水解蛋白质制备高质量复合氨基酸的方法.pdf

摘要
申请专利号：	CN02134924.X	申请日：	2002.10.10
公开号：	CN1513833A	公开日：	2004.07.21
当前法律状态：	驳回	有效性：	无权
法律详情：	发明专利申请公布后的驳回\|\|\|实质审查的生效\|\|\|公开
IPC分类号：	C07C227/40	主分类号：	C07C227/40
申请人：	黄洪锐; 邹学满
发明人：	邹学满
地址：	510160广东省广州市西站二街12号602
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内容摘要

蛋白质水解液利用活性炭吸附柱和717阴离子树脂交换柱色层分离法，细分出单一品种的氨基酸，大幅度降低了灰份含量，使混合氨基酸以混合晶体方式结晶析出，并获得高纯度的结晶物。以脱脂蚕蛹为蛋白质水解原料，以本发明工艺方法进行色层分离，可以制备出高质量的复合氨基酸产品。

权利要求书

1：水解蛋白质制备十八种单一氨基酸组成的复合氨基酸的方法，其特征是将蛋白质水解转化生成的十七种氨基酸混合液用活性炭吸附柱和717阴离子树脂交换柱等色层分离色谱法有选择性地分离得到天门冬氨酸和谷氨酸的混合结晶；分离得到精氨酸、赖氨酸、组氨酸等碱性氨基酸单一成份品种；分离得到脯氨酸、丝氨酸和苏氨酸的单一成份品种；其他中性氨基酸全部制备为混合结晶产品。所制备的十七种单一氨基酸，另加入按1％比例的色氨酸，制成符合 FAO/WHO规定的8种必需氨基酸的比例标准的由18种单一氨基酸构成的复合氨基酸产品。
2：根据权利要求1所述的复合氨基酸制备方法，其特征是蛋白质原料为人发、猪毛等角质蛋白，或是猪血粉、明胶、骨胶、蚕丝、蚕蛹、植物油饼等人和牲畜不能直接利用的蛋白质原料。
3：根据权利要求1所述的复合氨基酸制备方法，其特征包括活性炭柱，717阴离子树脂交换柱和732阳离子树脂交换柱等色层分离设备。
4：根据权利要求1所述的复合氨基酸制备方法，其特征活性炭，717阴离子树脂和732阳离子树脂为分离介质。
5：根据权利要求1所述的复合氨基酸制备方法，其特征是8种必需氨基酸中的色氨酸为添加配制，其他7种必需氨基酸是由不同蛋白质制备的混合氨基酸根据分析测试结果按比例要求配制而成。
6：根据权利要求1所述的复合氨基酸制备方法，其特征是从17种氨基酸混合液彻底分离出2种酸性氨基酸，3种碱性氨基酸以及脯氨酸、丝氨酸后剩下的混合氨基酸的混合晶体，作为配制的原料。
7：根据权利要求1所述的复合氨基酸制备方法，其特征是将酸性氨基酸和碱性氨基酸互相中和至PH6.0以下，所获得的混合结晶作为非必需氨基酸用到配制复合氨基酸中去。
8：根据权利要求1所述的复合氨基酸制备方法，其特征是根据需要加入分离出的脯氨酸和丝氨酸到复合氨基酸产品中。

说明书

水解蛋白质制备高质量复合氨基酸的方法
    本发明涉及以蛋白质水解液配制由18种单一氨基酸构成的复合氨基酸的方法，尤其是按照FAO/WHO关于18种氨基酸中的8种必需氨基酸的规定比例而配制的方法。

    目前，蛋白质水解液中生成的17种氨基酸，由于天门冬氨酸和谷氨酸是酸性氨基酸，其等电点为PH值2.77至3.22，需将其溶液的PH值提高到6以上时，要加入碱性物质；精氨酸、赖氨酸和组氨酸是碱性氨基酸，其等电点在PH值7.6至PH值0.76，而要将它们溶液的PH值降低到PH6.0时，要加入酸性物质。这样生产出的复合氨基酸产品中的盐分含量升高，无法实现低灰份高质量的复合氨基酸产品。此外，由于脯氨酸的水溶性极强，不能从水溶液中结晶析出。丝氨酸溶解度也很大，使混合氨基酸在水溶液中不结晶析出，因此，根本无法制备出结晶复合氨基酸产品。目前市场上的复合氨基酸产品，为颜色很深，灰份含量达3.5％的喷雾干燥制备的产品。这种产品由于灰份含量太大，只能用作食品原料，不能用作医药原料。而要配制医药用复合氨基酸原料，只能购买各种单一氨基酸产品自行配制，这样生产的复合氨基酸产品的成本，比本方法要昂贵两倍以上。

    本发明使用活性炭吸附柱和717阴离子树脂交换柱等色层分离色谱法，把天门冬氨酸和谷氨酸等酸性氨基酸，以及精氨酸，赖氨酸，组氨酸等碱性氨基酸分别分离提取出来，大幅度降低了因酸性氨基酸和碱性氨基酸影响复合氨基酸产品中的灰份含量，从而提高了产品质量，使之能够达到药用质量标准。

    本发明使用活性炭吸附柱和717阴离子树脂交换柱等色层分离色谱法，把在水中溶解度大的脯氨酸和丝氨酸分别分离提取出来，制成纯品，从而使混合氨基酸以它们的混合晶体方式结晶析出，获得高纯度的混合氨基酸结晶物，使原来无法结晶析出的复合氨基酸成为容易结晶析出的复合氨基酸产品。

    本发明使用的活性炭吸附柱和717阴离子树脂交换柱等色层分离色谱法是一种固定的分离程序，任何蛋白质水解转化生成的氨基酸混合液，不受上述分离程序的影响。由于各种蛋白质对某一种或某几种氨基酸地含量变化幅度较大，所以，通过变换水解蛋白质的种类，可以按照某一特定的比例要求，配制齐备各种氨基酸含量。

    本发明制备的复合氨基酸产品中8种必需氨基酸含量比例，是以FAO/WHO规定的比例为准。见下表：氨基酸名称异亮  亮  赖  蛋+胱苯丙+酪  苏  缬  色  合计规定比例  4％  7％  5.5％  3.5％  6％  4％  5％  1％  36％

    本发明采用多种蛋白质水解制备出多种不同的8种必需氨基酸含量的混合产品，为配制符合上述比例要求的8种必需氨基酸混合产品提供了条件。目前市场上一些复合氨基酸产品是用蚕蛹蛋白为原料制成的。理论上分析蚕蛹蛋白的7种必需氨基酸含量均符合上表要求，另外添加色氨基酸后，符合FAO/WHO关于复合氨基酸的8种氨基酸规定比例要求，但实践上并非如此。在生产时往往在脱色过程中把苯丙氨酸和酪氨酸都脱掉，所剩无几。亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的大部分也被吸附，因为脱色剂活性炭对这些氨基酸均具有较大的吸附力。所以，目前市场上的复合氨基酸产品，无论从关于8种必需氨基酸含量比例、灰份含量、色泽等方面分析，均是低质量的产品。本发明方法的优点是能够从以上三个方面都可以制备出高质量的复合氨基酸产品，以满足社会生产和人们生活的需求。

    本发明下面将结合实施例作进一步详述：

    将100克脱脂蚕蛹置于800毫升圆底烧瓶中，加入300毫升6N盐酸溶液，升温110℃水解18小时，收集转化生成的氨基酸溶液，加入四倍水解液体积的水进行稀释，再以液氨调节PH为9.0，让其流经4.0cm×20.0cm的活性炭柱，再流经4.0cm×20.0cm的717阴离子树脂交换柱，分离出天门冬氨酸9.2克，谷氨酸9.8克，精氨酸4.7克，赖氨酸6.9克，组氨酸2.4克，脯氨酸3.2克，丝氨酸3.8克，混合氨基酸晶体44.6克，合计84.6克。复合氨基酸的总得率为84.6％。8种必需氨基酸存在量是异亮氨酸4.02％，亮氨酸6.84％，赖氨酸7.2％，蛋氨酸3.48％，苯丙氨酸和酪氨酸8.8％，苏氨酸3.98％，缬氨酸4.4％，七种必需氨基酸合计为38.72％，再添加1％的色氨酸，总比例达到39.72％，远远超过FAO/WHO关于8种必需氨基酸规定的36％比例要求，实现了高质量的复合氨基酸产品。