本发明涉及新的（S）-N5-[亚氨基（甲氨基）甲基]鸟氨酸的结晶性盐、含这样的盐的药用组合物及其在医学方面的用途，更具体地讲是治疗和预防脓毒性休克（septic shock）特别是与此有关的低血压的用途。 国际专利申请WO 91/04024（美国专利5028627）描述了NG取代的精氨酸或NG，NG-二取代的精氨酸治疗低血压的用途。具体来讲，该专利申请描述了NG-甲基-L-精氨酸（也称作（S）-N5[亚氨基（甲氨基）甲基]鸟氨酸或L-NMMA）抑制诱发低血压和脓毒性休克的一氧化氮的产生的用途。一氧化氮是强力血管舒张和细胞毒剂，它通常作为血管紧张的内原性调节剂产生于内皮以及作为宿主防御机制的要素产生于巨噬细胞。一氧化氮合成增加不当，会导致这些作用的扩大，结果引起持久和显著的血管舒张，导致各种生命机体的低血压。此外，细胞中一氧化氮的合成显著增加会导致细胞毒性和直接的组织损害，特别是对血管内皮的损害。
Kilbourn等人（Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，87，3629页，1990年）报道了L-NMMA的黄安酸盐与Dowexl（OH-）的反应以及用盐酸滴定得到的L-NMMA游离碱至PH7.2。该盐酸盐没被从溶液中分离。
现在我们发现L-NMMA的盐酸盐，可以纯盐如结晶的形式获得，晶体具有显著的物理优势如在稳定性方面。制备结晶形式的盐酸盐的最初尝试得到了不结晶地无定形的玻璃状物。当该无定形玻璃状物在乙醇存在下放置数月时，出人意料地获得了该盐酸盐的结晶。
因此，本发明提供作为基本上纯的盐如固体形式、更具体地讲是结晶形式的（S）-N5[亚氨基（甲氨基）甲基]鸟氨酸的盐酸盐，该L-NMMA的盐酸盐是无水的且不吸湿。
该盐的纯度在至少70%为佳，至少90%更好，大于95%为最好。
该盐至少存在三种可区分的同晶型形式（isomorphic form）（A，B和C），这已由X射线衍射分析和示差扫描量热法（DSC）鉴定。本发明将包括每个单独的同晶型形式或两个或两个以上同晶型形式的混合物。
吸湿性研究表明：形式A在湿度为65%时潮解，而形式B很少吸潮。DSC表明形式A热力学上更稳定。DSC也用于测定形式A和形式B的熔点，它们分别为219℃和约205℃。
本发明也提供制备结晶性L-NMMA盐酸盐的方法，该方法包括：L-NMMA与盐酸反应并析出盐酸盐的结晶。L-NMMA与酸的摩尔比在1∶1到1∶5范围内为佳，最好是约1∶1。该反应宜按下述方法进行：于不过高也不过低的温度例如在10-80℃之间、最好在室温将L-NMMA溶于盐酸溶液（优选0.5-5M，2M适当）中。得到的溶液最好蒸发（例如在升温即在35-60℃之间及减压条件下）。然后将残留物用适当的溶剂结晶，例如将残留物溶解在最少量的热乙醇（在沸点时为宜）和水中。已发现将晶种投入含L-NMMA的盐酸盐的溶液中有助于其结晶，若不放入晶种，结晶过程可能需要数月。
本发明还提供制备L-NMMA盐酸盐的方法，该方法包括：将L-NMMA的非盐酸盐与盐酸反应以除去原来的成盐离子。该反应宜通过将L-NMMA的乙酸盐溶于盐酸水液中来完成，所述盐酸水液的浓度在0.5-5M之间，2M为宜。然后将溶液蒸发（例如在升温即在30-70℃之间、60℃为宜，以及减压的条件下）。然后将残留物溶于适当的溶剂如含水乙醇中并冷却。将L-NMMA的盐酸盐的结晶又作为晶种放到该冷却的溶液中帮助结晶。
尽管L-NMMA的盐酸盐可以作为原化学品来服用，但最好将其制成药用制剂。本发明进一步提供药用组合物，该药用组合物含L-NMMA的盐酸盐（“活性成分”）连同一种或一种以上药学上可接受的载体并且可以含一种或一种以上其它的治疗成分。载体必须是“可接受的”，其意义在于：该载体与该制剂的其它组分相容且对其受者无毒害。
该制剂包括适于口服、肠道外（包括皮下、真皮内、肌内、静脉内和关节内）、直肠和局部（包括皮肤、颊、舌下和眼内）给药的制剂，可是大多数适当的途径可能取决于例如受者的状况和疾病情况。该制剂宜按单剂量形式提供并可按任何制药领域内熟知的方法来制备。所有的方法都包括将活性成分加到由一种或一种以上辅助成分构成的载体中这一步骤。一般来讲，该制剂通过将活性成分均匀和直接地加到液体载体或磨碎的固体载体或这二者中来制备，然后根据需要，将产品制成所需的制剂形式。
适宜于口服给药的本发明制剂可制成各含预定量活性成分的独立单位如胶囊、扁囊剂或片剂;粉剂或颗粒剂;水性液体或非水性液体的溶液或悬浮液;或者水包油型液体乳剂或油包水型液体乳剂。活性成分也可以是丸剂、糖剂或糊剂。
通过压制或模压可以制得片剂，可使用一种或一种以上辅助成分。压制片可以通过下述方法制备：将处于自由流动形态如粉末或颗粒的活性成分，可与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂或分散剂混合，在适当的机器中压制。模压片可以通过将用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物置适当的机器中模压制得。片剂也可以被包衣或修整（scored）而且可以制成使其中的活性成分缓释或控释的片剂。
肠道外给药的制剂包括水性和非水性灭菌注射溶液，该溶液可以含抗氧剂、缓冲剂、制菌剂和使该制剂成为与受者血液等渗的溶质;包括水性和非水性灭菌悬浮液，该悬浮液可以包含助悬剂和增稠剂。该制剂可以制成单位剂量或多剂包装，例如密封的安瓿和小瓶，而且可以冻干（冷冻干燥的）状态贮存，仅需要在使用前立即加入灭菌液体载体如盐水、注射用水，或可以注射液形式贮存。临时的注射液和悬浮液可由前述的这类灭菌粉剂、颗粒剂和片剂制得。
用于直肠给药的制剂可以是具通常的载体如可可脂或聚乙二醇的栓剂。
经口腔局部给药如颊或舌下给药的制剂包括活性成分含在矫味的基质如蔗糖和阿拉伯胶或西黄著胶中的锭剂，和活性成分含在如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶的基质中的软锭剂。
该盐最好以水溶液的形式服用，该水溶液被缓冲至其固有的pKa。
优选的单位剂量的制剂是含有效剂量活性成分的制剂，如下文中所列的制剂;或者是含适当份额活性成分的制剂。
应当明白，除以上具体所述的组分外，考虑到所述的制剂类型，本发明制剂可以包括其它的本领域常规试剂，例如适宜于口服给药的制剂可以包含矫味剂。
本发明化合物可经口服或注射使用，剂量为每天1-100mg/kg，最好是每天3-50mg/kg。上述每天3mg/kg的剂量最好可以按在长时间内给予一连串的较小剂量即通过用数小时输液给药。成人的剂量范围一般在70mg-7g/日，最好是在200mg-3.5g/日。按独立的单位提供的片剂或其它形式制剂中的本发明化合物的含量可以是能产生效果的剂量或者是倍量为宜，例如每单位含70-500mg，通常大约在100-300mg之间。
本发明化合物最适宜于口服或注射（静脉内或皮下）给药且注射给药最好。给病人服用的化合物的准确剂量将由护理医师来决定。但所用的剂量将取决于多种因素，包括病人的年令和性别，待治疗的确切的疾病及其严重程度。经药途径也可以随疾病情况及其严重程度而改变。
上文所述的NG-甲基-L-精氨酸盐酸盐可用来治疗和/或预防脓毒性休克。因此，本发明进一步提供NG-甲基-L-精氨酸盐酸盐在制造治疗和/或预防脓毒性休克的药物方面的用途。本发明还提供治疗或预防脓毒性休克的方法，它包括给病人服用治疗有效量的NG-甲基-L-精氨酸盐酸盐。
现仅用实施例的方式来说明本发明。
实施例1
（S）-N5-[亚氨基（甲氨基）甲基]鸟氨酸盐
酸盐（L-NMMA盐酸盐）的制备
将鸟氨酸盐酸盐（16.86g，100mmol）、碘化N，S-二甲基硫脲（N，S-dimethylthiouronium iodide）（34.8g，150mmol）和2M氢氧化钠水溶液（100ml）的混合物于100℃搅拌5小时。然后将该溶液冷却，用2M盐酸水溶液调至PH3，并加到Dowex 50W-X8（H+）树脂柱（湿柱床体积为200ml）中。该柱用水洗涤至洗脱液呈中性，然后用0.5M氢氧化铵水溶液洗脱，约15ml为一流份，硅胶薄层层析监测，用水合茚三酮显色。将第26-45流份合并，于45℃减压蒸发，得无色树脂状物（9.5g）。将其溶于2M盐酸水溶液中并将得到的溶液于50℃减压蒸发。用热乙醇（108ml）处理该无定形的残留物并将该混合物于沸点剧烈搅拌，同时滴加水（4ml）。残留物逐渐溶解并当投入少许该盐酸盐的晶体时开始结晶，将该混合物冷却，然后将其于4℃静置2小时以使结晶完全。滤出产物，用乙醇洗涤并置真空干燥器中干燥，得纯的L-NMMA盐酸盐（9.6g），为无水无色结晶性固体，薄层层析检查为单一物质，高压液相层析和1Hnmr以及质谱分析结果与拟定的结构一致。
实施例2
由乙酸盐-水合物制备L-NMMA盐酸盐。
将L-NMMA乙酸盐-水合物（186g）溶于2M盐酸水溶液（350ml）中并将该溶液于60℃减压蒸发。然后将残留物溶于水（约150ml）中并减压蒸发;然后将再溶解和蒸发过程重复2次。然后将残留物溶于温热的水（25ml）中并加入乙醇（25ml）以助流动性。将该仍温热的溶液搅拌，用乙醇（1200ml）处理，投入少许结晶作晶种，并于室温继续搅拌5小时。将该混合物于4℃放置过夜，滤出结晶性固体，用乙醇洗涤并置真空干燥器中干燥，得纯的L-NMMA盐酸盐（108g），其在所有方面均与上述物质一致。
实施例3
将按实施例1但没投入晶种制得的非晶形盐酸盐的样品经在乙醇存在下于4℃静置5个月，制得结晶，该物质被用作实施例1和实施例2的制备中的“晶种”。
L-NMMA盐酸盐的晶种样品可索自伯明翰大学化学院，伯明翰B152TT。