作为 γ- 分泌酶调节剂的新的取代的双环杂环化合物 发明领域 本发明涉及新的取代的双环杂环化合物， 此类化合物可用作 γ- 分泌酶调节剂。 本发明还涉及制备此类新化合物的方法、 含作为活性成分的所述化合物的药用组合物和所 述化合物作为药物的用途。
发明背景
早老性痴呆症 (AD) 为特征在于记忆、 认知和行为稳定性丧失的进行性神经变性 疾病。AD 困扰着 6-10％ 65 岁以上 - 多达 50％ 85 岁以上的人群。它是痴呆症的主要原因， 是继心血管病和癌症后的第三大死亡原因。目前没有有效治疗 AD 的方法， 在美国， 与 AD 有 关的总的净开支每年超过 $1000 亿。
AD 的病因复杂， 但它与一些风险因素有关， 包括 (1) 年龄， (2) 家族史和 (3) 头创 伤； 其它因素包括环境毒素和教育水平低。在边缘皮层和大脑皮层中的特定的神经病性损 害包括由超磷酸化 τ 蛋白组成的细胞内神经元纤维缠结和细胞外淀粉样 β- 肽的原纤维 聚合体沉积 ( 淀粉样蛋白斑 )。 淀粉样蛋白斑 (amyloid plaque) 的主要成分是各种长度的 淀粉样蛋白 β(A-β、 Abeta 或 Aβ) 肽。据信， 其变体 Aβ1-42- 肽 (Abeta-42) 为淀粉样蛋 白形成的主要病因物。另一种变体为 Aβ1-40- 肽 (Abeta-40)。淀粉样蛋白 β 为前体蛋 白， 即 β- 淀粉样前体蛋白 (β-APP 或 APP) 的蛋白水解产物。
AD 的家族性早期发作常染色体显性形式与 β- 淀粉样前体蛋白 (β-APP 或 APP) 和早老蛋白 1 和 2 中错义突变有关。 在一些患者中， AD 的晚期发作形式与载脂蛋白 E(ApoE) 基因的特定等位基因相关， 最近在 α2- 巨球蛋白中发现突变， α2- 巨球蛋白中的突变可能 与至少 30％ AD 人群有关。尽管存在该异质性， 但所有形式的 AD 均显示相似的病理检查结 果。基因分析为对于 AD 的合理治疗方法提供了最好线索。迄今为止发现的所有突变影响 称为 Abeta- 肽 (Aβ) 的淀粉样蛋白形成肽， 尤其是 Aβ42 的定量或定性生产， 对 AD 的 “淀 粉样级联学说” 给出有力支持 (Tanzi and Bertram， 2005， Cell 120， 545)。Aβ 肽的产生 与 AD 疾病之间的可能联系突显了需要更好地理解 Aβ 产生的机理， 并强烈地支持调节 Aβ 水平的治疗方法。
Aβ 肽的释放受至少两种蛋白的水解活性的调节， 这两种蛋白的水解活性分别是 指 β- 和 γ- 分泌酶在 Aβ 肽的 N- 端 (Met-Asp 键 ) 和 C- 端 (37-42 残基 ) 上解离。在该 分泌通路中， 有证据显示， β- 分泌酶先进行解离， 导致 s-APPβ(sβ) 分泌和 11kDa 膜结合 羧基末端片段 (CTF) 存留。据信， 被 γ- 分泌酶解离后， 后者产生 Aβ 肽。在携带某些突变 的特定蛋白 ( 早老蛋白 ) 的患者中， 较长的同种型 Aβ42 的量选择性增加， 这些突变与家族 性早老性痴呆症的早期发作有关。因此， 许多研究人员相信， Aβ42 是早老性痴呆症发病的 的主要元凶。
现已清楚， γ- 分泌酶活性不能归因于单个蛋白， 但实际上与不同蛋白的装配有 关。
gamma(γ)- 分泌酶活性存在于含至少 4 种组分的多蛋白复合物中 ： 早老蛋白 (PS) 异二聚体、 呆蛋白、 aph-1 和 pen-2。PS 异二聚体由通过前体蛋白的内切蛋白酶解产生的氨
基和羧基末端 PS 片段组成。催化部位的两个天冬氨酸在该异二聚体的接触面上。近来有 人提出， 呆蛋白用作 γ- 分泌酶底物受体。γ- 分泌酶的其它成员的功能尚不得而知， 但产 生活性均需要它们 (Steiner， 2004.Curr.Alzheimer Research 1(3) ： 175-181)。
因此， 尽管第二解离步骤的分子机理迄今为止仍然难以确定， 但 γ- 分泌酶复合 物已成为寻找治疗早老性痴呆症的化合物的主要靶标之一。
人们已提出过各种靶向早老性痴呆症中 γ- 分泌酶的策略， 范围从直接靶向催化 部位、 开发底物特异性抑制剂和 γ- 分泌酶活性调节剂 (Marjaux 等， 2004.Drug Discovery Today ： Therapeutic Strategies( 当今药物发现 ： 治疗策略 )， 第 1 卷， 1-6)。因此， 论述了 以分泌酶为靶标的各种化合物 (Larner， 2004.Secretases as therapeutics targets in Alzheimer’ s disease ： patents 2000-2004( 分泌酶作为早老性痴呆症的治疗靶标 ： 专利 2000-2004).Expert Opin.Ther.Patents 14， 1403-1420)。
该发现确实得到其中显示某些 NSAID 对 γ- 分泌酶的作用的生物化学研究的支持 (Weggen 等 (2001)Nature 414， 6860， 212 和 WO 01/78721 和 US 2002/0128319 ； Morihara 等 (2002)J.Neurochem.83， 1009 ； Eriksen(2003)J.Clin.Invest.112， 440)。用 NSAID 预防或 治疗 AD 的潜在制约是它们抑制 COX 酶的活性， 该抑制可导致有害副作用 ； 和它们的低 CNS 渗透 (Peretto 等， 2005， J.Med.Chem.48， 5705-5720)。
WO-2008/137139 涉及杂环衍生物和它们作为 γ- 分泌酶调节剂的用途。
WO-2005/115990 中公开了肉桂酰胺化合物， 此类化合物可用于治疗由淀粉样 β 蛋白造成的神经变性疾病， 例如早老性痴呆症、 老年痴呆症、 唐氏综合征和淀粉样变性。
WO-2004/110350 涉及芳基化合物和它们在调节淀粉样蛋白 β 中的用途。
WO-2007/131991 公开了咪唑并吡嗪化合物作为 MAPKAPK5 抑制剂， 用于治疗变性 和炎性疾病。
WO-2004/017963 涉及苯并咪唑作为凝血因子 Xa 抑制剂， 用于治疗血栓栓塞疾病。
非常需要调节 γ- 分泌酶活性从而为治疗早老性痴呆症开辟新途径的新化合物。 本发明的目的是克服或减少现有技术的至少一个缺点， 或提供有用的替代。 因此， 本发明目 的是提供此类新化合物。
发明概述
已发现本发明化合物可用作 γ- 分泌酶调节剂。本发明化合物及其药学上可接受 的组合物可用于治疗或预防早老性痴呆症。
本发明涉及式 (I) 新化合物及其药学上可接受的加成盐， 和溶剂合物 ：
及其立体异构体形式， 其中 1 Het 为 5 元或 6 元芳杂环， 具有式 (a-1)、 (a-2)、 (a-3)、 (a-4) 或 (a-5) ：
R0 为 H 或 C1-4 烷基 ； R1 为 H、 C1-4 烷基或 C1-4 烷氧基 C1-4 烷基 ； 2 R 为 C1-4 烷基 ； X为O或S； G1 为 CH 或 N ； G2 为 CH、 N 或被 C1-4 烷基取代的 C ； 1 条件是 G 和 G2 不同时为 N ； G3 为 CH 或 N ； R10a 和 R10b 各自独立为氢或 C1-4 烷基 ； A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 H、 卤基或 C1-4 烷氧基 ； 2 3 4 A、 A 和 A 各自独立为 CH、 CF 或 N ； 条件是 A1、 A2、 A3 和 A4 中最多两个为 N ； Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-1) 或 (b-2) ：
Z1 为 CH 或 N ；Z2 为 CR4a 或 N ；
Z3 为 CH 或 N ； 条件是 Z1、 Z2 和 Z3 中最多一个为 N ；
Y1 为 CH 或 N ；
Y2 为 CR4b 或 N ；
Y3 为 CH 或 N ； 条件是 Y1、 Y2 和 Y3 中最多一个为 N ；
R4a 为 H ； 卤基 ； C1-4 烷氧基 ； 氰基 ； C3-7 环烷基 ； C1-4 烷基羰基 ； C1-4 烷氧基羰基 ； 或任 选被一个或多个取代基取代的 C1-4 烷基， 所述取代基各自独立选自卤基和氨基 ； 4b
R 为H； 卤基 ； C1-4 烷氧基 ； 氰基 ； C3-7 环烷基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的 C1-4 烷基， 所述取代基各自独立选自卤基和氨基 ；
R5 为 H ； 卤基 ； 氰基 ； C1-4 烷氧基 ； C2-6 烯基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的 C1-6烷基， 所述取代基各自独立选自 C1-4 烷氧基和卤基 ；
R6a 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自哌啶基、 Ar、 C1-6 烷氧基、 四氢吡喃基、 C3-7 环烷基氧基和 8 9 C3-7 环烷基 ； C3-7 环烷基 ； C1-4 烷基羰基 ； 四氢吡喃基 ； Ar ； R R N- 羰基 ； 或 CH2-O-Ar ； 6b
R 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自哌啶基、 Ar、 C1-6 烷氧基、 四氢吡喃基、 C3-7 环烷基氧基和 C3-7 环烷基 ； C3-7 环烷基 ； 被一个或多个苯基取代基取代的 C3-7 环烷基， 所述苯基取代基任选 8 9 被一个或多个卤基取代基取代 ； 哌啶基 ； 吗啉基 ； 吡咯烷基 ； NR R ； 四氢吡喃基 ； O-Ar ； C1-6 烷氧基 ； C1-6 烷硫基 ； Ar ； CH2-O-Ar ； S-Ar ； NCH3-Ar ； 或 NH-Ar ；
其中哌啶基、 吗啉基和吡咯烷基各自可任选被一个或多个取代基取代， 所述取代 基各自独立选自 C1-4 烷基、 C2-6 烯基、 C1-4 烷基羰基、 卤基和 C1-4 烷氧基羰基 ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 8 9 自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 NR R 、 吗啉基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代的吡啶基， 所述取代基各自独立选自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 任选被一个或多个 C1-4 烷基取 代基取代的
唑基 ； 或任选被一个或多个卤基取代基取代的噻吩基 ；各 R8 独立为 H 或 C1-4 烷基 ；
各 R9 独立为 H 或 C1-4 烷基 ；
R7 为 H、 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自卤基、 苯基和 C1-4 烷氧基。
本发明还涉及制备式 (I) 化合物的方法和含它们的药用组合物。
惊讶的发现， 本发明化合物在体外和体内调节 γ- 分泌酶活性， 因此可用于治疗 或预防早老性痴呆症 (AD)、 创伤性脑损伤、 轻度认知损害 (MCI)、 衰老、 痴呆症、 具有 Lewy 小 体的痴呆症、 脑淀粉样血管病、 多梗塞性痴呆症、 唐氏综合征 ； 与帕金森病有关的痴呆症和 与 β 淀粉样蛋白有关的痴呆症， 优选早老性痴呆症和其它与 β 淀粉样蛋白疾病有关的病 症 ( 例如青光眼 )。
鉴于前述式 (I) 化合物的药理特性， 由此得出结论 ： 它们适合用作药物。
更尤其是， 这些化合物适合治疗或预防早老性痴呆症、 脑淀粉样血管病、 多梗塞性 痴呆症、 拳击员痴呆 (dementia pugilistica) 或唐氏综合征。
本发明还涉及通式 (I) 化合物、 其立体异构体形式及其药学上可接受的酸或碱加 成盐和溶剂合物在制备用于调节 γ- 分泌酶活性的药物中的用途。
优选式 (I) 化合物调节 γ- 分泌酶活性从而导致产生的 Aβ42- 肽的相对量减少 的用途。
本发明化合物或部分本发明化合物的一个优点可在于它们的增强的 CNS 渗透。
现在进一步阐述本发明。在下文中， 更详细地定义本发明的不同方面。除非明确 表明是相反情况， 如此定义的各方面可与任何其它一方面或多方面组合。 尤其是， 所述优选 或有利的任何特征可与所述优选或有利的任何其它一个特征或多个特征组合。
发明详述
当描述本发明化合物时， 除另有说明外， 使用的术语应视为符合以下定义。当指明取代基的数目时， 术语 “一个或多个” 表示从一个取代基到最大可能的取代 数目， 即取代基置换一个氢至最高达置换所有的氢， 所述取代基各自单独选自指定的基团， 条件是不超过正常价， 该取代导致化学稳定的化合物， 即足够稳定以致可从反应混合物中 分离至有用纯度并配制为治疗药物的化合物。因此， 优选 1、 2、 3 或 4 个取代基。尤其优选 1、 2 或 3 个取代基。更尤其优选 1 个取代基。
除另有说明外， 作为基团或基团一部分的术语 “卤基” (halo)、 “卤代” 或 “卤素” 通 常指氟、 氯、 溴、 碘。
作为基团或基团一部分的术语 “C1-6 烷基” 是指式 CnH2n+1 烃基， 其中 n 为 1-6 的数。 C1-6 烷基含 1-6 个碳原子， 尤其是 1-4 个碳原子， 更尤其是 1-3 个碳原子， 还更尤其是 1-2 个 碳原子。烷基可为直链或支链， 且可按本文中所述被取代。当本文中在碳原子后方使用下 标时， 下标是指所述的基团可能含有的碳原子数目。因此， 例如 C1-6 烷基包括含 1-6 个碳原 子的所有直链或支链烷基， 因此包括例如甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 2- 甲基 - 乙基、 丁基 及其异构体 ( 例如正丁基、 异丁基和叔丁基 )、 戊基及其异构体、 己基及其异构体等。
作为基团或基团一部分的术语 “C2-6 烷基” 是指式 CnH2n+1 烃基， 其中 n 为 2-6 的数。 C2-6 烷基含 2-6 个碳原子， 尤其是 2-4 个碳原子， 更尤其是 2-3 个碳原子。烷基可为直链或 支链， 且可按本文中所述被取代。 当本文中在碳原子后方使用下标时， 下标是指所述的基团 可能含有的碳原子数目。因此， 例如 C2-6 烷基包括含 2-6 个碳原子的所有直链或支链烷基， 因此包括例如乙基、 正丙基、 异丙基、 2- 甲基 - 乙基、 丁基及其异构体 ( 例如正丁基、 异丁基 和叔丁基 )、 戊基及其异构体、 己基及其异构体等。
作为基团或基团一部分的术语 “C1-4 烷基” 是指式 CnH2n+1 烃基， 其中 n 为 1-4 的数。 C1-4 烷基含 1-4 个碳原子， 尤其是 1-3 个碳原子， 更尤其是 1-2 个碳原子。烷基可为直链或 支链， 且可按本文中所述被取代。 当本文中在碳原子后方使用下标时， 下标是指所述的基团 可能含有的碳原子数目。因此， 例如 C1-4 烷基包括含 1-4 个碳原子的所有直链或支链烷基， 因此包括例如甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 2- 甲基 - 乙基、 丁基及其异构体 ( 例如正丁基、 异 丁基和叔丁基 ) 等。
作为基团或基团一部分的术语 “C1-6 烷氧基” 是指具有式 ORb 的基团， 其中 Rb 为 C1-6 烷基。合适的 C1-6 烷氧基的非限制性实例包括甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、 丁氧基、 异丁氧基、 仲丁氧基、 叔丁氧基、 戊氧基和己氧基。
作为基团或基团一部分的术语 “C1-4 烷氧基” 是指具有式 ORc 的基团， 其中 Rc 为 C1-4 烷基。合适的 C1-4 烷氧基的非限制性实例包括甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、 丁氧基、 异丁氧基、 仲丁氧基和叔丁氧基。
在本发明范围内， C2-6 烯基为含双键的具有 2-6 个碳原子的直链或支链烃基， 例如 乙烯基、 丙烯基、 丁烯基、 戊烯基、 1- 丙烯 -2- 基、 己烯基等。
单独或联合使用的术语 “C3-7 环烷基” 是指具有 3-7 个碳原子的环状饱和烃基。合 适的 C3-7 环烷基的非限制性实例包括环丙基、 环丁基、 环戊基、 环己基和环庚基。
单独或联合使用的术语 “C3-7 环烷基氧基” 是指具有式 ORd 的基团， 其中 Rd 为 C3-7 环烷基。合适的 C3-7 环烷基氧基的非限制性实例包括环丙氧基、 环丁氧基、 环戊氧基、 环己 氧基和环庚氧基。
本发明化合物的化学名按 Chemical Abstracts Service 确定的命名规则生成。在互变异构体形式的情况下， 应清楚， 其它未描绘的互变异构体形式也包括在本 发明范围内。
当任何变量在任何组分中出现超过一次， 各定义独立。
可以意识到， 某些式 (I) 化合物和它们的药学上可接受的加成盐和立体异构体形 式可含一个或多个手性中心并作为立体异构体形式存在。
前文中使用的术语 “立体异构体形式” 限定式 (I) 化合物可能具有的所有可能的 异构体形式。除另有提及或说明外， 化合物的化学名称是指所有可能的立体化学异构体形 式的混合物。更具体地说， 立体异构 (stereogenic) 中心可具有 R- 或 S- 构型 ； 二价环 ( 部 分 ) 饱和基团上的取代基可具有顺式或反式构型。含双键的化合物可在所述双键上具有 E 或 Z- 立体化学。式 (I) 化合物的立体异构体形式包括在本发明范围内。
当指定特定立体异构体形式时， 表示所述形式基本上不含其它异构体， 即与小于 50％， 优选小于 20％， 更优选小于 10％， 甚至更优选小于 5％， 进一步优选小于 2％， 最优选 小于 1％的其它异构体相联系。
当指定特定区域异构体 (regioisomeric) 形式时， 表示所述形式基本上不含其它 异构体， 即与小于 50％， 优选小于 20％， 更优选小于 10％， 甚至更优选小于 5％， 进一步优选 小于 2％， 最优选小于 1％的其它异构体相联系。
为在治疗中使用， 式 (I) 化合物的盐为其中相反离子为药学上可接受的那些盐。 但药学上不能接受的酸和碱的盐也可有用， 例如可用于药学上可接受的化合物的制备或纯 化。无论药学上是否可接受， 所有盐均包括在本发明范围内。
上文或下文中所述药学上可接受的酸和碱加成盐应包括式 (I) 化合物能够形成 的治疗活性无毒酸和碱加成盐形式。 可通过将碱形式用这种合适的酸处理方便地得到药学 上可接受的酸加成盐。合适的酸包括例如无机酸， 例如氢卤酸例如盐酸或氢溴酸、 硫酸、 硝 酸、 磷酸等酸 ； 或有机酸例如乙酸、 丙酸、 羟乙酸、 乳酸、 丙酮酸、 草酸 ( 即乙二酸 )、 丙二酸、 琥珀酸 ( 即丁二酸 )、 马来酸、 富马酸、 苹果酸、 酒石酸、 柠檬酸、 甲磺酸、 乙磺酸、 苯磺酸、 对 甲苯磺酸、 环拉酸、 水杨酸、 对 - 氨基水杨酸、 双羟萘酸等酸。可通过用合适的碱处理将所述 盐形式反向转化为游离碱形式。
也可通过用合适的有机和无机碱处理将含酸性质子的式 (I) 化合物转化为它 们的无毒金属或胺加成盐形式。合适的碱式盐形式包括例如铵盐、 碱金属和碱土金属盐 例如锂、 钠、 钾、 镁、 钙盐等 ； 有机碱成的盐， 例如伯、 仲和叔脂族和芳族胺， 例如甲胺、 乙 胺、 丙胺、 异丙胺、 四丁胺异构体、 二甲胺、 二乙胺、 二乙醇胺、 二丙胺、 二异丙胺、 二正丁胺、 吡咯烷、 哌啶、 吗啉、 三甲胺、 三乙胺、 三丙胺、 奎宁环、 吡啶、 喹啉和异喹啉 ； 苄星青霉素 G(benzathine)、 N- 甲基 -D- 葡糖胺、 哈胺青霉素 (hydrabamine) 的盐 ； 和氨基酸例如精氨 酸、 赖氨酸等成的盐。可通过用酸处理将所述盐形式反向转化为游离酸形式。
术语溶剂合物包括其中式 (I) 化合物能够形成的水合物和溶剂加成形式及其盐。 此类形式的实例为例如水合物、 醇化物等。
按下述方法制备的式 (I) 化合物可以对映体的外消旋混合物形式合成， 此类对映 体可按照本领域已知的拆分方法彼此分离。分离式 (I) 化合物的对映异构体形式的方法涉 及使用手性固定相的液相色谱。 所述纯立体化学异构体形式也可从合适原料的相应的纯立 体化学异构体形式衍生， 条件是反应按立体有择方式发生。优选， 如果需要特定立体异构体， 通过立体有择制备方法合成所述化合物。在这些方法中， 最好使用对映异构纯原料。
在本申请的框架内， 本发明化合物固有的包含其化学元素的所有同位素组合。在 本申请的框架内， 化学元素， 尤其是当提及与式 (I) 化合物相关时， 包含该元素的所有同位 1 2 3 素和同位素的混合物。例如， 当提及氢时， 应理解为是指 H、 H、 H 及其混合物。
因此， 本发明化合物固有的包括含一个或多个元素的一个或多个同位素的化合物 及其混合物， 包括又称为放射性标记化合物的放射性化合物， 其中一个或多个非放射性原 子被其放射性同位素之一置换。术语 “放射性标记化合物” 表示含至少一个放射性原子的 任何式 (I) 化合物或其药学上可接受的盐。例如， 化合物可用正电子或发射 γ 的放射性同 3 125 位素标记。对于放射性配体结合技术， H 原子或 I 原子为待置换原子的选择。对于成像， 18 15 最常用的发射正电子 (PET) 放射性同位素为 11C、 F、 O 和 13N， 其中所有的同位素均通过加 速器产生， 半衰期分别为 20、 100、 2 和 10 分钟。因为这些放射性同位素的半衰期太短， 所以 仅在制备它们的地点上具有加速器的机构使用它们才可行， 因此限制了它们的使用。最广 18 99m 201 123 泛使用的这些同位素为 F、 Tc、 Tl 和 I。技术人员已知这些放射性同位素的处理、 制 备、 分离和加入分子的方法。
尤其是， 放射性原子选自氢、 碳、 氮、 硫、 氧和卤素。尤其是， 放射性同位素选自 3H、 11 18 122 123 125 131 75 76 77 C、 F、 I、 I、 I、 I、 Br、 Br、 Br 和 82Br。
除上下文中另有说明外， 本说明书和权利要求中使用的单数形式 “一” 和 “该” 还 包括复数指示物。例如， “一种化合物” 表示一个化合物或大于一个化合物。
上述术语和本说明书中使用的其它术语， 本领域技术人员完全理解。
现在描述本发明化合物的优选特征。
本发明涉及新的式 (I) 化合物及其药学上可接受的加成盐和溶剂合物 ：
及其立体异构体形式， 其中 1 Het 为 5 元或 6 元芳杂环， 具有式 (a-1)、 (a-2)、 (a-3)、 (a-4) 或 (a-5) ：
R0 为 H 或 C1-4 烷基 ； R1 为 H、 C1-4 烷基或 C1-4 烷氧基 C1-4 烷基 ； 2 R 为 C1-4 烷基 ；X为O或S； G1 为 CH 或 N ； G2 为 CH、 N 或被 C1-4 烷基取代的 C ； 1 条件是 G 和 G2 不同时为 N ； G3 为 CH 或 N ； R10a 和 R10b 各自独立为氢或 C1-4 烷基 ； A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 H、 卤基或 C1-4 烷氧基 ； 2 3 4 A、 A 和 A 各自独立为 CH、 CF 或 N ； 条件是 A1、 A2、 A3 和 A4 中最多两个为 N ； Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-1) 或 (b-2) ：Z1 为 CH 或 N ；
Z2 为 CR4a 或 N ；
Z3 为 CH 或 N ； 条件是 Z1、 Z2 和 Z3 中最多一个为 N ；
Y1 为 CH 或 N ；
Y2 为 CR4b 或 N ；
Y3 为 CH 或 N ； 条件是 Y1、 Y2 和 Y3 中最多一个为 N ；
R4a 为 H ； 卤基 ； C1-4 烷氧基 ； 氰基 ； C3-7 环烷基 ； C1-4 烷基羰基 ； C1-4 烷氧基羰基 ； 或任 选被一个或多个取代基取代的 C1-4 烷基， 所述取代基各自独立选自卤基和氨基 ；
R4b 为 H ； 卤基 ； C1-4 烷氧基 ； 氰基 ； C3-7 环烷基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的 C1-4 烷基， 所述取代基各自独立选自卤基和氨基 ；
R5 为 H ； 卤基 ； 氰基 ； C1-4 烷氧基 ； C2-6 烯基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自 C1-4 烷氧基和卤基 ；
R6a 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自哌啶基、 Ar、 C1-6 烷氧基、 四氢吡喃基、 C3-7 环烷基氧基和 C3-7 环烷基 ； C3-7 环烷基 ； C1-4 烷基羰基 ； 四氢吡喃基 ； Ar ； R8R9N- 羰基 ； 或 CH2-O-Ar ； 6b
R 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自哌啶基、 Ar、 C1-6 烷氧基、 四氢吡喃基、 C3-7 环烷基氧基和 C3-7 环烷基 ； C3-7 环烷基 ； 被一个或多个苯基取代基取代的 C3-7 环烷基， 所述苯基取代基任选 被一个或多个卤基取代基取代 ； 哌啶基 ； 吗啉基 ； 吡咯烷基 ； NR8R9 ； 四氢吡喃基 ； O-Ar ； C1-6 烷氧基 ； C1-6 烷硫基 ； Ar ； CH2-O-Ar ； S-Ar ； NCH3-Ar ； 或 NH-Ar ；
其中哌啶基、 吗啉基和吡咯烷基各自可任选被一个或多个取代基取代， 所述取代
基各自独立选自 C1-4 烷基、 C2-6 烯基、 C1-4 烷基羰基、 卤基和 C1-4 烷氧基羰基 ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 8 9 自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 NR R 、 吗啉基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代的吡啶基， 所述取代基各自独立选自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 任选被一个或多个 C1-4 烷基取 代基取代的
唑基 ； 或任选被一个或多个卤基取代基取代的噻吩基 ；各 R8 独立为 H 或 C1-4 烷基 ；
各 R9 独立为 H 或 C1-4 烷基 ；
R7 为 H、 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自卤基、 苯基和 C1-4 烷氧基。
在一个实施方案中， 本发明涉及式 (I) 化合物及其立体异构体形式， 及其药学上 可接受的加成盐和溶剂合物， 或在任何其它实施方案中所述其任何亚组， 其中适用以下限 制中的一个或多个， 优选全部 ； 2 3
(a)A 、 A 和 A4 各自独立为 CH 或 N ； 条件是 A1、 A2、 A3 和 A4 中最多两个为 N ；
(b)Z2 为 CR4a ； (c)R4a 为 H ； 卤基 ； 氰基 ； C3-7 环烷基 ； C1-4 烷基羰基 ； C1-4 烷氧基羰基 ； 或任选被一个 或多个取代基取代的 C1-4 烷基， 所述取代基各自独立选自卤基和氨基 ； 5
(d)R 为 H ； 卤基 ； C1-4 烷氧基 ； C2-6 烯基 ； 或任选被一个或多个 C1-4 烷氧基取代基取 代的 C1-6 烷基 ；
(e)R6a 为任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自 Ar、 C1-6 烷氧基和四氢吡喃基 ； C3-7 环烷基 ； C1-4 烷基羰基 ； 四氢吡喃基 ； Ar ； 或 R8R9N- 羰基 ；
(f)R6b 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取 代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自 Ar、 C1-6 烷氧基、 四氢吡喃基和 C3-7 环烷基 ； C3-7 环 烷基 ； 被一个苯基取代基取代的 C3-7 环烷基， 所述苯基取代基任选被一个或多个卤基取代 8 9 基取代 ； 未取代的吡咯烷基 ； NR R ； 四氢吡喃基 ； Ar ； 或 CH2-O-Ar ；
(g) 各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选自 卤基、 C1-4 烷氧基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 任选被一个或多
个 C1-4 烷基取代基取代的
8唑基 ； 或任选被一个或多个卤基取代基取代的噻吩基 ；(h) 各 R 独立为 C1-4 烷基 ；(i) 各 R9 独立为 C1-4 烷基 ；
(j)R7 为任选被一个或多个 C1-4 烷氧基取代基取代的 C1-6 烷基。
在一个实施方案中， 本发明涉及式 (I) 化合物及其立体异构体形式， 及其药学上 可接受的加成盐和溶剂合物， 或在任何其它实施方案中所述其任何亚组， 其中适用以下限 制中的一个或多个， 优选全部 ： 0
(a)R 为 H 或甲基 ；
(b)R1 为 H、 甲基、 异丙基或甲氧基甲基 ； 2
(c)R 为甲基 ；
(d)G2 为 CH、 N 或被甲基取代的 C ； 1
条件是 G 和 G2 不同时为 N ；(e)R10a 和 R10b 各自独立为氢或甲基 ；
(f)A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 H、 F 或甲氧基 ； 2
(g)A 为 CH 或 N ；
(h)A3 为 CH ；
(i)A4 为 CH 或 N ；
(j)Z2 为 CR4a ；
(k)R4a 为 H ； Br ； Cl ； F； 氰基 ； 环丙基 ； 甲基羰基 ； 甲氧基羰基 ； 或任选被一个或多 个取代基取代的 C1-4 烷基， 所述取代基各自独立选自 F 和氨基 ； 4b
(l)R 为 H ； F； 甲氧基 ； 氰基 ； 环丙基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的 C1-4 烷 基， 所述取代基各自独立选自 F 和氨基 ；
(m)R5 为 H ； I； 甲氧基 ； 1- 丙烯 -2- 基 ； 或任选被一个或多个甲氧基取代基取代的 C1-6 烷基 ；
(n)R6a 为任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自 Ar、 乙氧基和四氢吡喃基 ； 环丙基 ； 甲基羰基 ； 四氢吡喃基 ； Ar ； 或 R8R9N- 羰基 ；
(o)R6b 为被一个或多个 F 取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代 的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自 Ar、 异丙氧基、 四氢吡喃基和环丙基 ； 环丙基 ； 被一个 苯基取代基取代的环丙基， 所述苯基取代基进一步被一个或多个 Cl 取代基取代 ； 未取代的 8 9 吡咯烷基 ； NR R ； 四氢吡喃基 ； Ar ； 或 CH2-O-Ar ；
(p) 其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立 选自 F、 Cl、 C1-4 烷氧基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个 F 取代基取代的 C1-4 烷基 ； 任选被一个或 多个甲基取代基取代的
8唑基 ； 或任选被一个或多个 Cl 取代基取代的噻吩基 ；(q) 各 R 为甲基 ；
(r) 各 R9 为甲基或 2- 甲基 - 丙基 ；
(s)R7 为任选被一个或多个甲氧基取代基取代的 C1-6 烷基。
在一个实施方案中， 本发明涉及式 (I) 化合物及其立体异构体形式， 及其药学上 可接受的加成盐和溶剂合物， 或在任何其它实施方案中所述其任何亚组， 其中适用以下限 制中的一个或多个， 优选全部 ： 1
(a)Het 为 5 元或 6 元芳杂环， 具有式 (a-1) 或 (a-5) ； 尤其是 (a-1) ； 0
(b)R 为 H 或 C1-4 烷基 ； 尤其是 H 或甲基 ； (c)R1 为 H 或 C1-4 烷基 ； 尤其是 H 或甲基 ；
(d)X 为 O ；
(e)R10a 和 R10b 各自独立为氢或 C1-4 烷基 ； 尤其是 R10a 为 H， R10b 为 C1-4 烷基 ； 更尤其 10a 10b 是 R 为 H， R 为甲基 ；
(f)A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 C1-4 烷氧基 ； 尤其是 R3 为甲氧基 ；
(g)A2、 A3 和 A4 为 CH ；
(h)Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-1) 或 (b-2) ； 尤其是 (b-2) ； 1 3
(i)Z 和 Z 为 CH ；
(j)Z2 为 CR4a ；
(k)R4a 为 H 或卤基 ； 尤其是卤基 ； 更尤其是氟 ；
(l)Y1 和 Y3 为 CH ；
(m)Y2 为 CR4b ；
(n)R4b 为 H 或 C1-4 烷氧基 ； 尤其是 H 或甲氧基 ； 5
(o)R 为 H 或甲基 ； 尤其是 H ； 6a
(p)R 为 C1-6 烷基 ；
(q)R6b 为任选被一个或多个卤基取代基取代的苯基 ； 尤其是被一个卤基取代基取 代的苯基 ； 更尤其是被一个 F 取代基取代的苯基 ； 最尤其是对位被一个 F 取代基取代的苯 基；
(r)R7 为 C1-6 烷基 ； 尤其是甲基或异丙基。
在一个实施方案中， 本发明涉及新的式 (I) 化合物及其立体异构体形式， 药学上 可接受的加成盐及其溶剂合物， 其中 1
Het 为 5 元芳杂环， 具有式 (a-1)、 (a-2)、 (a-3) 或 (a-4)
R0 为 H 或 C1-4 烷基 ； R1 为 H 或 C1-4 烷基 ； R2 为 C1-4 烷基 ； X为O或S； G1 为 CH 或 N ； G2 为 CH、 N 或被 C1-4 烷基取代的 C ； 1 2 条件是 G 和 G 不同时为 N ； G3 为 CH 或 N ； A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 H、 卤基或 C1-4 烷氧基 ； 2 3 4 A、 A 和 A 各自独立为 CH、 CF 或 N ； 条件是 A1、 A2、 A3 和 A4 中最多两个为 N ； Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-1) 或 (b-2) ：
Z1 为 CH 或 N ； Z2 为 CR4a ； Z3 为 CH ； Y1 为 CH 或 N ； Y2 为 CR4b ； Y3 为 CH ； R4a 为 H ； 卤基 ； C1-4 烷氧基 ； 氰基 ； 或任选被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基；
R4b 为 H ； 卤基 ； C1-4 烷氧基 ； 氰基 ； 或任选被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基； R5 为 H ； 卤基 ； 氰基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自 独立选自 C1-4 烷氧基和卤基 ；
R6a 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自哌啶基、 Ar、 C1-6 烷氧基、 四氢吡喃基、 C3-7 环烷基氧基和 C3-7 环烷基 ； C3-7 环烷基 ； 四氢吡喃基 ； Ar ； 或 CH2-O-Ar ； 6b
R 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自哌啶基、 Ar、 C1-6 烷氧基、 四氢吡喃基、 C3-7 环烷基氧基和 8 9 C3-7 环烷基 ； C3-7 环烷基 ； 哌啶基 ； 吗啉基 ； 吡咯烷基 ； NR R ； 四氢吡喃基 ； O-Ar ； C1-6 烷氧基 ； C1-6 烷硫基 ； Ar ； CH2-O-Ar ； S-Ar ； NCH3-Ar 或 NH-Ar ；
其中哌啶基、 吗啉基和吡咯烷基各自可任选被一个或多个取代基取代， 所述取代 基各自独立选自 C1-4 烷基、 C2-6 烯基、 C1-4 烷基羰基、 卤基和 C1-4 烷氧基羰基 ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 8 9 自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 NR R 、 吗啉基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的吡啶基， 所述取代基各自独立选自卤基、 C1-4 烷氧 基、 氰基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 8
各 R 独立为 H 或 C1-4 烷基 ；
各 R9 独立为 H 或 C1-4 烷基 ；
R7 为 H、 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自卤基、 苯基和 C1-4 烷氧基。
在一个实施方案中， 本发明涉及新的式 (I) 化合物 ：
及其立体异构体形式， 及其药学上可接受的加成盐和溶剂合物， 其中 1 Het 为 5 元芳杂环， 具有式 (a-1)、 (a-2)、 (a-3) 或 (a-4)
R0 为 H 或 C1-4 烷基 ； R1 为 H 或 C1-4 烷基 ； R2 为 C1-4 烷基 ；X为O或S； G1 为 CH 或 N ； G2 为 CH、 N 或被 C1-4 烷基取代的 C ； 条件是 G1 和 G2 不同时为 N ； G3 为 CH 或 N ； A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 H、 卤基或 C1-4 烷氧基 ； 2 3 4 A、 A 和 A 各自独立为 CH、 CF 或 N ； 条件是 A1、 A2、 A3 和 A4 中不超过两个为 N ； Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-1a) 或 (b-2a)R4a 为 H、 卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基， 或任选被一个或多个取代基取代的 C1-4 烷基， 所述 取代基选自卤基 ；
R4b 为 H、 卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基， 或任选被一个或多个取代基取代的 C1-4 烷基， 所述 取代基选自卤基 ；
R5 为 H ； 卤基 ； 氰基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基选自 C1-4 烷氧基和卤基 ；
R6a 为被一个或多个取代基取代的 C2-6 烷基， 所述取代基选自卤基 ； 任选被一个或 多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基选自哌啶基、 Ar、 C1-6 烷氧基、 四氢吡喃基、 C3-7 环烷 基氧基和 C3-7 环烷基 ； C3-7 环烷基 ； 四氢吡喃基 ； Ar ； 或 CH2-O-Ar ； 6b
R 为被一个或多个取代基取代的 C2-6 烷基， 所述取代基选自卤基 ； 任选被一个或 多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基选自哌啶基、 Ar、 C1-6 烷氧基、 四氢吡喃基、 C3-7 环烷 8 9 基氧基和 C3-7 环烷基 ； C3-7 环烷基 ； 哌啶基 ； 吗啉基 ； 吡咯烷基 ； NR R ； 四氢吡喃基 ； O-Ar ； C1-6
烷氧基 ； C1-6 烷硫基 ； Ar ； CH2-O-Ar ； S-Ar ； NCH3-Ar 或 NH-Ar ；
其中哌啶基、 吗啉基和吡咯烷基各自可任选被一个或多个取代基取代， 所述取代 基选自 C1-4 烷基、 C2-6 烯基、 C1-4 烷基羰基、 卤基和 C1-4 烷氧基羰基 ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 8 9 自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 NR R 、 吗啉基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个取代基取代的 C1-4 烷基， 所述取代基选自卤基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的吡啶基， 所述取代基各自独立选 自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个取代基取代的 C1-4 烷基， 所述取代基选 自卤基 ；
其中 R8 为 H 或 C1-4 烷基 ；
其中 R9 为 H 或 C1-4 烷基 ；
R7 为 H、 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基选自卤基、 苯基和C1-4 烷氧基 ；
Z1 为 CH 或 N ；
Y1 为 CH 或 N。
在另一个实施方案中， 本发明涉及式 (I) 化合物、 其立体异构体形式、 及其药学上 可接受的加成盐和溶剂合物， 其中 1
Het 为 5 元芳杂环， 具有式 (a-1)、 (a-2)、 (a-3) 或 (a-4)
R0 为 H 或 C1-4 烷基 ；
R1 为 H 或 C1-4 烷基 ；
R2 为 C1-4 烷基 ；
X为O或S；
G1 为 CH ；
G2 为 CH， 或被 C1-4 烷基取代的 C ； 3
G 为 CH ；
A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 H、 卤基或 C1-4 烷氧基 ； 2 3 4
A、 A 和 A 各自独立为 CH 或 N ； 条件是 A1、 A2、 A3 和 A4 中最多两个为 N ；
Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-1) 或 (b-2) ； 1 2
其中 Z 为 CH 或 N ； Z 为 CR4a ； Z3 为 CH ； Y1 为 CH 或 N ； Y2 为 CR4b ； Y3 为 CH ；
R4a 为 H ； 卤基 ； 氰基 ； 或任选被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 4b
R 为H； 卤基 ； 氰基 ； 或任选被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 5
R 为 H 或 C1-4 烷基 ；
R6a 为 Ar ； 被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 或任选被一个或多个取代基 取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自 Ar、 C1-6 烷氧基和 C3-7 环烷基 ； 6b
R 为 Ar ； 被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取 代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自 Ar、 C1-6 烷氧基和 C3-7 环烷基 ； 或 CH2-O-Ar ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 自卤基、 氰基、 C1-4 烷氧基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 7
R 为任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自卤基和 C1-4 烷氧基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及式 (I) 化合物及其立体异构体形式， 及其药学 上可接受的加成盐和溶剂合物， 其中 1
Het 为 5 元芳杂环， 具有式 (a-1)、 (a-2)、 (a-3) 或 (a-4) ； 0
R 为 H 或 C1-4 烷基 ；
R1 为 H 或 C1-4 烷基 ；
R2 为 C1-4 烷基 ； X为O或S； G1 为 CH ； G2 为 CH， 或被 C1-4 烷基取代的 C ； 3 G 为 CH ； A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 H、 卤基或 C1-4 烷氧基 ； 2 A 为 CH 或 N ； A3 和 A4 为 CH ； Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-1) 或 (b-2) ； 1 2 其中 Z 为 CH 或 N ； Z 为 CR4a ； Z3 为 CH ； Y1 为 CH 或 N ； Y2 为 CR4b ； Y3 为 CH ； R4a 为 H 或卤基 ； R4b 为 H、 卤基或任选被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 5 R 为 H 或 C1-4 烷基 ； R6a 为 Ar ； 或任选被一个 Ar 取代的 C1-6 烷基 ； 6b R 为 Ar ； 被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个 Ar 取代基取代的 C1-6 烷基 ； 或 CH2-O-Ar ； 其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 自卤基、 C1-4 烷氧基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ； 7
R 为任选被一个或多个 C1-4 烷氧基取代基取代的 C1-6 烷基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及式 (I) 化合物及其立体异构体形式， 及其药学 上可接受的加成盐和溶剂合物， 其中 1
Het 为 5 元芳杂环， 具有式 (a-1)、 (a-2)、 (a-3) 或 (a-4) ； 0
R 为 H 或甲基 ；
R1 为 H 或甲基 ；
R2 为甲基 ；
X为O或S；
G1 为 CH ；
G2 为 CH， 或被甲基取代的 C ； 3
G 为 CH ；
A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 H、 F 或甲氧基 ； 2 3
A 和 A 为 CH 或 N ； 条件是 A1、 A2 和 A3 中最多两个为 N ；
A4 为 CH ；
Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-1) 或 (b-2) ； 1 2
其中 Z 为 CH 或 N ； Z 为 CR4a ； Z3 为 CH ； Y1 为 CH 或 N ； Y2 为 CR4b ； Y3 为 CH ；
R4a 为 H、 Br、 F、 氰基或 CF3 ； 4b
R 为 H、 F、 氰基、 CH3 或 CF3 ； 5
R 为 H 或 CH3 ；
R6a 为 Ar ； 乙基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的甲基， 所述取代基各自独立选 自 C1-3 烷氧基和 Ar ；R6b 为 Ar ； 3， 3， 3- 三氟丙基 ； 环丙基甲基 ； 任选被一个或多个 Ar 取代基取代的甲 基； 或 CH2-O-Ar ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 自 F、 Cl、 CN、 甲基、 2- 丙基、 甲氧基、 乙氧基和三氟甲基 ； 7
R 为甲基、 2- 丙基、 叔丁基， 或任选被一个甲氧基取代的乙基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及式 (I) 化合物及其立体异构体形式， 及其药学 上可接受的加成盐和溶剂合物， 其中 1
Het 为 5 元芳杂环， 具有式 (a-1)、 (a-2)、 (a-3) 或 (a-4) ； 0
R 为 H 或甲基 ；
R1 为 H 或甲基 ；
R2 为甲基 ；
X为O或S；
G1 为 CH ；
G2 为 CH， 或被甲基取代的 C ； 3
G 为 CH ；
A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 H、 F 或甲氧基 ； 2
A 为 CH 或 N
A3 如 A4 为 CH ；
Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-1) 或 (b-2) ； 1 2
其中 Z 为 CH 或 N ； Z 为 CR4a ； Z3 为 CH ； Y1 为 CH 或 N ； Y2 为 CR4b ； Y3 为 CH ；
R4a 为 H 或 Br ；
R4b 为 H、 F、 CH3 或 CF3 ； 5
R 为 H 或 CH3 ；
R6a 为 Ar ； 或任选被一个 Ar 取代的甲基 ； 6b
R 为 Ar ； 3， 3， 3- 三氟丙基 ； 环丙基甲基 ； 任选被一个或多个 Ar 取代基取代的甲 基； 或 CH2-O-Ar ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 自 F、 Cl、 甲基、 2- 丙基、 甲氧基、 乙氧基和三氟甲基 ； 7
R 为甲基、 2- 丙基、 叔丁基， 或任选被一个甲氧基取代的乙基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及式 (I) 化合物、 其立体异构体形式、 及其药学上 可接受的加成盐和溶剂合物， 其中 1
Het 为 5 元芳杂环， 具有式 (a-1) ； 0
R 为 H 或 C1-4 烷基 ；
R1 为 H 或 C1-4 烷基 ；
X为O；
A1 为 CR3 或 N ； 其中 R3 为 H、 F 或 C1-4 烷氧基 ； 2 3 4
A、 A 和 A 为 CH ；
Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-2) ； 其中 Y1 为 CH 或 N ； Y2 为 CR4b ； Y3 为 CH ；
R4b 为 H、 F 或 CF3 ；R6b 为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选自卤基、 甲基 和甲氧基 ；
R7 为 C1-4 烷基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及式 (I) 化合物及其立体异构体形式， 及其药学 上可接受的加成盐和溶剂合物， 其中 1
Het 为 5 元芳杂环， 具有式 (a-1) ； 0
R 为 H 或 C1-4 烷基 ；
R1 为 H 或 C1-4 烷基 ；
X为O；
A1 为 CR3 ； 其中 R3 为 C1-4 烷氧基 ；
A2、 A3 和 A4 为 CH ；
Het2 为 9 元双环芳杂环， 具有式 (b-2) ； 其中 Y1 为 CH ； Y2 为 CH ； Y3 为 CH ；
R6b 为任选被一个或多个卤基取代基取代的苯基 ；
R7 为 C1-4 烷基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6a
R 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自 Ar、 C1-6 烷氧基、 C3-7 环烷基氧基和 C3-7 环烷基 ； Ar ； 或 CH2-O-Ar ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6b
R 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 任选被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自 Ar、 C1-6 烷氧基、 C3-7 环烷基氧基和 C3-7 环烷基 ； Ar ； 或 CH2-O-Ar ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6a
R 为异丁基； 环丙基甲基； 3， 3， 3- 三 氟 丙 基 ； 被 甲 氧 基 取 代 的 C2-4 烷 基 ； CH2-O-Ar ； 或 Ar ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6b
R 为异丁基； 环丙基甲基； 3， 3， 3- 三 氟 丙 基 ； 被 甲 氧 基 取 代 的 C2-4 烷 基 ； CH2-O-Ar ； 或 Ar ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6a R 为 Ar ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6a R 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选自卤基、 C1-4 烷氧基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ；
尤其是， 任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选自卤基、 甲 氧基、 甲基和三氟甲基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6b R 为 Ar ；
其中各 Ar 独立为任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选 自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6b R 为被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 或任选被一个或多个取代基取代的苯基， 所述取代基各自独立选自卤基、 C1-4 烷氧基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个卤基取代基取代的 C1-4 烷基 ；
尤其是， 被一个或多个卤基取代基取代的 C2-6 烷基 ； 或任选被一个或多个取代基 取代的苯基， 所述取代基各自独立选自卤基、 甲氧基、 甲基和三氟甲基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 4a R 为 H、 卤基、 C1-4 烷氧基， 或任选被一个或多个卤基取代基取代的甲基 ； 尤其是 H 或卤基 ； 更尤其是 H 或 F。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 4a R 为 H、 卤基、 甲基、 氰基或三氟甲基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 4b R 为 H、 卤基、 C1-4 烷氧基， 或任选被一个或多个卤基取代基取代的甲基 ； 尤其是 H、 卤基或 C1-4 烷氧基 ； 更尤其是 H、 F 或甲氧基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 4b R 为 H、 卤基、 甲基、 氰基或三氟甲基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 7 R 为被一个或多个取代基取代的 C1-6 烷基， 所述取代基各自独立选自卤基和 C1-4 烷氧基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 7 R 为 C1-4 烷基。
在另一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 8 9 R 为 H 或 C1-4 烷基 ； 且其中 R 为 H 或 C1-4 烷基。
在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 5
R 为 H 或甲基 ；
R6a 为间位被取代的苯基， 且任选还在其它位置被取代。
在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 5
R 为 H 或甲基 ；
R6a 为邻位被取代的苯基， 且任选还在其它位置被取代。在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 5
R 为 H 或甲基 ；
R6a 为对位被取代的苯基， 且任选还在其它位置被取代。
在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 5
R 为 H 或甲基 ；
R6a 为对位被 F 取代的苯基， 且任选还在其它位置被取代。
在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 5
R 为H；
R6a 为被苯基取代的甲基， 其中苯基任选被一个或多个取代基取代， 所述取代基各 8 9 自独立选自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 NR R 、 吗啉基、 C1-4 烷基， 和被一个或多个卤基取代基取 代的 C1-4 烷基。
在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6b
R 为间位被取代的苯基， 且任选还在其它位置被取代。
在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6b
R 为邻位被取代的苯基， 且任选还在其它位置被取代。
在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6b
R 为对位被取代的苯基， 且任选还在其它位置被取代。
在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6b
R 为对位被 F 取代的苯基， 且任选还在其它位置被取代。
在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 6b
R 为被苯基取代的甲基， 其中苯基任选被一个或多个取代基取代， 所述取代基各 8 9 自独立选自卤基、 C1-4 烷氧基、 氰基、 NR R 、 吗啉基、 C1-4 烷基 ； 和被一个或多个卤基取代基取 代的 C1-4 烷基。
在一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 R0 和 R1 中的一个为 C1-4 烷基， 且 R0 和 R1 中的一个为 H ； 尤其是 R0 和 R1 中的一个为甲基， 且 R0 和 R1 中的一个为 H。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 X 为 O。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 Het 为 (a-1)， X 为 O。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 X 为 S。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 Het 为 (a-1)， X 为 S。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 3 3 A 为 CR 或 N ； 其中 R 为 H、 F 或甲氧基。
在下一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 3 3 3
A 为 CR 或 N ； 其中 R 为 H、 卤基或 C1-4 烷氧基 ； 尤其是 R 为 H、 F 或 C1-4 烷氧基 ； 更 3 3 尤其是 R 为 H、 F 或甲氧基 ； 最尤其是 R 为甲氧基 ；A2 为 CH、 CF 或 N ； 尤其是 CH 或 N ； 3 4
A 和 A 为 CH 或 N ； 条件是 A1、 A2、 A3 和 A4 中最多两个为 N。
在下一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 3 3
A 为 CR 或 N ； 其中 R 为 H、 卤基或 C1-4 烷氧基 ； 2
A 为 CH、 CF 或 N ； 尤其是 CH 或 CF ； 更尤其是 CH ； 3 4
A 和 A 为 CH。
在下一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 2 A 为 N， A 为 CH。
在下一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 2 当 A 为 N 时， A 为 CH。
在下一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 2 3 4 A、 A、 A 和 A 中最多一个为 N。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 Het 具有式 (a-1)。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 Het 具有式 (a-2)。 在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 Het 具有式 (a-3)。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 Het 具有式 (a-4)。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 Het 具有式 (a-5)。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 2 Het 具有式 (b-1)。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 2 Het 具有式 (b-2)。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 Y 为 CH。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 Y 为 N。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 Z 为 CH。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 1 Z 为 N。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 2 4a Z 为 CR 。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 2 Z 为 N。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中
1Z2 和 Z3 中的一个为 N， 或其中 Y2 和 Y3 中的一个为 N。
在再一个实施方案中， 本发明涉及其它实施方案中任一实施方案的化合物， 其中 C1-6 烷基限定为 C1-4 烷基。
在一个实施方案中， 式 (I) 化合物选自 ：
1)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(52)N-[4-(2， 4- 二甲基 -53)N-[4-(2， 4- 二甲基 -5-唑 基 ) 苯 基 ]- 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑基 )-3- 甲氧基苯基 ]-2-(4- 氟苯基 )- 咪唑并 [1， 唑基 )-3- 甲氧基苯基 ]-3- 甲基 -2- 苯基 - 咪唑并 唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 苯2-a] 吡啶 -8- 胺，
[1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
4)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -55)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-吡啶 -8- 胺，
并咪唑 -4- 胺， 6)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(1- 甲 基 -1H- 吡 唑 -4- 基 ) 苯 基 ]-1- 甲 基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
7)N-[4-(2， 4- 二甲基 -5- 噻唑基 )-3- 甲氧基苯基 ]-2-(3- 甲氧基苯基 )-3- 甲 基 - 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
8)N-[4-(1， 3- 二 甲 基 -1H- 吡 唑 -4- 基 )-3- 甲 氧 基 苯 基 ]-2-(3- 甲 氧 基 苯 基 )-3- 甲基 - 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
9)N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ]-2-(3- 甲氧基苯基 )-3- 甲基 - 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
10)N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5- 噻唑基 ) 苯基 ]-2-(3- 甲氧基苯基 )-3- 甲基 - 咪 唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
11)N-[4-(2， 4- 二 甲 基 -5-唑 基 )-3- 甲 氧 基 苯 基 ]-2-(4- 氟 苯 基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
12)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 ) 苯基 ]-1- 甲 基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
13)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(3- 甲 基 -1， 2， 414)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -515)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[5-(4- 甲基 -516)N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -517)N-[3- 甲 氧 基 -4-(4- 甲 基 -5-二 唑 -5- 基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 苯 唑基 )-2- 吡啶基 ]-1H- 苯并并咪唑 -4- 胺，
咪唑 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -2-(3， 3， 3- 三氟丙 唑 基 ) 苯 基 ]-2-(3- 甲 氧 基 苯 基 )-1- 甲基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，18)2-(3- 氯苯基 )-1- 甲基 -N-[5-(4- 甲基 -5-唑基 )-2- 吡啶基 ]-1H- 苯并 唑 基 )-2- 吡 啶咪唑 -4- 胺，
19)2-(4- 氯 -3- 甲 氧 基 苯 基 )-1- 甲 基 -N-[5-(4- 甲 基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
20)2-[4- 乙 氧 基 -2- 甲 基 -5-(1- 甲 基 乙 基 ) 苯 基 ]-N-[3- 甲 氧 基 -4-(4- 甲 基 -5
唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺， 21)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -522)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[4-(2- 甲 基 -5唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1，2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑 基 ) 苯 基 ]- 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 唑基 )-3- 吡啶啶 -8- 胺，
23)1-(1， 1- 二甲基乙基 )-2-(4- 氟苯基 )-N-[6-(4- 甲基 -524)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[6-(4- 甲基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 苯并 唑基 ) 苯基 ]-1H- 苯咪唑 -4- 胺，
25)2-(4- 氟苯基 )-1-(1- 甲基乙基 )-N-[4-(2- 甲基 -526)N-[4-(2- 甲 基 -5-并咪唑 -4- 胺，
唑 基 ) 苯 基 ]-2-(2- 甲 基 苯 基 )- 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 唑基 )-3- 吡啶基 ]- 咪唑并 [1， 唑基 )-3- 吡啶基 ]- 咪唑并 [1，啶 -8- 胺，
27)2-(4- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[6-(4- 甲基 -528)2-(2- 氟 -4- 甲基苯基 )-N-[6-(4- 甲基 -529)N-[4-(2- 甲基 -5-2-a] 吡啶 -8- 胺，
2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-2-[2- 甲基 -5-( 三氟甲基 ) 苯基 ]- 咪唑 唑 基 ) 苯 基 ]-1- 甲并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
30)2-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -5-基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
31)1-(2- 甲 氧 基 乙 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -5- 噻 唑 基 ) 苯 基 ]-2- 甲 基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺， 32)N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5- 噻唑基 ) 苯基 ]-2-(2- 甲基苯基 )- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
33)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[4-(2- 甲基 -534)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -535)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -536)2-(4- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[4-(2- 甲基 -529唑基 ) 苯基 ]-1H- 咪唑并 [4， 唑基 ) 苯基 ]-1-(1- 甲基乙 唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 咪 唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a]5-c] 吡啶 -4- 胺，
基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
吡啶 -8- 胺，102325765 A CN 102325778
说明书23/134 页37)2-(2- 氟 -4- 甲基苯基 )-N-[4-(2- 甲基 -538)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[6-(2- 甲基 -539)2-(2- 氯苯基 )-3- 甲基 -N-[4-(2- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 唑基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 苯并 唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1，吡啶 -8- 胺，
咪唑 -4- 胺，
吡啶 -8- 胺，
40)2-(5- 甲氧基 -2- 甲基苯基 )-N-[4-(2- 甲基 -541)2-[(4- 氟苯基 ) 甲基 ]-N-[4-(2- 甲基 -542)N-[3- 氟 -4-(2- 甲基 -5-2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a]吡啶 -8- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 唑基 ) 苯基 ]- 咪并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
43)2-(5- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -544)N-[6-(4- 甲 基 -5-唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑 基 )-3- 吡 啶 基 ]-2-[2- 甲 基 -5-( 三 氟 甲 基 ) 苯 唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
45)2-(3- 甲 氧 基 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 基 )-N-[4-(2- 甲 基 -546)2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 基 )-N-[5-(2- 甲 基 -547)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑 基 )-2- 吡 啶基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -6-( 三 唑基 ) 苯基 ]-1H- 咪氟甲基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
48)2-(4- 氟苯基 )-1-(1- 甲基乙基 )-N-[4-(2- 甲基 -549)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -550)N-[3- 氟 -4-(2- 甲基 -551)N-[3- 氟 -4-(2- 甲 基 -5-唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-1-(1- 甲基乙基 )-1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-2-(5- 甲氧基 -2- 甲基苯基 )- 咪 唑 基 ) 苯 基 ]-2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 唑 基 )-3- 吡 啶唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
52)2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 基 )-N-[6-(2- 甲 基 -553)2-(2， 4- 二氟苯基 )-1- 甲基 -N-[4-(2- 甲基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-1H- 咪唑并 唑 基 ) 苯 基 ]-1- 甲[4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
54)2-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(4- 甲 基 -555)2-(2， 4- 二氟苯基 )-N-[3- 氟 -4-(2- 甲基 -530基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，102325765 A CN 102325778
说明书24/134 页56)6- 氟 -2-(3- 甲氧基苯基 )-1- 甲基 -N-[4-(2- 甲基 -557)2-(4- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[4-(2- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 唑基 ) 苯基 ]-1H- 咪唑并 唑 基 ) 苯 基 ]-1， 6- 二 甲 唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并吡嗪 -8- 胺，
58)2-(4- 氟苯基 )-1， 6- 二甲基 -N-[4-(2- 甲基 -559)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -560)6- 溴 -2-(4- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[4-(2- 甲基 -561)1- 甲基 -N-[6-(4- 甲基 -5-[4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
[1， 2-a] 吡嗪 -8- 胺，
唑基 )-3- 吡啶基 ]-2-( 苯氧基甲基 )-1H- 苯 唑基)苯并咪唑 -4- 胺，
62)2-(4- 氯 -3- 甲 氧 基 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -563)N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -5-基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑 基 ) 苯 基 ]-2-(3- 甲 氧 基 苯 基 )-1- 甲 唑基 ) 苯基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
64)2-( 环 丙 基 甲 基 )-1- 乙 基 -N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -565)N-[3- 氟 -4-(4- 甲 基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑 基 ) 苯 基 ]-2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 咪基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
66)2-( 环丙基甲基 )-N-[3- 氟 -4-(2- 甲基 -5-唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
67)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5- 噻唑基 ) 苯基 ]-1-(1- 甲基乙 基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
68)N-[3- 氟 -4-(2- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ]-2-(3- 甲氧基苯基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
69)2-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -5- 噻 唑 基 ) 苯 基 ]-1- 甲 基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
70)N-[3- 氟 -4-(2- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ]-2-(4- 氟苯基 )-3- 甲基 -3H- 咪唑 唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -6-( 三氟甲基 )-2-(3， 唑基 ) 苯基 ]-2- 甲基 -6-( 三氟甲基 )- 咪并 [4， 5-b] 吡啶 -7- 胺，
71)N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -572)N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-3， 3- 三氟丙基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
73)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[4-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 苯基 ]-1H- 苯并咪 唑 -4- 胺，
74)8-[[3- 氟 -4-(2- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]-N， N- 二甲基 -6-( 三氟甲基 )- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺，75)6- 氟 -2-(3- 甲 氧 基 苯 基 )-1- 甲 基 -N-[6-(2- 甲 基 -576)N-[3- 甲 氧 基 -4-(4- 甲 基 -577)N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5-唑 基 )-3- 吡 啶基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑 基 ) 苯 基 ]-2， 3- 二 甲 基 -6-( 三 氟 甲 唑基 ) 苯基 ]-2- 甲基 -6-( 三氟甲基 )- 咪 唑 基 ) 苯 基 ]- 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡基 )- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑并 [1， 2-a] 吡嗪 -8- 胺，
78)6- 溴 -2- 甲 基 -N-[4-(2- 甲 基 -579)8-[[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-嗪 -8- 胺，
唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]-N， N- 二甲基 -6-( 三 唑基 )-3- 吡啶基 ]-6-( 三氟 唑基 ) 苯基 ]-1H- 苯氟甲基 )- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺，
80)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[6-(2- 甲基 -5-甲基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
81)1- 甲基 -2-[(1- 甲基乙氧基 ) 甲基 ]-N-[4-(2- 甲基 -5-并咪唑 -4- 胺，
82)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[6-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 苯 并咪唑 -4- 胺，
83)2， 3- 二甲基 -N-[4-[2-(1- 甲基乙基 )-584)N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-唑基 ] 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-2， 3- 二甲基 - 咪唑并 [1， 2-a] 唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]-6-( 三氟甲基 ) 咪吡啶 -8- 胺，
85)1-[8-[[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -586)N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5-唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ]- 乙酮，
唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -2-(3， 3， 3- 三氟丙 唑 基 ) 苯 基 ]-1， 6- 二 甲基 )-1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
87)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(4- 甲 基 -588)8-[[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -589)N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -590)N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]-2- 甲基 - 咪唑并 [1， 唑基 ) 苯基 ]-2- 甲基 -6-( 三氟甲基 )- 咪 唑基 ) 苯基 ]-2- 甲基 -6-( 三氟甲基 )- 咪 唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -2-(1- 吡咯烷2-a] 吡啶 -6- 甲腈，
唑并 [1， 2-b] 哒嗪 -8- 胺，
唑并 [1， 2-b] 哒嗪 -8- 胺，
91)6- 氟 -N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5-基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
92)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(1- 甲 基 -1H-1， 2， 4- 三 唑 -5- 基 ) 苯 基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
93)6- 氟 -1- 甲基 -N-[4-(2- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ]-2-(1- 吡咯烷基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，94)6- 氟 -2-(4- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -595)2-(4- 氟 -2- 甲基苯基 )-8-[[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -596)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -597)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -598)N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -599)1- 甲基 -2-(4- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -6- 甲腈，
唑基 ) 苯基 ]-3- 甲基 -3H- 咪 唑基 ) 苯基 ]-3- 甲基 -3H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -7- 胺，
唑并 [4， 5-c] 吡啶 -7- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-2-(3- 甲氧基苯基 )-1， 6- 二 唑基 ) 苯基 ]-6-( 三 唑基 ) 苯基 ]-1H- 咪甲基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑基 )-N-[4-(2- 甲基 -5-氟甲基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
100)2-(3- 甲氧基苯基 )-1， 6- 二甲基 -N-[4-(2- 甲基 -5101)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[5-(2- 甲基 -5102)N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑基 )-2- 嘧啶基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-2-(3- 甲氧基苯基 )-1， 6- 二 唑基 )-3- 吡啶基 ] 氨甲基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
103)2-(3- 甲氧基苯基 )-1- 甲基 -4-[[6-(2- 甲基 -5104)N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -6- 甲腈，
唑基 ) 苯基 ]-2- 甲基 - 咪唑并 [1， 2-a] 吡 唑基 ) 苯基 ]-2-(2- 甲基丙基 )- 咪 唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]-3- 甲嗪 -8- 胺，
105)6- 氟 -N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
106)2-(4- 氟苯基 )-7-[[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5107)1- 甲 基 -N-[4-(2- 甲 基 -5-基 -3H- 咪唑并 [4， 5-b] 吡啶 -5- 甲腈，
唑 基 ) 苯 基 ]-2-( 四 氢 -2H- 吡喃 -4- 基 )-6-( 三氟甲基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
108)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[4-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 ) 苯基 ]-1H- 苯并 咪唑 -4- 胺，
109)2-(4- 氟 苯 基 )-6- 甲 氧 基 -N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -5110)N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -5-唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑 基 ) 苯 基 ]-1-(1- 甲 基 乙 基 )-2-( 四 唑基 ) 苯基 ]-3， 5- 二甲氢 -2H- 吡喃 -4- 基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
111)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5112)4-[[3- 甲 氧 基 -4-(4- 甲 基 -5-基 -3H- 咪唑并 [4， 5-b] 吡啶 -7- 胺，
唑 基 ) 苯 基 ] 氨 基 ]-2-(3- 甲 氧 基 苯基 )-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -6- 甲腈，113)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[5-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -5- 基 )-2- 吡啶基 ]-1H- 苯 并咪唑 -4- 胺， 114)2-( 乙氧基甲基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5唑基 ) 苯基 ]-6-( 三氟 唑基 ) 苯基 ] 氨
甲基 )- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
115)2-(4- 氟 -2- 甲基苯基 )-8-[[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5116)N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5-基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -6- 甲胺，
唑基 ) 苯基 ]-1， 6- 二甲基 -2-( 四氢 -2H- 吡 唑基 ) 苯喃 -4- 基 )-1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
117)5- 环 丙 基 -2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -5118)2-(4- 氟苯基 )-3-(1- 甲基乙烯基 )-N-[4-(2- 甲基 -5-基 ]-3- 甲基 -3H- 咪唑并 [4， 5-b] 吡啶 -7- 胺，
唑基 ) 苯基 ]- 咪 唑基 ) 苯唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
119)6- 环 丙 基 -2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -5120)2-(4- 氟苯基 )-3-(1- 甲基乙基 )-N-[4-(2- 甲基 -5121)2-(4- 氟苯基 )-4-[[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5122)8-[[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5123)N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5124)6- 氟 -N-[4-(2- 甲基 -5-基 ]-1- 甲基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -6- 甲腈，
唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]-2-(2- 甲基丙基 )- 咪 唑基 ) 苯基 ]-1， 6- 二甲基 -2-[3-(1- 甲基唑并 [1， 2-a] 吡啶 -6- 甲腈，
乙氧基 ) 苯基 ]-1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-2-(2- 甲基丙基 )- 咪唑并 [1， 2-a]吡啶 -8- 胺，
125)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[6-(2- 甲基 -5- 噻唑基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 苯并 咪唑 -4- 胺，
126)6- 氟 -2-(4- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[4-(2- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 唑基 ) 苯基 ]-6- 甲[1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
127)2-(4- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5128)2-(4- 氟 苯 基 )-1- 甲 基 -N-[4-(4- 甲 基 -5129)2-(3- 甲氧基苯基 )-3- 甲基 -N-[4-(4- 甲基 -5130)6- 氟 -N4-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5131)N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-基 - 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑 基 ) 苯 基 ]-1H- 苯 并 咪 唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1，唑 -4- 胺，
2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-N2， 1- 二甲基 -N2-(2- 甲基丙基 )-1H- 苯并咪唑 -2， 4- 二胺，
唑基 ) 苯基 ]-2-( 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基 )- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，132)2-(4- 氟苯基 )-4-[[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5133)N-[6-(4- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -6- 甲胺，
唑基 )-3- 吡啶基 ]-2-( 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基 )- 咪唑 唑 基 )-3- 吡 啶 基 ] 氨并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
134)2-(4- 氟 苯 基 )-1- 甲 基 -4-[[6-(4- 甲 基 -5135)6- 环丙基 -N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -6- 甲腈，
唑基 ) 苯基 ]-2- 甲基 - 咪唑并 唑 基 )-3- 吡 啶 唑 基 )-3- 吡 啶 唑 基 )-3- 吡 啶[1， 2-a] 吡嗪 -8- 胺，
136)2-(3- 氯 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 基 )-N-[6-(4- 甲 基 -5137)2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 基 )-N-[6-(4- 甲 基 -5138)2-(2- 氯 苯 基 )-6- 氟 -1- 甲 基 -N-[6-(4- 甲 基 -5139)2-(2- 氯苯基 )-1- 甲基 -N-[6-(4- 甲基 -5140)N-[4-(2， 4- 二甲基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -1H- 苯并 唑 基 )-3- 吡 啶 基 ] 氨 唑基 )-3- 吡啶基 ]- 咪咪唑 -4- 胺，
141)2-(4- 氟 苯 基 )-1- 甲 基 -4-[[6-(2- 甲 基 -5142)6- 氟 -2-(4- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[6-(2- 甲基 -5143)2-(2- 氯苯基 )-1- 甲基 -N-[6-(2- 甲基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -6- 甲腈，
唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 咪唑 唑 基 ) 苯 基 ]-3- 甲 唑 基 )-3- 吡 啶 唑 基 )-3- 吡 啶 唑 基 )-3- 吡 啶并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
144)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -5-基 -5-(1- 甲基乙基 )-3H- 咪唑并 [4， 5-b] 吡啶 -7- 胺，
145)6- 氟 -2-(4- 氟 苯 基 )-1- 甲 基 -N-[6-(4- 甲 基 -5146)6- 氟 -2-(4- 氟 苯 基 )-1- 甲 基 -N-[6-(2- 甲 基 -5147)2-(2- 氯 苯 基 )-6- 氟 -1- 甲 基 -N-[6-(2- 甲 基 -5148)6- 氯 -N-[3- 甲 氧 基 -4-(4- 甲 基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑 基 ) 苯 基 ]-2-( 四 氢 -2H- 吡 唑基 )-3- 吡喃 -4- 基 )- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
149)2-(5- 氯 -2- 噻吩基 )-1-(1- 甲基乙基 )-N-[6-(4- 甲基 -5150)N-[6-(2， 4- 二甲基 -5-啶基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 )-3- 吡啶基 ]-2-(4- 氟苯基 )-1-(1- 甲基乙35基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，102325765 A CN 102325778
说明书29/134 页151)2-(2- 氯苯基 )-N-[6-(2， 4- 二甲基 -5152)N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5-唑基 )-3- 吡啶基 ]-6- 氟 -1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-3-(3- 甲氧基丙基 )-2-[2-( 三 唑基 )-3- 吡啶基 ]-3H- 咪唑 唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a]氟甲基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
153)2-(4- 氟苯基 )-3- 甲基 -N-[6-(2- 甲基 -5154)2-(4- 氟苯基 )-3- 碘 -N-[4-(2- 甲基 -5155)3- 甲 基 -N-[6-(2- 甲 基 -5156)8-[[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5157)N-[4-(2， 4- 二甲基 -5158)N-[4-(2， 4- 二 甲 基 -5-并 [4， 5-c] 吡啶 -7- 胺，
吡啶 -8- 胺，
唑 基 )-3- 吡 啶 基 ]-2-[2-( 三 氟 甲 基 ) 苯 唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]-2-(2- 甲基丙基 )- 咪基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑并 [1， 2-a] 吡啶 -6- 甲酸甲酯，
唑基 )-3- 甲氧基苯基 ]-2-(4- 氟苯基 )-1-(1- 甲 唑 基 ) 苯 基 ]-2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 唑 基 )-3- 吡 啶 基 ]- 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 唑基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺， 唑基 )-3- 吡基乙基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
159)2- 环 丙 基 -N-[6-(4- 甲 基 -5160)2- 环丙基 -N-[4-(2- 甲基 -5-啶 -8- 胺，
161)6- 氟 -2-(4- 氟苯基 )-1-(1- 甲基乙基 )-N-[6-(2- 甲基 -5162)6- 氟 -N-[3- 甲 氧 基 -4-(4- 甲 基 -5-啶基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑 基 ) 苯 基 ]-2-( 四 氢 -2H- 吡 唑基 ) 苯喃 -4- 基 )- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
163)2-(4- 氟苯基 )-3-( 甲氧基甲基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5164)2-[1-(4- 氯苯基 ) 环丙基 ]-1- 甲基 -N-[6-(2- 甲基 -5165)N-[6-(4- 甲基 -5-基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 )-3- 吡啶基 ]-2-[( 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基 ) 甲 唑 基 )-3- 吡 啶基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
166)2-[1-(4- 氯 苯 基 ) 乙 基 ]-1- 甲 基 -N-[6-(2- 甲 基 -5167)2-(2- 氯苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5168)2-(2- 氯苯基 )-1， 6- 二甲基 -N-[6-(4- 甲基 -5169)6- 氯 -2-(5- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[6-(5- 甲基 -4170)1-[8-[[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -536基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-1， 6- 二甲 唑基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 咪 唑基 )-3- 吡啶基 ]- 咪基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
唑并 [1， 2-b] 哒嗪 -8- 胺，
唑基 ) 苯基 ] 氨基 ]-2-(2- 甲基丙基 )102325765 A CN 102325778说明书30/134 页咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -6- 基 ]- 乙酮，
171)2-(4- 氟苯基 )-3-(2- 甲氧基乙基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -5172)2-(4- 氟苯基 )-N-[4-[2-( 甲氧基甲基 )-5173)2-(2- 氯苯基 )-3- 甲基 -N-[6-(2- 甲基 -5174)2- 甲 基 -N-[6-(2- 甲 基 -5-唑基 )苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑基 ] 苯基 ]-1-(1- 甲基乙 唑基 )-3- 吡啶基 ]- 咪唑并基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
[1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
唑 基 )-3- 吡 啶 基 ]- 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 唑基 )-3- 吡啶 -8- 胺，
175)2-(4- 氟苯基 )-3- 甲基 -5-(1- 甲基乙基 )-N-[6-(2- 甲基 -5176)2-(4- 氟苯基 )-3- 甲氧基 -N-[6-(4- 甲基 -5177)2-(5- 氟 -2- 甲基苯基 )-N-[6-(4- 甲基 -5-啶基 ]-3H- 咪唑并 [4， 5-b] 吡啶 -7- 胺，
唑基 )-3- 吡啶基 ]- 咪唑 唑基 )-3- 吡啶基 ]- 咪唑并并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
[1， 2-b] 哒嗪 -8- 胺， 178)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(1- 甲 基 -1H-1， 2， 3- 三 唑 -4- 基 ) 苯 基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
179)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲 基 -2H-1， 2， 3- 三 唑 -4- 基 ) 苯 基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
180)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 苯 并咪唑 -4- 胺，
181)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]-1， 6- 二甲 基 -1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
182)2-(4- 氟 苯 基 )-1- 甲 基 -N-[4-(2- 甲 基 -4- 吡 啶 基 ) 苯 基 ]-1H- 苯 并 咪 唑 -4- 胺，
183)2-(2- 氯苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]-3- 甲基 - 咪 唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
184)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]-1-(1- 甲基乙 基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
185)2-(4- 氟苯基 )-1， 6- 二甲基 -N-[4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]-1H- 咪唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺，
186)2-(4- 氟苯基 )-1-(1- 甲基乙基 )-N-[4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]-1H- 苯 并咪唑 -4- 胺， 187)2-(2- 氯苯基 )-3- 甲基 -N-[4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
188)2-(4- 氟苯基 )-N-(2- 甲氧基 -2′ - 甲基 [3， 4′ - 联吡啶 ]-6- 基 )-1-(1- 甲 基乙基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
189)2-(4- 氟苯基 )-N-(2- 甲氧基 -2 ′ - 甲基 [3， 4 ′ - 联吡啶 ]-6- 基 )-1- 甲 基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
190)2-(2- 氯苯基 )-N-(2- 甲氧基 -2 ′ - 甲基 [3， 4 ′ - 联吡啶 ]-6- 基 )-3- 甲 基 - 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
191)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[6- 甲 氧 基 -5-(1- 甲 基 -1H- 吡 唑 -4- 基 )-2- 吡 啶 基 ]-1-(1- 甲基乙基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
192)2-(4- 氟 苯 基 )-N-[6- 甲 氧 基 -5-(1- 甲 基 -1H- 吡 唑 -4- 基 )-2- 吡 啶 基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
193)N-[4-(2， 6- 二 甲 基 -4- 吡 啶 基 ) 苯 基 ]-2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
194)N-[3- 氟 -4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]-2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -1H- 苯并 咪唑 -4- 胺，
195)N-[3- 氟 -4-(2- 甲 基 -4- 吡 啶 基 ) 苯 基 ]-2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
196)2-(2- 氯苯基 )-N-[3- 氟 -4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]-3- 甲基 - 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺，
197)N-[3- 氟 -4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]-2-(4- 氟苯基 )-1， 6- 二甲基 -1H- 咪 唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺， 198)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[6-(2- 甲基 -4- 吡啶基 )-3- 哒嗪基 ]-1H- 苯并 咪唑 -4- 胺，
199)2-(4- 氟苯基 )-1， 6- 二甲基 -N-[6-(2- 甲基 -4- 吡啶基 )-3- 哒嗪基 ]-1H- 咪 唑并 [4， 5-c] 吡啶 -4- 胺， 和
200)2-(4- 氟苯基 )-1- 甲基 -N-[4-(4- 吡啶基 ) 苯基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
包括它们的任何立体化学异构体形式和药学上可接受的加成盐和溶剂合物。
在 一 个 实 施 方 案 中， 优 选 所 述 式 (I) 化 合 物 为 2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧
基 -4-(4- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺， 包括其任何立体化学异构体形式及其药学上可接受的加成盐和溶剂合物。
在 一 个 实 施 方 案 中， 优 选 所 述 式 (I) 化 合 物 为 2-(4- 氟 苯 基 )-N-[3- 甲 氧 基 -4-(2- 甲基 -5唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺， 包括其任何立体化学异 构体形式及其药学上可接受的加成盐和溶剂合物。
在 一 个 实 施 方 案 中， 优 选 所 述 式 (I) 化 合 物 为 2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 基 )-N-[6-(2- 甲基 -5唑基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺， 包括其任何立体化学 异构体形式及其药学上可接受的加成盐和溶剂合物。
在 一 个 实 施 方 案 中， 优 选 所 述 式 (I) 化 合 物 为 2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 基 )-N-[6-(2- 甲基 -5
唑基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺。 唑 基 )-3- 吡 啶在一个实施方案中， 式 (I) 化合物选自 ： 1)2-(4- 氟 苯 基 )-1-(1- 甲 基 乙 基 )-N-[6-(2- 甲 基 -52)6- 氟 -N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-基 ]-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
唑基 ) 苯基 ]-2-(2- 甲基丙基 )- 咪唑 唑基 ) 苯基 ]-1- 甲并 [1， 2-a] 吡啶 -8- 胺 .HCl，
3)2-(4- 氟苯基 )-6- 甲氧基 -N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
4)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(4- 甲基 -5-唑基 ) 苯基 ]-1- 甲基 -1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
5)2-(4- 氟苯基 )-N-[3- 甲氧基 -4-(2- 甲基 -4- 吡啶基 ) 苯基 ]-1-(1- 甲基乙 基 )-1H- 苯并咪唑 -4- 胺，
包括它们的任何立体化学异构体形式， 及其药学上可接受的加成盐和溶剂合物。
在上文中， 一个实施方案的特征可与另一个实施方案或实施方案组合的特征组 合。
本发明还包括式 (I) 化合物及其亚组的制备方法。在所述反应中， 可能需要保护 活性官能团， 例如羟基、 氨基或羧基， 其中最终产物中需要这些基团以避免它们在反应中不 需要的参与。 可按标准实践例如参见 T.W.Greene and P.G.M.Wuts 著″ Protective Groups in Organic Chemistry″， John Wiley and Sons， 1999 使用常规保护基。
可通过下文中所述一系列步骤制备式 (I) 化合物及其亚组。通常由市售或通过本 领域技术人员显而易见的标准方法制备的原料制备它们。 也可用有机化学领域技术人员常 用的标准合成方法制备本发明化合物。
一些典型的实施例的通用制备方法如下所示 ： 实验方法 1 一般而言， 可按以下流程 1 中所示制备式 (I) 化合物， 其中所有变量定义同上 ：流程 1
可通过使式 (II-a) 与 (III-a) 中间体或使式 (II-b) 与 (III-b) 中间体之间进行 偶合反应， 制备式 (I) 化合物， 其中卤基定义为 Cl、 Br 或 I， 和其中所有其它变量定义同前 文。可在合适的碱例如 Cs2CO3 或叔丁醇钠的存在下， 进行该反应。反应可在反应惰性溶剂
例如甲苯、 N， N- 二甲基甲酰胺 (DMF)、 叔丁醇或二烷中进行。 反应通常在催化剂系统的存在下进行， 所述系统包含合适的催化剂例如乙酸钯 (II)(Pd(OAc)2) 或三 ( 二亚苄基丙酮 ) 合二钯 (Pd2(dba)3) 和配体例如 (9， 9- 二甲基 -9H- 夹氧杂蒽 -4， 5- 二基 ) 二 [ 二苯基膦 ] (Xantphos)、 [1， 1′ - 联萘 ]-2， 2′ - 二基二 [ 二苯基膦 ](BINAP)， 或二环己基 [2′， 4′， 6′ - 三 (1- 甲基乙基 )[1， 1′ - 联苯 ]-2- 基 ]- 膦 (X-phos)。优选， 该反应在惰性气氛下 例如氮气或氩气气氛下进行。可通过微波辅助的加热提高反应速度和产率。
在备选方法中， 其仅仅在 Het2 的定义中， Y1、 Y3、 Z1 或 Z3 为 N 时才有效， 可通过式(II-a) 与 (III-a) 中间体之间进行芳族亲核取代反应制备其中 Y1、 Y3、 Z1 或 Z3 为 N 的式 (I) 化合物。该反应可在合适的碱例如 K2CO3 或二异丙基乙胺的存在下进行。反应可在反应惰 性溶剂例如 DMF 或 CH3CN 中进行。该反应也可在酸性条件下例如在 HCl 或甲磺酸的存在下 进行。该反应可在反应惰性溶剂例如 2- 丙醇中进行。可通过微波辅助的加热提高反应速 度和产率。
实验方法 2
也可按流程 2， 通过使式 (IV) 中间体与式 (V) 中间体之间进行偶合反应制备式 (I) 化合物， 其中卤基定义为 Cl、 Br 或 I， 和其中所有其它变量定义同前。
流程 2
在流程 2 中， 可购买或可按本领域中通常已知的常规反应方法制备式 (V) 中间体。 偶合反应在合适的碱例如 Cs2CO3、 Na2CO3 或 NaOH 的存在下进行。反应可在反应惰性溶剂例
如甲苯、 DMF 或二烷中进行。反应通常在催化剂例如四 ( 三苯基膦 ) 合钯 (Pd(PPh3)4) 的存在下进行。搅拌、 升高的温度 ( 例如 70-140℃ ) 和 / 或压力可提高反应速度。优选， 该反 应在惰性气氛例如氮气或氩气气氛下进行。
或者， 可通过相应硼酸衍生物替代式 (V) 硼酸频哪醇 (picanol) 酯衍生物。
实验方法 3
或者， 也可按流程 3， 通过式 (VI) 中间体与式 (VII) 中间体之间进行偶合反应制备 式 (I) 化合物， 其中卤基定义为 Cl、 Br 或 I， 和其中所有其它变量定义同前。
流程 3
在流程 3 中， 可购买或可按本领域中通常已知的常规反应方法制备式 (VII) 中间 体。反应条件类似于实验方法 2 中所述反应条件。
实验方法 4
可按流程 4 中所示， 通过将式 (VIII) 中间体还原制备式 (II-a) 中间体， 其中所有 变量定义同前。
流程 4
可通过常规方法， 例如还原性氢化或用金属或金属盐和酸 [ 例如金属例如铁或金 属盐例如 SnCl2 和酸例如无机酸 ( 盐酸、 硫酸等 ) 或有机酸 ( 乙酸等 )] 还原或将硝基转化 为相应胺的其它熟知方法将 (VIII) 还原为 (II-a)。
实验方法 5
可按流程 5 中所述， 通过使式 (X) 中间体与式 (IX) 中间体之间进行缩合反应制备
式 (VIII) 中间体， 其中 Het1 限于 4 位上被 R0 取代的唑， 据此命名为式 (XI) 中间体。可购买或可按本领域中通常已知的常规反应方法制备中间体 (IX)。该缩合反应在合适的碱 例如 K2CO3 或乙醇钠 (NaOEt) 的存在下进行。反应可在质子溶剂例如甲醇 (MeOH) 或乙醇 (EtOH) 中进行。搅拌和 / 或升温 ( 例如 70-110℃ ) 可提高反应速度。在流程 5 中， 所有变 量定义同上述。
流程 5
或者， 流程 5 中所述反应也可用式 (IX) 中间体的苯甲醛衍生物进行， 其中 NO2 被 2 Cl、 Br、 I 或 NH-Het 置换。
实验方法 6
也可按照流程 6， 通过用本领域技术人员熟知的反应条件将式 (II-b) 中间体中的 卤基取代基转化为氨基或随后可转化为氨基的掩蔽或保护的氨基官能团， 制备式 (II-a) 中间体。在流程 6 中， 卤基定义为 Cl、 Br 或 I， 所有其它变量定义同前。
流程 6 可按照用于合成中间体 (XI) 的合成方案， 以式 (XII) 中间体为原料， 制备式 唑， 据此命名为式 (XII-b) 中间体 ：(II-b) 中间体， 其中 Het1 限于被 R0 取代的
可购买或可按本领域中通常已知的常规反应方法制备式 (XII) 中间体。 实验方法 7 可按流程 7， 通过使式 (XIV) 中间体与式 (IX) 中间体之间进行缩合反应制备式 唑， 据此命名为式 (XIII) 中(VIII) 中间体， 其中 Het1 限于 2 位被 R1 取代且 CH3 在 4 位的间体， 其中所有变量定义同前文。可购买或可按本领域中通常已知的常规反应方法制备两 种中间体。该缩合反应通常可在溶剂例如吡啶中进行。搅拌和 / 或升温 ( 例如 70-110℃ ) 可提高反应速度。
流程 7
实验方法 8
可按流程 8 中所示， 通过使式 (XV) 中间体与式 (III-a) 中间体之间进行偶合反应 制备式 (IV) 中间体， 其中卤基定义为 Cl、 Br 或 I， 其中所有其它变量定义同前文。可按类 似于实验方法 1 中所述合成方案进行该反应。
流程 8
实验方法 9
可通过使式 (XVII) 中间体与式 (XVI) 中间体缩合， 制备式 (VIII) 中间体， 其中 1 Het 限于流程 9 中所示， 据此命名为式 (XVIII) 中间体， 式 (XVI) 中间体在三氟甲磺酸的存 在下， 用二乙酸碘苯活化。搅拌和 / 或升高的温度 ( 例如 70-100℃ ) 可提高反应速度。在 流程 9 中， R1a 定义为 C1-4 烷基， 所有其它变量定义同前文。
流程 9
可由其中 NO2 被相应卤素 ( 分别为 Cl 或 Br) 置换的式 (XVI) 中间体制备式 (XVIII) 中间体， 其中 NO2 被 Cl 或 Br 置换。
实验方法 10
可按流程 10 中所示， 通过使式 (XIX) 中间体与式 (XX) 中间体缩合制备式 (VIII) 1 中间体， 其中 Het 限于流程 10 中所示， 据此命名为式 (XXI) 中间体， 其中所有变量定义同 前。通常， 反应可在乙酸中进行。搅拌和 / 或升高的温度 ( 最高达 90℃ ) 可提高反应速度。
流程 10
实验方法 11
可按流程 11 中所示， 通过使二甲基甲酰胺二甲基缩醛 (DMF-DMA) 与式 (XVI) 中间 体缩合制备式 (XIX) 中间体。搅拌和 / 或升温 ( 例如 70-110℃ ) 可提高反应速度。
流程 11
实验方法 12
可按流程 12 中所示， 通过使式 (XXII) 中间体与式 (XXIII) 中间体之间进行缩合 反应制备式 (III-a) 中间体， 其中 Het2 限于产生式 (XXIV) 中间体， 其中卤基限于 Br 和 Cl， 其中所有其它变量定义同上文。反应可在反应惰性溶剂例如 EtOH 或正丁醇中进行， 或通过 在无溶剂存在下混合反应试剂进行。 反应可方便地在范围在 50℃ - 反应混合物的回流温度 之间升高的温度下进行。可通过微波辅助的加热提高反应速度和产率。
流程 12
实验方法 13
可按流程 13， 通过将式 (XXV) 中间体用式 (XXVI) 中间体酰化， 然后进行缩合反应 2 得到 (XXVII)， 制备式 (III-a) 中间体， 其中 Het 限于产生式 (XXVII) 中间体， 其中 R6b 与苯 并咪唑杂环碳连接， 其中卤基限于 Br、 Cl 和 I， 且其中所有其它取代基定义同前文。酰化反 应可在溶剂例如吡啶或反应惰性溶剂例如 DMF 中在碱例如三乙胺 (Et3N) 的存在下进行。 可 通过将粗酰化产物在溶剂例如乙酸中加热， 进行后续缩合反应。
流程 13
实验方法 14
或者， 也可通过将中间体 (XXV) 用式 (XXVIII) 醛处理制备式 (XXVII) 中间体， 其 6b 中 R 与苯并咪唑杂环碳连接。可按流程 14， 在焦亚硫酸钠的存在下， 在反应惰性溶剂例如 N， N- 二甲基乙酰胺 (DMA) 中进行反应， 其中卤基限于 Br、 Cl 和 I， 其中所有其它取代基定义 同前文。
流程 14
实验方法 15
或者， 也可按流程 15， 通过在连二亚硫酸钠的存在下在反应惰性溶剂例如 EtOH 中， 将中间体 (XXIX) 用式 (XXVIII) 醛处理， 制备式 (XXVII) 中间体， 其中 R6b 与苯并咪唑杂 环碳连接， 其中卤基限于 Br、 Cl 和 I， 和其中所有其它取代基定义同前文。
流程 15
对于其中 R7 为 H 的式 (XXVII) 中间体， 可通过 N- 烷基化引入备选的 R7， 主要生成 7 式 (XXVII) 中间体， 其中 R 为取代基， 该取代基定义同前， 氢除外。
实验方法 16
可按以下流程 16 中所示， 通过将中间体 (XXIX) 还原， 制备式 (XXV) 中间体， 其中 卤基限于 Br、 Cl 和 I， 和其中所有其它取代基定义同前文。可通过常规方法例如还原性氢 化或用金属或金属盐和酸 [ 例如金属例如铁或金属盐例如 SnCl2 和酸例如无机酸 ( 盐酸、 硫酸等 ) 或有机酸 ( 乙酸等 )] 还原， 或将硝基转化为相应胺的其它熟知方法将 (XXIX) 还 原为 (XXV)。
流程 16
实验方法 17
可按以下流程 17 中所示， 通过使式 (XXX) 中间体与式 (XLV) 中间体之间进行取代 反应制备式 (XXIX) 中间体， 其中卤基限于 Br、 Cl 和 I， 卤基 -b 定义为 F、 Cl 或 Br， 和其中所 有其它取代基定义同前文。可购买或按本领域通常已知的常规反应方法制备式 (XLV) 中间 体。
流程 17
实验方法 18
可通过使式 (XXXI-a) 与 (XXXII-a) 中间体或式 (XXXI-b) 与 (XXXII-b) 中间体之 间进行偶合反应， 制备式 (VIII) 中间体。该反应在流程 18 中显示， 其中卤基限于 Br、 Cl 和 I， 和其中所有其它变量定义同前文。在流程 18 中， 可购买或按本领域通常已知的常规反应
方法制备式 (XXXI-a)、 (XXXI-b)、 (XXXII-a) 和 (XXXII-b) 中间体。偶合反应在合适的碱 例如 Cs2CO3、 Na2CO3 或 NaOH 的存在下进行。反应可在反应惰性溶剂例如甲苯、 DMF 或四氢呋 喃 (THF) 中进行。反应通常在催化剂系统的存在下进行， 所述催化剂系统包含合适的催化 剂例如乙酸钯 (II)(Pd(OAc)2) 和配体例如三苯基膦。搅拌、 升高的温度 ( 例如 70-140℃ ) 和 / 或压力可提高反应速度。优选该反应在惰性气氛例如氮气或氩气气氛下进行。可用相 应硼酸酯例如频哪醇酯代替硼酸 (XXXII-a) 或 (XXXI-b)。
流程 18
实验方法 19
可按流程 19， 通过使式 (XXXI-a) 中间体与三丁基 (1- 乙氧基乙烯基 ) 锡进行偶 合反应， 制备式 (XVI) 中间体， 其中卤基定义为 Br、 Cl 或 I， 和其中所有其它变量定义同前。 在流程 19 中， 可购买或按本领域通常已知的常规反应方法制备式 (XXXI-a) 中间体。反应 可在反应惰性溶剂例如甲苯或 DMF 中进行。反应通常在催化剂例如 Pd(PPh3)4 的存在下进 行。搅拌、 升高的温度 ( 例如 70-140℃ ) 和 / 或压力可提高反应速度。优选该反应在惰性 气氛例如氮气或氩气气氛下进行。 然后， 可将得到的乙醇在酸性条件下例如用盐酸水解， 得 到式 (XVI) 乙酰基衍生物。
流程 19
实验方法 20
可按流程 20 中所示， 通过使式 (XXXIV) 中间体与式 (XXXIII) 中间体之间进行缩 合反应制备式 (XXXV) 中间体， 其中 R1a 定义为 C1-4 烷基， 和其中所有其它取代基定义同上文。 反应可在溶剂例如吡啶中进行。搅拌、 升高的温度 ( 例如 70-100℃ ) 可提高反应速度。
流程 20
实验方法 21
可按流程 21 中所示， 通过式 (XXXVI) 中间体活化反应制备式 (XXXIV) 中间体， 其 中所有变量定义同上文。反应可在反应惰性溶剂例如氯仿中在 DMF 的存在下进行。反应通 常在活化剂例如 SOCl2 的存在下进行。 搅拌、 升高的温度 ( 例如 50-80℃ ) 可提高反应速度。
流程 21
实验方法 22
可按流程 22， 通过使式 (XXXVII) 中间体与式 (XXXVIII) 中间体之间进行偶合反应 制备式 (XXXIX) 中间体， 其中卤基定义为 I 或 Br， 和其中所有其它变量定义同前。在流程 22 中， 可购买或按本领域通常已知的常规反应方法制备式 (XXXVII) 和 (XXXVIII) 中间体。 偶合反应在合适的碱例如 Cs2CO3 或 Ag2CO3 的存在下进行。 反应可在反应惰性溶剂例如 H2O、 CH3CN 或 DMF 中进行。反应通常在催化剂系统的存在下进行， 所述催化剂系统包含合适的催 化剂例如乙酸钯 (II)(Pd(OAc)2) 或 1.1- 二 ( 二苯基膦基二茂铁二氯合钯 II)(Pd(dppf) Cl2) 和配体例如三苯基膦。搅拌、 升高的温度 ( 例如 60-140℃ ) 可提高反应速度。
流程 22
实验方法 23
可按流程 23 所示， 通过使式 (XL) 化合物进行脱羧反应制备式 (XLI) 中间体， 其中 卤基定义为 Br、 I 或 Cl， 和其中所有其它变量定义同上文。 反应可在溶剂例如喹啉或 DMF 中 在氧化铜 (II)(CuO) 的存在下进行。反应通常需要高温 ( 最高达 150℃ )。
流程 23
实验方法 24
可按流程 24 所示， 通过将式 (XLII) 化合物的羧酸酯官能团水解， 制备式 (XL) 中 间体， 其中卤基定义为 Br、 I 或 Cl， 和其中所有其它变量定义同前。该反应可在酸性条件或
碱性条件下进行。 优选， 在碱性条件下在碱例如 NaOH 或 LiOH 的存在下， 在二 合物中， 在室温下进行反应。
烷和水的混流程 24
实验方法 25
可按流程 25 中所示， 通过使式 (XLIII) 中间体与式 (XLIV) 中间体之间进行偶合 反应制备式 (XLII) 中间体， 其中卤基定义为 Br、 I 或 Cl， 其中卤基 -c 定义为 Br 或 I， 和其 中所有其它变量定义同前文。可购买或按本领域通常已知的常规反应方法制备式 (XLIII) 和 (XLIV) 中间体。偶合反应在合适的碱例如 Cs2CO3 或 Ag2CO3 的存在下进行。反应可在反 应惰性溶剂例如 CH3CN、 甲苯或 DMF 中进行。反应通常在催化剂系统的存在下进行， 所述催 化剂系统包含合适的催化剂例如乙酸钯 (II)(Pd(OAc)2) 或 [1， 1’ - 二 ( 二苯基膦基 ) 二茂 铁 ] 二氯合钯 (II)(Pd(dppf)Cl2) 和配体例如三苯基膦或三 - 邻 - 甲苯基膦。搅拌、 升高 的温度 ( 例如 60-140℃ ) 可提高反应速度。
流程 25 当必需或需要时， 可按任何顺序进行以下另外步骤中的任何一个或多个 ：可用本领域中已知方法将式 (I) 化合物、 其任何亚组、 加成盐、 溶剂合物和立体化 学异构体形式转化为本发明其它化合物。在特定情况下， 可在本领域技术人员熟知的还原 4a 4b 条件下， 将其中 R 或 R 定义为 Cl、 Br 或 I 的式 (I) 化合物进一步衍生为其中 R4a 或 R4b 为 H 的式 (I) 化合物。
本领域技术人员会意识到， 在上述方法中， 中间体化合物的官能团可能需要用保 护基封闭。 在中间体化合物的官能团被保护基封闭的情况下， 在反应步骤后， 可将它们脱保 护。
药理学
发现， 本发明化合物调节 γ 分泌酶活性。因此， 本发明化合物及其药学上可接受 的组合物可用于治疗或预防早老性痴呆症 (AD)、 创伤性脑损伤、 轻度认知损害 (MCI)、 衰 老、 痴呆症、 具有 Lewy 小体的痴呆症、 脑淀粉样血管病、 多梗塞性痴呆症、 唐氏综合征、 与帕 金森病有关的痴呆症和与 β- 淀粉样蛋白有关的痴呆症， 优选早老性痴呆症。
本文中使用的术语 “调节 γ 分泌酶活性” 是指通过 γ 分泌酶 - 复合物对 APP 加 工的作用。优选， 是指作用， 其中不施用所述化合物可基本上保持 APP 加工的整体速度， 但 其中加工产物的相对量发生改变， 更优选按产生的 Aβ42- 肽的量减少的方式改变。例如， 可产生不同的 Abeta 类物质 ( 例如较短氨基酸序列的 Abeta-38 或其它 Abeta 肽类物质而 非 Abeta-42) 或产物的相对量不同 ( 例如 Abeta-40 与 Abeta-42 的比例改变， 优选增加 )。
之前已表明， γ 分泌酶复合物还涉及 Notch 蛋白加工。Notch 为在发育过程中其 关键作用的信号蛋白 ( 例如 Schweisguth F(2004)Curr.Biol.14， R129 综述 )。对于 γ 分 泌酶调节剂在治疗中的用途， 不干扰 γ 分泌酶活性的 Notch 加工活性以避免预计的有害副 作用似乎特别有利。 虽然因伴随的 Notch 加工抑制导致 γ 分泌酶抑制剂显示副作用， 但γ 分泌酶调节剂可具有选择性减少高度聚集和神经毒性形式的 Aβ 即 Aβ42 产生而不减少较 小聚集性较低形式的 Aβ 即 Aβ38 和无伴随抑制 Notch 加工的优点。因此， 优选不影响 γ 分泌酶复合物的 Notch 加工活性的化合物。
本文中使用的术语 “治疗” 是指其中可能存在延缓、 妨碍、 抑制或终止疾病进行但 无需显示所有症状消除的所有方法。
本发明涉及用作药物的通式 (I) 化合物及其立体异构体形式、 药学上可接受的酸 或碱加成盐和溶剂合物。
本发明还涉及用于治疗或预防疾病或病症的通式 (I) 化合物及其立体异构体形 式、 药学上可接受的酸或碱加成盐和溶剂合物， 所述疾病或病症选自早老性痴呆症 (AD)、 创 伤性脑损伤、 轻度认知损害 (MCI)、 衰老、 痴呆症、 具有 Lewy 小体的痴呆症、 脑淀粉样血管 病、 多梗塞性痴呆症或唐氏综合征。
在一个实施方案中， 所述疾病或病症选自早老性痴呆症、 轻度认知损害、 衰老、 痴 呆症、 具有 Lewy 小体的痴呆症、 脑淀粉样血管病、 多梗塞性痴呆症或唐氏综合征。
在一个实施方案中， 所述疾病或病症优选为早老性痴呆症。
本发明还涉及用于治疗所述疾病的通式 (I) 化合物及其立体异构体形式、 药学上 可接受的酸或碱加成盐和溶剂合物。
本发明还涉及用于治疗或预防， 尤其是治疗 γ 分泌酶介导的疾病或病症的通式 (I) 化合物及其立体异构体形式、 药学上可接受的酸或碱加成盐和溶剂合物。本发明还涉及通式 (I) 化合物及其立体异构体形式、 药学上可接受的酸或碱加成 盐和溶剂合物在制备药物中的用途。
本发明还涉及通式 (I) 化合物及其立体异构体形式、 药学上可接受的酸或碱加成 盐和溶剂合物在制备用于调节 γ 分泌酶活性的药物中的用途。
本发明还涉及通式 (I) 化合物及其立体异构体形式、 药学上可接受的酸或碱加成 盐和溶剂合物在制备用于治疗或预防前文中所述任一疾病病症的药物中的用途。
本发明还涉及通式 (I) 化合物及其立体异构体形式、 药学上可接受的酸或碱加成 盐和溶剂合物在制备用于治疗前文中所述任一疾病病症的药物中的用途。
在本发明中， 尤其优选通过合适测定例如用于以下实施例的测定测得的抑制 Aβ42- 肽产生的 IC50 值小于 1000nM， 优选小于 100nM， 更优选小于 50nM， 甚至更优选小于 20nM 的式 (I) 化合物或其任何亚组。
本发明化合物可给予哺乳动物， 优选人， 用于治疗或预防前文中所述任一疾病。
考虑到式 (I) 化合物的实用性， 提供了治疗患前文中所述任一疾病的温血动物包 括人的方法， 或预防患前文中所述任一疾病的温血动物包括人的方法。
所述方法包括给予， 即全身或局部给予， 优选经口给予温血动物包括人有效量的 式 (I) 化合物及其立体异构体形式和药学上可接受的加成盐或溶剂合物。
治疗此类疾病的技术人员可由下文中给出的试验结果决定每日有效治疗量。 每日 有效治疗量为约 0.005mg/kg-50mg/kg， 尤其是 0.01mg/kg-50mg/kg 体重， 更尤其是 0.01mg/ kg-25mg/kg 体重， 优选约 0.01mg/kg- 约 15mg/kg， 更优选约 0.01mg/kg- 约 10mg/kg， 甚至 更优选约 0.01mg/kg- 约 1mg/kg， 最优选约 0.05mg/kg- 约 1mg/kg 体重。获得疗效需要的 本文中又称为活性成分的本发明化合物的量自然根据具体情况变化， 例如使用的具体化合 物、 给药途径、 接受者的年龄和状态， 和所治疗的具体病症或疾病。
治疗方法还可包括按每日 1-4 次摄取的方案给予活性成分。在这些治疗方法中， 优选在给药前配制本发明化合物。 如下文中所述， 通过已知方法， 用熟知和容易得到的成分 制备合适的药用制剂。
可将适合治疗或预防早老性痴呆症或其症状的本发明化合物单独或与一种或多 种其它治疗药物联合给予。联合疗法包括给予含式 (I) 化合物和一种或多种其它治疗药物 的单一药物剂量制剂， 和通过其自身单独的药物剂量制剂给予式 (I) 化合物和其它各治疗 药物。例如， 可通过单一口服剂量组合物例如片剂或胶囊剂将式 (I) 化合物和治疗药物一 起给予患者， 或可通过单独的口服剂量制剂给予各药物。
虽然可以单独给予活性成分， 但优选按药用组合物提供。
因此， 本发明还提供药用组合物， 该组合物含药学上可接受的载体和作为活性成 分的治疗有效量的式 (I) 化合物。
在与组合物的其它成分配伍和对其接受者无害的意义上， 载体或稀释剂必须是 “可接受的” 。
为便于给药， 可将主题 (subject) 化合物配制为用于给药目的的各种药物形式。 可将本发明化合物， 尤其是式 (I) 化合物、 其药学上可接受的酸或碱加成盐、 其立体化学异 构体形式， 或其任何亚组或组合配制为用于给药目的的各种药物形式。 作为合适的组合物， 可引用通常用于全身给药的所有组合物。为制备本发明药用组合物， 将作为活性成分的有效量的具体化合物， 任选加成盐 形式与药学上可接受的载体组合在充分混合的混合物中， 载体可为多种形式， 取决于给药 需要的制剂形式。需要这些药用组合物为适合尤其是口服、 直肠、 皮下、 肠胃外注射或吸入 给药的单位剂型。例如， 在制备口服剂量形式的组合物中， 可使用任何普通药物介质， 例如 在口服液体制剂例如混悬剂、 糖浆、 酏剂、 乳液和溶液的情况下， 使用水、 二醇、 油类、 醇类 等； 或在散剂、 丸剂、 胶囊剂和片剂的情况下， 使用固体载体例如淀粉、 糖类、 高岭土、 稀释 剂、 润滑剂、 粘合剂、 崩解剂等。 因为它们易于给药， 片剂和胶囊剂代表最佳的口服剂量单位 形式， 在该情况下， 显然使用固体药物载体。对于肠胃外组合物， 尽管还包括其它成分例如 助溶的成分， 但载体通常至少大部分含无菌水。 例如， 可制备注射液， 其中载体含盐水溶液、 葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。例如， 可制备注射液， 其中载体含盐水溶液、 葡 萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。可在油中配制含式 (I) 化合物的注射液， 以使作 用延长。用于该目的的合适的油为例如花生油、 芝麻油、 棉籽油、 玉米油、 大豆油、 合成的长 链脂肪酸的甘油酯和这些油和其它油的混合物。 也可制备注射混悬液， 在该情况下， 可使用 合适的液体载体、 悬浮剂等。还包括预定临用前转化为液体形式制剂的固体形式制剂。在 适合皮下给药的组合物中， 载体任选含渗透促进剂和 / 或合适的湿润剂， 任选与较小比例 的任何性质的合适添加剂组合， 添加剂不引入对皮肤的明显损害作用。所述添加剂可促进 给予皮肤药物和 / 或可有助于制备需要的组合物。可按各种方法例如透皮贴剂、 定点制剂 (spot-on)、 软膏剂给予这些组合物。因它们的水溶性比相应的碱或酸形式增大， 式 (I) 化 合物的酸或碱加成盐更适合制备含水组合物。
尤其有利， 配制便于给药和剂量均一的单位剂量形式的前述药用组合物。本文中 使用的单位剂量形式是指适合作为单位剂量的物理上离散的单位， 各单位含经计算可产生 需要的疗效的预定量的活性成分和组合在一起的需要的药物载体。 此类单位剂量形式的实 例为片剂 ( 包括刻痕或包衣片 )、 胶囊剂、 丸剂、 袋装散剂、 糯米纸囊剂、 栓剂、 注射液或混悬 液等， 及其隔离的多个单位。
因为本发明化合物为活性可经口给药的化合物， 用于经口给药的含所述化合物的 药用组合物尤其有利。
为提高式 (I) 化合物在药用组合物中的溶解性和 / 或稳定性， 使用 α-、 β- 或 γ- 环糊精或它们的衍生物， 尤其是羟基烷基取代的环糊精例如 2- 羟基丙基 -β- 环糊精或 磺基丁基 -β- 环糊精可能有利。助溶剂例如醇也可改善本发明化合物在药用组合物中的 溶解性和 / 或稳定性。
根据给药方式， 药用组合物优选含 0.05-99％重量， 更优选 0.1-70％重量， 甚至更 优选 0.1-50％重量的式 (I) 化合物， 和 1-99.95％重量， 更优选 30-99.9％重量， 甚至更优选 50-99.9％重量的药学上可接受的载体， 所有百分比均基于组合物的总重量计。
以下实施例举例说明本发明。 实施例
A. 中间体的制备 实施例 A1 a) 中间体 1 的制备将 K2CO3(9.6g， 69.5mmol) 和 1- 甲 基 -1- 甲 苯 磺 酰 基 甲 胩 (isocyanide)(8g， 38.2mmol) 加 入 2- 甲 酰 基 -5- 硝 基 苯 甲 醚 (6.29g， 34.7mmol) 的 MeOH(150ml) 溶 液， 将反应混合物回流 4h。将反应混合物减压浓缩， 将残留物溶于 DCM， 将有机相用 H2O 洗 涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： 正庚烷 / EtOAc100/0-50/50) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。收率 ： 6.24g 中间体 1(77％ )。
b) 中间体 2 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(150ml) 加入 Pd/C 10％ (1g)。然后， 加入 0.4％噻吩的 DIPE 溶液 (1ml) 和中间体 1(6.24g， 26.6mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 25℃下搅拌至吸 收 3 当量 H2。通过硅藻土将催化剂过滤除去， 将滤液蒸发。得到 ： 5.4g 中间体 2(99％ )。
实施例 A2
a) 中间体 3 的制备
在 N2 下， 在室温下， 将二乙酸碘苯 (5.49g， 18.44mmol) 和三氟甲磺酸 (6.08ml， 69.17mmol) 在 CH3CN(100ml) 中搅拌 1h， 在室温下， 立刻将 2’ - 甲氧基 -4’ - 硝基 - 苯乙酮 (3.0g， 15.37mmol) 加入溶液， 然后将反应混合物回流 2h， 然后冷却至室温， 搅拌下， 小心加 入 Na2CO3(500ml) 饱和水溶液。将产物用 DCM 萃取， 将有机相干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂减 压蒸发。 得到的深棕色油状物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 等度洗脱 95/5) 纯化。 将产物流分收集， 将溶剂减压蒸发。得到 ： 3.0g 中间体 3(75％ )。
b) 中间体 4 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(50ml) 加入 Pd/C 10％ (0.250g)。然后， 加入 0.4％噻吩的 DIPE 溶液 (2ml) 和中间体 3(0.946g， 4.04mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 25℃下搅 拌至吸收 3 当量 H2。通过硅藻土将催化剂过滤除去， 将滤液蒸发。将产物在 DIPE 中研磨， 滤出， 真空干燥。得到 ： 0.66g 中间体 4(80％ )。
实施例 A3
中间体 5 的制备
将 3- 溴 -2- 吡 啶 胺 (24.9g， 144mmol)、 2- 溴 -1-(3- 甲 氧 基 苯 基 )-1- 丙 酮 (42g， 172.8mmol) 和 250ml 正丁醇在回流温度下加热 3 夜。将混合物在 DCM 和水之间分 离。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经硅胶柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/ MeOH(NH3)100/0-98/2) 纯化。 将最纯流分减压浓缩， 使残留物从 DIPE 中结晶。 得到 ： 19g 中 间体 5(42％ )。
实施例 A4
中间体 6 的制备
向中间体 5(2g， 6.3mmol) 和 4- 溴 -3- 甲氧基苯胺 (1.40g， 6.93mmol) 的 DMF(40ml) 溶 液 中 加 入 Cs2CO3(4.1g， 12.61mmol)、 Pd2(dba)3(0.144g， 0.158mmol) 和 BINAP(0.196g， 0.315mmol)， 将混合物用 N2 吹扫 5 分钟。将反应混合物在 120℃下加热 2h， 然后冷却至室 温。 向反应混合物中加入 H2O(300ml) 和 EtOAc(300ml)， 将混合物在室温下搅拌 15 分钟。 将 有机相分离， 用 H2O 和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 蒸发至干。使残留物从 EtOH 结晶， 过 滤， 干燥。得到 ： 1.8g 中间体 6(65％ )。
实施例 A5 中间体 7 的制备将 二 硼 酸 二 ( 频 哪 醇 酯 )(Bis(pinacolato)diborane)(0.191g， 0.753mmol)、 [1， 1 ′ - 二 ( 二 苯 膦 基 ) 二 茂 铁 ] 二 氯 合 钯 (0.020g， 0.025mmol) 和 乙 酸 钾 (0.049g， 0.502mmol) 加入中间体 6(0.110g， 0.251mmol) 的 DMF(10ml) 溶液中， 将混合物用 N2 吹扫 10 分钟。将反应混合物在 120℃下加热 5h。将反应混合物冷却至室温， 将溶剂减压除去。将 残留物溶于 DCM。将有机相用 H2O 和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 蒸发至干。残留物经硅 胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-90/10) 纯化。 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 0.070g 中间体 7(57％ )。
实施例 A6
a) 中间体 8 的制备将 2- 甲氧基 -4- 硝基苯甲醛 (4.677g， 25.817mmol) 和 2- 乙酰氨基丙烯酸 (5g， 38.725mmol) 加入吡啶 (50ml)， 将反应混合物在 120℃下搅拌过夜。冷却后， 将反应混合物 倾入 H2O， 将产物用 EtOAc 萃取。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 减压蒸发。残留物经硅 胶闪式层析 ( 洗脱液 ： 正庚烷 /EtOAc 100/0-75/25) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 0.9g 中间体 8(14％ )。
b) 中间体 9 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(50ml) 加入 Pd/C 10％ (0.2g)。 然后， 加入 0.4％噻吩的 DIPE 溶液 (0.5ml) 和中间体 8(0.9g， 3.62mmol)。在 25℃下， 将反应混合物在 H2 气氛下搅拌， 直 至吸收 3 当量 H2。通过硅藻土将催化剂滤出， 将滤液蒸发。得到 ： 5.4g 中间体 9(88％ )。
实施例 A7
a) 中间体 10 的制备
将 2’ - 甲氧基 -4’ - 硝基 - 苯乙酮 (90564-14-0， 3.07g， 15.73mmol) 的 DMF-DMA 溶 液回流 6h。将反应混合物冷却至室温， 减压浓缩。将残留物用 DIPE 研磨， 将沉淀过滤。得 到： 3.63g 中间体 10(92％ )。
b) 中间体 11 和 12 的制备
将中间体 10(3.63g， 14.505mmol) 加入甲肼 (0.84ml， 15.956mmol) 的 AcOH(20ml) 溶液中， 将得到的混合物在 90℃下搅拌 3h。 将反应混合物冷却至室温， 减压浓缩。 残留物经 硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/ 正庚烷， 50/50-70/30) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 1.44g 中间体 11(42％ ) 和 0.83g 中间体 12(24％ )。
c) 中间体 13 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(50ml) 加入 Pd/C 10％ (0.2g)。 然后， 加入 0.4％噻吩的 DIPE 溶液 (1ml) 和中间体 12(0.83g， 3.57mmol)。在 25℃下， 在 H2 气氛下， 将反应混合物搅拌至 吸收 3 当量 H2。通过硅藻土将催化剂滤出， 将滤液蒸发。得到 ： 0.72g 中间体 13(98％ )。
实施例 A8
a) 中间体 14 的制备
将 K2CO3(14.84g， 107.5mmol) 和 1- 甲基 -1- 甲苯磺酰基甲胩 (13.5g， 64.5mmol) 依 次加入 6- 溴吡啶 -3- 甲醛 (10.0g， 53.76mmol) 的 200mlMeOH 溶液。将反应混合物回流 1h。 将反应混合物减压浓缩， 将残留物溶于 DCM， 将有机相用 H2O 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶 剂真空蒸发。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： 正庚烷 /EtOAc， 100/0-50/50) 纯化。将产 物流分收集， 将溶剂蒸发。使残留物悬浮于 DIPE， 将沉淀滤出， 在 50℃下， 真空干燥。得到 ： 6.8g 中间体 14(53％ )。
b) 中间体 15 的制备
将 2- 甲 基 -2- 丙 醇 钠 盐 (0.804g， 8.36mmol)、 BINAP(0.521g， 0.837mmol)、 Pd2(dba)3(0.383g， 0.418mmol) 和 二 苯 酮 亚 胺 (0.948g， 5.23mmol) 加 入 中 间 体 14(1.0g， 4.18mmol) 的甲苯 (20ml) 溶液。 将反应混合物脱气， 置于 N2 气氛下。 在微波中， 将反应混合 物在 100℃下搅拌 2h。冷却后， 将大部分溶剂蒸发 ( 近干燥 )， 加入 1N HCl:THF 溶液 (1/1， 100ml)。将反应混合物在室温下搅拌 1h。将反应混合物用 10％ Na2CO3 溶液处理， 将产物用 EtOAc 萃取。 将有机相干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂蒸发。 残留物经硅胶柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/ MeOH 100/0-95/5) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.29g 中间体 15(39％ )。
实施例 A9
中间体 16 的制备
将 3- 溴 -2- 吡 啶 胺 (50g， 289mmol) 和 2- 溴 -1-(4- 氟 苯 基 ) 乙 酮 (75.3g， 346.8mmol) 在 EtOH(300ml) 中的混合物在 75℃下加热 17h。将反应混合物冷却至室温。将 形成的沉淀滤出， 用 EtOH(50ml) 洗涤， 真空干燥， 得到流分 1。将相应滤液浓缩至 100ml 体 积。 将 EtOH(20ml) 和 DIPE(100ml) 加入浓缩物， 得到产物沉淀。 将固体滤出， 用 DIPE(50ml) 和 EtOH(10ml) 的混合物洗涤， 真空干燥， 得到流分 2。将流分 1 和 2 合并， 在饱和 NaHCO3 水溶液 (500ml) 中搅拌 30 分钟。将该混合物用 DCM(500ml) 萃取。将分离的有机层干燥 (Na2SO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。使残留物从 EtOAc 中重结晶。将固体滤出， 真空干燥。得 到： 46.5g 中间体 16(55％ )。
实施例 A10
a) 中间体 17 的制备
将 8M 甲胺的乙醇 (100ml， 0.8mol) 溶液加入 1- 溴 -3- 氟 -2- 硝基 - 苯 (19.8g， 90mmol)。将混合物在水浴上冷却， 在室温下搅拌过夜。然后， 将溶剂蒸发， 使残留物在水和 DCM 之间分配。 将合并的有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。 得到 ： 20g 中间体 17(96％ )， 在下一步中原样使用。
b) 中间体 18 的制备
将中间体 17(20g， 86.6mmol) 和铁粉 (15g， 269mmol) 加入乙酸 (150ml)， 将得到的 悬浮液搅拌， 在 60℃下加热 1h。将反应混合物真空浓缩， 将残留物在 DCM 和饱和 NaHCO3 水 溶液之间分配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。得到 ： 14g 中间体 18(80％ )， 在下 一步中原样使用。
c) 中间体 19 的制备
将 Et3N(8.1g， 80mmol) 加入中间体 18(10g， 39.8mmol) 的 DCM(250ml) 溶液中。然 后， 在室温下滴加 4- 氟 - 苯甲酰氯 (5.5g， 34.7mmol)， 将反应混合物在室温下搅拌过夜。 将 反应混合物用水洗涤， 将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。 将残留物溶于 AcOH(100ml)， 加入浓 HCl 水溶液 (3ml)。将反应混合物在 100℃下搅拌 2h。将反应混合物真空浓缩， 将残 留物溶于 DCM， 用饱和 NaHCO3 水溶液和水洗涤。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。得 到： 12g 中间体 19， 在下一步中原样使用。
实施例 A11
中间体 20 的制备
在 室 温 下， 将 4， 4， 4- 三 氟 丁 醛 (1.891g， 15mmol) 滴 加 到 中 间 体 18(3.015g， 15mmol) 和焦亚硫酸钠 (3.707g， 19.5mmol) 的 DMA(80ml) 溶液。在 220℃下， 使反应在微波 中进行 45 分钟。 将反应混合物用 EtOAc 稀释， 将有机层用 H2O 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶 剂蒸发。残留物经 RP 制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4HCO3 水溶液 )/MeOH 梯度 ] 纯化。将产物流分收集， 进行后处理。得到 ： 0.670g 中间体 20(14.5％ )。
实施例 A12
中间体 21 的制备将 3- 溴 -2- 吡啶胺 (1g， 5.78mmol) 和 2- 溴 -1- 苯基 -1- 丙酮 (1.48g， 6.94mmol) 在 EtOH(20ml) 中的混合物在 100℃下搅拌和加热 2 天。将溶剂真空蒸发， 残留物经闪式层 析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-98/2) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。残留物经 RP 制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4HCO3 水溶液 )/MeOH 梯度 ] 纯化。将产物流分收集， 进行后处理。得到 ： 0.850g 中间体
21(51％ )。
实施例 A13
a) 中间体 22 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(100ml) 加入 Pt/C 5％ (1g)。然后， 加入 0.4％噻吩的 DIPE 溶液 (2ml) 和 4- 氨基 -2- 溴 -3- 硝基 - 吡啶 (3.5g， 16mmol)。在 25℃下， 将反应混合物在 H2 气氛下搅拌至吸收 3 当量 H2。通过硅藻土将催化剂滤出， 将滤液真空浓缩。得到 ： 1.8g 中间体 22(63％ )， 在下一步中原样使用。
b) 中间体 23 的制备
将中间体 22(1.8g， 9.57mmol) 和 4- 氟 - 苯甲酸 (1.34g， 9.57mmol) 在多磷酸 (25g) 中的混合物搅拌， 并在 180℃下加热 1h。将反应混合物冷却至室温， 加入水。将得到的溶液 用 K2CO3 中和， 将得到的沉淀滤出， 用水洗涤。得到 ： 1g 粗中间体 23， 在下一步中原样使用。
c) 中间体 24 的制备
将中间体 23(825mg， 2.8mmol)、 CH3I(400mg， 2.8mmol) 和 K2CO3(830mg， 6mmol) 加入 DMF(25ml)。将得到的混合物在 50℃下搅拌 1h。将反应混合物冷却至室温， 真空浓缩。将 残留物在 DCM 和水之间分配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。残留物经 RP 制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4HCO3 水 溶液 )/MeOH 梯度 ] 纯化。将产物流分收集， 进行后处理。得到 ： 180mg 中间体 24(21％ )。
实施例 A14
a) 中间体 25 的制备
将 1- 甲 基 -4- 吡 唑 基 硼 酸 (0.63g， 4.99mmol) 和 Cs2CO3(3.257g， 9.99mmol) 加 入 2- 溴 -5- 硝基苯甲醚 (1.16g， 4.99mmol)、 乙酸钯 (II)(0.112g， 0.5mmol) 和三苯基膦
(0.262g， 1mmol) 的 THF(20ml) 溶液。搅拌 10 分钟后， 加入 3N NaOH 溶液 (1.6ml)， 将混 合物用 N2 吹扫 2 分钟。将反应混合物在室温下搅拌过夜， 将产物用 EtOAc 萃取。将有机 层用 H2O 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 蒸发除去。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-96/4) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.630g 中间体 25(54％ )。
b) 中间体 26 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(100ml) 加入 Pd/C 10 ％ (0.2g)。然后， 加入 0.4 ％噻吩的 DIPE 溶液 (0.5ml) 和中间体 25(0.926g， 3.97mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 50℃下 搅拌至吸收 3 当量 H2。通过硅藻土将催化剂过滤除去， 将滤液蒸发。将残留物用 DCM 稀释， 将有机层用 H2O 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 减压浓缩。 残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/ MeOH 100/0-90/10) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.82g 中间体 26(100％ )。
实施例 A15 a) 中间体 27 的制备将 K2CO3(36g， 262mmol) 和 1- 甲基 -1- 甲苯磺酰基甲胩 (35g， 167mmol) 依次加入 5- 硝基吡啶 -2- 甲醛 (131mmol) 的 MeOH(500ml) 溶液中， 将反应混合物回流 4h。将反应混 合物减压浓缩， 将残留物溶于 DCM， 将有机相用 H2O 洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸 发。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： 石油醚 /EtOAc 4/1) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂 蒸发。得到 ： 15g 中间体 27(56％ )。
b) 中间体 28 的制备
将中间体 27(10g， 48.7mmol) 的 THF(300ml) 溶液加入氯化铵 (2.6g， 48.7mmol) 的 H2O(100ml) 溶液中。然后加入铁 (16.3g， 292mmol)， 将反应混合物回流 4h。将沉淀过滤除 去， 将滤液真空蒸发。将残留物溶于 EtOAc， 将有机层用 H2O 洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 将溶 剂真空蒸发。将残留物溶于 2N HCl 溶液， 将水相用 DCM 洗涤， 通过加入 2N NaOH 溶液使成 碱性， 将产物用 EtOAc 萃取。将有机层洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发， 得到 6g 中间体 28(71％ )。
实施例 A16
a) 中间体 29 的制备
将 5- 溴 -2- 硝基吡啶 (5g， 24.63mmol)、 三丁基 (1- 乙氧基乙烯基 ) 锡 (9.785g， 27.1mmol) 和 Ph(PPh3)4(0.284g， 0.246mmol) 在 DMF(100ml) 中的混合物在 120℃下搅拌 3h。 冷却后， 加入 1N HCl 溶液， 将反应混合物在室温下搅拌 18h。将反应混合物用饱和 NaHCO3 水溶液中和， 将产物用 DCM 萃取。 将有机相干燥 (Na2SO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。 残留物经 硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-98/2) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得 到： 3.44g 中间体 29(83％ )。
b) 中间体 30 的制备
在室温下， 在 N2 下， 将二乙酸碘苯 (2.327g， 7.2mmol) 和三氟甲磺酸 (2.397ml， 27.1mmol) 在 CH3CN(50ml) 中 搅 拌 20 分 钟。 在 室 温 下， 将 中 间 体 29(1g， 6.0mmol) 的 CH3CN(10ml) 溶液立刻加入溶液， 然后将反应混合物回流 2h。冷却后， 将过量 CH3CN 减压除 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂 去， 将粗产物用 DCM 萃取。将有机层用饱和 Na2CO3 水溶液洗涤， 减压蒸发。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-99/1) 纯化。将产物流分收 集， 将溶剂减压蒸发。得到 ： 0.73g 中间体 30(47％ )。
c) 中间体 31 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(150ml) 加入 Pd/C 10 ％ (0.5g)。然后， 加入 0.4 ％噻吩的 DIPE 溶液 (2ml) 和中间体 30(2.2g， 10.7mmol)。 在 H2 气氛下， 将反应混合物在 50℃下搅拌至 吸收 3 当量 H2。通过硅藻土将催化剂过滤除去， 将滤液蒸发。得到 ： 1.6g 中间体 31(68％ )。
实施例 A17
a) 中间体 32 的制备
将 异 丙 胺 (12.9g， 218mmol) 加 入 1- 溴 -3- 氟 -2- 硝 基 - 苯 (8.0g， 36mmol) 的 EtOH(40mL) 溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后， 将溶剂蒸发， 将残留物在水和 DCM 之间分配。 将合并的有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。 得到 ： 8.3g 中间体 32(88％ )， 在下一步中原样使用。
b) 中间体 33 的制备
将中间体 32(8.3g， 32mmol) 和铁粉 (8.95g， 160mmol) 加入乙酸 (50ml)， 将得到的 悬浮液搅拌， 在 60℃下加热 1h。将反应混合物真空浓缩， 将残留物在 DCM 和饱和 NaHCO3 水 溶液之间分配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。得到 ： 7.5g 中间体 33(100％ )， 在 下一步中原样使用。
c) 中间体 34 的制备
将 4- 氟 - 苯 甲 醛 (2.28g， 18.3mmol) 和 Na2S2O5(3.73g， 19.6mmol) 加 入 中 间 体 33(3g， 13.1mmol) 的 DMA(50ml) 溶液。在室温下， 将反应混合物搅拌过夜。然后， 将反应混 合物倾入水中， 导致固体沉淀。 将固体滤出， 用水洗涤， 悬浮于 DIPE。 将得到的固体滤出， 用 DIPE 洗涤， 干燥。得到 ： 2.3g 中间体 34(53％ )。
实施例 A18 a) 中间体 35 的制备将 2- 碘 -5- 硝基苯甲醚 (0.675g， 2.42mmol)、 Ag2CO3(1.11g， 4.0mmol)、 [1， 1’ -二 ( 二苯膦基 ) 二茂铁 ] 二氯合钯 (II)(0.073g， 0.101mmol) 和 PPh3(0.053g， 0.20mmol) 充分 混合。依次加入 2- 甲基噻唑 (0.2g， 2.02mmol)、 CH3CN(10ml)， 将混合物用 N2 吹扫 2 分钟。 将反应混合物在 60℃下搅拌过夜。冷却后， 加入 DCM(20ml) 和丙酮 (10ml)， 通过硅藻土将 悬浮液过滤， 用 DCM 充分洗涤。将滤液减压浓缩， 残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM) 纯 化。将产物流分收集， 将溶剂减压蒸发。得到 ： 0.257g 中间体 35(51％ )。
b) 中间体 36 的制备
将中间体 35(0.25g， 1mmol) 和铁 (0.278g， 5mmol) 在 AcOH(6ml) 中振荡 1.5h。将 溶剂蒸发。将残留物溶于 DCM， 将有机层用 1N NaOH 溶液洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 减压浓 缩。得到 ： 0.220g 中间体 36(100％ )。
实施例 A19
a) 中间体 37 的制备
2- 甲 氧 基 -4- 硝 基 - 苯 甲 酸 (4.0g， 20.3mmol)、 SOCl2(4.72ml， 64.9mmol)、 CHCl3(20ml) 和一滴 DMF 的悬浮液回流 6h。冷却后， 将溶剂减压除去， 粗残留油状物用于下 一步， 无需纯化。得到 ： 4.4g 中间体 37(100％ )。
b) 中间体 38 的制备
将中间体 37(4.374g， 20.3mmol) 和乙酰胺肟 (1.653g， 22.32mmol) 的吡啶 (50ml) 溶液回流过夜。 冷却后， 将溶剂蒸发， 将残留物溶于 DCM。 将有机层用 H2O 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂减压蒸发。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM) 纯化。将产物流分收集， 将 溶剂减压蒸发。得到 ： 3.8g 中间体 38(79％ )。 c) 中间体 39 的制备
将 中 间 体 38(0.2g， 0.85mmol) 和 氯 化 锡 (II) 二 水 合 物 (0.959g， 4.25mmol) 的 EtOH(5ml) 溶液在 60℃下搅拌 1.5h。 冷却后， 将反应混合物倾入饱和 Na2CO3 溶液 (15ml) 和 DCM(8ml) 的混合物中。将 2 相分离， 将水相用 DCM 萃取。将合并的有机层干燥 (MgSO4)， 过 滤， 减压浓缩。得到 ： 0.153g 中间体 39(87％ )。
实施例 A20
a) 中间体 40 的制备
在 0 ℃下， 将 2M 甲胺的 THF(0.80g， 25.9mmol) 溶液加入 2， 4- 二氯 -3- 硝基吡啶 (5.0g， 25.9mmol) 和 Et3N(4ml， 28.9mmol) 在 DMF(15ml) 中的混合物中。将反应混合物在室 温下搅拌 1h， 然后倾入冰水， 将得到的固体过滤， 用 H2O 洗涤， 真空干燥。
得到 ： 3.0g 中间体 40(62％ )。
b) 中间体 41 的制备
将 4- 氟 苯 甲 醛 (1.74g， 14.08mmol) 和 Na2S2O4(8.3g， 47.7mmol) 加 入 中 间 体 40(2.5g， 13.32mmol) 的 EtOH(60ml) 溶液。 在 150℃下， 将反应混合物在微波条件下加热 45 分钟。将反应混合物冷却至室温， 通过硅藻土过滤。将滤液蒸发， 残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)99/1) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.44g 中间体 41(13％ )。
实施例 A21
a) 中间体 42 的制备
将 三 氟 甲 磺 酸 (2.39ml， 27.0mmol) 加 入 二 乙 酸 碘 苯 (2.32g， 7.21mmol) 的 CH3CN(60ml) 溶液， 在 N2 下， 将反应混合物在室温下搅拌 20 分钟。 在室温下， 将 2’ - 氟 -4’ -硝 基 - 苯乙酮 (1.1g， 6.0mmol) 的 CH3CN(10ml) 溶液立刻加入溶液， 然后将反应混合物回流 2h， 然后冷却至室温。将 CH3CN 蒸发， 将残留物用 DCM 萃取。将有机相用饱和 NaHCO3 水溶液洗 涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂减压蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM) 纯化。 将产物流分收集， 将溶剂减压蒸发。得到 ： 0.75g 中间体 42(53％ )。
b) 中间体 43 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(50ml) 加入 Pd/C 10％ (0.2g)。 然后， 加入 0.4％噻吩的 DIPE 溶液 (1ml) 和中间体 42(0.7g， 3.15mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 25℃下搅拌至吸 收 3 当量 H2。通过硅藻土将催化剂过滤除去， 将滤液蒸发。得到 ： 0.6g 中间体 43(77％ )。
实施例 A22
a) 中间体 44 的制备
将 2- 碘 -5- 溴 吡 啶 (13.7g， 48.2mmol)、 2- 甲 基 -4-唑 甲 酸 甲 酯 (3.4g，24.1mmol)、 乙 酸 钯 (II)(0.54g， 2.41mmol)、 三 - 邻 - 甲 苯 酰 基 膦 (1.47g， 4.81mmol) 和 Cs2CO3(15.7g， 48.2mmol) 的 甲 苯 (75ml) 溶 液 用 N2 吹 扫， 密 闭， 在 110 ℃ 下 搅 拌 过 夜。通过硅藻土将催化剂过滤， 将滤液蒸发。粗产物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-98/2) 纯化。 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 5.64g 中间体 44(13％ )。
b) 中间体 45 的制备
将 中 间 体 44(5.64g， 15.4mmol) 和 LiOH(0.91g， 38mmol) 溶 于 二烷 (40ml) 和然后用 1M HCl 溶液处理至 pH ＝ 2。 H2O(10ml) 的混合物。将反应混合物在室温下搅拌 5h， 将得到的沉淀过滤， 真空干燥。将滤液用 CHCl3 萃取， 将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂 减压除去， 得到固体。将两固体流分合并。得到 ： 4.75g 中间体 45(97％ )。
c) 中间体 46 的制备
将氧化铜 (II)(1.33g， 16.8mmol) 加入中间体 45(4.75g， 16.8mmol) 的 DMF(75ml) 溶液。将反应混合物在 150℃下加热 15h。冷却后， 通过硅藻土将催化剂过滤， 将滤液蒸发。 将残留物用 DIPE/CH3CN 研磨， 将得到的固体过滤除去。将滤液蒸发， 残留物在下一步原样 使用。得到 ： 1g 中间体 46(14.5％ )。
d) 中间体 47 的制备
将 中 间 体 46(0.53g， 2.23mmol)、 Pd2(dba)3(0.204g， 0.223mmol)、二 环 己 基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.212g， 0.446mmol) 和 Cs2CO3(2.18g， 6.69mmol) 加入 N- 苄基胺 (0.239g， 2.23mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (20ml) 溶 液， 将反应混合物在 110℃下加热过夜。冷却后， 加入 H2O， 将产物用 DCM 萃取。将有机相干 燥 (MgSO4)， 过滤， 减压浓缩。 残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-98/2) 纯化， 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.15g 中间体 47(21％ )。
e) 中间体 48 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(50ml) 加入 Pd/C 10％ (0.05g)。 然后， 加入中间体 47(0.15g， 0.565mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 50℃下搅拌至吸收 1 当量 H2。通过硅藻土将催 化剂过滤除去， 将滤液蒸发。得到 ： 0.105g 中间体 48(95％ )。
实施例 A23
a) 中间体 49 的制备
在 0℃下， 在 N2 气氛下， 将 1M LiHMDS 的 THF 溶液 (47ml， 47mmol) 滴加到 5-(4- 硝 唑 (6.0g， 31.6mmol) 的 THF(100ml) 溶液。将反应混合物在 0℃下搅拌 30 分基苯基 )-钟， 然后加入 DMF(3.67ml， 47mmol)， 让混合物升温至室温。将反应混合物在室温下搅拌 1h， 41mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 16h， 然后将 然后加入 MeOH(100ml) 和 NaBH4(1.55g， 一部分溶剂真空除去。加入 H2O， 通过加入 AcOH 将混合物中和。将混合物用 DCM 萃取。将 有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。将残留物用 DIPE 研磨。得到 ： 4.6g 中 间体 49(61％ )。
b) 中间体 50 的制备
在 N2 气 氛 下， 将 60 ％ NaH(600mg， 15mmol) 的 矿 物 油 悬 浮 液 加 入 中 间 体 49(1.79g， 7.5mmol) 的 THF(61ml) 溶 液 中。 将 反 应 混 合 物 在 室 温 下 搅 拌 30 分 钟， 然后 30mmol)。将反应混合物在 60 ℃下搅拌 4h， 然后加入盐水。将有机相 加入 CH3I(1.87ml， 分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/ MeOH(NH3)100/0-98/2) 纯化。 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 790mg 中间体 50(41％ )。
c) 中间体 51 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(100ml) 加入 Pd/C 10 ％ (0.2g)。然后， 加入 0.4 ％噻吩的 DIPE 溶液 (0.5ml) 和中间体 50(0.79g， 3.1mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 25℃下搅 拌至吸收 3 当量 H2。 通过硅藻土将催化剂过滤除去， 将滤液蒸发。 得到 ： 0.65g 中间体 51( 定 量 )。
实施例 A24
a) 中间体 52 的制备
将 N-(5- 溴 -1， 6- 二 氢 -6- 氧 代 -2- 吡 啶 基 )- 乙 酰 胺 (8.6g， 37.2mmol)、 CH3I(13.2g， 93mmol) 和 Ag2CO3(10.2g， 3.2mmol) 在甲苯 (275ml) 中的混合物在 60℃下搅拌 48h。将反应混合物冷却至室温， 将溶剂在真空中除去。将残留物在 DCM 和 H2O 之间分配。 将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。 将残留物用 DIPE 研磨。 得到 ： 5.7g 中 间体 52(62％ )。
b) 中间体 53 的制备
将 1- 甲 基 -4- 吡 唑 基 (pyrazoyl) 硼 酸 频 哪 醇 酯 (1.96g， 9.4mmol) 和 Pd(PPh3)4(0.835g， 0.72mmol) 加入中间体 52(1.77g， 7.2mmol) 的 DMF(15ml) 溶液、 H2O(5ml) 和 K2CO3(2.0g， 14.4mmol)。将反应混合物脱气， 置于 N2 下， 在微波照射下， 在 140 ℃下， 搅 拌， 加热 30 分钟。将反应混合物冷却至室温， 在 H2O 和 DCM 之间分配。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。将残留物用 CH3CN 研磨。得到 ： 1.35g 中间体 53(76％ )。
c) 中间体 54 的制备
将 10％ NaOH 水溶液 (50ml) 加入中间体 53(1.3g， 5.28mmol) 的 MeOH(100ml) 溶液， 将反应混合物在 80℃下搅拌 18h。 将有机溶剂真空除去， 加入 DCM 和 H2O。 将有机相分离， 干 燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。将残留物用 DIPE 研磨。得到 ： 0.95g 中间体 54(88％ )。
实施例 A25
a) 中间体 55 的制备
将 2- 甲 基 吡 啶 -4- 硼 酸 频 哪 醇 酯 (3178mg， 14.5mmol) 和 Pd(PPh3)4(1.22g， 1.06mmol) 加入 2- 溴 -5- 硝基苯甲醚 (3.06g， 13.2mmol) 的 DME(40ml) 溶液、 水 (16ml) 和 Cs2CO3(1.33g， 40.9mmol)。将得到的混合物搅拌， 在回流温度下加热 16h。将反应混合物冷 却至室温， 在 H2O 和 DCM 之间分配。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残 留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-98/2) 纯化。将产物流分收集， 真空浓 缩， 得到 2.04g 中间体 55(63％ )。
b) 中间体 56 的制备
搅拌下， 将中间体 55(2.04g， 9.50mmol) 加入 10％ Pd/C(500mg) 和 4％噻吩的 MeOH 溶液 (1ml) 混合物。 在 H2 气氛下， 将反应混合物在 50℃下加热。 吸收 3 当量 H2 后， 通过硅藻 土将催化剂过滤除去。将滤液减压蒸发， 粗产物经硅胶柱层析 ( 洗脱液 ： MeOH/DCM 10/90) 纯化。将产物流分合并， 蒸发， 得到浅褐色固体。得到 ： 1700mg 中间体 56(95％ )。
实施例 A26
中间体 57 的制备
将三氟甲磺酸 (7.63ml， 86mmol) 加入二乙酸碘苯 (7.41g， 23mmol) 的 CH3CN(50ml) 溶液， 在 N2 下， 将反应混合物在室温下搅拌 20 分钟。 在室温下， 将 1-(2- 氯 -5- 嘧啶基 )- 乙 酮 (3g， 19.2mmol) 的 CH3CN(10ml) 溶液立刻加入溶液， 然后将反应混合物回流 2h， 然后冷却 至室温。将 CH3CN 蒸发， 将残留物用 DCM 萃取。将有机相用饱和 NaHCO3 水溶液洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂减压蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM) 纯化。将产物流 分收集， 将溶剂减压蒸发。得到 ： 1.6g 中间体 57(43％ )。
实施例 A27
a) 中间体 58 的制备
将 1- 乙炔基 -2- 甲氧基 -4- 硝基 - 苯 (785mg， 4.43mmol) 和三甲基甲硅烷基叠氮 化物 (trimethylsilyl azide)(1.75ml， 13.3mmol) 的混合物分到 6 支微波瓶中， 在微波照 射下， 在 150℃下加热 2h。将反应混合物冷却至室温， 通过硅藻土过滤， 用 DCM 洗涤。将滤 液用 H2O 洗涤。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经硅胶闪式柱
层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-96/4) 纯化。将产物流分收集， 真空浓缩， 得到 344mg 中间 体 58(35％ )。
b) 中间体 59 和中间体 60 的制备
将 K2C03(580mg， 4.2mmol) 加入中间体 58(462mg， 2.1mmol) 的 THF(10ml) 溶液。将 混合物冷却至 0-5℃， 加入 CH3I(0.131ml， 2.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 3h。通过 硅藻土将反应混合物过滤， 用 DCM 洗涤。将滤液用水洗涤。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经制备 SFC(Chiralpak Diacel AD 20x250mm ； 流动相 CO2， MeOH/0.2％ iPrNH2) 纯化。 将产物流分收集， 真空浓缩。 得到 ： 214mg 中间体 59(43％ ) ； 70mg 中间体 60(14％ )。
c) 中间体 61 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(40ml) 加入 Pd/C 10 ％ (0.05g)。然后， 加入 0.4 ％噻吩的 DIPE 溶液 (0.1ml) 和中间体 59(0.214g， 0.91mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 25 ℃
下搅拌至吸收 3 当量 H2。通过硅藻土将催化剂过滤除去， 将滤液蒸发。将残留物在 DCM 和 H2O 之间分配。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。得到 ： 0.198g 中间体 61(98％ )。
d) 中间体 62 的制备
在 N2 气氛下， 将 MeOH(40ml) 加入 Pd/C 10 ％ (0.05g)。然后， 加入 0.4 ％噻吩的 DIPE 溶液 (0.1ml) 和中间体 60(0.070g， 0.3mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 25℃下 搅拌至吸收 3 当量 H2。 通过硅藻土将催化剂过滤除去， 将滤液蒸发。 将残留物在 DCM 和水之 间分配。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。得到 ： 0.073g 中间体 62( 定 量 )。
[1000] 实施例 A28
[1001] 中间体 63 的制备
将 中 间 体 19(370mg， 1.21mmol)、 氧 化 铜 (I)(10mg) 和 0.5M NH3 的 二烷溶液(30ml， 15mmol) 加入不锈钢高压釜。将高压釜关闭， 将反应混合物在 150℃下加热 18h。然 后， 将反应混合物冷却， 加入饱和 NH4OH 水溶液 (5ml)， 将反应混合物在 150℃下再加热 18h。 将反应混合物冷却， 将反应混合物真空浓缩。将残留物在 DCM 和饱和 NH4Cl 水溶液之间分 配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。得到 ： 240mg 中间体 63(82％ )， 在下一步中原 样使用。
[1004] 实施例 A29 a) 中间体 64 的制备将 Na2S2O5(1.64g， 8.62mmol) 和 4- 氟 - 苯甲醛 (891mg， 7.18mmol) 加入 3- 溴 -5- 三 氟甲基 -1， 2- 二氨基苯 (1.65g， 6.47mmol) 的 DMA(40ml) 溶液。将反应混合物在 70℃下搅 拌过夜。 然后， 将反应混合物冷却至室温， 倾入水中。 将固体滤出， 用水洗涤， 使悬浮于 DIPE 和几滴 2- 丙醇中。将得到的固体滤出， 用 DIPE 洗涤， 干燥。得到 ： 1.95g 中间体 64(84％ )。
[1008] b) 中间体 65 的制备
[1007] 在 N2 气氛下， 在室温下， 将 1M LiHMDS 的 THF 溶液 (9.2ml， 9.2mmol) 滴加到中间 体 64(1.65g， 4.6mmol) 的 THF(50ml) 溶液中。将反应混合物在室温下搅拌 30 分钟， 然后加 入 CH3I(3.26g， 23mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 1h， 然后用饱和 NaHCO3 水溶液和盐 水洗涤。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经 RP 制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4HCO3 水溶液 )/ MeOH/CH3CN 梯度 ] 纯化。将产物流分收集， 进行后处理。得到 ： 720mg 中间体 65(42％ )。
[1011] 实施例 A30
[1012] a) 中间体 66 的制备
[1010] 将 Na2S2O5(5.56g， 29.2mmol) 和 4- 氟 - 苯 甲 醛 (2.91g， 23.4mmol) 加 入 3- 溴 -5- 氟 -1， 2- 二氨基苯 (4.0g， 19.5mmol) 的 DMA(80ml) 溶液。将反应混合物在 70℃ 下搅拌过夜。然后， 将反应混合物冷却至室温， 倾入水中。将固体滤出， 用水洗涤， 干燥。得 到： 6g 中间体 66， 在下一步中原样使用。
[1015] b) 中间体 67 的制备
[1014] 在 N2 气氛下， 将 60％ NaH 的矿物油悬浮液 (233mg， 5.82mmol) 加入冷 (5℃ ) 的中 间体 66(900mg， 2.91mmol) 的 THF(5ml) 溶液。将反应混合物在 5℃下搅拌 30 分钟， 然后加 入异丙基碘 (1.98g， 11.6mmol)。在微波照射下， 将反应混合物在 130℃下搅拌 2h。将反应 混合物冷却， 再加入 THF， 将混合物用盐水洗涤。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂 真空蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： 庚烷 /DCM50/50-0/100) 纯化。将产物流分 收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 350mg 中间体 67(34％ )。
[1018] 实施例 A31
[1019] a) 中间体 68 的制备
[1017] 将 N- 碘代琥珀酰亚胺 (26.7g， 119mmol) 和 TFA(2.5mL， 32.4mmol) 加入 2， 4- 二 氯 - 吡啶 -3- 基胺 (17.6g， 108mmol) 的 CH3CN(150ml) 悬浮液。将反应混合物在室温下搅拌 16h， 然后加热至 40℃持续 6h。将反应混合物用 EtOAc 稀释， 用饱和 Na2S2O3 水溶液洗涤。将 水相用 EtOAc 萃取， 将合并的有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经硅胶闪 式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM) 纯化。 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 22g 中间体 68(71％ )。
[1022] b) 中间体 69 和中间体 70 的制备
[1023] 将 甲 胺 的 THF 溶 液 (2M， 25ml， 50mmol) 加 入 中 间 体 68(4.8g， 16.6mmol) 的 EtOH(20ml) 溶液。在微波照射下， 将反应混合物在 160℃下搅拌 8h。然后， 将溶剂蒸发， 使 残留物在 NaHCO3 水溶液和 DCM 之间分配。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)， 过滤， 真空浓缩。 残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： 庚烷 /DCM 100/0-0/100) 纯化。将产物流分收集， 将溶 剂蒸发。得到 ： 950mg 中间体 69(20％ ) 和 2900mg 中间体 70(62％ )。
[1025] c) 中间体 71 的制备
[1024] 将 Et3N(3.61ml， 26.5mmol) 和 4- 氟 - 苯 甲 酰 氯 (1.68g， 10.6mmol) 加 入 中 间 体 70(2.5g， 8.8mmol) 的 DCM(100ml) 溶液， 将反应混合物在室温下搅拌 4h。将反应混合物真 空浓缩。得到 ： 2.7g 粗中间体 71(75％ )， 在下一步中原样使用。
[1028] d) 中间体 72 的制备
[1027] 将磷酰氯 (907mg， 5.9mmol) 加入中间体 71(2.0g， 4.93mmol) 的二氯乙烷 (15ml) 溶液， 在微波照射下， 将得到的混合物在 150℃下搅拌， 加热 0.25h。将反应混合物真空浓 缩， 残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-97/3) 纯化。将产物流分收 集， 将溶剂蒸发。得到 ： 1.56g 中间体 72(81％ )。
[1031] e) 中间体 73 的制备
[1030] 将 异 丙 烯 基 硼 酸 频 哪 醇 酯 (867mg， 5.16mmol) 和 Pd(PPh3)4(298mg， 0.258mmol) 烷 (8ml) 溶 液 和 NaHCO3 水 溶 液 (4ml)， 在微波加 入 中 间 体 72(2.0g， 5.16mmol) 的 二照 射 下， 将 得 到 的 混 合 物 在 160 ℃ 下 搅 拌、 加 热 10 分 钟。 将 反 应 混 合 物 冷 却 至 室 温， 通过硅藻土过滤， 使用 EtOAc， 将滤液蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/ MeOH(NH3)100/0-97/3) 纯化。 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 1.25g 中间体 73(80％ )。
[1034] f) 中间体 74 的制备
[1035] 在 N2 气氛下， 将 MeOH(40ml) 加入 Pt/C 5％ (100mg)。 然后， 加入中间体 73(1.25g， 4.14mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 25℃下搅拌至吸收 1 当量 H2。通过硅藻土将催 化剂过滤除去， 将滤液蒸发。得到 ： 0.9g 粗中间体 74(71％ )， 在下一步中原样使用。
[1037] g) 中间体 75 的制备
[1036] 将 甲 基 硼 酸 (93mg， 1.55mmol) 和 Pd(PPh3)4(71mg， 0.062mmol) 加 入 中 间 体 烷 (10ml) 溶液和 NaHCO3 水溶液 (5ml)。在微波照射下， 在72(600mg， 0.31mmol) 的二150℃下， 将得到的混合物搅拌、 加热 20 分钟。将反应混合物冷却至室温， 在水和 DCM 之间 分配。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。得到 ： 180mg 粗中间体 75， 在下 一反应步骤中原样使用。
[1040] h) 中间体 76 的制备
[1041] 将 Zn(CN)2(36mg， 0.31mmol) 和 Pd(PPh3)4(30mg， 0.026mmol) 加 入 中 间 体 72(200mg， 0.52mmol) 的 DMF(5lL) 溶液。在微波照射下， 在 160℃下， 将得到的混合物搅拌、 加热 10 分钟。将反应混合物冷却至室温， 通过硅藻土过滤。将滤液真空浓缩， 残留物经硅 胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-97/3) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 0.14g 中间体 76(95％ )。
[1042] 实施例 A32 a) 中间体 77 的制备将 4- 氟苯甲醛 (1.11g， 8.93mmol) 和 Na2S2O4(3.89g， 22.3mmol) 加入 2- 氯 -N-6- 二 甲基 -3- 硝基 - 吡啶 -4- 胺 (1.5g， 7.44mmol) 的 EtOH(15ml) 溶液。在 160℃下， 将反应混 合物在微波照射下加热 1h。将反应混合物冷却至室温， 通过硅藻土过滤， 使用 EtOAc。将该 操作重复 3x。将合并的滤液蒸发， 残留物经 RP 制备 HPLC[RP Vydec Denali C18(10μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4HCO3 水溶液 )/CH3CN 梯度 ] 纯化。将产物流分收集， 进 行后处理。得到 ： 1.95g 中间体 77(32％ )。
[1047] 实施例 A33
[1048] a) 中间体 78 的制备
[1046] 将 Et3N(1.87ml， 13.8mmol) 和 4- 氟 - 苯 甲 酰 氯 (873mg， 5.5mmol) 加 入 中 间 体 69(1.3g， 4.6mmol) 的 DCM(80ml) 溶液， 将反应混合物在室温下搅拌 4h。将反应混合物真空 浓缩。得到 ： 1.5g 粗中间体 78(81％ )， 在下一反应步骤中原样使用。
[1051] b) 中间体 79 的制备
[1050] 将磷酰氯 (121mg， 0.79mmol) 加入中间体 78(267mg， 0.66mmol) 的二氯乙烷 (2ml) 溶液， 在微波照射下， 在 150℃下， 将混合物搅拌、 加热 0.25h。将反应混合物真空浓缩， 残留 物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-97/3) 纯化。 将产物流分收集， 将溶剂 蒸发。得到 ： 215mg 中间体 79(84％ )。
[1054] c) 中间体 80 的制备
[1053] 将 异 丙 烯 基 硼 酸 频 哪 醇 酯 (434mg， 2.58mmol) 和 Pd(PPh3)4(149mg， 0.129mmol) 烷 (8ml) 溶 液 和 NaHCO3 水 溶 液 (4ml)， 在微波加 入 中 间 体 79(1.0g， 2.58mmol) 的 二照射下， 在 160 ℃下， 将得到的混合物搅拌、 加热 10 分钟。将反应混合物冷却至室温， 通过硅藻土过滤， 使用 EtOAc， 将滤液蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/ 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 0.72g 中间体 80(92％ )。 MeOH(NH3)100/0-97/3) 纯化。
[1057] d) 中间体 81 的制备
[1058] 在 N2 气氛下， 将 MeOH(40ml) 加入 Pt/C 5％ (100mg)。 然后， 加入中间体 80(0.75g， 2.49mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 25℃下搅拌至吸收 1 当量 H2。通过硅藻土将催 化剂过滤除去， 将滤液蒸发。 得到 ： 0.55g 粗中间体 81(73％ )， 在下一反应步骤中原样使用。
[1060] e) 中间体 82 的制备
[1059] 将 环 丙 基 硼 酸 (86mg， 1.0mmol) 和 Pd(PPh3)4(78mg， 0.067mmol) 加 入 到 中 间 体 烷 (6ml) 溶液和 NaHCO3 水溶液 (3ml)。 在微波照射下， 在 160℃79(260mg， 0.67mmol) 的二下， 将混合物搅拌、 加热 10 分钟。将反应混合物冷却至室温， 通过硅藻土过滤， 使用 EtOAc， 将滤液蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-97/3) 纯化。将产 物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.15g 中间体 82(74％ )。
[1063] 实施例 A34
[1064] a) 中间体 83 的制备
[1065] 在 0 ℃下， 将磷酰氯 (1.25ml， 13.7mmol) 加入 DMF(3.5ml)， 将混合物在该温度下 搅拌 0.5h。在 0 ℃下， 加入中间体 16(1g， 3.44mmol)， 将反应混合物在室温下搅拌， 加入 DMF(5ml)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倾入冰上， 通过加入 NaHCO3 将 混合物中和。将混合物用 DCM 萃取。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。将残 留物用 DIPE 研磨。将固体收集， 干燥。得到 ： 0.625g 中间体 83(57％ )。
[1067] b) 中间体 84 的制备
[1066] 将 NaBH4(28mg， 0.75mmol) 加 入 中 间 体 83(200mg， 0.63mmol) 的 MeOH(5ml) 和 THF(2ml) 溶液。将反应混合物在室温下搅拌 15 分钟， 然后将溶剂在真空中除去。将残留物 在 DCM 和水之间分配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。得到 ： 90mg 中间体 84(45％ )。
[1070] c) 中间体 85 的制备
[1069] 将亚硫酰氯 (33mg， 0.28mmol) 加入中间体 84(90mg， 0.28mmol) 的 DCM(2ml) 溶液。 将反应混合物在室温下搅拌 30 分钟， 加入饱和 NaHCO3 水溶液。将有机层分离， 通过硅藻土 过滤， 将滤液浓缩。得到 ： 90mg 中间体 85(95％ )。
[1073] d) 中间体 86 的制备
[1072] 将 0.5M NaOMe 的 MeOH 溶液 (0.64ml， 0.32mmol) 加入中间体 85(90mg， 0.265mmol) 的 MeOH(2ml) 溶液。将反应混合物在室温下搅拌 30 分钟， 然后将溶剂真空除去。将残留物 在 DCM 和 H2O 之间分配。通过硅藻土将有机层过滤， 将滤液浓缩。将残留物用 DIPE 研磨， 真空干燥。得到 ： 60mg 中间体 86(67％ )。
[1076] e) 中间体 87 的制备
[1075] 在 -15℃下， 将 KOtBu(0.87g， 7.74mmol) 的 THF(7ml) 溶液加入甲氧基亚甲基三苯 (1.53g， 4.47mmol) 的 THF(3ml) 悬浮液。将反应混合物搅拌 30 分钟。然后， 在基氯化磷5℃下， 加入中间体 83(0.95g， 3mmol) 的 THF(3ml) 溶液， 将反应混合物在室温下搅拌 1h。 将 反应混合物在 DCM 和 H2O 之间分配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物 经硅胶柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 99/1) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂真空蒸发。得到 ： 700mg 中间体 87， 为 E/Z 混合物 (68％ )。实施例 A35 a) 中间体 88 的制备将 1- 碘 -2， 5- 吡咯烷二酮 (5.54g， 24.6mmol) 加入 8- 溴 -2-(2- 三氟甲基 - 苯 基 )- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 ( 按实施例 A9， 由 3- 溴 -2- 吡啶胺和 2- 溴 -1-(2- 三氟甲基 - 苯 基 ) 乙酮制备 ； 5.6g， 16.4mmol) 的 DCM(50ml) 溶液。将反应混合物在室温下搅拌 24h， 用 额外的 DCM 稀释， 然后依次用 15％ NaOH 水溶液、 饱和 NaHSO3 水溶液洗涤。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。得到 ： 7.2g 中间体 88(94％ )。
[1083] b) 中间体 89 的制备
[1082] 在 N2 气氛下， 在 50℃下， 将中间体 88(350mg， 0.75mmol)、 3- 甲氧基 - 丙炔 (58mg， 0.82mmol)、 PdCl2(PPh3)2(20mg， 0.028mmol)、 CuI(5mg， 0.027mmol) 在 Et3N(3ml) 中的混合物 搅拌 20h。将混合物在 DCM 和 H2O 之间分配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。残留 物经硅胶柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 99/1) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂真空蒸发。得 到： 100mg 中间体 89(33％ )。
[1086] c) 中间体 90 的制备
[1085] 在 N2 气 氛 下，将 中 间 体 4(50mg， 0.24mmol)、 Pd2(dba)3(22mg， 0.024mmol)、 X-phos(23mg， 0.049mmol) 和 Cs2CO3(240mg， 0.73mmol) 加入中间体 89(100mg， 0.24mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (10ml) 溶液。将反应混合物在 100℃下加热 20h。然后， 加入水， 将混合物 用 DCM 萃取。 将合并的有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂蒸发。 残留物经硅胶闪式层析 ( 洗 脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-99/1) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂真空蒸发。得到 ： 30mg 中 间体 90(23％ )。
[1089] 实施例 A36
[1090] a) 中间体 91 的制备
[1088] 将 3- 溴 -5- 氟 -1， 2- 二氨基苯 (10.5g， 51mmol) 和尿素 (3.84g， 64mmol) 在二甲 苯 (100ml) 中的混合物搅拌、 回流过夜。然后， 将反应混合物冷却至室温， 将得到的沉淀滤 出。将固体悬浮于 1N HCl 水溶液， 再次滤出， 然后干燥。将得到的固体用 DIPE 研磨。得到 ： 9.5g 中间体 91(80％ )。
[1093] b) 中间体 92 的制备
[1092] 将 磷 酰 氯 (30ml) 缓 慢 加 入 中 间 体 91(3.0g， 13mmol)， 然 后 加 入 浓 HCl 水 溶 液 (1ml)。将反应混合物加热、 回流 2 天。将反应混合物真空浓缩。将残留物在 DCM 和 NaHCO3
[1095] 水溶液之间分配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 蒸发。得到 ： 3.0g(93％ ) 粗中间体 92。
[1096] c) 中间体 93 的制备
[1097] 在 N2 气氛下， 将 60％ NaH 的矿物油悬浮液 (721mg， 18mmol) 加入中间体 92(3.0g， 12mmol) 的 冷 (5 ℃ )DMF(40ml) 溶 液。 将 反 应 混 合 物 在 5 ℃ 下 搅 拌 30 分 钟， 然后加入 CH3I(8.53g， 60mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 3h， 然后在水和 EtOAc 之间分配。将有 机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。 残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： 庚烷 / EtOAc 80/20-50/50) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 850mg 中间体 93(27％ )。
[1099] d) 中间体 94 的制备
[1098] 在 微 波 照 射 下， 在 180 ℃ 下， 将 中 间 体 93(760mg， 2.88mmol) 和 吡 咯 烷 (1.03g， 14.4mmol) 在 NMP(15ml) 中 的 混 合 物 加 热 10 分 钟。 将 反 应 混 合 物 冷 却 至 室 温， 倾入 H2O(100ml)。 将得到的沉淀滤出， 用 H2O 洗涤。 将固体干燥， 用 DIPE 研磨。 得到 ： 675mg(78％ ) 中间体 94。
[1102] 实施例 A37
[1103] a) 中间体 95 的制备
[1101] 将 2- 氯 - 乙 醛 (6M， 1.0ml， 6.0mmol) 和 Na2S2O5(1.14g， 6.0mmol) 加 入 中 间 体 18(800mg， 3.98mmol) 的 DMA(10ml) 溶液。将反应混合物在室温下搅拌 2h。将反应混合物 倾入 H2O 中。将固体滤出， 用 H2O 洗涤， 使悬浮于 DIPE。将固体滤出， 用 DIPE 洗涤， 干燥。得 到： 0.15g 中间体 95(15％ )。
[1106] b) 中间体 96 的制备
[1105] 在 N2 气氛下， 将 60％ NaH 的矿物油悬浮液 (193mg， 4.82mmol) 加入 2- 丙醇 (232mg， 3.85mmol) 的 DMF(10ml) 溶液。将反应混合物在室温下搅拌 30 分钟， 然后加入中间体 95(0.5g， 1.93mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 2h， 然后在 H2O 和 EtOAc 之间分配。将有 机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/
[1108] MeOH(NH3)100/0-95/5) 纯化。 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 120mg 中间体 96(15％ )。
[1109] 实施例 A38
[1110] a) 中间体 97 的制备
[1111] 将 8- 碘 -6-( 三氟甲基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸乙酯 (0.60g1.56mmol) 和 LiOH(38mg， 1.6mmol) 溶于 THF/H2O(10ml/10ml) 混合物， 将混合物在室温下搅拌 20h。 将混合物用 1N HCl 水溶液酸化至产物沉淀。将沉淀滤出， 真空干燥。得到 ： 0.5g 中间体 97(90％ )。
[1113] b) 中间体 98 的制备
[1112] 将 2M 二甲胺的 THF 溶液 (0.58ml， 1.16mmol)/THF(10ml) 加入中间体 97(500mg， 1.4mmol) 和 HBTU(533mg， 1.4mmol) 在 DMF(10ml) 中的混合物。然后加入 DIPEA(0.98ml， 5.62mmol)， 将反应混合物在室温下搅拌 18h。将混合物用 DCM 稀释， 用 0.5N NaOH 水溶液、 H2O 洗涤。 将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。 残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/ MeOH(NH3)99/1) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂真空蒸发。得到 ： 490mg 中间体 98(90％ )。
[1115] 实施例 A39 a) 中间体 99 的制备将 BF3 合 乙 醚 (0.154ml， 1.32mmol) 加 入 4- 氟 苯 基 乙 二 醛 (glyoxal) 水 合 物 (4.5g， 26.5mmol) 和 2- 氨基 -3- 溴吡啶 (4.72g， 26.5mmol) 在 DCM(100ml) 中的混合物。将 反应混合物在室温下搅拌 6h。将得到的沉淀滤出， 真空干燥。得到 ： 4g 中间体 99(49％ )。
[1120] b) 中间体 100 的制备
[1119] 将 NaH(60 ％矿物油悬浮液， 414mg， 10.3mmol) 加入中间体 99(1.06g， 3.45mmol) 的 DMF(50ml) 冰冷却溶液。将反应混合物在 0℃下搅拌 15 分钟， 然后加入 CH3I(0.258ml， 4.14mmol)， 将得到的反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水猝灭， 然后真空浓 缩。将残留物在 DCM 和 H2O 之间分配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。残留物经 硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： 正庚烷 /EtOAc 100/0-50/50) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂真 空蒸发。将残留物悬浮于 DIPE， 真空干燥。得到 ： 445mg 中间体 100(40％ )。
[1123] 实施例 A40
[1124] 中间体 101 的制备
[1122] 将 3， 5- 二溴 - 吡嗪 -2- 基胺 (5g， 19.8mmol)、 2- 氯 - 丙酮 (18.3g， 198mmol) 和二烷 (40ml) 在回流温度下加热 16h。将反应混合物减压浓缩， 将残留物用 DIPE 研磨。得 到： 3.6g 中间体 101(55％ )。
[1127] 实施例 A41
[1128] a) 中间体 102 的制备
[1129] 在 15 ℃ 下， 将 溴 (3.15ml， 61.3mmol) 滴 加 到 4- 氨 基 -3- 硝 基 - 苄 腈 (10g， 61.3mmol) 的 AcOH(80ml) 溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜， 再加入溴 (1.58ml， 30.7mmol)。再在室温下 6h 后， 再加入溴 (0.79ml， 15.3mmol)， 在室温下连续搅拌过周末。 将反应混合物减压浓缩， 将残留物用水研磨。 残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH98/2) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂真空蒸发。得到 ： 6.24g 中间体 102(35％ )。
[1131] b) 中间体 103 的制备
[1132] 将 4- 氟 苯 甲 醛 (0.96ml， 9.1mmol) 和 Na2S2O4(5.04g， 28.9mmol) 加 入 中 间 体 102(2g， 6.86mmol) 的 EtOH(10ml) 溶液。在微波条件下， 将反应混合物在 150℃下加热 45 分钟。将反应混合物冷却至室温， 通过硅藻土过滤。将滤液蒸发， 将残留物溶于 DMF。加入 H2O。将得到的沉淀滤出， 用 H2O 洗涤。将残留物悬浮于甲苯， 将溶剂减压除去。得到 ： 1.6g 中间体 103(70％ )。
[1134] c) 中间体 104 的制备
[1133] 在 5 ℃下， 在 N2 气氛下， 将 60 ％ NaH 的矿物油悬浮液 (569mg， 14.2mmol) 加入中 间体 103(3g， 9mmol) 的 DMF(20ml) 溶液。将反应混合物在 5 ℃下搅拌 15 分钟， 然后加入 CH3I(1.48ml， 23.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 30 分钟， 使在 EtOAc 和 H2O 之间分 配。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱 液： DCM/MeOH 100/0-99/1) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。残留物再经制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4CO3 水溶液， CH3CN/ MeOH)] 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。得到 ： 1.1g 中间体 104(37％ )。
[1137] 实施例 A42
[1138] a) 中间体 105 的制备
[1139] 在 N2 气氛下， 将 MeOH(150ml) 加入 Pt/C 5％ (1g)。然后， 加入 0.4％噻吩的 DIPE 溶液 (2ml) 和 2- 溴 -4- 甲氧基 -6- 硝基苯胺 (5g， 20.2mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物 在 25℃下搅拌至吸收 3 当量 H2。通过硅藻土将催化剂过滤除去， 将滤液真空浓缩。得到 ： 4.33g 中间体 105(99％ )， 在下一步中原样使用。
[1141] b) 中间体 106 的制备
[1140] 将 4- 氟 - 苯 甲 醛 (1.17ml， 11.1mmol) 和 Na2S2O5(2.63g， 13.8mmol) 加 入 中 间 体 105(2g， 9.2mmol) 的 DMA(40ml) 溶液。将反应混合物在 90℃下搅拌过夜。然后， 将反应混 合物倾入水中， 导致固体沉淀。 将固体滤出， 用水洗涤， 使悬浮于 DIPE。 将得到的固体滤出， 用 DIPE 洗涤， 干燥。得到 ： 2.9g 中间体 106(98％ )。
[1144] c) 中间体 107 的制备
[1143] 在 N2 气氛下， 在 5℃下， 将 60％ NaH 的矿物油悬浮液 (486mg， 12.1mmol) 加入中间 体 106(2.6g， 8.1mmol) 的 DMF(15ml) 溶液。 将反应混合物在 5℃下搅拌 30 分钟， 然后加入甲 基碘 (1.26ml， 20.2mmol)。 将反应混合物在室温下搅拌 3h， 使在 EtOAc 和水之间分配。 将有 机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-99/1) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 1.25g 中间体 107(46％ )。
[1147] 实施例 A43
[1148] a) 中间体 108 的制备
[1149] 将 浓 HNO3(12.5ml) 加 入 3， 5- 二 溴 - 吡 啶 N- 氧 化 物 (4.5g， 17.8mmol) 的 浓 H2SO4(16ml) 溶液。将反应混合物回流 4h， 然后冷却， 倾入冰水。通过过滤将得到的沉淀收 集， 干燥。得到 ： 3.1g 中间体 108(58％ )， 在下一步中原样使用。
[1151] b) 中间体 109 的制备
[1150] 将 2M 甲胺的 THF 溶液 (7.15ml， 14.3mmol) 加入中间体 108(2.66g， 8.9mmol) 在 THF(100ml) 中的混合物。 将反应混合物在 60℃下搅拌 2 天， 然后真空浓缩。 将残留物在 DCM 和 NaHCO3 水溶液之间分配。将有机相分离， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物 经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： 庚烷 /DCM/MeOH(NH3)100/0/0-0/100/0-0/70/30) 纯化。将产 物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 1.2g 中间体 109(54％ )。
[1154] c) 中间体 110 的制备
[1153] 将 4- 氟 苯 甲 醛 (252mg， 2.0mmol) 和 Na2S2O4(1.18g， 6.8mmol) 加 入 中 间 体 109(420mg， 1.7mmol) 的 EtOH(6ml) 溶液。在微波条件下， 将反应混合物在 160 ℃下加热 45 分钟。将反应混合物冷却至室温， 用 EtOAc 稀释。将混合物用 NaHCO3 水溶液和盐水洗 涤。将有机相分离， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱 液： DCM/MeOH(NH3)100/0-97/3) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.35g 中间体 110(68％ )。
[1157] 实施例 A44
[1158] 中间体 111 的制备
[1156] 将 6- 氨 基 -5- 溴 - 烟 腈 (nicotinonitrile)(4g， 20.2mmol) 和 1- 溴 -4- 甲 基 -2- 戊酮 (5.43g， 30.3mmol) 在 NMP(40ml) 中的混合物在 150℃下加热 2h。将反应混合 物冷却至室温， 倾入 10％ NaHCO3 水溶液。将混合物用甲苯萃取。将有机层干燥 (MgSO4)， 过 滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： 正庚烷 /EtOAc 100/0-50/50) 纯 化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。将残留物用 DIPE 研磨。得到 ： 2.9g 中间体 111(52％ )。
[1161] B. 化合物的制备
[1162] 实施例 B1
[1163] 化合物 1 的制备
[1160] 将 Cs2CO3(0.56g， 1.72mmol)、 Pd2(dba)3(0.039g， 0.043mmol) 和 BINAP(0.053g， 0.086mmol) 加 入 中 间 体 16(0.25g， 0.859mmol) 和 中 间 体 2(0.184g， 0.902mmol) 的 DMF(80ml) 溶液。将反应混合物用 N2 吹扫 5 分钟， 然后在 100℃下加热 18h。将反应混合 物减压浓缩。将残留物溶于 DCM。将有机相用 H2O 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸 发。 残留物经制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4CO3 水溶液， MeOH+CH3CN) 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。将残留物悬浮于 DIPE， 过滤收集沉淀， 在 60℃下， 真空干燥。得到 ： 0.068g 化合物 1(19％ )。
[1166] 实施例 B2
[1167] 化合物 2 的制备
[1165] 将 Cs2CO3(0.616g， 1.892mmol)、 Pd2(dba)3(0.043g， 0.047mmol) 和 BINAP(0.058g， 0.094mmol) 加入中间体 5(0.3g， 0.95mmol) 和中间体 2(0.203g， 0.993mmol) 的 DMF(20ml) 溶液。将混合物用 N2 吹扫 5 分钟， 然后在 100℃下加热 18h。将反应混合物减压浓缩。将 残留物溶于 DCM， 将有机相用 H2O 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经制 备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4CO3 水溶液， MeOH+CH3CN) 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。在 60℃下， 将固体产物真空干燥。 得到 ： 0.129g 化合物 2(30％ )。
[1170] 实施例 B3
[1171] 化合物 3 的制备
[1169] 将 中 间 体 16(0.230g， 0.793mmol)、 Pd2(dba)3(0.060g， 0.066mmol)、 二环己基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.069g， 0.145mmol) 和 Cs2CO3(0.646g， 1.98mmol) 加入中间体 4(0.135g， 0.661mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (10ml) 溶 液， 将反应混合物在 110℃下加热过夜。冷却后， 加入 H2O， 将产物用 DCM 萃取。将有机相干 燥 (MgSO4)， 过滤， 减压浓缩。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-98/2) 纯化， 将产物流分收集， 进行后处理。使残留物从 DIPE 中结晶， 过滤， 在 80℃下， 真空干燥。 得到 ： 0.032g 化合物 3(11.7％ )。
[1174] 实施例 B4
[1175] d) 化合物 4 的制备
[1173] 将 中 间 体 7(0.070g， 0.14mmol)、 5- 溴 -2- 甲 基 噻 唑 (0.051g， 0.29mmol)、 Cs2CO3(0.047g， 0.14mmol)、 Pd(PPh3)4(0.033g， 0.29mmol) 和 3N NaOH 水 溶 液 (0.024ml，
[1177] 0.07mmol) 的 1， 4- 二烷 (10ml) 溶液用 N2 吹扫 2 分钟。将反应混合物在 80℃下搅拌过夜。冷却后， 加入 H2O， 将产物用 DCM 萃取。将有机相用盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 减压 浓缩。残留物经制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动 相： (0.25％ NH4CO3 水溶液， MeOH+CH3CN)] 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。得到 ： 0.013g化合物 4(19.7％ )。
[1178] 实施例 B5
[1179] 化合物 5 的制备
[1180] 将 中 间 体 6(0.220g， 0.50mmol)、 2， 4- 二 甲 基 -5-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -1， 3， 2- 二 氧杂硼杂环戊烷 -2- 基 )-1， 3- 噻唑 (859833-13-9， 0.240g， 1.0mmol)、 Pd(PPh3)4(0.116g， 0.1mmol)、 Cs2CO3(0.163g， 0.50mmol) 和 3N NaOH 水溶液 (0.084ml， 0.251mmol) 的 1， 4- 二
[1181] 烷 (20ml) 溶液用 N2 吹扫 2 分钟。将反应混合物在 80℃下搅拌过夜。冷却后， 将反应混 合物浓缩， 加入 H2O， 将产物用 EtOAc 萃取。将有机相用盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 减压 浓缩。残留物经制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动 相： (0.5％ NH4OAc 水溶液 +10％ CH3CN， CH3CN)] 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。得到 ： 0.078g 化合物 5(33％ )。
[1182] 实施例 B6
[1183] 化合物 6 的制备
[1184] 将 中 间 体 6(0.220g， 0.502mmol)、 Pd(PPh3)4(0.116g， 0.1mmol) 的 1， 4- 二烷(20ml) 溶液用 N2 吹扫 2 分钟， 将反应混合物在室温搅拌 10 分钟。将 1H- 吡唑 -1， 3- 二 甲 基 -4-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -1， 3， 2- 二 氧 杂 硼 杂 环 戊 烷 -2- 基 )(0.223g， 1.0mmol) 和 Cs2CO3(0.327g， 1.0mmol) 加入反应混合物。在室温下搅拌 10 分钟后， 加入 3N NaOH 水溶液 (0.084ml， 0.251mmol)。将反应混合物在 80℃下搅拌过夜。冷却后， 将反应混合物浓缩， 加 入 H2O， 将产物用 EtOAc 萃取。将有机相用盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 减压浓缩。残留 物经制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4CO3 水溶液， CH3CN)] 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。得到 ： 0.055g 化合物 6(24％ )。
[1186] 实施例 B7
[1187] 化合物 7 的制备
[1188] 将 Cs2CO3(1.137g， 3.491mmol)、 Pd2(dba)3(0.080g， 0.087mmol) 和 BINAP(0.109g， 0.175mmol) 加 入 中 间 体 16(0.508g， 1.75mmol) 和 中 间 体 9(0.400g， 1.83mmol) 的 DMF(30ml) 溶液。将混合物用 N2 吹扫 5 分钟。将反应混合物在 100℃下加热 18h， 然后减压 浓缩。将残留物溶于 DCM， 将有机相用 H2O 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留 物经制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4CO3 水溶液， MeOH+CH3CN)] 纯化。将产物流分收集， 蒸发除去溶剂。残留物经硅胶闪式层 析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-95/5) 再纯化。将产物流分收集， 蒸发溶剂。使残留物从正 庚烷 /DIPE 中结晶， 将沉淀过滤， 在 50℃下真空干燥。得到 ： 0.099g 化合物 7(13.2％ )。
[1190] 实施例 B8
[1191] 化合物 8 的制备
[1192] 将 Cs2CO3(0.261g， 0.80mmol)、 Pd2(dba)3(0.018g， 0.02mmol) 和 BINAP(0.025g， 0.04mmol) 加入中间体 21(0.115g， 0.4mmol) 和中间体 9(0.091g， 0.42mmol) 的 DMF(20ml) 溶液， 将混合物用 N2 吹扫 5 分钟。将反应混合物在 100℃下加热 18h， 然后减压浓缩。将残 留物溶于 DCM， 将有机相用 H2O 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂真空蒸发。残留物经制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4CO3 水 溶液， MeOH+CH3CN)] 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。在 60℃下， 将固体残留物在真空下 干燥。得到 ： 0.043g 化合物 8(25.3％ )。
[1194] 实施例 B9
[1195] 化合物 9 的制备
[1193] 将 中 间 体 19(0.305g， 1mmol)、 Pd2(dba)3(0.091g， 0.0.98mmol)、 二 环 己 基 [2 ′， 4′， 6′ - 三 (1- 甲基乙基 )[1， 1′ - 联苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.095g， 0.2mmol) 和 Cs2CO3(0.978g， 3.0mmol) 加 入 中 间 体 13(0.172g， 0.983mmol) 的 2- 甲 基 -2- 丙 醇 (20ml) 溶 液， 将反 应混合物在 110 ℃下加热过夜。然后， 将反应混合物减压浓缩。将残留物溶于 DCM， 将 有机相用 H2O 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 减压浓缩。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-98/2) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.160g 化合物 9(37.4％ )。
[1198] 实施例 B10
[1199] 化合物 10 的制备
[1197] 将 中 间 体 19(0.300g， 0.983mmol)、 Pd2(dba)3(0.090g， 0.098mmol)、 二环己基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.103g， 0.216mmol) 和 Cs2CO3(0.961g， 2.95mmol) 加入中间体 15(0.172g， 1mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (10ml) 溶液， 将反应混合物在 110℃下加热过夜。冷却后， 加入 H2O， 将混合物搅拌 10 分钟， 然后用 DCM 稀释， 通过硅藻土过滤。将滤液用 H2O 洗涤， 将有机相干燥 (MgSO4)， 减压浓缩。残留物经硅 胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-95/5) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.169g 化合物 10(43％ )。
[1202] 实施例 B11
[1203] 化合物 11 的制备
[1201] 将 中 间 体 20(0.210g， 0.684mmol)、 Pd2(dba)3(0.062g， 0.068mmol)、 二环己基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.071g， 0.15mmol) 和 Cs2CO3(0.688g， 2.05mmol) 加入中间体 2(0.139g， 0.684mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (10ml) 溶 液， 将反应混合物在 110℃下加热 6h。冷却后， 加入 H2O， 将产物用 DCM 萃取。将有机相干燥 (MgSO4)， 减压浓缩。残留物经制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4CO3 水溶液， CH3CN)] 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。得 到： 0.197g 化合物 11(67％ )。
[1206] 实施例 B12
[1207] 化合物 12 的制备
[1205] 将 中 间 体 19(0.660g， 2.16mmol)、 Pd2(dba)3(0.198g， 0.216mmol)、二 环 己 基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.226g， 0.476mmol) 和 Cs2CO3(2.115g， 6.49mmol) 加 入 中 间 体 2(0.441g， 2.16mmol) 的 2- 甲 基 -2- 丙 醇 (30ml) 溶液， 将反应混合物在 90 ℃下加热 72 小时。冷却后， 将溶剂蒸发。加入 H2O， 将混合物用 DCM 萃取。将有机层分离， 干燥 (MgSO4)， 减压浓缩。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/ MeOH(NH3)100/0-99/1) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。使产物从 DIPE 中结晶， 滤出， 真空干燥。得到 ： 0.465g 化合物 12(50％ )。
[1209] 实施例 B13 化合物 13 的制备将 中 间 体 19(0.304g， 0.99mmol)、 Pd2(dba)3(0.091g， 0.099mmol)、二 环 己 基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.104g， 0.22mmol) 和 Cs2CO3(0.976g， 3.0mmol) 加入中间体 26(0.203g， 1.0mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (8ml) 溶液， 将反应混合物在 110℃下加热 16 小时。冷却后， 加入 H2O， 将混合物用 DCM 萃取。将有机层 分离， 干燥 (MgSO4)， 减压浓缩。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM 等度洗脱 ) 纯化。将 产物流分收集， 将溶剂蒸发。使产物从 DIPE 中结晶， 滤出， 真空干燥。得到 ： 0.065g 化合物 13(15.2％ )。
[1214] 实施例 B14
[1215] 化合物 14 的制备
[1213] 将 中 间 体 24(0.298g， 1.14mmol)、 Pd2(dba)3(0.104g， 0.114mmol)、二 环 己 基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.108g， 0.228mmol) 和 Cs2CO3(1.108g， 3.42mmol) 加入中间体 4(0.233g， 1.14mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (15ml) 溶 液， 将反应混合物在 110℃下加热过夜。冷却后， 加入 H2O， 将产物用 DCM 萃取。将有机相干 燥 (MgSO4)， 过滤， 减压浓缩。 使残留物在 DIPE/CN3CN 中结晶， 将沉淀过滤， 真空干燥。 得到 ： 0.246g 化合物 14(50％ )。
[1218] 实施例 B15
[1217] 化合物 15 的制备将 中 间 体 34(0.320g， 0.96mmol)、 Pd2(dba)3(0.088g， 0.096mmol)、二 环 己 基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.091g， 0.192mmol) 和 Cs2CO3(0.939g， 2.881mmol) 加入中间体 31(0.320g， 0.96mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (15ml) 溶液， 将反应混合物在 100℃下加热过夜。冷却后， 加入 H2O， 将产物用 DCM 萃取。将有机相
[1221] 干燥 (MgSO4)， 过滤， 减压浓缩。 残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-98/2) 纯 化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.216g 化合物 15(51.5％ )。
[1222] 实施例 B16
[1223] 化合物 16 的制备
[1224] 将 中 间 体 19(0.336g， 1.10mmol)、 Pd2(dba)3(0.101g， 0.11mmol)、二 环 己 基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.115g， 0.242mmol) 和 Cs2CO3(1.077g， 3.31mmol) 加 入 中 间 体 4(0.225g， 1.10mmol) 的 2- 甲 基 -2- 丙 醇 (15ml) 溶液， 将反应混合物在 90 ℃下加热 72h。冷却后， 将溶剂蒸发， 加入 H2O， 将产物用 DCM 萃 取。将有机相干燥 (MgSO4)， 过滤， 减压浓缩。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-99/1) 纯化， 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。使残留物在 DIPE 中结晶， 过滤， 在 80℃ 下， 真空干燥。得到 ： 0.220g 化合物 16(46.6％ )。
[1226] 实施例 B17
[1227] 化合物 17 的制备
[1225] 将 中 间 体 41(0.22g， 0.84mmol)、 Pd2(dba)3(0.077g， 0.084mmol)、二 环 己 基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.080g， 0.168mmol) 和 Cs2CO3(0.822g， 2.52mmol) 加入中间体 43(0.161g， 0.841mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (15ml) 溶液， 将反应混合物在 100℃下加热 20h。冷却后， 将溶剂蒸发， 加入 H2O， 将产物用 DCM 萃 取。将有机相干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂蒸发。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/ MeOH(NH3)99/1) 纯化， 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.20g 化合物 17(57％ )。
[1229] 实施例 B18 化合物 18 的制备
[1233] 将 中 间 体 34(0.190g， 0.57mmol)、 Pd2(dba)3(0.052g， 0.057mmol)、二 环 己 基 [2 ′， 4 ′， 6 ′ - 三 (1- 甲 基 乙 基 )[1， 1 ′ - 联 苯 ]-2- 基 ] 膦 (0.054g， 0.114mmol) 和Cs2CO3(0.558g， 1.71mmol) 加入中间体 48(0.100g， 0.571mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (10ml) 溶液， 将反应混合物在 110℃下加热 14h。 冷却后， 加入 H2O， 将产物用 DCM 萃取。 将有机相干 燥 (MgSO4)， 过滤， 减压浓缩。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-98/2) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 0.093g 化合物 18(38％ )。
[1234] 实施例 B19
[1235] 化合物 169 的制备
[1236] 在 H2( 常压 ) 下， 将中间体 90(30mg， 0.056mmol) 和 Raney 镍 (20mg) 在 THF(30ml) 中的混合物在室温下搅拌。吸收 H2(2 当量 ) 后， 通过硅藻土将催化剂过滤除去。将溶剂蒸 发， 将残留物在 DCM 和 H2O 之间分配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。残留物经 制备 HPLC[RP Vydac Denali C18(10μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4CO3 水溶液， CH3CN)] 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。得到 ： 1.1mg 化合物 169(4％ )。 实施例 B20 化合物 188 的制备
[1238] 将 中 间 体 57(0.224g ， 1.15mmol) 、Pd(OAc) 2 (0.034g ， 0.15mmol) 、 Xantphos(0.133g， 0.23mmol) 和 Cs2CO3(0.498g， 1.53mmol) 加 入 中 间 体 63(0.185g，
[1241] 0.76mmol) 的二烷 (3ml) 溶液， 在微波照射下， 将反应混合物在 160℃下加热 1h。 冷却后，将产物用 DCM 萃取。将有机相干燥 (MgSO4)， 减压浓缩。残留物经制备 HPLC[RP 加入 H2O， Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25 ％ NH4CO3 水溶液， MeOH)] 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。得到 ： 0.040g 化合物 188(13％ )。
[1242] 实施例 B21 化合物 128 的制备
[1245] 将中间体 34(0.405g， 1.17mmol)、 Pd2(dba)3(0.107g， 0.12mmol)、 X-Phos(0.122g， 0.26mmol) 和 Cs2CO3(1.14g， 3.5mmol) 加入中间体 56(0.250g， 1.17mmol) 的 2- 甲基 -2- 丙醇 (10ml) 溶液中， 将反应化合物在 100 ℃下加热 4h。冷却后， 加入 H2O， 将产物用 DCM 萃 取。 将 有 机 相 干 燥 (MgSO4)， 过 滤， 减 压 浓 缩。 残 留 物 经 硅 胶 闪 式 层 析 ( 洗 脱 液 ： DCM/ MeOH(NH3)100/0-98/2) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。将残留物用 DIPE/2- 丙醇研 磨。得到 ： 0.284g 化合物 128(52％ )。
[1246] 实施例 B22
[1247] 化合物 165 的制备
[1248] 在 0 ℃ 下， 将 化 合 物 143( 按 实 施 例 B3， 由 中 间 体 98 和 中 间 体 2 制 备， 150mg， 0.33mmol) 的 THF(5ml) 溶液缓慢加入 1M CH3Li 的 THF 溶液 (1ml， 1mmol)。将混合物在室 温下搅拌 2h， 然后再加入 1M CH3Li 的 THF 溶液 (1ml， 1mmol)， 在室温下， 连续搅拌 1h。加入 过滤， 减压浓缩。残留物经 10％ HCl 水溶液， 将混合物用 DCM 萃取。将有机相干燥 (MgSO4)， 硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-99/1) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 21mg 化合物 165(15％ )。
[1250] 实施例 B23
[1251] 化合物 120 的制备
[1249] 在 H2( 常压 ) 下， 将化合物 123( 按实施例 B18， 由中间体 104 和中间体 2 制备， 40mg， 0.088mmol) 和 Raney 镍 (20mg) 在 MeOH(NH3)(40ml) 中的混合物在室温下搅拌。吸收 H2(2 当量 ) 后， 通过硅藻土将催化剂过滤除去。将溶剂蒸发， 残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)90/10) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。得到 ： 7mg 化合物 120(17％ )。 实施例 B24 化合物 197 的制备
[1254] 在 N2 气氛下， 将 1 ∶ 1 的 THF 和 MeOH(100ml) 混合物加入 Pd/C(10％， 500mg)。然后， 加入 0.4％噻吩的 DIPE 溶液 (0.5ml)、 化合物 198( 按实施例 B3 制备， 49mg， 0.11mmol) 和 KOAc(13mg， 0.13mmol)， 在 H2 气氛下， 将反应混合物在 25 ℃下搅拌至吸收 1 当量 H2。 通过硅藻土将催化剂过滤除去。将滤液蒸发， 将残留物在 DCM 和饱和 NaHCO3 水溶液之 间分配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂蒸发。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-96/4) 纯 化。 将 产 物 流 分 收 集， 将 溶 剂 蒸 发。 得 到 ： 9.5mg 化 合 物 197(21％ )。
[1258] 实施例 B25
[1259] 化合物 179 的制备
[1260] 在微波照射下， 将 4-(2- 甲基 -唑 -5- 基 )- 苯胺 (615mg， 3.53mmol)、 中间体101(933mg， 3.21mmol) 和 DIPEA(1.24g， 9.62mmol) 在 CH3CN(10ml) 中的混合物在 200℃下加 热 1.5h。 将挥发物减压蒸发， 将残留物在 DCM 和 H2O 之间分配。 将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 将溶剂蒸发。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)95/5) 纯化。将含产物的流 分收集， 将溶剂蒸发。 残留物进一步经制备 HPLC[RP Shandon Hyperprep C18 BDS(8μm， 250g， I.D.5cm) ； 流动相 ： (0.25％ NH4CO3 水溶液， MeOH)] 纯化。将产物流分收集， 减压浓缩。 得到 ： 0.031g 化合物 179(3％ )。
[1262] 实施例 B26
[1263] a) 化合物 185 的制备
[1264] 将 1- 碘 -2， 5- 吡 咯 烷 二 酮 (837mg， 3.72mmol) 加 入 化 合 物 42(1.3g， 3.38mmol) 的 DCM(50ml) 和 AcOH(5ml) 溶液。将反应混合物在室温下搅拌 5 分钟， 然后用 NaHCO3 水 溶液洗涤。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH(NH3)100/0-97/3) 纯 化。 将 产 物 流 分 收 集， 将 溶 剂 蒸 发。 得 到 ： 500mg 化 合 物 185(29％ )。
[1266] b) 化合物 177 的制备
[1265] 将 异 丙 烯 基 硼 酸 频 哪 醇 酯 (151mg， 0.9mmol) 和 Pd(PPh3)4(52mg， 0.045mmol)加 入 化 合 物 185(230mg， 0.45mmol) 的 二烷 (2ml) 溶 液 和 NaHCO3 水 溶 液 (2ml) 中， 在微波照射下， 将混合物在 150 ℃下搅拌并加热 10 分钟。将反应混合物冷却至室温， 通 过硅藻土过滤， 用 EtOAc 洗涤， 将滤液蒸发。残留物经硅胶闪式柱层析 ( 洗脱液 ： DCM/ MeOH(NH3)100/0-97/3) 纯化。 将产物流分收集， 将溶剂蒸发。 得到 ： 14mg 化合物 177(7％ )。
[1269] c) 化合物 175 的制备
[1270] 在 N2 气氛下， 将 MeOH(40ml) 加入 Pt/C 5％ (50mg)。 然后， 加入化合物 177(150mg， 0.35mmol)。在 H2 气氛下， 将反应混合物在 25℃搅拌至吸收 1 当量 H2。通过硅藻土将催化 剂过滤除去， 将滤液蒸发。将残留物用 DIPE 研磨。得到 ： 70mg 粗化合物 175(46％ )。
[1272] 实施例 B27
[1273] a) 化合物 156 的制备
[1271] 在 0℃下， 将 3M CH3MgBr 的 Et2O 溶液加入化合物 151( 按实施例 B3， 由中间体 2 和 中间体 111 制备， 105mg， 0.26mmol) 的 THF(20ml) 溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜， 然后用饱和 NH4Cl 水溶液猝灭。加入水， 将混合物用 DCM 萃取。将有机层干燥 (MgSO4)， 过 滤， 真空浓缩。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-95/5) 纯化。将产物流 分收集， 将溶剂蒸发。将残留物溶于 DIPE/CH3CN， 加入 6N HCl 的 2- 丙醇溶液。过滤， 将得 到的沉淀收集， 干燥。得到 ： 3.2mg 化合物 156， 为 HCl 盐 (3％ )。
[1276] b) 化合物 162 的制备
[1275] 将 NaOH(2g， 50mmol) 的 H2O(40ml) 溶液加入化合物 151(0.4g， 1mmol) 的二烷(40ml) 溶液。将反应混合物搅拌、 回流 3h， 然后冷却至室温， 用浓 HCl 水溶液中和至 pH 7。 过滤， 将得到的沉淀收集， 干燥。将部分残留物 (213mg， 0.51mmol) 溶于 DCM(13ml)， 然后加入草酰氯 (0.13ml， 1.52mmol) 和 DMF(0.2ml， 2.58mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过 夜， 然后倾入 MeOH(20ml)， 在室温下搅拌 1h。将混合物在 DCM 和饱和 NaHCO3 水溶液之间分 配。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 真空浓缩。残留物经硅胶闪式层析 ( 洗脱液 ： DCM/MeOH 100/0-95/5) 纯化。将产物流分收集， 将溶剂蒸发。将残留物用 DIPE 研磨。得到 ： 58mg 化 合物 162(20％， 2 步合计收率 )。
[1279] 在表 1、 2、 3、 4 和 5 中的化合物 1-202 列出了通过与以上实施例之一类似的方法制 备的化合物。如果未说明盐形式， 则得到的化合物为游离碱。 ‘Pr.’ 是指与合成化合物的方 案对应的实施例编号。 ‘Co.No.’ 表示化合物编号。 ‘Bx’ 是指通用实验方法 1， 其中使用叔 丁醇钠、 甲苯、 BINAP 和 Pd(OAc)2。
[1280] 为得到化合物的 HCl 盐形式， 可使用本领域技术人员已知的典型方法。例如， 在典 型的方法中， 将粗残留物 ( 游离碱 ) 溶于 DIPE 或 Et2O， 然后滴加 6N HCl 的 2- 丙醇溶液或 1N HCl 的 Et2O 溶液。将混合物搅拌 10 分钟， 将产物滤出。将 HCl 盐真空干燥。
[1281] 表1
[1282] 表2
[1294] 表3
[1301] 表4
[1303] 表5
[1305] 分析部分
[1307] LCMS
[1308] 通用方法 A
[1309] 用含二元泵、 样品组织器、 柱加热器 ( 设为 55 ℃ )、 二极管阵列检测器 (DAD) 的 Acquity UPLC(Waters) 系统和以下相关方法中具体说明的柱进行 LC 测量。将从柱流出的 液流分至 MS 光谱仪。使 MS 检测器配置电喷雾离子化源。通过在 0.18 秒内从 100 扫描至 1000， 驻留时间采用 0.02 秒， 获得质谱。 毛细管针 (capillary needle) 电压为 3.5kV， 所述 源温度维持在 140℃。用氮气作为喷雾器气体。用 Waters-Micromass MassLynx-Openlynx 数据系统采集数据。
[1310] 通用方法 B
[1311] 用含带脱气器的二元泵、 自动进样器、 柱温箱、 UV 检测器和以下相关方法中具体 说明的柱的 Agilent 1100 系列液相色谱系统进行 HPLC 测量。将从柱流出的液流分至 MS 光谱仪。使 MS 检测器配置电喷雾离子化源。毛细管电压为 3kV， 将四极聚焦器温度保持在 100℃， 去溶剂化温度为 300℃。用氮气作为喷雾器气体。用 Agilent Chemstation 数据系 统采集数据。
[1306] 通用方法 C
[1313] 用含带脱气器的四元泵、 自动进样器、 柱温箱 ( 除另有说明外， 设为 40℃ )， 二极管 阵列检测器 (DAD) 和以下相关方法中具体说明的柱的 Alliance HT 2790(Waters) 系统进 行 HPLC 测量。将从柱流出的液流分至 MS 光谱仪。将 MS 检测器配置电喷雾离子化源。通过 在 1 秒内从 100 扫描至 1000， 使用的驻留时间为 0.1 秒， 获得质谱。 毛细管针电压为 3kV， 将 源温度保持在 140℃。用氮气作为喷雾器气体。用 Waters-Micromass MassLynx-Openlynx 数据系统采集数据。
[1314] LCMS 方法 1
[1315] 除通用方法 A 外 ： 在桥接乙基硅氧烷 / 二氧化硅杂化物 (BEH)C 18 柱 (1.7μm， 2.1x 50mm ； Waters Acquity) 上进行反相 UPLC( 超性能液相色谱 )， 流速 0.8ml/ 分钟。用
[1312] 两种流动相 (25mM NH4OAc 的 H2O 溶液 /CH3CN 95/5 ； 流动相 B ： CH3CN) 进行梯度洗脱， 梯度条 件为在 1.3 分钟 (min) 内从 95％ A 和 5％ B 变为 5％ A 和 95％ B， 保持 0.3 分钟。进样体积 为 0.5μl。对于正电离模式， 锥电压为 10V， 对于负电离模式， 锥电压为 20V。
[1316] LCMS 方法 2
[1317] 除通用方法 A 外 ： 在 BEH C18 柱 (1.7μm， 2.1x 50mm ； Waters Acquity) 上进行反 相 UPLC， 流速 0.8ml/ 分钟。用两种流动相 ( 流动相 A ： 0.1％甲酸的 H2O 溶液 /MeOH 95/5 ； 流动相 B ： MeOH) 进行梯度洗脱， 梯度条件为在 1.3 分钟 (min) 内从 95％ A 和 5％ B 变为 5％ A 和 95％ B， 保持 0.2 分钟。进样体积为 0.5μl。对于正电离模式， 锥电压为 10V， 对于负电 离模式， 锥电压为 20V。
[1318] LCMS 方法 3
[1319] 除通用方法 B 外 ： 在 YMC-Pack ODS-AQ C 18 柱 (4.6x 50mm) 上进行反相 HPLC， 流速 2.6ml/ 分钟。采用梯度洗脱， 运行条件为在 4.80 分钟内从 95％水和 5％ CH3CN 变为 95％ CH3CN， 保持 1.20 分钟。通过从 100 扫描到 1400 得到质谱。进样体积为 10μl。柱温 为 35℃。
[1320] LCMS 方法 4
[1321] 除通用方法 C 外 ： 将 柱 加 热 器 设 定 为 60 ℃。 在 Xterra MS C18 柱 (3.5μm， 4.6x 100mm) 上进行反相 HPLC， 流速为 1.6ml/ 分钟。用三种流动相 ( 流动相 A ： 95％ 25mM NH4OAc+5％ CH3CN ； 流动相 B ： CH3CN ； 流动相 C ： MeOH) 进行梯度洗脱， 梯度条件为在 6.5 分钟 内从 100％ A 变为 50％ B 和 50％ C， 再在 0.5 分钟内变为 100％ B， 在这些条件下保持 1 分 钟， 用 100％ A 再平衡 1.5 分钟。进样体积为 10μl。对于正电离模式， 锥电压为 10V， 对于 负电离模式， 锥电压为 20V。
[1322] LCMS 方法 5
[1323] 除通用方法 C 外 ： 将柱加热器设定为 45 ℃。在 Atlantis C18 柱 (3.5μm， 4.6x 100mm) 上进行反相 HPLC， 流速为 1.6ml/ 分钟。用两种流动相 ( 流动相 A ： 70％ MeOH+30％ H2O ； 流动相 B ： 0.1％甲酸的 H2O 溶液 /MeOH 95/5) 进行梯度洗脱， 梯度条件为在 9 分钟内从 100％ B 变为 5％ B+95％ A， 在这些条件下保持 3 分钟。进样体积为 10μl。对于正电离模 式， 锥电压为 10V， 对于负电离模式， 锥电压为 20V。
[1324] LCMS 方法 6
[1325] 除通用方法 C 外 ： 在 Xterra MS C18 柱 (3.5μm， 4.6x 100mm) 上进行反相 HPLC， 流速为 1.6ml/ 分钟。用三种流动相 ( 流动相 A ： 95 ％ 25mM NH4OAc+5 ％ CH3CN ； 流动相 B ： CH3CN ； 流动相 C ： MeOH) 进行梯度洗脱， 梯度条件为在 6.5 分钟内从 100％ A 变为 1％ A， 49％ B 和 50％ C， 再在 1 分钟内变为 1％ A 和 99％ B， 在这些条件下保持 1 分钟， 用 100％ A 再平 衡 1.5 分钟。进样体积为 10μl。对于正电离模式， 锥电压为 10V， 对于负电离模式， 锥电压 为 20V。
[1326] LCMS 方法 7
[1327] 除通用方法 A 外 ： 在桥接 BEH C18 柱 (1.7μm， 2.1x 50mm ； Waters Acquity) 上进 行反相 UPLC， 流速为 0.8ml/ 分钟。用两种流动相 (25mM NH4OAc 的 H2O 溶液 /CH3CN 95/5 ； 流动相 B ： CH3CN) 进行梯度洗脱， 梯度条件为在 1.3 分钟内从 95％ A 和 5％ B 变为 5％ A 和 95％ B， 保持 0.3 分钟。进样体积为 0.5μl。对于正电离模式， 锥电压为 30V， 对于负电离模式， 锥电压为 30V。
[1328] 熔点
[1329] 对于许多化合物， 用 DSC823e(Mettler-Toledo) 测定熔点 (m.p.)。用 30℃ / 分钟 温度梯度测量熔点。最高温度为 400℃。数值为峰值。
[1330] 分析测量结果列于表 6。
[1331] 表6： 保留时间 (Rt)， 以分钟计， [M+H]+ 峰 ( 质子化分子 )， LCMS 方法和 m.p.( 按℃ 计的熔点 )。(n.d. 表示未测定 )
[1332] NMR
[1341] 对于许多化合物， 在分别在 360、 400 和 600MHz 下运行的具有标准脉冲顺序的 Bruker DPX-360、 Bruker DPX-400 或 Bruker Avance 600 光谱仪上记录 1H NMR 波谱， 用氯 仿 -d 或 DMSO-d6 作为溶剂。按相对于四甲基硅烷 (TMS) 的百万分数 (ppm) 报道化学位移 (δ)， 四甲基硅烷用作内标。
[1340] 1 化合物 1 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.11(s， 3H)， 3.80(s， 3H)， 6.81(t， J＝ 7.1Hz， 1H)， 7.03-7.13(m， 2H)， 7.18(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.28(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.30(t， J ＝ 8.7Hz， 2H)， 8.02-8.11(m， 3H)， 8.27(s， 1H)， 8.39(s， 1H)， 8.52(s， 1H). 1
[1343] 化合物 2 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.11(s， 3H)， 2.65(s， 3H)， 3.80(s， 3H)， 3.83(s， 3H)， 6.88(t， J ＝ 7.1Hz， 1H)， 6.94(dt， J ＝ 5.9， 2.9Hz， 1H)， 7.05-7.11(m， 2H)， 7.17(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.27(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 7.37-7.43(m， 3H)， 7.90(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 8.26(s， 1H)， 8.53(s， 1H). 1
[1344] 化合物 3 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.46(s， 3H)， 3.92(s， 3H)， 6.82(t， J＝ 7.1Hz， 1H)， 7.06(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.09(dd， J ＝ 8.5， 2.0Hz， 1H)， 7.19(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)，
[1342] 7.24(s， 1H)， 7.30(t， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.56(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.04-8.09(m， 3H)， 8.39(s， 1H)， 8.48(s， 1H). 1
[1345] 化合物 4 ： H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 2.64(s， 3H)， 2.65(s， 3H)， 3.83(s， 3H)， 3.89(s， 3H)， 6.87(t， J ＝ 7.1Hz， 1H)， 6.94(dt， J ＝ 6.4， 2.8Hz， 1H)， 7.04-7.09(m， 2H)， 7.18(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 7.36-7.44(m， 3H)， 7.60(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.88(d， J ＝ 6.7Hz， 1H)， 7.97(s， 1H)， 8.45(s， 1H). 1
[1346] 化 合 物 5： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.22(s， 3H)， 2.60(s， 3H)， 2.65(s， 3H)， 3.77(s， 3H)， 3.83(s， 3H)， 6.87(t， J ＝ 7.1Hz， 1H)， 6.94(dt， J ＝ 5.9， 3.0Hz， 1H)， 7.03-7.10(m， 2H)， 7.16(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.20(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 7.37-7.43(m， 3H)， 7.88(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 8.46(s， 1H). 1
[1347] 化合物 6 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.14(s， 3H)， 2.64(s， 3H)， 3.77(s， 3H)， 3.78(s， 3H)， 3.83(s， 3H)， 6.85(t， J ＝ 7.1Hz， 1H)， 6.94(dt， J ＝ 6.0， 2.9Hz， 1H)， 7.00(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.00-7.04(m， 1H)， 7.12(d， J ＝ 2.1Hz， 1H)， 7.16(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 7.38-7.42(m， 3H)， 7.65(s， 1H)， 7.83(d， J ＝ 6.7Hz， 1H)， 8.25(s， 1H). 1
[1348] 化 合 物 7： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.04(s， 3H)2.38(s， 3H)3.80(s， 3H)6.81(t， J ＝ 7.32Hz， 1H)6.99-7.11(m， 2H)7.16(d， J ＝ 1.83Hz， 1H)7.24(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)7.30(t， J ＝ 8.78Hz， 2H)7.99-8.15(m， 3H)8.39(s， 1H)8.48(s， 1H). 1
[1349] 化合物 8 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.04(s， 3H)， 2.38(s， 3H)， 2.65(s， 3H)， 3.79(s， 3H)， 6.88(t， J ＝ 7.1Hz， 1H)， 7.04-7.11(m， 2H)， 7.16(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.24(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 7.36(t， J ＝ 7.4Hz， 1H)， 7.49(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.86(d， J ＝ 7.7Hz， 2H)， 7.89(d， J ＝ 6.7Hz， 1H)， 8.48(s， 1H).
[1350] 化合物 9 ： 1H NMR(360MHz， 氯仿 -d)δppm 3.76(s， 3H)， 3.81(s， 3H)， 3.85(s， 3H)， 6.24(d， J ＝ 1.9Hz， 1H)， 6.92(d， J ＝ 2.1Hz， 1H)， 6.94-7.01(m， 2H)， 7.14(s， 1H)， 7.17(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 7.22-7.32(m， 4H)， 7.52(d， J ＝ 1.9Hz， 1H)， 7.75(dd， J ＝ 8.5， 5.4Hz， 2H). 1
[1351] 化合物 10 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.35(s， 3H)， 3.86(s， 3H)， 7.21(dd， J ＝ 8.1， 1.4Hz， 1H)， 7.25(t， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.39(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.44(t， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.81(dd， J ＝ 8.8， 2.5Hz， 1H)， 7.94(dd， J ＝ 8.6， 5.6Hz， 2H)， 8.28(dd， J ＝ 7.5， 1.3Hz， 1H)， 8.32(s， 1H)， 8.47(d， J ＝ 2.5Hz， 1H)， 9.22(s， 1H). 1
[1352] 化 合 物 11 ： H NMR(360MHz， 氯 仿 -d)δpm 2.24(s， 3H)， 2.76-2.90(m， 2H)， 3.10-3.16(m， 2H)， 3.76(s， 3H)， 3.85(s， 3H)， 6.87-6.91(m， 2H)， 6.97(dd， J ＝ 8.3， 2.1Hz， 1H)， 6.96(s， 1H)， 7.20(t， J ＝ 7.7Hz， 1H)， 7.24(dd， J ＝ 7.9， 1.5Hz， 1H)， 7.85(s， 1H). 1
[1353] 化合物 12 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.10(s， 3H)， 3.75(s， 3H)， 3.86(s， 3H)， 6.95(dd， J ＝ 8.4， 2.0Hz， 1H)， 7.06(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.15-7.26(m， 4H)， 7.43(t， J ＝ 8.7Hz， 2H)， 7.92(dd， J ＝ 8.4， 5.4Hz， 2H)， 8.23(s， 1H)， 8.53(s， 1H). 1
[1354] 化合物 13 ： H NMR(360MHz， 氯仿 -d)δppm 3.84(s， 3H)， 3.89(s， 3H)， 3.94(s， 3H)， 6.89-6.93(m， 2H)， 6.97(dd， J ＝ 8.2， 2.1Hz， 1H)， 7.07(s， 1H)， 7.21-7.28(m， 4H)， 7.45(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 7.75(dd， J ＝ 8.6， 5.3Hz， 2H)， 7.79(s， 1H)， 7.83(s， 1H). 1
[1355] 化合物 14 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.46(s， 3H)， 3.86(s， 3H)， 3.92(s， 3H)， 7.18(d， J ＝ 5.8Hz， 1H)， 7.23(s， 1H)， 7.46(t， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.53(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)，7.93-7.99(m， 4H)， 8.03(d， J ＝ 5.8Hz， 1H)， 9.26(s， 1H). 1
[1356] 化合物 15 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 1.59(d， J ＝ 6.9Hz， 6H)， 2.47(s， 3H)， 4.58-4.69(m， 1H)， 7.20(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.35(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.38(d， J ＝ 7.9Hz， 1H)， 7.39(s， 1H)， 7.43(t， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.74(dd， J ＝ 8.6， 5.5Hz， 2H)， 7.83(dd， J ＝ 8.8， 2.5Hz， 1H)， 8.24(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 8.52(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 9.14(s， 1H). 1
[1357] 化合物 16 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.45(s， 3H)， 3.86(s， 3H)， 3.86(s， 3H)， 6.97(dd， J ＝ 8.5， 2.0Hz， 1H)， 7.07(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.14-7.25(m， 4H)， 7.43(t， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.49(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 7.92(dd， J ＝ 8.6， 5.5Hz， 2H)， 8.50(s， 1H). 1
[1358] 化 合 物 18 ： H NMR(360MHz，氯 仿 -d)δppm 1.66(d， J ＝ 6.95Hz， 6H)2.56(s， 3H)4.73(spt ，J ＝ 6.92 ， 6.77Hz ， 1H)7.13(s ， 1H)7.15-7.22(m ， 3H)7.22-7.28(m ， 2H)7.40(s， 1H)7.54(d， J ＝ 8.78Hz， 1H)7.62(dd， J ＝ 8.60， 5.31Hz， 2H)7.69(dd， J ＝ 8.60， 2.74Hz， 1H)8.61(d， J ＝ 2.56Hz， 1H). 1
[1359] 化 合 物 25 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 1.68(d， J ＝ 6.95Hz， 6H)2.47(s， 3H)3.90(s， 3H)4.71-4.82(m， 1H)6.93(dd， J ＝ 8.42， 1.83Hz， 1H)6.98(s， 1H)7.44-7.52(m， 2H)7.57(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)7.61(t， J ＝ 8.96Hz， 2H)7.67(t， 1H)7.95(dd， J ＝ 8.60， 5.31Hz， 2H)9.17(br.s.， 1H). 1
[1360] 化 合 物 38 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 3.93(s， 3H)6.82(t， J ＝ 7.32Hz， 1H)7.08(d ， J ＝ 7.68Hz ， 1H)7.11(dd ， J ＝ 8.42 ， 2.20Hz ， 1H)7.21(d ， J ＝ 2.20Hz ， 1H)7.30(t， J ＝ 8.78Hz， 2H)7.40(s， 1H)7.63(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)8.01-8.09(m， 3H)8.36(s， 1H)8.40(s， 1H)8.54(s， 1H). 1
[1361] 化 合 物 40 ： H NMR(360MHz，氯 仿 -d)δppm 2.49(s， 3H)2.53(s， 3H)3.88(s， 3H)6.72(dd， J ＝ 7.32， 6.95Hz， 1H)6.85(dd， J ＝ 8.42， 2.93Hz， 1H)6.94(d， J ＝ 6.95Hz， 1H)7.14(s， 1H)7.20(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)7.33-7.39(m， 3H)7.51(d， J ＝ 2.56Hz， 1H)7.60(m， 2H)7.69(s， 1H)7.71(dd， J ＝ 6.59， 0.73Hz， 1H). 1
[1362] 化 合 物 57 ： H NMR(600MHz， 氯 仿 -d)δppm 2.53(s， 3H)， 2.53(s， 3H)， 7.00-7.04(m， 2H)， 7.15(s， 1H)， 7.50(d， J ＝ 4.6Hz， 1H)， 7.60(d， J ＝ 4.6Hz， 1H)， 7.62(d， J ＝ 8.7Hz， 2H)， 7.62(s， 1H)， 7.77(dd， J ＝ 8.1， 6.0Hz， 1H)， 7.94(d， J ＝ 8.7Hz， 2H)， 8.20(s， 1H). 1
[1363] 化 合 物 60 ： H NMR(600MHz， 氯 仿 -d)δppm 2.52(s， 3H)， 2.53(s， 3H)， 6.99-7.05(m， 2H)， 7.16(s， 1H)， 7.59(s， 1H)， 7.64(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)， 7.74(d， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 7.76(s， 1H)， 7.93(d， J ＝ 8.6Hz， 2H)， 8.24(s， 1H). 1
[1364] 化 合 物 89 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 1.64(d， J ＝ 6.95Hz， 6H)2.52(s， 3H)4.72(spt， 1H)7.18(dd， J ＝ 11.89， 1.65Hz， 1H)7.52-7.64(m， 4H)7.73(d， J ＝ 8.78Hz， 1H)7.87-7.94(m， 3H)8.60(d， J ＝ 2.56Hz， 1H)9.74(br.s.， 1H). 1
[1365] 化 合 物 95 ： H NMR(360MHz，氯 仿 -d)δppm 2.52(s， 3H)3.80(s， 3H)3.89(s， 3H)3.94(s， 3H)6.39(d， J ＝ 1.83Hz， 1H)6.87-6.93(m， 2H)7.00(dd， J ＝ 8.42， 2.20Hz， 1H)7.10(s， 1H)7.19-7.28(m， 2H)7.29(s， 1H)7.66(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)7.72(dd， J ＝ 8.60， 5.31Hz， 2H). 1
[1366] 化 合 物 97 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.46(s， 3H)2.54(s， 3H)3.83(s，3H)3.86(s ， 3H)3.94(s ， 3H)7.02(s ， 1H)7.11-7.17(m ， 1H)7.22(s ， 1H)7.40-7.46(m ， 2H)7.46-7.54(m， 2H)7.77(dd， J ＝ 8.78， 1.83Hz， 1H)8.32(d， J ＝ 1.83Hz， 1H)9.24(s， 1H). 1
[1367] 化合物 99 ： H NMR(600MHz， 氯仿 -d)δppm 2.53(s， 3H)， 2.66(s， 3H)， 4.03(s， 3H)， 7.12(br.s.， 1H)， 7.15(s， 1H)， 7.19(s， 1H)， 7.36(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)， 7.36(s， 1H)， 7.62(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)， 8.00(s， 1H). 1
[1368] 化 合 物 101 ： H NMR(360MHz，氯 仿 -d)δppm 2.57(s， 3H)3.91(s， 3H)7.22(s， 1H)7.24-7.33(m， 2H)7.36(s， 1H)7.45(s， 1H)7.61(d， J ＝ 8.78Hz， 1H)7.71(dd， J ＝ 8.78， 2.93Hz， 1H)7.77(dd， J ＝ 8.78， 5.12Hz， 2H)8.64(d， J ＝ 2.56Hz， 1H). 1
[1369] 化 合 物 106 ： H NMR(360MHz，氯 仿 -d)δppm 2.57(s， 3H)3.81(s， 3H)6.65(dd， J ＝ 8.78， 1.83Hz， 1H)6.90(dd， J ＝ 12.08， 2.20Hz， 1H)7.19(s， 1H)7.25(t， J ＝ 8.23Hz， 2H)7.44(s， 1H)7.58(d， J ＝ 8.78Hz， 1H)7.71-7.78(m， 3H)8.60(d， J ＝ 2.56Hz， 1H). 1
[1370] 化 合 物 127 ： H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 2.49(s， 3H)2.54(s， 3H)3.81(s， 3H)3.84(s， 3H)7.00(s， 1H)7.31(d， J ＝ 8.48Hz， 1H)7.34(dd， J ＝ 5.05， 1.41Hz， 1H)7.40(s， 1H)7.43(t， J ＝ 8.88Hz， 2H)7.79(dd， J ＝ 8.48， 2.02Hz， 1H)7.94(dd， J ＝ 8.88， 5.65Hz， 2H)8.29(d， J ＝ 2.02Hz， 1H)8.39(d， J ＝ 5.25Hz， 1H)9.19(s， 1H). 1
[1371] 化 合 物 129 ： H NMR(360MHz，氯 仿 -d)δppm 2.60(s， 3H)3.85(s， 3H)4.10(s， 3H)6.65(d， J ＝ 8.05Hz， 1H)7.02(d， J ＝ 8.05Hz， 1H)7.22-7.30(m， 2H)7.30-7.37(m， 2H)7.39(s， 1H)7.62(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)7.76(dd， J ＝ 8.60， 5.31Hz， 2H)7.91(s， 1H)8.25(d， J ＝ 7.68Hz， 1H)8.48(d， J ＝ 5.12Hz， 1H). 1
[1372] 化 合 物 139 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.48(s， 3H)3.76(s， 3H)3.86(s， 3H)6.98(dd， J ＝ 8.42， 2.20Hz， 1H)7.08(d， J ＝ 2.20Hz， 1H)7.12-7.34(m， 5H)7.37(s， 1H)7.44(t ， J ＝ 8.78Hz ， 2H)7.93(dd ， J ＝ 8.78 ， 5.49Hz ， 2H)8.38(d ， J ＝ 5.12Hz ， 1H)8.50(s， 1H). 1
[1373] 化 合 物 157 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 0.96(d， J ＝ 6.59Hz， 6H)2.12(s， 3H)2.13-2.22(m， 1H)2.73(d， J ＝ 6.95Hz， 2H)3.81(s， 3H)7.05(dd， J ＝ 8.42， 1.83Hz， 1H)7.09(d， J ＝ 1.83Hz， 1H)7.38(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)7.55(d， J ＝ 10.98Hz， 1H)8.06(s， 1H)8.30(s， 1H)8.56(br.s.， 1H)9.73(br.s.， 1H). 1
[1374] 化 合 物 167 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.30(s， 3H)2.49(s， 3H)6.91(t， J ＝ 6.95Hz， 1H)7.03(d， J ＝ 7.32Hz， 1H)7.46(s， 1H)7.54(d， J ＝ 7.32Hz， 1H)7.60(d， J＝ 8.78Hz， 1H)7.68(t， J ＝ 7.68Hz， 1H)7.76(t， J ＝ 7.68Hz， 1H)7.81(dd， J ＝ 8.78， 2.56Hz， 1H)7.85-7.93(m， 2H)8.65(d， J ＝ 2.56Hz， 1H)8.77(s， 1H). 1
[1375] 化 合 物 173 ： H NMR(360MHz，氯 仿 -d)δppm 2.44(s， 3H)2.57(s， 3H)6.82(t， J ＝ 7.14Hz， 1H)6.95(d， J ＝ 6.95Hz， 1H)7.31-7.42(m， 3H)7.44(s， 1H)7.48-7.62(m， 4H)7.69(dd， J ＝ 8.42， 2.56Hz， 1H)8.64(d， J ＝ 2.56Hz， 1H). 1
[1376] 化 合 物 186 ： H NMR(360MHz，氯 仿 -d)δppm 2.52(s， 3H)3.94(s， 3H)3.95(s， 3H)6.90(s， 1H)6.92(d， J ＝ 2.20Hz， 1H)6.98(dd， J ＝ 8.42， 2.20Hz， 1H)7.27-7.33(m， 3H)7.68(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)7.79(dd， J ＝ 8.23， 5.31Hz， 2H)8.45(s， 1H)8.61(s， 1H). 1
[1377] 化合物 187 ： H NMR(400MHz， DMSO-d6)δppm 2.49(s， 3H)， 3.88(s， 3H)， 7.10(d， J ＝ 5.6Hz， 1H)， 7.26(d， J ＝ 3.5Hz， 1H)， 7.33-7.38(m， 2H)， 7.44(t， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.66(t，J ＝ 8.5Hz， 1H)， 7.98(dd， J ＝ 8.7， 5.5Hz， 2H)， 8.15(d， J ＝ 5.5Hz， 1H)， 9.48(s， 1H). 1
[1378] 化 合 物 190 ： H NMR(360MHz， 氯 仿 -d)δppm 1.35(d， J ＝ 6.95Hz， 6H)2.53(s， 3H)3.10(spt， J ＝ 6.95Hz， 1H)3.93(s， 3H)3.96(s， 3H)6.96(d， J ＝ 1.83Hz， 1H)7.00(dd， J ＝ 8.05， 1.83Hz， 1H)7.04(s， 1H)7.25(t， J ＝ 8.60Hz， 2H)7.32(s， 1H)7.35(s， 1H)7.73(d， J ＝ 8.05Hz， 1H)7.78(dd， J ＝ 8.60， 5.31Hz， 2H). 1
[1379] 化 合 物 191 ： H NMR(360MHz， 氯 仿 -d)δppm 1.34(d， J ＝ 6.95Hz， 6H)2.58(s， 3H)3.09(spt， J ＝ 6.95Hz， 1H)3.93(s， 3H)6.93(s， 1H)7.25(t， J ＝ 8.42Hz， 2H)7.31(s， 1H)7.48(s， 1H)7.63(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)7.70(dd， J ＝ 8.42， 2.56Hz， 1H)7.78(dd， J ＝ 8.42， 5.85Hz， 2H)8.70(d， J ＝ 2.56Hz， 1H). 1
[1380] 化 合 物 194 ： H NMR(360MHz，氯 仿 -d)δppm 2.44(s， 3H)2.60(s， 3H)4.11(s， 3H)6.61(d， J ＝ 8.05Hz， 1H)6.90(t， J ＝ 7.14Hz， 1H)7.32-7.43(m， 4H)7.50-7.61(m， 3H)7.63(d， J ＝ 8.05Hz， 1H)8.07(s， 1H)8.23(d， J ＝ 6.95Hz， 1H)8.49(d， J ＝ 5.49Hz， 1H). 1
[1381] 化 合 物 195 ： H NMR(360MHz， DMSO-d6)δppm 2.47(s， 3H)， 2.49(s， 3H)， 3.95(s， 3H)， 6.79(s， 1H)， 7.15(dd， J ＝ 8.3， 2.0Hz， 1H)， 7.24(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.33(s， 1H)， 7.71(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.97(s， 1H)， 10.02(s， 1H).
[1382] 药理学
[1383] A) 筛选具有 γ- 分泌酶调节活性的本发明化合物
[1384] A1) 方法 1
[1385] 用携带 APP 695- 野生型的 SKNBE2 细胞进行筛选， 使细胞生长在由 Gibco( 目录 号 31330-38) 提供的 Dulbecco 氏改良的 Eagle 培养基 / 营养混合物 F-12(DMEM/NUT-mix F-12)(HAM)， 混合物含补充 1％非必需氨基酸的 5％血清 /Fe。使细胞生长至近连生。
[1386] 用 Citron 等在 (1997)Nature Medicine 3 ： 67 中所述测定进行筛选。简而言之， 5 在加入化合物前一天， 按约 10 细胞 /ml， 将细胞接种在 96 孔板中。将化合物加入处于补充 1％谷氨酰胺 (Invitrogen， 25030-024) 的 Ultraculture(Lonza， BE12-725F) 的细胞中， 保 持 18 小时。通过两次夹心 ELISA 测定培养基中的 Aβ42 和 Aβtotal。按厂商的方案， 通过 WST-1 细胞增殖试剂 (Roche， 1644807) 测定化合物毒性。
[1387] 为定量细胞上清液中 A β42 的量， 使用市售酶联 - 免疫吸附 - 测定 (ELISA) 试剂 盒 (Innotest β- 淀粉样蛋白 (1-42)， Innogenetics N.V.， Ghent， Belgium)。 基本上按厂商 的方案进行 A β42ELISA。 简而言之， 在聚丙烯 Eppendorf 中制备标准液 ( 合成的 A β1-42 稀释液 )， 终浓度 8000 降至 3.9pg/ml(1/2 稀释步骤 )。将样品、 标准液和空白 (100μl) 加 入试剂盒提供的抗 -A β42- 涂覆的板 ( 捕获抗体选择性识别抗原的 C- 端 )。将板在 25℃ 下温育 3h， 以使抗体 - 淀粉样蛋白复合物形成。 完成温育和随后的洗涤步骤后， 加入选择性 抗 -A β- 抗体缀合物 ( 生物素化 3D6)， 温育至少 1 小时， 以使抗体 - 淀粉样蛋白 - 抗体 - 复 合物形成。温育和适当洗涤步骤后， 加入链霉胍 (Streptavidine)- 过氧化酶 - 缀合物， 30 分钟后， 加入 3， 3′， 5， 5′ - 四甲基联苯胺 (TMB)/ 过氧化物混合物， 导致底物转化为有色产 物。通过加入硫酸 (0.9N) 将该反应终止， 通过光度测定法， 用具有 450nm 滤器的 ELISA- 读 板器测量颜色强度。
[1388] 为定量细胞上清液中 Aβtotal 的量， 将样品和标准液加入 6E10 涂覆的板。将板 在 4℃下温育过夜， 以使抗体 - 淀粉样蛋白复合物形成。该温育和随后的洗涤步骤后， 加入选择性抗 -Aβ- 抗体缀合物 ( 生物素化 4G8)， 温育至少 1 小时， 以使抗体 - 淀粉样蛋白 - 抗 体 - 复合物形成。温育和适当洗涤步骤后， 加入链霉胍 (Streptavidine)- 过氧化酶 - 缀合 物， 30 分钟后， 按厂商说明 (Pierce Corp.， Rockford， Il)， 加入 Quanta Blu 荧光发光过氧 化酶底物。
[1389] 为得到表 7a 中报道的值， 通过计算机化曲线拟合分析 S 形剂量反应曲线， 用抑制 百分率对化合物浓度作图。用 Xlfit 中的 4 参数方程 ( 模型 205) 测定 IC50。将曲线的顶 部和底部分别固定为 100 和 0， 将斜坡斜率固定为 1。IC50 代表抑制生物作用 50％所需要的 化合物浓度 ( 在本文中， 其为 Aβ 肽水平降低 50％的浓度 )。
[1390] IC50 值列于表 7a ：
[1391] 为得到表 7b 中报道的值， 按在试验化合物不存在时测量的淀粉样蛋白 β42 的最 大量的百分比， 计算数据。用非线性回归分析分析 S 形剂量反应曲线， 用对照百分比对化合 物的 log 浓度作图。用 4 参数方程测定 IC50。表 7b 中报道的值为平均的 IC50 值。
[1394] IC50 值列于表 7b(n.d. 表示未测定 ) ：
[1393] A2) 方法 2
[1403] 用携带 APP 695- 野生型的 SKNBE2 细胞进行筛选， 使细胞生长在由 Invitrogen( 目 录号 10371-029) 提供的 Dulbecco 氏改良的 Eagle 培养基 / 营养混合物 F-12(DMEM/NUT- 混 合物 -F-12)(HAM)， 混合物含补充 1％非必需氨基酸、 1- 谷氨酰胺 2mM， Hepes 15mM， 青霉素 50U/ml( 单位 /ml) 和链霉素 50μg/ml 的 5％血清 /Fe。让细胞生长至近连生。
[1404] 用 改 良 的 Citron 等 (1997)Nature Medicine 3 ： 67 中 所 述 测 定 进 行 筛 4 选。 简 而 言 之， 按 10 细 胞 / 孔， 将 细 胞 接 种 在 384 孔 板， 板中含补充 1％谷氨酰胺 (Invitrogen， 25030-024)， 1％非必需氨基酸 (NEAA)， 青霉素 50U/ml 和链霉素 50μg/ml 的 Ultraculture(Lonza， BE12-725F) 并存在不同试验浓度的试验化合物。将细胞 / 化合物混 通过两次夹心免疫测定分析培养基中的 Aβ42 和 合物在 37℃， 5％ CO2 下温育过夜。次日， Aβtotal。
[1405] 用 Aphalisa 技术 (Perkin Elmer) 定量细胞上清液中 Aβtotal 和 Aβ42 的浓度。 Alphalisa 为夹心测定， 使用与链霉抗生物素涂布的供体珠连接的生物素化抗体， 且抗体与 受体珠缀合。在抗原的存在下， 使珠相互靠近。供体珠的激发光激起单态氧分子释放， 单态 氧分子在受体珠中触发能量转移级联， 导致光发射。为定量细胞上清液中 Aβ42 的量， 使对 Aβ42 的 C 端 (JRF/cAβ42/26) 具有特异性的单克隆抗体与受体珠偶联， 用对 Aβ 的 N 端 (JRF/AβN/25) 具有特异性的生物素化抗体与供体珠反应。为定量细胞上清液中 Aβtotal 的量， 使对 Aβ 的 N 端 (JRF/AβN/25) 具有特异性的单克隆抗体与受体珠偶联， 用对 Aβ 的 中间区域 ( 生物素化 4G8) 具有特异性的生物素化抗体与供体珠反应。
[1406] 为得到表 7c 中报道的值， 按试验化合物不存在时测量的淀粉样蛋白 β42 的最大 量的百分比， 计算数据。用非线性回归分析分析 S 形剂量反应曲线， 用对照百分比对化合物 的 log 浓度作图。用 4 参数方程测定 IC50。
[1407] IC50 值列于表 7c ：
[1402] B) 体内效力证明
[1413] 可用本发明降 Aβ42 药物在哺乳动物例如人中治疗 AD， 或在动物模型例如但不限 于小鼠、 大鼠或豚鼠中证明效力。 哺乳动物可为经诊断未患 AD， 或可不具有 AD 遗传素质， 但 可转基因以使其按类似于在患 AD 的人中看到的方式过度产生并最终沉积 Aβ。
[1414] 可按任何标准形式， 用任何标准方法给予降 Aβ42 药物。例如， 但不限于， 可按可 口服或注射的液体、 片剂或胶囊形式给予降 Aβ42 药物。可按足以显著降低血、 血浆、 血清、 脑脊液 (CSF) 或脑中 Aβ42 水平的任何剂量给予降 Aβ42 药物。
[1415] 为测定短暂给予降 Aβ42 药物是否在体内降低 Aβ42 水平， 可使用非转基因啮齿 类动物， 例如小鼠或大鼠。或者， 可使用含 “瑞典” 变种的表达 APP695 的 2-3 月龄 Tg2576 小鼠或 Fred Van Leuven 博士 (K.U.Leuven， Belgium) 及其同事开发的转基因小鼠模型， 该 小鼠神经元特异性表达临床突变的人淀粉样前体蛋白 [V717I](Moechars 等 1999J.Biol. Chem.274， 6483)。在小转基因小鼠的脑中 Aβ 水平高但 Aβ 沉积不能测定。在约 6-8 月 龄， 转基因小鼠开始显示在脑中自发、 进行性蓄积 β- 淀粉样蛋白 (Aβ)， 最终导致在脑下 脚、 海马和皮层中形成淀粉样蛋白斑。检查用降 Aβ42 药物处理的动物， 并与未处理或用溶 媒处理的那些动物相比， 通过标准技术例如用 ELISA 定量可溶性 Aβ42 和总 Aβ 的脑水平。 处理期可为数小时至数天， 一旦确定起效的时程， 可根据降 Aβ42 的结果调整处理期。
[1416] 显示测量体内降 Aβ42 的典型的方案， 但它仅为多种可用于优化可测 Aβ 水平的 变体中的一种。例如， 在 20％ Captisol (β- 环糊精的磺基丁基醚 ) 水溶液或 20％羟丙 基 β 环糊精中配制降 Aβ42 化合物。按单个口服剂量或通过任何可接受的给药途径给予 过夜禁食的动物降 Aβ42 药物。4 小时后， 将动物处死， 分析 Aβ42 水平。
[1417] 通过断头采血， 将采集的血液放入 EDTA 处理的收集试管。在 4℃下， 将血在 1900g 下离心 10 分钟， 回收血浆， 速冻， 用于后续分析。将脑与颅和后脑分离。将小脑除去， 将左 和右半球分离。 将左半球在 -18℃下贮存， 用于定量分析试验化合物水平。 将右半球用磷酸 盐缓冲盐水 (PBS) 冲洗， 在干冰上立即冷冻， 在 -80℃贮存至均化， 用于生物化学测定。
[1418] 按每克组织加入 10 倍体积 0.4 ％ DEA， 例如在 0.158g 脑中， 加入 1.58ml 0.4 ％ DEA， 将小鼠脑再悬浮于含蛋白酶抑制剂 (Roche-11873580001 或 04693159001) 的 10 体积 的 0.4％ DEA( 二乙胺 )/50mM NaCl pH 10( 对于非转基因动物 ) 或 0.1％ 3-[(3- 氯酰胺丙 基 )- 二甲基 - 氨基 (ammonio)]-1- 丙磺酸酯 (CHAPS) 的三羟甲基氨基甲烷缓冲盐水 (TBS) ( 对于转基因动物 )。在 20％功率输出 ( 脉冲模式 ) 下， 将所有样品在冰上超声处理 30 秒。 将匀浆在 221.300x g 下离心 50 分钟。 然后将得到的高速上清液转移至新试管， 任选在下一 步前进一步纯化。将一部分上清液用 10％ 0.5M Tris-HCl 中和， 用该溶液定量 Aβtotal。
[1419] 将得到的上清液用 Water Oasis HLB 反相柱 (Waters Corp.， Milford， MA) 纯化， 将脑溶胞物中的非特异性免疫活性物质除去， 然后进行 Aβ 检测。用真空支管， 使所有溶液 按约 1ml/ 分钟速度通过柱， 所以在整个过程中相应调节真空压力。将柱用 1ml 100％ MeOH
[1412] 预处理， 然后用 1ml H2O 平衡。将未中和的脑溶胞物加载在柱上。然后将加载样品洗涤两 次， 其中第一次洗涤用 1ml 5％ MeOH 进行， 第二次洗涤用 1ml 30％ MeOH 进行。最后， 用含 2％ NH4OH 的 90％ MeOH 溶液将 Aβ 从柱中洗脱流入 100x 30mm 玻璃试管。然后将洗脱液 转移到 1.5ml 试管， 在 70 ℃下， 在高温高速蒸发仪 (speed-vac concentrator) 中浓缩约 1.5-2h。然后将浓缩的 Aβ 再悬浮于 UltraCULTURE 通用无血清培养基 (Cambrex Corp.， Walkersville， MD)， 按厂商建议加入蛋白酶抑制剂。
[1420] 为定量脑匀浆的可溶部分的 Aβ42 的量， 使用市售酶联免疫吸附测定 (ELISA) 试 剂盒 ( 例如 Innotest β- 淀粉样蛋白 (1-42)， Innogenetics N.V.， Ghent， Belgium)。仅 用试剂盒提供的板进行 Aβ42ELISA。简而言之， 在含 Ultraculture 的 1.5ml Eppendorf 试管中制备标准液 ( 合成的 Aβ1-42 稀释液 )， 终浓度为 25000-1.5pg/ml。将样品、 标准 液和空白 (60μl) 加入抗 -Aβ42- 涂覆的板 ( 捕获抗体选择性识别抗原的 C- 端 )。将板 在 4 ℃下温育过夜， 以使抗体 - 淀粉样蛋白复合物形成。温育和随后的洗涤步骤后， 加入 选择性抗 -Aβ- 抗体缀合物 ( 生物素化检测抗体， 例如生物素化 4G8(Covance Research Products， Dedham， MA)， 温育至少 1 小时， 以使抗体 - 淀粉样蛋白 - 抗体 - 复合物形成。 温育 和适当洗涤步骤后， 加入链霉胍 - 过氧化酶 - 缀合物， 50 分钟后， 按厂商的说明， 加入 Quanta Rockford， Il)。每 5 分钟进行一次动力学读 Blu 荧光发光过氧化物底物 (Pierce Corp.， 数， 持续 30 分钟 ( 激发波长 320/ 发射波长 420)。为定量脑匀浆的可溶部分中 Aβtotal 的 量， 将样品和标准液加入 JRF/rAβ/2 涂覆的板。 将板在 4℃下温育过夜， 以使抗体 - 淀粉样 蛋白复合物形成。然后进行 ELISA， 用于 Aβ42 检测。
[1421] 在该模型中， 与未处理的动物相比， Aβ42 降低至少 20％将是有利的。
[1422] 结果列于表 8 ：
[1423] Co.No. 195 2 104 186 97 157 95 10 11 Aβ42( 对照％ )_ 均值 89 95 110 52 71 77 47 106 91 Aβtotal( 对照％ )_ 均值 99 104 97 82 102 100 88 109 99138102325765 A CN 102325778 12 Co.No. 13 14 16 17 18 25 30 31 40 41 101 170 105 181 141 63 59 58 54
[1424] 56说明书101 Aβtotal( 对照％ )_ 均值 105 91 95 109 94 96 92 102 102 87 92 99 96 105 89 90 95 105 104132/134 页Aβ42( 对照％ )_ 均值 87 78 58 106 54 76 96 91 77 93 77 99 104 104 87 56 97 89 101C) 对 γ- 分泌酶 - 复合物的 Notch- 加工活性的影响
[1426] Notch 无细胞测定
[1427] 通过 γ 分泌酶将 Notch 跨膜域解离， 使 Notch 细胞内 C 端域 (NICD) 释放。Notch 为在发育过程中起关键作用的信号蛋白， 因此， 对 γ- 分泌酶复合物的 Notch- 加工活性不
[1425] 显示影响的化合物是优选的。
[1428] 为监测化合物对 NICD 生产的影响， 制备重组 Notch 底物 (N99)。在大肠埃希氏 菌 (E.coli) 中 表 达 由 小 鼠 Notch 片 段 (V1711-E1809)、 N- 端 蛋 氨 酸 和 C- 端 FLAG 序 列 (DYDDDDK) 组成的 Notch 底物， 并在含抗 -FLAG M2 亲和力基质的柱上纯化。
[1429] 典型的 Notch 无细胞测定由 0.3-0.5μM Notch 底物、 γ- 分泌酶富集制剂和 1μM 试验化合物 ( 本发明的化合物 16、 18 和 106) 组成。对照包含 γ- 分泌酶抑制剂 (GSI)， 例如 (2S)-N-[2-(3， 5- 二氟苯基 ) 乙酰基 ]-L- 丙氨酰 -2- 苯基 - 甘氨酸 1， 1- 二甲基乙 酯 (DAPT) 或 (2S)-2- 羟 基 -3- 甲 基 -N-[(1S)-1- 甲 基 -2- 氧 代 -2-[[(1S)-2， 3， 4， 5- 四 氢 -3- 甲基 -2- 氧代 -1H-3- 苯并氮杂 -1- 基 ] 氨基 ] 乙基 ]- 丁酰胺 (Semagacestat) 和 DMSO， DMSO 的终浓度为 1％。 重组 Notch 底物用 17μM DTT(1， 4- 二硫苏糖醇 ) 和 0.02％ SDS( 十二烷基硫酸钠 ) 预处理， 在 65℃下加热 10 分钟。 将底物、 γ- 分泌酶和化合物 /DMSO 的混合物在 37℃下温育 6-22 小时 (h)。6 小时温育足以得到最大量的 NICD， 解离的产物可 再保持 16h 稳定。处理反应产物， 以进行 SDS PAGE( 十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电 泳 ) 和蛋白质印迹。依次用抗 Flag M2 抗体、 LI-COR 红外线第二抗体探测印迹， 用 Odyssey 红外成像系统 (LI-COR Biosciences) 分析。
[1430] 在无细胞 Notch 测定中， 试验化合物 ( 本发明的化合物 16、 18 和 106) 均不能抑制 由 γ- 分泌酶引起的 C99 解离， 而 NICD 的生产被对照 GSI(DAPT 或 Semagacestat) 阻断。 因 此证明， 本发明的化合物 16、 18 和 106 对 γ- 分泌酶 - 复合物的 Notch- 加工活性 (NICD 的 生产 ) 没有显示影响。
[1431] Notch 基于细胞的测定
[1432] Notch 基于细胞的测定基于在共培养系统中 Notch 与其配体相互作用和利用 Dual-Glo 荧光素酶测定系统 (Promega) 监测 NICD 生产。创建两种稳定的细胞系 N2-CHO 和 DL-CHO， 以分别表达全长小鼠 Notch2 和 δ。还用两种质粒 pTP1-Luc 和 pCMV-Rluc 转染表 达小鼠 Notch 的细胞， 以表达萤火虫和 Renilla 荧光素酶。在响应 NICD 激活的 TP1 启动子 的控制下， 表达萤火虫荧光素酶。驱动 Renilla 荧光素酶表达的 CMV 启动子不响应 NICD 激 活， 因此用于转染效率和化合物毒性的对照。
[1433] 在转染前一天， 按 1x105/ 孔， 将 N2-CHO 细胞接种在 24 孔板中。次日， 用 3μg/ 孔 pTP1-Luc( 表达萤火虫荧光素酶 ) 和 0.3ng/ 孔 pCMV-RLuc( 表达 Renilla 荧光素酶 ) 将细 胞双重转染。6h 温育后， 将转染的 N2-CHO 细胞洗涤， 加入 DL-CHO 细胞 (2x 105 细胞 / 孔 )。
[1434] 将化合物与 5 点曲线中的 DL-CHO 细胞悬浮液预混合。通常， 按一式两份， 在 DMSO 中， 按系列 1 ∶ 10 稀释倍数处理化合物 (3μM-0.3nM)。在给定的培养物中 DMSO 的终浓度 为 1％。对照包括未转染细胞和仅用 GSI 或 DMSO 处理的转染细胞。16h 共培养和化合物处 理后， 进行荧光素酶测定。
[1435] 按厂商说明， 进行荧光素酶测定。简而言之， 将细胞用 PBS( 磷酸盐缓冲盐水 ) 洗 涤， 用 Passive 裂解缓冲液 (Promega) 裂解， 在室温下温育 20 分钟。将溶胞物与 Dual-Glo 荧光素酶试剂混合， 通过阅读 EnVision 2101 Multilabel 读板器中的发光信号， 测量萤火 虫荧光素酶的活性。然后将 Dual-Glo Stop & Glo 试剂加入各孔， 测量 Renilla 荧光素酶 信号。
[1436] Notch 基于细胞的测定结果与无细胞 NICD 测定的那些结果一致。 根据荧光素酶测定读数， 由 Notch 基于细胞的测定得到的 DAPT 和 Semagacestat 的平均 IC50 值分别为 45nM 和 40nM， 而本发明的化合物 18 却发现无抑制作用。
[1437] D. 组合物实施例
[1438] 贯穿在这些实施例中使用的 “活性成分” (a.i.) 涉及式 (I) 化合物， 包括其任何立 体化学异构体形式、 其药学上可接受的盐或溶剂合物 ； 尤其是任一示例性的化合物。
[1439] 本发明制剂处方的典型实施例如下 ：
[1440] 1. 片剂
[1441] 2. 混悬液
[1443] 制备用于经口给药的水混悬液， 使每毫升含 1-5mg 活性成分、 50mg 羧甲基纤维素 钠、 1mg 苯甲酸钠、 500mg 山梨醇， 加水至 1ml。
[1444] 3. 注射剂
[1445] 通过将 1.5％ ( 重量 / 体积 ) 活性成分在 0.9％ NaCl 溶液或在 10％ ( 体积 ) 丙二 醇的水溶液中搅拌， 制备肠胃外组合物。
[1446] 4. 软膏剂
[1442] 在该实施例中， 活性成分可用相同量的本发明任何化合物， 尤其是相同量的任何 示例性的化合物代替。
[1449] 合理的变化并不视为背离本发明范围。 因此， 很显然， 本领域技术人员可按多种方 式对所述发明进行修改。
[1448] 141