细粉状药物组合物 技术领域 本发明涉及包含微溶性药物和亲水性表面活性剂的细粉状 (finely pulverized) 组 合 物。 更 具 体 地， 本 发 明 涉 及 包 含 微 溶 性 药 物 22β- 甲 氧 基 齐 墩 果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇和表面活性剂的细粉状组合物， 并且细粉状组合物包含上述成分以及另外的 可药用的聚合物化合物。
背景技术 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇是使用包含在大豆胚轴中的大豆 甾醇 B 作为原材料合成的药品， 并且是已主要作为肝病治疗剂开发的药物化合物 ( 参见例 如专利文献 1)。
该化合物不太可能溶于水或有机溶剂中， 因此是不能期望不利用特殊技术即被吸 收到人等的体内的微溶性化合物。
为了改善微溶性药物的口服吸收， 已经通过无定形化、 固体分散或利用包埋化合 物如环糊精或胆酸的包埋来进行改善吸收性的尝试 ( 参见例如非专利文献 1 和 2)。 通过与 引起自乳化的基质材料混合来改善溶解度的方法也是已知的。
此外， 公开了向低溶解度的结晶性药物加入非交联表面变性剂并利用研磨介质通 过机械手段研磨混合物的方法 ( 参见例如专利文献 2)。 而且， 公开了通过干燥研磨、 利用研 磨介质由微溶性药物、 聚乙烯吡咯烷酮和十二烷基硫酸钠制备细粒的方法 ( 参见例如专利 文献 3)。
然而， 这些研磨方法由于利用研磨介质研磨药物而引发下述问题 ： 通过产生热引 起药物分解或通过刮擦所用介质出现异物。此外， 研磨时产生静电。因此， 研磨的药物发生 聚集， 不可能获得具有预期粒径的颗粒药物。因此， 不能通过上述研磨方法制备药品。
现有技术文献
专利文献
专利文献 1 ： 日本专利 No.3279574
专利文献 2 ： 日本专利 No.3602546
专利文献 3 ： 日本专利申请公开 No.99442/2004
非专利文献
非专利文献 1 ： “Saikin no seizai gijutu to sono oyo( 最新制剂技术及其应 用 )I” ， Iyaku(Medicine and Drug)Journal Co.Ltd. 出版， 第 157-159 页， 1983
非专利文献 2 ： “Saikin no seizai gijutu to sono oyo( 最新制剂技术及其应 用 )II” ， Iyaku(Medicine and Drug)Journal Co.Ltd. 出版， 第 158-162 页， 1985
发明概述
已经尝试应用用于改善口服吸收的上述方法来研磨微溶性药物例如 22β- 甲氧 基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇。它们中的任何一种例如在稳定性、 溶解度或施用容 易性方面都不令人满意。
在技术背景中， 本发明人已经发现， 利用具体表面活性剂湿法研磨 22β- 甲氧基 齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇可以实现物理化学高度稳定性的组合物的制备， 其在制 备期间颗粒之间不发生聚集并且包含具有狭窄粒度分布的细粒、 同时随时间流逝颗粒之间 不发生聚集。本发明人还已经发现 ： 包含在制粒步骤中不发生聚集的细粒的组合物可以通 过额外利用特定聚合物化合物制备。本发明人进一步已经发现， 这些组合物表现出高水平 的溶出性和高水平的口服吸收性。本发明基于这样的发现。
因此， 本发明的目的是提供具有改善的口服吸收并且包含微溶性药物的组合物， 以及用于制备它们的方法。
根据本发明， 提供了以下发明。
(1) 包含微溶性药物和亲水性表面活性剂的组合物。
(2) 根据 (1) 的组合物， 其中所述微溶性药物是三萜衍生物或其可药用盐。
(3) 根据 (1) 的组合物， 其中所述微溶性药物是 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇或其可药用盐。
(4) 根据 (1) 或 (2) 的组合物， 其中所述亲水性表面活性剂是十二烷基硫酸钠、 蔗 糖脂肪酸酯或聚山梨酯。
(5) 根据 (1) 或 (2) 的组合物， 其还包含聚合物化合物。 (6) 根据 (5) 的组合物， 其中所述聚合物化合物是水溶性聚合物。 (7) 根据 (6) 的组合物， 其中所述水溶性聚合物是聚乙烯吡咯烷酮或羟丙甲基纤维素。 (8) 根据 (1) 或 (2) 的组合物， 其中所加入的亲水性表面活性剂的量为 10-400mg/ g 三萜衍生物。
(9) 根据 (5) 的组合物， 其中所加入的聚合物化合物的量为 30-800mg/g 三萜衍生 物。
(10) 根据 (3) 的组合物， 其中 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇的 累积 50％粒径不超过 1.5μm 和累积 90％粒径不超过 3.0μm。
(11) 根据 (3) 的组合物， 其中 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇的 累积 50％粒径不超过 1.0μm 和累积 90％粒径不超过 2.0μm。
(12) 用于制备根据 (1) 至 (3) 任一项的组合物的方法， 其特征在于包括在溶剂中 分散微溶性药物和亲水性表面活性剂， 然后用高压匀浆机研磨分散体。
(13) 用于制备根据 (5) 的组合物的方法， 其特征在于包括在溶剂中分散微溶性药 物和亲水性表面活性剂， 用高压匀浆机研磨分散体， 然后进一步溶解聚合物化合物于匀浆 物中。
(14) 根 据 (12) 或 (13) 的 方 法， 其 中 所 述 微 溶 性 药 物 是 22β- 甲 氧 基 齐 墩 果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇或其可药用盐。
(15) 包含微溶性药物和亲水性表面活性剂的组合物， 所述组合物通过根据 (12) 至 (14) 任一项的方法制备。
本发明的组合物包含不发生聚集的均质颗粒的药物。 该组合物在消化道内表现出 高水平的溶出性并且具有高水平的吸收性， 因此可以显著性增加血中浓度。 因此， 可预期本 发明的组合物实现微溶性药物的高疗效。
附图简述
[ 图 1] 图 1 示出通过用高压匀浆机研磨而获得的原料药 ( 实施例 1) 和通过用气 流磨碎机研磨而获得的原料药 ( 比较实施例 1) 的溶出试验结果。
[ 图 2] 图 2 示出在 5℃ ( □ )、 15℃ ( ○ ) 和 25℃ ( ▲ ) 经研磨得到的悬液中的 原料药颗粒的累积 50％粒径的经时稳定性的结果。
[ 图 3] 图 3 示出在 5℃ ( □ )、 15℃ ( ○ ) 和 25℃ ( ▲ ) 经研磨得到的悬液中的 原料药颗粒的累积 90％粒径的经时稳定性的结果。
[ 图 4] 图 4 示出实施例 5 的细粒与比较实施例 2 的细粒的溶出试验的结果。
[ 图 5] 图 5 示出使用不同赋形剂制备的片剂 ( 实施例 6-8) 的溶出试验结果。
[ 图 6] 图 6 示出比较实施例 2 的细粒 ( □ ) 与已用高压匀浆机研磨的原料药制备 的实施例 4 的细粒 ( ● ) 的狗口服吸收试验的结果。
[ 图 7] 图 7 示出通过已用高压匀浆机研磨的原料药制备的实施例 4 的细粒 ( ● ) 和实施例 6 的片剂 ( △ ) 的狗口服吸收试验的结果。
发明详述
用于本发明的微溶性药物是指水中溶解度低的药物， 即 25 ℃时水中溶解度低于 0.1mg/mL。 根据本发明的微溶性药物包括描述于日本专利 No.3279574 中的三萜衍生物。 其 中， 优选 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇。
三萜衍生物可由式 (I) 表示 ：
[ 化学式 1]
其中 R1 表示羟基、 C1-6 烷氧基、 C1-6 烷基羰基氧基， 或 任选取代的芳烷基氧基， R2 表示 C1-6 烷基、 -CH2OR5， 其中 R5 表示氢原子、 C1-6 烷基、 任选取代的芳烷基、 或 C1-6 烷基羰基、 甲酰基、 -COOR6， 其中 R6 表示氢原子或 C1-6 烷基， 或 7 8 7 8 -CH2N(R )R ， 其中 R 和 R 可以相同或不同， 表示氢原子或 C1-6 烷基， 或 1 2 9 10 9 10 R 和 R 彼此组合来表示 -O-CR (R )-OCH2-， 其中 R 和 R 可以相同或不同， 表示氢原子、 C1-6 烷基或芳基， 并且 3 4
R 和 R 可以相同或不同， 表示
氢原子、
羟基、
C1-6 烷基、
羟基 C1-6 烷基、
甲酰基、
-COOR11， 其中 R11 表示氢原子或 C1-6 烷基， 或 12 12
-OR ， 其中 R 表示 C1-6 烷基、 任选取代的芳烷基、 C1-6 烷基羰基、 任选取代的芳基 羰基、 C2-6 链烯基、 C2-6 链烯基羰基或任选取代的芳基链烯基羰基， 或 3 4
R 和 R 一起表示亚甲基，
式中的＝表示单键或双键， 条件是当＝表示双键时， R4 不存在。
在本发明书中， 术语 “烷基” 作为基团或基团部分表示直链类型或支链类型中的任 一种。其具体实例包括甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 正丁基、 异丁基和叔丁基。术语 “卤原子” 是指氟、 氯、 溴或碘原子。术语 “芳基” 作为基团或基团部分优选指苯基、 萘基、 甲苯基、 甲氧 基苯基等。术语 “芳烷基” 作为基团或基团部分优选指苯基 C1-4 烷基， 更优选苄基、 苯乙基 等。 “芳基” 或 “芳烷基” 上的一个或多个氢原子、 优选一个或两个氢原子被任选地取代， 并 且取代基的具体实例包括羟基、 C1-6 烷氧基 ( 优选 C1-4 烷氧基、 更优选甲氧基 )、 卤原子、 氨 基、 二甲基氨基、 乙酰氧基、 亚甲基二氧基和硝基。 取代的基团的实例包括甲氧基苯基、 羟基 苯基、 二羟基苯基和二甲氧基苯基。
在式 (I) 中， 由 R1 所示的 C1-6 烷氧基优选 C1-4 烷氧基， 更优选甲氧基或乙氧基。其 具体实例包括甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 丁氧基、 戊氧基和己氧基。C1-6 烷基羰基优选为 C1-4 烷基羰基， 且其具体实例包括乙酰基、 丙酰基、 丁酰基、 戊酰基和己酰基。 R1 所示的优选的芳 烷基氧基的实例包括苄氧基、 苯乙基氧基、 甲基苄基氧基和萘基甲基氧基。 2 5
在式 (I) 中， 由 R 所示的 -CH2OR 优选为 -CH2OH、 -CH2O-C1-4 烷基、 -CH2O-( 苯基 C1-4 2 6 烷基 ) 或 -CH2O-CO-C1-4 烷基， 更优选为羟基甲基。由 R 所示的 -COOR 优选为 -COO-C1-6 烷 基和 COOH。
在式 (I) 中， R1 和 R2 可彼此组合以形成 -O-CR9(R10)-OCH2-。此处， R9 和 R10 可以相 同或不同， 表示氢原子、 C1-6 烷基或芳基。其优选的实例包括其中 R9 和 R10 均表示 C1-6 烷基、 优选 C1-4 烷基、 更优选甲基或乙基的情况， 和其中 R9 和 R10 中的任一个表示氢原子而另一个 表示芳基、 优选苯基、 甲苯基、 二甲苯基、 联苯基、 萘基、 蒽基或菲基的情况。 3 4
在式 (I) 中， 由 R 或 R 所示的 C1-6 烷基优选为 C1-4 烷基， 更优选甲基或乙基。由 3 4 R 或 R 所示的羟基 C1-6 烷基优选为羟基 C1-4 烷基， 更优选羟基甲基。 3 4 11
在式 (I) 中， 由 R 或 R 所示的 -COOR 表示 -COOH 或 -COO-C1-4 烷基。
此外， 在式 (I) 中， 由 R3 或 R4 所示的 -OR12 中的 R12 表示 C1-6 烷基、 芳烷基、 C1-6 烷 基羰基、 芳基羰基、 C2-6 链烯基、 C2-6 链烯基羰基或芳基链烯基羰基。此处， C2-6 链烯基优选为 C2-4 链烯基， 且其具体实例包括乙烯基、 丙烯基、 烯丙基、 丁烯基、 2- 甲基丙烯基、 戊烯基和己 烯基。芳烷基的实例包括苄基、 苯乙基、 甲基苄基、 萘基甲基和苯基丙基。C1-6 烷基羰基优选 为 C1-4 烷基羰基， 且其具体实例包括乙酰基、 丙酰基、 丁酰基、 戊酰基和己酰基。优选的芳基羰基的实例包括苯甲酰基和萘基羰基。C2-6 链烯基优选为 C2-4 链烯基羰基， 且其具体实例包 括丙烯酰基、 烯丙基羰基和丁烯酰基。C2-6 链烯基羰基选为 C2-4 链烯基羰基。芳基链烯基羰 基的具体实例包括肉桂酰基和苯基丁烯酰基。
R3 和 R4 一起表示亚甲基。
在式 (I) 中， ＝表示单键或双键。
当式中的＝表示双键时， 优选 R1 表示氢原子， R2 表示 -CH2OH， 或 R1 和 R2 彼此组合 以表示 -O-CR9(R10)-OCH2-， 其中 R9 和 R10 如上所述， 且 R3 表示氢原子。
在式 (I) 的化合物中， 存在各种异构体。本发明包括各异构体和其混合物。还考 虑存在衍生自式 (I) 中的其它基团的异构体。式 (I) 中也包括这些异构体和其混合物。
式 (I) 的化合物优选具有由式 (1-1) 表示的构型 ： [ 化学式 2]
三萜衍生物可以以可药用盐的形式用于本发明的组合物。 三萜衍生物的盐可容易 地通过使可药用碱作用于三萜衍生物而形成。优选的碱包括无机碱例如氢氧化钠、 氢氧化 钾、 氢氧化铝、 碳酸钠、 碳酸钾和碳酸氢钠， 和有机碱例如哌嗪、 吗啉、 哌啶、 乙胺和三甲胺。
用于研磨药物的方法根据研磨时的状态大致分为两种方法， 即干型和湿型方法。 在研磨过程中， 由于颗粒之间的摩擦而产生静电。具体而言， 在干燥研磨时， 静电的产生引 起颗粒附着到研磨机等上， 或引起研磨的颗粒再次聚集的二次聚集。 结果， 经研磨的原料药 颗粒的粒度增大， 且因此， 不能获得预定的药物颗粒的粒径。 聚集进一步在经研磨药物的贮 存期间进行， 因此， 干燥研磨不是优选的方法。 粒度的增加是指药物在消化道中的吸收性下 降， 使其不可能维持作为产品的规定质量水平。 此外， 聚集的高易感性引起颗粒附着到制备 装置等， 导致收率低或制备过程中的处理性差。因此， 一个药学上重要的因素是， 即使当研 磨的药物贮存时粒度随时间仍保持不变。
另一方面， 湿法研磨没有干燥研磨中所涉及的问题， 因此， 适合作为用于本发明的 研磨方法。然而， 由于在湿法研磨中， 经研磨的颗粒也聚集于溶液中， 所以湿法研磨不是不 产生聚集的全部方法。
如下面实施例所示， 已经发现， 在湿法研磨中使用具体表面活性剂能够维持药物 颗粒的物理化学稳定性而不产生聚集。 即， 当加入具体表面活性剂作为添加剂时， 即使湿法 研磨也可制备不产生聚集的具有所需粒径的颗粒。
亲水性表面活性剂期望作为本发明中使用的表面活性剂。其中， 优选十二烷基硫 酸钠、 蔗糖脂肪酸酯、 聚山梨酯等是优选的。 当考虑到本发明中所用的原料药的水分散性和 随时间的物理化学稳定性时， 十二烷基硫酸钠是最优选的。
即， 根据本发明一方面的组合物是包含微溶性药物和表面活性剂的悬液。
从药物在水中的分散性以及悬液的粘度和流动性的观点来看， 本发明中所用的表 面活性剂的添加量可以是每克本发明中所用的药物 10 至 400mg、 优选 50 至 200mg、 更优选 50 至 100mg。
关于根据本发明的组合物的浓度， 可根据情况适当地调节固体含量。从湿法研 磨步骤的平稳实施和收率的观点来看， 就悬液中原料药的固体含量而言， 浓度可以是 5 至 50％、 优选 25 至 40％。
可用于本发明的研磨机包括当将原料药通过微细狭缝同时使悬液循环时通过向 悬液施加高压， 在剪切力或空化的作用下允许进行微粉化的高压匀浆机 ； 其中向悬液混合 具有不同材质和大小的珠粒继而搅拌以通过珠粒彼此碰撞等进行微粉化的湿式珠磨机 ； 以 及由通过向高速旋转的两盘之间非常狭窄的间隙的一部分输送悬液而产生的高速剪切力 的作用进行微粉化的超精度研磨机。
作为本发明中所用的研磨机， 高压匀浆机由于不形成异物而最为适合。不特别限 制高压匀浆机的类型。可以根据所研磨药物的量适当地调节高压匀浆机的研磨条件。高压 匀浆机的处理压力优选为 150 至 200MPa， 更优选 170 至 200MPa， 特别优选为 190 至 200MPa。 处理的次数优选为 20 至 40 次， 更优选 25 至 30 次。 根据本发明的组合物可通过以下方法制备。具体地， 通过首先将表面活性剂溶解 于溶剂如水中、 向溶液中加入药物、 用常规搅拌机分散药物并且用高压匀浆机研磨分散体， 以制备根据本发明的组合物。
优选地， 包含在根据本发明的组合物中的药物的颗粒的累积 50 ％粒径不超过 1.5μm 和累积 90％粒径不超过 3.0μm。更优选地， 累积 50％粒径和累积 90％分别不超过 1.0μm 和不超过 2.0μm。本发明中， 当通过假定分析粒度分布的粉末群的总体积为 100％ 而确定累积曲线时， 累积曲线为 50％的点的粒径和累积曲线为 90％的点的粒径分别为 “累 积 50％粒径” 和 “累积 90％粒径” (μm)。
通过研磨所得的药物颗粒的直径可通过激光衍射 / 散射型粒度分布测量机器测 量。具体地， 例如优选由 NIKKISO 株式会社销售的 Microtruck( 商标名 )。
本发明的组合物的一个特征是在组合物的制备过程中不发生聚集。 这里， 表述 “不 发生聚集” 是指药物颗粒不在悬液中析出， 并且即使析出药物颗粒， 在再分散沉淀后， 保持 湿法研磨之后的粒径， 并且在粉末形式时， 通过干燥悬液所得的药物的粒径与湿法研磨之 后的粒径相同。
当研磨步骤转换成制粒步骤时， 有时将由此产生的悬液贮存规定的时间。即使在 这种情况下， 根据本发明的组合物和悬液在 5 至 25℃的贮存温度不发生聚集并且保持物理 化学稳定状态。
作为根据本发明的另一方面的组合物， 可以提及还包含聚合物化合物的本发明的 组合物或本发明的悬液。可以以颗粒形式提供该组合物和悬液。
可以从本发明中获得的悬液制备根据本发明的颗粒。 可以通过制粒或干燥悬液获 得药物颗粒。然而， 当对悬液就此进行制粒或干燥时， 悬液中的药物颗粒在制粒 / 干燥过程 中聚集， 结果， 粒径远远大于预期粒径。因此， 湿法研磨没有意义。因此， 优选地， 制备根据 本发明的颗粒以使在制粒或干燥过程中不发生聚集。
有效避免聚集的方法是在制粒前向根据本发明的悬液加入具体的聚合物化合物。 根据该方法， 经研磨的药物颗粒不发生聚集， 且药物的粒径可以保持恒定。优选地， 在制粒 / 干燥之前的阶段， 将聚合物化合物溶解并且混合于根据本发明的悬液中。
作为根据本发明的微粒中所用的聚合物化合物， 优选为水溶性聚合物。 其中， 优选 聚乙烯聚合物和纤维素聚合物， 例如聚乙烯吡咯烷酮和羟丙甲基纤维素。
本发明中所用的聚合物化合物的添加量为每克本发明原料药 30 至 800mg， 优选 30 至 200mg， 更优选 50 至 100mg。
可以通过进一步掺入可药用载体到本发明的组合物中而制备可口服施用的药物 制剂， 例如粉剂、 细粒剂、 颗粒剂、 片剂、 胶囊剂、 悬液和液体。 这些药物制剂可通过常规方法 制备。
药物制剂中所用的药品添加剂可用作可药用载体。其具体实例包括赋形剂、 崩解 剂、 粘合剂、 分散剂、 润滑剂、 包衣剂和增塑剂。如果需要， 可以适当地掺入甜味剂、 防腐剂、 着色剂、 调味剂等。
赋形剂包括乳糖、 蔗糖、 D- 甘露醇、 淀粉、 结晶纤维素和部分胶化淀粉。
崩解剂包括交联羧甲纤维素钠、 羧甲基淀粉钠、 羧甲基纤维素、 低取代羟基丙基纤 维素和交联聚维酮。
粘合剂包括羟基丙基纤维素、 羟丙基甲基纤维素、 羟丙甲纤维素和聚乙烯吡咯烷 酮。分散剂包括轻质无水硅酸、 羧甲基纤维素钠和黄原胶。
润滑剂包括硬脂酸镁、 硬脂酸钙和滑石。
包衣剂包括羟基丙基纤维素、 羟丙基甲基纤维素、 醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸 酯、 羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、 醋酸纤维素邻苯二甲酸酯、 乙基纤维素、 乙基纤维素 水分散体、 丙烯酸乙酯 - 甲基丙烯酸甲酯共聚物的分散体和甲基丙烯酸共聚物 LD。
增塑剂包括三醋精、 硬脂酸、 聚乙二醇和柠檬酸三乙酯。
甜味剂包括阿斯巴甜、 木糖醇、 糖精钠、 甘草酸和甜叶菊提取物。
防腐剂包括过氧苯甲酸酯、 氯代丁醇和苯甲醇。
着色剂包括核黄素或黄色三氧化二铁、 红色三氧化二铁、 食用色素例如食用黄色 5 号和食用蓝色 2 号， 以及食用色淀色素。
调味剂包括天然调味剂， 例如水果类调味剂、 果皮类调味剂、 树皮类调味剂、 种子 类调味剂、 枝叶类调味剂和花类调味剂， 以及合成调味剂， 例如柠檬醛、 香茅醛、 顺式 - 茉莉 和顺式 -3- 己醇。
根据本发明的组合物的剂量可以根据例如患者的年龄、 体重、 病况和病况严重度 而变化。然而， 当微溶性药物为三萜衍生物时， 本发明的组合物通常可以以 25 至 800mg( 活 性成分 )/ 成人 / 天的剂量口服施用。
根据本发明的组合物可以用作用于治疗和预防微溶性药物的适应性疾病的药物 组合物。当根据本发明的组合物的活性成分为三萜衍生物时， 根据本发明的组合物可用作 肝病和高铁血症的治疗剂和预防剂。肝病包括急性和慢性病毒肝炎、 自身免疫性肝炎和药 物诱导性、 成瘾性、 酒精诱导性、 肝内、 胆汁郁积性和先天代谢紊乱性肝病。此处， “肝炎” 和 “肝病” 是指肝的炎性疾病， 且用作包括脂肪肝、 肝硬化和取决于症状进展的肝癌的概念。实施例 通过以下实施例和比较实施例对本发明进一步说明， 但是这些实施例不用作对本 发明的限制。
实施例 1 ： 原料药的研磨
通过将 3.0kg 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原料药 ( 制造厂 商： Meiji Seika Kaisha 株式会社， 累积 50％粒径 ： 约 50μm， 累积 90％粒径 ： 约 100μm)、 0.3kg 十二烷基硫酸钠和 6.7kg 纯化水以 30 ∶ 3 ∶ 67 的重量比分散所获得的水溶液用高压 匀浆机 ( 型号 ： Microfluidizer， 制造厂商 ： Microfluidics) 在示于表 1 中的研磨条件 ( 处 理压力和处理次数 ) 下研磨以得到悬液。关于悬液中原料药的粒径， 用粒度分布测量装置 ( 制造厂商 ： NIKISSO 株式会社， 型号 ： Microtruck×100) 测量累积 50％粒径和累积 90％粒 径。结果示于表 1。
[ 表 1]
比较实施例 1 ： 原料药的研磨
将 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原料药 ( 制造厂商 ： Meiji Seika Kaisha 株式会社， 累积 50 ％粒径 ： 约 50μm， 累积 90 ％粒径 ： 约 100μm)(14kg) 用 气流磨碎机 ( 制造厂商 ： Nippon Pneumatic Mfg. 株式会社， 型号 ： Jet Mill PJM-100) 在 0.54MPa 的条件下研磨。关于经研磨的原料药的粒径， 将经研磨的原料药在 0.01％十二烷 基硫酸钠水溶液中分散所获得的样品用粒度分布测量装置 ( 制造厂商 ： NIKKISO 株式会社， 型号 ： Mircotruck×100) 测量累积 50％粒径。因此， 发现经研磨原料药的累积 50％粒径为 2.5μm。
实施例 2 ： 溶出试验 (1)
对于实施例 1( 研磨条件 3) 所制备的悬液和通过将比较实施例 1 在水中所获得的 经研磨的原料药悬浮所获得的液体， 进行溶出试验。
将对应于 50mg 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原料药的量的每 种悬液精确称重， 通过在日本药典中详细说明的溶出试验方法 - 第二种方法 ( 桨法 ) 进行 试验， 转速为 100rpm( 桨的转速 )， 使用 900mL 1％聚山梨酯 80 水溶液作为测试溶液。开始 溶出后 15 分钟、 30 分钟、 60 分钟和 180 分钟， 收集 5mL 测试溶液， 通过孔径为 0.2μm 的膜 滤器过滤以得到测量样品。通过高效液相色谱法 ( 制造厂商 ： Shimadzu Seisakusho 株式 会社， 型号 ： LC-10ATvp) 分析样品， 以测定每种样品的溶出率。
结果示于图 1。对于实施例 1( 研磨条件 3) 的 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原料药， 在 15 分钟内溶出率超过 60％。
另一方面， 比较实施例 1 的溶出率低， 在开始溶出后 3 小时为 10％。
上述结果证明， 通过高压匀浆机研磨的原料药具有显著改善的溶出性。
实施例 3 ： 悬液中经研磨原料药的经时稳定性
将通过实施例 1( 研磨条件 3) 的研磨所获得的悬液以静置状态贮存， 以确认悬液 中原料药微粒的粒度是否随时间经受变化。将悬液以静态贮存于 5℃、 15℃和 25℃。
累积 50％粒径和累积 90％粒径随时间用同一粒度分布测量装置测量。结果示于 图 2 和 3。累积 50％粒径和累积 90％粒径均保持不变达一个月， 表明未发生二次聚集。即， 证实了通过本申请所述的方法进行研磨可以允许十二烷基硫酸钠在悬液中以遏制二次聚 集， 借此可以获得物理化学稳定的原料药微粒。
实施例 4 ： 细颗粒 (1) 的制备
将 4.3％羟丙甲基纤维素 ( 也称为羟丙基甲基纤维素， 商标名 ： TC-5R， 制造厂商 ： The Shin-Etsu Chemical 株式会社 ) 水溶液 (7.6L) 加入到 7.3L 在实施例 1( 研磨条件 2) 中获得的悬液并且混合。 将混合液体用流化床制粒机 ( 型号 ： SPIR-A-FLOW SFC-15， 制造厂 商： Freund Corporation) 喷雾到 250g 交联羧甲基纤维素钠和 7250g D- 甘露醇的混合物 上以获得颗粒。将颗粒用筛分式磨碎机 ( 型号 ： COMIL， 制造厂商 ： QUADRO) 降低粒度， 以制 备细颗粒。 实施例 5 ： 细颗粒 (2) 的制备
将 4.3 ％聚乙烯吡咯烷酮 ( 级别 ： K30， 制造厂商 ： BASF) 水溶液 (7.6L) 加入到 7.3L 实施例 1( 研磨条件 2) 中获得的悬液并且混合。将混合液体用流化床制粒机 ( 型号 ： SPIR-A-FLOW SFC-15， 制造厂商 ： Freund Corporation) 喷雾到 250g 交联羧甲基纤维素钠 和 7250g D- 甘露醇的混合物上以获得颗粒。将颗粒用筛分式磨碎机 ( 型号 ： COMIL， 制造厂 商： QUADRO) 降低粒度， 以制备细颗粒。
比较实施例 2 ： 细颗粒的制备
累积 50％粒径 2.5μm、 且已通过用比较实施例 1 中的气流磨碎机研磨而获得的 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原料药 (25.0mg)、 8.75mg 交联羧甲基纤维 素钠、 2.5mg 羟基丙基纤维素和 83.75mg D- 甘露醇一起在制粒机 ( 制造厂商 ： Fukae Kogyo 株式会社， 型号 ： 高速混合机 LFS-GS-2J) 中混合， 在喷射 130ml 纯化水的同时进行湿法制 粒， 然后干燥。将干燥产物用切割式磨碎机 ( 制造厂商 ： DALTON CORPORATION， 型号 ： Power Mill P-02S) 研磨， 以制备细颗粒。
比较实施例 3 ： 细颗粒的制备
将 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原料药 (2.2kg)、 0.22kg 十二 烷基硫酸钠和 4.9kg 纯化水以 30 ∶ 3 ∶ 67 的重量比分散来制备 7.3L 悬液。将悬液用实 施例 1 中所用的高压匀浆机进行湿法研磨。在处理压力 200MPa 和处理次数为 40 的条件下 进行研磨。 研磨后， 用实施例 1 中所用的粒度分布测量装置测量原料药的累积 50％粒径， 测 得为 1.0μm。
在不添加水溶性聚合物下将湿法研磨的悬液就此喷雾到 250g 交联羧甲基纤维素 钠与 7250g D- 甘露醇的混合物上以获得颗粒。将颗粒用筛分式磨碎机 ( 型号 ： COMIL， 制造
厂商 ： QUADRO) 降低粒度， 以制备细颗粒。
比较实施例 4 ： 细颗粒的制备
将 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原料药 (2.2kg)、 0.22kg 十二 烷基硫酸钠和 4.9kg 纯化水以 30 ∶ 3 ∶ 67 的重量比分散来制备 7.3L 悬液。将悬液用实 施例 1 中所用的高压匀浆机进行湿法研磨。在处理压力 200MPa 和处理次数为 40 的条件下 进行研磨。 研磨后， 用实施例 1 中所用的粒度分布测量装置测量原料药的累积 50％粒径， 测 得为 1.0μm。
将 4.3 ％ 低 取 代 羟 基 丙 基 纤 维 素 ( 级 别 ： LH-21， 制造厂商 ： The Shin-Etsu Chemical 株式会社 ) 水溶液 (7.6L) 加入到湿法研磨的悬液中并混合。将混合液体用流化 床制粒机 ( 型号 ： SPIR-A-FLOW SFC-15， 制造厂商 ： Freund Corporation) 喷雾到 250g 交联 羧甲基纤维素钠和 7250g D- 甘露醇的混合物上以获得颗粒。将颗粒用筛分式磨碎机 ( 型 号： COMIL， 制造厂商 ： QUADRO) 降低粒度， 以制备细颗粒。
比较实施例 5 ： 细颗粒的制备
将 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原料药 (2.2kg)、 0.22kg 十二 烷基硫酸钠和 4.9kg 纯化水以 30 ∶ 3 ∶ 67 的重量比分散来制备 7.3L 悬液。将悬液用实 施例 1 中所用的高压匀浆机进行湿法研磨。在处理压力 200MPa 和处理次数为 40 的条件下 进行研磨。 研磨后， 用实施例 1 中所用的粒度分布测量装置测量原料药的累积 50％粒径， 测 得为 1.0μm。 将 4.3％聚乙二醇 ( 级别 ： 6000， 制造厂商 ： Sanyo Chemical Industries 株式会 社 ) 水溶液 (7.6L) 加入到湿法研磨的悬液中并且混合。将混合液体用流化床制粒机 ( 型 号： SPIR-A-FLOW SFC-15， 制造厂商 ： Freund Corporation) 喷雾到 250g 交联羧甲基纤维素 钠和 7250g D- 甘露醇的混合物上以获得颗粒。将颗粒用筛分式磨碎机 ( 型号 ： COMIL， 制造 厂商 ： QUADRO) 降低粒度， 以制备细颗粒。
实施例 6 ： 片剂 (1) 的制备
将 10 ％羟丙甲基纤维素 ( 也称为羟丙基甲基纤维素， 商标名 ： TC-5R， 制造厂商 ： The Shin-Etsu Chemical 株式会社 ) 水溶液 (225mL) 加入到 428.6g 实施例 1 中所得的悬液 中并混合。 将混合液体用流化床制粒机 ( 型号 ： Multiplex 制粒机 MP-01， 制造厂商 ： POWREX CORPORATION) 喷雾到 540g 乳糖与 19.5g 交联羧甲基纤维素钠的混合物上以获得颗粒。
将交联羧甲基纤维素钠 (20g) 和 4g 轻质无水硅酸加入到 124.5g 颗粒中。 然后， 将 1.5g 硬脂酸镁加入到混合物中并混合以获得用于压片的颗粒。将用于压片的颗粒以 550kg
至 580kg 的压力进行压片以制备
的片剂。实施例 7 ： 片剂 (2) 的制备
将 10 ％羟丙甲基纤维素 ( 也称为羟丙基甲基纤维素， 商标名 ： TC-5R， 制造厂商 ： The Shin-Etsu Chemical 株式会社 ) 水溶液 (225mL) 加入到 428.6g 实施例 1 中所得的悬液 中并混合。 将混合液体用流化床制粒机 ( 型号 ： Multiplex 制粒机 MP-01， 制造厂商 ： POWREX CORPORATION) 喷雾到 540g D- 甘露醇与 19.5g 交联羧甲基纤维素钠的混合物上以获得颗 粒。
将交联羧甲基纤维素钠 (20g) 和 4g 轻质无水硅酸加入到 124.5g 颗粒。然后， 将 1.5g 硬脂酸镁加入到混合物中并混合以获得用于压片的颗粒。将用于压片的颗粒以 550kg至 580kg 的压力进行压片以制备
的片剂。实施例 8 ： 片剂 (3) 的制备
将 10 ％羟丙甲基纤维素 ( 也称为羟丙基甲基纤维素， 商标名 ： TC-5R， 制造厂商 ： The Shin-Etsu Chemical 株式会社 ) 水溶液 (225mL) 加入到 428.6g 实施例 1 中所得的悬 液中并混合。将混合液体用流化床制粒干燥机 ( 型号 ： Multiplex 制粒机 MP-01， 制造厂商 ： POWREX CORPORATION) 喷雾到 540g 结晶纤维素 (Ceolus KG-802) 与 19.5g 交联羧甲基纤维 素钠的混合物上以获得颗粒。
将交联羧甲基纤维素钠 (20g) 和 4g 轻质无水硅酸加入到 124.5g 颗粒。然后， 将 1.5g 硬脂酸镁加入到混合物中并混合以获得用于压片的颗粒。将用于压片的颗粒以 550kg 至 580kg 的压力进行压片以制备
的片剂。实施例 9 ： 原料药微粒的累积 50％粒径的测量
用粒度分布测量装置 ( 制造厂商 ： NIKKISO 株式会社， 型号 ： Mircotruck×100) 测 量实施例 4 和 5 以及比较实施例 3 至 5 的细粒中的原料药微粒的累积 50％粒径。结果示于 表 2。已确认， 应用实施例 4 和 5 中所用的水溶性聚合物， 原料药微粒不发生聚集。另一方 面， 已确认， 应用比较实施例 3 至 5 中所用的水溶性聚合物， 原料药微粒的粒径明显增加。
[ 表 2]
水溶性聚合物类型 实施例 4 实施例 5 比较实施例 3 比较实施例 4 比较实施例 5
羟丙甲基纤维素 聚乙烯吡咯烷酮 未添加 L-HPC 聚乙二醇 6000 累积 50％粒径 (nm) 0.9 0.9 13.9 22.6 31.4实施例 10 ： 溶出试验 (2)
对实施例 5 的细颗粒和比较实施例 2 的细颗粒进行溶出试验。精确地称量对应 于 50mg 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原料药的量的每种颗粒， 通过溶 出试验方法 - 第二种方法进行试验， 转速为 100rpm， 使用 900mL 1％聚山梨酯 80 水溶液作 为测试溶液。开始溶出后 15 分钟、 30 分钟、 60 分钟、 120 分钟和 180 分钟， 收集 5mL 测试溶 液， 通过孔径为 0.2μm 的膜滤器过滤以得到测量样品。通过高效液相色谱法 ( 制造厂商 ： Shimadzu Seisakusho 株式会社， 型号 ： LC-10ATvp) 分析样品， 以测定每种样品的溶出率。 结果示于图 4。使用经高压匀浆机研磨的原料药制备的实施例 5 的药物制剂开始 溶出后 60 分钟的溶出率比使用经气流磨碎机研磨的原料药制备的比较实施例 2 的药物制 剂的高 4 倍。
实施例 11 ： 溶出试验 (3)
对实施例 6-8 中制备、 且含有 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原
料药 (25mg) 的片剂进行溶出试验。通过日本药典中详细说明的溶出试验方法 - 第二种方 法 ( 桨法 ) 进行试验， 转速为 50rpm( 桨的转速 )， 使用 900mL1％聚山梨酯 80 水溶液作为测 试溶液。开始溶出后 5 分钟、 10 分钟、 15 分钟、 30 分钟和 60 分钟， 收集 5mL 测试溶液， 通过 孔径为 0.2μm 的膜滤器过滤以得到测量样品。通过高效液相色谱法 ( 制造厂商 ： Shimadzu Seisakusho 株式会社， 型号 ： LC-10ATvp) 分析样品， 以测定每种样品的溶出率。 结果示于图 5。所有片剂均具有良好的溶出度。
实施例 12 ： 犬的口服吸收试验 (1)
评价实施例 4 的细颗粒和比较实施例 2 的细颗粒的犬的口服吸收性 ( 雄性 beagle 犬， 约 11kg 重 )。使用 10 只犬通过交叉试验进行试验。在喂养状态下， 用 10mL 水喂服对 应于 50mg 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇的量的各药物制剂。预设时间 (1 小时、 2 小时、 4 小时、 6 小时、 8 小时、 10 小时和 24 小时 ) 之后收集血液， 用 LC-MS/MS 测 量血中药物浓度。
结果示于图 6。 与比较实施例 2 的细颗粒相比， 根据本发明的实施例 4 的细颗粒的 血中最大药物浓度 (Cmax) 和血中药物浓度的时间曲线下面积 (AUC) 均增加， 表明口服吸收 性显著提高。
实施例 13 ： 犬的口服吸收试验 (2)
评价实施例 4 的细颗粒和实施例 6 的片剂的犬的口服吸收性 ( 雄性 beagle 犬， 约 11kg 重 )。使用 10 只犬通过交叉试验进行试验。在喂养状态下， 用 10mL 水喂服对应于 25mg 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇原料药的量的各药物制剂。预设时 间 (1 小时、 2 小时、 4 小时、 6 小时、 8 小时、 10 小时和 24 小时 ) 之后收集血液， 用 LC-MS/MS 测量血中药物浓度。
结果示于图 7。实施例 4 的细颗粒和实施例 6 的片剂均具有良好的口服吸收性。
因此， 本发明可改善微溶性药物 22β- 甲氧基齐墩果 -12- 烯 -3β， 24(4β)- 二醇 在水中的分散性及溶解性， 以确保高水平的口服吸收性， 同时可实现在制备过程中物理化 学稳定性的持久性， 由此可以制备更均质的微粒并且可以提供高质量药物制剂。