抑亢散的质量控制方法.pdf

本发明涉及一种抑亢散的质量控制方法，属于中药技术领域，尤其是指中药制剂中成份含量测定和鉴别方法。包括用高效液相色谱法测定药物中橙皮苷C28H34O15的含量；用薄层色谱法鉴别其中的延胡索、女贞子、α-香附酮和芍药苷成分。优点是：克服了传统中药不足，建立了该药物先进的质量控制方法，利用高效液相色谱法测定该药物中的橙皮苷的含量，对药物中主药延胡索、女贞子、香附、白芍药味进行了薄层色谱法鉴别，保证了药物质量控制方法的准确性和先进性，能够有效地控制该药物的产品质量。

1、  抑亢散的质量控制方法，其中所述的药物配方是由羚羊角40.9g、白芍62g、天竺黄82g、桑椹205g、延胡索(醋炙)83g、青皮(醋炙)124g、香附41g、玄参39g、石决明43g、黄精59g、黄药子144g、天冬121g、女贞子1083g、地黄16g组成的中药复方制剂，羚羊角锉研成细粉；天竺黄、白芍、香附、桑椹、延胡索(醋炙)、青皮(醋炙)、石决明、玄参粉碎成细粉；黄药子、天冬、地黄、女贞子、黄精加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二次加6倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏，与上述粉末混合，干燥，粉碎，再与羚羊角粉配研，过筛，混匀，分装，制成1000g；该药物每袋装4.7g，每袋相当于处方药材10.07g；其特征在于：包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的两种成分；
含量测定：
用高效液相色谱法测定该药物中橙皮苷C₂₈H₃₄O₁₅的含量，
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(15-55∶45-85)或甲醇-水-冰乙酸(15-55∶45-85∶0.05-6)或乙腈-水(10-35∶65-90)或乙腈-水-冰乙酸(10-35∶65-90∶0.05-6)为流动相；检测波长为284±2nm，理论板数按橙皮苷计算不得少于3000；
对照品溶液的制备：
精密称定橙皮苷对照品适量，加甲醇或乙醇制成每1ml含橙皮苷0.1mg-0.3mg的溶液；
供试品溶液的制备：
精密称定已经研细的该药物1g，置锥形瓶中，精密加入50ml的甲醇或乙醇，称定重量，超声处理，功率50-200W，频率25-75KHz，10-50分钟，放冷，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液5ml，置5ml-15ml量瓶中，加甲醇或乙醇至刻度，摇匀，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1μl-10μl，注入液相色谱仪，测定橙皮苷含量；
该药物每袋含青皮以橙皮苷C₂₈H₃₄O₁₅计，不得少于60.0mg；
鉴别方法：
a)用薄层色谱法鉴别其中的延胡索成分：
供试品溶液的制备：
称取该药物2g，加25ml-75ml的甲醇或乙醇，超声处理10-50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加入10ml-30ml水使溶解，加氨水调至碱性，用乙醚振摇提取2-4次，每次5ml-15ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇或乙醇0.5ml-1.5ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备
称取延胡索乙素对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含延胡索乙素0.5mg-1.5mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液5-15μl，对照品溶液1-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上或用1％NaOH溶液制备的硅胶G薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽碘后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
b)用薄层色谱法鉴别其中的女贞子成分：
供试品溶液的制备：
称取该药物1g，加20ml-60ml甲醇或乙醇，加热回流20-40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇∶三氯甲烷＝2-4∶1-3的混合溶0.5ml-1.5ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取齐墩果酸对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含齐墩果酸0.5mg-1.5mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液5-15μl、对照品溶液1-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃-120℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2、  根据权利要求1所述的抑亢散的质量控制方法，其特征在于：鉴别方法中还包括：
c)用薄层色谱法鉴别其中的α-香附酮成分
供试品溶液的制备：
取该药物4.7g，加乙醚10ml-30ml，放置0.5小时-1.5小时，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取α-香附酮对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含α-香附酮1mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以二硝基苯肼试液，日光下检视，斑点渐变为橙红色。

3、  根据权利要求1或2所述的抑亢散的质量控制方法，其特征在于：鉴别方法中还包括：
d)用薄层色谱法鉴别其中的芍药苷成分
供试品溶液的制备：
取该药物4.7g，加甲醇或乙醇30ml-50ml，加热回流20分钟-40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇或乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取芍药苷对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含芍药苷1mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液8μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在100℃-120℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

4、  根据权利要求1所述的抑亢散的质量控制方法，其特征在于：含量测定中色谱条件：流动相中的冰乙酸是磷酸。

5、  根据权利要求1所述的抑亢散的质量控制方法，其特征在于鉴别方法a)用薄层色谱法鉴别其中的延胡索成分中：显色反应中喷以碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

6、  根据权利要求1所述的抑亢散的质量控制方法，其特征在于鉴别方法a)用薄层色谱法鉴别其中的延胡索成分中：展开剂是正己烷-三氯甲烷-甲醇(5-18∶2-10∶0.5-2)或正己烷-三氯甲烷-甲醇-二乙胺(5-18∶2-10∶0.5-2∶0.05-1)或正己烷-三氯甲烷-甲醇-浓氨试液(5-18∶2-10∶0.5-2∶0.05-1)。

7、  根据权利要求1所述的抑亢散的质量控制方法，其特征在于鉴别方法b)用薄层色谱法鉴别其中的女贞子成分中：显色反应中喷以10％硫酸溶液或者喷以磷钼酸试液，在100℃-120℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及其它常用显色反应。

8、  根据权利要求1所述的抑亢散的质量控制方法，其特征在于鉴别方法b)用薄层色谱法鉴别其中的女贞子成分中：展开剂是三氯甲烷-甲醇(30-50∶1-5)或环己烷-丙酮-乙酸乙酯(4-6∶1-3∶0.2-1.5)或甲苯-乙酸乙酯-醋酸(8-14∶2-4∶0.1-0.5)或三氯甲烷-丙酮(8-10∶0.5-1.5)或环己烷-丙酮(3-5∶0.5-1.5)或环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-醋酸(19-21∶4-6∶7-9∶0.05-1)或正己烷-乙酸乙酯-醋酸(5-7∶3-5∶0.05-1)或甲苯-乙酸乙酯(1-2∶1-2)。

9、  根据权利要求2所述的抑亢散的质量控制方法，其特征在于鉴别方法：c)用薄层色谱法鉴别其中的α-香附酮成分，展开剂是正己烷-乙酸乙酯(10-30∶1-5)或苯-乙酸乙酯(5-70∶0.5-2)或苯-乙酸乙酯-冰醋酸(50-95∶1-5∶1-5)或环己烷-乙酸乙酯(5-15∶0.5-2)或石油醚(60℃-90℃)-乙酸乙酯(5-20∶2-5)或正己烷-乙酸乙酯-二乙胺(10-30∶3-8∶0.5-2)。

10、  根据权利要求3所述的抑亢散的质量控制方法，其特征在于鉴别方法：d)用薄层色谱法鉴别其中的芍药苷成分，展开剂是三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(30-50∶1-10∶5-15∶0.1-0.3)或三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(6-10∶0.5-2∶3-5)或三氯甲烷-乙酯乙酯-甲醇-浓氨试液(6-10∶0.5-2∶3-5∶0.5-2)或三氯甲烷-甲醇(2-10∶0.5-2)或三氯甲烷-甲醇-水(10-30∶3-20∶0.5-10)。

抑亢散的质量控制方法
技术领域
本发明属于中药技术领域，尤其是指中药制剂中成份含量测定和鉴别方法。
背景技术
抑亢散是由羚羊角40.9g、白芍62g、天竺黄82g、桑椹205g、延胡索(醋炙)83g、青皮(醋炙)124g、香附41g、玄参39g、石决明43g、黄精59g、黄药子144g、天冬121g、女贞子1083g、地黄16g组成的中药复方制剂，羚羊角锉研成细粉；天竺黄、白芍、香附、桑椹、延胡索(醋炙)、青皮(醋炙)、石决明、玄参粉碎成细粉；黄药子、天冬、地黄、女贞子、黄精加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二次加6倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏，与上述粉末混合，干燥，粉碎，再与羚羊角粉配研，过筛，混匀，分装，制成1000g。
该药物为棕黄色的粉末；味微苦。该药物的功能主治为：育阴潜阳，豁痰散结，降逆和中，用于瘿病(甲状腺机能亢进)引起的突眼，多汗心烦，心悸怔忡，口渴，多食，肌体消瘦，四肢震颤等。该药物的用法用量为：口服，一次1袋，每袋相当于处方药材10.07g，一日2次。该药物每袋装4.7g，每袋相当于处方药材10.07g，密封贮藏。
该药物目前的质量控制方法较为单一，在《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第三册85页颁布了抑亢丸的质量控制方法，在抑亢丸的质量控制方法中，只有一个显微鉴别项，质量控制方法局限性大，专属性不强，难于控制药物的质量标准。本发明克服了现有技术的不足，提高了药品的质量控制标准，建立了药物中含量测定指标及其检测方法，增加其中主要药味延胡索、女贞子、香附、白芍薄层色谱鉴别方法，保证了该药物较高的质量标准水平。
青皮为芸香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培变种的干燥幼果或未成熟果实的果皮，具有疏肝破气，消积化滞的功效，主要成分挥发油、黄酮苷(如橙皮苷)类物质，青皮醋制后可缓和辛烈之性，增强疏肝止痛，消积化滞的作用。
延胡索为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥块茎，具有活血，利气，止痛的功效，主要成分为延胡索甲素、延胡索乙素等生物碱类物质，延胡索醋制后使难溶于水的生物碱变成了生物碱盐，大大提高了延胡索有效成分在煎液中的溶解度，从而增强疗效。
女贞子为木犀科植物女贞Ligustrum lucidum Ait.的干燥成熟果实，具有补肝肾，强腰膝，治阴虚内热，头昏目花，耳鸣，腰膝酸软，须发早白等功效，主要成分为齐墩果酸油酸、亚油酸，棕榈酸，硬脂酸、甘露醇等，果皮含有三萜类成分齐墩果酸约占14％。
香附为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根茎，具有行气解郁，调理气机，行气止痛的功效，含有α-香附酮等挥发性成分。
白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根，具有柔肝止痛，养血调经，敛阴止汗，平抑肝阳的功效，主要成分有芍药苷、牡丹酚、芍药花苷等成分。
发明内容
本发明提供一种抑亢散的质量控制方法，以解决目前的质量控制方法不能满足要求的问题。本发明采取的技术方案是：包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的两种成分；
含量测定：
用高效液相色谱法测定该药物中橙皮苷C₂₈H₃₄O₁₅的含量；
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(15-55∶45-85)或甲醇-水-冰乙酸(15-55∶45-85∶0.05-6)或乙腈-水(10-35∶65-90)或乙腈-水-冰乙酸(10-35∶65-90∶0.05-6)为流动相；检测波长为284±2nm，理论板数按橙皮苷计算不得少于3000；
对照品溶液的制备：
精密称定橙皮苷对照品适量，加甲醇或乙醇制成每1ml含橙皮苷0.1mg-0.3mg的溶液；
供试品溶液的制备：
精密称定已经研细的该药物1g，置锥形瓶中，精密加入50ml的甲醇或乙醇，称定重量，超声处理，功率50-200W，频率25-75KHz，10-50分钟，放冷，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液5ml，置5ml-15ml量瓶中，加甲醇或乙醇至刻度，摇匀，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1μl-10μl，注入液相色谱仪，测定橙皮苷含量。
该药物每袋含青皮以橙皮苷C₂₈H₃₄O₁₅计，不得少于60.0mg。
流动相中的冰乙酸也可以是磷酸。
鉴别方法：
a)用薄层色谱法鉴别其中的延胡索成分：
供试品溶液的制备：
称取该药物2g，加25ml-75ml的甲醇或乙醇，超声处理10-50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加入10ml-30ml水使溶解，加氨水调至碱性，用乙醚振摇提取2-4次，每次5ml-15ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇或乙醇0.5ml-1.5ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备
称取延胡索乙素对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含延胡索乙素0.5mg-1.5mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液5-15μl，对照品溶液1-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上或用1％NaOH溶液制备的硅胶G薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽碘后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及其它常用显色反应。
本发明一种实施方式是：展开剂是正己烷-三氯甲烷-甲醇(5-18∶2-10∶0.5-2)或正己烷-三氯甲烷-甲醇-二乙胺(5-18∶2-10∶0.5-2∶0.05-1)或正己烷-三氯甲烷-甲醇-浓氨试液(5-18∶2-10∶0.5-2∶0.05-1)；以及其它常用的展开剂及配比。
b)用薄层色谱法鉴别其中的女贞子成分：
供试品溶液的制备：
称取该药物1g，加20ml-60ml甲醇或乙醇，加热回流20-40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇∶三氯甲烷＝2-4∶1-3的混合溶0.5ml-1.5ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取齐墩果酸对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含齐墩果酸0.5mg-1.5mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液5-15μl、对照品溶液1-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃-120℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以10％硫酸溶液或者喷以磷钼酸试液，在100℃-120℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及其它常用显色反应。
本发明一种实施方式是：展开剂是环己烷-丙酮-乙酸乙酯(4-6∶1-3∶0.5-1.5)或三氯甲烷-甲醇(30-50∶1-5)或甲苯-乙酸乙酯-醋酸(8-14∶2-4∶0.1-0.5)或三氯甲烷-丙酮(8-10∶0.5-1.5)或环己烷-丙酮(3-5∶0.5-1.5)或环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-醋酸(19-21∶4-6∶7-9∶0.05-1)或正己烷-乙酸乙酯-醋酸(5-7∶3-5∶0.05-1)或甲苯-乙酸乙酯(1-2∶1-2)；以及其它常用的展开剂及配比。
本发明鉴别方法中还包括：c)用薄层色谱法鉴别其中的α-香附酮成分；
供试品溶液的制备：
取该药物4.7g，加乙醚10ml-30ml，放置0.5小时-1.5小时，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：
称取α-香附酮对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含α-香附酮1mg的溶液，作为对照品溶液。
薄层色谱法试验：
吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以二硝基苯肼试液，日光下检视，斑点渐变为橙红色。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，在100℃-120℃加热3-20分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以1％香草醛硫酸溶液或10％的硫酸乙醇溶液，在100℃-120℃加热3-20分钟，置365nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明一种实施方式是：展开剂是正己烷-乙酸乙酯(10-30∶1-5)或苯-乙酸乙酯(5-70∶0.5-2)或苯-乙酸乙酯-冰醋酸(50-95∶1-5∶1-5)或环己烷-乙酸乙酯(5-15∶0.5-2)或石油醚(60℃-90℃)-乙酸乙酯(5-20∶2-5)或正己烷-乙酸乙酯-二乙胺(10-30∶3-8∶0.5-2)。
本发明鉴别方法中还包括：d)用薄层色谱法鉴别其中的芍药苷成分；
供试品溶液的制备：
取该药物4.7g，加甲醇或乙醇30ml-50ml，加热回流20分钟-40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇或乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：
称取芍药苷对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含芍药苷1mg的溶液，作为对照品溶液。
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液8μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在100℃-120℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以硫酸乙醇溶液，在100℃-120℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以茴香醛试液，在100-120℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：展开剂是三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(30-50∶1-10∶5-15∶0.1-0.3)或三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(6-10∶0.5-2∶3-5)或三氯甲烷-乙酯乙酯-甲醇-浓氨试液(6-10∶0.5-2∶3-5∶0.5-2)或三氯甲烷-甲醇(2-10∶0.5-2)或三氯甲烷-甲醇-水(10-30∶3-20∶0.5-10)。
本发明的优点是：克服了传统中药不足，建立了该药物先进的质量控制方法，利用高效液相色谱法测定该药物中的橙皮苷的含量，对药物中主药延胡索、女贞子、香附、白芍药味进行了薄层色谱法鉴别，保证了药物质量控制方法的准确性和先进性，能够有效地控制该药物的产品质量。
具体实施方式
所述的药物配方是由羚羊角40.9g、白芍62g、天竺黄82g、桑椹205g、延胡索(醋炙)83g、青皮(醋炙)124g、香附41g、玄参39g、石决明43g、黄精59g、黄药子144g、天冬121g、女贞子1083g、地黄16g组成的中药复方制剂，羚羊角锉研成细粉；天竺黄、白芍、香附、桑椹、延胡索(醋炙)、青皮(醋炙)、石决明、玄参粉碎成细粉；黄药子、天冬、地黄、女贞子、黄精加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮2小时，第二次加6倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏，与上述粉末混合，干燥，粉碎，再与羚羊角粉配研，过筛，混匀，分装，制成1000g；该药物每袋装4.7g，每袋相当于处方药材10.07g。
实施例1
用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的四种成分；
含量测定：
用高效液相色谱法测定该药物中橙皮苷C₂₈H₃₄O₁₅的含量。
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰乙酸15∶45∶0.05为流动相；检测波长为284±2nm，理论板数按橙皮苷计算不得少于3000；
对照品溶液的制备：
精密称定橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含橙皮苷0.1mg的溶液；
供试品溶液的制备：
精密称定已经研细的该药物1g，置锥形瓶中，精密加入50ml的甲醇，称定重量，超声处理，功率50W，频率25KHz，50分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液5ml，置5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，测定橙皮苷含量。
该药物每袋含青皮以橙皮苷C₂₈H₃₄O₁₅计，不得少于60.0mg。
流动相中的冰乙酸也可以是磷酸。
鉴别方法：
a)用薄层色谱法鉴别其中的延胡索成分：
供试品溶液的制备：
称取该药物2g，加25ml的甲醇，超声处理50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加入10ml水使溶解，加氨水调至碱性，pH值8，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备
称取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含延胡索乙素0.5mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液5μl，对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂正己烷-三氯甲烷-甲醇5∶2∶0.5展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽碘后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及其它常用显色反应。
本发明一种实施方式是：展开剂是正己烷-三氯甲烷-甲醇-二乙胺(5-18∶2-10∶0.5-2∶0.05-1)或正己烷-三氯甲烷-甲醇-浓氨试液(5-18∶2-10∶0.5-2∶0.05-1)；以及其它常用的展开剂及配比。
b)用薄层色谱法鉴别其中的女贞子成分：
供试品溶液的制备：
称取该药物1g，加20ml甲醇，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇∶三氯甲烷＝2∶1的混合溶0.5ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取齐墩果酸对照品，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸0.5mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液5μl、对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂环己烷-丙酮-乙酸乙酯4∶1∶0.2展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在120℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以10％硫酸溶液或者喷以磷钼酸试液，在120℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及其它常用显色反应。
本发明一种实施方式是：展开剂是三氯甲烷-甲醇(30-50∶1-5)或甲苯-乙酸乙酯-醋酸(8-14∶2-4∶0.1-0.5)或三氯甲烷-丙酮(8-10∶0.5-1.5)或环己烷-丙酮(3-5∶0.5-1.5)或环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-醋酸(19-21∶4-6∶7-9∶0.05-1)或正己烷-乙酸乙酯-醋酸(5-7∶3-5∶0.05-1)或甲苯-乙酸乙酯(1-2∶1-2)；以及其它常用的展开剂及配比。
c)用薄层色谱法鉴别其中的α-香附酮成分
供试品溶液的制备：
取该药物4.7g，加乙醚10ml，放置1.5小时，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：
称取α-香附酮对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含α-香附酮1mg的溶液，作为对照品溶液。
薄层色谱法试验：
吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以展开剂正己烷-乙酸乙酯10∶1展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以二硝基苯肼试液，日光下检视，斑点渐变为橙红色。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，在120℃加热3分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以1％香草醛硫酸溶液或10％的硫酸乙醇溶液，在100℃加热20分钟，置365nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明一种实施方式是：展开剂是苯-乙酸乙酯(5-70∶0.5-2)或苯-乙酸乙酯-冰醋酸(50-95∶1-5∶1-5)或环己烷-乙酸乙酯(5-15∶0.5-2)或石油醚(60℃-90℃)-乙酸乙酯(5-20∶2-5)或正己烷-乙酸乙酯-二乙胺(10-30∶3-8∶0.5-2)。
d)用薄层色谱法鉴别其中的芍药苷成分
供试品溶液的制备：
取该药物4.7g，加甲醇30ml，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：
称取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含芍药苷1mg的溶液，作为对照品溶液。
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液8μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸30∶1∶5∶0.1展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在120℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以硫酸乙醇溶液，在120℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以茴香醛试液，在120℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(6-10∶0.5-2∶3-5)或三氯甲烷-乙酯乙酯-甲醇-浓氨试液(6-10∶0.5-2∶3-5∶0.5-2)或三氯甲烷-甲醇(2-10∶0.5-2)或三氯甲烷-甲醇-水(10-30∶3-20∶0.5-10)。
实施例2
用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的四种成分；
含量测定：
用高效液相色谱法测定该药物中橙皮苷C₂₈H₃₄O₁₅的含量。
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰乙酸40∶56∶4为流动相；检测波长为284±2nm，理论板数按橙皮苷计算不得少于3000；
对照品溶液的制备：
精密称定橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含橙皮苷0.2mg的溶液；
供试品溶液的制备：
精密称定已经研细的该药物1g，置锥形瓶中，精密加入50ml的甲醇，称定重量，超声处理，功率120W，频率50KHz，30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定橙皮苷含量。
该药物每袋含青皮以橙皮苷C₂₈H₃₄O₁₅计，不得少于60.0mg。
流动相中的冰乙酸也可以是磷酸。
鉴别方法：
a)用薄层色谱法鉴别其中的延胡索成分：
供试品溶液的制备：
称取该药物2g，加50ml的甲醇，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加入20ml水使溶解，加氨水调至碱性pH值10，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇1.0ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备
称取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含延胡索乙素1.0mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液10μl，对照品溶液3μl，分别点于同一用1％NaOH溶液制备的硅胶G薄层板上，以展开剂正己烷-三氯甲烷-甲醇7.5∶4∶1展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽碘后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及其它常用显色反应。
本发明一种实施方式是：展开剂是正己烷-三氯甲烷-甲醇-二乙胺(5-18∶2-10∶0.5-2∶0.05-1)或正己烷-三氯甲烷-甲醇-浓氨试液(5-18∶2-10∶0.5-2∶0.05-1)；以及其它常用的展开剂及配比。
b)用薄层色谱法鉴别其中的女贞子成分：
供试品溶液的制备：
称取该药物1g，加40ml甲醇，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇∶三氯甲烷＝3∶2的混合溶1.0ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取齐墩果酸对照品，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸1.0mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂环己烷-丙酮-乙酸乙酯5∶2∶1展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以10％硫酸溶液试液，在110℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及其它常用显色反应。
本发明一种实施方式是：展开剂是三氯甲烷-甲醇(30-50∶1-5)或甲苯-乙酸乙酯-醋酸(8-14∶2-4∶0.1-0.5)或三氯甲烷-丙酮(8-10∶0.5-1.5)或环己烷-丙酮(3-5∶0.5-1.5)或环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-醋酸(19-21∶4-6∶7-9∶0.05-1)或正己烷-乙酸乙酯-醋酸(5-7∶3-5∶0.05-1)或甲苯-乙酸乙酯(1-2∶1-2)；以及其它常用的展开剂及配比。
c)用薄层色谱法鉴别其中的α-香附酮成分
供试品溶液的制备：
取该药物4.7g，加乙醚20ml，放置1.0小时，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：
称取α-香附酮对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含α-香附酮1mg的溶液，作为对照品溶液。
薄层色谱法试验：
吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以展开剂正己烷-乙酸乙酯17∶3展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以二硝基苯肼试液，日光下检视，斑点渐变为橙红色。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，在110℃加热10分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以1％香草醛硫酸溶液或10％的硫酸乙醇溶液，在110℃加热11分钟，置365nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明一种实施方式是：展开剂是苯-乙酸乙酯(5-70∶0.5-2)或苯-乙酸乙酯-冰醋酸(50-95∶1-5∶1-5)或环己烷-乙酸乙酯(5-15∶0.5-2)或石油醚(60℃-90℃)-乙酸乙酯(5-20∶2-5)或正己烷-乙酸乙酯-二乙胺(10-30∶3-8∶0.5-2)。
d)用薄层色谱法鉴别其中的芍药苷成分
供试品溶液的制备：
取该药物4.7g，加甲醇40ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：
称取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含芍药苷1mg的溶液，作为对照品溶液。
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液8μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸40∶5∶10∶0.2展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以茴香醛试液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(6-10∶0.5-2∶3-5)或三氯甲烷-乙酯乙酯-甲醇-浓氨试液(6-10∶0.5-2∶3-5∶0.5-2)或三氯甲烷-甲醇(2-10∶0.5-2)或三氯甲烷-甲醇-水(10-30∶3-20∶0.5-10)。
实施例3
用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的四种成分；
含量测定：
用高效液相色谱法测定该药物中橙皮苷C₂₈H₃₄O₁₅的含量。
色谱条件：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水35∶65为流动相；检测波长为284±2nm，理论板数按橙皮苷计算不得少于3000；
对照品溶液的制备：
精密称定橙皮苷对照品适量，加乙醇制成每1ml含橙皮苷0.3mg的溶液；
供试品溶液的制备：
精密称定已经研细的该药物1g，置锥形瓶中，精密加入50ml的乙醇，称定重量，超声处理，功率200W，频率75KHz，10分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液5ml，置15ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得；
含量测定方法：
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定橙皮苷含量。
该药物每袋含青皮以橙皮苷C₂₈H₃₄O₁₅计，不得少于60.0mg。
流动相中的冰乙酸也可以是磷酸。
鉴别方法：
a)用薄层色谱法鉴别其中的延胡索成分：
供试品溶液的制备：
称取该药物2g，加75ml的乙醇，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加入30ml水使溶解，加氨水调至碱性，pH值13，用乙醚振摇提取4次，每次5ml，合并乙醚液，挥干，残渣加乙醇1.5ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备
称取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含延胡索乙素1.5mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液15μl，对照品溶液5μl，分别点于同一用1％NaOH溶液制备的硅胶G薄层板上，以展开剂正己烷-三氯甲烷-甲醇-二乙胺12∶6∶1.5∶0.5展开，取出，晾干，以碘蒸气熏至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在空气中挥尽碘后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及其它常用显色反应。
本发明一种实施方式是：展开剂是正己烷-三氯甲烷-甲醇(5-18∶2-10∶0.5-2)或正己烷-三氯甲烷-甲醇-浓氨试液(5-18∶2-10∶0.5-2∶0.05-1)；以及其它常用的展开剂及配比。
b)用薄层色谱法鉴别其中的女贞子成分：
供试品溶液的制备：
称取该药物1g，加60ml乙醇，加热回流20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇∶三氯甲烷＝4∶3的混合溶1.5ml使溶解，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备：
称取齐墩果酸对照品，加乙醇制成每1ml含齐墩果酸1.5mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液15μl、对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂三氯甲烷-丙酮9∶1展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以10％硫酸溶液或者喷以磷钼酸试液，在100℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及其它常用显色反应。
本发明一种实施方式是：展开剂是环己烷-丙酮-乙酸乙酯(4-6∶1-3∶0.5-1.5)或三氯甲烷-甲醇(30-50∶1-5)或甲苯-乙酸乙酯-醋酸(8-14∶2-4∶0.1-0.5)或环己烷-丙酮(3-5∶0.5-1.5)或环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-醋酸(19-21∶4-6∶7-9∶0.05-1)或正己烷-乙酸乙酯-醋酸(5-7∶3-5∶0.05-1)或甲苯-乙酸乙酯(1-2∶1-2)；以及其它常用的展开剂及配比。
c)用薄层色谱法鉴别其中的α-香附酮成分
供试品溶液的制备：
取该药物4.7g，加乙醚30ml，放置0.5小时，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：
称取α-香附酮对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含α-香附酮1mg的溶液，作为对照品溶液。
薄层色谱法试验：
吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以展开剂环己烷-乙酸乙酯10∶1展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以二硝基苯肼试液，日光下检视，斑点渐变为橙红色。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，在100℃加热20分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以1％香草醛硫酸溶液或10％的硫酸乙醇溶液，在100℃加热20分钟，置365nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明一种实施方式是：展开剂是正己烷-乙酸乙酯(10-30∶1-5)或苯-乙酸乙酯(5-70∶0.5-2)或苯-乙酸乙酯-冰醋酸(50-95∶1-5∶1-5)或石油醚(60℃-90℃)-乙酸乙酯(5-20∶2-5)或正己烷-乙酸乙酯-二乙胺(10-30∶3-8∶0.5-2)。
d)用薄层色谱法鉴别其中的芍药苷成分
供试品溶液的制备：
取该药物4.7g，加乙醇50ml，加热回流20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：
称取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含芍药苷1mg的溶液，作为对照品溶液。
薄层色谱法试验：
吸取供试品溶液8μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇8∶1∶4展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：显色反应中喷以茴香醛试液，在100℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明一种实施方式是：展开剂是三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(30-50∶1-10∶5-15∶0.1-0.3)或三氯甲烷-乙酯乙酯-甲醇-浓氨试液(6-10∶0.5-2∶3-5∶0.5-2)或三氯甲烷-甲醇(2-10∶0.5-2)或三氯甲烷-甲醇-水(10-30∶3-20∶0.5-10)。