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1、(10)申请公布号 CN 104126797 A (43)申请公布日 2014.11.05 CN 104126797 A (21)申请号 201410361338.X (22)申请日 2014.07.28 A23L 1/29(2006.01) (71)申请人 陈君亮 地址 中国台湾新北市新店区花园十二路 3-404 号 (72)发明人 陈君亮 (74)专利代理机构 北京超凡志成知识产权代理 事务所 ( 普通合伙 ) 11371 代理人 吴开磊 (54) 发明名称 一种冬虫夏草发酵液高效利用方法 (57) 摘要 本发明公开了属于食品原料生产及处理技术 领域的一种冬虫夏草发酵液高效利用方法。该方 。
2、法采用多次扩大培养的方法获取冬虫夏草发酵 液, 然后将菌体灭活, 最后将菌体破壁或者热充 填, 得到成品。本发明的方法简单, 减少生产设备 需求, 污染率低, 菌体腺苷、 虫草素等营养物质充 分被利用, 提高原料的营养价值, 保存过程均采用 无菌操作方式, 无需添加防腐剂等, 充分发挥冬虫 夏草菌液的保健功能。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 2 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 附图1页 (10)申请公布号 CN 104126797 A CN 104126797 A 1/1 页 2 1. 一种冬虫夏草。
3、发酵液高效利用方法, 其特征在于, 按照如下步骤进行 : (1) 将培养的冬虫夏草菌块接种到冬虫夏草菌生长的液体培养基中, 在 22-26条件 下, 150-200 次 / 分钟的速度在摇床上震荡培养 144-200 小时, 获得菌种液 ; (2) 将菌种液接种到冬虫夏草菌生长的培养基中, 接种量为 10-15, 在 18-28的条 件下, 150-200 次 / 分钟的速度在摇床上震荡培养 144-200 小时, 获得冬虫夏草发酵液 ; (3) 将 冬 虫 夏 草 发 酵 液 接 种 到 发 酵 罐 中, 接 种 量 为 10-15 , 通 气 量 控 制 在 1 (0.3-0.6)m3/m。
4、3/min, 搅拌速度控制在 180-200r/min ; (4)将步骤(3)获得的冬虫夏草发酵菌液经过30-70, 48-100h灭活处理, 在无菌的条 件下, 将冬虫夏草发酵液保存到另一无菌容器中 ; (5) 在无菌条件下, 将灭活的冬虫夏草发酵液进行菌体组织破壁, 即在 -4条件下存 放 24h, 然后在 3 个小时内升温到 60, 保存 3-4h, 最后在 3 小时内降温到 -4 ; 或者直接 将灭活的冬虫夏草发酵液引到高速旋转榨汁机中, 破壁后, 进行热充填。 权 利 要 求 书 CN 104126797 A 2 1/2 页 3 一种冬虫夏草发酵液高效利用方法 技术领域 0001 本。
5、发明属于食品原料生产及处理技术领域, 具体涉及一种冬虫夏草发酵液高效利 用方法。 背景技术 0002 冬虫夏草 (Cordyceps sinensis), 又名虫草, 为麦角菌科虫草属真菌寄生在绿蝙 蝠蛾幼虫上的子座及幼虫的复合体。 冬虫夏草性温而味甘, 药用价值极高, 具有补肺、 益肾、 补精髓及诸虚百损、 止咳化痰、 抗白血病、 抗抑郁症、 调节免疫系统之功效。但由于近年来, 高原植被破坏、 环境恶化等因素导致野生冬虫夏草产量减少, 市场上冬虫夏草价格疯涨。 研 究表明 : 发酵的冬虫夏草菌丝体与野生冬虫夏草的功效相同。因此利用冬虫夏草发酵液代 替冬虫夏草作为主要的食品原料具有重要的意义。。
6、 现有的利用冬虫夏草发酵液直接作为主 要原料的专利有很多, 发酵液直接作为主要原料不能充分利用冬虫夏草发酵菌丝体腺苷、 虫草素等营养成分, 且容易受到外界环境的污染。 发明内容 0003 本发明的目的在于提供一种冬虫夏草发酵液高效利用方法, 解决目前的发酵菌液 指标营养成分不足, 易污染的问题。 0004 一种冬虫夏草发酵液高效利用方法, 按照如下步骤进行 : 0005 (1) 将培养的冬虫夏草菌块接种到冬虫夏草菌生长的液体培养基中, 在 22-26 条件下, 150-200 次 / 分钟的速度在摇床上震荡培养 144-200 小时, 获得菌种液 ; 0006 (2) 将菌种液接种到冬虫夏草菌。
7、生长的培养基中, 接种量为 10-15, 在 18-28 的条件下, 150-200 次 / 分钟的速度在摇床上震荡培养 144-200 小时, 获得冬虫夏草发酵 液 ; 0007 (3) 将冬虫夏草发酵液接种到发酵罐中, 接种量为 10-15, 通气量控制在 1 (0.3-0.6)m3/m3/min, 搅拌速度控制在 180-200r/min ; 0008 (4)将步骤(3)获得的冬虫夏草发酵菌液经过30-70, 48-100h灭活处理, 在无菌 的条件下, 将冬虫夏草发酵液保存到另一无菌容器中 ; 0009 (5) 在无菌条件下, 将灭活的冬虫夏草发酵液进行菌体组织破壁, 即在 -4条件 。
8、下存放 24h, 然后在 3 个小时内升温到 60, 保存 3-4h, 最后在 3 小时内降温到 -4 ; 或者 直接将灭活的冬虫夏草发酵液引到高速旋转榨汁机中, 破壁后, 进行热充填。 0010 本发明的有益效果 : 本发明的方法流程简单, 减少生产设备需求, 污染率低 ; 菌体 腺苷、 虫草素等营养物质充分被利用, 提高原料的营养价值 ; 保存过程均采用无菌操作方 式, 无需添加防腐剂等, 充分发挥冬虫夏草菌液的保健功能。 附图说明 0011 图 1 为实施例 1 测出的腺苷和虫草素 HPLC 图。 说 明 书 CN 104126797 A 3 2/2 页 4 0012 图 2 为实施例 。
9、2 测出的腺苷和虫草素 HPLC 图。 具体实施方式 0013 下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步说明。 0014 实施例 1 0015 一种冬虫夏草发酵液高效利用方法, 按照如下步骤进行 : 0016 (1) 将培养的冬虫夏草菌块接种到冬虫夏草菌生长的液体培养基中, 在 24条件 下, 150 次 / 分钟的速度在摇床上震荡培养 200 小时, 获得菌种液 ; 0017 (2) 将菌种液接种到冬虫夏草菌生长的培养基中, 接种量为 10, 在 25的条件 下, 150 次 / 分钟的速度在摇床上震荡培养 200 小时, 获得冬虫夏草发酵液 ; 0018 (3)将冬虫夏草发酵液接种到发酵罐。
10、中, 接种量为10, 通气量控制在10.6m3/ m3/min, 搅拌速度控制在 180r/min, 培养 200 小时, 以此方法获得大量的冬虫夏草发酵液 ; 0019 (4) 将步骤 (3) 获得的冬虫夏草发酵菌液经过 30, 48h 灭活处理, 在无菌的条件 下, 将冬虫夏草发酵液保存到另一无菌容器中 ; 0020 (5) 在无菌条件下, 将灭活的冬虫夏草发酵液进行菌体组织破壁, 即在 -4条件 下存放 24h, 然后在 3 个小时内升温到 60, 保存 3-4h, 最后在 3 小时内降温到 -4。 0021 采用上述方法得到的发酵液腺苷含量 0.17mg/ml, 虫草素含量 0.012。
11、mg/ml, 以上 两个指标同时达到时, 便可结束发酵过程, 进行第 (4) 步灭活处理。图 1 为测出的腺苷和虫 草素 HPLC 图。 0022 实施例 2 0023 一种冬虫夏草发酵液高效利用方法, 按照如下步骤进行 : 0024 (1) 将培养的冬虫夏草菌块接到适宜冬虫夏草菌生长的液体培养基中, 24的温 度下 150 次 / 分钟的速度在摇床上震荡培养 200 小时, 获得菌种液 ; 0025 (2) 将菌种液接到适宜冬虫夏草菌生长的培养基中, 接种量为 10, 在 25的条 件下, 150 次 / 分钟的速度在摇床上震荡培养 200 小时, 获得冬虫夏草发酵液 ; 0026 (3) 。
12、将发酵液接种到发酵罐中, 接种量为 10, 通气量控制在 1 0.6 之间 ( 单位 为 m3/m3/min), 搅拌速度控制在 180r/min, 培养 200 小时, 以此方法获得大量的冬虫夏草发 酵菌液 ; 0027 (4) 发酵菌液经过 50, 90h 灭活处理, 在无菌的条件下, 将灭活后在无菌的条件 下将发酵液引流到高速旋转破壁机中 ; 0028 (5) 在无菌条件下, 将灭活出罐的菌液进行菌体组织破壁, 具体为将在破壁机中的 发酵液迅速(一般不超过2分钟)升温到70, 同时启动刀片, 高速旋转30秒, 之后快速进 行热充填, 以免发生沉淀导致充填后每个样品营养不等。 0029 采用上述方法得到的发酵液腺苷含量 0.085, 虫草素含量 0.005, 以上两个指 标同时达到时, 便可结束发酵过程, 进行第 (4) 步灭活处理。图 2 为测出的腺苷和虫草素 HPLC 图。 0030 本发明在第 (4) 步和第 (5) 步均在无菌的条件下操作, 且操作简单, 减少污染率, 无需防腐剂或抑菌剂, 也不会因为高温高压灭菌而导致营养成分破坏 ; 在第 (5) 步中, 采用 温差处理的方法, 使菌体细胞壁自然破碎, 减少了繁琐的浸提、 过滤等步骤。 说 明 书 CN 104126797 A 4 1/1 页 5 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 104126797 A 5 。