一种胆汁酸组合物及其制备方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410230930.6

申请日:

2014.05.28

公开号:

CN104041678A

公开日:

2014.09.17

当前法律状态:

授权

有效性:

有权

法律详情:

授权|||实质审查的生效IPC(主分类):A23K 1/165申请日:20140528|||公开

IPC分类号:

A23K1/165; C07J9/00

主分类号:

A23K1/165

申请人:

山东龙昌动物保健品有限公司

发明人:

籍立民

地址:

251100 山东省德州市齐河县齐河经济开发区园区北路1号

优先权:

专利代理机构:

济南千慧专利事务所(普通合伙企业) 37232

代理人:

商福全

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内容摘要

本发明特别公开了一种胆汁酸组合物及其制备方法。该胆汁酸组合物,其有效成分组成包括猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸,所述猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比≥78.0%,鹅去氧胆酸的重量百分比≥18.0%,其余为水分和灰分。本发明的有益效果是:制备方法操作简便,条件温和,制备过程中不使用有毒有害的有机溶剂,易应用于工业化生产,制备出的胆汁酸收率高,纯度高,加入饲料中喂食肉食鸡,可显著改善肉仔鸡的生长性能和屠宰性能,有利于肉仔鸡对脂肪的利用,减少自身脂肪的动用,从而改善肉仔鸡的生长性能和屠宰性能,解决了饲料中脂肪消化吸收的问题,改善了肉鸡胴体品质。

权利要求书

权利要求书
1.  一种胆汁酸组合物,其特征是:其有效成分组成包括猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸,所述猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比≥78.0%,鹅去氧胆酸的重量百分比≥18.0%,其余为水分和灰分。

2.  根据权利要求1所述的胆汁酸组合物的制备方法,其特征是:包括如下步骤:
(1)皂化:将粉碎过40目筛的猪胆粉加入反应釜中,然后加入质量分数为10%的氢氧化钠溶液,每1kg猪胆粉加入10L质量分数为10%的氢氧化钠溶液,加热搅拌,待反应釜中的溶液升温至100℃时开始计时,继续加热搅拌保持沸腾状态12h,然后将反应生成的皂化液冷却至固液分层,将下清液离心分离,剩余固体即为胆汁酸皂化品;
(2)脱色:向反应釜中加入自来水,猪胆粉与自来水的重量比为1:6,加热至80℃并搅拌使胆汁酸皂化品溶解,然后将其打入脱色罐中,加入双氧水,每10kg猪胆粉加入3L双氧水,将溶液混合均匀后,常温下反应24h,反应完毕后,将溶液过滤至酸化槽中;
(3)酸化:向酸化槽中缓慢加入体积分数为10%的盐酸溶液,边加入边搅拌,待溶液PH值为3时停止加盐酸溶液,此时得到白色固形物;
(4)纯化:将步骤(3)制得的白色固形物离心,在离心过程中不断加水冲洗,将附着在白色固形物表面的水溶性杂质去除,水洗至分离出得水相PH值为中性时停止,将离心后的白色固形物在100℃下干燥至水分不高于10%,得胆汁酸组合物粗品;
(5)重结晶:将步骤(4)制得的胆汁酸组合物粗品投入萃取罐中,加入乙酸乙酯溶解,每1kg胆汁酸组合物粗品加入10L乙酸乙酯,搅拌均匀,待胆 汁酸组合物粗品完全溶解后加入无水硫酸钠脱水,每1kg猪胆粉加入0.08g无水硫酸钠,过滤,收集滤液,将滤液进行减压浓缩并回收乙酸乙酯,浓缩液经减压抽滤得到含有固体猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的胆汁酸组合物,将胆汁酸组合物在100℃下干燥至水分不超过1%即得,制得的胆汁酸组合物中猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比≥78.0%,鹅去氧胆酸的重量百分比≥18.0%,其余为水分和灰分。

说明书

说明书一种胆汁酸组合物及其制备方法
(一)技术领域
本发明特别涉及一种胆汁酸组合物及其制备方法。
(二)背景技术
随着饲料工业和畜牧养殖业的不断发展,动物营养水平的研究由围绕氨基酸平衡转向氨基酸和脂肪酸的两大平衡,饲料成本中能量部分所占比例也在不断升高,从而促进了能量饲料产业的发展。脂肪的消化是脂肪利用的前提,而乳化又是脂肪消化的第一步,其程度也决定了脂肪的消化吸收率。为了提高脂肪的利用率,通过不断地研究发现,在饲料中添加乳化剂可以在一定程度上提高脂肪的消化吸收率,于是饲料用乳化剂应运而生。近几年,能量饲料原料尤其是油脂价格不断攀升,如何提高饲料中能量的利用率,减少油脂的添加量,减少高油脂带来的危害以节约成本,成为人们关注的重点。
胆汁酸作为内源性乳化剂可以提高肉鸡生产性能,改善肉鸡胴体品质。目前,制备胆汁酸的方法主要有化学合成法和天然胆汁提取法两类,这两种提取胆汁酸的方法均存在操作复杂、试剂消耗量大、成本较高、收率较低、难以应用于工业化等缺点,制备出的胆汁酸含有的胆汁酸种类繁多(胆汁酸有很多种种类,如石胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、猪胆酸、猪去氧胆酸、熊去氧胆酸等很多种),杂质也较多,纯度较低,某些种类的胆汁酸甚至会对动物机体产生不好的影响,例如石胆酸,是鹅去氧胆酸在肠内通过细菌代谢产生的物质,毒性强,能引起肝胆系统的种种病害,给养殖户造成严重的经济损失。
(三)发明内容
本发明为了弥补现有技术的不足,提供了一种操作简便、条件温和、试剂 消耗量较低并可回收利用、产品纯度高、收率高、易应用于工业化生产、能改善肉鸡生产性能及肉鸡胴体品质的胆汁酸组合物及其制备方法。
本发明是通过如下技术方案实现的:
一种胆汁酸组合物,其有效成分组成包括猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸,所述猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比≥78.0%,鹅去氧胆酸的重量百分比≥18.0%,其余为水分和灰分。
该胆汁酸组合物的制备方法,包括如下步骤:
(1)皂化:将粉碎过40目筛的猪胆粉加入反应釜中,然后加入质量分数为10%的氢氧化钠溶液,每1kg猪胆粉加入10L质量分数为10%的氢氧化钠溶液,加热搅拌,待反应釜中的溶液升温至100℃时开始计时,继续加热搅拌保持沸腾状态12h,然后将反应生成的皂化液冷却至固液分层,将下清液离心分离,剩余固体即为胆汁酸皂化品;
(2)脱色:向反应釜中加入自来水,猪胆粉与自来水的重量比为1:6,加热至80℃并搅拌使胆汁酸皂化品溶解,然后将其打入脱色罐中,加入双氧水,每10kg猪胆粉加入3L双氧水,将溶液混合均匀后,常温下反应24h,反应完毕后,将溶液过滤至酸化槽中;
(3)酸化:向酸化槽中缓慢加入体积分数为10%的盐酸溶液,边加入边搅拌,待溶液PH值为3时停止加盐酸溶液,此时得到白色固形物;
(4)纯化:将步骤(3)制得的白色固形物离心,在离心过程中不断加水冲洗,将附着在白色固形物表面的水溶性杂质去除,水洗至分离出得水相PH值为中性时停止,将离心后的白色固形物在100℃下干燥至水分不高于10%,得胆汁酸组合物粗品;
(5)重结晶:将步骤(4)制得的胆汁酸组合物粗品投入萃取罐中,加入 乙酸乙酯溶解,每1kg胆汁酸组合物粗品加入10L乙酸乙酯,搅拌均匀,待胆汁酸组合物粗品完全溶解后加入无水硫酸钠脱水,每1kg猪胆粉加入0.08g无水硫酸钠,过滤,收集滤液,将滤液进行减压浓缩并回收乙酸乙酯,浓缩液经减压抽滤得到含有固体猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的胆汁酸组合物,将胆汁酸组合物在100℃下干燥至水分不超过1%即得,制得的胆汁酸组合物中猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比≥78.0%,鹅去氧胆酸的重量百分比≥18.0%,其余为水分和灰分。
本发明胆汁酸组合物及其制备方法的有益效果是:制备方法操作简便,条件温和,制备过程中不使用有毒有害的有机溶剂,碱液和乙酸乙酯消耗量较低并可回收利用,易应用于工业化生产,制备出的胆汁酸收率高,纯度高(猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比≥78.0%,鹅去氧胆酸的重量百分比≥18.0%);通过纯化、重结晶将胆汁酸组合物粗品进一步提纯制得含有猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸和猪胆酸这三种主要成分的胆汁酸,加入饲料中喂食肉食鸡,可显著改善肉仔鸡的生长性能和屠宰性能,且显著提高肉仔鸡十二指肠脂蛋白酯酶和脂肪酶活性,抑制激素敏感脂肪酶活性,有利于肉仔鸡对脂肪的利用,减少自身脂肪的动用,从而改善肉仔鸡的生长性能和屠宰性能,解决了饲料中脂肪消化吸收的问题,改善了肉鸡胴体品质。
(四)具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明,但本发明并不局限于此,实施例中的制备方法均为常规制备方法,不再详述。
化学名称:胆汁酸
分子式:C24H40O5(猪胆酸),C24H40O4(猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸)。
分子量:408.57(猪胆酸),392.58(猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸)(依据2001年国际相对原子质量)。
结构式:

实施例1:
该胆汁酸组合物,其有效成分组成包括猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸,所述猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比为80.0%,鹅去氧胆酸的重量百分比为18.0%,其余为水分和灰分(重量百分比总和以100%计算)。
该胆汁酸组合物的制备方法,采用如下步骤:
(1)皂化:将粉碎过40目筛的猪胆粉500kg加入反应釜中,然后加入质量分数为10%的氢氧化钠溶液5000L,加热搅拌,待反应釜中的溶液升温至100℃时开始计时,继续加热搅拌保持沸腾状态12h,然后将反应生成的皂化液冷却至固液分层,用管道离心泵将下清液(即氢氧化钠溶液)离心分离打至储罐中以回收利用,反应釜内剩余固体即为胆汁酸皂化品;
(2)脱色:向反应釜中加入自来水3000kg,加热至80℃并搅拌使胆汁酸皂化品溶解,然后将其打入脱色罐中,加入双氧水150L,将溶液混合均匀后,常温下反应24h,反应完毕后,将溶液过滤至酸化槽中;
(3)酸化:向酸化槽中缓慢加入体积分数为10%的盐酸溶液,边加入边搅拌,待溶液PH值为3时停止加盐酸溶液,此时得到白色固形物;
(4)纯化:将步骤(3)制得的白色固形物用离心机离心,在离心过程中 不断加水冲洗,将附着在白色固形物表面的水溶性杂质去除,水洗至分离出得水相PH值为中性时停止,将离心后的白色固形物放入烘箱中,在100℃下干燥至水分不高于10%,得胆汁酸组合物粗品;
(5)重结晶:将步骤(4)制得的胆汁酸组合物粗品投入萃取罐中,加入乙酸乙酯溶解,每1kg胆汁酸组合物粗品加入10L乙酸乙酯,搅拌均匀,待胆汁酸组合物粗品完全溶解后加入40g无水硫酸钠脱水,过滤,收集滤液,将滤液进行减压浓缩并回收乙酸乙酯,浓缩液经减压抽滤得到含有固体猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的胆汁酸组合物,将胆汁酸组合物在100℃下干燥至水分不超过1%即得,制得的胆汁酸组合物中猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比为80.0%,鹅去氧胆酸的重量百分比为18.0%,其余为水分和灰分(重量百分比总和以100%计算)。
用量:每1kg基础日粮中添加该胆汁酸60-80mg。
实施例2:
该胆汁酸组合物,其有效成分组成包括猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸,所述猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比为78.0%,鹅去氧胆酸的重量百分比为20.0%,其余为水分和灰分(重量百分比总和以100%计算)。
制备方法与用量同实施例1。
实施例3:
该胆汁酸组合物,其有效成分组成包括猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸,所述猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比为79.0%,鹅去氧胆酸的重量百分比为20.0%,其余为水分和灰分(重量百分比总和以100%计算)。
制备方法与用量同实施例1。
在胆汁酸组合物制备过程中,通过粗提取得到的是胆汁酸组合物粗品。在 粗品中,胆汁酸组合物的种类很多很复杂,为了使胆汁酸组合物在畜禽中发挥的作用更加明显,通过纯化和重结晶两步,将胆汁酸组合物粗品中的其他胆汁酸类,例如石胆酸、去氧胆酸等从胆汁酸组合物粗品中除去,只得到含有猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的胆汁酸组合物,使胆汁酸组合物的纯度提高,同时也使胆汁酸组合物的成分更加稳定。
本发明胆汁酸组合物的技术指标:
项目指标胆汁酸总量/(%)≥96.0猪胆酸和猪去氧胆酸总和/(%)≥78.0鹅去氧胆酸/(%)≥18.0干燥失重/(%)≤1.0氯化物(以Cl计)/%≤0.5粗灰分/%≤0.1粒度(通过180μm孔径标准筛)/(%)≥95.0
农业部饲料效价与安全监督检验测试中心(北京)对本发明制备的胆汁酸组合物的有效性进行了验证试验:
试验目的:是以肉仔鸡为靶动物,在不同添加水平(40、60和80mg/kg),以及不同添加时期的情况下,以空白组为对照,研究日粮添加本发明胆汁酸组合物对生长性能、屠宰性能、血液生化指标及消化道酶活的影响,以综合评价本发明制备的胆汁酸组合物的使用效果。
1材料和方法:
1.1试验动物及设计:
试验选用1080只1日龄平均初始体重为43.07g的AA商品代肉仔鸡公雏,随机分为10个处理,每个处理6个重复,每个重复18只鸡。试验分为0-21天和22-42天两个阶段。10个处理组分别于生长前期(0-21d)/生长后期(22-42 d)在基础日粮中添加:0/0、40/0、0/40、60/0、0/60、80/0、0/80、40/40、60/60和80/80mg/kg本发明制备的胆汁酸组合物。
1.2试验日粮:
试验采用玉米-豆粕型基础日粮,基础日粮营养水平参考美国NRC(1994)《家禽的营养需要量》配合而成,试验基础日粮的组成及营养水平如表1。胆汁酸为本发明制备的胆汁酸组合物。配合日粮时,用石粉对胆汁酸组合物进行逐级稀释放大,混匀后,与其他原料混合。
表1基础日粮组成及营养水平
 肉小鸡(0-21日龄)肉中鸡(22-42日龄)日粮组成(%)  玉米60.1361.53豆粕32.5031.70鱼粉2.000.00猪油1.503.00磷酸氢钙1.501.70石粉1.341.1598%DL-蛋氨酸0.230.12食盐0.300.300.5%预混料a0.500.50总计100.00100.00营养水平(%)b  代谢能(kcal/kg)29603020粗蛋白21.5420.021.020.91总磷0.680.66蛋氨酸0.570.43赖氨酸1.211.09
a:给每千克配合饲料提供:维生素A,9000IU;维生素D3,3000IU;维生素E,24mg;维生素K3,1.8mg;维生素B1,2.0mg;核黄素,5.0mg;维生素B6,3.0mg;维生素B12,0.1mg;烟酸,40mg;泛酸,15mg;叶酸,1.0mg;生物素,0.05mg;氯化胆碱,500mg;铁,80mg;铜,20mg;锌,90mg;锰,80mg;碘,0.35mg。
b:除代谢能为计算值,其他数据均为实测值。
1.3饲养管理:
试验于2011年10月27日至12月9日在中国农业大学动物科技学院代谢室进行,试验期为49天。试验鸡采用三层笼养,喂给干粉料,自由采食与饮水。每日24小时光照,试验第1周温度控制在34-35℃,每周下降2℃,最终温度控制在20-26℃之间,相对湿度45%-55%。按照肉仔鸡常规免疫程序免疫和饲养管理,每日观察鸡群健康与精神状况。
1.4测定指标及其方法:
1.4.1生长性能:
试验开始时,称量肉仔鸡的初始体重,21天和42天每个饲养阶段结束时,早上空腹称重并记录耗料量。计算0-21天、22-42天和0-42天平均日增重、平均日采食量和料肉比。
1.4.2屠宰性能:
试验的第42天,每处理随机取6只鸡(每个重复1只)进行屠宰,分别测定屠体重、半净膛重、全净膛重,胸肌、腿肌和腹脂重量,计算屠体率、半净膛率、全净膛率及胸肌、腿肌和腹脂率。各项指标计算公式如下:
屠宰率=(屠体重/活重)×100%
半净膛率=(半净膛重/活重)×100%
全净膛率=(全净膛重/活重)×100%
腿肌率=(腿肌重/全净膛重)×100%
胸肌率=(胸肌重/全净膛重)×100%
腹脂率=(腹脂重/全净膛重)×100%
1.4.3血液生化指标:
分别于试验的第21和42天,每处理随机取6只鸡(每个重复1只),用真空采血管心脏采血,离心制备血清样品,测定甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、球蛋白(GLB)和尿酸(UA)。
1.4.4消化道酶活:
分别于试验的第21和42天,每处理随机取6只鸡(每个重复1只)进行屠宰,采集十二指肠、空场、回肠和肝脏。液氮速冻,用于其酶活的测定。酶活指标包括脂蛋白酯酶(LPL)、脂肪酶(LPS)及激素敏感脂肪酶(HSL)。
1.5统计分析:
试验数据采用SAS8.0统计软件进行单因素方差分析、邓肯氏多重比较分析。P值大于0.05为差异显著。
2结果与分析:
2.1生长性能:
不同生长期饲喂添加不同水平胆汁酸组合物的日粮对肉仔鸡的生长性能影响见表2-1、2-2和2-3。由表2-1、2-2和2-3可见,只在生长前期添加不同水平胆汁酸组合物时,各处理组间平均日增重、平均日采食量和料肉比均没有显著差异(P>0.05)。然而,只在生长后期添加不同水平胆汁酸组合物,或者全期都添加不同水平胆汁酸组合物时,0-21天的各处理组间平均日增重、平均日采食量和料肉比均没有显著差异(P>0.05);但在22-42和0-42天时,与其他日粮处理组比较,在22-42阶段日粮或饲养全阶段日粮添加60和80mg/kg胆汁酸组合物饲喂的肉仔鸡,其平均日增重显著提高,且料肉比显著降低,同时其处理组的肉仔鸡42日龄体重也显著提高(P<0.01)。该结果表明日粮添加高于60mg/kg的胆汁酸组合物时,能进一步有效改善肉仔鸡的生产性能。
2.2屠宰性能:
不同生长期饲喂添加不同水平胆汁酸组合物的日粮肉仔鸡42日龄的屠宰性能测定结果如表3-1、3-2和3-3。由表3-1、3-2和3-3可见,42日龄时,各处理组间的胸肌率没有显著差异(P>0.05)。然而,与其他日粮处理组比较,在22-42阶段日粮和饲养全阶段日粮添加60和80mg/kg胆汁酸组合物饲喂的肉仔鸡,其42日龄时的屠宰率、全净膛率、半净膛率和腿肌率均显著增加,而腹脂率显著降低(P<0.01)。该结果表明日粮添加高于60mg/kg的胆汁酸组合物时,能进一步有效改善肉仔鸡的屠宰性能。
2.3血液生化指标:
不同生长期饲喂添加不同水平胆汁酸组合物的日粮肉仔鸡21和42日龄的血液生化指标测定结果如表4-1、4-2和4-3。由表4-1、4-2和4-3可见,在只前期日粮添加不同水平胆汁酸组合物时,各处理组间肉仔鸡21和42日龄的血清TG、HDL、LDL、GLB和UA均没有显著差异(P>0.05)。然而,只后期日粮添加不同水平胆汁酸组合物,或者全期日粮添加不同水平胆汁酸组合物时,各处理组间肉仔鸡21和42日龄的TG、HDL、LDL和GLB含量均没有显著差异(P>0.05);21日龄时其血清UA含量没有显著差异(P>0.05),而42日龄时,饲喂添加80mg/kg胆汁酸组合物日粮处理组的UA含量显著低于其他处理组(P<0.05)。该结果表明,日粮添加不同水平胆汁酸组合物时,能改善肉仔鸡的血清尿酸水平,但对其他血液生化指标影响不大。
2.4消化道酶活:
不同生长期饲喂添加不同水平胆汁酸组合物的日粮肉仔鸡21和42日龄的消化道酶活测定结果如表5-1、5-2和5-3。由表5-1、5-2和5-3可见,只前期添加不同水平胆汁酸组合物时,21日龄的各处理组间肝脏、空肠和回肠的各消 化酶活以及十二指肠的HSL活性均没有显著差异(P>0.05),但饲喂日粮添加60和80mg/kg胆汁酸组合物肉仔鸡的十二指肠LPL和LPS活性显著高于其他处理组(P<0.01);42日龄的各处理组间肝脏、十二指肠和回肠的各消化酶活以及空肠的HSL和LPS活性均没有显著差异(P>0.05),但饲喂日粮添加60和80mg/kg胆汁酸组合物肉仔鸡的空肠LPL活性显著高于空白组(P<0.01)。只后期添加不同水平胆汁酸组合物时,21日龄各处理组间肝脏、十二指肠、空肠和回肠的各消化酶活性均没有显著差异(P>0.05);42日龄的各处理组间肝脏、空肠和回肠的各消化酶活性均没有显著差异(P>0.05),然而与其他处理组比较,饲喂日粮添加60和80mg/kg胆汁酸组合物肉仔鸡的十二指肠LPL和LPS活性显著增强,HSL活性显著降低(P<0.01)。全期日粮都添加不同水平胆汁酸组合物时,21日龄的各处理组间肝脏、空肠和回肠的各消化酶以及十二指肠的HSL活性均没有显著差异(P>0.05),但饲喂日粮添加60和80mg/kg胆汁酸组合物肉仔鸡的十二指肠LPL和LPS活性显著高于其他处理组(P<0.01);42日龄的各处理组间肝脏、空肠和回肠的各消化酶活性均没有显著差异(P>0.05),然而与其他处理组比较,饲喂日粮添加60和80mg/kg胆汁酸组合物肉仔鸡的十二指肠LPL和LPS活性显著增强,HSL活性显著降低(P<0.01)。该结果表明日粮添加高于60mg/kg胆汁酸组合物时,能增强肉仔鸡十二指肠道消化酶活性,进而提高肉仔鸡对脂肪的利用率,但是,日粮添加高于60mg/kg胆汁酸组合物时,可能会抑制内源性胆汁的分泌,进而影响部分胰腺消化酶(如HSL)的分泌。
表2-1前期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡生长性能的影响

注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表2-2后期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡生长性能的影响

注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表2-3全期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡生长性能的影响

注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表3-1前期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡屠宰性能的影响

注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表3-2后期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡屠宰性能的影响


注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表3-3全期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡屠宰性能的影响

注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表4-1前期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡血液生化指标的影响

注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表4-2后期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡血液生化指标的影响


注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表4-3全期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡血液生化指标的影响

注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表5-1前期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡消化道酶活的影响


注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表5-2后期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡消化道酶活的影响


注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表5-3全期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡消化道酶活的影响

注:同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);未标明字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
3结论:
3.1生长前期(0-21d)日粮添加0、40、60、80mg/kg胆汁酸组合物对肉仔鸡的平均日增重、平均日采食量和料肉比影响不显著(P>0.05),然而在生长后期(22-42d)日粮添加高于60mg/kg胆汁酸组合物时,能进一步有效改善肉仔鸡的生产性能,并且添加高于60mg/kg的胆汁酸组合物时,能进一步有效改善肉仔鸡的42日龄的屠宰性能。
3.2日粮添加不同水平胆汁酸组合物时,能改善肉仔鸡的血清尿酸水平,但对其他血液生化指标影响不大。
3.3日粮添加高于60mg/kg胆汁酸组合物时,能增强肉仔鸡十二指肠道消化酶活性,进而提高肉仔鸡对脂肪的利用率,但是,日粮添加高于60mg/kg胆汁酸组合物时,可能会抑制内源性胆汁的分泌,进而影响部分胰腺消化酶(如HSL)的分泌。
上述试验结果表明,在本试验条件下,肉仔鸡生长后期(22-42天)或全期(0-42天)日粮添加60-80mg/kg胆汁酸组合物时,可显著改善肉仔鸡的生长性能和屠宰性能,且显著提高肉仔鸡十二指肠脂蛋白酯酶和脂肪酶活性,抑制激素敏感脂肪酶活性,这将有利于肉仔鸡对脂肪的利用,减少自身脂肪的动用,从而改善肉仔鸡的生长性能和屠宰性能。肉仔鸡生长后期或全期,胆汁酸组合物推荐添加量为60-80mg/kg。

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1、(10)申请公布号 CN 104041678 A (43)申请公布日 2014.09.17 CN 104041678 A (21)申请号 201410230930.6 (22)申请日 2014.05.28 A23K 1/165(2006.01) C07J 9/00(2006.01) (71)申请人 山东龙昌动物保健品有限公司 地址 251100 山东省德州市齐河县齐河经济 开发区园区北路 1 号 (72)发明人 籍立民 (74)专利代理机构 济南千慧专利事务所 ( 普通 合伙企业 ) 37232 代理人 商福全 (54) 发明名称 一种胆汁酸组合物及其制备方法 (57) 摘要 本发明特别公开了。

2、一种胆汁酸组合物及其制 备方法。该胆汁酸组合物, 其有效成分组成包括 猪胆酸、 猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸, 所述猪胆酸 和猪去氧胆酸之和的重量百分比 78.0, 鹅去 氧胆酸的重量百分比 18.0, 其余为水分和灰 分。本发明的有益效果是 : 制备方法操作简便, 条 件温和, 制备过程中不使用有毒有害的有机溶剂, 易应用于工业化生产, 制备出的胆汁酸收率高, 纯 度高, 加入饲料中喂食肉食鸡, 可显著改善肉仔鸡 的生长性能和屠宰性能, 有利于肉仔鸡对脂肪的 利用, 减少自身脂肪的动用, 从而改善肉仔鸡的生 长性能和屠宰性能, 解决了饲料中脂肪消化吸收 的问题, 改善了肉鸡胴体品质。 (51)In。

3、t.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 15 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书15页 (10)申请公布号 CN 104041678 A CN 104041678 A 1/1 页 2 1. 一种胆汁酸组合物, 其特征是 : 其有效成分组成包括猪胆酸、 猪去氧胆酸和鹅去氧 胆酸, 所述猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比 78.0, 鹅去氧胆酸的重量百分比 18.0, 其余为水分和灰分。 2. 根据权利要求 1 所述的胆汁酸组合物的制备方法, 其特征是 : 包括如下步骤 : (1) 皂化 : 将粉碎过 40 目筛的猪胆粉加入反应釜中, 然后加入质。

4、量分数为 10的氢氧 化钠溶液, 每 1kg 猪胆粉加入 10L 质量分数为 10的氢氧化钠溶液, 加热搅拌, 待反应釜中 的溶液升温至 100时开始计时, 继续加热搅拌保持沸腾状态 12h, 然后将反应生成的皂化 液冷却至固液分层, 将下清液离心分离, 剩余固体即为胆汁酸皂化品 ; (2) 脱色 : 向反应釜中加入自来水, 猪胆粉与自来水的重量比为 1 : 6, 加热至 80并搅 拌使胆汁酸皂化品溶解, 然后将其打入脱色罐中, 加入双氧水, 每 10kg 猪胆粉加入 3L 双氧 水, 将溶液混合均匀后, 常温下反应 24h, 反应完毕后, 将溶液过滤至酸化槽中 ; (3) 酸化 : 向酸化槽。

5、中缓慢加入体积分数为 10的盐酸溶液, 边加入边搅拌, 待溶液 PH 值为 3 时停止加盐酸溶液, 此时得到白色固形物 ; (4) 纯化 : 将步骤 (3) 制得的白色固形物离心, 在离心过程中不断加水冲洗, 将附着在 白色固形物表面的水溶性杂质去除, 水洗至分离出得水相 PH 值为中性时停止, 将离心后的 白色固形物在 100下干燥至水分不高于 10, 得胆汁酸组合物粗品 ; (5) 重结晶 : 将步骤 (4) 制得的胆汁酸组合物粗品投入萃取罐中, 加入乙酸乙酯溶解, 每 1kg 胆汁酸组合物粗品加入 10L 乙酸乙酯, 搅拌均匀, 待胆汁酸组合物粗品完全溶解后 加入无水硫酸钠脱水, 每 1。

6、kg 猪胆粉加入 0.08g 无水硫酸钠, 过滤, 收集滤液, 将滤液进行 减压浓缩并回收乙酸乙酯, 浓缩液经减压抽滤得到含有固体猪胆酸、 猪去氧胆酸和鹅去氧 胆酸的胆汁酸组合物, 将胆汁酸组合物在 100下干燥至水分不超过 1即得, 制得的胆汁 酸组合物中猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比 78.0, 鹅去氧胆酸的重量百分比 18.0, 其余为水分和灰分。 权 利 要 求 书 CN 104041678 A 2 1/15 页 3 一种胆汁酸组合物及其制备方法 ( 一 ) 技术领域 0001 本发明特别涉及一种胆汁酸组合物及其制备方法。 ( 二 ) 背景技术 0002 随着饲料工业和畜牧养殖业的。

7、不断发展, 动物营养水平的研究由围绕氨基酸平衡 转向氨基酸和脂肪酸的两大平衡, 饲料成本中能量部分所占比例也在不断升高, 从而促进 了能量饲料产业的发展。 脂肪的消化是脂肪利用的前提, 而乳化又是脂肪消化的第一步, 其 程度也决定了脂肪的消化吸收率。 为了提高脂肪的利用率, 通过不断地研究发现, 在饲料中 添加乳化剂可以在一定程度上提高脂肪的消化吸收率, 于是饲料用乳化剂应运而生。近几 年, 能量饲料原料尤其是油脂价格不断攀升, 如何提高饲料中能量的利用率, 减少油脂的添 加量, 减少高油脂带来的危害以节约成本, 成为人们关注的重点。 0003 胆汁酸作为内源性乳化剂可以提高肉鸡生产性能, 改。

8、善肉鸡胴体品质。 目前, 制备 胆汁酸的方法主要有化学合成法和天然胆汁提取法两类, 这两种提取胆汁酸的方法均存在 操作复杂、 试剂消耗量大、 成本较高、 收率较低、 难以应用于工业化等缺点, 制备出的胆汁酸 含有的胆汁酸种类繁多 ( 胆汁酸有很多种种类, 如石胆酸、 鹅去氧胆酸、 去氧胆酸、 猪胆酸、 猪去氧胆酸、 熊去氧胆酸等很多种 ), 杂质也较多, 纯度较低, 某些种类的胆汁酸甚至会对动 物机体产生不好的影响, 例如石胆酸, 是鹅去氧胆酸在肠内通过细菌代谢产生的物质, 毒性 强, 能引起肝胆系统的种种病害, 给养殖户造成严重的经济损失。 ( 三 ) 发明内容 0004 本发明为了弥补现有。

9、技术的不足, 提供了一种操作简便、 条件温和、 试剂消耗量较 低并可回收利用、 产品纯度高、 收率高、 易应用于工业化生产、 能改善肉鸡生产性能及肉鸡 胴体品质的胆汁酸组合物及其制备方法。 0005 本发明是通过如下技术方案实现的 : 0006 一种胆汁酸组合物, 其有效成分组成包括猪胆酸、 猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸, 所述 猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比 78.0, 鹅去氧胆酸的重量百分比 18.0, 其 余为水分和灰分。 0007 该胆汁酸组合物的制备方法, 包括如下步骤 : 0008 (1) 皂化 : 将粉碎过 40 目筛的猪胆粉加入反应釜中, 然后加入质量分数为 10的 氢氧化钠溶液。

10、, 每 1kg 猪胆粉加入 10L 质量分数为 10的氢氧化钠溶液, 加热搅拌, 待反应 釜中的溶液升温至 100时开始计时, 继续加热搅拌保持沸腾状态 12h, 然后将反应生成的 皂化液冷却至固液分层, 将下清液离心分离, 剩余固体即为胆汁酸皂化品 ; 0009 (2) 脱色 : 向反应釜中加入自来水, 猪胆粉与自来水的重量比为 1 : 6, 加热至 80 并搅拌使胆汁酸皂化品溶解, 然后将其打入脱色罐中, 加入双氧水, 每 10kg 猪胆粉加入 3L 双氧水, 将溶液混合均匀后, 常温下反应 24h, 反应完毕后, 将溶液过滤至酸化槽中 ; 0010 (3) 酸化 : 向酸化槽中缓慢加入体。

11、积分数为 10的盐酸溶液, 边加入边搅拌, 待溶 说 明 书 CN 104041678 A 3 2/15 页 4 液 PH 值为 3 时停止加盐酸溶液, 此时得到白色固形物 ; 0011 (4) 纯化 : 将步骤 (3) 制得的白色固形物离心, 在离心过程中不断加水冲洗, 将附 着在白色固形物表面的水溶性杂质去除, 水洗至分离出得水相 PH 值为中性时停止, 将离心 后的白色固形物在 100下干燥至水分不高于 10, 得胆汁酸组合物粗品 ; 0012 (5) 重结晶 : 将步骤 (4) 制得的胆汁酸组合物粗品投入萃取罐中, 加入乙酸乙酯溶 解, 每 1kg 胆汁酸组合物粗品加入 10L 乙酸乙。

12、酯, 搅拌均匀, 待胆汁酸组合物粗品完全溶解 后加入无水硫酸钠脱水, 每 1kg 猪胆粉加入 0.08g 无水硫酸钠, 过滤, 收集滤液, 将滤液进 行减压浓缩并回收乙酸乙酯, 浓缩液经减压抽滤得到含有固体猪胆酸、 猪去氧胆酸和鹅去 氧胆酸的胆汁酸组合物, 将胆汁酸组合物在 100下干燥至水分不超过 1即得, 制得的胆 汁酸组合物中猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比 78.0, 鹅去氧胆酸的重量百分比 18.0, 其余为水分和灰分。 0013 本发明胆汁酸组合物及其制备方法的有益效果是 : 制备方法操作简便, 条件温和, 制备过程中不使用有毒有害的有机溶剂, 碱液和乙酸乙酯消耗量较低并可回收利。

13、用, 易应 用于工业化生产, 制备出的胆汁酸收率高, 纯度高 ( 猪胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分 比 78.0, 鹅去氧胆酸的重量百分比 18.0 ) ; 通过纯化、 重结晶将胆汁酸组合物粗品 进一步提纯制得含有猪去氧胆酸、 鹅去氧胆酸和猪胆酸这三种主要成分的胆汁酸, 加入饲 料中喂食肉食鸡, 可显著改善肉仔鸡的生长性能和屠宰性能, 且显著提高肉仔鸡十二指肠 脂蛋白酯酶和脂肪酶活性, 抑制激素敏感脂肪酶活性, 有利于肉仔鸡对脂肪的利用, 减少自 身脂肪的动用, 从而改善肉仔鸡的生长性能和屠宰性能, 解决了饲料中脂肪消化吸收的问 题, 改善了肉鸡胴体品质。 ( 四 ) 具体实施方式 0014 。

14、下面结合实施例对本发明作进一步说明, 但本发明并不局限于此, 实施例中的制 备方法均为常规制备方法, 不再详述。 0015 化学名称 : 胆汁酸 0016 分子式 : C24H40O5( 猪胆酸 ), C24H40O4( 猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸 )。 0017 分子量 : 408.57( 猪胆酸 ), 392.58( 猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸 )( 依据 2001 年国 际相对原子质量 )。 0018 结构式 : 0019 0020 实施例 1 : 0021 该胆汁酸组合物, 其有效成分组成包括猪胆酸、 猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸, 所述猪 胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比为 80.0, 鹅去氧胆酸。

15、的重量百分比为 18.0, 其余 说 明 书 CN 104041678 A 4 3/15 页 5 为水分和灰分 ( 重量百分比总和以 100计算 )。 0022 该胆汁酸组合物的制备方法, 采用如下步骤 : 0023 (1) 皂化 : 将粉碎过 40 目筛的猪胆粉 500kg 加入反应釜中, 然后加入质量分数为 10的氢氧化钠溶液 5000L, 加热搅拌, 待反应釜中的溶液升温至 100时开始计时, 继续 加热搅拌保持沸腾状态 12h, 然后将反应生成的皂化液冷却至固液分层, 用管道离心泵将下 清液 ( 即氢氧化钠溶液 ) 离心分离打至储罐中以回收利用, 反应釜内剩余固体即为胆汁酸 皂化品 ;。

16、 0024 (2) 脱色 : 向反应釜中加入自来水 3000kg, 加热至 80并搅拌使胆汁酸皂化品溶 解, 然后将其打入脱色罐中, 加入双氧水 150L, 将溶液混合均匀后, 常温下反应 24h, 反应完 毕后, 将溶液过滤至酸化槽中 ; 0025 (3) 酸化 : 向酸化槽中缓慢加入体积分数为 10的盐酸溶液, 边加入边搅拌, 待溶 液 PH 值为 3 时停止加盐酸溶液, 此时得到白色固形物 ; 0026 (4) 纯化 : 将步骤 (3) 制得的白色固形物用离心机离心, 在离心过程中不断加水 冲洗, 将附着在白色固形物表面的水溶性杂质去除, 水洗至分离出得水相 PH 值为中性时停 止, 将。

17、离心后的白色固形物放入烘箱中, 在 100下干燥至水分不高于 10, 得胆汁酸组合 物粗品 ; 0027 (5) 重结晶 : 将步骤 (4) 制得的胆汁酸组合物粗品投入萃取罐中, 加入乙酸乙酯 溶解, 每 1kg 胆汁酸组合物粗品加入 10L 乙酸乙酯, 搅拌均匀, 待胆汁酸组合物粗品完全溶 解后加入 40g 无水硫酸钠脱水, 过滤, 收集滤液, 将滤液进行减压浓缩并回收乙酸乙酯, 浓 缩液经减压抽滤得到含有固体猪胆酸、 猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的胆汁酸组合物, 将胆汁 酸组合物在 100下干燥至水分不超过 1即得, 制得的胆汁酸组合物中猪胆酸和猪去氧 胆酸之和的重量百分比为 80.0, 鹅去氧。

18、胆酸的重量百分比为 18.0, 其余为水分和灰分 ( 重量百分比总和以 100计算 )。 0028 用量 : 每 1kg 基础日粮中添加该胆汁酸 60-80mg。 0029 实施例 2 : 0030 该胆汁酸组合物, 其有效成分组成包括猪胆酸、 猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸, 所述猪 胆酸和猪去氧胆酸之和的重量百分比为 78.0, 鹅去氧胆酸的重量百分比为 20.0, 其余 为水分和灰分 ( 重量百分比总和以 100计算 )。 0031 制备方法与用量同实施例 1。 0032 实施例 3 : 0033 该胆汁酸组合物, 其有效成分组成包括猪胆酸、 猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸, 所述猪 胆酸和猪去氧胆酸之。

19、和的重量百分比为 79.0, 鹅去氧胆酸的重量百分比为 20.0, 其余 为水分和灰分 ( 重量百分比总和以 100计算 )。 0034 制备方法与用量同实施例 1。 0035 在胆汁酸组合物制备过程中, 通过粗提取得到的是胆汁酸组合物粗品。 在粗品中, 胆汁酸组合物的种类很多很复杂, 为了使胆汁酸组合物在畜禽中发挥的作用更加明显, 通 过纯化和重结晶两步, 将胆汁酸组合物粗品中的其他胆汁酸类, 例如石胆酸、 去氧胆酸等从 胆汁酸组合物粗品中除去, 只得到含有猪胆酸、 猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的胆汁酸组合物, 使胆汁酸组合物的纯度提高, 同时也使胆汁酸组合物的成分更加稳定。 说 明 书 CN 1。

20、04041678 A 5 4/15 页 6 0036 本发明胆汁酸组合物的技术指标 : 0037 项目指标 胆汁酸总量 /( ) 96.0 猪胆酸和猪去氧胆酸总和 /( ) 78.0 鹅去氧胆酸 /( ) 18.0 干燥失重 /( ) 1.0 氯化物 ( 以 Cl 计 )/ 0.5 粗灰分 / 0.1 粒度 ( 通过 180m 孔径标准筛 )/( ) 95.0 0038 农业部饲料效价与安全监督检验测试中心(北京)对本发明制备的胆汁酸组合物 的有效性进行了验证试验 : 0039 试验目的 : 是以肉仔鸡为靶动物, 在不同添加水平 (40、 60 和 80mg/kg), 以及不同 添加时期的情况。

21、下, 以空白组为对照, 研究日粮添加本发明胆汁酸组合物对生长性能、 屠宰 性能、 血液生化指标及消化道酶活的影响, 以综合评价本发明制备的胆汁酸组合物的使用 效果。 0040 1 材料和方法 : 0041 1.1 试验动物及设计 : 0042 试验选用 1080 只 1 日龄平均初始体重为 43.07g 的 AA 商品代肉仔鸡公雏, 随机 分为 10 个处理, 每个处理 6 个重复, 每个重复 18 只鸡。试验分为 0-21 天和 22-42 天两个 阶段。10 个处理组分别于生长前期 (0-21d)/ 生长后期 (22-42d) 在基础日粮中添加 : 0/0、 40/0、 0/40、 60/。

22、0、 0/60、 80/0、 0/80、 40/40、 60/60 和 80/80mg/kg 本发明制备的胆汁酸组合 物。 0043 1.2 试验日粮 : 0044 试验采用玉米 - 豆粕型基础日粮, 基础日粮营养水平参考美国 NRC(1994) 家禽的 营养需要量 配合而成, 试验基础日粮的组成及营养水平如表 1。胆汁酸为本发明制备的胆 汁酸组合物。配合日粮时, 用石粉对胆汁酸组合物进行逐级稀释放大, 混匀后, 与其他原料 混合。 0045 表 1 基础日粮组成及营养水平 0046 肉小鸡 (0-21 日龄 )肉中鸡 (22-42 日龄 ) 日粮组成 ( ) 说 明 书 CN 1040416。

23、78 A 6 5/15 页 7 玉米60.1361.53 豆粕32.5031.70 鱼粉2.000.00 猪油1.503.00 磷酸氢钙1.501.70 石粉1.341.15 98 DL- 蛋氨酸0.230.12 食盐0.300.30 0.5预混料 a 0.500.50 总计100.00100.00 营养水平 ( )b 代谢能 (kcal/kg)29603020 粗蛋白21.5420.02 钙1.020.91 总磷0.680.66 蛋氨酸0.570.43 赖氨酸1.211.09 0047 a : 给每千克配合饲料提供 : 维生素 A, 9000IU ; 维生素 D3, 3000IU ; 维生素。

24、 E, 24mg ; 维生素K3, 1.8mg ; 维生素B1, 2.0mg ; 核黄素, 5.0mg ; 维生素B6, 3.0mg ; 维生素B12, 0.1mg ; 烟 酸, 40mg ; 泛酸, 15mg ; 叶酸, 1.0mg ; 生物素, 0.05mg ; 氯化胆碱, 500mg ; 铁, 80mg ; 铜, 20mg ; 锌, 90mg ; 锰, 80mg ; 碘, 0.35mg。 0048 b : 除代谢能为计算值, 其他数据均为实测值。 0049 1.3 饲养管理 : 0050 试验于 2011 年 10 月 27 日至 12 月 9 日在中国农业大学动物科技学院代谢室进 行,。

25、 试验期为 49 天。试验鸡采用三层笼养, 喂给干粉料, 自由采食与饮水。每日 24 小时光 照, 试验第1周温度控制在34-35, 每周下降2, 最终温度控制在20-26之间, 相对湿度 45 -55。按照肉仔鸡常规免疫程序免疫和饲养管理, 每日观察鸡群健康与精神状况。 0051 1.4 测定指标及其方法 : 说 明 书 CN 104041678 A 7 6/15 页 8 0052 1.4.1 生长性能 : 0053 试验开始时, 称量肉仔鸡的初始体重, 21 天和 42 天每个饲养阶段结束时, 早上空 腹称重并记录耗料量。计算 0-21 天、 22-42 天和 0-42 天平均日增重、 平。

26、均日采食量和料肉 比。 0054 1.4.2 屠宰性能 : 0055 试验的第 42 天, 每处理随机取 6 只鸡 ( 每个重复 1 只 ) 进行屠宰, 分别测定屠体 重、 半净膛重、 全净膛重, 胸肌、 腿肌和腹脂重量, 计算屠体率、 半净膛率、 全净膛率及胸肌、 腿肌和腹脂率。各项指标计算公式如下 : 0056 屠宰率 ( 屠体重 / 活重 )100 0057 半净膛率 ( 半净膛重 / 活重 )100 0058 全净膛率 ( 全净膛重 / 活重 )100 0059 腿肌率 ( 腿肌重 / 全净膛重 )100 0060 胸肌率 ( 胸肌重 / 全净膛重 )100 0061 腹脂率 ( 腹脂。

27、重 / 全净膛重 )100 0062 1.4.3 血液生化指标 : 0063 分别于试验的第 21 和 42 天, 每处理随机取 6 只鸡 ( 每个重复 1 只 ), 用真空采血 管心脏采血, 离心制备血清样品, 测定甘油三酯 (TG)、 高密度脂蛋白 (HDL)、 低密度脂蛋白 (LDL)、 球蛋白 (GLB) 和尿酸 (UA)。 0064 1.4.4 消化道酶活 : 0065 分别于试验的第 21 和 42 天, 每处理随机取 6 只鸡 ( 每个重复 1 只 ) 进行屠宰, 采 集十二指肠、 空场、 回肠和肝脏。液氮速冻, 用于其酶活的测定。酶活指标包括脂蛋白酯酶 (LPL)、 脂肪酶 (。

28、LPS) 及激素敏感脂肪酶 (HSL)。 0066 1.5 统计分析 : 0067 试验数据采用 SAS8.0 统计软件进行单因素方差分析、 邓肯氏多重比较分析。P 值 大于 0.05 为差异显著。 0068 2 结果与分析 : 0069 2.1 生长性能 : 0070 不同生长期饲喂添加不同水平胆汁酸组合物的日粮对肉仔鸡的生长性能影响见 表2-1、 2-2和2-3。 由表2-1、 2-2和2-3可见, 只在生长前期添加不同水平胆汁酸组合物时, 各处理组间平均日增重、 平均日采食量和料肉比均没有显著差异 (P0.05)。然而, 只在生 长后期添加不同水平胆汁酸组合物, 或者全期都添加不同水平胆。

29、汁酸组合物时, 0-21 天的 各处理组间平均日增重、 平均日采食量和料肉比均没有显著差异 (P0.05) ; 但在 22-42 和 0-42 天时, 与其他日粮处理组比较, 在 22-42 阶段日粮或饲养全阶段日粮添加 60 和 80mg/ kg 胆汁酸组合物饲喂的肉仔鸡, 其平均日增重显著提高, 且料肉比显著降低, 同时其处理组 的肉仔鸡 42 日龄体重也显著提高 (P0.05)。 然而, 与其他日粮处理组比较, 在22-42阶段日粮和饲养全阶段日粮 添加 60 和 80mg/kg 胆汁酸组合物饲喂的肉仔鸡, 其 42 日龄时的屠宰率、 全净膛率、 半净膛 率和腿肌率均显著增加, 而腹脂率。

30、显著降低 (P0.05)。 然而, 只后期日粮添加不同水平胆汁酸组合物, 或者全期日粮添加不同 水平胆汁酸组合物时, 各处理组间肉仔鸡 21 和 42 日龄的 TG、 HDL、 LDL 和 GLB 含量均没有显 著差异 (P0.05) ; 21 日龄时其血清 UA 含量没有显著差异 (P0.05), 而 42 日龄时, 饲喂添 加 80mg/kg 胆汁酸组合物日粮处理组的 UA 含量显著低于其他处理组 (P0.05), 但饲喂日粮添加60和80mg/kg胆汁酸组合物肉仔鸡的十二指肠 LPL 和 LPS 活性显著高于其他处理组 (P0.05), 但饲喂日粮添加 60 和80mg/kg胆汁酸组合物。

31、肉仔鸡的空肠LPL活性显著高于空白组(P0.05) ; 42 日龄的各处理组间肝脏、 空肠和回肠的各消化酶活性均没有显 著差异 (P0.05), 然而与其他处理组比较, 饲喂日粮添加 60 和 80mg/kg 胆汁酸组合物肉仔 鸡的十二指肠 LPL 和 LPS 活性显著增强, HSL 活性显著降低 (P0.05), 但饲喂日粮添加60和80mg/kg胆汁酸组合物肉仔鸡 的十二指肠 LPL 和 LPS 活性显著高于其他处理组 (P0.05), 然而与其他处理组比较, 饲喂日粮添 加 60 和 80mg/kg 胆汁酸组合物肉仔鸡的十二指肠 LPL 和 LPS 活性显著增强, HSL 活性显著 降低。

32、 (P0.05)。 0080 表 2-2 后期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡生长性能的影响 0081 0082 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 0083 表 2-3 全期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡生长性能的影响 说 明 书 CN 104041678 A 10 9/15 页 11 0084 0085 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 0086 表 3-1 前期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡屠宰性能的影响 0087 0088 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 0089 表 3-2 后期。

33、日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡屠宰性能的影响 0090 说 明 书 CN 104041678 A 11 10/15 页 12 0091 0092 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 0093 表 3-3 全期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡屠宰性能的影响 0094 0095 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 0096 表 4-1 前期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡血液生化指标的影响 0097 0098 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 0099 表 4-2 后期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对。

34、肉仔鸡血液生化指标的影响 0100 说 明 书 CN 104041678 A 12 11/15 页 13 0101 0102 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 0103 表 4-3 全期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡血液生化指标的影响 0104 0105 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 0106 表 5-1 前期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡消化道酶活的影响 0107 说 明 书 CN 104041678 A 13 12/15 页 14 0108 0109 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 。

35、0110 表 5-2 后期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡消化道酶活的影响 0111 说 明 书 CN 104041678 A 14 13/15 页 15 0112 0113 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 0114 表 5-3 全期日粮添加不同水平胆汁酸组合物对肉仔鸡消化道酶活的影响 0115 说 明 书 CN 104041678 A 15 14/15 页 16 0116 注 : 同行数据中肩标不同小写字母之间差异显著(P0.05)。 0117 3 结论 : 0118 3.1 生长前期 (0-21d) 日粮添加 0、 40、 60、 80mg/kg 胆汁酸。

36、组合物对肉仔鸡的平均 日增重、 平均日采食量和料肉比影响不显著 (P0.05), 然而在生长后期 (22-42d) 日粮添加 高于 60mg/kg 胆汁酸组合物时, 能进一步有效改善肉仔鸡的生产性能, 并且添加高于 60mg/ kg 的胆汁酸组合物时, 能进一步有效改善肉仔鸡的 42 日龄的屠宰性能。 0119 3.2 日粮添加不同水平胆汁酸组合物时, 能改善肉仔鸡的血清尿酸水平, 但对其他 血液生化指标影响不大。 0120 3.3 日粮添加高于 60mg/kg 胆汁酸组合物时, 能增强肉仔鸡十二指肠道消化酶活 性, 进而提高肉仔鸡对脂肪的利用率, 但是, 日粮添加高于 60mg/kg 胆汁酸。

37、组合物时, 可能 会抑制内源性胆汁的分泌, 进而影响部分胰腺消化酶 ( 如 HSL) 的分泌。 0121 上述试验结果表明, 在本试验条件下, 肉仔鸡生长后期 (22-42 天 ) 或全期 (0-42 说 明 书 CN 104041678 A 16 15/15 页 17 天 ) 日粮添加 60-80mg/kg 胆汁酸组合物时, 可显著改善肉仔鸡的生长性能和屠宰性能, 且 显著提高肉仔鸡十二指肠脂蛋白酯酶和脂肪酶活性, 抑制激素敏感脂肪酶活性, 这将有利 于肉仔鸡对脂肪的利用, 减少自身脂肪的动用, 从而改善肉仔鸡的生长性能和屠宰性能。 肉 仔鸡生长后期或全期, 胆汁酸组合物推荐添加量为 60-80mg/kg。 说 明 书 CN 104041678 A 17 。

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