后在氩气气氛中于室温搅 拌。在 4 小时后， 使用油泵蒸发溶剂。将残留物吸收在乙腈 (10ml) 中， 过滤通过玻璃棉， 然后与硅胶一起浓缩。进行硅胶色谱法 ( 用乙酸乙酯 - 庚烷 (1 ∶ 10 和 1 ∶ 2) 作为洗脱 剂 )， 得到标题化合物 (0.46g， 37％ )， 其为黄色油状物。
1H NMR(400MHz， CD2Cl2) 7.84(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.77(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.49(brs， 1H)， 7.43(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 5.47(s， 1H)， 3.92(s， 3H)， 3.80-3.71(m， 2H)， 3.68-3.58(m， 2H)， 2.20(s， 3H)， 1.23(t， J ＝ 7.2Hz， 6H)。 +
APCI-MS m/z 439(MH )， 393(M-45)。
人嗜中性白细胞弹性蛋白酶淬灭的 -FRET 试验
该 试 验 使 用 从 血 清 中 纯 化 的 人 嗜 中 性 白 细 胞 弹 性 蛋 白 酶 (HNE， Calbiochem art.324681 ； Ref.Baugh， R.J. 等人， 1976， Biochemistry.15， 836-841)。在 -20 ℃， 将 HNE 贮存在 50mM 乙酸钠 (NaOAc)、 200mM 氯化钠 (NaCl) 中， 其 pH5.5， 添加有 30％甘油。所使用 MeOSuc-AAPV-AMC(Calbiochem art.324740 ； Ref. 的蛋白酶底物是荧光弹性蛋白酶底物 V ： Castillo， M.J. 等人， 1979， Anal.Biochem.99， 53-64)。在 -20℃， 将所得底物贮存在二甲 基亚砜 (DMSO) 中。测定添加物如下所述 ： 向黑色的 96 孔平底板 (Greiner 655076) 中加入 试验化合物和对照物 (1μL 于 100％ DMSO 中 )， 随后加入于测定缓冲液中的 30μLHNE( 含 有 0.01％ Triton( 商标 )X-100 清洁剂 )。测定缓冲液的组成 ： 100mM 三 ( 羟甲基 ) 氨基甲 烷 (TRIS， pH 7.5) 以及 500mM NaCl。将酶和化合物在室温培养 15 分钟。然后加入于测定 缓冲液中的 30μL 底物。将测定混合物在室温培养 30 分钟。培养期间， HNE 酶和底物的浓 度分别为 1.7nM 和 100μM。然后通过加入 60μL 终止液 (140mM 乙酸， 200mM 单氯乙酸钠， 60mM 醋酸钠， pH 4.3) 使测定终止。在 Wallac 1420 Victor 2 仪器上测量荧光， 该仪器的 设置为 ： 激发为 380nM， 发射为 460nM。使用模型 205， 利用 Xlfit 曲线拟合法 (Xlfit curve fitting) 确定 IC50 值。
当在上述筛选中测试时， 对于抑制人嗜中性白细胞弹性蛋白酶活性， 实施例化合 物的 IC50 值小于 30μM( 微摩尔浓度 )， 这表明本发明化合物如所预期那样具有有用的治疗 性质。下表中显示了样品结果 ：
对人嗜中性白细胞弹性蛋白酶的抑制 化合物 IC50( 纳摩尔， nM) 实施例 1 或 1a 实施例 2 2.2 1136CN 101918391 A说实施例 3 实施例 4 实施例 5 实施例 6 28 3.5 4.2 1.4明书34/34 页