一种地龙组合物及其制备方法技术领域
本发明属于药物剂型和制剂技术领域，涉及一种地龙组合物及其制备方法。
背景技术
中风即脑血管意外，常见脑溢血和脑栓塞，是中老年人常发病状，尤其是高血压、
高血脂、冠心病患者，并呈逐年升高趋势。它的发病原因主要包括：在高血压及动脉粥样硬
化基础上，脑动脉血管壁增厚，管腔狭窄；或者随着中老年人体内胆固醇、甘油三酯、低密度
脂蛋白与极低密度脂蛋白增高，高密度脂蛋白下降，血液粘度增高，引起血流速度减慢，导
致血栓形成。脑血栓形成的好发部位为大脑中动脉、颈内动脉虹吸段和基底动脉中、下段，
脑血栓形成后，病变血管所供应的脑组织即发生梗塞、局部水肿、缺血性坏死和软化，甚至
出现脑溢血和脑栓塞，危及生命，并出现精神呆滞、舌质发硬、言语迟涩、发音不清、口眼歪
斜、肢体麻木或半身不遂等症状。目前治疗脑血栓症是以积极预防和治疗动脉硬化为主，药
物多用尿激酶、链激酶静脉滴注和扩张血管治疗。但由于患者体内脂质紊乱未得到调理，易
发生脑血栓后遗症装，患者达不到标本兼治，利用中药组方开发既能扩张血管、又能改善脂
质紊乱、并具有溶栓作用的中成药有着广泛的应用市场。
地龙是一平肝熄风中药，已有数千年的使用历史。1983年Mihara等首次发现
Lumbricidae科蚯蚓水提物有直接溶解纤维蛋白及激活纤溶酶原的作用，并命名为“蚓激
酶”。健康人口服本品后，纤维蛋白平板法测得外周血优球蛋白的纤溶活性明显增高，优球
蛋白溶解时间明显缩短，认为该提取物有望发展为新型溶栓剂。此后，国内外蚓激酶的研究
论文陆续发表，蚓激酶药品于1992年投入临床研究，主要用于治疗脑血栓性疾病。目前中国
市场上有关蚓激酶的保健品有龙舒泰、龙寿丹、龙津、龙福地龙胶囊等，国家批准的药品有
复方地龙胶囊、博洛克、溶栓胶囊等，这些产品含蚓激酶纯度不一，对改善微循环，防治血栓
性疾病均有一定疗效。
复方地龙胶囊是由蚓激酶粗酶和中药浸膏粉制成的中药三类新药，有活血化瘀、
温经通络，同时有益气扩血管、改善脂质紊乱之功效。有效治疗脑血栓，消除肢体偏瘫、言语
蹇涩或不语、心悸气短、流涎自汗、口眼歪斜、肢体麻木、半身不遂等症状。复方地龙胶囊的
处方由清·王清任《医林改错》中的补阳还五汤化裁而来，含有地龙、川芎、黄芪和牛膝。
蚓激酶是一类酸性蛋白水解酶，易降解失活或降活。复方地龙胶囊在制备过程中，
由于生产、贮存等条件的变化，会造成蚓激酶生物活性下降，从而降低了复方地龙胶囊的质
量，进而影响其疗效。
现有技术中糖类常作为水解蛋白多肽类的稳定剂。据文献报道，有人考察了蔗糖、
葡聚糖10400、葡聚糖41000以及葡聚糖20000分别与乳糖、精氨酸、谷氨酸组合使用、葡聚糖
20000加入量及pH对蚓激酶稳定性的影响，发现以加入50g/L葡聚糖20000和控制pH9为最佳
配方(王茵，陆直.以药物稳定性为指标考察蚓激酶粉针剂的工艺[J].江西中医院学报，
1999，11(1)：31-32。然而该方法所得制剂中保护性辅料存在着用量较大，单位重量辅料保
护效率低的缺点，且该方法所得制剂室温3个月蚓激酶残留活性仅为73.1％，保护效果有待
提高。
磷酸钙在食品工业中用作抗结剂、酸度调节剂、营养增补剂、增香剂、水分保持剂。
在制药行业中用作填充剂和稀释剂，在本发明中我们发现磷酸钙能很好的延缓蚓激酶的降
解速度。可能是由于磷酸钙能对蚓激酶进行适当的吸附包裹，减少蚓激酶的氧化降解发生。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种配方和方法，起到更好的保护蚓激酶活性的
效果。
本发明的目的可通过如下技术方案实现：
一种地龙组合物，以重量份计算，由地龙干粉10份、磷酸钙0.01-1份组成。
本发明所述的地龙组合物，磷酸钙的孔隙率优选在20％以上，进一步优选20％-
80％。
本发明所述的组合物在制备含地龙的药物中的应用。
本发明所述的地龙组合物，以重量份计算，包含地龙干粉10份、磷酸钙0.01-1份、
中药浸膏粉20-40份，滑石粉1-3份。
本发明所述的地龙组合物，优选包含地龙干粉10份、磷酸钙0.2-0.5份、中药浸膏
粉、20-40份，滑石粉1-3份。
本发明所述的地龙组合物，磷酸钙的孔隙率优选在20％以上，进一步优选20％-
80％。
所述中药浸膏粉由中药材川芎、黄芪、牛膝按1:1～2:1～2的质量比制得，其制备
方法为本领域的现有技术。
本发明所述的地龙组合物的制备方法，包括如下步骤：
a、称取配方量的地龙干粉、磷酸钙，用水溶解；
b、将上述溶液浓缩干燥，得含有磷酸钙的地龙干粉；
c、将含有磷酸钙的地龙干粉与川芎、黄芪、牛膝的浸膏粉、辅料滑石粉混合，灌装
胶囊，得复方地龙胶囊。
其中，步骤b所述干燥方法优选冷冻干燥、减压干燥或喷雾干燥。
本发明通过采用加入特定辅料磷酸钙对蚓激酶进行保护，减少了蚓激酶的活性下
降，相对于现有技术具有以下优点：
1.将保护辅料磷酸钙与地龙干粉混合溶解，干燥过程中保护辅料磷酸钙将蚓激酶
吸附至孔隙中，对蚓激酶进行了包裹，减少了蚓激酶与外界的接触，可以达到保护的目的。
2.磷酸钙的用量低，加入少量即可有效保护蚓激酶活性，且存放周期未见活性下
降。
3.磷酸钙的加入可降低干燥时间与能耗，减少蚓激酶的受热时间，提高其稳定性。
4.磷酸钙为无机物，可经人体代谢后排出，使用安全，对人体基本无害。
具体实施方式
以下是实施例及实验数据等，但本发明的内容并不局限于这些实施例的范围。
以下实施例中提及的地龙干粉制备方法、磷酸钙孔隙率的测定方法、中药浸膏粉
制备方法、蚓激酶效价的测定方法分别为：
地龙干粉制备方法为：取中药材地龙用10倍量纯化水40-60℃提取4-6小时，过滤，
滤液用减压干燥或冷冻干燥得到干燥物，干燥物粉碎过80目筛，即得地龙干粉。
磷酸钙孔隙率的测定方法为：氮气静态吸附容量法测定。
中药浸膏粉制备方法为：中药材川芎、黄芪、牛膝按1:1～2:1～2的质量比加至提
取罐中，加入8倍量的纯化水，煮沸提取2次，每次2小时，提取液合并，过滤，滤液用多效浓缩
罐浓缩至相对密度1.1-1.2，浓缩液采用减压干燥，干燥物粉碎过80目筛，即得中药浸膏粉。
蚓激酶效价的测定方法采用尿激酶琼脂糖-纤维蛋白平板法测定制品的效价，方
法参照卫生部颁发的蚓激酶〔W S-303(X-258)-95〕试行质量标准。具体测定方法如下：
效价测定
(1)试剂
0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.8)取磷酸氢二钠3.58g，加水使溶解并稀释至
1000ml为A液；取磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)0.78g，加水使溶解并稀释至500ml为B液；将A、
B两液混合至pH值为7.8。
工作溶液取0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.8)与0.9％氯化钠溶液(1:17混合)。
1.5％琼脂糖溶液取琼脂糖1.5g，加工作溶液100ml加热溶解。
纤维蛋白原溶液取纤维蛋白原适量，加工作溶液制成每1ml中含1.5mg的可凝蛋白
溶液。
凝血酶溶液取凝血酶，加0.9％氯化钠溶液制成每1ml中1BP单位的溶液。
标准品溶液的制备取蚓激酶标准品，用0.9％氯化钠溶液制成浓度分别为每1ml中
含10000、8000、6000、4000、2000蚓激酶单位的溶液。
供试品溶液的制备取本品适量，加0.9％氯化钠溶液使溶解并稀释成标准曲线范
围内的浓度。
(2)测定法取纤维蛋白原溶液39ml，置烧杯中，边搅拌边加入55℃琼脂糖溶液
39ml、凝血酶溶液3.0ml，立即混匀，快速倒入直径14cm塑料培养皿中，室温水平放置1小时，
打孔。精密量取不同浓度的蚓激酶标准品溶液及供试品溶液各10μl，分别点在同一平皿中，
加盖，置37℃恒温箱中反应18小时。取出后用卡尺测量溶圈垂直两直径，以蚓激酶标准品单
位数的对数为横坐标，垂直两直径乘积的对数为纵坐标，计算回归方程，将供试品垂直两直
径乘积的对数代入回归方程，计算供试品效价单位数。标准品与供试品应各做两点，以平均
值计算。
实施例1不同保护剂对地龙组合物中蚓激酶活性的影响
按照表1中处方和下述工艺制备复方地龙胶囊，测定蚓激酶效价，列于下表：
称取地龙干粉和保护辅料，将地龙干粉和保护辅料溶解于水中；混合均匀，冻干除
水，得到含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末，将含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末与其他
中药浸膏粉、其他辅料混合，所述其他中药浸膏粉由川芎、黄芪、牛膝按1:1:1的质量比制
得，所述中药浸膏粉的用量是地龙干粉用量的2倍，其他辅料中为滑石粉，滑石粉用量是地
龙干粉重量的十分之一，得地龙组合物，将地龙组合物置于25℃保存，测定1周、2周后蚓激
酶的效价。
表1不同保护剂对地龙组合物蚓激酶活性的影响
研究发现不加保护剂的实验组，地龙组合物在放置过程中蚓激酶活性下降严重，
加入0.1-10％重量比的磷酸钙能很高程度的提高蚓激酶的残留活性。
实施例2磷酸钙孔隙率对复方地龙胶囊蚓激酶活性的影响
按照表2中处方和下述工艺制备复方地龙胶囊，测定蚓激酶效价，列于下表：
称取地龙干粉和不同孔隙率的磷酸钙，溶解在水中；混合均匀，减压干燥除水，得
到含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末，将含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末与其他中药浸
膏粉、其他辅料混合，所述其他中药浸膏粉由川芎、黄芪、牛膝按1:2:2的质量比制得，所述
中药浸膏粉的用量是地龙干粉用量的4倍，其他辅料为滑石粉，滑石粉用量是地龙干粉重量
的十分之三，灌装胶囊，得复方地龙胶囊，将复方地龙胶囊置于25℃保存，测定1周、2周、5周
后蚓激酶的效价。
表2不同孔隙率的磷酸钙对复方地龙胶囊蚓激酶活性的影响
研究发现，随着保护剂磷酸钙孔隙率提高，蚓激酶的残留活性也有提高，优选孔隙
率在20％以上的磷酸钙。
实施例3磷酸钙加入量对复方地龙片蚓激酶活性的影响
按照表3中处方和下述工艺制备复方地龙片，测定蚓激酶效价，列于下表：
称取地龙干粉和磷酸钙，溶解于水中；混合均匀，喷雾干燥除去水，得到含保护辅
料的地龙磷酸钙混合粉末，将含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末与其他中药浸膏粉、辅料
混合，所述其他中药浸膏粉由中药材川芎、黄芪、牛膝按1:2:2的质量比制得，所述中药浸膏
粉的用量是地龙干粉用量的4倍，其他辅料为滑石粉，滑石粉用量是地龙干粉重量的十分之
三，压片，得复方地龙片，将复方地龙片置于25℃保存，测定1周、2周、5周后蚓激酶的效价。
表3磷酸钙加入量对复方地龙片蚓激酶活性的影响
研究发现，随着保护剂磷酸钙比例提高，蚓激酶的残留活性也有提高，但投入比例
0.01～1份之间差别不大，均能很好的对蚓激酶进行保护。优选磷酸钙的用量为0.1～0.5
份。
实施例4含保护辅料的复方地龙胶囊稳定性研究
按照表4的处方和下述工艺制备复方地龙胶囊，放置稳定性，于取样点测定蚓激酶
效价，稳定性数据列于下表：
称取地龙干粉和磷酸钙，溶于水中；混合均匀，减压干燥除去分散剂，得到含保护
辅料的地龙磷酸钙混合粉末，将含保护辅料的地龙磷酸钙混合粉末与其他中药浸膏粉、辅
料混合，所述其他中药浸膏粉由中药材川芎、黄芪、牛膝按1:1:1的质量比制得，所述中药浸
膏粉的用量是地龙干粉用量的4倍，辅料中包括滑石粉，滑石粉用量是地龙干粉重量的十分
之一，灌装胶囊，得复方地龙胶囊，将复方地龙胶囊置于25℃3个月，于1月、2月、3月测定蚓
激酶效价。
表4含保护辅料的复方地龙胶囊稳定性研究
研究发现，地龙浓度在2～12g/100ml范围内，加入0.5份磷酸钙，复方地龙胶囊在
室温保存3个月，蚓激酶残留活性均＞84％，说明该方法能有效保护蚓激酶活性。