《一种同时制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种同时制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法.pdf（5页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、10申请公布号CN102329324A43申请公布日20120125CN102329324ACN102329324A21申请号201110304607522申请日20111010C07D493/0420060171申请人南京泽朗医药科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号05幢6楼72发明人刘东锋吴艳波54发明名称一种同时制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法57摘要本发明公开一种同时制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法。方法是取原料粉末先经超临界CO2萃取，得到提取物，然后经高速逆流色谱进一步提纯，得鬼臼苦酮和鬼臼苦素纯品。本发明采用高速逆流色谱法制备工艺，克服了样品吸附、。
2、损失等缺点，且高速逆流色谱具有制备量大、易于工业化等优点。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页CN102329334A1/1页21一种同时制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法，其特征在于1）将原料药材粉碎，置于萃取釜中，进行超临界CO2萃取，解析，收集提取物；2）取正己烷乙酸乙酯乙腈水（3536485）均匀混合，充分饱和后，静置1012小时，取上相为固定相，下相为流动相，将提取物用流动相溶解，将固定相泵入逆流色谱的螺旋管柱中，调节转速为8001000RPM，以153ML/MIN的流速将流动相泵入，待机子稳定后进样，分别收集鬼臼苦酮和鬼臼苦素流分，浓。
3、缩、低温干燥即得鬼臼苦酮和鬼臼苦素。2根据权利要求1所述的制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法，其特征在于所述原料药材来源于小檗科陕西窝儿七、南方山荷叶、多花八角莲、贵州八角莲、广西八角莲、桃儿七等植物的根茎或叶。3根据权利要求1所述的制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法，其特征在于所述超临界萃取温度为3550，萃取压力为2240MPA，解析温度为1840，解析压力为815MPA，CO2流量为1830L/H。权利要求书CN102329324ACN102329334A1/3页3一种同时制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法技术领域0001本发明涉及从天然植物中制备活性成分的方法，具体地说，涉及一种同时制备鬼臼。
4、苦酮和鬼臼苦素的工艺方法。背景技术0002鬼臼苦酮PICROPODOPHYLLONE，C22H20O8、鬼臼苦素PODOPHYLLOTOXIN，C22H22O8属于木脂体类LIGNANS，主要存在于小檗科多年生草本类群鬼臼亚科八角莲属、窝儿七属、桃儿七属、山荷叶属及足叶草属植物中。这些植物由于都具有盾状着生的叶，茎中具有多数散生微管束，花不具蜜腺，浆果含鬼臼苦素等一些共同特征而被看作一个自然而相对独立的类群，习惯上称为鬼臼类植物。鬼臼类植物是一类含有显著生物活性，具有悠久应用历史的药用植物。我国汉代的神农本草经中就有鬼臼的记述。该类植物具有抗肿瘤、祛痰止咳、抗炎和抗病毒等作用，其根、茎及叶中含。
5、有大量具有抗癌活性的木脂素类成分。其中，鬼臼苦酮和鬼臼苦素是主要活性成分。0003鬼臼苦酮无色针晶，分子式C22H20O8，分子量41239；药理作用主要有1抗肿瘤作用，对P388、A549、HT29的IC50都为5微克/毫升，对照药阿霉素的IC50（微克/毫升）分别为0017、0053和011；2抗病毒作用，对HSV/CV1和VSV/BHK的IC50（微克/毫升）分别为20和10；3抗真菌作用，在200微克/毫升时，对絮状表皮癣菌、弯孢、稻黑孢、糙皮侧耳等有强抑制活性。0004鬼臼苦素无色细针晶，分子式C22H22O8，分子量41441；药理作用主要有抗肿瘤作用，对P388、A549、HT2。
6、9的IC50都25微克/毫升，对照药阿霉素的IC50（微克/毫升）分别为0017、0053和011，对HSV/CV1和VSV/BHK的IC50（微克/毫升）分别20和10。0005现有技术采用超声提取鬼臼苦素，而采用高速逆流色谱法纯化鬼臼苦酮和鬼臼苦素的方法尚未见文献报道。发明内容0006本发明的目的在于提供一种同时制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法，以同时得到高纯度的鬼臼苦酮和鬼臼苦素。0007为实现上述目的，本发明的技术方案如下1）将原料药材粉碎，置于萃取釜中，进行超临界CO2萃取，解析，收集提取物；2）取正己烷乙酸乙酯乙腈水（3536485）均匀混合，充分饱和后，静置1012小时，取上相为。
7、固定相，下相为流动相，将提取物用流动相溶解，将固定相泵入逆流色谱的螺旋管柱中，调节转速为8001000RPM，以153ML/MIN的流速将流动相泵入，待机子稳定后进样，分别收集鬼臼苦酮和鬼臼苦素流分，浓缩、低温干燥即得鬼臼苦酮和鬼臼苦素。0008所述原料药材来源于小檗科陕西窝儿七、南方山荷叶、多花八角莲、贵州八角莲、说明书CN102329324ACN102329334A2/3页4广西八角莲、桃儿七等植物的根茎或叶。0009所述超临界萃取温度为3550，萃取压力为2240MPA，解析温度为1840，解析压力为815MPA，CO2流量为1830L/H。0010本发明的优势在于（1）采用超临界提取技。
8、术，高效无溶剂残留，对环境无污染；（2）采用高速逆流色谱制备工艺，克服了固相载体带来的样品吸附、损失等缺点，且HSCCC法具有制备量大、易于工业推广等优点。具体实施方式0011下面结合实施例进一步对本发明加以说明实施例1将小檗科植物陕西窝儿七的根茎叶粉碎，取1KG置于萃取釜中，通入超临界CO2流体，进行超临界CO2萃取，CO2流量为18L/H，超临界萃取温度为50，萃取压力为40MPA，解析，解析温度为18，解析压力为15MPA，收集小檗科植物提取物；用水和乙腈按体积比45混合，配制混合液A，用正己烷和乙酸乙酯按体积比33，配制混合液B，将混合液A和混合液B均匀混合，充分饱和后，静置10小时，。
9、取下相为固定相，上相为流动相，将小檗科植物提取物用流动相溶解，将固定相泵入逆流色谱的螺旋管柱中，调节转速为1000RPM，以3ML/MIN的流速将流动相泵入，待机子稳定后进样，分别收集鬼臼苦酮和鬼臼苦素流分，将鬼臼苦酮流分浓缩、低温干燥得到鬼臼苦酮7MG，经HPLC检测，纯度为982；将鬼臼苦素流分浓缩、低温干燥得到鬼臼苦素12MG，经HPLC检测，纯度为981。0012实施例2将小檗科植物南方山荷叶的根茎叶粉碎，取1KG置于萃取釜中，通入超临界CO2流体，进行超临界CO2萃取，CO2流量为30L/H，超临界萃取温度为35，萃取压力为22MPA，解析，解析温度为40，解析压力为8MPA，收集小。
10、檗科植物提取物。用水和乙腈按体积比85混合，配制混合液A，用正己烷和乙酸乙酯按体积比53，配制混合液B，将混合液A和混合液B均匀混合，充分饱和后，静置10小时，取下相为固定相，上相为流动相，将小檗科植物提取物用流动相溶解，将固定相泵入逆流色谱的螺旋管柱中，调节转速为800RPM，以15ML/MIN的流速将流动相泵入，待机子稳定后进样，分别收集鬼臼苦酮和鬼臼苦素流分，将鬼臼苦酮流分浓缩、低温干燥得到鬼臼苦酮5MG，经HPLC检测，纯度为985；将鬼臼苦素流分浓缩、低温干燥得到鬼臼苦素8MG，经HPLC检测，纯度为983。0013实施例3将小檗科植物多花八角莲的根茎叶粉碎，取1KG置于萃取釜中，通。
11、入超临界CO2流体，进行超临界CO2萃取，CO2流量为25L/H，超临界萃取温度为40，萃取压力为28MPA，解析，解析温度为25，解析压力为12MPA，收集小檗科植物提取物。用水和乙腈按体积比65混合，配制混合液A，用正己烷和乙酸乙酯按体积比45，配制混合液B，将混合液A和混合液B均匀混合，充分饱和后，静置10小时，取下相为固定相，上相为流动相，将小檗科植物提取物用流动相溶解，将固定相泵入逆流色谱的螺旋管柱中，调节转速为1000RPM，以25ML/MIN的流速将流动相泵入，待机子稳定后进样，分别收集鬼臼苦酮和鬼臼苦素流分，将鬼臼苦酮流分浓缩、低温干燥得到鬼臼苦酮4MG，经HPLC检测，纯度为。
12、981；将鬼臼苦素流分浓说明书CN102329324ACN102329334A3/3页5缩、低温干燥得到鬼臼苦素11MG，经HPLC检测，纯度为985。0014实施例4将小檗科植物广西八角莲的根茎叶粉碎，取1KG置于萃取釜中，通入超临界CO2流体，进行超临界CO2萃取，CO2流量为22L/H，超临界萃取温度为38，萃取压力为33MPA，解析，解析温度为25，解析压力为13MPA，收集小檗科植物提取物。用水和乙腈按体积比75混合，配制混合液A，用正己烷和乙酸乙酯按体积比43，配制混合液B，将混合液A和混合液B均匀混合，充分饱和后，静置10小时，取下相为固定相，上相为流动相，将小檗科植物提取物用流动相溶解，将固定相泵入逆流色谱的螺旋管柱中，调节转速为950RPM，以28ML/MIN的流速将流动相泵入，待机子稳定后进样，分别收集鬼臼苦酮和鬼臼苦素流分，将鬼臼苦酮流分浓缩、低温干燥得到鬼臼苦酮5MG，经HPLC检测，纯度为985；将鬼臼苦素流分浓缩、低温干燥得到鬼臼苦素10MG，经HPLC检测，纯度为986。说明书CN102329324A。