本发明是关于新的酰三肽作为免疫刺激和抗菌剂的用途;它的药用盐;中间体及其制备方法。 较新的免疫药物学领域，特别是涉及免疫调制的部分正在迅速发展。对包括四肽，特天素在内各种天然化合物作了研究，化学上已知的有N2-〔1-（N2-L苏氨酰-L赖氨酰基）-L-脯氨酰基〕-L-精氨酸。合成肽糖衍生物已引起许多注意，特别是通称为胞壁酰二肽的化合物。在作为免疫调制剂特别是免疫刺激剂研究过的化合物的大量摘要中，人们注意到：
Dukar et al.，Annu.Rep.Med.Chem.，
14，146-167（1979），Lederer，J.Med.Chem.，
23，819-825（1980）and to J.Kralovec，
Drugs of the Future，8，615-638（1983）。
免疫刺激剂肽化物在许多专利说明书中都有描述。
L-丙氨酰-α-戊二酸N-酰基二肽于1981年1月15日公布于德专利3，024，355中。
含有D-丙氨酰-L-谷氨酰部分或L-丙氨酰-D-谷氨酰基部分的四，五肽分别公布于1981年2月4日的英国专利2，053，231和1981年1月8日公布的德国专利3，024，281中。
C-末端氨基酸是赖氨酸或二氨基庚二酸的N-酰基-L-丙氨酰-α-D-谷氨酰基三肽衍生物，公布于1981年1月15日，德国专利3，024，369中。
由N-乳酰丙氨酰谷氨酰基，二氨基庚二酸和羧甲基氨组成的乳酰四肽公布于1980年5月28日欧洲专利11283中。
另外，具有式A的免疫刺激剂聚肽及其羧基和氨基被保护了的衍生物已公开在美国专利4，311，640和4，322，341;欧洲申请25，482;50，856;51，812;53，388;55，846和57，419中。
式中R1是氢或酰基;R2特别是氢，低烷基，羧甲基，苄基;R3和R4各是氢，羧基，-CONR7R8，其中R7是氢，低烷基或被羟基取代了地低烷基;R8是单一或二羧基低烷基;R4和R5中之一是氢时，R5是氢或羧基，否则是羧基或-CONR7R8;R6是氢;m是1到3，n是0到2。
在公开的现有技术中没有一个聚肽有一个碱性氨基酸在上式中的不定的R4所在的位置上。
Kitaura et al.，医药化学，25，335-337（1982）报导N2-（γ-D-谷氨酰基）-内消旋-2（L），2′（D）-二氨基庚二酸作为能够引出式〔A〕化合物的生物特性的最低限度结构。其中n是1;R1是CH3CH（OH）-CO-;R2是CH3;R3和R5各是COOH;R4是-CONHCH2COOH;R6是H。上述式（A）化合物称为FK-156。
新的式Ⅰ酰三肽
及其药用盐是高效的免疫刺激剂或免疫调制剂和抗菌剂。在上式中：
R°为1到6个碳原子的烷基，x是从1-4的整数。
本发明也包括了作为生产式（Ⅰ）化合物中间体的某些化合物。这些中间体的分子式为（Ⅱ）和（Ⅲ）。
式中R°是1-6碳的烷基;
Y1，Y2和Y4各是一个羧基保护基团;
Y3是一个羧基保护基或
其中x是1至4的整数;而Y5是一个氨基保护基团。
至于谈到所说化合物的药理活性，组成式Ⅰ化合物的氨基酸部分的方位具有特殊意义。在具有上述分子式所示的立体化学性质的Ⅰ式化合物中观察到了最强的活性。以天然氨基酸为基准，将立体化学指定为D-或L-，的立体化学部分可以是D-或L-，两种差向立体异构体都赋予在其它位置表明有立体化学性质的式Ⅰ化合物强活性。
式Ⅰ酰三肽可按熟悉本领域的技术人员已知的任一方法制备。制备方法包括在氨基酸之间形成肽交连，由于氨基和羧基团之外，常常还有其它反应基团存在，氨基酸需要保护上述基团和/或活化这些基团（尤其是羧基），以完成某一反应或优化这样一个反应。
所涉及的全部反应顺序说明如下：
Z＝Cbz＝苯氧基羰基
BSA＝二-三甲基甲硅烷基乙酰胺
CMEC＝1-环己基-3-（2-吗啉代乙基）碳化二亚胺N-甲-p-甲苯磺酸盐。
HOSuc＝N-羟基琥珀酰亚胺
NMM＝N-甲基吗啉
R＝（C1-C6）烷基
DCC＝二环己基碳化二亚胺
根据上面反应顺序，显然构成化学式（1）三肽的氨基酸是通过把酰化谷氨酸连接到二氨基庚二酸一赖氨酸（或碱性的氨基酸）二肽部分制备的。照上面的顺序，二肽部分是通过将二氨基庚二酸连接到赖氨酸上而制备的。各个氨基酸混合的顺序对生成三肽是不重要的。
在这里提出的实施例中，专门说明特定的保护基团和活化基团，然而，在该领域中熟炼的技术人员会考虑到使用其它保护基团或活化基团。特殊保护基团的选择很大程度上取决于必要试剂是否容易得到，其效果取决于受保护化合物的溶解性、脱去的难易及其它基团的存在（由于受保护化合物的用途而需要引入的基团）即，它的选择性或移去能力。
例如，在许多反应中必须或至少需要保护氨基和/或羧基。选用不同的制备三肽的合成路线可能需要脱去一个或者另一个，或者两个前面所说的保护基，以使在氨基或羧基还原时进一步反应，即，使用的保护基团是可逆的、通常可以彼此独立地移动。此外，根据氨基在总反应系统中的作用，为一个给定的氨基选择保护基团，因而具有各种不稳定性的（即脱去难易不同的）氨基保护基团会受到使用。对于羧基保护基团上述原则也同样正确。这些基团在本领域是已知的。Bodanky et al已经注意到了下列文献：Ed.，John wiley & Sons，N.Y.（1976）;Greene、“有机合成中的保护基团”，John wiley & Sons、N.Y.（1981）;Mcomie、“有机化学中的保护基团”、plenum press、N.Y（1973）;and to sheppard in“综合有机化学、有机化合物的合成和反应”、Pergaman press、N.Y（1979）、edited by E.Haslam，part23.6，321-339页。
一般的氨基和羧基保护基团对本领域那些熟炼的技术人员是已知的。典型的氨基保护基团如下（但决不限于此）：苄氧基羰基：取代的或未取代的芳烷基，例如苄基、三苯甲基、二苯甲基和4-硝基苄基;亚苄基;芳硫基，例如苯硫基、硝基苯硫基和三氯苯硫基;磷酰基衍生物，例如二甲基磷酰基和O，O-二苄基磷酰基;三烷基甲硅烷基衍生物，例如三甲基硅烷基;美国专利4，322，341中描述的其它基团和由参考文献编入其中的基团。优先选择的氨保护基团是苄氧基羰基。在给定氨基上取代上述保护基的方法已众所周知，一般包括在反应惰性溶剂中用苄氧基羰基氯化物（苄基氯甲酸酯）酰化合适的氨基化合物，反应惰性溶剂如：水、二氯甲烷、四氢呋喃，在碱（酸接受体）存在时酰化，例如水为溶剂的氢氧化钠或氢氧化钾，而在使用有机溶剂时，在叔胺（例如1-4碳的三烷基胺和吡啶）存在下进行酰化。当使用含水溶剂时，反应物的PH保持在大约8-10，最好在9。换句话说，当反应物（即一个氨基受保护的化合物）含有碱性基团时，它可以作为酸接受体。
通过将上面的谷氨酸与合适的酰基氯或酰基溴在反应惰性溶剂中反应的标准酰化步骤，将R-CO-酰基引入到谷氨酸反应物上（上面顺序化合物9）。较优的反应条件是含水系统，例如，含水丙酮且PH为9.0、添加合适的碱例如氢氧化钠或氢氧化钾使PH保持在8.5-9.0、也可使用无水溶剂，然而，在这种情况下，有机碱（最好是叔胺、例如三乙基胺、N-甲基吗啉或吡啶）用作碱。
当然，根据标准方法酰化可用合适的酸酐（单一的、或混合的）来完成，当酐使用在此酰化步骤时，混合酐，尤其是那些从小分子量羧酸得到的混合酐，特别是混合的羧一碳酸酐较好。
典型的羧基保护基团是各种酯，例如甲硅烷基酯，包括三烷基甲硅烷基酯、三卤基甲硅烷基酯和卤烷基甲硅烷基酯;某些烃基酯，例如1-4碳的烷基、尤其是叔丁基;苄基和被取代的苄基酯、二苯甲基和三苯甲基;苯甲酰甲基和苯二甲酰亚氨甲基酯;某些被取代的烃基酯、例如氯甲基、2、2、2-三氯乙基、氰基甲基;四氢吡喃基;甲氧基甲基;甲基硫代甲基;保护的咔唑基，例如-CONH-NHR6其中R5是上面公开的保护基团，尤其是苄氧基羧基;美国专利4，322，341中描述的其它基团和由参考文献编入的基团。较好的羧基保护基团是-CONH-NHR6、其中R5是苄氧羧基、上面较好的基团被认为是苄氧基卡巴肼，最好的羧基保护基团是苄基。
通过本领域熟炼的技术人员所知的方法将被保护的氨基和羧基转化成非保护态的氨基和羧基苄氧基羰基和苄基，氨基和羧基的较好保护基团（作为被保护的咔唑基一部分）通过以钯、最好是钯一碳为催化剂加氢而被除去。从内消旋-二氨基庚二酸二苄氧基卡巴肼（下述实例3产物）选择脱除一个苄氧基卡巴肼保护基团，通常是使用亮氨酸氨基肽酶（LAP）来完成的。在含水溶剂，特别是水和水的可混溶剂的混合物中（例如1-4碳链烷醇、四氢呋喃、二噁烷）在碱性PH，最好在8-10范围（8.5更佳）时进行反应。
活化羧基用来促进一个给定的反应是本领域技术人员所知的、尤其在此描述的反应顺序中特别有用处的是使用酐（特别是环酐）和活化酯。例如从N-羟基苯邻二甲酰亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺得到的酐，上述两种酐用于肽的合成物中。
在这里描述一个反应顺序、化学式（2）和（6）含有α-可取代的甘氨酸部分，并通常分别地转化成化学（3）和（7）的2、5-噁唑烷二酮衍生物（N-羧酐），前述的酐促进化学式（3）和（7）化合物经受的接着发生的反应。化学式（3）和（7）的化合物是化学式（2）和（6）中原有的氨基酸与反应物（例如Pcl5或Socl2）反应形成的酐。
活化的N-羟基琥珀酰亚胺酯（例如分子式10）在前面的活化乙酯基存在时促进后面的反应，作为熟炼技术人员会考虑到使用其它活性基团，特别重要的基团是N-羟基苯邻二甲酰亚胺基，所说基团以象N-羟基琥珀酰亚胺同样方式使用，在两种情况下，无水偶合剂用来形成活化酯，这些典型的偶合剂是1-环己基-3-（2-吗啉基乙基）碳化二亚胺方法-P-甲苯磺酸盐、二环己基碳化二亚胺、N、N′-碳化二亚胺噻唑、N-（3-二甲基胺基丙基）-N′-乙基羰二亚胺的盐酸盐，乙氧基乙炔、二苯乙烯酮和N-乙基-5-苯异噁唑烯-3′-磺酸盐。使用这种偶合剂的反应条件在文献中已很好地描述过，一般包括使用反应惰性溶剂、并且温度范围从室温到100℃、上面提到的碳化二亚胺试剂是受人欢迎的，因为允许使用室温反应并且所需酯的产率令人满意。
本发明的产物对哺乳动物、包括人类，作为用于由各种致病微生物（尤其是格兰式阴性细菌）引起的疾病的临床诊断和治疗的药剂是有效的。由于现存的或临床诱发的免疫遏制而引起传染病危险增加时，本发明的产物作为哺乳动物（包括人）的免疫刺激剂也是有效的。
试验使用Charles River Breeding Laboratory的C3H/HeN雄性鼠，其方法如下：老鼠使用前适应气候5天，然后进行皮下治疗（SC），或者口服各种试验化合物或空白对照剂（无盐焦数）的不同稀释物（10、1和0.1mg/Kg）0.2ml进行治疗（PO）。治疗方法取决于使用的传染生物体：用铜绿菌假单孢菌进行免疫性试验前-24和0小时;用Esherich氏菌属大肠杆菌或假单孢菌铜绿菌进行免疫性试验前-6、-5、-4和-1天、对K·肺炎球菌在臀部进行内肌试验或对Escherich氏菌属和肺炎球菌铜绿素进行内腹膜试验，试验用量0.2ml。就铜绿假单孢菌7天后，就其它两种微生物试验3天后记录死亡率。
培养物的制备：
铜绿菌假单孢菌：在脑心灌注的琼脂培养基上划痕以从冷冻的血液库中得到高纯度的铜绿菌单孢菌，从18小时的平板培养物中取出3个菌落，放置到9ml的BHI肉汤里，在37℃时肉汤在旋转摇动器上进行培养2小时，之后在几个BHI琼脂培养基斜线表面上用0.2ml铜绿菌假单泡菌划痕。接着在37℃孵化18小时，用BHI肉汤清洗斜线。用spectronic 20调节培养物密度并达到合适浓释度，以在老鼠中达到LD100免疫性试验水平（大约250CFU/动物），（CFU＝菌落形成单位）。
Escherich氏菌属大肠杆菌：在从冷却血液贮库中得到的BHI琼脂培养基平板表面上划痕以得到高纯度的Escherich氏菌属大肠杆菌，孵化一晚上后，将几个菌落放置到250ml埃伦迈厄氏烧瓶中的100ml Difco营养琼脂培养基中。在新的Brunswick旋转摇动器上，在30℃下孵化18小时，1∶10稀释液转化成90ml新鲜营养肉汤，在30℃下孵化3小时（旋转振动器，200转/分），用spectronic20调节密度为78%，合适的稀释液转化成BHI肉汤，通过内腹膜注射入老鼠中达到LD90。
当本发明化合物作为抗菌剂或免疫刺激剂用于人类时，通常通过口腔、皮下、内肌、内静脉或内腹膜（一般以混合物形式）进行用药。这样的混合物的组分包括在选用的用药方法和标准药剂实践基础上挑选出的药物载体。例如，它可以片状、丸状、粉剂或粒剂形式给病人用药。而这些药剂含有例如淀粉、牛奶糖、一定类型粘土等等的赋形剂。它们可以胶囊形式，相同或等同的赋形剂混合物形式给病人使用，还可以口服悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂和含有香味和色彩的酏剂形式给病人用药。对本发明的口服治疗剂来说，含量大约为50-500mg的片剂和胶囊适用于大多数用途。
医生将决定最适合每个患者的用量，其用量随年龄、体重、个别患者的反应及用药方法而改变。然而，一般来说，成年人最初用量范围每天2-100mg/Kg，分一次或几次服。较好的口服用量范围大约为每天10-300mg/Kg，较好的肠胃外用量范围大约为10-100mg/Kg，优先选择的范围大约为0.1到20mg/Kg·日。
本发明也给出了药物的组分（包括单位剂量形式），它对于本发明中提及的在此公开了的用途的化合物的使用很重要。用药形式可以是一次服或几次服，就象前面提到的一样，以达到对特殊用途的日剂量使用效果。
例1
N，N′-二苄氧羰基-内消旋-二氨基庚二酸
209.4克（1.1摩尔）内消旋二氨基庚二酸在2200毫升水中的溶液用2当量浓度的氢氧化钠碱化，使PH值为9.0，然后放在冰浴器里，将其冷却至10C，在30分钟以上时间加入450.5克（2.64摩尔）苄基氯甲酸酯，用2当量浓度的氢氧化钠使在整个加入苄基氯甲酸酯过程中PH值始终维持在9.0。两个半小时后，用1升乙酸乙酯将溶液萃取三次。水溶液用10%的盐酸酸化到PH值为1.5，并用1升乙酸乙酯萃取2次。将萃取物合并在一起，放在硫酸镁上干燥，过滤，浓缩，生成的油从920毫升氯仿中在室温下结晶出来产生了170克（34%）如标题所述的产物：熔点129-133℃;IR（溴化钾）2700，1720，1600Cm-1;NMR（D6-二甲基亚砜）δ＝7.1-7.4（m，10H），5.2（S，4H），4.0-4.2（m，2H）1.2-1.6（m，6H）;〔α〕D＝0.0（C＝1.2，甲醇）。
例2
内消旋-二氨基庚二酸-二-N-羧酸酐
将62.0克（140毫摩尔）N，N-二苄氧羰基-内消旋-二氨基庚二酸在1240ml无水的二氯甲烷中的悬浮液放在氮气中冷却至10℃，然后用62.0克的（300毫摩尔）五氯化磷一次处理。产生的黄色溶液在10℃放置一小时。让其升至室温后放置20小时，将生成的悬浮液过滤，用无水的二氯甲烷连续冲洗过滤后的产物，在高真空下干燥，生成29.9克91%的二-N-羧酸酐：熔点280℃;IR（溴化钾）＝3250，1840，1760Cm-1;NMR（D6-二甲基亚矶），δ＝4.2-4.4（m，2H），1.2-2.1（m，6H）。
例3
内消旋-二氨基庚二酸-二苄氧
羰基卡巴肼二乙酸盐
将搅拌过的1.4克（8.5毫摩尔）苄基肼基甲酯在4毫升冷乙酸中的溶液冷却至10℃，产生的膏状物用1.0克（4.1毫摩尔）的内消旋-二氨基庚二酸-二-N-羧酸酐处理。使产生的反应物慢慢升到室温并维持2小时，生成的油，用乙醚研制生成了2.37克（95%）如标题所述的产物：熔点158-161℃;IR（Nujol）2850，1700Cm-1;NMR（CD3OD），δ＝7.30（s，10H），5.10（s，4H），3.30（m，2H），1.5-1.8（m，6H）。
例4
内消旋-二氨基庚二酸-（D）
-单-苄氧基羰基卡巴肼
26.2克（43毫摩尔）内消旋-二氨基庚二酸-二苄氧羰基卡巴肼二乙酸盐在325毫升甲醇和750毫升水中的溶液用2当量的氢氧化钠处理到PH值为8.5。生成的溶液用2200单位的白氨酸氨肽酶处理（Sigma Hog Kidney，Ⅲ型悬浮物，Sigma化学公司，St.Louis，MO，美国），在室温搅拌五天，用2当量氢氧化钠维持PH值为8.5。在真空中除去甲醇，产生的水溶液用200毫升醋酸乙酯冲洗2次。水溶液用于HP-21树脂柱。（HP-21是一个具有大网状结构泡状形式的交联苯乙烯二乙烯基苯的共聚物，可以从美国纽约新约克州，420Lexington路V，G，F公司得到）用2升水冲洗树脂柱，然后用50%甲醇水溶液洗提，将洗提溶液缩后得到产物，用乙醚研制，过滤，干燥，得到14.1克95%的如标题所述的产品：熔点204-210℃（分解）;IR（Nujol）2200-3600，1720，1660，1580Cm-1;NMR（CD3OD）δ＝7.45（s，5H），5.20（s，2H），3.50（m，2H），1.4-2.1（m，6H）;〔α〕D＝-16.8（C＝1.0，醋酸）。
例5
N，N′-二苄氧基羰基-内消旋-二氨基庚二酸-单-苄氧基羰基卡巴肼
含11.8g（35mmol）内消旋-二氨基庚二酸-（D）-单-苄氧基羰基卡巴肼的270ml无水二氯甲烷的悬浮液用56.8ml（280mmol）双-三甲基硅烷基乙酰胺处理，在室温和氮气中搅拌18小时，把反应溶液冷却至-15℃，再用15.0g（88mmol）苄基氯甲酸酯处理5分钟。反应溶液在-15℃搅拌一小时，然后，升温至室温，维持18小时。用稀盐酸酸化溶液，并搅拌一小时，过滤，得到13.6g（64%）标题化合物：（熔点：141～145℃）
IR（KBr）：3300，1740，1715，1695，1660Cm-1;
NMR（CD3OD）：δ7.30（s，15H），5.10（s，6H），4.10（m，2H），1.40～2.00（m，6H）;
〔α〕D＝+18.2（C＝0.6，甲醇）。
例6
苄氧基羰基-内消旋-二氨基庚二酸-单-
苄氧基羰基卡巴肼
向130ml纯亚硫酰氯溶液加入13.0g（21mmol）例5的标题化合物。将溶液于室温下搅拌2小时，浓缩，并在真空下干燥1小时。把得到的产物溶解于130ml乙酸中，用65ml 1N盐酸处理，并于室温下搅拌18小时。将反应溶液浓缩，得到的料浆溶解于100ml水中，并用饱和的碳酸氢钠溶液中和，将悬浮液搅拌1小时，过滤，用清水洗涤并干燥，得到9.7g（93%）标题化合物：
熔点：201～205℃（有分解）
IR：（KBr）3300，1715，1690，1600Cm-1，
NMR（D6-DMSO）δ7.2～7.4（bs，10H），5.25（s，2H），5.20（s，2H），4.40（m，2H），1.6～2.5（m，6H）;
〔α〕D＝+35.1（C＝0.4，甲醇）。
例7
N-庚酰-D-谷氨酸
将含75.0g（510mmol）D-谷氨酸的1升丙酮水溶液（50∶50），用2N氢氧化钠调节PH值为9.0。将该溶液冷却至10℃，用114.2g（770mmol）庚酰氯处理45分钟，其间用2N氢氧化钠维持溶液PH值为9.0。使反应溶液升至室温，维持3小时。在真空中除去丙酮，余下的水溶液用稀盐酸酸化，并用700ml乙酸乙酯萃取三次。把萃取液合并，在硫酸镁表面干燥，过滤并浓缩。用己烷研制得到的油，得到109.8g（83%）所需的产物：
熔点：92-96℃：
IR（Nujol）：3300，2700～3250，1720，1625Cm-1;
NMR（D6-DMSO）δ4.20（m，1H），2.28（t，2H），2.20（t，2H），1.85～2.05（m，1H），1.65～1.85（m，1H），1.40～1.60（m，2H），1.15～1.30（m，6H），0.75（t，3H）;
〔α〕D＝+9.6（C＝1.0，甲醇）。
例8
N-庚酰-D-谷氨酸-α-苄基酯
把含108.8g（420mmol）N-庚酰-D-谷氨酸和50.6g（500mmol）三乙基氨的135ml二甲基甲酰胺溶液，用85.7g（500mmol）苄基溴处理，在氮气中搅拌60小时，将反应溶液倒在一升乙酸乙酯上，依次用500ml稀盐酸和水洗涤二次。然后用500ml 1N氢氧化钠洗涤乙酸乙酯。底下的水层用稀酸酸化，用500ml乙酸乙酯萃取4次。将乙酸乙酯萃取物合并，用过量的二环己胺处理，搅拌18小时。将悬浮液过滤，在新鲜的乙酸乙酯（400ml）中制浆2小时，再过滤，在真空中干燥得到49.1g二环己胺盐。将14.0g得到的盐在稀盐酸中搅拌，过滤，用乙酸乙酯洗涤。滤液用乙酸乙酯萃取两次，将有机层合并，在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。得到的油在己烷中研制，得到7.9g（盐的86%）标题上的酯：
熔点：76～79℃
IR（Nujol）：3300，2700～3100，1730，1700，1645Cm-1;
NMR（CDCl3）δ7.35（S，5H），5.20（S，2H），4.70（m，1H），1.85～2.50（m，6H），1.55～1.70（m，2H），1.10～1.40（m，6H），0.75（t，3H）;
〔α〕D＝27.6（C＝0.6，甲醇）。
例9
N-庚酰-D-谷氨酸-α-苄基-γ-（N-羟基丁二酰亚胺）二酯
把含7.68g（22mmol）N-庚酰-D-谷氨酸-α-苄基酯和6.1g（51mmol）N-羟基丁二酰亚胺的220ml乙酸乙酯溶液用22.9g（51mmol）1-环己基-3-（2-吗啉代乙基）碳化二亚胺-甲-P-甲苯磺酸酯处理。反应溶液在室温下搅拌二天，然后倒在150ml水上，分层，乙酸乙酯部分分别用水和盐水洗涤，在硫酸镁表面干燥，并过滤和浓缩。用乙醚研制，得到8.0g（82%）标题上的二酯：
熔点：85～89℃;
IR（Nujol）3350，2800～3000，1810，1790，1745，1650Cm-1;
NMR（CDCl3）δ7.30（s，5H），5.20（s，2H），2.8（bs，4H），2.0～2.7（m，6H），1.50～1.70（m，2H），1.10～1.4（m，6H），0.80（t，3H）。
实例10
N-庚酰基-γ-D-谷氨酰基-（α-苄基酯）-苄氧羰基-（D）-内消旋-二氨基庚二酸-（D）-苄氧基羰基-卡巴肼。
把200ml含4.22g（9mmol）例子6中标题名称的化合物和0.9g（9mmol）的N-甲基吗啉的20%的四氢呋喃的水溶液用4.0g（9mmol）的N-庚酰基-D-谷氨酸-α-苄基-γ-（N-羟基丁二酰亚胺）-双酯（例子9中得到的产物）处理。在室温下反应物搅拌两天，浓缩，及用60ml 1N的盐酸和200ml乙酸乙酯处理。将有机层合并起来，用1N Hcl和盐水各洗涤一次，用硫酸镁干燥后过滤，及浓缩。从三酸乙酯中结晶，得到了4.94g（69%）的上述标题名称的产物：熔点139-141℃.;IR（Nujol）3300-2550，1680，1640cm-1;NMR（D6-DMSO）7.30（bs，15H），5.12（s，2H），5.08（s，2H），5.00（s，2H），4.25（m，1H），4.15（m，1H），4.00（m，1H），2.25（t，2H），2.10（t，2H），1.20-2.00（m，16H），0.80（t，3H）;[α]D＝+22.4（C＝0.3，甲醇）。
实例11
N-庚酰基-γ-D-谷氨酰基-（α-苄基酯）-苄氧基羰基-（D）-内消旋-二氨基庚二酸-（D）-（苄氧基羰基卡巴肼）-L-（N-羟-基丁二酰亚胺）酯。
把150ml含3.70g（4.6mmol）例子1C标题名称的化合物和0.64g（5.52mmol）N-羟基丁二酰亚氨的50%的二噁烷水溶液冷却到10℃。并用一份1.35g（5.06mmol）的N，N′-二环己基碳化二亚胺处理。将溶液在10℃下搅拌两小时，在室温中放置18小时，再一次冷却并过滤，把滤液蒸发掉，再溶解在乙酸乙酯中，过滤并浓缩。从滤液中得到的固体用乙醚来研制，从而得到3.50g（85%）上述标题名称的产物：熔点107-110℃.;IR（KBr）3600，3100，3000，2950，1810，1740，1710，1645cm-1;
NMR（D6-DMSO）δ7.35（bs，15H），5.12（s，2H），5.10（s，2H），5.00（s，2H），4.50（m，1H），4.30（m，1H），4.10（m，1H），3.40（bs，4H），1.20-2.40（m，20H），0.85（t，3H）.
实例12
N-庚酰基-γ-D-谷氨酰基-（α-苄基酯）-苄氧基羰基-（D）-内消旋-二氨基庚二酸-（D）-（苄氧基羰基卡巴肼）-（L）-Ne（α-苄氧基羰基）-L-赖氨酸。
30ml含0.75g（2.7mmol）α-苄氧基羰基-L-赖氨酸的无水二氯甲烷的悬浮液用2.2g（10.7mmol）的双-三甲硅烷基乙酰胺处理，并在室温中搅拌18小时。溶液的温度升高5℃。在100ml的二氯甲烷和50ml的四氢呋喃里搅拌例子11中的酯。产生的溶液在5℃下搅拌1小时，并慢慢加热使其达到室温。浓缩此溶液。用300ml 0.7M的Hcl溶液处理，用乙酸乙酯进行三次萃取。合并在一起的乙酸乙酯相继用水和盐水洗涤后，用硫酸镁干燥，过滤和蒸发。剩余物溶解于少量的热乙酸乙酯，冷却，过滤得到了2.06g（80%）的上述标题名称的产物。熔点154-157℃;IR（KBr）3600-3100，3000，2900，1740，1690，1640cm-1;NMR（D6-DMSO）δ7.30（bs，20H），5.14（s，2H），5.09（s，2H），5.02（s，2H），4.98（s，2H），4.30（m，1H），4.15（m，1H），3.95（m，2H），3.00（m，2H），2.20（t，3H），2.15（t，3H），1.10-2.10（m，22H），0.85（t，3H）.
实例13
N-庚酰基-γ-D-谷氨酰基-L-内消旋-二氨基庚二酸-Ne-L-赖氨酸。
1.0g（0.94mmol）受保护的例12的三肽产物溶液和250mg10%的钯碳催化剂在100ml20%的乙酸溶液中，于50磅（3.52Kg/Cm2）氢气压力下进行气相氢化24小时，溶液在脱气后进行过滤使滤液浓缩。剩余物溶于80ml 0.1N硫酸中，冷却到5℃，用0.44g（2.06mmol）偏高碘酸钠处理。在5℃下把棕色溶液搅拌1小时，一滴滴地用饱和的亚硫酸氢钠溶液来处理，直到溶液纯清，把它送入HP-21树酯柱中用水洗涤树酯柱。然后把所需的化合物用50%的甲醇水溶液来洗提，蒸发洗涤液而得到了0.46g（88%）的标题酰基三肽。
熔点220℃.（decomp.）;IR（KBr）3650-2700，1710，1650，1600cm-1;NMR（D2O）δ4.38（m，1H），4.22（m，1H），4.10（m，2H），3.25（m，2H），2.45（t，2H），2.35（t，2H），1.2-2.25（m，22H），0.85（t，3H）.[α]D＝-18.8（C＝0.5，H2O）。
实例14
N-庚酰基-γ-D-谷氨酰基-（α-苄基酯）-苄氧基羰基-（D）-内消旋-二氨基庚二酸-（D）-苄氧基羰基卡巴肼-（L）-Ne-（Na-乙酰基）L-赖氨酸甲酯。
把200ml含0.895g（3.75mmol）的Na-乙酰基-L-赖氨酸甲酯氢氯化物和2.0g（2.50mmol）受保护的例10中的二肽及0.38g（3.75mmol）N-甲基吗啉的四氢呋喃溶液冷却到0℃。并用0.51g（3.75mmol）1-羟基苯甲基噻唑进行处理，得到的溶液搅拌10分钟，用2.12g（5.0mmol）的1-环己基-3-（2-吗啉代乙基）碳化二亚胺N-甲-P-甲苯磺酸酯来处理。把溶液加热到室温并搅拌72小时，反应物进行浓缩，剩余物溶解在200ml乙酸乙酯，用200ml，2.5%盐酸水溶液洗涤，生成的悬浮液在有机相和水相不分离的情况下进行过滤以得到一种白色固体，把该固体从热四氢呋喃和二乙醚中进行重结晶而得到了1.64g 66%的标题产物。
熔点174-176℃.;IR（KBr）3600-3100，3000，2950，1740，1690，1660，1640cm-1;NMR（D6-DMSO）δ7.35（bs，15H），5.13（s，2H），5.09（s，2H），5.00（s，2H），4.30（m，1H），4.18（m，2H），4.00（m，1H），3.60（s，3H），3.05（m，2H），2.22（t，2H），2.15（t，2H），1.10-2.10（m，22H），1.85（s，3H），0.85（t，3H）.
实例15
N-庚酰-γ-D-谷氨酰基-L-内消旋-二氨基-庚二酸-Ne-（Na-乙酰-L-赖氨酸甲基酯）
1.0g（1.01mmol）实例14的受保护的三肽产物和250mg10%钯-碳在50ml 20%的含水乙酸中的溶液，在50磅/吋2的氢压下进行氢化一小时。该溶液脱气、过滤并浓缩。残余物溶解于50ml水和1ml四氢呋喃中，并用硫酸将PH值调到2。将该溶液冷却到5℃，用475毫克（2.22mmol）偏高碘酸钠处理，搅拌1小时，然后一滴一滴添加亚硫酸氢钠的饱和溶液使之澄清。该溶液应用到HP-21树脂柱上，用水洗涤，产物用1升30%含水甲醇洗提。溶液浓缩，生成的固体用乙醚研制，得到434mg（70%）所需产物：mp140℃、（dec）;IR（KBr）3600-3100，2950、2850、1740、1640、1620;NMR（D2O）δ4.35（m，2H），4.20（m，1H），3.80（m，1H）;3.80（s，3H），3.20（m，2H），2.45（t，2H），2.30（t，2H），1.20-2.25（m，22H），2.05（s，3H），0.85（t，3H）;〔α〕D1.5＝-22.2（C＝0.5，H2O）
实例16
N-庚酰-γ-D-谷氨酰基-（α-苄基酯-苄氧基羰基-（D）-内消旋-二氨基庚二酸-（D）-苄氧基羰基）-L-Ne-（Na-乙酰）-L-赖氨酸
0.50g（2.67mmol）Na-乙酰-L-赖氨酸和2.45g（12.0mmol）二（三甲硅烷基）-乙酰胺在50ml无水二氯乙烷中的溶液在室温下搅拌18小时。该溶液由注射器加到-15℃的实例10产物异丁基混合酐的溶液中〔混合酐的制备：将0.29g（2.24mmol）氯甲酸异丁酯加入到-15℃、1.78g（2.2mmol）实例11和0.24g（2.2mmol）N-甲基吗啉在100ml无水四氢呋喃中的溶液）。产生的反应混合物在-15℃时搅拌1小时，在室温时搅拌3小时。浓缩、溶解在200ml乙酸乙酯中，用200ml 2.5%盐酸洗涤，分离乙酸乙酯层，并浓缩产生一种白色固体，该白色固体用乙醚研制产生1.37g（63%）产物：mp170-175℃;IR（KBr）3600-2850，1740、1680、1750、1600Cm-1，NMR（D6-DMSO）delta 7.35（bs，15H），5.12（s，2H），5.08（s，2H），5.02（s，2H），4.30（m，1H），4.15（m，2H），4.0（m，1H），3.05（m，2H），2.25（m，2H），2.15（t，2H），1.90（s，3H），1.15-1.85（m，22H），0.85（t，3H）。
实例17
N-庚酰-γ-D-谷氨酰基-L-内消旋-二氨基庚二酸-Ne-（Na-乙酰）-L-赖氨酸
1.2g（1.23mmol）实例16的产物在50ml 20%乙酸中的溶液用330mg钯（10%）-碳催化处理，并在50磅/吋2（3.52Kg/Cm2）氢压下氢化1小时，溶液脱气、过滤并浓缩。生成的油溶解在50ml水中，冷却到5℃。用硫酸酸化使PH为1.5-2.0，生成的溶液再用0.58g（2.7mmol）偏高碘酸钠处理，搅拌1小时，用饱和亚硫酸氢钠处理直到溶液澄清。该溶液应用到HP-21树脂柱上，柱子用250ml水洗涤、用250ml 50%甲醇洗提，浓缩后生成0.55g（74%）所需产物：mp220℃（dec）;IR（KBr）3600-2900，2850、1720、1640、1540Cm-1;NMR（D2O）delta 4.30（bm，3H），3.80（t，1H），3.25（m，2H），2.45（t，2H），2.35（t，2H），1.2-2.3（m，22H），2.05（s，3H），0.85（t，3H）;〔alpha〕D＝-17.6（C＝0.5，H2O）。
实例18
N-庚酰-γ-D-谷氨酰基-（α-苄基酯）-L-内消旋-二氨基庚二酸〔（D）-苄氧基羰基-（D）-苄氧基羰基卡巴肼〕-Nd-α-苄氧基羰基-L-乌氨酸
0.59g（2.2mmol）α-苄氧基羰基-L-乌氨酸在80ml无水二氯乙烷中的悬浮液用1.81g（8.9mmol）二（三甲基硅烷基）乙酰氨处理，在室温下搅拌3小时，生成的溶液加入到实例11酯产物在70ml无水四氢呋喃的溶液中并在室温下搅拌3天，生成的溶液浓缩，残留的油用500ml 0.7N盐酸和350ml乙酸乙酯处理。两相溶液搅拌1.5小时，分离、有机层浓缩，用乙醚研制产生1.95克（84%）标题产物：mp167-171℃;IR（KBr）3600-3100，2950、1740、1695、1640;NMR（D6-DMSO）delta7.40（m，20H），5.12（s，2H），5.10（s，2H），5.05（s，2H），5.00（s，2H），4.30（m，1H），4.18（m，1H），4.00（m，2H），3.10（m，2H），2.25（t，2H），2.15（t，2H），1.05-2.10（m，20H），0.85（t，3H）。
实例19
N-庚酰-γ-D-谷氨酰基-L-内消旋-二氨基庚二酸-Nd-L-乌氨酸
1.40g（1.33mmol）实例18产物和400mg钯（10%）-碳在150ml 20%乙酸中的溶液在45磅/吋2（3.16Kg/Cm2）氢压下氢化45分钟。溶液脱气、过滤并浓缩，生成的油溶解在50ml水中，用浓硫酸调PH＝2.0，产生的溶液冷却到5℃，在一份0.57g（2.66mmol）高偏碘酸钠中处理。生成的褐色溶液搅拌1.5小时，用饱和亚硫酸氢钠溶液处理直到溶液澄清，然后应用到HP-21树脂柱上，柱子用750ml水洗涤，所需产物用400ml 50%甲醇洗提。含有产物的分馏物浓缩产生0.52g（71%）的所需产物：mp230℃（dec）;IR（KBr）3600-3100，2950、1640、1590;NMR（D6-DMSO）delta 4.30（m，2H），3.95（m，2H），3.15（m，2H），2.30（t，2H），2.22（t，2H），1.2-2.20（m，20H），0.95（t，3H）。