一种利用竹荪深层发酵技术生产竹荪营养菌丝体的方法.pdf

摘要
申请专利号：	CN96115299.0	申请日：	1996.05.10
公开号：	CN1165187A	公开日：	1997.11.19
当前法律状态：	终止	有效性：	无权
法律详情：	专利权的终止(未缴年费专利权终止)授权公告日：2001.1.10\|\|\|授权\|\|\|\|\|\|公开
IPC分类号：	C12N1/14; C12N9/00; //(C12N1/14,C12R1:645)	主分类号：	C12N1/14; C12N9/00; //
申请人：	中国科学院大连化学物理研究所;
发明人：	杜昱光; 卜宗式; 白雪芳; 王靖楣; 韩宝祥; 马小军
地址：	116023辽宁省大连市中山路457号
优先权：
专利代理机构：	中国科学院沈阳专利事务所	代理人：	汪惠民
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内容摘要

一种利用竹荪深层发酵技术生产竹荪营养菌丝体的方法，是取竹荪菌株采用深层发酵技术生产竹荪营养菌丝体，并利用由溶菌酶、蛋白酶、纤维素酶或半纤维素酶中两种或多种混合酶菌。摇瓶培养时采用的培养基含：土豆法、蛋白胨、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、NaCl，深层发酵时采用的培养液含：黄豆饼粉、蛋白胨、酵母粉、玉米浆、蔗糖、玉米粉、KH2PO4、MgSO4、NaCl。该技术所制备的竹荪

权利要求书

1.一种利用竹荪深层发酵技术生产竹荪营养菌丝体的方
法，其特征在于是取竹荪菌株采用深层发酵技术生产竹荪营养
菌丝体，并利用复合酶降解竹荪菌；所谓复合酶是由溶菌酶、
蛋白酶、纤维素酶或半纤维素酶中两种或多种混合酶菌。
2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于竹荪菌株进行
摇瓶培养时采用的培养基重量组成为：土豆汁10～20％M/V；蛋
白胨0.1～1％；葡萄糖1～10％；KH₂PO₄ 0.01～0.1％，MgSO₄ 0.01
～0.1％；NaCl 0.005～0.1％；其余为水。
3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于竹荪菌株进行
深层发酵时采用的培养液重量组成为：黄豆饼粉5～15％；蛋白
胨0.1～1％；酵母粉0.01～0.5％；玉米浆0.01～0.5；蔗糖1～5％；
玉米粉1～5％；KH₂PO₄ 0.01～0.5％；MgSO₄ 0.01～0.1％；NaCl 0.05
～0.1％；其余为水。
4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于复合酶菌的重
量含量为酶解液的1～8％。

说明书

一种利用竹荪深层发酵技术生产竹荪营养菌丝体的方法

本发明涉及生化工程领域，提供一种竹荪菌的生产方法。
具体地说是利用竹荪深层发酵获得的菌丝体为原料，经复合酶
解作用使其有效养分及活性物质易被人体吸收，该竹荪粉中除
菌丝体水溶性成分外，还包括非溶水部分和培养液中游离氨基
酸等。

竹荪为一种名贵的食药用真菌，其竹荪保健饮品及调味品
生产均以其子实体为原料，成本较高，主要是采用子实体的浸
泡、水煮或醇提等方法，加一些中草药成分配制成多种原料组
成的饮品、保健酒或加入到调味品之中制成竹荪调味品。也
有报导以香茹、金针菇和竹荪固体发酵菌丝体，加绞骨兰和麦
芽粉为原料，混合提取后经压榨、过滤制成，为一种水提复合
液。然而，该方法固体培养基(以棉子壳为主)中的三种菌丝体
成分难以充分获得，水提液中混杂有棉子壳及麸皮等的水提物。
至今尚未发现利用深层发酵技术来获得菌丝体及以菌丝为原
料，生产各种竹荪保健品的报导。本发明的目的提供一种
生产竹荪成分的生化方法。

本发明的生产竹荪粉的方法是利用深层发酵技术生产竹
荪营养菌丝体，结合复合酶解作用，形成纯竹荪成分组成并易
被人体所吸收的全营养竹荪粉。具体地说本发明的工艺过程
为：

1.深层发酵培养竹荪菌株：

取竹荪菌株接种于培养瓶中，于培养基液体中进行摇床振
荡培养，培养基的组成为：土豆浸汁10～20％M/V，蛋白胨0.1～
1％，葡萄糖1～10％，KH₂PO₄ 0.01～0.1％，MgSO₄ 0.01～0.1％，
NaCl 0.005～0.1％，其余为水。摇瓶培养于20～30℃下，以30
～80rmp/分速度进行1～10小时。并以此液体菌种再用相同培
养基进行瓶培养1～10日。

将上述培养后菌种接种于发酵罐内进行发酵培养，其培养
液为黄豆饼粉5～15％，蛋白胨0.1～1％，酵母粉0.01～0.5％，玉
米浆0.01～0.5％，蔗糖1～5％，玉米粉1～5％，KH₂PO₄ 0.01～
0.5％，MgSO₄ 0.01～0.1％，MaCl 0.05～0.1％。搅拌速度为50～
150rmp/分，培养1～10日后离心分离出菌体。

2.复合酶降解竹荪菌：

将收集到的菌丝体，移到复合酶解液中于35～50℃下振荡
反应1～10小时，完成酶解过程，复合酶可用溶菌酶，蛋白酶、
纤维素酶或半纤维素酶中两种或多种混合酶菌。复合酶解液
的调配采用常规技术用稀MgSO₄溶液加入酶菌配制而成，酶菌
的含量为酶解液的1～8％。

3.经酶解后的酶解混合液可按常规技术浓缩或直接制成
含竹荪的生物制品。

下面通过实例对本发明的技术给予进一步的说明。

实例1

将斜面竹荪菌株接种于250ml三角瓶液体培养基(土豆浸
汁20％M/V、蛋白胨0.2％、葡萄糖2％、KH₂PO₄ 0.05％、MgSO₄
0.05％、NaCl 0.01％)100ml，待菌丝展开生长后，摇床振荡培
养(80rmp/min)，并以此为液体菌种再进行三角瓶液体培养(20℃
144hr)后接种于5立升气升式全自动发酵罐液体培养液(黄豆
饼粉10％、蛋白胨0.3％、酵母粉0.2％、玉米浆0.1％、蔗糖2％、
玉米粉1.5％、KH₂PO₄ 0.1％、MgSO₄ 0.05％、NaCl 0.01％)，通
气量0.8～1.0V/V/M，搅拌速度120rmp/min培养七天后离心将
菌体移入复合酶解液(0.6M MgSO₄配制纤维素酶1％、半纤维
素酶1％、溶菌酶0.5％、蛋白酶1％)，40℃振荡反应5小时后，同
滤菌上清液一起浓缩，之后经喷雾干燥、灭菌即得全营养竹荪
粉。

由上述实例，本发明技术的特点是采用可工业化生产的深
层发酵技术，生产竹荪营养菌丝体并利用复合酶降解菌丝体蛋
白，释放细胞内有效成分，制成易被人体所吸收的纯竹荪粉。