一种埃博霉素D内酰胺衍生物化学合成方法.pdf

本发明公开了一种埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，它包括以下步骤：它采用埃博霉素B、叠氮钠作为起始原料，选择一种稀有金属化合物为催化剂，进行开环氮化反应生成氮酸，再进行水解反应，生成氨基酸，再进行环合反应生成埃博霉素B内酰胺衍生物，再进行还原反应，得到埃博霉素D-内酰胺衍生物。本发明可以有效地从埃博霉素中合成埃博霉素D-内酰胺衍生物。

1： 一种埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 它包括以下步骤 ： 步骤一， 开环氮化反应 ： 在氮气保护下， 反应釜中投入四氢呋喃和水的混合液、 埃博霉 素 B 和催化剂， 然后投入叠氮钠， 在搅拌下， 慢慢升温、 搅拌， 使得溶液变成黄色， 再用乙酸 乙酯进行萃取， 利用有机相用饱和盐水进行洗涤， 用无水硫酸钠进行干燥， 真空浓缩， 得到 氮酸 ； 步骤二， 水解反应 ： 在氩气保护下， 反应釜中投入四氢呋喃、 步骤一中得到的氮酸和三 苯膦进行第一次搅拌升温， 再进行第一次冷却， 滴加 25％氢氧化铵溶液， 滴加完毕后进行 第二次升温和搅拌， 进行第二次冷却至室温， 最后采用乙酸乙酯萃取， 有机相用饱和盐水洗 涤， 无水硫酸钠干燥， 真空浓缩， 得到氨基酸 ； 步骤三， 环合反应 ： 在氩气保护下， 反应釜中投入四氢呋喃和步骤二中得到的氨基酸进 行搅拌， 再投入碳酸钠进行降温， 降温后缓慢滴加二苯基磷酰基叠氮化物后进行保温搅拌， 然后将配制的 25％磷酸二氢钠溶液冷却后加入到反应釜中， 继续搅拌， 最后再加入乙酸乙 酯进行萃取， 采用有机相无水硫酸钠干燥， 减压浓缩， 得埃博霉素 B 内酰胺衍生物 ； 步骤四， 还原反应 ： 在氩气保护下， 在反应釜中投入四氢呋喃和埃博霉素 B 内酰胺进行 搅拌冷却， 再缓慢滴加四氢化铝锂和四氢呋喃的混合溶液进行反应， 滴加完毕后继续搅拌， 再自然升温至常温， 投入 10％氯化钾溶液搅拌， 最后再采用乙酸乙酯进行萃取， 有机相无水 硫酸钠干燥， 减压浓缩， 得到埃博霉素 D 内酰胺衍生物 ； 步骤五， 纯化 ： 在反应釜中投入第四步得到的埃博霉素 D 内酰胺衍生物溶解在四氢呋 喃中， 用饱和盐水清洗搅拌， 再依次采用乙酸乙酯萃取进行萃取、 采用无水硫酸钠干燥和采 用减压浓缩， 最后经过两次纯化后得到纯埃博霉素 D 内酰胺衍生物。
2： 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的 步骤一中四氢呋喃和水的混合液为 800ml， 四氢呋喃与水的体积比为 9 ∶ 1， 埃博霉素 B 为 25g， 催化剂为四 ( 三苯基膦 ) 合钯， 四 ( 三苯基膦 ) 合钯为
3： 5g， 叠氮钠为
4： 76g， 投入叠 氮钠后搅拌升温至 60℃， 搅拌的时间为 7 小时， 在搅拌的过程中跟踪 TLC ∶ EtOAc/MSO ＝ 1 ∶ 2， 在萃取时进行三次萃取， 每次采用 250ml 的乙酸乙酯进行萃取 ； 在洗涤时进行 2 次洗 涤， 每次采用 200ml 的有机相用饱和盐水进行洗涤， 最后得到的氮酸为 17.1g。 3. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的步 骤二中四氢呋喃为 500ml， 氮酸为 17.1g， 三苯膦为 16.3g， 第一次搅拌升温至 50℃， 搅拌的 时间为 18 小时， 第一次冷却至 10℃以下， 滴加 25％氢氧化铵溶液为 150ml， 滴加时的温度控 制在 10℃以下， 第二次升温至 50℃， 搅拌的时间为 6 小时， 在萃取时进行三次萃取， 每次采 用 100ml 的乙酸乙酯进行萃取 ； 在洗涤时进行 2 次洗涤， 每次采用 200ml 的有机相用饱和盐 水进行洗涤， 最后得到的氨基酸为 12.5g。 4. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的步 骤三中四氢呋喃为 500ml， 氨基酸为 12.5g， 碳酸钠为 15g， 投入碳酸钠后降温至 0℃， 滴加的 二苯基磷酰基叠氮化物为 20ml， 滴加时的温度控制在 0℃以下， 在滴加后搅拌的时间为 24 小时， 配制的 25％磷酸二氢钠溶液为 200ml， 磷酸二氢钠溶液冷却到 0-3℃后加入到反应釜 中继续搅拌的时间为 2 小时， 乙酸乙酯的温度为 0-3℃， 在萃取时进行三次萃取， 每次采用 500ml 的乙酸乙酯进行萃取， 最后得到的埃博霉素 B 内酰胺衍生物为
5： 6g。 5. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的 2 步骤四中四氢呋喃为 300ml， 埃博霉素 B 内酰胺衍生物为 5.6g， 搅拌冷却至 5℃以下， 滴加 四氢化铝锂和四氢呋喃的混合溶液为 50ml， 其中四氢化铝锂为 6.3g， 在滴加时的温度控制 在 5℃以下， 滴加完毕后继续搅拌 12 小时， 氯化钾溶液为 200ml， 投入氯化钾溶液后搅拌的 时间为半小时， 在萃取时进行三次萃取， 每次采用 500ml 的乙酸乙酯进行萃取， 还原反应后 得到的埃博霉素 B 内酰胺衍生物为 4.2g。 6. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的步 骤五中埃博霉素 D 内酰胺衍生物为 4.2g， 四氢呋喃为 200ml， 饱和盐水为 200ml， 清洗搅拌的 时间为 20 分钟， 在萃取时进行三次萃取， 每次采用 250ml 的乙酸乙酯进行萃取， 两次纯化的 过程为 ： 第一次色谱纯化， 色谱纯化在 10*80cm 的二氧化硅上采用 2-5％甲醇 - 氯仿进行梯 度洗脱， 第二次为制备型 HPLC 纯化， 它采用 6-55％甲醇 - 氯仿梯度洗脱， 最后得到纯埃博霉 素 D 内酰胺衍生物 3.6g。
6： 3g， 第一次搅拌升温至 50℃， 搅拌的 时间为 18 小时， 第一次冷却至 10℃以下， 滴加 25％氢氧化铵溶液为 150ml， 滴加时的温度控 制在 10℃以下， 第二次升温至 50℃， 搅拌的时间为 6 小时， 在萃取时进行三次萃取， 每次采 用 100ml 的乙酸乙酯进行萃取 ； 在洗涤时进行 2 次洗涤， 每次采用 200ml 的有机相用饱和盐 水进行洗涤， 最后得到的氨基酸为 12.5g。 4. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的步 骤三中四氢呋喃为 500ml， 氨基酸为 12.5g， 碳酸钠为 15g， 投入碳酸钠后降温至 0℃， 滴加的 二苯基磷酰基叠氮化物为 20ml， 滴加时的温度控制在 0℃以下， 在滴加后搅拌的时间为 24 小时， 配制的 25％磷酸二氢钠溶液为 200ml， 磷酸二氢钠溶液冷却到 0-3℃后加入到反应釜 中继续搅拌的时间为 2 小时， 乙酸乙酯的温度为 0-3℃， 在萃取时进行三次萃取， 每次采用 500ml 的乙酸乙酯进行萃取， 最后得到的埃博霉素 B 内酰胺衍生物为 5.6g。 5. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的 2 步骤四中四氢呋喃为 300ml， 埃博霉素 B 内酰胺衍生物为 5.6g， 搅拌冷却至 5℃以下， 滴加 四氢化铝锂和四氢呋喃的混合溶液为 50ml， 其中四氢化铝锂为 6.3g， 在滴加时的温度控制 在 5℃以下， 滴加完毕后继续搅拌 12 小时， 氯化钾溶液为 200ml， 投入氯化钾溶液后搅拌的 时间为半小时， 在萃取时进行三次萃取， 每次采用 500ml 的乙酸乙酯进行萃取， 还原反应后 得到的埃博霉素 B 内酰胺衍生物为 4.2g。 6. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的步 骤五中埃博霉素 D 内酰胺衍生物为 4.2g， 四氢呋喃为 200ml， 饱和盐水为 200ml， 清洗搅拌的 时间为 20 分钟， 在萃取时进行三次萃取， 每次采用 250ml 的乙酸乙酯进行萃取， 两次纯化的 过程为 ： 第一次色谱纯化， 色谱纯化在 10*80cm 的二氧化硅上采用 2-5％甲醇 - 氯仿进行梯 度洗脱， 第二次为制备型 HPLC 纯化， 它采用 6-55％甲醇 - 氯仿梯度洗脱， 最后得到纯埃博霉 素 D 内酰胺衍生物 3.6g。
7： 1g。 3. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的步 骤二中四氢呋喃为 500ml， 氮酸为 17.1g， 三苯膦为 16.3g， 第一次搅拌升温至 50℃， 搅拌的 时间为 18 小时， 第一次冷却至 10℃以下， 滴加 25％氢氧化铵溶液为 150ml， 滴加时的温度控 制在 10℃以下， 第二次升温至 50℃， 搅拌的时间为 6 小时， 在萃取时进行三次萃取， 每次采 用 100ml 的乙酸乙酯进行萃取 ； 在洗涤时进行 2 次洗涤， 每次采用 200ml 的有机相用饱和盐 水进行洗涤， 最后得到的氨基酸为 12.5g。 4. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的步 骤三中四氢呋喃为 500ml， 氨基酸为 12.5g， 碳酸钠为 15g， 投入碳酸钠后降温至 0℃， 滴加的 二苯基磷酰基叠氮化物为 20ml， 滴加时的温度控制在 0℃以下， 在滴加后搅拌的时间为 24 小时， 配制的 25％磷酸二氢钠溶液为 200ml， 磷酸二氢钠溶液冷却到 0-3℃后加入到反应釜 中继续搅拌的时间为 2 小时， 乙酸乙酯的温度为 0-3℃， 在萃取时进行三次萃取， 每次采用 500ml 的乙酸乙酯进行萃取， 最后得到的埃博霉素 B 内酰胺衍生物为 5.6g。 5. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的 2 步骤四中四氢呋喃为 300ml， 埃博霉素 B 内酰胺衍生物为 5.6g， 搅拌冷却至 5℃以下， 滴加 四氢化铝锂和四氢呋喃的混合溶液为 50ml， 其中四氢化铝锂为 6.3g， 在滴加时的温度控制 在 5℃以下， 滴加完毕后继续搅拌 12 小时， 氯化钾溶液为 200ml， 投入氯化钾溶液后搅拌的 时间为半小时， 在萃取时进行三次萃取， 每次采用 500ml 的乙酸乙酯进行萃取， 还原反应后 得到的埃博霉素 B 内酰胺衍生物为 4.2g。 6. 根据权利要求 1 所述的埃博霉素 D- 内酰胺衍生物化学合成方法， 其特征是所述的步 骤五中埃博霉素 D 内酰胺衍生物为 4.2g， 四氢呋喃为 200ml， 饱和盐水为 200ml， 清洗搅拌的 时间为 20 分钟， 在萃取时进行三次萃取， 每次采用 250ml 的乙酸乙酯进行萃取， 两次纯化的 过程为 ： 第一次色谱纯化， 色谱纯化在 10*80cm 的二氧化硅上采用 2-5％甲醇 - 氯仿进行梯 度洗脱， 第二次为制备型 HPLC 纯化， 它采用 6-55％甲醇 - 氯仿梯度洗脱， 最后得到纯埃博霉 素 D 内酰胺衍生物 3.6g。