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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410714797.1 (22)申请日 2014.11.28 A01N 1/02(2006.01) (71)申请人 陈小洁 地址 545000 广西壮族自治区柳州市东环大 道 145 号鹿山花苑 E 区九栋 2-101 (72)发明人 陈小洁 (74)专利代理机构 北京众合诚成知识产权代理 有限公司 11246 代理人 龚燮英 (54) 发明名称 一种淡水白鲨精液保存方法 (57) 摘要 一种淡水白鲨精液保存方法， 包括以下步骤 ： 精液采集， 稀释液配制， 精液稀释， 精液冷冻的步 骤。利用本发明的方法提高了淡水白鲨镜子利用 率以。
2、及杂交繁殖受精率， 且条件要求低， 操作易于 实现， 适合于规模化养殖繁育。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 (10)申请公布号 CN 104396943 A (43)申请公布日 2015.03.11 CN 104396943 A 1/1 页 2 1. 一种淡水白鲨精液保存方法， 其特征在于， 包括以下步骤 ： (1) 精液采集 ： 采集成熟度好的淡水白鲨精液， 存放于 3洁净的环境下备用 ； (2) 稀释液配制 ： 配制含重量比链霉素 0.09、 NaCl 0.65、 KCl 0.21、 葡萄糖 1.5、 蔗糖 。
3、0.5、 谷氨酸钠 0.8的溶液， 调节 pH 值为 6.8 ； (3) 精液稀释 ： 将上述精液和稀释液以 1 3 稀释比例混合稀释后， 添加抗冻剂至终浓 度为 8， 并放于 3条件下平衡 35 分钟 ； (4) 精液冷冻 ： 上述稀释平衡后的精液置于液氮液面上方 5 厘米处平衡 15 分钟， 然后 在液氮面上方 1 厘米处平衡 5 分钟后投入液氮保存备用。 2. 根据权利要求 1 所述的淡水白鲨精液保存方法， 其特征在于 ： 所述精液采集步骤后进行质量检查 ： 肉眼观察正常精液为乳白色， 用普通显微镜， 在 1040 倍下， 以清水激活， 对平均活率大于 80的精液保存备用， 否则， 弃之。
4、。 3. 根据权利要求 1 或 2 所述的淡水白鲨精液保存方法， 其特征在于 ： 所述的抗冻剂为 体积比 DMSO10、 甘油 30、 乙二醇 45、 DMA15的组合物。 权 利 要 求 书 CN 104396943 A 2 1/2 页 3 一种淡水白鲨精液保存方法 技术领域 0001 本发明涉及鱼类繁殖技术， 属于水产养殖技术领域， 具体涉及淡水白鲨精液保存 方法。 背景技术 0002 淡水白鲨， 为淡水名贵鱼类， 主要分布在东南亚一带， 原产于马来西亚、 泰国等地， 于 1998 年引进我国。该鱼分黑、 白、 灰三种体色， 体长侧扁， 体表光滑无鳞， 背部隆起， 头扁 平呈圆锥形， 口亚。
5、下位， 鳃膜与颊部不相连。瓢大， 具有呼吸空气的功能， 不易缺氧。淡水白 鲨体色艳丽， 具有生长快、 食性杂、 耐低氧、 抗病力强、 少肌间刺、 肉质细嫩等优点， 因而市场 前景无比广阔。 鱼类精液的超低温冷冻保存方法已经基本成熟， 但是种属差异明显存在， 在 涉及淡水白鲨的精液保存领域中并没有这方面的报道。 发明内容 0003 本发明主要解决的技术问题是提供一种淡水白鲨精液保存方法。 0004 为解决上述技术问题， 本发明采用的一个技术方案是 ： 提供一种淡水白鲨精液保 存方法， 包括以下步骤 ： 0005 (1) 精液采集 ： 采集成熟度好的淡水白鲨精液， 存放于 3洁净的环境下备用 ； 。
6、0006 (2) 稀释液配制 ： 配制含重量比链霉素 0.09、 NaCl 0.65、 KCl 0.21、 葡萄糖 1.5、 蔗糖 0.5、 谷氨酸钠 0.8的溶液， 调节 pH 值为 6.8 ； 0007 (3) 精液稀释 ： 将上述精液和稀释液以 1 3 稀释比例混合稀释后， 添加抗冻剂至 终浓度为 8， 并放于 3条件下平衡 35 分钟 ； 0008 (4) 精液冷冻 ： 上述稀释平衡后的精液置于液氮液面上方 5 厘米处平衡 15 分钟， 然后在液氮面上方 1 厘米处平衡 5 分钟后投入液氮保存备用。 0009 所述精液采集步骤后进行质量检查 ： 肉眼观察正常精液为乳白色， 用普通显微镜。
7、， 在 1040 倍下， 以清水激活， 对平均活率大于 80的精液保存备用， 否则， 弃之。 0010 所述的抗冻剂为体积比 DMSO10、 甘油 30、 乙二醇 45、 DMA15的组合物。 0011 本发明的有益效果是 ： 0012 (1) 提高了淡水白鲨镜子利用率以及杂交繁殖受精率 ； 0013 (2) 本发明条件要求低， 操作易于实现， 适合于规模化养殖繁育。 具体实施方式 0014 下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述， 以使本发明的优点和特征能更易于被 本领域技术人员理解， 从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。 0015 本发明实施例包括 ： 0016 实施例 0017 。
8、一种淡水白鲨精液保存方法， 包括以下步骤 ： 说 明 书 CN 104396943 A 3 2/2 页 4 0018 (1) 精液采集 ： 采集成熟度好的淡水白鲨精液， 存放于 3洁净的环境下备用 ； 0019 (2) 稀释液配制 ： 配制含重量比链霉素 0.09、 NaCl 0.65、 KCl 0.21、 葡萄糖 1.5、 蔗糖 0.5、 谷氨酸钠 0.8的溶液， 调节 pH 值为 6.8 ； 0020 (3) 精液稀释 ： 将上述精液和稀释液以 1 3 稀释比例混合稀释后， 添加抗冻剂至 终浓度为 8， 并放于 3条件下平衡 35 分钟 ； 0021 (4) 精液冷冻 ： 上述稀释平衡后的。
9、精液置于液氮液面上方 5 厘米处平衡 15 分钟， 然后在液氮面上方 1 厘米处平衡 5 分钟后投入液氮保存备用。 0022 所述精液采集步骤后进行质量检查 ： 肉眼观察正常精液为乳白色， 用普通显微镜， 在 1040 倍下， 以清水激活， 对平均活率大于 80的精液保存备用， 否则， 弃之。 0023 所述的抗冻剂为体积比 DMSO10、 甘油 30、 乙二醇 45、 DMA15的组合物。 0024 利用本发明保存的淡水白鲨精液受精， 在原肠中期受精率可达 50， 高于目前市 场 20左右。 0025 以上所述仅为本发明的实施例， 并非因此限制本发明的专利范围， 凡是利用本发 明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换， 或直接或间接运用在其他相关的技术领 域， 均同理包括在本发明的专利保护范围内。 说 明 书 CN 104396943 A 4 。