一种灵芝复合免疫剂的生产方法技术领域
本发明涉及一种灵芝的高效药用价值开发的方法，具体地说是一种灵芝复合免疫
剂的生产方法。
背景技术
中国是世界上肉类消耗最大国，国际食物政策研究所2016年6月7日在北京发布
《2016全球粮食政策报告》。报告显示，我国人均肉类消费量约59公斤，达到世界平均数的两
倍。我国有着全世界最大规模的家畜家禽养殖业，每年畜牧业养殖要使用大量的抗生素。抗
生素在畜牧业中的使用通常可分为两部分：一为治病用抗生素，主要用于动物疾病的防治,
降低畜禽发病率和死亡率；另一为饲料添加剂用抗生素(作为动物生长促进剂)，饲用抗生
素主要用于促进动物生长，减少疾病的发生以及提高饲料利用率，降低生产成本等。中国是
抗生素生产使用大国，目前，我国有6000多家药厂，生产各种抗菌药物1000 多个品种、 数
万个产品。化学工业学会和制药工业学会2005年统计数据显示，我国每年产抗生素原料大
约21万吨，其中，有9.7万吨抗生素用于畜牧养殖业，占年总产量的46.1%。由于抗生素在动
物体内无法得到有效降解，形成了抗生素残留。经常食用含有抗生素的“有抗食品”，即使是
微量的，也可能使人出现荨麻疹或过敏性症状及其他不良反应；长期食用“有抗食品”，消费
者的耐药性也会不知不觉增强，等于在人体内埋下一颗“隐形炸弹”，将来一旦患病，很可能
就无药可治。
抗生素虽然不会造成立刻死亡，但是危害很大，滥用抗生素则威胁到人类这个种
族，滥用抗生素会造成细菌耐药性，从而出现超级细菌，无药可治。而抗生素在养殖业中的
运用目的就是降低家畜家禽的发病率和死亡率，促进动物生长。其实质就是要增强动物的
免疫力。灵芝中的灵芝多糖具有很强的增强机体免疫功能的药理作用，如何将灵芝应用到
畜牧养殖业中替代抗生素，从而解决常规抗生素养殖造成的抗生素残留，保证民群众身体
健康成为一个技术难题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种能够避免抗生素养殖造成的抗生素残留，从
而保证人体健康的灵芝复合免疫剂的生产方法。
为了解决上述技术问题，本发明的灵芝复合免疫剂的生产方法，包括以下步骤：
A:芝深层发酵培养
a、灵芝菌种培养：培养温度为25～26℃，
取灵芝菌种在菌种培养基中培养20～30天，所述菌种培养基的配方组成为：马铃薯200
～250g、葡萄糖20～25g、磷酸二氢钾3～4g、七水硫酸镁1.5～2g、维生素B110～20mg、琼脂
18～20g、水1000ml；
b、摇床种：保持温度在25～26℃，在30L搅拌罐中装入所述步骤1)中培养有灵芝菌种的
菌种培养基，用水稀释，然后置于振荡器上，搅拌3～4天，控制搅拌速度为100～120转/min；
c、一级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤b中稀释搅拌后的培养基负压吸入300L
种子罐中，培养2～3天；
d、二级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤c中搅拌后的培养基负压吸入1.5吨的
种子罐中，培养2～3天；
e、发酵培养：保持温度在25～26℃，将所述步骤d中培养后的培养基负压吸入7吨的发
酵罐中，并加入发酵培养基发酵；
B、将7吨发酵罐中的灵芝发酵原液升温至45~55℃，加入20000u/g的酸性纤维素酶，加
入量为发酵罐实际装量的0.0001~0.0004%，搅拌酶解3~4小时，得到灵芝酶解液；
C、将上述灵芝酶解液降至40~45℃，并加入质量浓度为10%的NaOH溶液，调节pH至7.0~
9.0，加入发酵罐实际装量的0.006~0.012%的复合蛋白酶，搅拌酶解3~5小时，升温至85~95
℃，灭酶活10~30分钟；
D、板框压滤：将所述步骤C酶解灵芝混合液取出，用50～60kg的压力压滤，除去固体物，
得到灵芝酶解原液；
E、经过板框压滤后形成灵芝菌丝体，然后对灵芝菌丝体真空干澡并粉碎得到灵芝菌丝
体粉；
F、将灵芝菌丝体粉配伍黄芪粉得到灵芝复合免疫剂。
按质量百分数计，所述发酵培养基的配方组成为：玉米粉1～3％、蔗糖2～4％、磷
酸二氢钾0.01～0.02％、硫酸铵0.2～0.3％、酵母粉0.2～0.4％、豆油0.05～0.1％、余量为
水；
所述得复合蛋白酶的质量组成为：
10万u/g的中性蛋白酶35%
20万u/g的碱性蛋白酶 35%
10万u/g胰蛋白酶 10%
10万u/g的木瓜蛋白酶15%
10万u/g的糖肽酶 5%
所述步骤A中e工序中，待达到以下标准时，发酵结束：待灵芝菌丝上无明显芽头和锁状
联合现象，且菌丝变细，菌丝原生质凝集，菌丝有自溶现象发生时。
所述步骤A中e工序中，待达到以下标准时，发酵结束：菌丝湿重达到15～20％。
所述步骤A中e工序中，待达到以下标准时，发酵结束：发酵原液的pH值为3.0～
3.5。
本发明的有益效果在于：
灵芝菌种生产的灵芝菌丝体粉灵芝多糖含量高，活性强，具有显著的增强免疫力的功
能；黄芪也是一种具有增强机体免疫功能的中药材，主要功效成分是黄芪多糖，通过配伍灵
芝菌丝体粉和黄芪粉制成的灵芝复合免疫剂应用到畜牧养殖业中替代抗生素，从而解决了
常规抗生素养殖造成的抗生素残留，保证了人民群众的身体健康。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，对本发明的灵芝复合免疫剂的生产方法作进一步详细说
明。
本发明的灵芝复合免疫剂的生产方法，包括以下步骤：
A:芝深层发酵培养
a、灵芝菌种培养：培养温度为25～26℃，
取灵芝菌种在菌种培养基中培养20～30天，所述菌种培养基的配方组成为：马铃薯200
～250g、葡萄糖20～25g、磷酸二氢钾3～4g、七水硫酸镁1.5～2g、维生素B110～20mg、琼脂
18～20g、水1000ml；
b、摇床种：保持温度在25～26℃，在30L搅拌罐中装入所述步骤1)中培养有灵芝菌种的
菌种培养基，用水稀释，然后置于振荡器上，搅拌3～4天，控制搅拌速度为100～120转/min；
c、一级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤b中稀释搅拌后的培养基负压吸入300L
种子罐中，培养2～3天；
d、二级放大：保持温度在25～26℃，将所述步骤c中搅拌后的培养基负压吸入1.5吨的
种子罐中，培养2～3天；
e、发酵培养：保持温度在25～26℃，将所述步骤d中培养后的培养基负压吸入7吨的发
酵罐中，并加入发酵培养基发酵；
按质量百分数计，所述发酵培养基的配方组成为：玉米粉1～3％、蔗糖2～4％、磷酸二
氢钾0.01～0.02％、硫酸铵0.2～0.3％、酵母粉0.2～0.4％、豆油0.05～0.1％、余量为水；
待达到以下标准时，发酵结束：
待灵芝菌丝上无明显芽头和锁状联合现象，且菌丝变细，菌丝原生质凝集，菌丝有自溶
现象发生时；
发酵结束：菌丝湿重达到15～20％。
发酵原液的pH值为3.0～3.5。
B、将7吨发酵罐中的灵芝发酵原液升温至45~55℃，加入20000u/g的酸性纤维素
酶，加入量为发酵罐实际装量的0.0001~0.0004%，搅拌酶解3~4小时，得到灵芝酶解液；
C、将上述灵芝酶解液降至40~45℃，并加入质量浓度为10%的NaOH溶液，调节pH至7.0~
9.0，加入发酵罐实际装量的0.006~0.012%的复合蛋白酶，搅拌酶解3~5小时，升温至85~95
℃，灭酶活10~30分钟；
所述步骤C中复合蛋白酶的质量组成为：
10万u/g的中性蛋白酶35%
20万u/g的碱性蛋白酶 35%
10万u/g胰蛋白酶 10%
10万u/g的木瓜蛋白酶15%
10万u/g的糖肽酶 5%
D、板框压滤：将所述步骤C酶解灵芝混合液取出，用50～60kg的压力压滤，除去固体物，
得到灵芝酶解原液；
E、经过板框压滤后形成灵芝菌丝体，然后对灵芝菌丝体真空干澡并粉碎得到灵芝菌丝
体粉；
F、将灵芝菌丝体粉配伍黄芪粉得到灵芝复合免疫剂。