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串联体—聚合物—配合物其制备方法和含有该配合物的药剂
    本发明涉及在权利要求中所限定的内容，即新的串联体-聚合物—配合物含有这些化合物的药剂，该配合物用于疾病的诊断和治疗的应用，以及制备这些化合物及药剂的方法。

    迄今临床中用于现代成像方法核磁共振造影(MRT)和计算机X线断层造影(CT)所用的造影剂(Magnevist，Pro Hance，Ultrav-ist和Omniscan)分布于肌体的全部细胞空间中(管内空间和小间隙)，该分布容积大约占肌体总体积之20％。

    细胞外MRI-造影剂在临床上首先成功地用于诊断脑脊髓病理过程，这是由于区域分布容积所造成的完全特殊的情况所致。在脑和脊髓中，由于血脑屏障的存在，健康组织中细胞外造影剂不会离开血管内空间。但在血脑屏障紊乱的病理过程中(如恶性肿瘤，炎症，脱髓鞘病)，在脑内提高了对细胞外造影剂向血管内的通透性(schmiedl等：星状细胞神经胶质瘤的MRI的血脑屏障通透性：小分子量和大分子量造影剂地应用，Magn，Reson，Med.22：288，1991)。利用血管通透性的这种紊乱，可以识别比健康组织有较高的对比度的病态组织。

    在脑脊髓外部当然没有对上述造影剂的这种通透性屏幕障(canty等，非离子性造影剂向心肌血管外空间的首先进入作用。对通过时间和血液体积的放射照像估算的作用，Circulation，84：2071，1991)。因而造影剂的增加不再取决于血管的通透性，而只与相应组织中细胞外容积大小有关，用这类造影剂是不可能限制附近小间隙部位的血管的。

    为了血管造影，尤其希望造影剂只分布在血管腔内，这样的血管内药物应尽可能在核磁共振成像的帮助下很好地浸入血管中而不进入组织中，因而可诊断缺血。栓塞组织也由于其缺血在使用血管造影剂时可界定开健康组织和缺血组织。这对于区分心肌梗塞与缺血状态是尤其重要的。

    迄今怀疑有心血管病患者(在西方发达国家是最高死亡原因的疾病)大多需用浸入性诊断手段。现今进行的血管造影术都用含碘的造影剂、用伦琴射线诊断。这种手段有多种缺点：受射线照射的危险，以及在用含碘造影剂所特别出现的不适的负担，是由于与NMR造影剂相比使用的浓度过高。

    因而需要这样的NMR造影剂，它能够标识血管腔体(血管剂)。这些化合物应有良好的可容性和很强的作用等特点(提高的MRI信号强度)。

    通过使用与大分子或生物分子结合的复合物，这个问题至少可部分地解决，这个势头最近只是非常有限的。

    例如在欧洲专利No.0088695和0150844中叙述的复合物的顺磁中心数是不够令人满意的。

    倘若将复合物单元多次引入到大分子的生物分子中，从而提高所必需的金属离子数，则会使这些生物分子的亲和性和(或)特异性发生不能耐受的损伤(J.Nucl.Med.24：1158(1983))。

    大分子通常可作为造影剂适用于血管造影。例如白蛋白—GdDTPA(Radiology 1987，162：205大鼠静脉注射后24小时富集于肝组织中，几乎为剂量的30％。此外，在24小时后只有20％的药量排出体外。

    大分子多聚赖氨酸-GdDTPA(欧洲专利申请公开号No.0233619)也显示，它宜于作为血管造影剂。该化合物在制法上也是由不同大小的分子混合而成。大鼠的排泄试验表明，该大分子经肾小球过滤，以未变形式而排出。但在合成条件下，多聚赖氨酸-GdDTPA也会含有这样的大分子，它们在肾小球过滤时，不会穿越肾毛细血管，因而又回到体内。

    还报导含有碳水化合物如右旋糖酐的大分子造影剂(欧洲专利申请公开号No.0 326226)。这类化合物的缺点是，通常只有5％的顺磁正离子信号强度。

    在欧洲专利申请No.0430863中叙述的聚合物已提供了制备血管造影剂的一个途径，因为它不再有前述聚合物关于分子大小和分子量所特有的异源性。一直希望具有完全的排泄、无毒和(或)有效性。

    因而提出的任务是，找到完全可识别和定位血管疾病的诊断试剂，它们没有上述的缺点，而本发明则解决了此任务。

    现在发现，下述配合物令人意外地特别适于作为NMR及X线诊断剂，而无上述的缺点，所述配合物由含氮的且与配体形成配合物的串联体-聚合物至少16个，其原子序数为20-29，39，42，44或57-83元素的离子以及必要时无机和(或)有机碱，氨基酸或氨基酸酰氨的正离子所组成，并且必要时含有酰化的氨基。

    本发明的形成配合物的串联体-聚合物通过通式I表示：

    A-{X-[Y-(Z-＜W-Kw＞z)y]x}a    (I)式中A为具有多重碱性度a的、含氮串联体核，X和Y为各自独立的单键或具有多重重复度x或y的串联体重复单元，Z和W各自独立为具有多重重复度z或w的串联体重复单元，K为配合物构成体的一个基团，a为数值2～12，x、y、z和w各自独立为数值1-4，其条件是，至少二个重复单元不相同，多重度的乘积满足：

    16≤a·x·y·z·w≤64串联核A宜于为

    氮原子：式中m和n为数值1～10，p为数值0～10，U1为Q1或E，U2为Q2或E，E的含义为

    式中

    o为数值1～6

    Q1为氢原子或Q2，

    Q2为单键，M为C1-C10亚烷基键，任选被1-3个氧原子间隔和/或任选被1-2个氧代基团取代，R0为支链或直链C1-C10烷基，硝基、氨基、羧酸基或其中数值Q2相当于的多重碱度a。

    氮原子是串联核的最简单形式，其第一个“内层”(第1代)的三个价键(多重碱度a＝3)是被3个重复单元X或Y(当X为一单键时)或Z(当X或Y均为单键时)占据；其它的结构是，串联体中最基本的起始点氨A(H)a＝NH3中的三个氢原子被三个重复单元X或Y或Z取代，在串联体核A中含有的Q2又给出多重碱度a。

    在重复单元X、Y、Z和W含有-NQ1Q2基，其中Q1为氢原子或Q1和Q2为一个单键。在每个重复单元(例如X)中含有的Q2相当于该单元的多重重复度(例如当X情况下为x)。全部多重重复度的乘积a·x·y·z·w对应于串联体聚合物中结合了的配合物构成体基团K的数目。本发明的聚合物分子中含有至少16个、至多64个K基团，每一个可结合一个至最多3个(当是二价离子的情况下)，优选一个上述序号的元素的离子。

    第二代：即结合在配合物构成体基团K上的重复单元W经NH基(-NQ1Q2，其中Q1为氢原子，Q2为单键)与K相结合，而前面的重复单元既可经过NHQ2基(如经酰化反应)、也可经NQ1Q2基(例如经烷基化反应)相互连结。

    本发明的串联体-聚合物配合物最多可有10代(即分子中每个重复单元X、Y和Z也可多于1个)，优选为2-4代，其中，在分子中至少有2个重复单元是不同的。

    在上述通式中范围内，作为优选的串联体核A是这些，其中：

    m为数值1-3，优选为1；

    n为数值1-3，优选为1；

    p为数值0-3，优选为1；

    o为数值1，

    M为-CH2-，-CO-或-CH2-CO-基；且

    R0为-CH2NU1U2，CH3-或NO2-基。

    更优选的串联体起始点A(H)a例如为：

    (括弧中给出多重碱度a，用于表示构成相邻下-代时所用的下列单取代或二取代)

    三(氨基乙基)胺                                      (a＝6或3)

    三(氨基丙基)胺                                      (a＝6或3)

    二亚乙基三胺                                        (a＝5或3)

    三亚乙基四胺                                        (a＝6或4)

    四亚乙基五胺                                        (a＝7或5)

    1，3，5-三(氨基甲基)苯                              (a＝6或3)

    1，3，5-苯三酰氨                                    (a＝6或3)；

    1，4，7-三氮杂环壬烷                                (a＝3)；

    1，4，7，10-四氮杂环十二烷                          (a＝4)；

    1，4，7，10-13-五氮杂环十五烷                       (a＝5)；

    1，4，8，11-四氮杂环十四烷                          (a＝4)；

    1，4，7，10，13，16-六氮杂环二八烷                  (a＝6)；

    1，4，7，10，13，16，19，22，25，28-十氮杂三十烷    (a＝10)；

    四-氨基甲基)甲烷                                   (a＝8或4)；

    1，1，1-三(氨基甲基)乙烷                           (a＝6或3)；

    三(氨基丙基)-硝基甲烷                              (a＝6或3)

    2，4，6-三氨基-1，3，5-三嗪                        (a＝6或3)；

    1，3，5，7-金刚烷四羧酸酰胺                        (a＝8或4)；

    3，3′，5，5′-二苯醚-四羧酸酰胺                   (a＝8或4)；

    1，2-双[苯氧乙烷]-3′，3″，5′，5″-四羧酸酰胺    (a＝8或4)；

    1，4，7，10，13，16，21，24-八氮杂双环并[8.8.      (a＝6)

    8]二十六烷

    已知，选定串联体核A的定义以及由此产生的串联体与第一个重复单元之间的界限纯粹是一个形式问题，并且与所需的串联体-聚合物—配合物实质性合成无关。例如在实施例4中所使用的三(氨基乙基)胺本身既可认为是串联体核A(参见为A给定的第一个通式，其中m＝n＝p＝1，U1＝E且O＝1，U1＝U2＝Q2)，也可认为是氮原子(＝串联体核A)，它作为第一代具有三个重复单元-CH2-(参见E的定义)。

    串联体重复单元X、Y、Z和W相互独立为：

    E，式中，U1为Q1或E，U2为Q2或E，E的含义为基团其中o为数值1～6，Q1这氢原子或Q2Q1为单键，U3为C1-C20-亚烷基链，任选被1～10个氧原子和/或1-2个-N(CO)q-R2-、1至2个亚苯基-和/或1-2个亚苯氧基间隔，和/或任选被1-2个氧代基、硫代基、羧基C1-C5-烷基羧基-，C1-C5-烷氧基，羟基，C1-C5-烷基取代，其中，

    q为0或1，

    R2为氢原子，甲基或乙基，其上可任选被1-2个羟基或1个羧基取代，

    L为氢原子或为基团V为次亚甲基，前提是U4同时为单键，成为基团M，并且U5的含义为U3，或V为，前提是，U4和U5相同并且是单键，或者基团M

    优选的串联体重复单元X、Y、Z和W为这些，其中在上述通式中，U3为-CO-，-COCH2OCH2CO-，-COCH2-，-CH2CH2-，-CONHC6H4-，-COCH2CH2CO-，-COCH2-CH2CH2CO-，-COCH2CH2CH2CH2CO-，

    基团U4的含义为单键或-CH2CO-，

    基团U5的含义为单键，-C(CH2)4-，-CH2CO-，-CH(COOH)-，-CH2OCH2CH2-，-CH2-C6H4-，-CH2-C6H4-OCH2CH2-，

    基团E为

    有代表性的串联体重复单元X、Y、Z和W为可以列举如下：-CH2CH2NH-；-CH2CH2N＜；-COCH(NH-)(CH2)4NH-；-COCH(N＜)(CH2)4N＜；-COCH2OCH2CON(CH2CH2NH-)2；-COCH2OCH2CON(CH2CH2N＜)2；-COCH2N(CH2CH2NH-)2；-COCH2N(CH2CH2N＜)2；-COCH2NH-；-COCH2N＜；-COCH2CH2CON(CH2CH2NH-)2；-COCH2CH2CON(CH2CH2N＜)2；-COCH2OCH2CONH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2NH-)2]2；-COCH2OCH2CONH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2N＜)2]2；-COCH2CH2CO-NH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2NH-)2]2；-COCH2CH2CO-NH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2N＜)2]2；-CONH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2NH-)2]2；-CONH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2N＜)2]2；-COCH(NH-)CH(COOH)NH-；-COCH(N＜)CH(COOH)N＜；配合物构成体基团K可用通式IA和IB表示：式中，R1各自独立为氢原子或原子序数为20-29，39，42-44，或57-83的金属离子一个当量；R2为氢原子，甲基或乙基，其上任选被1-2个羟基或1个羧基取代；R3为-CH2-CH(OH)-U6-T-或-CH2-CO-U7-基团，U6为一个直链或支链的、饱和或不饱和的C1-C20亚烷基其上可任选含有1-5个亚氨基，1-3个亚苯基，1-3个亚苯氧基，1-3个亚苯基亚氨基，1-5个酰氨基，1-2个酰肼基，1-5个羰基，1-5个亚乙氧基，1个脲基，1-硫代脲基：1-2个羧烷基亚氨基，1-2个酯基，1-10个氧原子、1-5个硫原子和/或1-5个氮原子子、和/或任选被1-5个羟基、1-2个巯基、1-5个氧代、1-5个硫氧代、1-3个羧基、1-5个羧烷基、1-5个醚基和/或1-3个氨基取代，其上任选含有的亚苯基被1-2个羧基、1-2个砜基或1-2个羟基取代；U7为单链或基团-NR2-U6-TT为-CO-α，-NHCO-α-或-NHCS-α-基团α为在上一代重复单元W的末端氮原子上的键合位置；γ为数值0、1、2或3 。

    优选的配合物构成体基团K可提及这些，其中，在上述的通式1A中，U6为C1-C20、优选为C1-C12亚烷基链，其上含有-CH2-，-CH2NHCO-，-NHCOCH2O-，-NHCOCH2OC6H4-，-N(CH2CO2H)-，-NHCOCH2C6H4-，-NHCSNHC6H4-，-CH2OC6H4-，-CH2CH2O-，和/或被-COOH，-CH2COOH取代。

    作为实例，U6可为如下基团：-CH2-，-CH2CH2-，-CH2CH2CH2-，-C6H4-，-C6H10-，-CH2C6H5-，-CH2NHCOCH2CH(CH2CO2H)-C6H4-，-CH2NHCOCH2OCH2-，-CH2NHCOCH2C6H4-，-CH2NHCSNH-C6H4-CH(CH2COOH)CH2-，-CH2OC6H4-N(CH2COOH)CH2-，-CH2NHCOCH2O(CH2CH2O)4-C6H4-，-CH2O-C6H4-，-CH2CH2-O-CH2CH2-，-CH2CH2-O-CH2CH2-O-CH2CH2-，

    本发明药剂若用于NMR诊断，则配合物盐的中心离子必须是顺磁性的。这尤其应是其原子序数为21-29、42、44和58-70的元素的二价-或三价离子。适宜的离子例如是铬(III)、铁(II)、钴(II)、镍(II)、铜(II)、镨(III)、铷(III)、钐(III)和镱(III)离子。尤其优选的是钆(III)、铽(III)、镝(III)、钬(III)、铒(III)、锰(II)和铁(III)离子，这是因为它们有非常强的顺磁矩。

    本发明药剂若用于X-线诊断，则配合物中心离子必须从较高原子序数的元素产生，以便达到足够的X射线吸收。为达到此目的，已证明这样的诊断剂是合适的，它含有其中心离子为从原子序数为21-29，39，42，44，57-83的元素得到的生理可容性配合物盐，所说中心离子例如为镧(III)离子和上述的镧系元素离子。

    本发明的串联体-聚合物配合物至少含有16个上述原子序数元素的离子。

    其余的酸性氢原子即未被中心离子取代的氢，可任选地全部或部分地被无机的和(或)有机碱、氨基酸或氨基酸酰胺的阳离子置换。

    适宜的无机阳离子例如是锂、钾、钙、镁-和尤其是钠离子。适宜的有机碱阳离子为可除其它的外，由伯、仲、叔胺例如乙醇胺、二乙醇胺、吗啉、葡糖胺、N，N-二甲基葡糖胺、尤其是N-甲基葡糖胺生成的阳离子。适宜的氨基酸阳离子例如是赖氨酸，精氨酸-和乌氨酸-，以及酸性或中性氨基酸的酰胺的阳离子。

    分子量为10000～80000D，优选为15000-40000D的本发明化合物显示出开头所述的希望有的性质。这些化合物含有应用时所需数量的金属离子，它们稳定地结合在配合物中。

    这类物质富集于提高了血管通透性的组织如肿瘤中，经扩散可吸收到组织中，从而可以测定组织中的血液容积，选择性地缩短弛豫时间和血液的密度，并可形象地显示出血管的通透性。这些生理学信息不是能通过加入细胞外造影剂如Gd-DTPA(magnevist)而获得的。由此观点，也产生了现代磁共振成像和计算机X-线断层成像的新方法：恶性肿瘤的特异性诊断，细胞毒药物或血管扩张药物的早期治疗控制，小范围灌流的早期识别(如心肌)，血管疾患的血管造影，炎症(菌性或感染性)的识别与诊断。

    细胞外造影剂(如Gd-DTPA)的其它优点是，对于磁共振成像(较高的驰豫性)有较高的造影效率，从而明显地降低了诊断所用的剂量。同时本发明造影剂是以等渗溶剂注入血液中，因而降低了机体的渗透性负担，从而降低了这些物质的毒性(较高的中毒阈值)。较低的剂量和较高的中毒阈值明显地提高了应用该造影剂于现代成像技术的可靠性。

    与以碳水化合物如右旋糖苷(欧洲专利申请公开号0 326 226)的顺磁阳离子的信号强度通常只有大约5％的情况相比，本发明的聚合物-配合物的顺磁阳离子含量通常大约为20％，因而本发明的大分子的每个分子显示出非常高的信号强度，同时与以碳水化合物为基质的大分子造影剂相同，磁共振成像所需的剂量明显地减小。

    用本发明的聚合物-配合物，可成功地构建和制备这样的大分子，它们有单一地定义的分子量。因而令人意外地发现，可以调节足够大的高分子，以使其慢慢地离开血管腔，但同时又足够小，大小为300-800A，从而可以穿越肾小管。

    本发明的串联体-聚合物-配合物与其它的常规用的聚合物相比的特征是：改善了排泄性质，较高了造影特性，稳定性高和(或)改善了耐受性。

    本发明的另一优点是，现今带亲水性或亲脂性的、大环的或开链的、低分子量或高分子量的配体的配合物是可用的，可以通过化学取代来调节这些聚合物配合物的耐受性和药代动力学性质。

    本发明的串联体—聚合物配合物的制备方法是：使通式I′化合物与通式I′A或I′B的配合物或配合物构成体K′反应：

    A-{X-[Y-(Z-＜W-βw＞z)y]x}a    (I′)式中A为具有多碱度a的含氮的串联体核；X和Y各自独立为单链或重复度为x或y的串联体重复单元；Z和W各自独立为重复度为z或w的串联体重复单元；a为数值2-12；x、y、z和w各自独立为数值1-4且β为上一代的重复单元W的末端NH-基的键合点，其条件是重复单元中至少有二个不相同且多重性度的乘积满足下式：

    16≤a·x·y·z·w≤64其中R1’各自独立为一个氢原子，其原子序数为20-29，39，42-44或57-83的金属离子的一个当量或一个酸保护基；R2为氢原子，甲基或乙基，任选被1-2个羟基或1个羧基取代；R3’为-CH2-CH(OH)-U6-T或-CH2-CO-U7’-基U6为一个直链或支链的、饱和或不饱和的C1-C20亚烷基其上可任选含有1-5个亚氨基，1-3个亚苯基，1-3个亚苯氧基，1-3个亚苯基亚氨基，1-5个酰氨基，1-2个酰肼基，1-5个羰基，1-5个亚乙氧基，1个脲基，1-硫代脲基：1-2个羧烷基亚氨基，1-2个酯基，1-10个氧原子、1-5个硫原子和/或1-5个氮原子子、和/或任选被1-5个羟基、1-2个巯基、1-5个氧代、1-5个硫氧代、1-3个羧基、1-5个羧烷基、1-5个醚基和/或1-3个氨基取代，其上任选含有的亚苯基被1-2个羧基、1-2个砜基或1-2个羟基取代；U7’为单键或-NR2-U6-T’，T’为-C*O-，-COOH，-N＝C＝O，或-N＝C＝S基团，C*O为活化的羧基，r为数值0、1、2或3，其条件是：若K’代表一个配合物，则至少2个(对于二价金属)或3个(对于三价金属)取代基R1为上述元素的金属离子的一个当量，且根据需要，其余羧基为它与无机或(和)有机碱、氨基酸、氨基酸酰胺所成的盐形式。

    在该反应中还可任选地将存在的保护基裂解掉，使这样得到的串联体—聚合物-倘若K′代表一个配合物构成体-按已知的方法与其原子序数为20-29，39，42，44或57-83的一种元素的至少一个金属氧化物或金属盐反应，然后任选地将由此得到的串联体-聚合物配合物中还存在的酸性氢原子部分地或全部地用无机或有机碱、氨基酸或氨基酸酰氨取代，并且任选地将仍存在的游离末端氨基在金属配合之前或之后加以酰化。

    在配合物或配合物构成体K′中的活化羰基C*O的实例有酰酐，对-硝基苯·酯，N-羟基琥珀酰亚胺酯，五氟代苯酯和酰氯。

    为了引入配合物构成体单元所进行的加成或酰化要与这样的基质进行，它们含有所希望的取代基K(K最终结合于一个离去基团上)，或者由此底物经反应能产生所需的取代基。

    该加成反应的实例可提及异氰酸酯或硫代异氰酸酯的反应。异氰酸酯的反应优选于非质子性溶剂例如THF、二恶烷、DMF、DM-SO、二氯甲烷中进行，温度为0～100℃，优选为0～50℃，任选加入有机碱如三乙胺，吡啶，二甲基吡啶，N-乙基二异丙胺，N-甲基吗啉。硫代异氰酸酯的反应通常是在溶剂如水或低碳醇如甲醇、乙酯、异丙醇或它们的混合物、DMF或DMF与水的混合物中进行，温度为0-100℃，优选为0-50℃，任选加入有机或无机碱，例如三乙胺、吡啶，二甲基吡啶，N-乙基二异丙胺，N-甲基吗啉、或碱土金属的或碱金属的氢氧化物如氢氧化锂、-钠、-钾、-钙，或它们的碳酸盐如碳酸镁。

    酰化反应的实例是按照本领域技术人员已知之方法进行的游离羧酸的反应[例如J.P.Greenstein，M.Winttz，氨基酸化学，John Wi-ley & Sons，纽约(1961)，943-945页]。不过更为有利的是，在酰化反应前，将羧基转变为酸酐、活化酯或酰氯[例如E.Gross，J.Mein-hofer：肽，科学出版社，纽约(1979)，卷1，65-314页；N.F.Albert-son，有机反应，12：157(1962)]。

    酸酐反应的实例是单酸酐的反应N3-(2，6-二氧代吗啉代基乙基)-N6-(乙氧羰甲基)-3，6-二氮杂辛二酸与含有所希望的末端氨基的串联体-聚合物反应，反应在水中，极性溶剂如二噁烷、THF、DMF、DMSO或乙腈中，或它们的混合物中进行，在碱性PH、优选为8-10，即加入碱如氢氧化钠或-钾，三乙胺或吡啶，温度为0-50℃，优选为室温下进行。为使反应完全在水中最好用2-3倍过量的单酸酐。

    在用活化酯反应时，按照本领域技术人员熟悉的文献方法进行[如Houben-Weyl，有机化学方法，Georg Thieme出版社，Stuttgart，卷E5(1985)，633]。可在对上述酸酐反应所述的条件下进行。但也可以用非质子性溶剂如二氯甲烷、氯仿。

    酰氯的反应只能用非质子性溶剂如二氯甲烷、氯仿、甲苯、THF、温度为-20-50℃，优选为0-30℃进行。还可用本领域中已知的文献方法进行[如Houben-Weyl，有机化学方法，Georg-Thieme出版社，Stuttgart，(1974)，卷15/2，355-364页]。

    若R1′是一个酸保护基团，可考虑为烷基、芳基或芳烷基，如甲-、乙-、丙-、丁基，苯基、苄基、二苯基甲基、三苯甲基、双-(对-硝基苯基)甲基，以及三烷基甲硅烷基。

    对保护基作任选的裂酐时，可按本领域技术人员已知的方法进行，例如水解、氢解、酯类于水性-醇性碱溶液中进行碱性皂化，温度为0～50℃。若是叔丁基酯，则用三氟乙酸。

    必要时用配体或配合物进行不完全的酰化的末端氨基可根据需要转变成酰胺或半酰胺。例如可提及与乙酸酐、琥珀酸酐或二乙二醇酸酐。

    引入所需的金属的例子的方法是，例如在德国专利公开说明书3401052公布的那样，将其原子序数为20-29，42、44、57-83元素的金属氧化物或金属盐(如硝酸盐、乙酸盐、碳酸盐、氯化物或硫酸盐)溶解或悬浮于水和/或低碳醇(如甲醇、乙醇或异丙醇)中，与等当量的构成配合物的配位体的溶液或悬浮液反应，然后根据需要，将酸基上存在的酸性氢原子用无机或(和)有机碱的、氨基酸或氨基酸酰氨的阳离子取代。

    所需金属离子的引入既可以发生在配合物，构成体I’A或I’B阶段，即在偶联在串联体-聚合物之前，也可发生在未金属化的配体I’A或I’B的偶联之后。

    用无机碱进行中和反应(如氢氧化物，碳酸盐或碳酸氢盐)，例如是由钠、钾、锂、镁、或钙得到的无机碱和/或有机碱，如伯、仲、叔胺，例如乙醇胺、吗啉、葡糖胺、N-甲基-和N，N-二甲基葡糖胺，以及碱性氨基酸，赖氨酸、精氨酸和乌氨酸或中性或酸性氨基酸酰胺，如马尿酸、甘氨酸乙酰胺。

    为了制备中性的配合物化合物，例如可将酸性配合物盐的水溶液或水性悬浮液，加入所需量的碱，以使之达到中和点。然后将得到的溶液于减压下浓缩至干。通常是将生成的中性盐中加入可与水相混合的溶剂，如低碳醇(例如甲醇、乙醇、异丙醇等)、低碳酮(丙酮等)、极性醚(四氢呋喃、二噁烷、1，2-二甲氧基乙烷等)以使其沉淀，从而得到容易分离的和提纯了的结晶性盐。尤其有利的是，所希望得到的碱由于反应混合物的配合物生成时即被加入，因而节省了制备工艺步骤。

    若酸性配合物含有较多的游离酸基，常常以制备中性的混合盐为宜，此时的阳离子既可是无机阳离子，也可以是有机阳离子。

    例如可这样进行，将形成配合物的配体的水性悬浮液或溶液，以提供元素的中心离子的氧化物或盐和为半量中和所必需的有机碱进行反应，必要时将生成的配合物盐纯化然后用必要量的无机碱完全中和。加入碱的次序也可以反过来。

    得到的串联体-聚合物配合物进行纯化，任选地加入酸或碱，使pH为6～8，优选为7，用适宜孔径的膜进行超过滤(如AminconXM30，AmiconYM10，AmiconYM3)，或于适宜的Sephadex-Gelen进行凝胶过滤。

    为偶联到配合物构成体K’(也可以是相应的含金属的配合物)所必需的带有末端氨基的串联体一聚合物的制备方法一般是由可以买到的或按照类似于文献方法制备的含氮的串联体起始物A(H)a制备。X、Y、Z和W各代的引入是按照文献所述方法(例如J.March，高等有机化学第3版，John Wiley & Sons(1985)，364-381)，用具有所希望的结构的被保护的胺经酰化或烷化反应而得，该胺含有能够键合串联体核上的功能基，例如羧酸、异氰酸酯，硫代异氰酸酯或活化的羧酸(如酸酐、活泼酯、酰氯)或卤化物(例如氧化物、溴化物、碘化物)，氮丙啶、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、或专业人员熟知的其它离去基团。

    这里应强调的是，串联核A与重复单元之间的区别纯粹是形式上的。在合成上可能更有利的是，不用形式上的串联体起始物A(H)a，而是根据定义可将第一代的所有的含氮原子引入到串联体核上。例如，为了合成在实施例1b)中所述的化合物，不是用例如苄氧羰基氮丙啶(6倍)烷化形式上的串联体核苯三甲酸酰氨，而是将苯三甲酰氯与双[2-(苄氧羰基氨基)-乙基]胺(3倍)反应而得。

    氨基保护基有专业人员常用的苄氧羰基、叔丁氧羰基、三氟乙酰基、芴甲氧羰基、苄基、和甲酰基[Th.W.Greene，P.G.M.Wuts，有机合成中的保护基团，第2版，John Wiley and Sons(1991)，S，309-385]。为些保护基裂解后，按照文献已知的方法，再引入分子中相邻的下一代基团，此外，由每两个反应步骤(烷化或酰化以及去保护基)生成的某一代的结构时，也可能只用这两步反应引入两代如X-[Y]x或更多代的结构如X-[Y-(Z)y]x。这些多代单元的结构的生成是烷化或酰化所希望的重复单元上存在的未保护的具有第二个重复胺(以保护的形式存在)的化合物。

    作为串联体起始物的通式A(H)a所必需的化合物是可以买到的，或按文献方法可以制备的(例如Houben Weyl，有机化学方法，Georg-Thieme出版社，斯图加特(1957)，卷11/I；M.Micheloni等，无机化学(1985)，24，3702；T.J.AtKins等，有机合成卷58(1978)，86-98；杂环化合物化学：J.S.Bradshow等，氮杂冠状大分子，John Wi-ley & Sons，纽约(1993)]。有代表性的可列于下：三(氨基乙基)胺[例如Fluka化学公司，瑞士，Aldrich化学试剂，德国]；三(氨基丙基)胺[例如C.Woerner等，Angew，Chem.Inter，Ed.Engl.(1993)，32，1306]；二亚乙基三胺[例如，Fluka，Aldrich]；三亚乙基四胺[例如，Fluka，Aldrich]；四亚乙基五胺、例如，Fluka，Aldrich]；1，3，5-三(氨甲基)苯[例如，T.M.Garrett等，J.Am.Chem.Soc.(1991)，113：2965]；苯三甲酸三酰氨[例如，H.Kurihara；Jpn，Kokai Tokkyo Koho，J.P.04077481；CA117，162453]；1，4，7-三氮杂环壬烷[例如Fluka，Aldrich]；1，4，7，10，13-五氮杂环十五烷[例如K.W.Aston，欧洲专利申请号0524161，CA120，44580]；1，4，8，11-四氮杂环十四烷[例如Fluka，Aldrich]；1，4，7，10，13，16，19，22，25，28-十氮杂环三十烷[例如A.Andres等，J.chem.Soc，Dolton Trans(1993)，3507]；1，1，1-三(氨甲基)乙烷[例如R.J.Geue等，Aust.J.Chem.(1983)，36，927]；三(氨丙基)-硝基甲烷[例如G.R.NewKome等，Angew Chem.103，1205(1991)，类似于R.C.Larock Comprehensive Organic Trans-formations，VCH出版社，纽约(1989，419-420)；1，3，5，7-金刚烷四羧酰胺[例如H.Stetter等；Tetr.Lett.1967，1841]；1，2-双[苯氧乙烷]-3′，3″，5′，5″-四羧酰胺[例如J.P.collman等；J.Am.Chem.Soc.(1988)，110，3477-86，类似于实施例16所述的方法]；1，4，7，10，13，16，21，24-八氮杂双环[8.8.8]十六烷[例如P.H.Smith等，J.Org.Chem(1993)，58 7939]。

    为了构造各代结构而制备所必需的、含有上述功能基的重复胺，可按照实施例所述的方法或文献已知的方法进行。例如有：Nα，Nε-二-CO-o-CH2C6H5-赖氨酸-对-硝基苯酯[见实施例1c方法]；HOOC-CH2OCH2CO-N(CH2CH2NH-CO-O-CH2C6C5)2[见实施例7a)方法]；HOOC-CH2N(CH2CH2NH-CO-OCH2C6H5)2[见实施例9e)方法]；HOOC-CH2CH2CO-N(CH2CH2NH-COCF3)2[按照实施例7a)方法制备]，但用双(三氟乙酰胺基乙基)胺代替双(苄氧羰基胺基乙基)胺；用琥珀酸酐代替二乙二醇酸酐]；HOOC-CH2OCH2CONH-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2NHCO-O-CH2C6H5)2]2[按照实施例7a)方法制备，但用实施例9b)所述的胺代替双(苄氧羰基胺基乙基)胺]；O＝C＝N-C6H4-CH[CH2CON(CH2CH2NH-CO-O-CH2C6H5)2]2[见实施例9c)方法]；[见实施例21b)方法]

    按照实施例17f)方法制备，但用类似于实施例9c)的方法，用三光气代替二乙二醇酸酐。N-苄氧羰基氮丙啶[见实施例15a)方法]；N-苄氧羰基甘氨酸[可购于例如Bachem，加州]

    按照C.J.Cavallito等，J.Am.Chem.Soc，1943，65，2140方法，但用N-CO-O-CH2C6H5-(2-溴乙基)胺代替氯苄[A.R.Jacobson等，J.Med.Chem.(1991)，34，2816]。

    通式I′A和I′B的配合物或配合物构成体的制备方法是按照或类似于实验部分所述的或文献已知的方法(例如参见欧洲专利申请号0512661，0430863，0255471和0565930)。

    制备本发明药剂也是按照已知的方法，即将本发明的配合物化合物——任选地加入格林制剂中常规用的助剂——悬浮或溶解于水性介质中，然后任选地将此悬浮液或溶液灭菌。适宜的辅料例如有生理可容性缓冲剂(例如三羟甲基氨基甲烷缓冲剂)，加入配合物构成体或弱配合物(例如二亚乙基三胺五乙酸或相应的钙——串联体——聚合物——配合物)，或者如若需要，加入电解质例如氯化钠，或者，必要时，加入抗氧化剂例如抗坏血酸。

    用于经胃肠道用药或其它目的本发明制剂若是于水中或生理食盐水中的悬浮液或溶液时，则可与一种或多种格林制剂常规用的助剂(如甲基钎维素、乳糖、甘露醇)和或表面活性剂(如卯磷脂，吐温，Myrj)和/或为了矫味而用的香料(如挥发性油)等相混合。

    在原则上也可以在制备本发明药剂时不必分离出配合物盐，但在每种情况下，必须格外地小心，因为会形成螯合物，故本发明的盐或盐溶液不能与有毒性作用的金属离子形成配合物。

    为此，例如可在制备过程中加入显色指示到如二甲苯橙，通过控制滴定以保证不会形成毒性配合物。因此，本发明也涉及配合物化合物及其盐的制备方法，为确保后者的制备，要纯化分离出的配合物盐。

    本发明药剂含有的配合物盐优选为1μmol～mol/l，所用剂量一般为0.0001～5mmol/kg。可经胃肠道或非胃肠道用药。本发明配合物化合物可用于：1.与原子序数21-29，39，42，44和57-83元素的离子形成的配合物用于NMR和X-射线诊断。2.以原子序数27，29，31，32，37-39，43，44，62，64，70，75和77元素的放射同位素形成的配合物用于放射诊断和放射治疗。

    本发明药剂要满足作为磁共振成像的造影剂的多方面的要求，宜应在口服或非胃肠道用药后，通过提高信号强度，使磁共振成像得到的图像得到改善。此外，该药剂还有很高的所必需的效力，以致尽可能少量的外来物质停留于体内，并且有所必需的良好的耐受性，以确保非侵害性。

    本发明药剂有良好的水溶性和很小的渗透性，从而允许制备高浓度的溶液，并且通过体液循环，因而在血循环体积中维持合理的浓度。这就是说，NMR诊断剂的水溶性要比用于NMR光谱物质的水溶性浓度高100-1000倍。此外，本发明药剂不仅有很高的体外稳定性，而且有优良的体内高稳定性，以致在新的造影剂被完全排出的时间内，于配合物中未共价结合的离子的游离和交换作用(会引起中毒)，进行得非常慢。

    本发明药剂用于NMR诊断的通常剂量为0.0001-5mmol/kg，优选为0.005～0.5mmol/kg。详细的使用情况例如可参见H.-J.Weinmann等Am.J.of Roentge-nology 142，619(1984)。

    用于确诊肿瘤和心肌梗塞的器官特异的NMR诊断，尤其可用低剂量(1mg/kg体重以下)。

    此外，本发明配合化合物作为敏感性试剂和位移试剂，用于体内NMR光谱测定。

    本发明药剂由于其中含有的配合化合物有良好的放射活性和良好的稳定性，也适于用作放射诊断剂。其用法和剂量详述于例如“医学应用的放射示踪剂”，CRC-出版社，Boca Raton，Florida。

    用放射性同位素进行成像的另一个方法是阳电子-发射造影，用阳电子发射同位素例如43Sc，44Sc，52Fe，55Co和68Ga(W.D.Heiss，M.E.Phelps；脑的阳电子发射成像Springer出版社，柏林，Heidel-berg，New York，1983)。

    由于本发明物质富集于恶性肿瘤内(在健康组织内不扩散，但对肿瘤血管有高度的通透性)，它们也可用于恶性肿瘤的放射治疗。它与相应的诊断剂的区别只在于所用同位素的量和性质。目的是用高能量的短波照射而尽可能小的射线宽度，以达到破坏掉肿瘤细胞的目的。而且在复合物中含有的金属(例如铁或钆)，它们发射电离射线(如伦斯线)或中子射线而起作用。通过这个作用，在存在有金属配合物部位(如肿瘤)明显地提高了局部的射线剂量。为了在恶性组织中产生相同的射线剂量，要用这样的金属配合物，它们明显地降低了对健康组织的射线剂量，因而降低了对患者的副作用。本发明的金属配合物——结合物也适用于作为放射致敏物质。用于恶性肿瘤的射线治疗。适宜的发射β射线的离子例如46Sc，47Sc，48Sc，72Ga，73Ga和90Yo有适宜的半衰期的、可产生α射线的离子例如211Bi，212Bi，213Bi，214Bi，优选为212Bi。可适宜地发射光子和电子的离子例如有158Gα，后者可由157Gd经中子捕获而生成。

    本发明药剂若用于R.L.Milles等在自然(336：(1988)787页)发表建议的放射治疗，必须引入穆斯鲍尔同位素的中心离子，例如57Fe或151Eu。

    在体内应用本发明的治疗药剂时，同时用适宜的载体如血清或生理食盐水，并且合用其它的蛋白，例如人血清白蛋白，剂量与杀伤细胞的性质有关，也与所用的金属离子和成像方法有关。

    本发明的治疗药经胃肠道外给药，例如静脉注射。

    关于放射治疗剂应用的详细内容于R.W.Kozak等TIBTEC 10月，1986，262页中进行了讨论。

    本发明药剂突出地可适宜作X-线造影剂，尤其是它没有含碘的造影剂所造成的生化药理研究中的已知的过敏反应，特别是因为有良好的吸收性质，因而在数字减差技术的较高管压领域中很有价值。

    本发明的药剂一般用作X-射线造影剂与例如葡糖胺泛影酸盐一样，剂量为0.1-5mmol/Kg，优选为0.25-1mmol/Kg。

    X-射线造影剂用法的详细情况例如可见于Barke著X-射线造影剂，G.Thieme出版社，Leipzig(1970)和P.Thurn，E.Bücheler著“X-线造影剂导论”的书中，G.Thieme出版社，斯图加特，纽约(1977)。

    总之，本发明成功地合成了新的配合物构成体，金属配合物和金属配合物盐，它们在诊断医学和治疗医学中具有新的用途。

    下面的实施例对本发明内容作进一步说明。实施例1a)双[2-(苄氧羰基氨基)-乙基]胺

    51.5g(500mmol)二亚乙基三胺和139ml(1mmol)三乙胺溶解于二氯甲烷中，于-20℃下将161g氰甲酸苄酯(Fluka)于二氯甲烷中的溶液进行混合，然后于室温下搅拌过夜。反应毕，蒸发至干，用乙醚溶解残留物，有机相用碳酸钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤后滤液与己烷混合，滤集沉淀，干燥，得量163.4g(理论量88％)。元素分析：计算值  C64.67  H6.78  N11.31

          实测值  C64.58  H6.83  N11.28b)N，N，N’，N’，N″，N″-六[2-(苄氧羰基胺基)-乙基]苯三甲酸三酰胺

    13.27g(50mmol)苯三甲酰氯(Aldrich)和34.7ml(250mmol)三乙胺溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，于0℃下与65.0g(175mmol)实施例1a所述的胺相混合，室温搅拌过夜。真空蒸除溶剂，剩余物用乙酸乙酯在硅胶上层析。得量39.4g(理论量62％)。元素分析：计算值  C65.24  H5.95  N9.92

          实测值  C65.54  H5.95  N9.87c)Nα，Nε-二(N，N’-二苄氧羰基-赖氨酰基)-赖氨酸，被保护的“Tri-赖氨酸”

    3.6g(20mmol)赖氨酸盐酸盐和6.95ml(50mmol)三乙胺溶解于DMF中，与26.8g(50mmol)Nα，Nε-二苄氧羰基-赖氨酸-对-硝基苯酯(Bachem)相混合，室温下搅拌2日。反应毕，真空浓缩，剩余物用乙酸乙酯溶解，用稀盐酸振摇洗涤。有机相用硫酸钠干燥。蒸除溶剂，剩余物用乙酸乙酯/乙醇进行梯度层析。得量10.7g(理论量57％)元素分析：计算值  C63.95  H6.65  N8.95

          实测值  C63.63  H6.69  N8.93d)以N，N，N’，N’，N″，N″-六[2-(三赖氨酰基-胺基)-乙基]-苯三甲酰胺为基础的完全保护的苄氧羰-24-聚胺

    1.27g(1mmol)实施例1b)所述的六-苄氧羰基胺溶解于乙酸中，搅拌下与33％溴氢酸的乙酸溶液相混合。60分钟后，加入乙醚，使沉淀完全，乙醚洗涤生成的六胺氢溴酸盐，真空干燥，不必精制，进入下一步反应。得量0.95g(定量)。

    7.0g(7.5mmol)实施例1c)所述的、保护的“Tri-赖氨酸”。 1.2g(7.5mmol)1-羟基苯并三唑和2.4g(7.5mmol)2-(1H苯并-1-三唑基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TBTU，Peboc有限公司，UK)溶解于DMF中，搅拌15分钟。该溶液然后与5.16ml(30mmol)N-乙基二异丙胺和0.95(1mmol)上述的六胺氢溴酸盐相混合，室温搅拌过液。反应毕，真空蒸发，剩余物用乙酸乙酯/乙醇(2∶1)于硅胶上层析。得量4.55g(理论量76％)元素分析：计算值  C64.35  H6.71  N10.52

          实测值  C64.08  H6.57  N10.29e)以N，N，N’，N’，N″，N″-六[2-(三赖氨酰胺基)-乙基]-苯三甲酰胺为基础的24-DTPA单胺镓

    1.20g(0.2mmol)实施例1d)所述的聚苄氧羰胺溶解于乙酸中，搅拌下加入33％溴氢酸的乙酸溶液。 3小时后，加入乙醚，使析出的沉淀完全。用乙醚洗涤生成的24-胺氢溴酸盐，真空干燥。剩余物然后溶解于水，加入IN苛性钠，使pH为9.5。向此溶液中加入固体形式的5.8g(14.4mmol)N3-(2，6-二氧代吗啉代乙基)-N6-(乙氧羰基甲基)-3，6-二氮杂辛二酸(EP 0331616中的实施例13a)，其间通过一步加入氢氧化钠，使pH一直维持在9.5。加毕，用5N氢氧化钠水解DTPA-乙酯，使pH＞13，并于室温下搅拌过夜。然后用浓盐酸将PH调至5，加入2.61g(7.2mmol)Gd2O3，于80℃搅拌30分钟，冷却后于pH7下浓缩，经YM3AMICON超滤膜过滤脱盐。保留物然后经膜过滤，冻干。得量3.31g(理论量的94.6％)，水含量(卡尔-费舍尔法)：8.5％；Gd含量(AAS)：22.9％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C34.89  H4.17  Gd23.57  N10.24  Na3.45实测值：C35.26  H4.32  Gd22.82  N10.56  Na3.14

    用类似的方法由Yb2O3得到镱配合物元素分析(以无水物计算)：计算值：C34.08  H4.08  Yb25.34  N10.00  Na3.37实测值：C33.90  H4.22  Yb25.06  N9.83   Na3.13实施例2a)10-[5-(2-羧苯基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂苯基]-1，4，7-(三-羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷

    50g(144.3mmol)1，4，7-三-(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷(DO3A)溶解于250ml水中，用5N氢氧化钠调节pH至13。然后在1小时内滴入38.12g(187.6mmol)N-(2，3-环氧丙基)-邻苯二甲酰亚胺于100ml二噁烷中的溶液，于50℃搅拌24小时，并加入5N氢氧化钠以使pH保持为13。加入10％盐酸使pH2，真空浓缩至干。剩余物溶解于水，于离子交换柱上(Reillex＝聚-(4-乙烯)-吡啶)纯化，用水洗脱。主组分经真空浓缩。剩余物经RP-18层析(Lichroprep/洗脱剂：四氢呋喃/甲醇/水梯度洗脱)。蒸干主组分，得到63.57g(理论量71％)，为无定形固体。水含量：8.5％。分析(以无水物计算)计算值：C52.90  H6.57  N12.34实测值：C52.65  H6.68  N12.15b)10-(3-氨基-2-羟基丙基)-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷

    50g(88.1mmol)实施例2a的标题化合物于300ml浓盐酸中加热回流24小时。蒸发至干。剩余物溶解于水，离子交换柱(Reillex＝聚-(4-乙烯基)吡啶)纯化，水洗脱。主组分浓缩至干。得量：39.0g(理论量95％)，为玻璃状固体，水含量10.3％。元素分析(以无水物计算)：计算值  C48.68  H7.93  N16.70实测值  C48.47  H8.09  N16.55c)10-(3-氨基-2-羟基丙基)-1，4，7-三(羧甲基)-1，3，7，10-四氢杂环十二烷的钆配合物

    38g(90.6mmol)实施例26的标题化合物溶解于300ml水中，加入到16.42g(45.3mmol)氧化钆中。于90℃加热3小时。冷却后的溶液于室温下与5ml酸性离子交换树脂(IR-120/H+型)和5ml碱性离子交换树脂(IRA-410/OH-型)搅拌1小时。滤除离子交换剂，滤液冻干，得57.23g(理论量的98％)无定形固体。水含量为11.3％。分析(以无水物计算)计算值：C35.59  H5.27  Gd27.41  N12.21实测值：C35.32  H5.38  Gd27.20  N12.31d)10-[7-(4-硝基苯基)-2-羟基-5-氧代-7-(羧甲基)-4-氮杂-庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    将9.84g(41.8mmol)3-(4-硝基苯基)-戊二酸酐(J.Org.Chen.26：3856(1961))加到20g(34.86mmol)实施例2c的标题化合物于200ml DMF/20ml三乙胺的混合物中，室温搅拌过夜。真空浓缩至干。剩余物于异丙醇/醋酸(95∶5)中重结晶，得量27.46g(理论量的94％)，为淡黄色固体，水含量：3.4％。分析(以无水物计算)计算值：C41.58  H4.86  Gd19.44  N10.39实测值：C41.38  H4.97  Gd19.28  N10.17e)10-[7-(4-氨基苯基)-2-羟基-5-氧代-7-(羧甲基)-4-氮杂-庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    实施例2d的标题化合物25g(30.9mmol)溶于250ml甲醇，加入5g钯碳(10％)催化剂。室温下氢化过夜，滤除催化剂，真空浓缩滤液至干。得量24.0g(理论量的97％)，为奶酪样固体，水含量：3.0％。分析(以无水物计算)计算值：C43.18  H5.31  Gd29.19  N10.79实测值：C43.27  H5.48  Gd20.02  N10.61f)10-[7-(4-硫代异氰酸根合苯基)-2-羟基-5-氧代-7-(羧甲基)-4-氮杂-庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    15g(19.26mmol)实施例2e的标题化合物溶解于100ml水中，加入6.64g(57.8mmol)硫代光气于50ml氯仿中的溶液，50℃搅拌1小时，冷至室温，分出有机相，水相与100ml氯仿振摇2次。水相浓缩至干，剩余物于室温下与100ml异丙醇搅拌。滤集固体，乙醚洗涤。40℃真空干燥过夜，得15.9g(理论量的98％)，为奶酪色固体，水含量为3.5％。分析(以无水物计算)计算值  C42.43  H4.79  Gd19.15  N10.24  S3.91实测值  C42.23  H4.90  Gd19.01  N10.05  S3.96g)由10-[7-(4-硫代异氰酸根合苯基)-2-羟基-5-氧代-7-(羧甲基)-4-氮杂庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Gd配合物与24-胺N，N，N’，N’，N″，N″-六[2-(三赖氨酰氨基乙基)乙基]苯三甲酰胺得到的24-硫代尿素结合物。

    1.20g(0.2mmol)实施例1.d所述的24-苄氧羰基胺溶于乙酸中，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液混合。3小时后用乙醚处理使沉淀完全，生成的24-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。

    然后剩余物溶于水中，加入IN NaoH，使pH为9.5。向此溶液中分次加入固态的前面实施例2f所述的硫代异氰酸酯，并用NaoH溶液使pH-直维持在9.5。加毕，室温搅拌过夜，用稀盐酸中和。溶液超滤(Amicon YM3)，冻干。得量4.16g(理论量的83％)。水含量(费舍尔法)：8.2％。Gd含量(AAS)：14.7％元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.08  H5.11  Gd16.41  N11.51  Na2.40  S3.35实测值：C43.47  H5.32  Gd16.19  N11.23  Na2.04  S3.07

    用类似的方法，不用NaOH；而用N-甲基-D-葡糖胺得到N-甲基-D-葡糖胺盐。计算值：C43.91  H5.93  Gd13.89  N10.98  S2.83实测值：C43.73  H6.19  Gd13.56  N11.22  S2.60实施例3a)10-(8-羧-基-2-羟基-5-氧代-4-氮杂-7-氧杂-辛基)-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    10g(17.43mmol)实施例2C的标题化合物溶于100ml水，加入20ml三乙胺。于0℃下加入5.80g(50mol)二乙二醇酸酐，并于此温度下搅拌3小时。真空蒸干，剩余物经硅胶层析(洗脱剂：甲醇/氨水(25％)20∶1)。蒸干含有产物的镏份，用100ml水溶解。加入酸性离子交换剂(IR 120H+)，以使溶液pH为2.46。滤除离子交换剂，用少量水洗涤2次，滤液蒸干。剩余物用甲醇/丙酮结晶，真空干燥后(125℃过夜)，得到7.57g(理论量的63％)无色结晶。水含量3.1％。元素分析(以无水物计)计算值：C36.57  H4.97  Gd22.80  N10.15实测值：C36.43  H5.06  Gd22.70  N10.01b)10-[8-羧基-2-羟基-5-氧代-4-氮杂-7-氧杂辛基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7-10-四氮杂环十二烷的Gd配合物与24胺-N，N，N′，N′，N″，N″-六[2-(三赖氨酰基氨基)乙基]苯三甲酰胺形成的24酰胺结合物

    1.20g(0.2mmol)实施例1d所述的24-苄氧羰基胺溶解于乙酸中，搅拌下加入33％氢溴酸的乙酸溶液。3小时后，加入乙醚使沉淀生成完全，生成得到的24-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥，不必精制就进入下步反应。得量0.95g(重量)

    4.14g(6mmol)实施例3a的配合物酸、0.96g(6mmol)1-羟基苯并三唑(HOBt)和1.92g(6mmol)四氟硼酸(1H苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓盐(TBTU；Peboc公司，UK)溶解于DMF，搅拌15分钟，该溶液然后与4.13ml(24mmol)N-乙基二异丙胺和0.95g(0.2mmol)上制的24-胺氢溴酸盐混合，室温下搅拌过夜。反应毕，加入0.23g(2mmol)二乙二酸酸酐，再搅拌1小时，真空蒸干，剩余物溶于水，经AMICON YM-10-超过滤膜纯化。保留液必要时调节pH到7，膜过滤，冻干。得量3.62g(理论量88％)水含量(卡尔-费舍尔法)8.1％。Gd含量(AAS)18.7％元素分析(以无水物计算)计算值：C40.24  H5.46  Gd19.97  N12.23实值测：C40.07  H5.63  Gd20.20  N12.17实施例4a)N，N，N-三(2-[Nα，Nε-二苄氧羰基-赖氨酰基氨基)-乙基]胺

    1.46g(10mmol)三(2-氨乙基)胺和21.4g(40mmol)Nα，Nε-二苄氧羰基赖氨酸一对硝基苯酯溶解于DMF中，室温搅拌过夜，反应毕，真空蒸干，剩余物于乙醚中搅拌，滤集沉淀，乙酸乙酯结晶。得量：12.55g(理论量94％)。元素析计算值：C64.75  H6.79  N10.49实测值：C64.48  H6.88  N10.26b)基于N，N，N-三[2-(Nα，Nε-二{三赖氨酰基}-赖氨酰基氨基)-乙基]胺的、完全保护的苄氧羰基-24-聚胺

    1.33g(1mmol)实施例4a所述的六苄氧羰胺溶解于乙酸中，加入33％溴氢酸的乙酸溶液。 60分钟后，加入乙醚使沉淀完全，用乙醚洗涤生成的六胺氢溴酸盐，其空干燥，不必纯化就进入下步反应，收量：1.02g(定量)

    7.0g(7.5mmol)实施例1c所述的Nα，Nε-二(N，N′-二苄羰基赖氨酰基)赖氨酸(被保护的“Tri-赖氨酸”)按照类似于实施例1d方法，用TBTU和N-羟基苯并三唑活化，并按类似方法与1.02g(1mmol)上述的N，N，N-三[2-(赖氨酰基氨基)乙基]胺六氢溴酸盐和5.16ml(30mmol)N-乙基二异丙胺反应，并按上述方法处理。得量4.42g(理论量73％)。元素分析：计算值：C64.25  H6.89  N10.64实测值：C64.06  H7.04  N10.69c)基于24-胺N，N，N-三[2-(Nα，Nε-二(三赖氨酰-赖氨酰基氨基)-乙基]胺的24-钆-DTPA-单酰胺

    1.21g(0.2mmol)实施例4b所述本发明24-苄氧羰基胺溶解于乙酸中，搅拌下加入33％氢溴酸的乙酸溶液。3小时后，加入乙醚使沉淀完全，生成的24-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥，剩余物按照实施例1e的方法，用5.8g(14.4mmol)N3(2，6-二氧代吗啉代基乙基)-N6-(乙氧羰基甲基)-3，6-二氮杂辛二酸进行酰化，用2.61g(7.2mmol)Gd2O3形成配合物。得到3.30g(理论量92％)无色冻干物。水含量(卡尔-费舍尔法)10.3％，Gd含量(AAS)：20.7％。元素分析(以无水物计算)计算值：C34.97  H4.25  Gd23.48  N10.28  Na3.43实测值：C34.69  H4.31  Gd23.20  N10.37  Na3.05

    按照类似方法，由Dy2O3得到镝-配合物元素分析(以无水物计算)计算值：C34.70  H4.22  Dy24.07  N10.20  Na3.41实测法：C34.50  H4.42  Dy23.81  N10.06  Na3.02实施例5a)由10-[7-(4-硫代异氰酸根合苯基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂-7-(羧甲基)-辛基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Cd配合物与由N，N，N-三[2-(赖氨酰基氨基)乙基]胺同Nα，Nε-二(赖胺酰基)赖氨酸(“三赖氨酸”)缩合的24-胺形成的24-硫代脲素结合物

    1.21g(0.2mmol)实施例4b所述的24-苄氧羰基胺溶解于乙酸中，搅拌下，加入33％氢溴酸的乙酸溶液。3小时后，加入乙醚使沉淀完全，用乙醚洗涤生成的24-胺氢溴酸盐。真空干燥。剩余物随后吸收在水中，并类似于实施例2g中所述步骤，在pH为9.5时与6.08g 10-[7-(4-硫代异氰酸根合苯基)2-羟基-5-氧代-7-(羧甲基)-4-氮杂庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物反应，超滤后冻干。产量：4.31g(理论量的87％)H2O含量：(卡尔费歇尔法)6.9％Gd-含量(AAS)：15.0％。元素分析(基于无水物计算)：计算值：C43.11  H5.16  Gd16.36  N11.54  Na2.39  S3.34实测值：C42.89  H5.35  Gd16.09  N11.67  Na2.18  S3.23实施例6

    a)10-[8-羧基-2-羟基-5-氧代-4-氮杂-7-氧杂辛基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Gd-配合物与由N，N，N-三[2-(赖氨酰基氨基)乙基和Nα，Nε-二(赖氨酰基)赖氨酸(“Tri-赖氨酸)缩合而成的24-胺形成的24-酰胺结合物

    1.21g(0.2mmol)实施例4b所述的24-苄氧羰基胺溶解于乙酸中，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液混合。3小时后，加入乙醚使沉淀完全，用乙醚洗涤生成的24-胺氢溴酸盐。真空干燥，不必精制，进入下步反应，得量0.96g(定量)。

    4.14g(6mmol)实施例3b所述的钆配合物酸按照类似于实施例3b所述方法，用TBTU和于DMF中的HOBt进行活化，并与上述24-胺氢溴酸盐在加入碱的情况下偶合，并按类似方法处理。得量3.83g(理论量92％)水含量(卡尔-费舍尔法)：8.8％；Gd含量(AAS)：18.5％元素分析(以无水物计算)：计算值：C40.29  H5.52  Gd19.90  N12.26实测值：C39.97  H5.71  Gd19.55  N12.21实施例7a)N，N′-二(苄氧羰基)-3-[羧甲氧乙酰基]-3-氮杂戊烷-1，5-二胺

    37.14g(100mmol)实施例1a所述的二(苄氧羰基氨基乙基)胺溶于DMF中，在冰浴中与17.4g(150mmol)二乙二醇酸酐(JanssanChimica)和21ml(150mmol)三乙胺混合，室温搅拌过夜。溶液真空蒸干，剩余物用乙酸乙酯溶解，与稀盐酸振摇洗涤。有机相用硫酸钠干燥，滤除干燥剂，加入己烷使之结晶。得量：41.4g(理论量的85％)。元素分析：计算值：C59.13  H6.00  N8.62实测值：C58.99  H5.93  N8.70b)N，N′，N″N-四{8-(苄氧羰基氨基)-6-[2-(苄氧羰基氨基)乙基]-5-氧代-3-氧杂辛酰基}-环十二烷

    345mg(2mmol)1，4，7，10-四氮杂环十二烷(Cyclen；Fluka)与甲苯共沸脱水·冷却后，室温下加入4.88g(10mmol)N，N′-二(苄氧基羰基)-3-[羧基甲氧基乙酰基]-3-氮杂戊烷-1，5-二胺(实施例7a)于THF中的溶液和2.47g(10mmol)2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氢酯(EEDQ；Fluka)，搅拌过夜，反应毕，加入己烷，使产物沉出，倾滗出溶剂，加入THF/己烷，再自THF/甲苯中沉淀出，真空干燥后，得2.78g(理论量68％)浅黄色固体。元素分析：计算值：C60.93  H6.29  N10.93实测值：C60.68  H6.40  N10.97c)以由N，N′，N″，N-四-{8-(苄氧基羰基氨基)-6-[2-(苄氧基羰基氨基)-乙基]-5-氧代-3-氧杂辛酰基}环十二烷与Nα，Nε-二(赖氨酰)-赖氨酸(“Tri-赖氨酸”)缩合的32-胺为基础的，完全保护的苄氧羰基-32-聚胺

    2.05g(1mmol)实施例7b所述的八苄氧基羰基胺溶解于乙酸，搅拌下，加入33％氢溴酸的乙酸溶液。90分钟后，加入乙醚使沉淀完全，生成的八胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥，不必精制进入下步反应，得量1.6g(定量)。

    9.4g(10mmol)实施例1c所述的保护的“Tri-赖氨酸”，1.5g(10mmol)1-羟基苯并三唑和3.2g(10mmol)四氟硼酸2-(1H-苯并-1-三唑基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓盐(TBTU，Peboc公司，UK)溶于DMF中，搅拌15分钟。然后与5.16ml(30mmol)N-乙基二异丙胺和1.6g(1mmol)上述的八胺氢溴酸盐混合。室温搅拌过夜，反应毕，蒸除溶剂，剩余物经硅胶层析，2氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脱。得量6.0g(理论量72％)。元素分析计算值：C63.32  H6.76  N10.74实测值：C62.98  H6.91  N10.43d)以由实施例7c得到的，去保护的32-胺为基础的32-钆-DTPA单酰胺

    1.67g(0.2mmol)实施例7c的聚苄氧羰胺溶解于冰乙酸，搅拌下与33％溴氢酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的32-胺溴氢酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH为9.5。此溶液中加入固体的7.7g(19.2mmol)N3-(2，6-二氧代吗啉代乙基)-N6-(乙氧羰甲基)-3，6-二氮杂辛二酸(EP0331616实施例13a)，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕，加入5N氢氧化钠于pH＞13下室温搅拌过液，使DTPA乙酯皂化。然后加入浓盐酸使pH为5，与3.48g(9.6mmol)Gd2O3混合，于80℃搅拌30分钟，冷却后调节pH为7，经YM3 AMICON-超滤膜过滤，保留液经膜过滤后，冻干。得量：4.27g(理论量的91％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：7.5％。Gd含量(AAS)：22.6％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C34.98  H4.24  Gd23.19  N10.33  Na3.39实测值：C34.67  H4.15  Gd22.86  N10.25  Na3.14

    按照类似的方法，用Eu2O3反应得铕-配合物元素分析(以无水物计算)：计算值：C35.25  H4.27  Eu22.58  N10.41  Na3.42实测值：C35.08  H4.17  Eu22.16  N10.53  Na3.22实施例8a)由10-[7-(4-硫代异氰酸根合苯基)-2-羟基-5-氧代-7-(羧甲基)-4-氮杂庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Gd-复合物与实施例7c的去保护的32-胺形成的32-硫代尿素结合物

    1.67g(0.2mmol)实施例7c的32-苄氧羰基胺溶解于冰乙酸，搅拌下与33％溴氢酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的32-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH恒定为9.5。此溶液中加入固体的8.1g(9.6mmol)实施例2f所述的硫代异氰酸酯，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕，室温搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICONYM3)，保留液冻干。得量：5.8g(理论量的85％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：9.1％。Gd含量(AAS)：15.2％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.05  H5.15  Gd16.22  N11.56  Na2.37  S3.31实测值：C42.84  H5.36  Gd16.00  N11.84  Na2.10  S2.97实施例9a)1，11-二(苄氧羰基氨基)-3，9-二[2-(苄氧羰基氨基)乙基]-4，8-二氧代-6-(4-硝基苯基]-3，9-二氮杂十一碳烷

    6.33g(25mmol)3-(4-硝基)戊二酸(J.Org.Chem.，26，3856(1961)，6.33g(55mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和20.43g(55mmol)实施例1a所述的二(苄氧羰基胺乙基)胺溶解于DMF中，加入11.35g(55mmol)二环己基碳二亚胺，室温搅拌3天。滤除沉出的二环己基脲，滤液真空蒸干，硅胶层析，乙酸乙酯洗脱纯化。得量17.3g(理论量的72％)。元素分析：计算值：C63.81  H5.98  N10.21实测值：C63.94  H5.77  N10.26b)1，11-二(苄氧羰基氨基)-3，9-二-[2-(苄氧羰基氨基)乙基]-4，8-二氧代-6-(4-氨基苯基)-3，9-二氮杂十一碳烷

    15.57g(56mmol)FeSO4.7H2O溶解于水，与7.68g(8mmol)实施例9a所述的硝基化合物于同样体积的乙醇中的溶液相混合，加热至沸。在此温度下，慢慢滴入24ml氨水，此时生成黑色沉淀。搅拌下使悬浮液慢慢冷却，过滤，沉淀用乙酸乙酯洗涤合并洗涤液，滤液真空蒸发至干。剩余物经硅胶层析，乙酸乙酯/乙醇(98∶2)洗脱。得量4.84g(理论量的65％)。元素分析：计算值：C65.86  H6.39  N10.54实测值：C65.68  H6.31  N10.62c)由1，4，7，10-四氮杂环十二烷与1，11-二(苄氧羰基氨基)-3，9-二-[2-(苄氧羰基氨基)乙基]-4，8-二氧代-6-(4-异氰酸根合苯基)-3，9-二氮杂十二烷得到的N，N′N″，N-环十二烷-四-脲基结合物

    4.65g(5mmol)实施例9b所述的苯胺溶解于甲苯中，两次蒸除至干以除去水份每次加入新鲜甲苯使之溶解。用此方法得到的、胺在甲苯中的无水溶液于10℃下与0.54g(1.8mmol)三光气混合。于10℃下搅拌1小时，室温下搅拌过夜。向此悬浮液中加入0.17g(1mmol)无水的1，4，7，10-四氮杂环十二烷(Cyclen)于甲苯/吡啶(10∶1)中的溶液，室温搅拌过夜。然后真空蒸发至干，剩余物经硅胶层析，乙酸乙酯洗脱。得量3.55g(理论量的89％)。元素分析：计算值：C64.98  H6.16  N11.23实测值：C64.70  H6.29  N11.04d)N，N-二[2-(苄氧羰基氨基)-乙基]-甘氨酸叔丁酯

    18.6g(50mmol)实施例1a所述的二[2-(苄氧羰基氨基)-乙基]胺于四氢呋喃/水(25∶1)中的溶液与4.2g(30mmol)碳酸钾混合。室温下向此悬浮液中滴入11.7g(60mmol)溴乙酸叔丁酯，并于此温度下搅拌过液。滤除不溶物，滤液浓缩至干，剩余物经硅胶层析，乙醚/二异丙醚(1∶1)洗脱。得量20.4g(理论量的84％)。元素分析：计算值：C64.31  H7.26  N8.65实测值：C64.35  H7.00  N8.58e)N，N-二[2-苄氧羰基氨基)-乙基]-甘氨酸

    19.4g(40mmol)实施例9d所述的叔丁酯与150ml三氟乙酸混合，室温搅拌20分钟。加入乙醚，使产物沉出，再一次加入乙醚，然后与水搅拌。滤集沉淀，干燥。得量13.4g(理论量的78％)。元素分析：计算值：C61.52  H6.34  N9.79实测值：C61.64  H6.20  N9.94f)由与N，N-二[2-(苄氧羰基氨基)-乙基]-甘氨酸缩合的、实施例9c制得的N，N’，N″，N-环十二烷-四-脲基结合物得到的、完全保护的苄氧羰基-32-聚胺

    3.99g(1mmol)实施例9c所述的十六烷苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，90分钟后，加入乙醚使沉淀完全，得到的十六烷胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。不必纯化可进入下一步反应。得量：3.2g(定量)。

    8.6g(20mmol)实施例9e所述的N，N-二[2-苄氧羰基氨基)  -乙基]-甘氨酸，3.2g(20mmol)1-羟基苯并三唑和6.4g(20mmol)四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲鎓盐(TBTU；Peboc公司，UK)溶解于DMF中，搅拌15分钟。然后将该溶液与13.76ml(80mmol)N-乙基二异丙胺和3.2g(1mmol)上述的十六烷胺氢溴酸盐混合，室温搅拌过夜。反应毕，真空蒸干，剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/甲醇(9∶1)洗脱。得量7.3g(理论量的87％)。元素分析：计算值：C62.69  H6.55  N13.29实测值：C62.37  H6.72  N13.38g)以由实施例9f得到的、去保护的32-胺为基础的32-钆-DTPA  单酰胺

    1.69g(0.2mmol)实施例9f的聚苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的32-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入IN氢氧化钠，使pH为9.5。向此溶液中加入固体的7.3g(19.2mmol)N3-(2，6-二氧代吗啉代乙基)-N6-(乙氧羰基甲基)-3，6-二氮杂辛二酸(EP0331616实施例13a)，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5。加毕，加入5N氢氧化钠调节pH＞13，室温搅拌过夜，使DTPA乙酯皂化。然后加入浓盐酸使pH为5，与3.48g(9.6mmol)Gd2O3混合，于80℃搅拌30分钟，冷却后于pH为7下经YM3 AMICON-超滤膜过滤除盐，保留液经膜过滤后，冻干。得量：4.29g(理论量的91％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：9.1％。Gd含量(AAS)：22.7％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C35.41  H4.31  Gd23.48  N11.50  Na1.72实测值：C35.39  H4.20  Gd23.22  N11.69  Na1.59实施例10a)由10-[7-(4-硫代异氰酸根合苯基)-2-羟基-5-氧代-7-(羧甲基)-4-氮杂庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Gd-配合物与实施例9f中去保护的32-胺形成的32-硫代脲结合物

    1.69g(0.2mmol)实施例9f的32-苄氧羰基胺溶解于乙酸，搅抖下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的32-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入IN氢氧化钠使pH为9.5。向此溶液中分次加入固体的8.1g(9.6mmol)实施例2f所述的硫代异氰酸酯，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕，室温下搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICONYM3)，保留液冻干。得量：5.7g(理论量的85％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：8.7％。Gd含量(AAS)：15.3％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.47  H5.10  Gd16.38  N12.40  Na1.20  S3.34实测值：C43.25  H5.27  Gd16.11  N12.46  Na1.05  S3.62实施例11a)N，N′，N″，N-四{N，N-二[2-苄氧羰基氨基)-乙基]-甘氨酰}-环十二烷

    345mg(2mmol)1，4，5，10-四氮杂环十二烷(Fluka)与甲苯共沸脱水。冷却后，室温下向此十二烷的甲苯溶液中加入4.29g(10mmol)实施例9e所述的N，N-二[2-苄氧羰基氨基)-乙基]-甘氨酸于THF中的溶液和2.47g(10mmol)2-乙氧基-1-乙氧羰基-1，2-二氢醌(EEDQ，Fluka)，搅拌过夜。真空蒸发至干，剩余物经硅胶层析，乙酸乙酯/甲醇(10∶1)洗脱。得量2.69g(理论量的74％)。元素分析：计算值：C63.42  H6.65  N12.33实测值：C63.17  H6.80  N12.28b)以N，N′，N″，N-四{N，N-二[2-(三赖氨酰基氨基)-乙基]-甘氨酰}-环十二烷为基础的、完全保护的苄氧羰基-32-聚胺

    1.82g(1mmol)实施例11a所述的八苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，90分钟后加入乙醚使沉淀完全，得到的八胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。不必纯化可进入下一步反应。得量：1.39g(定量)。

    9.4g(10mmol)实施例1c所述的被保护的“Tri-赖氨酸”，1.5g(0mmol)1-羟基苯并三唑和3.2g(10mmol)四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓盐(TBTU；Peboc公司，UK)溶解于DMF中，搅拌15分钟。然后将该溶液与5.16ml(30mmol)N-乙基二异丙胺和1.39g(1mmol)上述的八胺氢溴酸盐混合，室温搅拌过夜。反应毕，真空蒸干，剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脱。得量6.0g(理论量的74％)。元素分析：计算值：C63.95  H6.86  N11.05实测值：C64.23  H7.01  N10.92c)以由实施例11b得到的去保护的32-胺为基础的32-钆-DTPA  单酰胺

    1.62g(0.2mmol)实施例11b的聚苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的32-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入IN氢氧化钠使pH为9.5。此溶液中加入固体的7.7g(19.2mmol)N3-(2，6-二氧代吗啉代乙基)-N6-(乙氧羰甲基)-3，6-二氮杂辛二酸(EP0331616实施例13a)，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5。加毕，加入5N氢氧化钠，于pH＞13、室温下搅拌过夜，使DTPA乙酯皂化。然后加入浓盐酸使pH5，与3.48g(9.6mmol)Gd2O3混合，于80℃搅拌30分钟，冷却后于pH7下经YM3 AMICON-超过滤膜过滤除盐，保留液经膜过滤后，冻干。得量：4.0g(理论量的89％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：4.9％。Gd含量(AAS)：22.1％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C35.05  H4.28  Gd23.58  N10.48  Na3.01实测值：C34.82  H4.40  Gd23.19  N10.46  Na2.79实施例12a)由10-[7-(4-硫代异氰酸根合苯基)-2-羟基-5-氧代-7-(羧甲基)-4-氮杂庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Gd-配合物与实施例11b的去保护的32-胺形成的32-硫代脲结合物

    1.62g(0.2mmol)实施例11b的32-苄氧羰胺溶解于乙酸中，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的32-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入IN氢氧化钠使pH为9.5。此溶液中分次加入固体的8.1g(9.6mmol)实施例2f所述的硫代异氰酸酯，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕室温下搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICON YM3)，保留液冻干。得量：5.6g(理论量的88％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：3.5％。Gd含量(AAS)：15.9％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.18  H5.19  Gd16.39  N11.68  Na2.10  S3.34实测值：C42.95  H5.33  Gd16.02  N11.90  Na1.71  S2.98实施例13a)N，N，N’，N’，N”，N”-六{2-[N，N-二[2-(苄氧羰基氨基-乙基)氨基]-乙基}-苯三甲酰三胺

    1.27g(1mmol)实施例1b所述的六苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，60分钟后加入乙醚使沉淀完全，得到的六胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。不必纯化可进入下一步反应。得量：0.95g(定量)。

    得到的0.95g(1mmol)氢溴酸盐悬浮液50ml乙腈中，加入3ml三乙胺，然后加入3.54g(20mmol)N-苄氧羰基氮丙啶(制法按照J.Chem.Soc，Perkin Trans，1，21-26，1993)，氮气中加热回流5日。蒸发至干，用100ml二氯甲烷溶解，5％碳酸钾溶液洗涤2次，每次100ml。二氯甲烷液经硫酸镁干燥，浓缩，剩余物硅胶层析，二氯甲烷/甲醇/三乙胺20∶1∶0.1洗脱。得量2.31g(理论量的89％)，为黄色油状物。元素分析：计算值：C65.34  H6.65  N11.35实测值：C65.12  H6.80  N11.19b)N，N，N′N′，N″，N-六{2-[N，N-二(2-氨基乙基)氨基]-乙基}-苯三甲酰三胺

    2.2g(0.85mmol)实施例13a的标题化合物溶解于100ml甲醇中，加热3g皮尔曼催化剂(氢氧化钯-活性炭)，于5巴氢压下室温氢化10小时。滤除催化剂，滤液浓缩至干。得量825mg(理论量的99％)。元素分析：计算值：C55.02  H10.16  N26.95实测值：C54.87  H10.25  N29.85c)以N，N，N′N′，N″，N-六{2-[N，N-二(2-(N，N-双氨基乙基)氨基)乙基]-乙基}-苯三甲酰三胺为基础的完全保护的苄氧羰基-24-聚胺

    800mg(0.814mmol)实施例13b的标题化合物溶解于150ml乙腈中，加入5.77g(32.56mmol)N-苄氧羰基氮丙啶(制法按照J.Chem.Soc，Perkin Trans，1，21-26，1993)，氮气中加热回流5日。蒸发至干，剩余物硅胶层析，二氯甲烷/甲醇/三乙胺20∶1∶0.1洗脱。得量3.62g(理论量的85％)，为黄色油状物。元素分析：计算值：C65.39  H6.99  N12.04实测值：C65.21  H7.10  N11.90d)以实施例13c的24-赖氨酰衍生物为基础的完全保护的苄氧羰基-48-聚胺

    1.05g(0.2mmol)实施例13c的标题化合物溶解于30ml甲醇中，加入1g皮尔曼催化剂(氢氧化钯-活性炭)，于5巴氢压下室温氢化10小时。滤除催化剂，滤液浓缩至干。不必纯化可进入下-步反应。得量0.40g(定量)。

    3.11g(7.5mmol)Nα，Nξ-二(苄氧羰基)赖氨酸(Bachem，瑞士)，1.2g(7.5mmol)1-羟基苯并三唑和2.4g(7.5mmol)四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲鎓盐(TBTU；Pe-boc公司，UK)溶解于DMF中，搅拌15分钟。然后将该溶液与5.16ml(30mmol)N-乙基二异丙胺和0.40g(0.2mmol)上述的24-聚胺混合，室温搅拌过夜。反应毕，真空蒸干，剩余物经硅胶层析，乙酸乙酯/乙醇/三乙胺(2∶1∶0.2)洗脱。得量1.36g(理论量的59％)。元素分析：计算值：C64.69  H6.95  N11.30实测值：C64.42  H7.11  N11.19e)以由实施例13d得到的去保护的48-胺为基础的48-钆-DTPA单酰胺

    1.15g(0.1mmol)实施13d的聚苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的48-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH为9.5。此溶液中加入固体的5.8g(14.4mmol)N-(2，6-二氧代吗啉代乙基)-N-(乙氧羰甲基)-3，6-二氮杂辛二酸(EP0331616实施例13a)，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5。加毕，加入5N氢氧化钠，于pH＞13、室温下搅拌过夜，使DTPA乙酯皂化。然后加入浓盐酸，使pH为5，与2.61g(7.2mmol)Gd2O3混合，于80℃搅拌30分钟，冷却后于pH7下经YM3AMICON-超过滤膜过滤除盐，保留液经膜过滤后，冻干。得量：3.15g(理论量的92％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：8.9％。Gd含量(AAS)：21.9％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C35.03  H4.34  Gd24.22  N10.65  Na2.21实测值：C34.84  H4.50  Gd23.63  N10.87  Na2.04实施例14a)由10-[7-(4-硫代异氰酸根合苯基)-2-羟基-5-氧代-7-(羧甲基)-4-氮杂庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Gd-配合物与实施例113d的去保护的48-胺形成的48-硫代脲结合物

    1.15g(0.1mmol)实施例13d的48-苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的48-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH为9.5。此溶液中分次加入固体的6.08g(7.2mmol)实施例2f所述的硫代异氰酸酯，加入时要加入氢氧化钠，以维持pH保持在9.5，加毕室温下搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICON YM3)，保留液冻干。得量：3.91g(理论量的82％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：4.5％。Gd含量(AAS)：16.6％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.33  H5.24  Gd16.71  N11.82  Na1.53  S3.43实测值：C43.04  H5.54  Gd16.19  N12.10  Na1.26  S3.89实施例15a)1，4，7，10，13，16-六[2-(苄氧羰基氨基)-乙基]-1，4，7，10，13，16-六氮杂环十八烷

    1.29g(5mmol)1，4，7，10，13，16-六氮杂环十八烷(环十八烷)与甲苯共沸脱水。冷却至室温后，向该十八环烷的甲苯溶液中加入10.63g(60mmol)N-苄氧羰基氮丙啶(J.Chem.Soc，，Perkin Trans，1，21-26，1993)的乙腈溶液，氮气下加热回流3日。蒸除溶液至干，剩余物经硅胶层析，乙酸乙酯/甲醇三乙胺(8∶2∶0.5)洗脱。得量5.68g(理论量的86％)，为浅黄色油状物。元素分析：计算值：C65.43  H7.32  N12.72实测值：C65.20  H7.51  N12.49 b)以1，4，7，10，13，16-六[2-(三赖氨酰基氨基)-乙基]环十八烷为基础的完全保护的苄氧羰基-24-聚胺

    1.32g(1mmol)实施15a所述的六苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，60分钟后加入乙醚使沉淀完全，得到的六胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。不必纯化可进入下一步反应。得量：1.48g(定量)。

    7.0g(7.5mmol)实施例1c所述的“tri-赖氨酸”，1.2g(7.5mmol)1-羟基苯并三唑和2.4g(7.5mmol)四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲鎓盐(TBTU；Peboc公司，UK)溶解于DMF中，搅拌15分钟。然后将该溶液与5.16ml(30mmol)N-乙基二异丙胺和1.48g(1mmol)上述的六胺氢溴酸盐混合，室温搅拌过夜。反应毕，真空蒸干，剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脱。得量5.02g(理论量的83％)。元素分析：计算值：C64.40  H7.00  N11.13实测值：C64.16  H6.82  N10.88c)以1，4，7，10，13，16-六[2-(三赖氨酰基氨基)-乙基]环十八烷为基础的24-钆-DTPA单酰胺

    1.21g(0.2mmol)实施例15b的聚苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的24-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH为9.5。此溶液中加入固体的5.8g(14.4mmol)N-(2，6-二氧代吗啉代乙基)-N-(乙氧羰甲基)-3，6-二氮杂辛二酸(EP0331616实施例13a)，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5。加毕，加入5N氢氧化钠，于pH＞13、室温下搅拌过夜，使DTPA乙酯皂化。然后加入浓盐酸使pH5，与2.61g(7.2mmol)Gd2O3混合，于80℃搅拌30分钟，冷却后于pH7下经YM3AMICON-超过滤膜过滤除盐，保留液经膜过滤后，冻干。得量：3.17g(理论量的92.5％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：8.7％。Gd含量(AAS)：21.9％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C35.94  H4.45  Gd24.13  N10.75  Na2.65实测值：C36.19  H4.26  Gd24.39  N10.48  Ns2.29实施例16a)由10-[7-(4-硫代异氰酸根合苯基)-2-羟基-5-氧代-7-(羧甲基)-4-氮杂庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Gd-配合物与1，4，7，10，13，16-六[2-(三赖氨酰基氨基)-乙基]环十八烷形成的24-硫代脲结合物

    1.21g(0.2mmol)实施例15b的16-苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的24-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH为9.5。此溶液中分次加入固体的6.08g(7.2mmol)实施例2f所述的硫代异氰酸酯，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕室温下搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICON YM3)，保留液冻干。得量：4.33g(理论量的89％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：7.0％。Gd含量(AAS)：15.7％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.94  H5.32  Gd16.67  N11.88  Na1.83  S3.40实测值：C43.70  H5.15  Gd16.21  N12.05  Na1.49  S3.78实施例17a)10-[6-(4-硝基苯基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂己基]-1，4，7，-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷

    实施例2c的标题化合物20g(34.86mmol)溶解于200ml水中，用2N氢氧化钠调节pH为10，于0℃下向其中滴入13.97g(70mmol)4-硝基苯乙酰氯于50ml二恶烷中的溶液，并随时加入2N氢氧化钠以维持pH为10。室温搅拌2小时。用10％盐酸调节pH7。水溶液用乙酸乙酯萃取2次，每次用200ml。水相蒸发至干，剩余物经层析纯化(RP-18/LiChroPrep；梯度法洗脱，四氢呋喃/甲醇/水)。主镏份蒸发后，得到22.5g(理论量的81％)，为淡褐色固体。水分含量7.5％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C50.75  H4.79  Gd21.34  N11.41实测值：C50.61  H4.89  Gd21.15  N11.30b)10-[6-(4-氨基苯基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂己基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷

    21g(28.5mmol)实施例17a的标题化合物溶解于200ml甲醇中，加入4g钯催化剂(10％Pd/C)，于氢气中室温氢化6小时。滤除催化剂，滤液浓缩至干。得量20.56g(理论量的99％)。为黄色玻璃状固体。水分含量13.1％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C42.48  H5.28  Gd22.25  N11.89实测值：C42.31  H5.41  Gd22.07  N11.67c)10-[6-(4-硫代异氰酸根合苯基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂己基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    实施例17b的标题化合物20g(28.29mmol)溶解于100ml水中，加入9.76g(84.9mmol)硫代光气于50ml氯仿中的溶液。50℃下搅拌1小时。冷却至室温，分出有机层，水层用氯仿萃取2次，每次100ml。水层蒸发至干，剩余物于室温下与200ml异丙醇搅拌。滤出固体。乙醚洗涤，40℃真空干燥过夜。得量21.7g(理论量的99％)，为浅奶酪色固体。水分含量3.4％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C41.70  H4.71  Gd21.00  N11.22  S4.28实测值：C41.55  H4.85  Gd20.85  N11.11  S4.20d)N，N，N′，N′，-四[2-(苄氧羰基氨基)-乙基]-5-硝基间苯二甲酸二酰胺

    实施例1a所述的二[2-(苄氧羰基氨基)-乙基]胺14.86g(40mmol)和20.24g(200mmol)三乙胺溶解于DMF中，与4.96g5-硝基间苯二酸二酰氯(J.Chem Soc，1957，1172-1175)混合。溶液真空蒸干，剩余物硅胶层析，乙酸乙酯洗脱。得量11.5(62.6％)为粘稠油状物。元素分析：计算值：C62.80  H5.60  N10.68实测值：C62.62  H5.77  N10.41e)N，N，N′，N′-四[2-(苄氧羰基氨基)-乙基]-5-氨基间苯二甲酸二酰胺

    将9.18g(10mmol)前叙实施例中所述的硝基化合物于200ml乙醇中的溶液加入到27.8g(100mmol)FeSO4·7H2O于200ml水中的溶液中，并加热至沸腾，加入50ml浓氨水后，再在回流下搅拌90分钟。冷却该悬浮液，再减压浓缩掉乙醇，用乙酸乙酯振摇水相。硫酸钠干燥后得到8.67g(97％的理论量)几乎无色的粘性油。元素分析：计算值：C64.93  H6.02  N11.04实测值：C65.10  H5.96  N10.89f)N，N，N′，N′-四[2-(苄氧羰基氨基)-乙基]5-(羧基甲氧乙酰基氨基)-间苯二酸二酰胺

    上述实施例所述的硝基化合物4.44g(5mmol)的DMF溶液，于冰浴中与5.05g(50mmol)三乙胺和2.9g(25mmol)二乙二醇酸酐混合，0℃下搅拌2小时。真空蒸干，剩余物于乙酸乙酯和1M柠檬酸溶液间分配。有机相用水洗至中性，干燥。得量4.62g(理论量的92％)，为粘稠的油状物。元素分析：计算值：C62.20  H5.72  N9.77实测值：C62.03  H5.60  N9.89g)以N，N′，N″，N-四-(三赖氨酰基氨基甲基)甲烷为基础的完全  保护的苄氧羰基十六烷胺

    3.0g(22.69mmol)四-(氨甲基)甲烷(制法见US 4485237A，1984)，实施例1c的标题化合物127.85g(136.15mmol)和15.67g(136.15mmol)N-羟基琥珀酰亚胺溶解于300mlDMF中。0℃下加入28.09g(136.15mmol)二环己基碳二亚胺，0℃搅拌1小时，然后在室温下搅拌2日。加入乙酸乙酯300ml。滤除环己基尿素，滤液真空浓缩。剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/异丙醇20∶1洗脱。得量58.02g(理论量的67％)，为无色粘稠的油状物。元素分析：计算值：C64.52  H6.76  N10.28实测值：C64.41  H6.91  N10.05h)由与四胺单羧酸17f缩合的N，N′，N″，N-四-(三赖氨酰基氨基甲基)甲烷得到的完全保护的苄氧羰基64-胺

    1.91g(0.5mmol)实施例17g所述的16-苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的16-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空蒸干。不必纯化可进入下一步反应。得量：1.48g(定量)。

    12.05g(12mmol)实施例17f所述的四胺单羧酸，1.92g(12mmol)1-羟基苯并三唑和3.84g(12mmol)四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲鎓盐(TBTU；Peboc公司，UK)溶解于DMF中，搅拌15分钟。然后将该溶液与6.20ml(36mmol)N-乙基二异丙胺和1.48g(0.5mmol)上述的16-胺氢溴酸盐混合，室温搅拌过夜。反应毕，真空干燥，剩余物经硅胶层析，乙酸乙酯/乙醇(2∶1)洗脱。得量4.54g(理论量的52％)，为淡黄色油状物。元素分析：计算值：C62.58  H6.01  N11.24实测值：C62.39  H6.22  N11.00i)由10-[6-(4-硫代异氰酸根合苯基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂庚基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Gd-配合物与实施例17h的去保护的64-聚胺形成的64-硫代脲结合物。

    1.74g(0.1mmol)实施例17h的64-苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的64-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH为9.5。此溶液中分次加入固体的7.20g(9.6mmol)实施例17c所述的硫代异氰酸酯，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕室温搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICON YM3)，保留液冻干。得量：5.31g(理论量的86％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：8.0％。Gd含量(AAS)：16.2％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.59  H5.14  Gd17.72  N12.92  S3.61实测值：C43.36  H5.41  Gd17.18  N13.20  S3.04实施例18a)2-硝基-5-羟基苯甲酸苄酯

    40g(218.4mmol)2-硝基-5-羟基苯甲酸，236.17g(2.184mol)苄醇和1g对甲苯磺酸于1000ml甲苯中加热脱水2日。蒸发至干，剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/己烷/丙酮＝15∶5∶1洗脱。得量50.72g(理论量的85％)，为黄色固体。元素分析：计算值：C61.54  H4.06  N5.13实测值：C61.31  H4.17  N5.05b)2-[4-硝基-2-(苄氧羰基)-苯氧基]乙酸叔丁酯

    0℃下将42.8g(220mmol)溴乙酸叔丁酯加到50g(183mmol)实施例18a的标题化合物、20.5g(366mmol)粉末状氢氧化钾和500硫酸氢四丁铵于500ml甲苯的溶液中。于0℃搅拌3小时。加入500ml冰水，剧烈搅拌2分钟。分出有机层。有机层用硫酸镁干燥，真空蒸发。剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/己烷/丙酮＝15∶10∶1洗脱。得量47.5g(理论量的67％)，为黄色粘稠油状物。元素分析：计算值：C62.01  H5.46  N3.62实测值：C62.13  H5.55  N3.50c)2-[4-硝基-2-(苄氧羰基)苯氧基]-乙酸

    实施例18b的标题化合物40g(103.26mmol)溶解于300ml二氯甲烷，于0℃滴加三氟乙酸100ml，回升到室温。4小时后蒸干，剩余物于乙醚/己烷中重结晶。得量32.5g(理论量的95％)，为淡黄色固体。元素分析：计算值：C58.01  H3.96  N4.23实测值：C58.17  H3.81  N4.18d)2-[4-硝基-2-(苄氧羰基)苯氧基]-乙酸的N-羟基琥珀酰  亚胺酯

    实施例18c的标题化合物10g(30.19mmol)和4.17g(36.28mmol)N-羟基琥珀酰亚胺溶解于20ml氯仿中，于0℃下加入7.48g(36.23mmol)二环己基碳二亚胺。室温搅拌24小时。于冰浴中冷却使尿素沉淀出。真空浓缩滤液，剩余物用异丙醇重结晶。得量12.03g(理论量的93％)，为浅黄色结晶性固体。元素分析：计算值：C56.08  H3.76  N6.54实测值：C56.17  H3.84  N6.41e)10-[6-(4-硝基-2-苄氧羰基)-苯氧基)2-羟基-5-氧代-4-氮杂己基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    室温下将实施例18d的标题化合物13.26g(23.11mmol)加到实施例2b的标题化合物11g(25.68mmol)于100mlDMF/20ml三乙胺中的溶液中，搅拌过夜。真空蒸发至干。剩余物经硅胶(RP-18，LiChroPrep)层析，水/四氢呋喃梯度洗脱。得量19.02g(理论量的81％)，为无定形固体。水分含量3.1％元素分析(以无水物计算)：计算值：C44.69  H4.66  Gd17.73  N9.47实测值：C44.48  H4.80  Gd17.56  N9.28f)10-[6-(4-氨基-2-羧基-苯氧基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂己基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    18g(20.3mmol)实施例18e的标题化合物溶解于200ml甲醇中，加入5g钯催化剂(10％Pd/C)，于氢气中室温氢化8小时。滤除催化剂，滤液浓缩至干。得量15.88g(理论量的99％)。为奶油色固体。水分含量4.1％元素分析(以无水物计算)：计算值：C40.72  H4.86  Gd20.51  N10.96实测值：C40.51  H4.97  Gd20.32  N10.73g)10-[6-(4-硫代异氰酸-2-羧基-苯氧基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂己基]-1，，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    实施例18f的标题化合物15g(19.56mmol)溶解于100ml水中，加入6.75g(58.7mmol)硫代光气于50ml氯仿中的溶液。50℃下甲苯1小时。冷却至室温，分出有机层，水层用氯仿萃取2次，每次100ml。水层蒸发至干，剩余物于室温下与100ml异丙醇搅拌。滤出固体。乙醚洗涤，40℃真空干燥过夜。得量16.5g(理论量的98％)，为浅奶酪色固体。水分含量5.8％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C40.09  H4.36  Gd19.44  N10.39  S3.96实测值：C40.15  H4.45  Gd19.23  N10.19  S3.87h)由10-[6-(4-硫代异氰酸根合-2-羧基苯氧基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂己基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Gd-配合物与实施例17h的去保护的64-聚胺形成的64-硫代脲结合物

    1.74g(0.1mmol)实施例17h的64-苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的64-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH为9.5。此溶液中分次加入固体的7.76g(9.6mmol)实施例18g所述的硫代异氰酸酯，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕室温搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICON YM3)，保留液冻干。得量：5.21g(理论量的79％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：6.0％。Gd含量(AAS)：15.1％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C41.14  H4.60  Gd16.22  N11.83  Na2.37  S3.31实测值：C40.89  H4.70  Gd16.65  N11.90  Na2.08  S3.73实施例19a)3-(4-硫代异氰酸根合苯基)戊二酸

    11.5g(100mmol)硫代光气加到22.12g(100mmol)3-(4-胺基苯基)戊二酸于300ml氯仿的溶液中，于40℃加热50分钟。蒸发至干。异丙醇/乙醚结晶，得量22.5g(理论量的85％)，为奶油色结晶性固体。元素分析：计算值：C54.33  H4.18  N5.28  S12.09实测值：C54.17  H4.29  N5.14  S12.15b)10-{6-[4-(2-羧基-1-羧甲基-乙基)-苯基]-2-羟基-5-硫氧代-4，6-二氮杂己基}-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    20g(37.2mmol)实施例2c的的标题化合物溶解于200mlDMF/50ml三乙胺中，加入11.84g(44.63mmol)实施例19a的标题化合物。室温搅拌过夜。真空蒸干，剩余物溶于200ml乙醇/30ml乙酸，再蒸干。剩余物于RP-18(LiChroPre)层析，水/THF梯度洗脱，得量26.22g(理论量的81％)，为奶油色固体。水分含量3.6％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C41.52  H4.93  Gd18.74  N10.02  S3.82实测值：C41.33  H5.05  Gd18.61  N10.17  S3.75c)10-{6-[4-(2，6-二氧代-3，4，5，6-四氢-2H-(吡喃-4-基)苯基]-2-羟基-5-硫氧代-4，6-二氮杂己基}-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    10g(11.92mmol)实施例19b的标题化合物溶解于50mlDMF中，于0℃下加入3.7g(17.88mmol)二环己基碳二亚胺。室温搅拌过夜。冷却至0℃，滤除沉出的脲，搅拌下向滤液中滴入500ml乙醚，滤出沉淀，真空50℃干燥过夜，得量9.6g(理论量的95％)本标题化合物，为浅黄色固体。水分含量2.7％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C42.43  H4.79  Gd19.15  N10.24  S3.91实测值：C42.28  H4.93  Gd19.03  N10.05  S3.83d)10-{6-[4-(2，6-二氧代-3，4，5，6-四氢-2H-(吡喃-4-基)-苯基]-2-羟基-5-硫氧代-4，6-二氮杂己基}-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物于实施例17h的去保护基的64-聚胺形成的64-酰胺-结合物

    1.74g(0.1mmol)实施例17h的64-苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的64-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH9.5。此溶液中分次加入固体的15.76g(19.2mmol)实施例19c所述的酸酐，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕室温搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICON YM3)，保留液冻干。得量：5.64g(理论量的83％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：7.6％。Gd含量(AAS)：14.7％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.08  H4.96  Gd16.02  N11.68  Na2.34  S3.27实测值：C43.03  H4.97  Gd15.86  N11.69  Na2.05  S3.11实施例20a)10-[3-(4-氨基苯氧基)-2-羟丙基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷

    15g(27.7mmol)10-[3-(4-硝基苯氧基)2-羟丙基]-1，，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷(EP0485045(先灵公司)实施例12a)溶解于250ml甲醇中，加入5g钯催化剂(10％Pd/C)，于氢气中氢化过夜。滤除催化剂，滤液浓缩至干。得量14.43g(理论量的98％)。为奶油色固体。水分含量3.8％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C54.00  H7.29  N13.69实测值：C53.88  H7.41  N13.51b)10-[3-{4-二(羧甲基)-氨基苯氧基}-2-羟丙基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷

    14g(27.37mmol)实施例20a的标题化合物，15.21g(109mmol)溴乙酸和41.5g(300mmol)碳酸钾于200ml乙醇中，加热回流2日。滤除固体，滤液中加入50ml浓盐酸，真空浓缩至干。剩余物于RP-18(Lichrop)层析，THF/水梯度洗脱，得量7.81g(理论量的43％)。为奶油色固体。水分含量5.4％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C51.67  H6.58  N11.16实测值：C51.48  H6.71  N11.03c)10-[3-{4-二(羧甲基)-氨基苯氧基}-2-羟丙基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    100ml水加到7.5g(11.95mmol)实施例20b的标题化合物和2.17g(5.97mmol)氧化钆中，90℃搅拌3日。冷却至室温，于3ml酸性的阳离子交换剂(Ir-120/H+型)搅拌。滤除交换剂，滤液冻干。得量10.18g(理论量的97％)。为无定形粉末。水分含量11.3％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C41.48  H4.90  Ga20.11  N8.96实测值：C41.27  H4.98  Gal9.93  N8.85d)10-[3-{4(2，6-二氧代吗啉代基)-2-羟丙基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    10g(12.79mmol)实施例20c的标题化合物溶解于50mlDMF中，于0℃下加入5.28g(25.58mmol)二环己基碳二亚胺。室温搅拌过夜。冷却至0℃，滤除沉出的脲，搅拌下向滤液中滴入500ml乙醚，析出本标题化合物。滤集，乙醚洗涤，真空50℃干燥过夜，得量9.67g(理论量的69％)本标题化合物，为浅黄色无定形固体。水分含量3.0％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C42.46  H4.75  Gd20.59  N9.17实测值：C42.27  H4.91  Gd20.38  N9.03e)由10-[3-{4-(2，6-二氧代吗啉代基)-苯氧基}-2-羟丙基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的Gd-配合物与实施例17h的去保护的64-聚胺形成的64-酰胺结合物

    1.74g(0.1mmol)实施例17h的64-苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的64-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH9.5。此溶液中分次加入固体的14.68g(19.2mmol)实施例20d所述的酸酐，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕室温搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICON YM3)，保留液冻干。得量：5.00g(理论量的78％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：7.7％。Gd含量(AAS)：15.7％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.15  H4.93  Gd17.01  N10.89  Na2.49实测值：C43.17  H4.89  Gd16.80  N10.54  Na2.33实施例21a)内消旋-2，3-双(苄氧羰基氨基)琥珀酸

    14.81g(100mmol)二胺基琥珀酸(内消旋型)悬浮于300mlTHF中，用2N氢氧化钠调节pH9。0℃和剧烈搅拌下滴入42.65g(250mmol)氯甲酸苄酯于50mlTHF中的溶液，同时加入2N氢氧化钠使pH为9。然后在pH9情况下搅拌5小时。加入盐酸使pH为2，再加300ml饱和食盐溶液。分出有机相，真空干燥，剩余物硅胶层析，二氯甲烷/甲醇10∶1(2％乙酸)洗脱，得量27.07g(理论量的65％)，为无色固体。元素分析：计算值：C57.69  H4.84  N6.73实测值：C57.59  H4.93  N6.66b)2，3-二(苄氧羰基氨基)琥珀酸酐

    25g(60.04mmol)实施例21a的标题化合物与200ml乙酸酐于50℃搅拌12小时。于冰浴中冷却到0℃，慢慢滴入600ml乙醚。滤集析出的结晶，用乙醚洗涤2次，每次100ml，真空(50℃)干燥过夜。得量23.44g(理论量的98％)，为无色片状结晶。元素分析：计算值：C60.30  H4.55  N7.03实测值：C60.15  H4.65  N6.94c)以(二胺基)琥珀酰化的N，N，N″，N-四-[三赖氨酰基氨基-乙基]-甲烷为基础的完全保护的苄氧羰基-32-胺

    10g(2.62mmol)实施例17d的标题化合物溶解于100ml乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合(100ml)，2小时后加入乙醚使沉淀完全，滤集得到的十六胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，不必纯化加入下一步反应。这样得到的氢溴酸盐溶解于200ml吡淀和20ml三乙胺，加入1g(8.81mmol)4-二甲胺基吡啶。于0℃下滴入33.40g(83.84mmol)实施例21b的标题化合物，室温搅拌过夜。真空蒸干，剩余物溶于300ml二氯甲烷，用5％碳酸钾溶液洗涤3次，每次100ml。有机相用硫酸镁干燥，真空蒸干，剩余物经过滤层析，二氯甲烷/甲醇20∶1洗脱。得量17.07g(理论量的81％)。为无色固体。元素分析(以无水物计算)：计算值：C59.28  H5.61  N10.45实测值：C59.13  H5.79  N10.29d)1-羟基-11-(4-硝基苯氧基]-3，6，9-三氧杂十一烷

    0℃下将18.16g(128.7mmol)4-氟代硝基苯加到100g(515.0mmol)四亚乙基乙二醇、73g(1300mmol)粉末状氢氧化钾和500mg硫酸氢四丁铵于500ml甲苯中的溶液中。于室温下搅拌过夜。加入1000ml饱和食盐水溶液，分出有机层，有机层用硫酸镁干燥，真空蒸发。剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/异丙醇＝15∶1洗脱。得量27.19g(理论量的67％)，为黄色油状物，放置硬化。元素分析：计算值：C53.33  H6.71  N4.44实测值：C53.20  H6.85  N4.28e)1-叔丁氧基-13-(4-硝基苯氧基]-2，5，8，11-四氧杂十三烷

    0℃下将18.6g(95.1mmol)溴乙酸叔丁酯加到25g(79.28mmol)实施例21d的标题化合物、8.9g(158.6mmol)粉末状氢氧化钾和200硫酸氢四丁铵于300甲苯中的溶液中。于0℃搅拌3小时。加入200ml水，分出有机层。有机层用硫酸镁干燥，真空蒸发。剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/丙酮＝10∶1洗脱。得量29.6g(理论量的87％)，为黄色粘稠油状物元素分析：计算值：C55.93  H7.28  N3.26实测值：C55.78  H7.41  N3.15f)1-羧基-13-(4-硝基苯氧基]-2，5，8，11-四氧杂十三烷

    实施例21e的标题化合物28g(65.2mmol)溶解于200ml二氯甲烷，于0℃滴加三氟乙酸150ml，回升到室温。1小时后蒸干，剩余物于乙醚/己烷中重结晶。得量23.4g(理论量的96％)，为淡黄色固体。元素分析：计算值：C51.47  H6.21  N3.75实测值：C51.38  H6.31  N3.61g)1-羧基-13-(4-硝基苯氧基]-2，5，8，11-四氧杂十三烷的N-羟基琥珀酰亚胺酯

    实施例21f的标题化合物10g(26.78mmol)和3.7g(32.14mmol)N-羟基琥珀酰亚胺溶解于20ml氯仿中，于0℃下加入6.63g(32.14mmol)二环己基碳二亚胺。室温搅拌24小时。于冰浴中冷却，使尿素沉淀出。真空浓缩滤液，剩余物用异丙醇重结晶。得量11.21g(理论量的89％)，为浅黄色结晶性固体。元素分析：计算值：C51.06  H5.57  N5.95实测值：C51.17  H5.61  N5.83h)10-[18-(4-硝基苯氧基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂-7，10，13，16-四氮杂-十八烷基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    室温下将实施例21g的标题化合物9.84g(20.92mmol)加到实施例2c的标题化合物10g(17.43mmol)于100mlDMF/20ml三乙胺中的溶液中，搅拌过夜。真空蒸发至干。剩余物经硅胶(RP-18，LichroPrep)层析，水/四氢呋喃梯度洗脱。得量14.3g(理论量的83％)，为无定形固体。水分含量5.8％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C42.66  H5.53  Gd16.93  N9.05实测值：C42.51  H5.68  Gd16.80  N9.15i)10-[18-(4-氨基苯氧基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂-7，10，13，16-四氧杂-十八烷基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氧杂环十二烷的钆配合物

    14g(15.07mmol)实施例21h的标题化合物溶解于200ml甲醇中，加入4g钯催化剂(10％Pd/C)，于氢气中室温氢化8小时。滤除催化剂，滤液浓缩至干。得量13.41g(理论量的99％)。为奶油色固体。水分含量6.1％元素分析(以无水物计算)：计算值：C44.09  H5.94  Gd17.49  N9.35实测值：C43.93  H6.10  Gd17.28  N9.22k)10-[18-(4-硫代异氰酸根合苯氧基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂-7，10，13，16-四氧杂-十八烷基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物

    实施例21i的标题化合物10g(11.12mmol)溶解于100ml水中，加入9.76g(84.9mmol)硫代光气于50ml氯仿的溶液。50℃下搅拌1小时。冷却至室温，分出有机层，水层用氯仿萃取2次，每次100ml。水层蒸发至干，剩余物于室温下与200ml异丙醇搅拌。滤出固体。乙醚洗涤，40℃真空干燥过夜。得量10.47g(理论量的97％)，为浅奶酪色固体。水分含量3.0％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.39  H5.46  Gd16.71  N8.93  S3.41实测值：C43.20  H5.60  Gd16.53  N8.75  S3.36l)10-[18-(4-硫代异氰酸根合苯氧基)-2-羟基-5-氧代-4-氮杂-7，10，13，16-四氧杂-十八烷基]-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的轧配合物与实施例21c的脱保护的32-胺得到的32-硫代脲结合物

    1.61g(0.2mmol)实施例21c所述的32-苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，滤集得到的32-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶于水，加入1N氢氧化钠使pH为9.5，此溶液中分次加入固体的9.03g(9.6mmol)实施例21k所述的硫代异氰酸酯，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕室温搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICON YM3)，保留液冻干。得量：6.10g(理论量的86％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：3.5％。 Gd含量(AAS)：14.0％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C43.14  H5.51  Gd14.70  N10.31  Na1.07  S3.00实测值：C42.96  H5.72  Gd14.50  N10.39  Na0.94  S2.76实施例22由10-[3-(4-硫代异氰酸根合苯氧基)-2-羟基丙基-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷的钆配合物与实施例21c的脱保护的32-胺得到的32-硫代脲结合物

    1.61g(0.2mmol)实施例21c所述的32-苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，滤集得到的32-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶于水，加入1N氢氧化钠使pH9.5，此溶液中分次加入固体的6.80g(9.6mmol)EP-485045(8.11.90)实施例12d所述的硫代异氰酸酯，加入时要加入氢氧化钠以维持pH保持在9.5，加毕室温搅拌过夜。然后加入稀盐酸以中和，该溶液经超滤(AMICON YM3)，保留液冻干。得量：4.56g(理论量的82％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：4.0％。Gd含量(AAS)：17.9％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C40.81  H4.76  Gd18.81  N11.52  Na1.37  S3.84实测值：C40.67  H4.98  Gd18.60  N11.70  Na1.21  S3.47实施例23a)六-N-[2-氨基乙基]-[1，3，5]-三嗪-2，4，6-三基三胺

    18.41g(100mmol)2，4，6-三氯-S-三嗪和92.99g(315mmol)二-(2-三氟乙酰基-氨基乙基)-胺(按照US-No4415737制备)悬浮液300ml水和300ml二噁烷的混合液中。搅拌下温度升至50℃。滴入饱和碳酸氢钾溶液，使pH7-8。当pH值不再改变时，加入1N氢氧化钾使pH升至9，升高温度到70℃30分钟，真空蒸发至原体积的1/10，冰浴冷却，滤集沉淀。用异丙醇结晶，得到本标题化合物29g，mp 168-172℃。元素分析(以无水物计算)：计算值：C46.85  H9.44  N43.71实测值：C46.62  H9.80  N43.92b)以六-N-[2-三赖氨酰基氨基]-[1，3，5]-三嗪-2，4，6-三基三胺为基础的完全保护的苄氧羰基-24-聚胺

    7.0g(7.5mmol)实施例1c所述的“Tri-赖氨酸”1.2g(7.5mmol)1-羟基苯并三唑和2.4g(7.5mmol)四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲鎓盐(TBTU；Peboc公司，UK)溶解于100mlDMF中，搅拌15分钟。然后将该溶液与5.16ml(30mmol)N-乙基二异丙胺和385mg(1mmol)六-N-[2-氨基乙基]-[1，3，5]-三嗪-2，4，6-三基三胺(实施例23a)混合，室温搅拌过夜。反应毕，真空蒸干，剩余物经硅胶层析，乙酸乙酯/乙醇(3∶1)洗脱。得量4.02g(理论量的68％)。元素分析：计算值：C 63.98  H6.80  N11.37实测值：C 64.15  H7.19  N11.51c)以六-N-[2-三赖氨酰基氨基]-[1，3，5]-三嗪-2，4，6-三基三胺为基础的24-钆-DTPA单酰胺

    1.18g(0.2mmol)实施例23b所述的聚苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的24-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH为9.5。此溶液中加入固体的5.8g(14.4mmol)N3-(2，6-二氧代吗啉代乙基)-N6-(乙氧基羰基甲基)-3，6-二氮杂辛二酸(EP0331616实施例13a)，加入时要加入氢氧化钠，以维持pH保持在9.5。加毕，加入5N氢氧化钠，于pH＞13室温搅拌过夜，使DTPA乙酯皂化。然后加入浓盐酸使pH5，与2.61g(7.2mmol)Gd2O3混合，于80℃搅拌30分钟，冷却后于pH7下经YM3 AMICON-超过滤膜过滤除盐，保留液经膜过滤后，冻干。得量：3.38g(理论量的88％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：7.3％。Gd含量(AAS)：20.1％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C40.78  H4.37  Gd19.68  N8.77  Na2.88实测值：C41.03  H4.61  Gd19.82  N8.98  Na3.01按照类似的方法用Dy2O3得到的镝配合物元素分析(以无水物计算)：计算值：C40.51  H4.34  dy20.21  N8.71  Na2.86实测值：C40.39  H4.61  dy19.90  N8.95  Na2.62实施例24a)1，4，7，10，13，16-六[苄氧基羰基甘氨酰]-1，4，7，10，13，16-六氮杂环十八烷

    516mg(2mmol)1，4，7，10，13，16-六氮杂环十八烷(Fluka)与甲苯加热共沸，向此冷却的溶液中室温下加入3.14g(15mmol)苄氧羰基甘氨酸的THF溶液和3.71g(15mmol)2-乙氧基-1-乙氧羰基-1，2-二氢醌(EEDQ)，搅拌过夜。反应毕，加入己烷使产物沉出，沉淀经硅胶层析，二氯甲烷/己烷/异丙醇(20∶10∶1)洗脱。得量1.83g(65％)。元素分析：计算值：C61.53  H6.02  N11.96实测值：C61.40  H5.96  N12.08b)1，4，7，10，13，16-六[N，N-二(苄氧羰基胺基乙基)甘氨酰]-1，4，7，10，13，16-六氮杂环十八烷

    1.41g(1mmol)上述实施例所述的六-苄氧羰胺，溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，60分钟后加入乙醚使沉淀完全，得到的八胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。不必纯化可进入下一步反应。得量：1.09g(定量)。1.09g(1mmol)所制的氢溴酸盐悬浮液50ml乙腈中加入3ml三乙胺。然后加入3.54g(20mmol)N-苄氧羰基氮丙啶(按照J.ChemSoc Perkin Trans，1，21-26，1993制备)氮气氛中搅拌5日，蒸发至干。100ml二氮甲烷溶解，用5％碳酸钾洗涤2次，每次100ml。二氯甲烷层经硫酸镁干燥，浓缩，剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/甲醇/三乙胺(20∶1∶0.1)洗脱。得量2.29g(理论量的84％)，为黄色粘稠油状物。元素分析：计算值：C 63.42  H6.65  N12.33实测值：C 63.29  H6.60  N12.47c)由与苄氧羰基氮丙啶烷基化的十二胺1，4，7，10，13，16-六[N，N-二(苄氧羰基胺基乙基)甘氨酰]-1，4，7，10，13，16-六氮杂环十八烷得到的完全保护的苄氧羰基-24-聚胺

    1.36g(0.5mmol)实施例24b的标题化合物溶解于100ml甲醇中，加热3g皮尔曼催化剂(氢氧化钯-活性炭)，于5巴氢压下室温氢化10小时。滤除催化剂，滤液浓缩至干。得量0.56g(定量)。

    向制得的游离12-胺0.56g(0.5mmol)于50ml乙腈中的溶液中，加入3.54g(20mmol)N-苄氧羰基氮丙啶(按照J.Chem SocPerkin Trans，1，21-26，1993制备)氮气氛中搅拌5日，蒸发至干。100ml二氯甲烷溶解，用5％碳酸钾洗涤2次，每次100ml。二氯甲烷层经硫酸镁干燥，浓缩，剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/甲醇/三乙胺(20∶1∶0.1)洗脱。得量2.23g(理论量的83％)，为黄色粘稠油状物。元素分析：计算值：C 64.41  H6.98  N12.52实测值：C 64.20  H7.15  N12.44d)以由实施例24c脱保护的24-胺为基础的24-钆-DTPA单酰  胺

    1.07g(0.2mmol)实施例24c的标题化合物溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的24-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH9.5。此溶液中加入固体的5.8g(14.4mmol)N3-(2，6-二氧代吗啉代乙基)-N6-(乙氧羰甲基)-3，6-二氮杂辛二酸(EP0331616实施例13a)，加入时要加入氢氧化钠，以维持pH保持在9.5。加毕，加入5N氢氧化钠，于pH＞13室温搅拌过夜，使DTPA乙酯皂化。然后加入浓盐酸使pH5，与2.61g(7.2mmol)Gd2O3混合，于80℃搅拌30分钟，冷却后于pH7下经YM3AMICON-超过滤膜过滤除盐，保留液经膜过滤后，冻干。得量：2.90g(理论量的89％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：8.0％。Gd含量(AAS)：23.4％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C34.61  H4.40  Gd25.17  N11.21  Na0.92实测值：C34.34  H4.50  Gd24.93  N11.06  Na1.10实施例25成品的实施例

    1.20g(0.2mmol)实施例1d所述的聚苄氧羰基胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的24-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH9.5。此溶液中加入固体的5.8g(14.4mmol)N3-(2，6-二氧代吗啉代乙基)-N6-(乙氧羰甲基)-3，6-二氮杂辛二酸(EP0331616实施例13a)，加入时要加入氢氧化钠，以维持pH保持在9.5。加毕，加入5N氢氧化钠，于pH＞13室温搅拌过夜，使DTPA乙酯皂化。然后加入阳离子交换剂(Amberlite IR120，H+-型)使pH4.5，滤除离子交换剂，向滤液中加入1.07g(14.4mmol)氢氧化钙。溶液用稀氢氧化钠溶液调节pH7，经YM3 AMI-CON-超过滤膜过滤，保留液经膜过滤后，冻干。得量：2.76g(理论量的95％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：7.2％。元素分析(以无水物计算，并且按照每个复合物含1.5钠盐计)计算值：C41.42  H5.04  Ga7.13  N12.15  Na6.14实测值：C41.09  H5.33  Ga6.97  N12.30  Na6.52b)实施例1所述的钆-串联物-聚合物溶液的制备

    实施例1e所述的化合物16.68g(0.025mol钆)溶解于60ml注射用水中。加入702mg(1.25mmol钙)上例所述的钙-配合物和121mg三羟甲基胺基甲烷，用稀盐酸调节pH为7.0，并用100ml注射水稀释，溶液超滤，灌装瓶内，灭菌。实施例264，7，13，16，21，24-六-{8-(苄氧羰基氨基)-6-[2-苄氧羰基氨基乙基]-5-氧代-3-氧杂辛酰基}八氮杂二环[8，8，8]十六烷

    741mg(2mmol)1，4，7，13，16，21，24-八氮杂二环[8，8，8]十六烷{P.H.Smith等，J Org Chem，(1993)，58：7937]与甲苯共沸蒸馏脱水。溶液冷却后，于室温下加入7.32g(15mmol)N，N′-二(苄氧羰基)-3-[羧甲氧乙酰基]-3-氮杂戊烷-1，5-二胺(实施例7a)于THF中的溶液和3.71g(15mmol)2-乙氧基-1-乙氧基-羰基-1，2-二氢醌(EEDQ)，搅拌过夜。反应毕，加入己烷使产物沉出，倾滗溶剂，再由THF/己烷沉出。真空干燥后，得量4.53g(理论量的71％)，为黄色固体。元素分析：计算值：C61.04  H6.45  N11.42实测值：C60.89  H6.55  N11.61b)以4，7，13，16，21，24-六-{8-(苄氧羰基氨基)-6-[2-(苄氧羰基氨基)乙基]-5-氧代-3-氧杂辛酰基}八氮杂二环[8，8，8]十六烷与Nα，Nξ-二(赖氨酰)赖氨酸(“Tri-赖氨酸”)缩合的48节-胺为基础的完全保护的48节-苄氧羰聚胺

    3.19g(1mmol)实施例26a所述的12一节苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，90分钟后加入乙醚使沉淀完全，得到十二胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。不必纯化可进入下一步反应。得量：2.7g(定量)。14.1g(5mmol)实施例1c所述的被保护的“Tri-赖氨酸”，2.25g(15mmol)1-羟基苯并三唑和4.8g(15mmol)四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲鎓盐(TBTU；Peboc公司，UK)溶解于DMF中，搅拌15分钟。然后将该溶液与7.74ml(45mmol)N-乙基二异丙胺和2.7g(1mmol)上述的十二胺氢溴酸盐混合，室温搅拌过夜。反应毕，真空蒸干，剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脱。得量9.4g(理论量的74.4％)。元素分析：计算值：C63.33  H6.80  N10.87实测值：C63.14  H6.72  N10.98c)以由实施例26b得到的、去保护的48节-胺为基础的32-钆-  DTPA单酰胺

    2.53g(0.2mmol)实施例26b的聚苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到的48-节胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。剩余物溶解于水，加入1N氢氧化钠使pH9.5。此溶液中加入固体的11.55g(28.8mmol)N3-(2，6-二氧代吗啉代乙基)-N6-(乙氧羰甲基)-3，6-二氮杂辛二酸(EP0331616实施例13a)，加入时要加入氢氧化钠，以维持pH保持在9.5。加毕，加入5N氢氧化钠，于pH＞13室温搅拌过夜，使DTPA乙酯皂化。然后加入浓盐酸使pH5，与5.22g(14.4mmol)Gd2O3混合，于80℃搅拌30分钟，冷却后于pH7下经YM3AMICON-超过滤膜过滤除盐，保留液经膜过滤后，冻干。得量：5.90g(理论量的83％)。水含量(卡尔-费舍尔法)：8.3％。Gd含量(AAS)：21.6％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C35.12  H4.27  Gd23.14  N10.39  Na3.24实测值：C34.98  H4.50  Gd22.91  N10.54  Na2.09实施例27a)10-(苄氧羰基甲基)-1，4，7-三(叔丁氧基羰基甲基)1，4，7，10-四氮杂环十二烷(为溴化钠的配合物)

    20g(38.87mmol)1，4，7-三(叔丁氧基羰基甲基)1，4，7，10-四氮杂环十二烷(DO3A-三-叔丁酯按照EP0299795实施例22a方法制备)溶解于100ml乙腈中。然后加入11.45g(50mmol)溴乙酸苄酯和10.6g(100mo)碳酸钠，于60℃搅拌12小时。滤除盐，滤液真空蒸干，剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/甲醇＝20∶1洗脱。得量21.72g(理论量的73％)，为无色无定形粉末。元素分析(以无水物计算)：计算值：C54.90  H7.63  N7.32  Na3.00  br10.44实测值：C54.80  H7.72  N7.21  Na2.89  Br10.27b)10-(羧甲基)-1，4，7-三(叔-丁氧羰基甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷(为溴化钠配合物)

    20g(26.12mmol)实施例27a的标题化合物溶解于300ml异丙醇中，加入3g钯催化剂(10％Pd/C)，于氢气中室温氢化过夜。滤除催化剂，滤液浓缩至干。得量17.47g(理论量的99％)。为无色无定形固体。元素分析(以无水物计算)：计算值：C49.78  H7.76  N8.29  Na4.44  Br11.83实测值：C49.59  H7.59  N8.17  Na4.40  Br11.70c)以24-节胺N，N，N′，N′，N″，N″-六[2-(三赖氨酰基氨基)-乙基]苯三甲酸三酰胺为基础的24-节N-(2-DO3A基-乙酰基)-串联体聚酰胺

    6.0g(1mmol)实施例1d所述的聚苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到24-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。

    32.43g(48mmol)实施例27b所述的酸溶解于DMF中，与7.35g(48mmol)1-羟基苯并三唑和15.41g(48mmol)四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲翁盐(TBTU；Peboc公司，UK)与49.3ml(288mmol)N-乙基二异丙胺混合，室温搅拌20分钟。然后与上述的(1mmol)24-胺氢溴酸盐混合，室温搅拌4日。真空蒸干，剩余的油状物于冰浴中冷却，与三氟乙酸混合，室温搅拌过夜，然后加入乙醚使沉出。滤集沉淀真空干燥。溶解于水，调节pH7，经YM3 Amicon超过滤膜过滤，以纯化低分子量部分，保存液经膜过滤，冻干。得量12.5g(理论量的83％)。水分含量(卡尔-费舍尔法)：9.7％。元素分析：计算值：C45.21  H5.97  N14.49  Na12.15实测值：C45.04  H6.15  N14.26  Na11.97d)以24-节胺N，N，N’，N’，N”，N”-六[2-(三赖氨酰基氨基)-乙基]苯三甲酸三酰胺为基础的N-(2-DO3A基-乙酰基)-串联体聚酰胺的24-节-钆配合物

    6.81g(0.5mmol)实施例27c所述的配合物构成体酸溶解于水，用稀盐酸调节pH3，与2.17g(6mmol)Gd2O3混合，80℃搅拌30分钟。冷却后调节pH为7，经YM3 AMICON超过滤膜脱盐，经IRA67(OH-型)阴离子交换剂和IRC50(H+型)阳离子交换剂，溶液经膜过滤，冻干。得量5.44(理论量的63.9％)。水分含量(卡尔-费舍尔法)：9.7％。钆含量(AAS)：21.95％元素分析(以无水物计算)：计算值：C39.13  H5.16  N12.54  Ga23.97实测值：C38.90  H5.29  N12.41  Ga23.55实施例28a)10-(4-羧基-2-氧代-3-氮杂丁基)-1，4，7-三(叔-丁氧羰基甲基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷

    1.73g(15mmol)N-羟基琥珀酰亚胺加到10g(14.80mmol)实施例27b的标题化合物中，冷却至0℃，加入4.13g(20mmol)二环己基碳二亚胺，0℃搅拌1小时，然后在室温下搅拌2小时。冷却至0℃，加入5.1g(50mmol)三乙胺和2.25g(30mmol)甘氨酸。室温搅拌过夜。滤除环己基尿素，滤液真空浓缩。剩余物用水处理，二氯甲烷萃取2次。有机相经硫酸镁干燥，真空蒸干。剩余物经硅胶层析，二氯甲烷/甲醇15∶1洗脱。得量8.20g(理论量的88％)，为无色固体。元素分析：计算值：C57.21  H8.80  N11.12实测值：C57.10  H8.91  N11.03b)以24-节胺N，N，N′，N′，N″，N″-六[2-(三赖氨酰基氨基)-乙基]苯三甲酸三酰胺为基础的24-节N-(5-DO3A基-4-氧代-3-氮杂戊酰基)-串联体聚酰胺

    6.0g(1mmol)实施例1d所述的聚苄氧羰胺溶解于乙酸，搅拌下与33％氢溴酸的乙酸溶液相混合，3小时后加入乙醚使沉淀完全，得到24-胺氢溴酸盐用乙醚洗涤，真空干燥。

    30.32g(48mmol)实施例28a)所述的酸溶解于DMF中，与7.35g(48mmol)1-羟基苯并三唑和15.41g(48mmol)四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲鎓盐(TBTU；Peboc公司，UK)与49.3ml(288mmol)N-乙基二异丙胺混合，室温搅拌20分钟。然后与上述的(1mmol)24-胺氢溴酸盐混合，室温搅拌4日。真空蒸干，剩余的油状物于冰浴中冷却，与三氟乙酸混合，室温搅拌过夜，然后加入乙醚使沉出。滤集沉淀真空干燥。溶解于水，调节pH7，经YM3 Amicon超滤膜过滤，以纯化低分子量部分，保存液经膜过滤，冻干。得量12.9g(理论量的79.2％)。水分含量(卡尔-费舍尔法)：7.9％。元素分析：计算值：C44.93  H5.91  N15.41  Na11.04实测值：C44.77  H6.15  N15.60  Na10.86c)以24-节胺N，N，N′，N′，N″，N″-六[2-(三赖氨酰基氨基)-乙基]苯三甲酸三酰胺为基础的N-(5-DO3A基-4-氧代-3-氮杂戊酰基)-串联体聚酰胺的24-节-钆配合物

    8.14g(0.5mmol)实施例28b所述的复合物构成体酸溶解于水，用稀盐酸调节pH3，与2.17g(6mmol)Gd2O3混合，80℃搅拌30分钟。冷却后调节pH7，经YM3 AMICON超滤膜脱盐。经IRA67(OH-型)阴离子交换剂和IRC50(H+型)阳离子交换剂，溶液经膜过滤，冻干。得量6.3g(理论量的67.7％)。水含量(卡尔-费舍尔法)8.0％。钆含量19.6％。元素分析(以无水物计算)：计算值：C39.37  H5.18  N13.50  Ga22.05实测值：C39.44  H5.02  N13.73  Ga21.79与细胞外造影剂进行体内比较的实施例用实施例7d化合物作为血液池中药物的试验按照如下方法进行：

    实验动物体重为300-350g雄性大鼠(Schering-SPF)。试验前剖腹，取出大肠，穿过后腹膜用手术针将肾血管(动脉和静脉)两侧结扎。然后再缝合腹腔。每只动物静脉给如下的造影剂溶液0.3ml(或50mmol/L)：混合物为1份的实施例7d化合物，下称化合物1，和10-(1-羟甲基-2，3-二羟丙基)-1，4，7-三(羧甲基)-1，4，7，10-四氮杂十二烷的锝配合物构成，制法按照欧洲专利EP448191，下称化合物2。经颈动脉导管于如下时间取血样：15，30，45，60，90秒，3，5，10，15分钟。所获得的血样用原子发射光谱平行测定钆(Gd)和锝(Dy)的浓度。注射的造影剂化合物1(Gd)和化合物2(Dy，对照物)在血样中存留量可用相同动物的示踪差异加以比较。由于肾消除是不可能的，血浓度的降低归结于血循环中的分配和向小间隙的扩散。结果：化合物1在小间隙的扩散与造影剂化合物2在细胞间浓度相比，明显地减慢了(见图1)。

    细胞间的造影剂(化合物2)在体内的小间隙中扩散得如此慢，以致在静脉注射1分钟后才达到平衡(经血浓度恒定证明)。与此相反，串联体配合物(化合物1)不仅可测出较高的血浓度(由很小的分布容积而证明)，而且在整个试验时间内(15分钟)也未达到平衡(在小间隙组织中非常慢的扩散)。这表明化合物1以血液造影剂的形式而保存。

    图1用结扎的肾血管测定大鼠中钆(化合物1)和锝(化合物2)的浓度