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一种治疗心脑血管疾病的中药组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的中药，具体地，本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的中药组合物及其制备方法。
背景技术
随着社会生活水平的提高以及人口的老龄化，心血管疾病的发病率呈现出迅速上升的趋势。尤其是冠心病，心绞痛及脑动脉硬化症已经严重威胁着中老年人的身体健康，使许多中老年人的正常生活受到影响，同时也给家庭带来了许多的痛苦。
由于这类疾病发病人群广，病程长，治愈率低，现在用于治疗此类疾病的药物很多，其治疗效果也是参差不齐，西药大部分副作用较多，而且价位较高，所以选择一种无副作用，疗效确切，价格合适的药物提供给患者有非常重要的意义。通过比较发现，心脑康胶囊是一种疗效比较显著的药物，其标准来源于部颁标准第十三册“心脑康胶囊”，由丹参、赤芍、制何首乌、枸杞子、葛根、川芎、红花、泽泻、牛膝、地龙、郁金、远志(蜜炙)、九节菖蒲、酸枣仁(炒)、鹿心粉、甘草等十六味原料药组成，制备方法为，除鹿心粉外，川芎、红花、泽泻、牛膝、郁金、远志、九节菖蒲、酸枣仁、甘草粉碎成细粉、过筛。其余丹参等6味，加水煎煮三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏。加入上述细粉，混合，干燥，粉碎，过筛，加入鹿心粉，混匀，装入胶囊，即得。但其制备工艺并不利于有效成份的充分提取溶出及能源的节约，而且制得的胶囊剂并不利于有效成分在体内的快速溶解和吸收，生物利用度不高，不能达到心脑血管疾病用药快速、高效的要求。所以如何改善该药剂的质量和增加生产效率成为了本领域需要解决的一个技术问题，提供一种能够充分发挥该药物疗效，能够快速见效的合理剂型有着非常重要的意义。
发明内容
为了改善心脑康胶囊剂的质量和增加生产效率，提高产品的疗效。本发明提供了下述技术方案：
心脑康软胶囊制剂是按照以下步骤制备而成：
步骤1：称取原料药丹参40g、赤芍30g、制何首乌30g、枸杞子30g、葛根30g、川芎30g、红花20g、泽泻30g、牛膝30g、地龙30g、郁金3g、远志(蜜炙)30g、九节菖蒲30g、酸枣仁(炒)20g、鹿心粉30g、甘草20g；
步骤2：步骤1中十六味原料药，除鹿心粉外，川芎、红花、泽泻、牛膝、郁金、远志、九节菖蒲、酸枣仁、甘草粉碎成细粉，过筛，备用；
步骤3：其余丹参、赤芍、制何首乌、枸杞子、葛根、地龙6味，用动态连续逆流提取方法加水提取，滤过，滤液浓缩成稠膏；
步骤3：其余丹参、赤芍、制何首乌、枸杞子、葛根、地龙6味，用动态连续逆流提取方法加水提取，滤过，滤液浓缩成稠膏；
步骤4：将步骤3所得稠膏中加入步骤2所得细粉，混合，干燥，粉碎，过筛，再加入鹿心粉，混匀，将药物细粉加入分散介质中，再加入适量混悬剂混合均匀，压制成软胶囊。
上述步骤3中用动态连续逆流提取方法提取时加4～6倍量水提取1～3小时，提取液滤过，滤液浓缩至50℃时相对密度为1.20～1.35的稠膏。
上述步骤1中药物细粉的粒度为80～120目，步骤4中药物的粉碎细度为100～200目。
上述步骤4中分散介质可以是聚乙二醇400或植物油；助悬剂可以是1％～5％的PEG4000或6000、蜂蜡、单硬脂酸铝或乙基纤维素。
上述步骤4中药粉与分散介质混合的比例为1～8∶1～8。
上述步骤4中压制软胶囊粒的步骤是在滚筒式成型机中成型2～4小时，成型条件是温度25～30℃，相对湿度15～25％，然后用90～99％的乙醇洗丸、然后置晾盘中晾放干燥15～30小时，干燥条件20～30℃，湿度15～25％。
心脑康软胶囊制备方法优选为：
取丹参40g、赤芍30g、制何首乌30g、枸杞子30g、葛根30g、川芎30g、红花20g、泽泻30g、牛膝30g、地龙30g、郁金3g、远志(蜜炙)30g、九节菖蒲30g、酸枣仁(炒)20g、鹿心粉30g、甘草20g，以上十六味，除鹿心粉外，川芎、红花、泽泻、牛膝、郁金、远志、九节菖蒲、酸枣仁、甘草粉碎成100目的细粉、过筛。其余丹参等6味，用动态连续逆流提取方法加4倍量水提取2小时，滤过，滤液浓缩至50℃时相对密度为1.30的稠膏。加入上述细粉，混合，干燥，粉碎至150目，过筛，加入鹿心粉，混匀，将植物油按照2∶1的比例加入药物细粉，再加入3％蜂蜡混合均匀，在滚筒式成型机中成型3小时，成型条件是温度27℃，相对湿度20％，然后用95％的乙醇洗丸、然后置晾盘中晾放干燥24小时，干燥条件26℃，湿度20％，即得软胶囊。
我们所发明的心脑康软胶囊制剂不仅克服了硬胶囊剂的缺点，药物以混悬状存在于分散介质中，其溶解速度加快、生物利用度提高、疗效更好，而且软胶囊剂易于吞服且外观漂亮，更易为患者接受。通过药效学试验和临床试验，证明其疗效显著，见效快，治愈率高，能够有效治疗冠心病，心绞痛及脑动脉硬化症，与心脑康胶囊比较其疗效有显著性差异。
具体实施方式
[试验例1]本发明药物的工艺试验研究
1、水提工艺的选择
我们通过测量水提物中芍药苷含量，以考察应用不同的水提方法对药物有效成份含量的影响，具体方法如下：
我们按比例称取丹参、赤芍、何首乌、枸杞子、葛根、地龙等6味药材共6份，分成2组，第一组采用加水煎煮三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时；第二组采用动态连续逆流提取方法，加4倍量水，煎煮2小时。通过考察干浸膏中芍药苷含量，以确定所选工艺的先进性。结果见下表：
表1：不同提取方法干浸膏芍药苷含量

从上表可以看出，动态连续逆流提取组的芍药苷含量明显高于水煎煮组。动态连续逆流提取是利用固液两相的浓度梯度差，逐级将药料中有效成分扩散至起始浓度相对较低的套提溶液中，达到最大限度转移物料中溶解成分的目的。该提取工艺方法的应用使得药物的有效成份提出率大大提高，不仅提高了药品的疗效，而且节省能源，提取效率高。
2、药物粉碎细度及加入分散介质比例的考察
软胶囊中填充固体药物时，药物粉末要求应通过五号筛，并混合均匀。本发明中将药物混合物分别粉碎至不同细度，取等量加入不同的分散介质混合均匀。通过考察2小时后的软胶囊囊液的均匀度来确定药物粉碎的细度。结果见下表：
表2：药物粉碎细度与加入分散介质混合均匀度的考察结果

通过上表可以看出，粉碎粒度在80～120目时，囊液均匀度不好，药物会出现分层沉淀现象。粉碎粒度在120～150目囊液稳定性较好，在规定时间内没有出现分层现象；药物粉碎细度在150目以上，在与分散介质混合时，不仅能耗增大，而且粉碎时药物损耗率、粉尘污染增大，所以选择粉碎粒度为120～150目。
3、软胶囊囊壳原料配比比例的筛选实验
我们选择不同比例的明胶、甘油、水制成囊壳，将优选方法配制成的囊液，用不同配比的囊壳压制成软胶囊，通过考察囊壳弹性、吸湿性、崩解时间，确定明胶、甘油、水的比例，结果见下表：
表3：软胶囊囊壳配比考察结果

  明胶∶甘油∶水    弹性    吸湿性    崩解时间      1∶0.3∶0.9    较硬    吸湿    56分钟      1∶0.4∶1.2    适中    不吸湿    34分钟      1∶0.5∶1.4    较软    不吸湿    21分钟      1∶0.6∶1.5    软    不吸湿    18分钟
从上表结果可以看出，明胶、甘油、水的配比为1∶0.4∶1.2时，制得的软胶囊囊壳各项指标均良好。
3、以制成软胶囊的合格率及各试验所得合格产品人体服用后2h的血药浓度为考察依据，采用正交试验对分散介质、助悬剂、药物与分散介质比例进行研究，具体方法如下：
取本发明药物原药材9份，按照上述优选试验方法提取药物、粉碎、配制囊壳，按照正交表L₉(3⁴)安排试验，制备软胶囊，考察制得软胶囊的合格率及人体服用后2h的血药浓度(以试验1所得软胶囊在2h时测得的血药浓度为参比数值，计算各组血药浓度与其的比值)，结果见下表：
表4.  优选因素水平表

表5.因素筛选正交试验数据表


表6.软胶囊合格率方差分析表

表7软胶囊血药浓度比例方差分析

由表5中极差R值大小显示，各因素作用主次为A＞C＞B；直观分析以A₁B₁C₂为最佳工艺；由表6、7方差分析结果表明：A、C因素的影响具有显著性意义，  B因素的影响无显著性意义。即：分散介质为植物油，药物与分散介质的比例为1∶2，助悬剂为3％蜂蜡时，所制得软胶囊成品率最高，在生物利用度最好。
[试验例2]本发明药物的药效学试验研究
供试药物：按照本发明[实施例1]所制备的软胶囊剂。
阳性对照药物：心脑康胶囊，由北京亚东生物制药有限公司生产，批号06052001
动物Wistar大鼠170只，雌雄兼有。购自中国科学院遗传研究所实验动物中心，合格证号：DB07/034。2-93
仪器实验性体内血栓形成仪、VZS-723分光光度计、PAT-4A型血小板聚集仪、R80血液黏度仪。
方法和结果
(一)本发明药物抗大鼠颈动脉血栓形成实验
Wistar雄性大鼠40只，体重(232±21)g。随机分为4组，即本发明药物大剂量组0.56g/kg、小剂量组0.38g/kg、阳性对照药心脑康胶囊组0.38g/kg及空白对照组，每组10只。灌胃给药。每日1次，连续给药5天。给药体积为2ml/200g。对照组给予等容积的生理盐水。于末次给药后1.5h开始实验。大鼠经2.5％戊巴比妥钠腹腔麻醉，分离右侧颈总动脉，采用电流损伤颈动脉内膜法在动脉上放置电极进行电刺激(2mA，7min)，记录自电刺激开始至血栓形成时间(超过50min以50min计)。结果详见表8
表8本发明药物对大鼠颈动脉血栓形成的影响

与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与心脑康胶囊比较△＜0.05
结果表明：本发明药物大、小剂量均可明显延长小鼠体内颈动脉血栓的形成。相同剂量的本发明药物与心脑康胶囊相比具有显著性差异；本发明药物加大剂量抑制血栓形成时间延长。
(二)本发明药物对大鼠脑组织毛细血管通透性的影响
Wistar大鼠50只，体重(215±26)g，雌雄各半。随机分为5组，即本发明药物大剂量组0.75g/kg、小剂量组0.375g/kg、阳性对照药物心脑康胶囊组0.375g/kg、脑缺血模型组和假手术组，每组10只。灌胃给药。每日1次，连续给药5天。给药体积为2ml/200g。假手术组和脑缺血模型组给予等体积的生理盐水。于末次给药后1.5h开始实验。动物用25％乌拉坦(1g/kg)腹腔麻醉。颈部正中切口，分离两侧颈总动脉，穿线备用。缺血模型组及各药物实验组则在结扎两侧颈总动脉前5min由尾静脉注射伊文思蓝50mg/kg。假手术组与模型组和各实验组相同要求时间尾静脉注射伊文思蓝50mg/kg，但不结扎两侧颈总动脉。结扎3h后，断头取脑称重，并分别浸泡于甲酰胺溶液(4ml/脑)中，在45℃恒温箱中温育72h，待脑组织中伊文思蓝色素全部浸出，取含伊文思蓝色素液于VZS-723分光光度计620nm处进行比色，测定OD值。结果详见表9
表9本发明药物对大鼠脑组织毛细血管通透性的影响

与假手术组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较△P＜0.05，△△P＜0.01；
与阳性对照组比较○P＜0.01
结果表明：本发明药物能明显改善脑缺血引起的毛细血管通透性，与对照组心脑康胶囊相比较，具有显著性差异。剂量加大对毛细血管通透性增强。
(三)本发明药物对大鼠血小板聚集功能的影响
Wistar大鼠40只，体重(228±19)g，雌雄各半。随机分为4组，即本发明药物大剂量组0.75g/kg、小剂量组0.375g/kg、阳性对照药心脑康胶囊组0.375g/kg及空白对照组，每组10只。灌胃给药。每日1次，连续给药5天。给药体积为2ml/200g。对照组给予等容积的生理盐水。于末次给药后1.5h开始实验。从颈静脉取血2.5ml放入加3.8％枸橼酸钠的试管内(与血液之比为1∶9)，封口，混匀。以1000r/min离心10min，分离出富血小板血浆(PRP)；以3000r/min离心30min，分离出贫血小板血浆(PPP)，对ADP诱导的血小板聚集进行测定，并计算最大聚集率、聚集抑制率和5min解聚率。结果详见表10
表10本发明药物对大鼠血小板聚集功能的影响
  组别  剂量(g/kg)  最大聚集率(％)  5min聚集率(％)  空白对照组  -  64.57±10.89  51.38±9.04  心脑康胶囊  0.38  50.73±15.69  39.72±17.38*  本发明药物(小)  0.38  43.58±12.04  33.58±15.09*△  本发明药物(大)  0.56  41.14±15.46  30.46±20.28**  △
与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与心脑康胶囊比较△P＜0.01。
结果表明：本发明药物对ADP诱导的大鼠血小板聚集有明显的抑制作用，与对照药物心脑康胶囊相比具有显著性差异，加大剂量对血小板的抑制作用增强。
(四)对ADP诱导的大鼠血小板聚集有明显抑制作用
本发明药物对大鼠血液黏度的影响Wistar雄性大鼠40只，体重(231±25)g。随机分为4组，每组10只。灌胃给药。每日1次，连续给药5天。给药体积为2ml/200g。对照组给予等容积的生理盐水。于末次给药后1.5h从颈静脉采血2ml(抗凝)，用R80血液黏度仪测定血液黏度。结果详见表11
表11本发明药物对大鼠血液黏度的影响
  组别  剂量  (g/  kg)  全血黏  度高切  全血黏度  低切  血浆黏度  红细胞  聚集指数  红细胞压  积  空白对照组  -  4.93±  1.24  18.60±2.74  2.30±  0.16  4.48±0.41  58.33±  2.71  心脑康胶囊  0.38  3.98±  0.56*  16.82±2.78  *  1.73±  0.13*  3.91±0.37  *  48.88±  1.75*  本发明药物  (小)  0.38  3.96±  0.76*△  14.79±  3.13*△  1.20±  0.14*△  3.31±0.39  *△  43.12±  1.95*△  本发明药物  (大)  0.56  3.01±  0.59**△  13.58±  2.36**△  1.11±  0.14**△  3.25±  0.16**△  41.64±  1.78**△
与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与心脑康胶囊比较△P＜0.05
结果表明：本发明药物能显著降低大鼠全血黏度、血浆黏度、红细胞压积和红细胞聚集指数，与对照药物心脑康胶囊相比有显著性差异，加大剂量对各项的指数降低增加。
[试验例3]本发明软胶囊剂治疗心脑血管疾病的临床疗效观察试验
临床应用心脑康软胶囊的疗效观察，来观察心绞痛及脑动脉硬化证患者540例，其中治疗组(按照实施例1制备的软胶囊剂)300例，对照组(心脑康胶囊)180例，非对照试验组60例。
(一)对心绞痛及脑动脉硬化证的改善
表12：治疗前后各组心绞痛及脑动脉硬化证疗效比较
  组别  N  疗前  疗后  消失(例数)  治疗组 120  115  11  104**△  对照组 60  55  29  26*  非对照实验组 60  58  41  17
与非对照实验组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与对照组比较△P＜0.05
由表可看出本品与心脑康胶囊比较，对心绞痛及脑动脉硬化证有明显作用。
(二)不同病理时期临床疗效比较
表13：不同病期总疗效比较

□*治疗组与对照组比较P＜0.05
由上表显示，无论急性期还是恢复早期，治疗组疗效均优于对照组。
观察结论
由临床试验结果可以看出，本发明的药物对治疗冠心病，心绞痛及脑动脉硬化症有显著疗效，且临床效果显著高于胶囊剂，说明该药物新剂型充分发挥了该药物组合物的疗效，不仅为治疗心脑血管疾病提供了有一种高效、安全、价格适宜的药品，而且更进一步证明中药治疗心脑血管疾病的药物在合理剂型的应用下，可以使其疗效发生巨大提高。
以下实施例均能够实现以上试验例所述效果
[实施例1]取丹参40g、赤芍30g、制何首乌30g、枸杞子30g、葛根30g、川芎30g、红花20g、泽泻30g、牛膝30g、地龙30g、郁金3g、远志(蜜炙)30g、九节菖蒲30g、酸枣仁(炒)20g、鹿心粉30g、甘草20g，以上十六味，除鹿心粉外，川芎、红花、泽泻、牛膝、郁金、远志、九节菖蒲、酸枣仁、甘草粉碎成100目的细粉、过筛。其余丹参等6味，用动态连续逆流提取方法加4倍量水提取2小时，滤过，滤液浓缩至50℃时相对密度为1.30的稠膏。加入上述细粉，混合，干燥，粉碎至150目，过筛，加入鹿心粉，混匀，将植物油按照2∶1的比例加入药物细粉，再加入3％蜂蜡混合均匀，在滚筒式成型机中成型3小时，成型条件是温度27℃，相对湿度20％，然后用95％的乙醇洗丸、然后置晾盘中晾放干燥24小时，干燥条件26℃，湿度20％，即得软胶囊。
[实施例2]取丹参40g、赤芍30g、制何首乌30g、枸杞子30g、葛根30g、川芎30g、红花20g、泽泻30g、牛膝30g、地龙30g、郁金3g、远志(蜜炙)30g、九节菖蒲30g、酸枣仁(炒)20g、鹿心粉30g、甘草20g，以上十六味，除鹿心粉外，川芎、红花、泽泻、牛膝、郁金、远志、九节菖蒲、酸枣仁、甘草粉碎成100目的细粉、过筛。其余丹参等6味，用动态连续逆流提取方法加4倍量水提取2小时，滤过，滤液浓缩至50℃时相对密度为1.30的稠膏。加入上述细粉，混合，干燥，粉碎至150目，过筛，加入鹿心粉，混匀，将植物油按照3∶2的比例加入药物细粉，再加入3％蜂蜡混合均匀，在滚筒式成型机中成型3小时，成型条件是温度27℃，相对湿度20％，然后用95％的乙醇洗丸、然后置晾盘中晾放干燥24小时，干燥条件26℃，湿度20％，即得软胶囊。
[实施例3]取丹参40g、赤芍30g、制何首乌30g、枸杞子30g、葛根30g、川芎30g、红花20g、泽泻30g、牛膝30g、地龙30g、郁金3g、远志(蜜炙)30g、九节菖蒲30g、酸枣仁(炒)20g、鹿心粉30g、甘草20g，以上十六味，除鹿心粉外，川芎、红花、泽泻、牛膝、郁金、远志、九节菖蒲、酸枣仁、甘草粉碎成100目的细粉、过筛。其余丹参等6味，用动态连续逆流提取方法加4倍量水提取2小时，滤过，滤液浓缩至50℃时相对密度为1.30的稠膏。加入上述细粉，混合，干燥，粉碎至150目，过筛，加入鹿心粉，混匀，将植物油按照2∶2的比例加入药物细粉，再加入3％蜂蜡混合均匀，在滚筒式成型机中成型3小时，成型条件是温度27℃，相对湿度20％，然后用95％的乙醇洗丸、然后置晾盘中晾放干燥24小时，干燥条件26℃，湿度20％，即得软胶囊。
[实施例4]取丹参60g、赤芍45g、制何首乌45g、枸杞子45g、葛根45g、川芎45g、红花30g、泽泻45g、牛膝45g、地龙45g、郁金4.5g、远志(蜜炙)45g、九节菖蒲45g、酸枣仁(炒)30g、鹿心粉45g、甘草30g，以上十六味，除鹿心粉外，川芎、红花、泽泻、牛膝、郁金、远志、九节菖蒲、酸枣仁、甘草粉碎成80目的细粉、过筛。其余丹参等6味，用动态连续逆流提取方法加6倍量水提取2小时，滤过，滤液浓缩至50℃时相对密度为1.35的稠膏。加入上述细粉，混合，干燥，粉碎至100目，过筛，加入鹿心粉，混匀，将植物油按照2∶1的比例加入药物细粉，再加入5％蜂蜡混合均匀，在滚筒式成型机中成型4小时，成型条件是温度25℃，相对湿度15％，然后用90％的乙醇洗丸、然后置晾盘中晾放干燥20小时，干燥条件30℃，湿度25％，即得软胶囊。
[实施例5]取丹参40g、赤芍30g、制何首乌30g、枸杞子30g、葛根30g、川芎30g、红花20g、泽泻30g、牛膝30g、地龙30g、郁金3g、远志(蜜炙)30g、九节菖蒲30g、酸枣仁(炒)20g、鹿心粉30g、甘草20g，以上十六味，除鹿心粉外，川芎、红花、泽泻、牛膝、郁金、远志、九节菖蒲、酸枣仁、甘草粉碎成120目的细粉、过筛。其余丹参等6味，用动态连续逆流提取方法加4倍量水提取3小时，滤过，滤液浓缩至50℃时相对密度为1.30的稠膏。加入上述细粉，混合，干燥，粉碎至200目，过筛，加入鹿心粉，混匀，将植物油按照2∶1的比例加入药物细粉，再加入1％蜂蜡混合均匀，在滚筒式成型机中成型2小时，成型条件是温度30℃，相对湿度25％，然后用99％的乙醇洗丸、然后置晾盘中晾放干燥30小时，干燥条件20℃，湿度15％，即得软胶囊。