作为NK3拮抗剂的脯氨酰胺衍生物.pdf

本发明涉及式I化合物或其药学上适宜的酸加成盐，其中R1是氢、卤素、低级烷基、被卤素取代的低级烷基、低级烷氧基或被卤素取代的低级烷氧基；R2是氢或低级烷基；R3、R4与它们所连接的N-原子一起形成选自非芳族杂环基团；R5是氢或卤素；R6是苯基，所述的苯基是未取代的或被氰基、卤素、低级烷基、低级烷氧基、CF3、-(CH2)2O-低级烷基、C(O)-低级烷基或C(O)O-低级烷基所取代，或是吡啶基，其是未取代的或被CF3所取代，或是-C(O)-苯基；R7是氢或低级烷氧基；R8是苯基、低级烷基或-C(O)O-低级烷基；R9是氢或S(O)2-低级烷基；R10是氢或环烷基；X是-CH2-或-C(O)-；p是1或2；n是1、2或3；o是1或2。该化合物是用于治疗抑郁、疼痛、精神病、帕金森病、精神分裂症、焦虑和注意力缺陷多动症(ADHD)的高效NK-3受体拮抗剂。

1、  式I化合物或其药学上适宜的酸加成盐

其中
R¹是氢、卤素、低级烷基、被卤素取代的低级烷基、低级烷氧基或被卤素取代的低级烷氧基；
R²是氢或低级烷基；
R³、R⁴与它们所连接的N-原子一起形成选自下列的非芳族杂环基团：

R⁵是氢或卤素；
R⁶是苯基，所述的苯基是未取代的或被选自下列的基团所取代：氰基、卤素、低级烷基、低级烷氧基、CF₃、-(CH₂)₂O-低级烷基、C(O)-低级烷基或C(O)O-低级烷基，
或是吡啶基，其是未取代的或被CF₃所取代，
或是-C(O)-苯基；
R⁷是氢或低级烷氧基；
R⁸是苯基、低级烷基或-C(O)O-低级烷基；
R⁹是氢或S(O)₂-低级烷基；
R¹⁰是氢或环烷基；
X是-CH₂-或-C(O)-；
p是1或2；
n是1、2或3；
o是1或2。

2、  权利要求1所述的式I化合物，其中X是-CH₂。

3、  权利要求2所述的式I化合物，其中R³/R⁴与它们所连接的N-原子一起形成哌嗪环，该哌嗪环被R⁶所取代。

4、  权利要求3所述的式I化合物，其中R⁶-取代是被氰基取代的苯基。

5、  权利要求4所述的式I化合物，其中所述化合物是
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈、
2-(4-{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈、
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二甲氧基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈、
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈、
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2-氯-5-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈、
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3-氯-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈、
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3-氯-4-氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈、
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，4-二氯-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈、
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3-氯-2-氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈、
2-{4-[4-(2，4-二氟-苄基氨基)-1-(3-氟-苄基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈或
2-{4-[(2S，4R)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈。

6、  权利要求3所述的式I化合物，其中R⁶-取代是被CF₃取代的苯基。

7、  权利要求6所述的式I化合物，其中所述化合物是
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮、
{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-基}-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮、
[(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮或
[(2S，4R)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮。

8、  权利要求3所述的式I化合物，其中R⁶-取代是被卤素取代的苯基。

9、  权利要求8所述的式I化合物，其中所述化合物是
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(4-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮或
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-氯-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮。

10、  权利要求3所述的式I化合物，其中R⁶-取代是未取代的或被低级烷氧基取代的苯基。

11、  权利要求10所述的式I化合物，其中所述化合物是
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(4-苯基-哌嗪-1-基)-甲酮或
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮。

12、  权利要求2所述的式I化合物，其中R³/R⁴与它们所连接的N-原子一起形成被R⁷取代的3，4-二氢-1H-异喹啉。

13、  权利要求12所述的式I化合物，其中所述化合物是[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(6，7-二甲氧基-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基)-甲酮。

14、  权利要求1所述的式I化合物，其中X是-C(O)-。

15、  权利要求14所述的式I化合物，其中所述化合物是
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2-氯-苯甲酰胺，
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-3，5-二氯-苯甲酰胺，
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2-三氟甲基-苯甲酰胺或
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2-甲氧基-苯甲酰胺。

16、  制备式I化合物的方法，该方法包括：
a)从式2化合物中除去保护基

得到式I-1化合物

其中保护基选自叔丁氧基羰基或氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯，并且其它取代基如上所述，或者
b)将式3化合物

与下式化合物反应

以得到式I-2化合物

其中取代基如上所述，或者
c)将式4化合物

与下式的胺反应
NHR³R⁴
以得到式I-3化合物

其中取代基如上所述，或者
d)将式5化合物

与下式化合物反应

以得到式I-4化合物

其中取代基如上所述，或者
e)将式6化合物

与下式化合物反应

以得到式I-5化合物

其中取代基如上所述，
并且，如果需要的话，将式I化合物转化成可药用盐。

17、  通过权利要求16中所要求的方法或者通过等同方法制得的权利要求1的化合物。

18、  含有一种或多种如权利要求1-15任一项所要求的化合物和可药用赋形剂的药物。

19、  用于治疗抑郁、疼痛、精神病、帕金森病、精神分裂症、焦虑和注意力缺陷多动症(ADHD)的权利要求18的药物。

20、  如权利要求1-15任一项所要求的化合物在制备用于治疗抑郁、疼痛、精神病、帕金森病、精神分裂症、焦虑和注意力缺陷多动症(ADHD)的药物中的用途。

21、  如上所述的本发明。

作为NK3拮抗剂的脯氨酰胺衍生物
本发明涉及式I化合物或其药学上适宜的酸加成盐

其中
R¹是氢、卤素、低级烷基、被卤素取代的低级烷基、低级烷氧基或被卤素取代的低级烷氧基；
R²是氢或低级烷基；
R³、R⁴与它们所连接的N-原子一起形成选自下列的非芳族杂环基团：

R⁵是氢或卤素；
R⁶是苯基，所述的苯基是未取代的或被氰基、卤素、低级烷基、低级烷氧基、CF₃、-(CH₂)₂O-低级烷基、C(O)-低级烷基或C(O)O-低级烷基所取代，
或是吡啶基，其是未取代的或被CF₃所取代，
或是-C(O)-苯基；
R⁷是氢或低级烷氧基；
R⁸是苯基、低级烷基或-C(O)O-低级烷基；
R⁹是氢或S(O)₂-低级烷基；
R¹⁰是氢或环烷基；
X是-CH₂-或-C(O)-；
p是1或2；
n是1、2或3；
o是1或2。
本发明包括式(I)化合物所有的立体异构体形式，包括单一非对映异构体和对映异构体以及其外消旋和非外消旋混合物。
已经发现，本发明的化合物是高效的NK-3受体拮抗剂，可用于治疗抑郁、疼痛、精神病、帕金森病、精神分裂症、焦虑和注意力缺陷多动症(ADHD)。
三种主要的哺乳动物速激肽，即P物质(SP)、神经激肽A(NKA)和神经激肽B(NKB)属于神经肽类家族，该家族具有共同的COOH-末端五肽序列Phe-X-Gly-Leu-Met-NH₂。作为神经递质，这些肽通过三种不同的神经激肽(NK)受体(称为NK-1、NK-2和NK-3)发挥其生物学活性。SP优先地与NK-1受体结合，NKA优先地与NK-2结合，NKB优先地与NK-3受体结合。
NK-3受体的特征在于主要在中枢神经系统中表达，已经证明了其参与中枢单胺能系统的调节。这些性质使得NK-3受体成为中枢神经系统障碍如焦虑、抑郁、双相性精神障碍、帕金森病、精神分裂症和疼痛的潜在靶标(Neurosci.Letters，2000，283，185-188；Exp.Opin.Ther.Patents 2000，10，939-960；Neuroscience，1996，74，403-414；Neuropeptides，1998，32，481-488)。
精神分裂症是主要的神经精神病之一，其特征在于严重的和慢性的精神损害。这种毁灭性的疾病影响约1％的世界人口。其症状开始于早期成年期，然后是人际关系和社交障碍时期。精神分裂症表现为幻听和幻视、偏执、妄想(阳性症状)、感情迟钝、抑郁、快感缺乏、言语贫乏、记忆力和注意力缺陷以及社交回避(阴性症状)。
数十年来，科学家和临床医师们一直致力于发现用于精神分裂症的药理学治疗的理想药物。但是，由于症状的多样性所造成的这些障碍的复杂性使得这些努力鲜有成效。就精神分裂症的诊断而言，不存在特定的病灶特征，并且没有单一症状始终存在于所有患者中。因此，精神分裂症作为单一精神障碍或者作为多种不同精神障碍的诊断已有讨论，但是尚无定论。精神分裂症新药开发中的主要困难是缺乏关于这种疾病的原因和性质的认识。在药理学研究的基础上已经提出了一些神经化学假说，以使相应疗法的开发合理化：多巴胺、血清素和谷氨酸假说。但是考虑到精神分裂症的复杂性，对抗阳性与阴性表现和症状的功效可能需要适宜的多受体亲和性。此外，理想的抗精神分裂症药将优选具有允许每天给药一次的低剂量，因为精神分裂症患者的坚持能力低。
近些年来，文献中报道了用选择性NK1和NK2受体拮抗剂进行的临床研究，显示了对呕吐、抑郁、焦虑、疼痛与偏头痛(NK1)和哮喘(NK2和NK1)的治疗结果。在利用NK1受体拮抗剂治疗化学疗法-诱发的呕吐、恶心和抑郁以及利用NK2受体拮抗剂治疗哮喘中产生了最令人兴奋的数据。相反，直到2000年才有文献报道关于NK3受体拮抗剂的临床数据。Sanofi-Synthelabo的Osanetant(SR 142，801)是第一种确定的强效的选择性非肽类NK3速激肽受体拮抗剂，可治疗精神分裂症，这在文献中有报道(Current Opinion in Investigational Drugs，2001，2(7)，950-956和PsychiatricDisorders Study 4，Schizophrenia，2003年6月，Decision Recources，Inc.，Waltham，Massachusetts)。所提出的药物SR 142，801已经在II期试验中显示对精神分裂症的阳性症状例如行为改变、妄想、幻觉、极端情绪、兴奋性运动活动和语无伦次有活性，但是在抑郁、快感缺乏、社会隔绝或记忆与注意力缺陷等阴性症状的治疗中无活性。
神经激肽-3受体拮抗剂被描述为可用于疼痛或炎症以及精神分裂症(Exp.Opinion.Ther.Patents(2000)，10(6)，939-960和Current Opinion inInvestigational Drugs，2001，2(7)，950-956 956和Psychiatric Disorders Study4，Schizophrenia，2003年6月，Decision Recources，Inc.，Waltham，Massachusetts)。
本发明的目的是新的式I化合物、它们的制备、基于本发明化合物的药物和它们的生产以及式I化合物在控制或预防疾病中的用途，所述疾病例如有抑郁、疼痛、双相性精神障碍、精神病、帕金森病、精神分裂症、焦虑和注意力缺陷多动症(ADHD)。
采用本发明化合物的优选的适应症有抑郁、精神病、帕金森病、精神分裂症、焦虑和注意力缺陷多动症(ADHD)。
本说明书中所用的一般术语具有下述定义，无论所述的术语是单独出现还是组合出现。
如本文所用的术语“低级烷基”指含有1至8个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基等。优选的低级烷基是具有1-4个碳原子的基团。
术语“被卤素取代的低级烷基”指其中至少一个氢原子被卤素替换的如上文所定义的烷基，例如-CF₃、-CHF₂、-CH₂F、-CH₂CF₃、-CH₂CH₂CF₃、-CH₂CF₂CF₃等。优选的被卤素取代的低级烷基是具有1-4个碳原子的基团。
术语“低级烷氧基”指其中的烷基如上文所定义且经由氧原子连接的基团，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、2-丁氧基、叔丁氧基等。优选的烷氧基是具有1-4个碳原子的基团。
术语“被卤素取代的低级烷氧基”指其中的烷基是上文所定义的“被卤素取代的低级烷基”且经由氧原子连接的基团。优选的被卤素取代的低级烷氧基是具有1-4个碳原子的基团。
术语“卤素”指氯、碘、氟和溴。
术语“环烷基”表示含有3-7个碳原子的饱和碳环，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。
术语“可药用的酸加成盐”包括无机和有机酸的盐，例如盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、甲酸、富马酸、马来酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等的盐。
其中的X是-CH₂-的式I化合物是优选的。该组中特别优选的化合物是其中的R³/R⁴与它们所连接的N-原子一起形成被R⁶取代的哌嗪环的化合物。
优选的R⁶-取代是被氰基取代的苯基，例如下列化合物：
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，
2-(4-{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈，
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二甲氧基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2-氯-5-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3-氯-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3-氯-4-氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，4-二氯-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3-氯-2-氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，
2-{4-[4-(2，4-二氟-苄基氨基)-1-(3-氟-苄基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈或
2-{4-[(2S，4R)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈。
进一步优选的R⁶-取代是被CF₃取代的苯基，例如下列化合物：
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮，
{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-基}-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮，
[(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮或
[(2S，4R)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮。
进一步优选的R⁶-取代是被卤素取代的苯基，例如下列化合物：
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(4-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮或
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-氯-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮。
进一步优选的R⁶-取代是未取代的或被低级烷氧基取代的苯基，例如下列化合物：
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(4-苯基-哌嗪-1-基)-甲酮或
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮。
还优选其中的X是-CH₂-且R³/R⁴与它们所连接的N-原子一起形成被R⁷取代的3，4-二氢-1H-异喹啉的式I化合物，例如下列化合物：
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(6，7-二甲氧基-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基)-甲酮。
进一步优选的化合物是其中的X是-C(O)-的化合物，例如下列化合物：
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2-氯-苯甲酰胺，
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-3，5-二氯-苯甲酰胺，
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2-三氟甲基-苯甲酰胺或
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2-甲氧基-苯甲酰胺。
本发明的式I化合物的制备可以以顺序或汇聚合成路线进行。如下流程中显示了本发明化合物的合成。进行反应和将所得产物纯化所要求的技术是本领域技术人员已知的。以下方法描述中所用的取代基和指数具有上文给出的含义，有相反指示时除外。
式I化合物可通过下文给出的方法、通过实施例中给出的方法或通过类似方法制备。对于各反应步骤而言适当的反应条件是本领域技术人员已知的。但是，反应顺序不限于流程1中所示的顺序，根据原料和它们各自的反应活性，可以自由地改变反应步骤的顺序。原料可以自商业途径获得或者可以通过与下文所述方法类似的方法、通过说明书中所引用的文献中或实施例中所述的方法或者通过本领域已知的方法来制备。
式I化合物及其可药用盐可以通过本领域已知的方法、例如通过下述方法来制备，所述方法包括：
a)从式2化合物中除去保护基

得到式I-1化合物

其中保护基选自叔丁氧基羰基或氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯，并且其它取代基如上所述，或者
b)将式3化合物

与下式化合物反应

以得到式I-2化合物

其中取代基如上所述，或者
c)将式4化合物

与下式的胺反应
NHR³R⁴
以得到式I-3化合物

其中取代基如上所述，或者
d)将式5化合物

与下式化合物反应

以得到式I-4化合物

其中取代基如上所述，或者
e)将式6化合物

与下式化合物反应

以得到式I-5化合物

其中取代基如上所述，
并且，如果需要的话，将式I化合物转化成可药用盐。
式I化合物的制备更详细地进一步描述在流程1-7和实施例1-98中。
流程1

a)向反式-N-Boc-4-羟基-L-脯氨酸甲酯(7)的吡啶和干燥DCM溶液中在0℃下加入4-甲基-苯磺酰氯。加入后将混合物回流过夜。蒸发溶剂，然后将残余物溶于CH₂Cl₂。除去溶剂后得到粗产物4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯，其不经进一步纯化即可用于下面的反应。
向以上所得到的4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯的干燥DMF溶液中一次性加入NaN₃并将反应混合物在约50℃下搅拌5小时。将形成的混合物纯化得到4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(8)。
b)将4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯在CF₃COOH/CH₂Cl₂中的混合物在室温下搅拌过夜。向得到的产物的DCM溶液中加入相应的未取代的或卤素-取代的苯甲醛、乙酸和NaBH(OAc)₃。搅拌过夜后将反应混合物纯化得到相应的产物4-叠氮基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(9)。
c)向4-叠氮基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(9)的THF溶液中在N₂下加入三苯基膦和水。将混合物在搅拌下回流约6小时。除去THF后将残余物溶于Et₂O，用HCl处理，搅拌5分钟并用Et₂O萃取。然后将水溶液用NaHCO₃处理并萃取，干燥并浓缩得到产物4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(10)。
d)向(10)和苯甲醛(未取代的或被R¹所取代)的DCM溶液中加入MgSO₄、AcOH和NaBH₃CN。将反应混合物搅拌过夜，然后用DCM稀释。将有机溶液用NaHCO₃洗涤，干燥并浓缩。将残余物溶于水，用(Boc)₂O处理，然后搅拌过夜。将反应混合物用DCM萃取，干燥并浓缩得到产物1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯(11)。
e)向1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯(11)的CH₃OH溶液中加入LiOH并将溶液在室温下搅拌过夜。除去溶剂后，将残余物溶于水，酸化至PH＝5，然后用EA萃取并浓缩得到产物1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(12)。
f)将(12)、N-羟基苯并三唑和2-哌嗪-1-基-苄腈、三乙胺在干燥二氯甲烷中的混合物在室温下搅拌过夜，然后用三氟乙酸处理。将形成的混合物在室温下继续搅拌5小时并浓缩。将残余物纯化得到式I-1化合物。
流程2

a)将L-羟基脯氨酸的Na₂CO₃溶液滴加到Boc-酐的THF/二恶烷溶液中并将混合物搅拌过夜。除去THF，然后将混合物用Et₂O洗涤，冷却至0度并用HCl酸化至PH＝2。将溶液萃取，将有机层干燥并浓缩得到4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(14)。
b)将4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯、EDC.HCl、HOBt、2-哌嗪-1-基-苄腈和Et₃N在DCM中的混合物搅拌过夜。除去溶剂后，将残余物纯化得到产物2-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(15)。
c)将2-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯溶于DCM/CF₃COOH并搅拌过夜。将溶液浓缩得到2-[4-(4-羟基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(16)。
d)将2-[4-(4-羟基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈溶于DCM，然后加入苯甲醛(未取代的或被R⁵取代)和NaBH(OAc)₃。搅拌过夜后，将反应混合物用DCM稀释，用NaHCO₃洗涤，干燥，浓缩并纯化得到相应的2-[4-(1-苄基-4-羟基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(17)。
e)将草酰氯在-78度下滴加到无水DCM和DMSO的溶液中。将反应混合物搅拌约30分钟，然后加入醇的DCM溶液，保持反应温度在-60度以下。一旦加入完成就将反应混合物在-78度下搅拌约2小时，然后加入三乙胺。加入完成后，将混合物升温至室温并搅拌过夜。将水加入到反应混合物中后，将pH用NaHCO₃调节至10并将产物萃取，洗涤，干燥，浓缩得到2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(3)。
f)将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈和3，5-二-三氟甲基-苄基胺溶于DCM，然后加入乙酸和NaBH(OAc)₃。搅拌约3小时后，将反应混合物稀释，洗涤，干燥并浓缩得到2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈(I-2)。
流程3

a)向相应的4-[(苄基氨基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯的冷却至0度的DCM溶液中加入TrocCl和TEA。将混合物搅拌过夜，用Na₂CO₃、盐水洗涤，干燥并真空浓缩得到4-[(苄基)-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(19)。
b)向4-[(苄基)-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯的冷却至0度的MeOH溶液中加入LiOH并将混合物搅拌过夜。除去溶剂后，将残余物用HCl酸化。将水层用EA萃取，将有机溶液干燥，浓缩并纯化得到4-[(苄基)-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(20)。
c)向4-[(苄基)-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯、HOBt、1-(2-氰基苯基)哌嗪的DCM溶液中加入Et₃N和EDC.HCl。将混合物搅拌过夜，然后用柠檬酸、Na₂CO₃、盐水洗涤，干燥并浓缩得到2-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-4-[(苄基)-(2，2，2-三氯乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(21)。
d)将2-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-4-[(苄基)-(2，2，2-三氯乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯和CF₃COOH的混合物在室温下搅拌约5小时，然后浓缩得到{5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-(苄基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(22)。
e)将{5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-(苄基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯、相应的苯甲醛和乙酸(催化量)在DCM中的混合物搅拌20分钟，然后加入NaBH(OAc)₃。将反应混合物搅拌过夜并浓缩得到{1-(苄基)-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-(2，4-二氟-苄基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(23)。
f)将{1-(苄基)-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-(2，4-二氟-苄基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯和Zn溶于MeOH并将pH用乙酸调节至5-6。将混合物加热回流并搅拌约30分钟。除去甲醇后将残余物纯化得到式I-2的最终产物。
流程4

a)将相应的1-苄基-4-羟基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的冷却至0℃的DCM溶液用三氯异氰尿酸和TEMPO处理，然后将反应混合物在0℃下搅拌约1小时。将混合物用DCM稀释，用NaHCO₃、HCl和盐水洗涤。将有机层干燥并浓缩得到产物1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯(25)。
b)将1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯和相应的苄基胺溶于DCM，然后加入乙酸和NaBH(OAc)₃。搅拌约3小时后，将反应混合物用DCM稀释，洗涤，干燥并浓缩。将残余物纯化得到1-苄基-4-(苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸甲酯(26)。
c)将1-苄基-4-(苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸甲酯和LiOH溶于THF/H₂O，然后搅拌过夜。除去溶剂后，将残余物中和至pH＝6-7，然后用EA萃取。将有机层用水和盐水洗涤，干燥并浓缩得到1-苄基-4-(苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸(4)。
d)将1-苄基-4-(苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐、N-羟基苯并三唑、式NHR³R⁴的相应的胺、三乙胺在二氯甲烷中的混合物搅拌过夜，然后浓缩。将残余物纯化得到式I-3化合物。
流程5

a)向(2S，4S)-1-苄基-4-[甲基-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯的THF和甲醇溶液中加入NaOH的水溶液并将反应混合物搅拌过夜，用EA萃取。将水溶液酸化至pH 5-6并用EA萃取。将有机相洗涤，干燥并浓缩得到1-苄基-4-[甲基-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(28)。
b)将1-苄基-4-[甲基-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸、2-哌嗪-1-基-苄腈、EDC和HOBT在CH₂Cl₂中的混合物搅拌5分钟，然后加入Et₃N并将反应混合物在室温下搅拌约12小时。纯化后得到(1-苄基-5-{1-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-基]-羰基}-吡咯烷-3-基)-甲基-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(29)。
c)向(1-苄基-5-{1-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-基]-羰基}-吡咯烷-3-基)-甲基-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯和Zn在CH₂Cl₂中的混合物中加入5滴AcOH并将混合物搅拌约2小时。除去Zn粉末后，将产物纯化得到2-[4-(1-苄基-4-甲基氨基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(5)。
d)向在室温下搅拌着的2-[4-(1-苄基-4-甲基氨基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈和相应的苯甲醛在CH₂Cl₂中的混合物中加入NaBH(OAc)₃和NEt₃，然后将形成的混合物搅拌过夜。纯化后得到2-(4-{1-苄基-4-[(3，4-二氯-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈(I-4)。
流程6

其中R²’是被(R¹)_n取代的-CH₂-苯基。
a)向配备有磁力搅拌棒和加液漏斗的圆底烧瓶中在N₂下加入N-Boc-L-反式-4-羟基-脯氨酸甲酯、PPh₃和无水THF。将溶液冷却至0摄氏度，加入DEAD的THF溶液，然后加入MeI。将反应混合物升温至室温并搅拌约10小时。除去溶剂，将粗产物纯化得到4-碘-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(31)。
b)向4-碘-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯的DMF溶液中加入NaN₃，将形成的混合物加热至约65摄氏度并搅拌过夜。将混合物稀释，萃取并干燥。除去溶剂后，将残余物纯化得到4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(8)。
c)将4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯、THF和PPh₃和水的溶液回流约6小时，然后浓缩。将残余物溶于Et₂O并用HCl处理。将水层萃取，洗涤，干燥并浓缩得到4-氨基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(32)。
d)向溶于DCM并冷却至0摄氏度的4-氨基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯的溶液中加入相应的苯甲醛，然后加入NaBH(OAc)₃和5滴HOAc。将混合物升温至室温并搅拌过夜。将混合物用DCM稀释，用盐水洗涤并干燥。除去溶剂后，得到粗产物4-(苄基氨基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(33)，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。
e)向冷却至0摄氏度的4-(苄基氨基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯的DCM溶液中加入TrocCl，然后加入Et₃N。将混合物在室温下搅拌过夜并浓缩。将残余物纯化得到4-[(苄基)-troc-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(34)。
f)向冷却至0摄氏度的4-[(2，4-二氟-苄基)-troc-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯的DCM溶液中加入TFA。将混合物搅拌30分钟，洗涤并干燥。将有机层浓缩得到粗产物4-[(苄基)-troc-氨基]-吡咯烷甲酯(35)。
g)向冷却至0摄氏度的4-[(2，4-二氟-苄基)-troc-氨基]-吡咯烷甲酯的DCM溶液中加入相应的苯甲醛、NaBH(OAc)₃和5滴HOAc。将形成的混合物升温至室温并搅拌过夜。将反应溶液用盐水洗涤，干燥并浓缩得到粗产物1-苄基-4-[(苄基)-troc-氨基]-吡咯烷甲酯(36)。
h)向1-苄基-4-[(苄基)-troc-氨基]-吡咯烷甲酯的甲醇溶液中加入LiOH。将混合物搅拌过夜，酸化至pH＝5并用DCM萃取。将有机层干燥并浓缩得到粗产物1-苄基-4-[(苄基)-troc-氨基]-吡咯烷甲酸(37)。
i)将1-苄基-4-[(苄基)-troc-氨基]-吡咯烷甲酸、EDCI、HOBT、Et₃N和相应的苯基哌嗪在DCM中的混合物在室温下搅拌过夜。将混合物浓缩得到粗产物1-苄基-[4-(苄基)-troc-氨基]-吡咯烷-2-基}-[4-(苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮(38)。
j)向{1-苄基-[4-(2，4-二氟-苄基)-troc-氨基]-吡咯烷-2-基}-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮的MeOH溶液中加入Zn粉和5滴HOAc并将混合物回流过夜。得到式I-1的最终产物。
流程7

a)向4-叠氮基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯的THF溶液中在N₂下加入三苯基膦和水。将混合物搅拌回流约6小时。除去溶剂后，将残余物溶于Et₂O，用HCl处理并继续搅拌5分钟。将溶液用Et₂O萃取，然后将水层用NaHCO₃中和至pH＞10并用DCM萃取。除去溶剂，然后溶于H₂O，用(Boc)₂O处理并搅拌过夜。然后将产物用EA萃取，用水和盐水洗涤，干燥并浓缩得到标题产物1-苄基-4-叔丁氧基羰基氨基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(39)。
b)将1-苄基-4-叔丁氧基羰基氨基-吡咯烷-2-甲酸甲酯和LiOH溶于THF/H₂O并将形成的混合物在室温下搅拌约5小时。除去溶剂后，将pH调节至6-7。收集固体并干燥得到1-苄基-4-叔丁氧基羰基氨基-吡咯烷-2-甲酸(40)。
c)将1-苄基-4-叔丁氧基羰基氨基-吡咯烷-2-甲酸、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐、N-羟基苯并三唑、2-哌嗪-1-基-苄腈和三乙胺在DCM中的混合物搅拌过夜。将粗产物纯化得到{1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}氨基甲酸叔丁酯(41)。
d)将{1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}氨基甲酸叔丁酯溶于DCM/CF₃COOH并搅拌过夜。除去溶剂后，将残余物用NaHCO₃处理并萃取。将有机层干燥并浓缩得到2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(6)。
e)向2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈和相应的苯甲酰氯在DCM中的混合物中加入三乙胺并将形成的混合物搅拌过夜，然后浓缩。将残余物纯化得到式I-5化合物。
根据本身已知并且为本领域任何技术人员所熟悉的方法，在室温下形成盐。纳入考虑的不仅有无机酸盐，而且还有有机酸盐。这类盐的实例有盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、甲烷磺酸盐、对甲苯磺酸盐等。
缩写词
DCM＝二氯甲烷；
DMF＝N，N-二甲基甲酰胺；
HPLC＝高效液相色谱；
MS＝质谱；
THF＝四氢呋喃；
EA＝乙酸乙酯
EDC＝1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺
TEA＝三乙胺
TEMPO＝2，2，6，6-四甲基-1-哌啶1-氧基
HOBT＝1-羟基苯并三唑水合物
DEAD＝偶氮二甲酸二乙酯
TrocCl＝2，2，2-三氯乙氧基羰基氯
TFA＝三氟乙酸
EDCI＝1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺
如上所述，式I化合物及其可药用的加成盐具有有价值的药理性质。已经发现，本发明的化合物是神经激肽3(NK-3)受体的拮抗剂。按照下文给出的测试研究了化合物。
实验方法
按照下文给出的测试研究了化合物。
[³H]SR142801竞争结合分析
采用[³H]SR142801(目录号TRK1035，比活性：74.0Ci/mmol，安玛西亚(Amersham)，GE医疗保健英国有限公司(GE Healthcare UK limited)，白金汉郡，UK)和由瞬时表达重组人NK3受体的HEK293细胞分离的膜进行hNK3受体结合试验。熔融后，将膜匀浆在4℃下于48,000Xg离心10分钟，将沉积物重新混悬于50mM Tris-HCl，4mM MnCl₂，1μM膦酰二肽，0.1％BSA结合缓冲液(pH 7.4)中，最终分析浓度为5μg蛋白质/孔。对于抑制试验，将膜与浓度等于放射性配体的K_D值的[³H]SR142801和10种浓度的抑制性化合物(0.0003-10μM)(总反应体积为500μl)一起于室温(RT)下孵育75分钟。在孵育结束时，将膜过滤到具有Filtermate 196收集器(帕卡德生物技术公司(Packard BioScience))的单滤器(96-孔白色微量滴定板，具有结合的GF/C滤器，预先在0.3％PEI+0.3％BSA中孵育1小时，帕卡德生物技术公司，Meriden，CT)上，用冰冷的50mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.4)洗涤4次。在10μM SB222200存在下测定两种放射性配体的非特异性结合。加入45μl Microscint 40(Canberra Packard S.A.，Zürich，瑞士)并振摇1小时后，在具有淬灭校正的Packard Top-计数微量板闪烁计数器上对滤器上的放射活性进行计数(5分钟)。采用Excel-fit 4软件(微软)，按照Hill方程：y＝100/(1+(x/IC₅₀)^nH)拟合抑制曲线，其中n_H＝斜率因子。由抑制曲线得到IC₅₀值，采用Cheng-Prussoff方程K_i＝IC₅₀/(1+[L]/K_D)计算亲和常数(K_i)值，其中[L]是放射性配体的浓度，K_D是其在受体的解离常数，得自饱和等温线。所有试验一式两份地进行，计算各K_i值的平均值±标准误差(SEM)。
下表1显示了具有良好hNK-3受体亲和力的优选化合物的一些结果。
表1
实施例    数据[μM]     实施例    数据[μM]
1         0.0122        38        0.058
5         0.0376        40        0.071
7         0.063         45        0.0279
8         0.0648        48        0.029
10        0.0567        49        0.048
12        0.0235        54        0.047
13        0.0394        62        0.039
32        0.0644        68        0.0412
34        0.044         87        0.052
36        0.0948        88        0.097
式(I)化合物及其可药用的酸加成盐可用作药物，例如以药物制剂的形式用作药物。药物制剂可以经口服施用，例如以片剂、包衣片剂、锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液剂、乳剂或混悬剂的形式施用。但是，施用还可以经直肠(例如以栓剂形式)或胃肠外(例如以注射溶液形式)进行。
式(I)化合物及其可药用的酸加成盐可以用药学上惰性的用于生产片剂、包衣片剂、锭剂和硬明胶胶囊的无机或有机赋形剂进行加工。乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其盐等可用作这类赋形剂用于例如片剂、锭剂和硬明胶胶囊。
适于软明胶胶囊的赋形剂有例如植物油、蜡、脂肪、半固体和液体多元醇等。
适于生产溶液和糖浆剂的赋形剂有例如水、多元醇、蔗糖、转化糖、葡萄糖等。
适于注射溶液的赋形剂有例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。
适于栓剂的赋形剂有例如天然或硬化油、蜡、脂肪、半液体或液体多元醇等。
此外，药物制剂可含有防腐剂、增溶剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、矫味剂、改变渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂或抗氧化剂。它们还可以含有其它在治疗上有价值的物质。
剂量可以在宽限度内改变，并且当然将适合于各具体情况中的个体需求。通常，当口服施用时，约10至1000mg通式(I)化合物/人的日剂量应当是适当的，虽然当需要时也可以超出上述上限。
实施例A
以常用方式制备下述组成的片剂：
                                        mg/片
活性物质                                5
乳糖                                    45
玉米淀粉                                15
微晶纤维素                              34
硬脂酸镁                                1
                                  片重  100
实施例B
制备具有下述组成的胶囊：
                                        mg/粒胶囊
活性物质                                10
乳糖                                    155
玉米淀粉                                30
滑石粉                                  5
                          胶囊填充物重量200
首先将活性物质、乳糖和玉米淀粉在混合器中混合，然后在粉碎机中混合。将混合物送回混合器中，向其中加入滑石粉，充分混合。通过机器将混合物填充入硬明胶胶囊中。
实施例C
制备具有下述组成的栓剂：
                                        mg/粒栓剂
活性物质                                15
栓剂基质                                1285
                                  总重  1300
将栓剂基质在玻璃或钢制容器中熔化，充分混合并冷却至45℃。然后，向其中加入微细粉末状的活性物质，搅拌直至其完全消失。将混合物倒入适宜大小的栓剂模具中，放置冷却，然后从模具中取出栓剂，在蜡纸或金属箔中单独包装。
下述实施例非限制性地解释了本发明。所有温度以摄氏度给出。
实施例1
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
a)4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
向反式-N-Boc-4-羟基-L-脯氨酸甲酯(45g，0.183mol)的吡啶(140ml)和干燥DCM(140ml)的溶液中在0℃下滴加4-甲基-苯磺酰氯(41.9g，0.22mol)。加入后将混合物回流过夜。蒸发溶剂然后将残余物溶于CH₂Cl₂(140ml)。将有机相用水(150ml)、盐水(140mL)洗涤并用硫酸钠干燥。除去溶剂后，得到黄色油状粗产物4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯73.2g(92％)，其不经进一步纯化即可用于下面的反应。
向以上所得到的4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(30g，75mmol)的干燥DMF(150ml)溶液中一次性加入NaN₃(9.5g，146.2mmol)，然后将反应混合物在50℃下搅拌5小时。将形成的混合物用乙酸乙酯稀释，用水(2×100ml)和盐水(100ml)洗涤，用无水MgSO₄干燥。除去溶剂后，得到黄色油状所需产物17.27g(85％)4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯。MS m/e＝271.3[M+H]⁺。
b)4-叠氮基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯
将4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(10.0g，36mmol)在CF₃COOH/CH₂Cl₂＝1∶5(50ml)中的混合物在室温下搅拌过夜，然后浓缩得到棕色油状产物6.29g(100％)。向该棕色油(6.29.9g，37mmol)的DCM(12ml)溶液中加入苯甲醛(5.87g，55.4mmol)、乙酸(2.75g，46.25mmol)和NaBH(OAc)₃(15.68g，74mmoll)。搅拌过夜后，将反应混合物用DCM稀释，用NaHCO₃水溶液洗涤，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。将残余物通过快速柱色谱纯化(EtOAc∶PE＝1∶25)得到无色油状标题产物4-叠氮基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯6.73g(70％)。MS m/e＝261.4[M+H]⁺。
c)4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯
向4-叠氮基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(6g，23mmol)的THF(100ml)溶液中在N₂下加入三苯基膦(12.08g，46mmol)和水(1.036mL，57.56mmol)。将混合物在搅拌下回流6小时。除去THF后将残余物溶于Et₂O，用0.15N HCl水溶液处理，搅拌5分钟并用Et₂O萃取(2×150ml)。然后将水溶液用10％NaHCO₃处理至pH＞10并用DCM萃取(2×100ml)。将合并的有机相用无水NaSO₄干燥，浓缩得到无色油状产物4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯4.6g(85％)。MS m/e＝235.3[M+H]⁺。
d)1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯
向4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(2.89g，12.33mmol)和2，4-二氟苯甲醛(1.64g，11.52mmol)的DCM(25ml)溶液中加入MgSO₄(8.1g)、AcOH(0.5ml)，然后加入NaBH₃CN(1.09g，17.28mmol)。将反应混合物搅拌过夜，然后用DCM稀释。将有机溶液用NaHCO₃水溶液洗涤，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。将残余物溶于水，用(Boc)₂O(1.09g，5mmol)处理，然后搅拌过夜。将反应混合物用DCM萃取，干燥并浓缩得到白色固体状产物1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯1.9g(36％)。MSm/e＝461.3[M+H]⁺。
e)1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸
向1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯(109g，4.13mmol)的CH₃OH(10ml)溶液中加入LiOH(0.826g，20.65mmol)并将溶液在室温下搅拌过夜。除去溶剂后，将残余物溶于水，酸化至pH＝5，然后用EA萃取。将有机相用水(2×50mL)和盐水(40mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并浓缩得到白色固体状产物1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸1.72g(93％)。MS m/e＝447.4[M+H]⁺。
f)2-{4-[1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(50.0mg，0.268mmol)、N-羟基苯并三唑(19.0mg，0.134mmol)和2-哌嗪-1-基-苄腈(46.7mg，0.25mmol)、三乙基胺(0.05ml)在干燥二氯甲烷(2ml)中混合物在室温下搅拌过夜，然后用三氟乙酸(1mL)处理。将形成的混合物在室温下继续搅拌5小时并浓缩。将残余物通过反相制备型HPLC纯化，用乙腈/水[0.1％氨水(25％)]梯度洗脱得到浅黄色油状标题化合物(6.7mg，9.7％)。MS m/e＝516.4[M+H]⁺。
实施例2
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(5.7mg，8.9％)。MSm/e＝473.4[M+H]⁺。
实施例3
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(4-异丙基-哌嗪-1-基)-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-异丙基-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(6.2mg，9.3％)。MS m/e＝457.4[M+H]⁺。
实施例4
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(5.7mg，7.5％)。MS m/e＝560.4[M+H]⁺。
实施例5
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(3-三氟甲基-苯基)哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(8.2mg，11％)。MSm/e＝559.4[M+H]⁺。
实施例6
1-(4-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苯基)-乙酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(4-哌嗪-1-基-苯基)-乙酮代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(5.8mg，8.1％)。MSm/e＝559.4[M+H]⁺。
实施例7
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(4-苯基-哌嗪-1-基)-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-苯基-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(6.3mg，9.5％)。MS m/e＝491.4[M+H]⁺。
实施例8
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(4-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(4-氟-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(7.6mg，11％)。MS m/e＝509.4[M+H]⁺。
实施例9
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3，4-二氯-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(3，4-二氯-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(5.5mg，7.0％)。MSm/e＝559.4[M+H]⁺。
实施例10
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-氯-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(2-氯-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(8.2mg，12％)。MS m/e＝525.4[M+H]⁺。
实施例11
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(2-氟-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(6.8mg，9.9％)。MS m/e＝509.4[M+H]⁺。
实施例12
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(6.1mg，8.7％)。MSm/e＝521.4[M+H]⁺。
实施例13
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(6，7-二甲氧基-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基)-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用6，7-二甲氧基-1，2，3，4-四氢-异喹啉代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(3.5mg，5.0％)。MS m/e＝522.4[M+H]⁺。
实施例14
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(4-苯基-哌啶-1-基)-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用4-苯基-哌啶代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(12.5mg，8.3％)。MS m/e＝490.5[M+H]⁺。
实施例15
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-氯-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(3-氯-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(5.6mg，7.9％)。MS m/e＝525.4[M+H]⁺。
实施例16
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(1，2-二氢-1-甲基磺酰基-螺吲哚-3-基)-哌啶-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1，2-二氢-1-(甲基磺酰基)螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(12.4mg，15.5％)。MS m/e＝594.4[M+H]⁺。
实施例17
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(5-氯-2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(5-氯-2-甲氧基-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(2.6mg，3.5％)。MS m/e＝555.4[M+H]⁺。
实施例18
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3，5-二甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(3，5-二甲氧基-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(2.3mg，3.1％)。MSm/e＝551.5[M+H]⁺。
实施例19
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2，3-二氯-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(2，3-二氯-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(1.4mg，1.8％)。MSm/e＝559.4[M+H]⁺。
实施例20
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3，5-二氯-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(3，5-二氯-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(2.7mg，3.6％)。MSm/e＝559.4[M+H]⁺。
实施例21
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-溴-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(3-溴-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(12.6mg，16％)。MS m/e＝569.3[M+H]⁺。
实施例22
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(4-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(4-甲氧基-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(1.7mg，2.4％)。MSm/e＝521.4[M+H]⁺。
实施例23
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(4-乙氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(4-乙氧基-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(1.7mg，2.4％)。MSm/e＝535.5[M+H]⁺。
实施例24
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(4-对甲苯基-哌嗪-1-基)-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-对甲苯基-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(1.8mg，2.6％)。MS m/e＝505.4[M+H]⁺。
实施例25
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3，4-二甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(3，4-二甲基-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(9.7mg，14％)。MSm/e＝519.4[M+H]⁺。
实施例26
4-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例1f所述的方法，用4-哌嗪-1-基苄腈代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(11.8mg，17％)。MS m/e＝516.5[M+H]⁺。
实施例27
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用1-(3-甲氧基-苯基)-哌嗪代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(12.3mg，17.6％)。MSm/e＝521.4[M+H]⁺。
实施例28
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(4-甲基-哌啶-1-基)-甲酮
按照实施例1f所述的方法，用4-甲基-哌啶代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(12.5mg，24％)。MS m/e＝428.5[M+H]⁺。
实施例29
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-3-甲酸乙酯
按照实施例1f所述的方法，用哌啶-3-甲酸乙酯代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成无色油状标题产物[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-3-甲酸乙酯(9.7mg，16％的收率)。MS m/e＝486.6[M+H]⁺。
实施例30
[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-甲酸乙酯
按照实施例1f所述的方法，用哌啶-4-甲酸乙酯代替2-哌嗪-1-基-苄腈，将1-苄基-4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氟-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(60.0mg，0.134mmol)转化成无色油状标题产物[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-3-甲酸乙酯(8.7mg，14％的收率)。MS m/e＝486.6[M+H]⁺。
实施例31
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
a)4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯
将L-羟基脯氨酸(10.0g，76.2mmol)在80ml 10％Na₂CO₃水溶液中的溶液滴加到Boc-酐(15.8g，72.4mmol)的44ml 10∶1 THF/二恶烷溶液中并将混合物搅拌过夜。除去THF后，将混合物用Et₂O洗涤，冷却至0度并用3N HCl酸化至pH＝2。将水溶液用EA萃取，将有机层干燥并浓缩得到黄色油状4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯，12g(68％)。MS m/e＝322.1[M+H]⁺。
b)2-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(3.7g，0.016mol)、EDC.HCl(6.14g，0.32mol)、HOBT(2.16g，0.16mol)、2-哌嗪-1-基-苄腈(3g，0.16mmol)和Et₃N(4.85ml)在干燥DCM(50ml)中的混合物搅拌过夜。除去溶剂后，将残余物通过柱色谱纯化(EA∶PE＝1∶1)得到白色固体状产物2-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，4g(63％)。MS m/e＝401.1[M+H]⁺。
c)2-[4-(4-羟基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈
将2-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯溶于50ml DCM/CF₃COOH(4∶1)并搅拌过夜。将溶液浓缩得到棕色油状产物2-[4-(4-羟基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈，2.1g(100％)。MS m/e＝301.1[M+H]⁺。
d)2-[4-(1-苄基-4-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈
将2-[4-(4-羟基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(2.1g，7mmol)溶于DCM(20mL)，然后加入苯甲醛(1.11g，10.5mmol)和NaBH(OAc)₃(2.95g，14mmol)。搅拌过夜后将反应混合物用DCM稀释，小心地用NaHCO₃水溶液洗涤，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。将残余物通过快速柱色谱纯化得到黄色油状标题产物2-[4-(1-苄基-4-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈8g(67％)。MS m/e＝391.2[M+H]⁺。
e)2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈
将草酰氯(0.89g，7mmol)在-78度下滴加到无水DCM(50mL)和DMSO(0.72g，9.2mmol)的溶液中。将反应混合物搅拌30分钟，然后滴加醇(1.8g，4.6mmol)的DCM(50mL)溶液并保持反应温度在-60度以下。一旦加入完成就将反应混合物在-78度下搅拌2小时，然后滴加三乙胺。加入完成后将混合物升温至室温并搅拌过夜。将水(10mL)加入到反应混合物中，然后将pH用饱和NaHCO₃调节至10并将产物用DCM萃取。合并有机相，用盐水洗涤，用K₂CO₃干燥并浓缩得到棕色油状产物2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(1.5g，83％)。MS m/e＝389.2[M+H]⁺。
f)2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(50mg，0.129mmol)和3，5-二-三氟甲基-苄基胺(34.5mg，0.141mmol)溶于干燥的DCM(2mL)，然后加入乙酸(0.1mL)和NaBH(OAc)₃(27.3mg，0.258mmol)。搅拌3小时后将反应混合物用DCM稀释，用NaHCO₃水溶液洗涤，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。将残余物通过制备型-LCMS纯化得到油状标题产物2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，7.8mg(9％)。MS m/e＝616.4[M+H]⁺。
实施例32
2-(4-{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(10.9mg，12.3％)。MS m/e＝630.4[M+H]⁺。
实施例33
2-(4-{(2S，4S)-1-苄基-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用(2，4-二氟-苄基)-甲基-胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(9.5mg，12.7％)。MSm/e＝530.4[M+H]⁺。
实施例34
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二甲氧基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用3，5-二甲氧基-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(14.3mg，18.8％)。MS m/e＝540.4[M+H]⁺。
实施例35
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2-甲氧基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用2-甲氧基-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(6.7mg，9.3％)。MS m/e＝510.4[M+H]⁺。
实施例36
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用2-三氟甲基-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(11mg，14.2％)。MS m/e＝548.3[M+H]⁺。
实施例37
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2，3-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用2，3-二氟-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(5.1mg，7％)。MS m/e＝516.3[M+H]⁺。
实施例38
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2-氯-5-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用2-氯-5-三氟甲基-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(5.5mg，6.7％)。MSm/e＝582.3[M+H]⁺。
实施例39
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2-氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用2-氟-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(2mg，2.8％)。MS m/e＝498.4[M+H]⁺。
实施例40
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3-氯-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用3-氯-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(4.3mg，5.9％)。MS m/e＝514.3[M+H]⁺。
实施例41
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(4-三氟甲氧基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用4-三氟甲氧基-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(2.3mg，2.9％)。MS m/e＝564.4[M+H]⁺。
实施例42
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二氯-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用3，5-二氯-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(9.5mg，12.3％)。MS m/e＝548.3[M+H]⁺。
实施例43
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2-氯-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用2-氯-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(10mg，13.8％)。MS m/e＝548.3[M+H]⁺。
实施例44
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(2-溴-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用2-溴-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(7.2mg，9.1％)。MS m/e＝560.3[M+H]⁺。
实施例45
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3-氯-4-氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用3-氯-4-氟-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(4.5mg，4.5％)。MS m/e＝532.5[M+H]⁺。
实施例46
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用3，4-二氟-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(2.2mg，3.0％)。MS m/e＝516.4[M+H]⁺。
实施例47
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(4-氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用4-氟-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(4.0mg，5.7％)。MS m/e＝498.4[M+H]⁺。
实施例48
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，4-二氯-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用3，4-二氯-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(7.1mg，9.2％)。MS m/e＝548.3[M+H]⁺。
实施例49
2-{4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3-氯-2-氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用3-氯-2-氟-苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(6.6mg，6.6％)。MS m/e＝532.4[M+H]⁺。
实施例50
2-[4-((2S，4S)-1-苄基-4-苄基氨基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈
按照实施例31f所述的方法，用苄基胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将2-[4-(1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-4-基]-苄腈(50.0mg，0.129mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(1.2mg，1.8％)。MS m/e＝480.4[M+H]⁺。
实施例51
2-{4-[1-(2，3-二氟-苄基)-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
a)4-[(2，4-二氟-苄基)-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
向4-[(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(7g，18.9mmol)的冷却至0度的干燥DCM(100ml)溶液中滴加TrocCl(6.02g，28.4mmol)和TEA(5.22ml，37.8mmol)。将混合物搅拌过夜，用Na₂CO₃、盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥并真空浓缩。通过硅胶色谱纯化(PE∶EA＝3∶1)得到黄色油状标题产物(8g，14.7mmol)。MS m/e＝545.2[M+H]⁺。
b)4-[(2，4-二氟-苄基)-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯
向4-[(2，4-二氟-苄基)-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(8g，14.7mmol)的冷却至0度的MeOH(50ml)溶液中加入LiOH(2.47g，58.8mmol)并将混合物搅拌过夜。除去甲醇后，将残余物用2M HCl酸化。将水层用EA萃取，将有机溶液干燥并浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化(PE∶EA＝3∶1)得到黄色油状标题产物(3.5g，6.5mmol)。MS m/e＝531.2[M+H]⁺。
c)2-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-4-[(2，4-二氟-苄基)-(2，2，2-三氯乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向4-[(2，4-二氟-苄基)-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(3.5g，6.6mmol)、HOBt(1.4g，10mmol)、1-(2-氰基苯基)哌嗪(1.5g，7.9mmol)的DCM(50ml)溶液中加入Et₃N(1.8ml，13.2mmol)和EDC.HCl(1.9g，10mmol)。将混合物搅拌过夜，然后用10％柠檬酸、Na₂CO₃、盐水洗涤，干燥并浓缩得到无色油状标题产物(4.5g，6.4mmol)。MS m/e＝700.3[M+H]⁺。
d){5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-(2，4-二氟-苄基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯
将2-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-4-[(2，4-二氟-苄基)-(2，2，2-三氯乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.5g，6.4mmol)和CF₃COOH(3.65g，32mmol)的混合物在室温下搅拌5小时，然后浓缩得到深黄色油状粗产物(3.5g，5.8mmol)。MS m/e＝600.2[M+H]⁺。
e){1-(2，3-二氟-苄基)-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-(2，4-二氟-苄基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯
将{5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-(2，4-二氟-苄基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(0.078g，0.13mmol)、2，3-二氟苯甲醛和乙酸(催化量)在DCM(5ml)中的混合物搅拌20分钟，然后小心地加入NaBH(OAc)₃(0.041g，0.13mmol)。将反应混合物搅拌过夜并浓缩得到粗产物，该粗产物可直接用于下一步骤。
f)2-{4-[1-(2，3-二氟-苄基)-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
将{1-(2，3-二氟-苄基)-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-(2，4-二氟-苄基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(0.13mmol)和Zn(0.068g，1.04mmol)溶于MeOH(5ml)并将pH用乙酸调节至5-6。将混合物加热回流并搅拌30分钟。除去甲醇后，将残余物通过HPLC纯化得到黄色油状的最终产物(5.5mg，0.01mmol)，收率为8％。MS m/e＝552.4[M+H]⁺。
实施例52
2-{4-[4-(2，4-二氟-苄基氨基)-1-(2-氟-苄基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例51所述的方法，用2-氟苯甲醛代替2，3-二氟苯甲醛得到黄色油状的2-{4-[4-(2，4-二氟-苄基氨基)-1-(2-氟-苄基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，收率为23％。MS m/e＝534.5[M+H]⁺。
实施例53
2-{4-[1-(3-氯-苄基)-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例51所述的方法，用3-氯苯甲醛代替2，3-二氟苯甲醛得到黄色油状的2-{4-[1-(3-氯-苄基)-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，收率为12％。MS m/e＝550.3[M+H]⁺。
实施例54
2-{4-[4-(2，4-二氟-苄基氨基)-1-(3-氟-苄基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例51所述的方法，用3-氟苯甲醛代替2，3-二氟苯甲醛得到黄色油状的2-{4-[4-(2，4-二氟-苄基氨基)-1-(3-氟-苄基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，收率为14％。MS m/e＝534.3[M+H]⁺。
实施例55
2-{4-[1-(2-氯-苄基)-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例51所述的方法，用2-氯苯甲醛代替2，3-二氟苯甲醛得到黄色油状的2-{4-[1-(2-氯-苄基)-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈，收率为9.8％。MS m/e＝550.3[M+H]⁺。
实施例56
[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
a)1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯
将冷却至0℃的1-苄基-4-羟基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(12.13g，49.5mmol)的250mL DCM溶液用三氯异氰尿酸(11.48g，49.5mmol)和TEMPO(770mg，4.95mmol)处理，然后将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将混合物用DCM稀释并用饱和NaHCO₃水溶液、1M HCl和盐水洗涤。将有机层用Na₂SO₄干燥并浓缩得到无色油状产物1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯11.5g(96％)。MS m/e＝234.3[M+H]⁺。
b)1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸甲酯
将1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯(100mg，0.428mmmol)和3，5-二-三氟甲基-苄基胺(125mg，0.514mmol)溶于干燥的DCM(2mL)，然后加入乙酸(0.1mL)和NaBH(OAc)₃(180.6mg，0.856mmol)。搅拌3小时后将反应混合物用DCM稀释，小心地用饱和NaHCO₃洗涤，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。将残余物通过快速柱色谱纯化得到黄色油状标题产物1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸甲酯124mg(63％)。MS m/e＝461.2[M+H]⁺。
c)1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸
将1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸甲酯(124mg，0.269mmol)和LiOH(53.9mg，1.5mmol)溶于THF/H₂O(4mL)，然后搅拌过夜。除去溶剂后，将残余物中和至pH＝6-7，然后用EA萃取两次。将有机层用水和盐水洗涤，干燥并浓缩得到黄色固体状标题产物1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸，65mg(54.2％)。MS m/e＝447.3[M+H]⁺。
d)[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
将1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸(65mg，0.146mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(54.5.0mg，0.292mmol)、N-羟基苯并三唑(20.7mg，0.146mmol)和1-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪(29.67mg，0.219mmol)、三乙胺(0.08ml)在干燥二氯甲烷(2mL)中的混合物搅拌过夜，然后浓缩。将残余物通过反相制备型HPLC纯化，用乙腈/水[0.1％氨水(25％)]梯度洗脱得到浅黄色油状标题化合物(10.2mg，10.6％)。MS m/e＝659.4[M+H]⁺。
实施例57
{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-基}-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例56b和56d所述的方法，用(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺并且用1-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪代替1-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪，将1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯(100mg，0.428mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(11.3mg，12.2％)。MS m/e＝635.5[M+H]⁺。
实施例58
{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-基}-(4-间甲苯基-哌嗪-1-基)-甲酮
按照实施例56b和56d所述的方法，用(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺并且用1-间甲苯基-哌嗪代替1-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪，将1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯(100mg，0.428mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(12.1mg，13.4％)。MS m/e＝619.4[M+H]⁺。
实施例59
4-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-甲酸乙酯
按照实施例56d所述的方法，用哌嗪-1-甲酸乙酯代替1-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪，将1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸(65mg，0.146mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(6.8mg，7.5％)。MS m/e＝587.3[M+H]⁺。
实施例60
[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-(4-间甲苯基-哌嗪-1-基)-甲酮
按照实施例56d所述的方法，用1-间甲苯基-哌嗪代替1-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪，将1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸(65mg，0.146mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(7.5mg，8.5％)。MS m/e＝605.4[M+H]⁺。
实施例61
(4-苯甲酰基-哌嗪-1-基)-[(2S，4S)-1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-甲酮
按照实施例56d所述的方法，用苯基-哌嗪-1-基-甲酮代替1-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪，将1-苄基-4-(3，5-二-三氟甲基-苄基氨基)-吡咯烷-2-甲酸(65mg，0.146mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(10.9mg，12.1％)。MSm/e＝619.4[M+H]⁺。
实施例62
{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-基}-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例56b和56d所述的方法，用(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺，将1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯(100mg，0.428mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(9.9mg，10.1％)。MS m/e＝673.4[M+H]⁺。
实施例63
{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-基}-[4-(2-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例56b和56d所述的方法，用(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-胺代替3，5-二-三氟甲基-苄基胺并且用1-(2-氟-苯基)-哌嗪代替1-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪，将1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯(100mg，0.428mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(5.5mg，6.0％)。MS m/e＝623.4[M+H]⁺。
实施例64
8-{(2S，4S)-1-(3-氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮
a)(2S，4R)-1-(3-氯-苄基)-4-羟基-吡咯烷-2-甲酸甲酯
将1-氯-3-氯甲基-苯(15.2ml，120mmol)加入到4-羟基-吡咯烷-2-甲酸甲酯盐酸盐(14.5g，80mmol)和三乙胺(18.6g，180mmol)在二氯甲烷(120ml)中的混合物中。将反应混合物回流过夜。冷却后加入1M氢氧化钠水溶液并将混合物用二氯甲烷萃取。将萃取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩并通过硅胶色谱纯化(己烷/EA＝5∶1至己烷/EA＝3∶1)得到14g黄色油状的标题产物，收率为65％。MS m/e＝270.7[M+H]⁺。
b)(S)-1-(3-氯-苄基)-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯
将草酰氯(3.8g，30mmol)在-78℃下滴加到无水CH₂Cl₂(30mL)和DMSO(3.13g，40mmol)的溶液中。使反应混合物平衡10分钟，然后以将反应温度保持在低于-60℃的速率滴加醇(5.4g，20mmol)的CH₂Cl₂(30mL)溶液。加入完成后，将反应混合物在-78℃下搅拌2小时，然后滴加三乙胺(60mmol)。加入完成后，将反应混合物升温至室温。将H₂O(50mL)加入到反应混合物中，将pH用饱和NaHCO₃水溶液调节至10并将产物用DCM萃取(3×20mL)。将所有有机相合并，用盐水洗涤，用K₂CO₃干燥并真空浓缩得到粗产物(5.4g)，收率为100％。MS m/e＝268.7[M+H]⁺。
c)(2S，4S)-1-(3-氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯
将酮(0.803g，3mmol)、(2，4-二氟-苄基)-甲基-胺(0.71g，4.5mmol)和乙酸(催化量)溶于DCM(20ml)并将混合物搅拌20分钟。冷却至0℃后小心地加入NaBH(OAc)₃(1.27g，6mmol)，然后将混合物升温至室温并搅拌过夜。将溶液用NaHCO₃水溶液、盐水洗涤，干燥并浓缩得到黄色油状粗产物(1.1g)，收率为90％。MS m/e＝409.9[M+H]⁺。
d)(2S，4S)-1-(3-氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-甲酸
向以上产物(1.2g，3mmol)的THF(2ml)和水(10ml)溶液中加入LiOH(0.63g，15mmol)并将形成的悬浮液在室温下搅拌5小时。除去THF后，将水溶液用Et₂O(10ml×2)萃取两次，然后用1M HCl酸化至pH 6-7。收集固体并用水洗涤得到标题产物(0.7g)，收率为60％。MS m/e＝395.8[M+H]⁺。
e)8-{(2S，4S)-1-(3-氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮
将酸(1mmol)、2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮(2mmol)，TBTU(1.5mmol)和DIPEA(3mmol)在DCM(20ml)中的混合物在室温下搅拌过夜。通过制备型HPLC纯化得到无色油状所需产物(73mg)，收率为12％。MS m/e＝613.2[M+H]⁺。
实施例65
2-(4-{(2S，4S)-1-(3-氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
按照实施例64e所述的方法，用2-哌嗪-1-基-苄腈代替2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮，将(2S，4S)-1-(3-氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(1mmol)转化成无色油状标题化合物(51mg)，收率为9％。MS m/e＝565.1[M+H]⁺。
实施例66
{(2S，4S)-1-(3-氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-基}-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例64e所述的方法，用1-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪代替2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮，将(2S，4S)-1-(3-氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(1mmol)转化成无色油状标题化合物(40mg)，收率为7％。MS m/e＝570.1[M+H]⁺。
实施例67
2-环己基-8-{(2S，4S)-1-(3，4-二氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮
a)(2S，4R)-1-(3，4-二氯-苄基)-4-羟基-吡咯烷-2-甲酸甲酯
按照实施例64a所述的方法，用1，2-二氯-4-氯甲基-苯代替1-氯-3-氯甲基-苯，将4-羟基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(10mmol)转化成黄色油状标题化合物(2.14g)，收率为70％。MS m/e＝305.2[M+H]⁺。
b)(S)-1-(3，4-二氯-苄基)-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯
按照实施例64b所述的方法，将(2S，4R)-1-(3，4-二氯-苄基)-4-羟基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(7mmol)转化成黄色油状标题化合物(2.12g)，收率为100％。MS m/e＝303.2[M+H]⁺。
c)(2S，4S)-1-(3，4-二氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯
按照实施例64b所述的方法，将(S)-1-(3，4-二氯-苄基)-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯(7mmol)转化成黄色油状标题化合物(2.8g)，收率为90％，MSm/e＝444.3[M+H]⁺。
d)(2S，4S)-1-(3，4-二氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-甲酸
按照实施例64d所述的方法，将(2S，4S)-1-(3，4-二氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯(6.3mmol)转化成白色固体状标题化合物(1.63g)，收率为60％。MS m/e＝430.3[M+H]⁺。
e)2-环己基-8-{(2S，4S)-1-(3，4-二氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮
按照实施例64e所述的方法，用2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮，将(2S，4S)-1-(3，4-二氯-苄基)-4-[(2，4-二氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(1mmol)转化成标题化合物，通过制备型HPLC纯化得到无色油状标题化合物(38.8mg)，收率为6％。MS m/e＝647.6[M+H]⁺。
实施例68
[(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
a)(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-甲酸甲酯
按照实施例64c所述的方法，用(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-胺代替(2，4-二氟苄基)-甲基-胺，将(S)-1-(3-氯-苄基)-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯(7mmol)转化成黄色油状标题产物，收率为95％。MS m/e＝509.9[M+H]⁺。
b)(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-甲酸
按照实施例64d所述的方法，得到白色固体状的(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-甲酸，收率为65％。MSm/e＝495.9[M+H]⁺。
c)[(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例64e所述的方法，用4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪代替2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮，将[(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-甲酸(1mmol)转化成无色油状标题产物(71mg)，收率为10％。MS m/e＝708.1[M+H]⁺。
实施例69
2-{4-[4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例64e所述的方法，用2-哌嗪-1-基-苄腈代替2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮，将(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-甲酸(1mmol)转化成无色油状标题化合物(73.1mg)，收率为11％。MS m/e＝665.1[M+H]⁺。
实施例70
[(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-氟-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例64e所述的方法，用1-(2-氟-苯基)-哌嗪代替2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮，将(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-甲酸(1mmol)转化成无色油状标题化合物(72mg)，收率为11％。MS m/e＝658.1[M+H]⁺。
实施例71
[(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例64e所述的方法，用1-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪代替2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮，将(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-甲酸(1mmol)转化成无色油状标题化合物(53.6mg)，收率为8％。MS m/e＝670.1[M+H]⁺。
实施例72
[(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-基]-(4-间甲苯基-哌嗪-1-基)-甲酮
按照实施例64e所述的方法，用4-间甲苯基-哌嗪代替2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮，将(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(3-氯-苄基)-吡咯烷-2-甲酸(1mmol)转化成无色油状标题化合物(52.3mg)，收率为8％。MS m/e＝654.1[M+H]⁺。
实施例73
2-{4-[(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(4-氯-苄基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例64e所述的方法，用2-哌嗪-1-基-苄腈代替2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮，将(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(4-氯-苄基)-吡咯烷-2-甲酸(1mmol)转化成无色油状标题化合物(60mg)，收率为9％。MS m/e＝665.1[M+H]⁺。
实施例74
[(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(4-氯-苄基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例64e所述的方法，用1-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪代替2-环己基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-1-烯-4-酮，将(2S，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-1-(4-氯-苄基)-吡咯烷-2-甲酸(1mmol)转化成无色油状标题化合物(70.8mg)，收率为10％。MS m/e＝708.1[M+H]⁺。
实施例75
2-(4-{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3，4-二氯-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
a)(2S，4S)-1-苄基-4-[甲基-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸
向(2S，4S)-1-苄基-4-[甲基-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸甲酯(6.4mmol)在18mL THF和12mL甲醇中的溶液中加入NaOH(12.8mmol)的10mL水溶液并将反应混合物搅拌过夜。将溶液用40mL水稀释并用20mL EA萃取。分离出水层，用2N HCl酸化至pH＝5-6。然后将溶液用EA萃取(3×40mL)。将合并的有机层用盐水洗涤(20mL)，用Na₂SO₄干燥并浓缩得到2.6g标题产物，收率为91％。MS m/e＝410.4[M+H]⁺。
b)(1-苄基-5-{1-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-基]-羰基}-吡咯烷-3-基)-甲基-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯
将1-苄基-4-[甲基-(2，2，2-三氯-乙氧基羰基)-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(3.4mmol)、2-哌嗪-1-基-苄腈(5.1mmol)、EDC(6.8mmol)和HOBT(6.8mmol)在15mL CH₂Cl₂中的混合物搅拌5分钟，然后加入1mL Et₃N并将反应混合物在室温下搅拌12小时。通过硅胶色谱纯化后，得到1.85g黄色油状标题产物，收率为93％。MS m/e＝579.4[M+H]⁺。
c)2-[4-(1-苄基-4-甲基氨基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈
向(1-苄基-5-{1-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-基]-羰基}-吡咯烷-3-基)-甲基-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(2.7mmol)和Zn(8.3mmol)在20mL CH₂Cl₂中的混合物中加入5滴AcOH并将混合物搅拌2小时。除去Zn粉末后，将粗产物通过硅胶色谱纯化得到1g黄色油状标题产物，收率为95％。MS m/e＝404.4[M+H]⁺。
d)2-(4-{1-苄基-4-[(3，4-二氯-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
向在室温下搅拌着的2-[4-(1-苄基-4-甲基氨基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(0.1mmol)和3，4-二氯-苯甲醛(0.15mmol)在2mL CH₂Cl₂中的混合物中加入NaBH(OAc)₃(0.15mmol)和NEt₃(0.3mmol)，然后将形成的混合物搅拌过夜。通过制备型HPLC纯化后得到2.5mg无色油状的2-(4-{1-苄基-4-[(3，4-二氯-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈，收率为4.8％。MS m/e＝562.4[M+H]⁺。
实施例76
2-(4-{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3-氯-4-氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
按照实施例75d所述的方法，用3-氯-4-氟苯甲醛代替3，4-二氯苯甲醛，将2-[4-(1-苄基-4-甲基氨基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈转化成标题化合物。MS m/e＝546.3[M+H]⁺。
实施例77
2-(4-{(2S，4S)-1-苄基-4-[(2-氯苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
按照实施例75d所述的方法，用2-氯苯甲醛代替3，4-二氯苯甲醛，将2-[4-(1-苄基-4-甲基氨基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈转化成标题化合物。MS m/e＝528.4[M+H]⁺。
实施例78
2-(4-{(2S，4S)-1-苄基-4-[(3-氟苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
按照实施例75d所述的方法，用3-氟苯甲醛代替3，4-二氯苯甲醛，将2-[4-(1-苄基-4-甲基氨基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈转化成标题化合物。MS m/e＝512.5[M+H]⁺。
实施例79
2-(4-{1-苄基-4-[甲基-(3-三氟甲基-苄基)-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
按照实施例75d所述的方法，用3-(三氟甲基)苯甲醛代替3，4-二氯苯甲醛，将2-[4-(1-苄基-4-甲基氨基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈转化成标题化合物。MS m/e＝562.5[M+H]⁺。
实施例80
2-(4-{1-苄基-4-[(2-氯-5-三氟甲基-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
将2-[4-(1-苄基-4-甲基氨基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(0.1mmol)、1-溴甲基-2-氯-5-三氟苯(0.1mmol)和NaOH(0.2mmol)在2ml干燥DMF中的混合物搅拌过夜，随后进行反相制备型HPLC纯化，用乙腈/水(0.05％NEt₃)梯度洗脱。得到12.2mg黄色粉末状标题化合物，收率为21.4％。MS m/e＝569.4([M+H]⁺。
实施例81
2-(4-{1-苄基-4-[(3-溴-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
a)1-苄基-4-[(3-溴-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-甲酸
向1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯(1mmol)、(3-溴-苄基)-甲基-胺(1mmol)的2mL CH₂Cl₂溶液中加入NaBH(OAc)₃(2mmol)和5滴AcOH并将形成的混合物搅拌3小时。将混合物用NaHCO₃水溶液处理，用CH₂Cl₂萃取(3×5mL)，将合并的萃取液用盐水(10mL)洗涤，用Na₂SO₄干燥并浓缩得到261.3mg粗产物，收率为65％。MS m/e＝403.3[M+H]⁺。
b)2-(4-{1-苄基-4-[(3-溴-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
向搅拌着的1-苄基-4-[(3-溴-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-甲酸(0.2mmol)、EDC(0.3mmol)和HOBT(0.3mmol)在3mL干燥DMF中的混合物中加入2-哌嗪-1-基-苄腈(0.24mmol)和NEt₃(0.6mmol)并将反应混合物搅拌过夜，随后进行反相制备型HPLC纯化，用乙腈/水(0.05％NEt₃)梯度洗脱。得到17.5mg棕色油状标题产物，收率为15.2％。MS m/e＝574.3[M+H]⁺。
实施例82
2-(4-{1-苄基-4-[(4-氟-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
按照实施例81所述的方法，用(4-氟-苄基)-甲基-胺代替(3-溴-苄基)-甲基-胺，将1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯转化成标题产物。MS m/e＝512.4[M+H]⁺。
实施例83
2-(4-{1-苄基-4-[(2-溴-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
按照实施例81所述的方法，用(2-溴-苄基)-甲基-胺代替(3-溴-苄基)-甲基-胺，将1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯转化成标题产物。MS m/e＝574.3[M+H]⁺。
实施例84
2-(4-{1-苄基-4-[(4-溴-苄基)-甲基-氨基]-吡咯烷-2-羰基}-哌嗪-1-基)-苄腈
按照实施例81所述的方法，用(4-溴-苄基)-甲基-胺代替(3-溴-苄基)-甲基-胺，将1-苄基-4-氧代-吡咯烷-2-甲酸甲酯转化成标题产物。MS m/e＝574.3[M+H]⁺。
实施例85
[(2S，4R)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
a)(2S，4S)-4-碘-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
在N₂下，向配备有磁力搅拌棒和加液漏斗的圆底烧瓶中加入N-Boc-L-反式-4-羟基-脯氨酸甲酯(60mmol，1当量)、P(Ph)₃(72mmol，1.2当量)和无水THF(275ml)。将溶液冷却至0摄氏度，滴加DEAD(1.2当量)的干燥THF溶液，然后加入MeI(1.2当量)。在加入MeI时，溶液从深褐色变成亮黄色。将反应混合物升温至室温并搅拌10小时。减压除去溶剂并将粗品油通过硅胶色谱纯化得到无色油状标题产物(19.44g)，收率为91％。MSm/e＝356.4[M+H]⁺。
b)(2S，4R)-4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
向4-碘-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(20mmol，1当量)的DMF溶液中加入NaN₃(2.5当量，50mmol)，将形成的混合物加热至65摄氏度并搅拌过夜。将混合物用水稀释，用AcOEt萃取并用Na₂SO₄干燥。除去溶剂后，将残余物通过硅胶色谱纯化得到无色油状标题产物(4.94g)，收率为90％。MS m/e＝271.5[M+H]⁺。
c)(2S，4R)-4-氨基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
将4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(838mg，2.2mmol)、THF(10ml)和P(Ph)₃(1.15g，4.4mmol)和水(0.08ml，4.4mmol)的溶液回流6小时，然后真空浓缩。将残余物溶于Et₂O并用HCl(0.1N，20ml)处理。将水层用Et₂O萃取，用Na₂CO₃(10％水溶液)洗涤，用无水MgSO₄干燥并浓缩得到无色油状的胺，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。
d)(2S，4R)-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
向4-氨基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(2mmol，1当量)的冷却至0摄氏度的干燥DCM(20ml)溶液中加入2，4-二氟苯甲醛(1.05当量)，然后加入NaBH(OAc)₃(2当量)和5滴HOAc。将混合物升温至室温并搅拌过夜。将混合物用DCM稀释，用盐水洗涤并用无水硫酸钠干燥。除去溶剂后，粗产物不经进一步纯化即可用于下一步骤。MS m/e＝371.4[M+H]⁺。
e)(2S，4R)-4-[(2，4-二氟-苄基)-Troc-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
向4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(2mmol，1当量)的冷却至0摄氏度的DCM溶液中滴加TrocCl(1.5当量)，然后滴加Et₃N(2当量)。将混合物在室温下搅拌过夜并浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化得到无色油状产物(1.0g)，收率为92％。MS m/e＝545.3[M+H]⁺。
f)(2S，4R)-4-[(2，4-二氟-苄基)-Troc-氨基]-吡咯烷甲酯
向4-[(2，4-二氟-苄基)-Troc-氨基]-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(1.5mmol，1当量)的冷却至0摄氏度的DCM(10ml)溶液中加入TFA(1.5当量)。将混合物搅拌30分钟，用NaHCO₃洗涤并用Na₂SO₄干燥。将有机层浓缩得到油状粗产物，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。MS m/e＝445.5[M+H]⁺。
g)(2S，4R)-1-苄基-4-[(2，4-二氟-苄基)-Troc-氨基]-吡咯烷甲酯
向4-[(2，4-二氟-苄基)-Troc-氨基]-吡咯烷甲酯(1.5mmol，1当量)的冷却至0摄氏度的干燥DCM(20ml)溶液中加入苯甲醛(1.2当量)、NaBH(OAc)₃(2当量)和5滴HOAc。将形成的混合物升温至室温并搅拌过夜。将反应溶液用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并浓缩得到粗产物，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。MS m/e＝535.4[M+H]⁺。
h)(2S，4R)-1-苄基-4-[(2，4-二氟-苄基)-Troc-氨基]-吡咯烷
向1-苄基-4-[(2，4-二氟-苄基)-Troc-氨基]-吡咯烷甲酯(1.5mmol，1当量)的甲醇(10ml)溶液中加入LiOH(5当量)。将混合物搅拌过夜，酸化至pH＝5并用DCM萃取。将有机层干燥并浓缩得到粗产物，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。MS m/e＝519.2[M-H]^-。
i){(2S，4R)-1-苄基-[4-(2，4-二氟-苄基)-Troc-氨基]-吡咯烷-2-基}-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
将1-苄基-4-[(2，4-二氟-苄基)-Troc-氨基]-吡咯烷(1.5mmol，1当量)、EDCI(1.1当量)、HOBt(1.1当量)、Et₃N(1.5当量)和2-甲氧基-苯基哌嗪(1.1当量)在DCM中的混合物在室温下搅拌过夜。浓缩混合物得到用于下一步骤的粗产物。MS m/e＝695.4[M+H]⁺。
j)[(2S，4R)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
向{1-苄基-[4-(2，4-二氟-苄基)-Troc-氨基]-吡咯烷-2-基}-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮(0.2mmol，1当量)的MeOH溶液中加入Zn粉(2mmol，10当量)和5滴HOAc并将混合物回流过夜。通过制备型HPLC得到最终产物(11.9mg)，收率为11％。MS m/e＝521.5[M+H]⁺。
实施例86
[(2S，4R)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(2-氟苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例85所述的方法，用2-氟苯基哌嗪代替2-甲氧基-苯基哌嗪得到白色粉末状标题化合物(3.6mg)。MS m/e＝509.4[M+H]⁺。
实施例87
[(2S，4R)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-基]-[4-(3-三氟甲基-苯基)-哌嗪-1-基]-甲酮
按照实施例85所述的方法，用3-三氟甲基-苯基哌嗪代替2-甲氧基-苯基哌嗪得到白色粉末状标题化合物(5.0mg)。MS m/e＝559.5[M+H]⁺。
实施例88
2-{4-[(2S，4R)-1-苄基-4-(2，4-二氟-苄基氨基)-吡咯烷-2-羰基]-哌嗪-1-基}-苄腈
按照实施例85所述的方法，用2-氰基-苯基哌嗪代替2-甲氧基-苯基哌嗪得到白色粉末状标题化合物(6.8mg)。MS m/e＝516.4[M+H]⁺。
实施例89
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2-氯-苯甲酰胺
a)1-苄基-4-叔丁氧基羰基氨基-吡咯烷-2-甲酸甲酯
向4-叠氮基-1-苄基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(4.36g，16.8mmol)的THF(30mL)溶液中在惰性气氛下加入三苯基膦(8.81g，33.6mmol)和水(0.756g，42mmol)。将混合物回流搅拌6小时。除去THF后，将残余物溶于Et₂O，用0.15N HCl水溶液处理，继续搅拌5分钟。将溶液用Et₂O萃取两次，然后将水层用10％NaHCO₃中和至pH＞10并用DCM萃取。除去溶剂得到黄色油，然后溶于H₂O(20mL)，用(Boc)₂O(2.6g，12.3mmol)处理并搅拌过夜。将产物用EA萃取，用水和盐水洗涤，干燥并浓缩得到黄色油状标题产物1-苄基-4-叔丁氧基羰基氨基-吡咯烷-2-甲酸甲酯3.15g(59％)。MS m/e＝335.2[M+H]⁺。
h)1-苄基-4-叔丁氧基羰基氨基-吡咯烷-2-甲酸
将1-苄基-4-叔丁氧基羰基氨基-吡咯烷-2-甲酸甲酯(3g，8.97mmol)和LiOH(1.8g，43，95mmol)溶于THF/H₂O(40mL)并将形成的混合物在室温下搅拌5小时。除去THF后，将pH调节至6-7。收集固体并干燥得到白色固体状标题产物1-苄基-4-叔丁氧基羰基氨基-吡咯烷-2-甲酸2.2g(78％)。MS m/e＝321.2[M+H]⁺
c){1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}氨基甲酸叔丁酯
将1-苄基-4-叔丁氧基羰基氨基-吡咯烷-2-甲酸(1.8g，5.62mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(2.15g，11.24mmol)、N-羟基苯并三唑(0.759g，5.62mmol)、2-哌嗪-1-基-苄腈(1.58g，8.43mmol)和三乙胺(1.7g，16.86mmol)在干燥DCM(10mL)中的混合物搅拌过夜。将粗产物通过柱色谱纯化(己烷/AcOEt＝4∶1)得到白色固体状标题产物{1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}氨基甲酸叔丁酯2g(74％)。MS m/e＝490.2[M+H]⁺
d)2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈
将{1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}氨基甲酸叔丁酯(2g，4mmol)溶于15mL DCM/CF₃COOH(2∶1)，搅拌过夜。除去溶剂后，将残余物用饱和NaHCO₃处理，用EA萃取(2×100mL)。将有机层用Na₂SO₄干燥，浓缩得到棕色油状标题产物2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈1.6g(100％)。MS m/e＝390.2[M+H]⁺。
e)N-{(S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2-氯-苯甲酰胺
向2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈和2-氯-苯甲酰氯在DCM(1mL)中的混合物中加入三乙胺(0.384mmol)并将形成的混合物搅拌过夜，然后浓缩。将残余物通过反相制备型HPLC纯化，用乙腈/水[0.1％氨水(25％)]梯度洗脱得到浅黄色油状标题化合物(6.7mg，9.9％)。MS m/e＝528.3[M+H]⁺。
实施例90
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-3，5-二氯-苯甲酰胺
按照实施例89e所述的方法，用3，5-二氯-苯甲酰氯代替2-氯-苯甲酰氯，将2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(50.0mg，0.128mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(8.3mg，11.5％)。MS m/e＝562.2[M+H]⁺。
实施例91
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2，6-二氯-苯甲酰胺
按照实施例89e所述的方法，用2，6-二氯-苯甲酰氯代替2-氯-苯甲酰氯，将2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(50.0mg，0.128mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(15mg，20％)。MS m/e＝562.2[M+H]⁺。
实施例92
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-3，4-二氯-苯甲酰胺
按照实施例89e所述的方法，用3，4-二氯-苯甲酰氯代替2-氯-苯甲酰氯，将2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(50.0mg，0.128mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(13mg，18.1％)。MS m/e＝562.2[M+H]⁺。
实施例93
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-3-甲氧基-苯甲酰胺
按照实施例89e所述的方法，用3-甲氧基-苯甲酰氯代替2-氯-苯甲酰氯，将2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(50.0mg，0.128mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(5.5mg，8.2％)。MS m/e＝524.3[M+H]⁺。
实施例94
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2-三氟甲基-苯甲酰胺
按照实施例89e所述的方法，用2-三氟甲基-苯甲酰氯代替2-氯-苯甲酰氯，将2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(50.0mg，0.128mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(15.5mg，21.5％)。MS m/e＝561.6[M+H]⁺。
实施例95
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-3-甲基-苯甲酰胺
按照实施例89e所述的方法，用3-甲基-苯甲酰氯代替2-氯-苯甲酰氯，将2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(50.0mg，0.128mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(2.6mg，4％)。MS m/e＝507.6[M+H]⁺。
实施例96
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-3，4，5-三甲氧基-苯甲酰胺
按照实施例89e所述的方法，用3，4，5-三甲氧基-苯甲酰氯代替2-氯-苯甲酰氯，将2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(50.0mg，0.128mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(13.4mg，17.9％)。MS m/e＝583.7[M+H]⁺。
实施例97
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-3-氯-苯甲酰胺
按照实施例89e所述的方法，用3-氯-苯甲酰氯代替2-氯-苯甲酰氯，将2-[4-(4-氨基-1苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(50.0mg，0.128mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(4.3mg，6.4％)。MS m/e＝528.3[M+H]⁺。
实施例98
N-{(3S，5S)-1-苄基-5-[4-(2-氰基-苯基)-哌嗪-1-羰基]-吡咯烷-3-基}-2-甲氧基-苯甲酰胺
按照实施例89e所述的方法，用2-甲氧基-苯甲酰氯代替2-氯-苯甲酰氯，将2-[4-(4-氨基-1-苄基-吡咯烷-2-羰基)-哌嗪-1-基]-苄腈(50.0mg，0.128mmol)转化成浅黄色油状标题化合物(5.2mg，7.7％)。MS m/e＝524.3[M+H]⁺。