一种有机牛初乳粉及其制备工艺.pdf

本发明公开了一种有机牛初乳粉及其制备工艺。本发明有机牛初乳粉摒弃了常规牛初乳粉生产工艺中低温冷冻干燥和高温喷粉环节，在牛初乳粉制备环节中采用超滤浓缩脱水和γ-射线辐照灭菌。本发明生产工艺既达到脱水浓缩的目的又能确保免疫球蛋白的活性不会被降低，同时采用γ-射线灭菌即保证了较完整的营养成分又保证了灭菌的彻底性。经临床实验表明，本发明有机牛初乳粉与常规高温喷粉方法制备的牛初乳粉比较，IgG含量较高，蛋白质、脂肪、水分、酸度等理化指标以及各项微生物指标均较后者优良。

权利要求书一种有机牛初乳粉，其特征在于采用如下方法制备：在牛初乳粉制备环节中采用超滤浓缩脱水和γ‑射线辐照灭菌。
如权利要求1所述的一种有机牛初乳粉，其特征在于其制备方法中超滤浓缩脱水是指：超滤机滤膜孔径为0.1‑0.3μm，超滤标准为每小时浓缩掉分子量3万道尔顿以下液体8‑12kg；γ‑射线辐照灭菌是指：辐射剂量为6‑8kGy。
如权利要求1或2所述的一种有机牛初乳粉，其特征在于其制备方法中超滤浓缩脱水是指：超滤机采用德国赛多利斯切向流超滤机，滤膜孔径为0.2μm，超滤浓缩标准为每小时浓缩掉分子量3万道尔顿以下液体10kg。
如权利要求1或2所述的一种有机牛初乳粉，其特征在于由如下方法依次制备：原料备取；高速离心脱脂去杂；超滤浓缩脱水；干燥制粉；超微粉碎；γ‑射线辐照灭菌而得。
如权利要求4所述的一种有机牛初乳粉，其特征在于在超滤浓缩脱水前由如下方法制备：选取健康奶牛产仔之日起3日内分泌的健康牛初乳，并将收集到的牛初乳即刻储藏于低温条件下备用；将收集到的牛初乳原料于高速低温离心机中进行离心脱脂去杂；
其中，牛初乳pH值6.2～6.5之间，相对密度为1.030~1.060之间，固形物含量12%以上；低温条件是指温度为0‑4℃；离心参数为6000‑7000r/min，离心时间15‑20min。
如权利要求4或5所述的一种有机牛初乳粉，其特征在于在超滤浓缩脱水后γ‑射线辐照灭菌前由如下方法制备：将超滤好的浓缩初乳置于专用干燥托盘，将托盘放入鼓风干燥箱进行风干；将干燥好的晶片用超微粉碎机进行超微粉碎；其中，干燥箱温度设置为50‑55℃，时间36‑48h；超微粉碎后的初乳粉颗粒大小在80目以上。
一种有机牛初乳粉的制备方法，其特征在于在牛初乳粉制备环节中采用超滤浓缩脱水和γ‑射线辐照灭菌；其中，超滤浓缩脱水是指：超滤机滤膜孔径为0.1‑0.3μm，超滤标准为每小时浓缩掉分子量3万道尔顿以下液体8‑12kg；γ‑射线辐照灭菌是指：辐射剂量为6‑8kGy。
如权利要求7所述的一种有机牛初乳粉的制备方法，其特征在于由如下方法依次制备：原料备取；高速离心脱脂去杂；超滤浓缩脱水；干燥制粉；超微粉碎；γ‑射线辐照灭菌而得；
其中，在超滤浓缩脱水前由如下方法制备：选取健康奶牛产仔之日起3日内分泌的健康牛初乳，并将收集到的牛初乳即刻储藏于低温条件下备用；将收集到的牛初乳原料于高速低温离心机中进行离心脱脂去杂；牛初乳pH值6.2～6.5之间，相对密度为1.030~1.060之间，固形物含量12%以上；低温条件是指温度为0‑4℃；离心参数为6000‑7000r/min，离心时间15‑20min；
在超滤浓缩脱水后γ‑射线辐照灭菌前由如下方法制备：将超滤好的浓缩初乳置于专用干燥托盘，将托盘放入鼓风干燥箱进行风干；将干燥好的晶片用超微粉碎机进行超微粉碎；干燥箱温度设置为50‑55℃，时间36‑48h；超微粉碎后的初乳粉颗粒大小在80目以上。
如权利要求1、2或5所述的一种有机牛初乳粉，其特征在于按照常规方法，制成临床接受的合剂、浓缩丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、丸剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。
如权利要求1、2或5所述的一种有机牛初乳粉在制备牛初乳保健品中的应用。
如权利要求1、2或5所述的一种有机牛初乳粉，其特征在于其胶囊剂的制备方法为：用胶囊灌装机灌装初乳粉，胶囊标准为0.5g/粒±10mg；灌装后的胶囊经抛光机抛光后，经由平板式自动泡罩包装机制成胶囊板，检查筛选无瑕疵后装盒制成成品。

说明书一种有机牛初乳粉及其制备工艺
技术领域
本发明属于保健品的制备技术领域，特别涉及一种有机牛初乳粉及其制备工艺。
背景技术
常规牛初乳粉生产工艺采用低温冷冻干燥或高温喷粉环节，灭菌温度过高或时间过长经常容易导致免疫球蛋白失活现象，使得最终生产的牛初乳粉中免疫球蛋白含量偏低，营养价值不高。
发明内容
本发明目的在于提供一种有机牛初乳粉；本发明的另一个目的在于提供该种有机牛初乳粉的制备工艺。
本发明目的是通过如下技术方案实现的：
一种有机牛初乳粉，由如下方法制备：在牛初乳粉制备环节中采用超滤浓缩脱水和γ‑射线辐照灭菌。
一种有机牛初乳粉，其制备方法中超滤浓缩脱水是指：超滤机滤膜孔径为0.1‑0.3μm，超滤标准为每小时浓缩掉分子量3万道尔顿以下液体8‑12kg。
一种有机牛初乳粉，其制备方法中超滤浓缩脱水是指：超滤机采用德国赛多利斯切向流超滤机，滤膜孔径为0.2μm，超滤浓缩标准为每小时浓缩掉分子量3万道尔顿以下液体10kg。
一种有机牛初乳粉，其制备方法中γ‑射线辐照灭菌是指：辐射剂量为6‑8kGy。
一种有机牛初乳粉，优选由如下方法依次制备：原料备取；高速离心脱脂去杂；超滤浓缩脱水；干燥制粉；超微粉碎；γ‑射线辐照灭菌而得。
一种有机牛初乳粉，优选在超滤浓缩脱水前由如下方法制备：选取健康奶牛产仔之日起3日内分泌的健康牛初乳，并将收集到的牛初乳即刻储藏于低温条件下备用；将收集到的牛初乳原料于高速低温离心机中进行离心脱脂去杂。
一种有机牛初乳粉，其制备方法中所述牛初乳，pH值6.2～6.5之间，相对密度为1.030~1.060之间，固形物含量12%以上。
一种有机牛初乳粉，其制备方法中所述低温条件是指温度为0‑4℃。
一种有机牛初乳粉，其制备方法中所述离心参数为6000‑7000r/min，离心时间15‑20min。
一种有机牛初乳粉，其制备方法中所述离心参数为6000‑7000r/min，温度4℃，离心时间15‑20min。
一种有机牛初乳粉，优选在超滤浓缩脱水后γ‑射线辐照灭菌前由如下方法制备：将超滤好的浓缩初乳置于专用干燥托盘，将托盘放入鼓风干燥箱进行风干；将干燥好的晶片用超微粉碎机进行超微粉碎。
一种有机牛初乳粉，其制备方法中干燥箱温度设置为50‑55℃，时间36‑48h。
一种有机牛初乳粉，其制备方法中超微粉碎后的初乳粉颗粒大小在80目以上。
上述有机牛初乳粉，不加任何辅料按照常规方法，制成胶囊剂。
上述有机牛初乳粉，其胶囊剂的制备方法优选为：用胶囊灌装机灌装初乳粉，胶囊标准为0.5g/粒±10mg；灌装后的胶囊经抛光机抛光后，经由平板式自动泡罩包装机制成胶囊板，检查筛选无瑕疵后装盒制成成品。
上述有机牛初乳粉，按照常规方法，制成临床接受的合剂、浓缩丸剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、丸剂、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。
上述有机牛初乳粉及其制剂用于制备牛初乳保健品。
本发明有机牛初乳粉奶源选用黄河故道万头国际牧场有机新鲜牛初乳；制备工艺采用超滤浓缩脱水和γ‑射线辐照灭菌。本发明有机牛初乳粉制备工艺中的超滤过程既达到脱水浓缩的目的又能确保免疫球蛋白的活性不会被降低，同时采用γ‑射线灭菌即保证了较完整的营养成分又保证了灭菌的彻底性。本发明有机牛初乳粉制备工艺摒弃了常规牛初乳粉生产工艺中低温冷冻干燥和高温喷粉环节，从而克服了现有技术中因灭菌温度过高或时间过长导致的免疫球蛋白失活现象，大大节省了时间和用电成本，提高了工作效率，且工艺简短、易操作而适合于产业化批量生产。此外本发明牛初乳粉加工成的胶囊剂，食用方便，易于储存。
本发明有机牛初乳粉，经临床实验表明，其中IgG含量在28%以上，蛋白质含量在55‑60%之间，脂肪含量小于1%，水分含量小于3%，。本发明的有机牛初乳粉与目前常规高温喷粉方法制备的牛初乳粉比较，IgG含量较高（常规高温喷粉方法制备的牛初乳粉IgG含量在10‑15%之间），蛋白质、脂肪、水分、酸度等理化指标以及各项微生物指标均较后者优良。
下述实验例和实施方式用于进一步说明本发明但并不限于本发明
实验例1各项微生物指标的对比实验
（一）具体实验方法及操作
对本发明实施例1超滤脱水前的液态牛初乳、本发明实施例1γ‑射线辐照灭菌后牛初乳粉和一般工艺高温喷雾的牛初乳粉根据RHB602‑2005进行各项指标的检测，具体操作步骤为：
一、菌落总数的测定
1.样品的稀释
1.1牛初乳胶囊粉：称取25g粉状样品置盛有225mL生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min，制成1:10的样品匀液。超滤浓缩脱水前原乳样品：以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。
1.2用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。
1.3按上条制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。
1.4根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，吸取1mL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
1.5及时将15mL～20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基（可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
2.培养
待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48h±2h。
3菌落计数及平板的选择
可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（colony‑forming units，cfu）表示。
3.1选取菌落数在30cfu～300cfu之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30cfu的平板记录具体菌落数，大于300cfu的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
3.2其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。
3.3当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。
4结果与报告
4.1菌落总数的计算方法
4.1.1若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）样品中菌落总数结果。
4.1.2若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按公式N=∑C/（n1+0.1n2)d计算,式中：N——样品中菌落数,C——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；n1——第一稀释度（低稀释倍数）平板个数；n2——第二稀释度（高稀释倍数）平板个数；d——稀释因子（第一稀释度）。
4.1.3若所有稀释度的平板上菌落数均大于300cfu，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
4.1.4若所有稀释度的平板菌落数均小于30cfu，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
4.1.5若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。
4.1.6若所有稀释度的平板菌落数均不在30cfu～300cfu之间，其中一部分小于30cfu或大于300cfu时，则以最接近30cfu或300cfu的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
4.2菌落总数的报告
4.2.1菌落数小于100cfu时，按"四舍五入"原则修约，以整数报告。
4.2.2菌落数大于或等于100cfu时，第3位数字采用"四舍五入"原则修约后，取前2位数字，后面用0代替个位数；也可用10的指数形式来表示，按"四舍五入"原则修约后，采用两位有效数字。
4.2.3若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。
4.2.4若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。
4.2.5称重取样以cfu/g为单位报告，体积取样以cfu/mL为单位报告。
二、大肠杆菌的检测
样品的稀释。
1.1牛初乳胶囊：称取25g粉状样品,放入盛有225mL生理盐水的无菌均质杯内,8000r/min～10000r/min均质1min～2min,制成1:10的样品匀液。超滤脱水浓缩前原乳：以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。
1.2样品匀液的pH值应在6.5～7.5之间，必要时分别用1mol/L NaOH或1mol/L HCl调节。
1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓缓注入9mL生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支1mL无菌吸管反复吹打，使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。
1.4根据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释1次，换用1支1mL无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。
2、初发酵试验
每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管接种1mL（如接种量超过1mL，则用双料LST肉汤），36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内是否有气泡产生，24h±2h产气者进行复发酵试验，如未产气则继续培养至48h±2h，产气者进行复发酵试验。未产气者为大肠菌群阴性。
3、复发酵试验
用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）管中，36℃±1℃培养48h±2h，观察产气情况。产气者，计为大肠菌群阳性管。
大肠菌群最可能数（MPN）的报告
按上条确证的大肠菌群LST阳性管数，检索MPN表，报告每100g（mL）样品中大肠菌群的MPN值。
大肠菌群平板计数法检验程序
5.1样品的稀释按1.1进行。
5.2平板计数
5.2.1选取2个～3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种2个无菌平皿，每皿1mL。同时取1mL生理盐水加入无菌平皿作空白对照。
5.2.2及时将15mL～20mL冷至46℃的结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）约倾注于每个平皿中。小心旋转平皿，将培养基与样液充分混匀，待琼脂凝固后，再加3mL～4mLVRBA覆盖平板表层。翻转平板，置于36℃±1℃培养18h～24h。
5.3平板菌落数的选择
选取菌落数在15cfu～150cfu之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。典型菌落为紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大。
5.4证实试验
从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于BGLB肉汤管内，36℃±1℃培养24h～48h，观察产气情况。凡BGLB肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。
5.5大肠菌群平板计数的报告
经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以5.3中计数的平板菌落数，再乘以稀释倍数，即为每g（mL）样品中大肠菌群数。
三、霉菌和酵母测定
样品的稀释
1.1牛初乳胶囊：称取25g样品至盛有225mL灭菌蒸馏水的锥形瓶中，充分振摇，即为1:10稀释液。超滤脱水浓缩前原乳：以无菌吸管吸取25mL样品至盛有225mL无菌蒸馏水的锥形瓶（可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。
1.2取1mL1:10稀释液注入含有9mL无菌水的试管中另换一支1mL无菌吸管反复吹吸此液为1:100稀释液。
1.3按上条操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管。
1.4根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿内。同时分别取1mL样品稀释液加入2个无菌平皿作空白对照。
1.5及时将15mL～20mL冷却至46℃的马铃薯‑葡萄糖‑琼脂或孟加拉红培养基可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
2、培养。待琼脂凝固后，将平板倒置，28℃±1℃培养5d，观察并记录。
3、菌落计数。肉眼观察，必要时可用放大镜，记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母数。以菌落形成单位（colonyforming units，cfu）表示。选取菌落数在10cfu～150cfu的平板，根据菌落形态分别计数霉菌和酵母数。霉菌蔓延生长覆盖整个平板的可记录为多不可计。菌落数应采用两个平板的平均数。
4、结果与报告
4.1计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数计算。
4.2若所有平板上菌落数均大于150cfu，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
4.3若所有平板上菌落数均小于10cfu，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
4.4若所有稀释度平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算；如为原液，则以小于1计数。
4.5菌落数在100以内时，按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字报告。
4.6菌落数大于或等于100时，前3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数来表示结果；也可用10的指数形式来表示，此时也按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字。
4.7称重取样以cfu/g为单位报告，体积取样以cfu/mL为单位报告，报告或分别报告霉菌和/或酵母数。
（二）实验结果及分析
表1：各项微生物指标检测结果

本发明所用原料液态牛初乳来自自控养殖小区，挤、送过程管控严格，在超滤脱水前就已经达到行业标准，本发明工艺所得牛初乳胶囊各项微生物指标远远低于行业标准，且优于一般工艺高温喷粉法所得。
实验例2各项理化指标的对比实验
（一）具体实验方法及操作
对本发明实施例1超滤脱水前的液态牛初乳、本发明实施例1γ‑射线辐照灭菌后牛初乳粉和一般工艺高温喷雾的牛初乳粉根据RHB602‑2005进行各项理化指标的检测，具体操作步骤为：
一、IgG测定
1、原理
根据高效亲和色谱的原理，在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白IgG与配基连接，在pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG,
2、试剂
2.1流动相A:pH6.5,0.05mol/L磷酸盐缓冲液。
2.2流动相B:pH2.5,0.05mol/L甘氨酸盐酸缓冲液。
2.3IgG标准贮备液:称取IgG标准品(Sigma化学公司)0.01g,用流动相A溶解并定容至10.0mL，摇匀，浓度为1.0mg/mL,
2.4IgG标准系列溶液:取IgG标准贮备液，用流动相A稀释成含IgG0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL的标准系列。临用时配制。
3、仪器和设备
高效液相色谱仪具紫外检测器和梯度洗脱装置。
4、分析步骤
4.1试样处理:称取0.1g精确至0.001g)试样，用流动相A稀释至25.0mL,摇匀，通过0.45μm微孔滤膜后进样。
4.2先用5倍柱体积的重蒸水洗柱，再用10倍柱体积的流动相A，平衡柱，进样，按洗脱程序进行洗脱。
5、结果计算
按下列公式计算：