一种含1，2，3-三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物的合成方法 【技术领域】
本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种含1，2，3-三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物的合成方法。
背景技术
1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，DNJ)化学名为(2R，3R，4R，5S)-2-(羟甲基-3，4，5一三羟基)吡啶，是一种不能在人体代谢的氮杂糖[1]。1976年，Yagid等从桑树根中首次分离得到DNJ，DNJ也存在于其他植物、微生物及蚕体中，自然界以桑中含量最高。DNJ也可通过化学合成或半合成方法得到。DNJ在酶催化的糖代谢过程中与糖基中间体形成竞争，从而表现出对糖苷酶很强的抑制活性[2]。DNJ及其衍生物作为高效的糖苷酶抑制剂，具有降血糖、抗病毒、抑制肿瘤转移等作用，且细胞毒性小，在药物开发中受到广泛重视[3]。
DNJ是目前糖尿病治疗市场上唯一国际公认的零伤害生物制剂，但DNJ的来源和应用仍存在一些问题：一方面是由于天然产物中DNJ含量甚低且纯化困难，而人工合成难度又较大，成本高，目前DNJ商品大多为DNJ粗提物；另一方面是DNJ在体外实验中是糖苷酶有效的抑制剂，但体内单独作用，至少要经过质膜和内质网两个膜障碍，才能到达抑制位点，导致抑制剂在酶水平和细胞水平有所差异。近年来科学家为增加DNJ的体内活性，提高对不同酶的选择性[4]，采用多种方法对DNJ进行结构修饰，主要是在DNJ结构中引入疏水性基团以增加其亲脂性，已设计合成了大量具有不同生物活性的DNJ衍生物，部分DNJ衍生物已商品化，但大部分仍处于临床前期和研发阶段，因此开发专一性强，选择性高的新型糖苷酶抑制剂受到国内外药物化学家的高度重视。
参考文献
[1]Lillelund V H，Jensen H H，Liang X F，et al.Chem Rev，2002，102(2)，515-553。
[2]Yoshimizu M，Tajima Y，Matsuzawa F，et al.Clinica Chimica Acta，2008，391(1-2)，68-73。
[3]Kong W H，OH S H，Ahn Y R，et al.J Agric Food Chem，2008，56(8)，2613-2619。
[4]Andersson U，Reinkensmeier G，Butters T D，et al.Biochem Pharmacol，2004，67(4)，697-705。
【发明内容】
本发明的目的在于提供一类含1，2，3-三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物的合成方法。
本发明获得的最终产物为含三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物(I)，中间产物为含三氮唑的芳烃衍生物(II)和含三氮唑的环氧化合物(III)。其合成路线如下
其中R为烷基或卤素等取代基。
本发明提出的含三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物的合成方法，具体步骤如下：
(1)含三氮唑的芳烃衍生物(II)的合成
将叠氮基芳烃衍生物、丙炔醇、抗坏血酸钠、碘化亚铜加入到烧瓶中，氮气保护下，室温反应15-24h，TLC检测显示反应完成后，向反应体系内加入水，用乙酸乙酯萃取，有机相水洗，无水硫酸钠干燥，真空旋转蒸发除去乙酸乙酯，硅胶柱分离，即得所需产品；其中，叠氮基芳烃衍生物与丙炔醇的摩尔比为1∶1-1∶1.2，丙炔醇与碘化亚铜的摩尔比为1∶0.1-1∶0.2，丙炔醇与抗坏血酸钠的摩尔比为1∶0.1-1∶0.2；
(2)含三氮唑的环氧化合物(III)的合成
将环氧氯丙烷和相转移催化剂加入反应瓶中，以氢氧化钠水溶液为溶剂，常温剧烈搅拌至完全溶解，之后放入冰浴，冷却至0℃，缓慢加入步骤(1)所得的含三氮唑的芳烃衍生物，在0℃下反应8-20h，TLC检测显示反应完成后，将反应液倒入冷水中，用乙醚萃取，饱和食盐水洗至中性，有机相无水硫酸钠干燥，真空旋转蒸发除去乙醚，硅胶柱分离，即得所需产品；其中，含三氮唑的芳烃衍生物与环氧氯丙烷的摩尔比为1∶5，含三氮唑的芳烃衍生物与相转移催化剂的摩尔比为20∶1，氢氧化钠水溶液质量浓度是50％；相转移催化剂采用季胺盐；
(3)含三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物(I)的合成
将步骤(2)所得的含三氮唑的环氧化合物和1-脱氧野尻霉素加入反应瓶中，以甲醇为溶剂，室温下搅拌反应12-24h，TLC检测显示反应完成后，真空旋转蒸发除去甲醇，硅胶柱分离，即得所需产品；其中，含三氮唑的环氧化合物与1-脱氧野尻霉素的摩尔比为1∶1-1∶1.2。
本发明中，所述叠氮基芳烃衍生物为带甲基、氟等含供电子或吸电子的取代芳基，如对甲苯，对氟苯等。
本发明中，所述相转移催化剂季胺盐采用四叔丁基溴化铵(TBAB)或四叔丁基碘化铵。
利用本发明方法制备得到的含1，2，3-三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物，其结构通式如下：
其中R为烷基或卤素等取代基。
具体如下：
利用本发明方法合成的含1，2，3-三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物，具有潜在的α-葡萄糖苷酶抑制活性，同时也可以作为进一步修饰的药物中间体，具有开发成新的治疗糖尿病药物的潜在应用价值。该合成路线具有操作简便、反应条件温和、节省溶剂、减少污染等优点，便于工业化生产。
【具体实施方式】
下面通过实施例进一步说明本发明，但不能限制本发明的内容。
实施例1：
(1)含三氮唑的芳烃衍生物(II)的合成路线：
将叠氮苯(119mg，1mmol)、丙炔醇(96μL，1.2mmol)、抗坏血酸钠(20mg，0.1mmol)、碘化亚铜(19mg，0.1mmol)加入到反应瓶中，氮气保护下，室温反应24h，TLC检测显示反应完成后，向反应体系内加入水，用乙酸乙酯萃取，有机相水洗，无水硫酸钠干燥，真空旋转蒸发除去乙酸乙酯，硅胶柱分离，即得淡黄色固体114mg，收率60％。
(2)含三氮唑的环氧化合物(II)的合成路线：
将环氧氯丙烷(390μL，5mmol)，TBAB(16mg)和50％氢氧化钠水溶液(0.6mL)加入反应瓶中，常温剧烈搅拌至完全溶解，之后放入冰浴，冷却至0℃，缓慢加入步骤(1)所得的对甲基三氮唑的芳烃衍生物(189mg，1mmol)。在0℃下反应18h，TLC检测显示反应完成后，将反应液倒入冷水中，用乙醚萃取，饱和食盐水洗至中性，有机相无水硫酸钠干燥，真空旋转蒸发除去乙醚，硅胶柱分离，即得白色固体200mg，收率82％。
(3)含三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物(I)的合成路线：
将步骤(2)所得的三氮唑地环氧化合物(17mg，0.07mmol)和1-脱氧野尻霉素(10mg，0.06mmol)加入反应瓶中，以甲醇作溶剂，室温下搅拌反应16h，TLC检测显示反应完成后，真空旋转蒸发除去甲醇，硅胶柱分离，即得白色固体18mg，收率74％。
表征数据如下：
1HNMR(500MHz，D2O)：δ＝8.30(s，1H)，7.47(d，2H，J＝8.1Hz)，7.29(d，2H，J＝8.1Hz)，4.01-4.11(m，2H)，3.90(m，1H)，3.20-3.83(m，7H)，3.04(m，1H)，2.80(m，1H)，2.54(m，1H)，2.21-2.37(m，5H)。
实施例2：
(1)含三氮唑的芳烃衍生物(II)的合成路线：
将对苄基叠氮苯(133mg，1mmol)、丙炔醇(96μL，1.2mmol)、抗坏血酸钠(20mg，0.1mmol)、碘化亚铜(19mg，0.1mmol)加入到反应瓶中，氮气保护下，室温反应24h，TLC检测显示反应完成后，向反应体系内加入水，用乙酸乙酯萃取，有机相水洗，无水硫酸钠干燥，真空旋转蒸发除去乙酸乙酯，硅胶柱分离，即得淡黄色固体142mg，收率75％。
(2)含三氮唑的环氧化合物(II)的合成路线：
将环氧氯丙烷(390μL，5mmol)，TBAB(16mg)和50％氢氧化钠水溶液(0.6mL)加入反应瓶中，常温剧烈搅拌至完全溶解，之后放入冰浴，冷却至0℃，缓慢加入步骤(1)所得的苄基三氮唑的衍生物(189mg，1mmol)。在0℃下反应8h，TLC检测显示反应完成后，将反应液倒入冷水中，用乙醚萃取，饱和食盐水洗至中性，有机相无水硫酸钠干燥，真空旋转蒸发除去乙醚，硅胶柱分离，即得黄色油状液体200mg，收率82％。
(3)含三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物(I)的合成路线：
将步骤(2)所得的三氮唑的环氧化合物(17mg，0.07mmol)和1-脱氧野尻霉素(10mg，0.06mmol)加入反应瓶中，以甲醇作溶剂，室温下搅拌反应24h，TLC检测显示反应完成后，真空旋转蒸发除去甲醇，硅胶柱分离，即得淡黄色固体16mg，收率57％。
表征数据如下：
1HNMR(500MHz，D2O)：δ＝7.98(s，1H)，7.35(m，5H)，5.54(d，2H，JH-H＝5.5Hz)，4.25(m，2H)，3.93(m，1H)，3.72(m，2H)，3.08(m，1H)，2.73(m，1H)，2.46(m，1H)，2.25(m，2H)。
实施例3：
(1)含三氮唑的芳烃衍生物(II)的合成路线：
将对氟叠氮苯(137mg，1mmol)、丙炔醇(96μL，1.2mmol)、抗坏血酸钠(20mg，0.1mmol)、碘化亚铜(19mg，0.1mmol)加入到反应瓶中，氮气保护下，室温反应24h，TLC检测显示反应完成后，向反应体系内加入水，用乙酸乙酯萃取，有机相水洗，无水硫酸钠干燥，真空旋转蒸发除去乙酸乙酯，硅胶柱分离，即得黄色固体172mg，收率89％。
(2)含三氮唑的环氧化合物(II)的合成路线：
将环氧氯丙烷(390μL，5mmol)，TBAB(16mg)和50％氢氧化钠水溶液(0.6mL)加入反应瓶中，常温剧烈搅拌至完全溶解，之后放入冰浴，冷却至0℃，缓慢加入步骤(1)所得的对氟苯基三氮唑的衍生物(193mg，1mmol)。在0℃下反应20h，TLC检测显示反应完成后，将反应液倒入冷水中，用乙醚萃取，饱和食盐水洗至中性，有机相无水硫酸钠干燥，真空旋转蒸发除去乙醚，硅胶柱分离，即得淡黄色液体221mg，收率89％。
(3)含三氮唑的1-脱氧野尻霉素衍生物(I)的合成路线：
将步骤(2)所得的三氮唑的环氧化合物(17mg，0.07mmol)和1-脱氧野尻霉素(10mg，0.06mmol)加入反应瓶中，以甲醇作溶剂，室温下搅拌反应24h，TLC检测显示反应完成后，真空旋转蒸发除去甲醇，硅胶柱分离，即得白色固体17mg，收率71％。
表征数据如下：
1HNMR(500MHz，D2O)：δ＝8.41(s，1H)，7.70(dd，2H，J＝4.2Hz，J＝13.3Hz)，7.30(t，2H)，4.09(m，1H)，3.79-3.90(m，2H)，3.55-3.65(m，4H)，3.28-3.44(m，3H)，3.15(m，H)，2.94(m，1H)，2.66(m，1H)，2.45(m，2H)。