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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410713445.4 (22)申请日 2014.11.29 C12N 1/06(2006.01) (71)申请人 黄南概 地址 530008 广西壮族自治区南宁市西乡塘 区双定镇居民组 12 号 申请人 林国友 罗生芳 (72)发明人 黄南概 林国友 罗生芳 (74)专利代理机构 广西南宁汇博专利代理有限 公司 45114 代理人 郭平香 (54) 发明名称 一种小球藻浓缩液的制备方法 (57) 摘要 本发明提供了一种小球藻浓缩液的制备方 法, 其特征在于, 包括以下步骤 :(1) 用水把小球 藻洗净, 放入匀浆机中, 加入小球藻。
2、重量 1-3 倍的 水, 高速匀浆搅拌, 制成小球藻匀浆, 补充水分, 使 得料液比为 1:5-10 ;(2) 加入碱性蛋白酶, 并调整 小球藻匀浆的 pH 为 9-10 ;(3) 加入氯化钠, 使小 球藻匀浆中钠离子浓度为1mol/L ;(4) 在50-60 温度下搅拌 3-4 小时, 使小球藻在自身酶系辅助 外源酶的情况下实现酶解 ;(5) 所得小球藻水解 物, 经离心分离得上清液, 上清夜经浓缩、 灭菌后 制成小球藻浓缩液。本发明利用小球藻自溶特点 辅助外源酶对其自身进行酶解, 所获得的小球藻 浓缩液附加值高, 可作为一种辅料添加至保健饮 料或其他食品中, 营养丰富。 (51)Int.C。
3、l. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书3页 (10)申请公布号 CN 104450523 A (43)申请公布日 2015.03.25 CN 104450523 A 1/1 页 2 1.一种小球藻浓缩液的制备方法, 其特征在于, 包括以下步骤 : (1) 用水把小球藻洗净, 放入匀浆机中, 加入小球藻重量 1-3 倍的水, 高速匀浆搅拌, 制 成小球藻匀浆, 补充水分, 使得料液比为 1:5-10 ; (2) 加入碱性蛋白酶, 并调整小球藻匀浆的 pH 为 9-10 ; (3) 加入氯化钠, 使小球藻匀浆中钠离子浓度为 1mol/L ; (4)。
4、 在 50-60温度下搅拌 3-4 小时, 使小球藻在自身酶系辅助外源酶的情况下实现酶 解 ; (5) 所得小球藻水解物, 经离心分离得上清液, 上清夜经浓缩、 灭菌后制成小球藻浓缩 液。 权 利 要 求 书 CN 104450523 A 2 1/3 页 3 一种小球藻浓缩液的制备方法 技术领域 0001 本发明属于微藻组织自溶技术领域, 具体涉及一种小球藻通过组织自溶制备浓缩 液的方法。 背景技术 0002 小球藻 (Chlorella) 为绿藻门小球藻属普生性单细胞绿藻, 是一种球形单细胞淡 水藻类, 直径 3 8 微米, 是地球上最早的生命之一, 出现在 20 多亿年前, 基因始终没有变。
5、 化, 是一种高效的光合植物, 以光合自养生长繁殖, 分布极广。其含有丰富的蛋白质、 维生 素、 矿物质、 食物纤维、 核酸及叶绿素等, 是维持和促进人体健康所不可缺少的营养素, 特别 是含有令人注目的生物活性物质糖蛋白、 多糖体以及高达 13的核酸等物质 ; 具有增强人 体免疫、 防止病毒增殖、 抑制癌细胞增殖、 抑制血糖上升, 降低血清胆固醇含量, 排除毒素, 迅速修复机体的损伤等功能 ; 富含 CGF( 小球藻生长因子 ), 能迅速恢复机体造成的损伤, 并 可作为食品风味改良剂, 广泛应用于食品及发酵领域。 0003 自溶, 是一种普遍存在的动植物死后组织在没有细菌影响的情况下分解的现象。
6、。 实验和其它研究报道表明, 小球藻中也存在这种现象, 而且, 小球藻藻自溶不仅在死会才会 发生, 在养殖过程中自溶就和小球藻的增殖成一种平衡。 研究和利用小球藻自溶技术, 一方 面可以增加小球藻蛋白质的水解作用, 并且在增加水解的过程中可以减少外源蛋白酶的使 用, 降低生产加工成本和外源生物产品的污染 ; 另一方面, 根据其自溶的所需的环境条件, 可以抑制该现象, 从而降低小球藻在养殖过程中因为自溶而造成的损失, 增加产值和小球 藻的品质。 0004 在检索到的相关文献中, 仅发现广西大学对螺旋藻的组织自溶进行了研究, 并申 请了一项发明专利 ( 发明名称 : 螺旋藻组织自溶的方法, 申请号。
7、 : 201010173975.6), 该专利 公开了以下技术内容 : 一种螺旋藻组织自溶的方法, 其特征是螺旋藻组织自溶的方法步骤 为 : 螺旋藻按质量比 1 0.05 4 加水, 捣碎匀浆, 破碎螺旋藻细胞, 并与水混合均匀 ; 加入 pH 缓冲剂调节 pH 值, 并利用调整剂对 pH 进行微调, 控制螺旋藻匀浆 pH 为 7 11 ; 加入氯化钠, 使螺旋藻匀浆中氯化钠浓度为 0.3-2.0mol/L ; 在 30 65搅拌 0.5 5.0 小时, 使螺旋藻的酶在激活后对其自身蛋白质进行水解, 从而发生自溶反应 ; 所得螺 旋藻自溶水解物, 经喷雾干燥可制成螺旋藻粉 ; 若经离心分离, 。
8、上清液可直接用于制备螺旋 藻饮料。并指出 : 用上述方法制成的螺旋藻粉, 营养更全面而易吸收 ; 制备出的螺旋藻饮料 营养、 口感都好 ; 起到了同时提高使用人的免疫力和生活质量的明显作用。 0005 截至目前, 尚未发现有相关利用小球藻组织自溶制备浓缩液的研究报道。 发明内容 0006 针对现有技术的不足, 本发明旨在提供一种小球藻组织自溶制备浓缩液的方法, 确定小球藻最优的组织自溶条件和酶解条件, 为小球藻深加工产品生产企业提供技术支 撑, 提高小球藻利用率, 降低生产成本, 同时提升产品附加值。 说 明 书 CN 104450523 A 3 2/3 页 4 0007 具体, 本发明的技术。
9、方案是 : 0008 一种小球藻浓缩液的制备方法, 其特征在于, 包括以下步骤 : 0009 (1) 用水把小球藻洗净, 放入匀浆机中, 加入小球藻重量 1-3 倍的水, 高速匀浆搅 拌, 制成小球藻匀浆, 补充水分, 使得料液比为 1:5-10 ; 0010 (2) 加入碱性蛋白酶, 并调整小球藻匀浆的 pH 为 9-10 ; 0011 (3) 加入氯化钠, 使小球藻匀浆中钠离子浓度为 1mol/L ; 0012 (4)在50-60温度下搅拌3-4小时, 使小球藻在自身酶系辅助外源酶的情况下实 现酶解 ; 0013 (5) 所得小球藻水解物, 经离心分离得上清液, 上清夜经浓缩、 灭菌后制成。
10、小球藻 浓缩液。 0014 与现有技术相比, 本发明提供了一种小球藻组织自溶制备浓缩液的方法, 确定了 小球藻最优的组织自溶条件和酶解条件, 为小球藻深加工产品生产企业提供技术支撑, 提 高小球藻利用率, 降低生产成本, 同时提升产品附加值 ; 所获得的小球藻浓缩液可作为一种 辅料添加至保健饮料或其他食品中, 营养丰富。 具体实施方式 0015 以下结合具体实施例对本发明作进一步详细说明, 本实施例仅是对本发明作更清 楚的说明, 而不是对本发明的限制。 0016 实施例 1 0017 本实施例小球藻浓缩液的制备方法包括以下步骤 : 0018 (1) 用水把小球藻洗净, 放入匀浆机中, 加入小球。
11、藻重量 2 倍的水, 高速匀浆搅拌, 制成小球藻匀浆, 补充水分, 使得料液比为 1:8 ; 0019 (2) 加入碱性蛋白酶, 并调整小球藻匀浆的 pH 为 9.5 ; 0020 (3) 加入氯化钠, 使小球藻匀浆中钠离子浓度为 1mol/L ; 0021 (4) 在 55温度下搅拌 3.5 小时, 使小球藻在自身酶系辅助外源酶的情况下实现 酶解 ; 0022 (5) 所得小球藻水解物, 经离心分离得上清液, 上清夜经浓缩、 灭菌后制成小球藻 浓缩液。 0023 实施例 2 0024 本实施例小球藻浓缩液的制备方法包括以下步骤 : 0025 (1) 用水把小球藻洗净, 放入匀浆机中, 加入小。
12、球藻重量 2 倍的水, 高速匀浆搅拌, 制成小球藻匀浆, 补充水分, 使得料液比为 1:10 ; 0026 (2) 加入碱性蛋白酶, 并调整小球藻匀浆的 pH 为 9.5 ; 0027 (3) 加入氯化钠, 使小球藻匀浆中钠离子浓度为 1mol/L ; 0028 (4) 在 60温度下搅拌 3 小时, 使小球藻在自身酶系辅助外源酶的情况下实现酶 解 ; 0029 (5) 所得小球藻水解物, 经离心分离得上清液, 上清夜经浓缩、 灭菌后制成小球藻 浓缩液。 0030 实施例 3 说 明 书 CN 104450523 A 4 3/3 页 5 0031 本实施例小球藻浓缩液的制备方法包括以下步骤 :。
13、 0032 (1) 用水把小球藻洗净, 放入匀浆机中, 加入小球藻重量 1 倍的水, 高速匀浆搅拌, 制成小球藻匀浆, 补充水分, 使得料液比为 1:10 ; 0033 (2) 加入碱性蛋白酶, 并调整小球藻匀浆的 pH 为 10 ; 0034 (3) 加入氯化钠, 使小球藻匀浆中钠离子浓度为 1mol/L ; 0035 (4) 在 50温度下搅拌 4 小时, 使小球藻在自身酶系辅助外源酶的情况下实现酶 解 ; 0036 (5) 所得小球藻水解物, 经离心分离得上清液, 上清夜经浓缩、 灭菌后制成小球藻 浓缩液。 0037 实施例 4 0038 本实施例小球藻浓缩液的制备方法包括以下步骤 : 。
14、0039 (1) 用水把小球藻洗净, 放入匀浆机中, 加入小球藻重量 3 倍的水, 高速匀浆搅拌, 制成小球藻匀浆, 补充水分, 使得料液比为 1:5 ; 0040 (2) 加入碱性蛋白酶, 并调整小球藻匀浆的 pH 为 10 ; 0041 (3) 加入氯化钠, 使小球藻匀浆中钠离子浓度为 1mol/L ; 0042 (4) 在 55温度下搅拌 3.5 小时, 使小球藻在自身酶系辅助外源酶的情况下实现 酶解 ; 0043 (5) 所得小球藻水解物, 经离心分离得上清液, 上清夜经浓缩、 灭菌后制成小球藻 浓缩液。 0044 实施例 5 0045 本实施例小球藻浓缩液的制备方法包括以下步骤 : 。
15、0046 (1) 用水把小球藻洗净, 放入匀浆机中, 加入小球藻重量 2 倍的水, 高速匀浆搅拌, 制成小球藻匀浆, 补充水分, 使得料液比为 1:7 ; 0047 (2) 加入碱性蛋白酶, 并调整小球藻匀浆的 pH 为 9.5 ; 0048 (3) 加入氯化钠, 使小球藻匀浆中钠离子浓度为 1mol/L ; 0049 (4)在55温度下搅拌.5小时, 使小球藻在自身酶系辅助外源酶的情况下实现酶 解 ; 0050 (5) 所得小球藻水解物, 经离心分离得上清液, 上清夜经浓缩、 灭菌后制成小球藻 浓缩液。 0051 实施例 6 0052 本实施例小球藻浓缩液的制备方法包括以下步骤 : 0053 (1) 用水把小球藻洗净, 放入匀浆机中, 加入小球藻重量 3 倍的水, 高速匀浆搅拌, 制成小球藻匀浆, 补充水分, 使得料液比为 1:8 ; 0054 (2) 加入碱性蛋白酶, 并调整小球藻匀浆的 pH 为 9 ; 0055 (3) 加入氯化钠, 使小球藻匀浆中钠离子浓度为 1mol/L ; 0056 (4) 在 60温度下搅拌 4 小时, 使小球藻在自身酶系辅助外源酶的情况下实现酶 解 ; 0057 (5) 所得小球藻水解物, 经离心分离得上清液, 上清夜经浓缩、 灭菌后制成小球藻 浓缩液。 说 明 书 CN 104450523 A 5 。