N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮及其在制备治疗抗肿瘤药物中的应用 技术领域：
本发明涉及合成抗肿瘤药物及制备方法，具体涉及合成N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮及其用于制备抗肿瘤药物的应用。
背景技术：
以4-哌啶酮为中间体与芳香醛缩合得到一系列化合物具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗过敏、治疗糖尿病等活性，但目前未有文献报道N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮及其在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。
发明内容：
本发明的目的之一在于提供一种N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮化合物。
本发明的N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮化合物通式如下：
本发明也可采用含有治疗有效量的N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮化合物和药学上可接受的载体来组成组合物。其中Ar所代表的基团为：取代苯基或杂环，苯基上的取代基可以是R1，R2，R3，R4，R5中的至少一个取代基，或者有两个取代基如R1，R3，也可以三个取代基如R3，R4，R5，最多可以有五个取代基R1，R2，R3，R4，R5，R1，R2，R3，R4，R5可以是相同的基团也可以是不同的基团，如可以R1＝R2，也可以，R1≠R2，所述的取代基优选烷基，烷氧基，卤素或硝基，最优选甲氧基，1-4个碳的烷基，氟或硝基；所述的杂环优选吡啶基，吡咯基或呋喃基，最优选3-吡啶基或2-呋喃基。
本发明目的之二在于提供N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮的制备方法。本发明的化合物N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮化合物可由芳醛或杂环醛与N-BOC-4-哌啶酮进行Claisen-Schimidt反应得到。反应方程式示意如下：
本发明目的之三在于提供N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮及其组成的组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明的N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮，可用于但不局限于作为制备治疗白血病、皮肤癌、胃癌、结肠癌、肝癌、乳腺癌或前列腺癌的药物。
根据本发明的实施方案，本发明为一种治疗癌症的药物，可以治疗的癌症的例子包括但不局限于白血病、皮肤癌、胃癌、结肠癌、肝癌、乳腺癌、前列腺癌。
本发明的有益效果为：本发明的N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮能够显著抑制多种人肿瘤细胞的增殖，见表二，说明本发明的N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮可用于作为制备治疗白血病、皮肤癌、胃癌、结肠癌、肝癌、乳腺癌或前列腺癌等的药物。而且本发明的制备方法简单，收率高，达到66％以上，最高可达到88％。
具体实施方式：
下面结合实施例对本发明进行详细说明：
合成原料：N-BOC-4-哌啶酮(又称N-叔丁氧羰基-4-哌啶酮)、芳醛、氢氧化钠、无水乙醇为国药集团化学试剂有限公司产品，核磁共振波谱仪(Bruker Avance III，400MHZ)，质谱仪(Agilent 1100LC/MSD Trap离子阱液质联用仪)；显微熔点仪(X-4，上海精密仪器厂)。
N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮的合成通法
N-Boc-4-哌啶酮0.995g(5mmol)，氢氧化钠40mg(1mmol)，无水乙醇20mL，混合后室温搅拌，待澄清后加入芳醛(10mmol)，室温下反应48小时，抽滤，滤饼用无水乙醇洗涤，真空干燥。
实施实例一
合成方法和合成条件同通法，芳醛采用2-氟苯苯甲醛；获得3，5-(E)-二(2-氟苯亚甲基)-N-Boc-哌啶-4-酮(1)黄色粉末，收率88％，mp 168～170℃，结构式见表一的No1。ESI-MS：434.3(M+Na)；1H-NMR(CDCl3，ppm)δ：7.85(2H，s，-CH＝)，7.40～7.35(4H，m，Ph-H)，7.21～7.11(4H，m，Ph-H)，4.61(s，4H，-CH2-)，1.25(s，9H，-C(CH3)3)。
实施实例二
合成方法和合成条件同通法，芳醛采用3，4-甲撑二氧基苯甲醛(胡椒醛)；获得3，5-(E)-二(3，4-甲撑二氧基苯亚甲基)-N-Boc-哌啶-4-酮(2)黄色粉末，收率80％，mp 225～228℃，结构式见表一的No2。ESI-MS：486.2(M+Na)；1H-NMR(CDCl3，ppm)δ：7.70(2H，s，-CH＝)，6.96(2H，d，J＝8Hz，Ar-H)，6.92(2H，s，Ar-H)，6.86(2H，d，J＝8Hz，Ar-H)，6.01(4H，s，O-CH2-O)，4.70(4H，s，-CH2-)，1.33(9H，s，-C(CH3)3)。
实施实例三
合成方法和合成条件同通法，芳醛采用3，4-二甲氧基苯甲醛；获得3，5-(E)-二(3，4-二甲氧基苯亚甲基)-N-Boc-哌啶-4-酮(3)黄色粉末，收率77％，mp 158～160℃，结构式见表一的No3。ESI-MS：518.3(M+Na)；1H-NMR(CDCl3，ppm)δ：7.75(2H，s，-CH＝)，7.06(2H，d，J＝8Hz，Ar-H)，6.98(2H，s，Ar-H)，6.92(2H，d，J＝8Hz，Ar-H)，4.76(4H，s，-CH2-)，3.95(12H，s，-OCH3)，1.33(9H，s，-C(CH3)3)。
实施实例四
合成方法和合成条件同通法，芳醛采用苯甲醛；获得3，5-(E)-二苯亚甲基-N-Boc-哌啶-4-酮(4)白色粉末，收率82％，mp 182～185℃，结构式见表一的No4。ESI-MS：398.2(M+Na)；1H-NMR(CDCl3，ppm)δ：7.81(2H，s，-CH＝)，7.43～7.35(10H，m，Ph-H)，4.73(4H，s，-CH2-)，1.27(9H，s，-C(CH3)3)。
实施实例五
合成方法和合成条件同通法，芳醛采用2-呋喃甲醛；获得3，5-(E)-二(2-呋喃亚甲基)-N-Boc-哌啶-4-酮(5)黄色粉末，收率85％，mp 185～187℃，结构式见表一的No5。ESI-MS：378.2(M+Na)；1H-NMR(CDCl3，ppm)δ：7.60(2H，d，J＝3.2Hz，furanyl-Hα)，7.50(2H，s，-CH＝)，6.72(2H，d，J＝1.6Hz，furanyl-Hβ′)，6.53(2H，dd，J1＝1.6Hz，J2＝3.2Hz，furanyl-Hβ)，4.89(4H，s，-CH2-)，1.42(9H，s，-C(CH3)3)。
实施实例六
合成方法和合成条件同通法，芳醛采用4-甲氧基苯甲醛；获得3，5-(E)-二(4-甲氧基苯亚甲基)-N-Boc-哌啶-4-酮(6)淡黄色粉末，收率81％，mp193-196℃，结构式见表一的No6。ESI-MS：458.2(M+Na)；1H-NMR(CDCl3，ppm)δ：7.76(2H，s，-CH＝)，7.41(4H，d，J＝8Hz，Ar-H)，6.95(4H，d，J＝8Hz，Ar-H)，4.73(4H，s，-CH2-)，3.85(6H，s，-OCH3)，1.31(9H，s，-C(CH3)3)。
实施实例七
合成方法和合成条件同通法，芳醛采用2-甲氧基苯甲醛；获得3，5-(E)-二(2-甲氧基苯亚甲基)-N-Boc-哌啶-4-酮(7)亮黄色粉末，收率66％，mp162～164℃，结构式见表一的No7。ESI-MS：458.2(M+Na)；1H-NMR(CDCl3，ppm)δ：8.00(2H，s，-CH＝)，7.36-7.24(4H，m，Ar-H)，6.99-6.91(4H，m，Ar-H)，，4.60(4H，s，-CH2-)，3.86(6H，s，-OCH3)，1.26(9H，s，-C(CH3)3)。
实施实例八
合成方法和合成条件同通法，芳醛采用2，6-二甲氧基苯甲醛；获得3，5-(E)-二(2，6-二甲氧基苯亚甲基)-N-Boc-哌啶-4-酮(8)淡黄色粉末，收率88％，mp200～203℃，结构式见表一的No8。ESI-MS：518.2(M+Na)；1H-NMR(CDCl3，ppm)δ：7.78(2H，s，-CH＝)，7.30-7.25(2H，dd，J＝8Hz，Ar-H)，6.56(4H，d，J＝8Hz，Ar-H)，4.24(4H，s，-CH2-)，3.83(12H，s，-OCH3)，1.20(9H，s，-C(CH3)3)。
实施实例九
合成方法和合成条件同通法，芳醛采用2，5-甲氧基苯甲醛；获得3，5-(E)-二(2，5-甲氧基苯亚甲基)-N-Boc-哌啶-4-酮(9)亮黄色粉末，收率82％，mp177～179℃，结构式见表一的No9。ESI-MS：518.2(M+Na)；1H-NMR(CDCl3，ppm)δ：7.95(2H，s，-CH＝)，6.91-6.83(4H，m，Ar-H)，6.79(2H，s，Ar-H)，4.59(4H，s，-CH2-)，3.80(12H，s，-OCH3)，1.26(9H，s，-C(CH3)3)。
实施实例十
合成方法和合成条件同通法，芳醛采用2，4，5-三甲氧基苯甲醛；获得3，5-(E)-二(2，4，5-三甲氧基苯亚甲基)-N-Boc-哌啶-4-酮(10)桔黄色粉末，收率80％，mp180～182℃，结构式见表一的No10。ESI-MS：578.3(M+Na)；1H-NMR(CDCl3，ppm)δ：7.98(2H，s，-CH＝)，6.82(2H，s，Ar-H)，6.54(2H，s，Ar-H)，4.63(4H，s，-CH2-)，3.86(18H，s，-OCH3)，1.30(9H，s，-C(CH3)3)。
表一N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮化合物结构式
实施例十一
体外抗肿瘤活性的检测：
使用的肿瘤细胞株有：人类慢性粒细胞白血病急变细胞K562，人原髓细胞白血病细胞HL60，人肝癌细胞HepG2，人结肠癌细胞SW1116，人结肠癌细胞SW480，人神经母细胞瘤SH-SY5Y，以上细胞均来源于中科院上海细胞库。
细胞培养于添加10％小牛血清的RPMI1640培养中，在37℃，5％CO2培养箱中培养，取对数生长期细胞用于实验。
将一定数量处于对数生长期的细胞，按一定密度接种于96孔板里(贴壁细胞待贴壁后)，实验组分别加入不同浓度的受试药物，对照组加同浓度溶剂，另设空白组(只加培养基，无细胞)，每组设三个平行孔，37℃培养48h，加入5mg/ml的MTT溶液20ul/孔，继续培养4h后，离心弃上清，加入DMSO 150ul，振荡10min，充分裂解后，用全自动酶标仪(美国BIO-RAD公司生产)检测570nm处的吸光度(OD570)值。根据吸光度计算细胞生长抑制率。细胞生长抑制率＝[OD对照-OD实验]/[OD对照-OD空白]×100％。
以同一药物的不同浓度对肿瘤细胞生长抑制率作图，可得到剂量反应曲线，根据线性回归方程求出该药物对细胞生长抑制率为50％的浓度即半数抑制浓度IC50。结果见表二，表二中的化合物编号1～10代表实施实例一～十所合成的化合物。从表二可以看到，N-Boc-3，5-(E)-二芳基-4-哌啶酮类化合物能够显著抑制多种人肿瘤细胞的增殖。本发明的保护范围不仅限于以上所述的实施例。
表二N-Boc-3，5-(E)-二芳基亚甲基-4-哌啶酮对体外培养肿瘤细胞地IC50(x±SD)