新的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂及其制备、配制、稀释和使用方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201480081671.3

申请日:

2015.09.03

公开号:

CN106686979A

公开日:

2017.05.17

当前法律状态:

实审

有效性:

审中

法律详情:

实质审查的生效 IPC(主分类):A01N 33/00申请日:20150903|||公开

IPC分类号:

A01N33/00

主分类号:

A01N33/00

申请人:

绿色创新生物技术有限公司

发明人:

缇瑞泰亚塔·卡塞吉缔

地址:

泰国曼谷帕亚泰区赛森纳街道曼克瑞塞纳路第3村门牌333/82

优先权:

2014.09.03 TH 1401005120

专利代理机构:

无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙) 32260

代理人:

张欢勇

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内容摘要

本发明提供包含壳寡糖的组合物、其制备和使用方法,所述方法包括例如刺激植物产生重要物质的方法。

权利要求书

1.一种组合物,包含壳寡糖、有机酸、氨基酸和矿物质。
2.根据权利要求1所述的组合物,其中所述有机酸为乳酸。
3.根据权利要求1所述的组合物,其中所述氨基酸为蛋氨酸。
4.根据权利要求1所述的组合物,其中所述矿物质包含氮、磷、钾、硫、锰、锌、钙、硅、亚
铁和铁。
5.根据权利要求1所述的组合物,其中所述壳寡糖具有可变的分子量和可变的脱乙酰
化程度。
6.根据权利要求5所述的组合物,其中所述壳寡糖的分子量在约2.0×102至约2.0×103
的范围内,且所述脱乙酰化程度在约84%至约96%的范围内。
7.根据权利要求5所述的组合物,其中所述壳寡糖的分子量在约4.0×104至约4.0×105
的范围内,且所述脱乙酰化程度在约81%至约92%的范围内。
8.根据权利要求5所述的组合物,其中所述壳寡糖的分子量在约3.0×106至约3.0×107
的范围内,且所述脱乙酰化程度在约75%至约85%的范围内。
9.根据权利要求1所述的组合物,还包含稀释剂。
10.根据权利要求9所述的组合物,其中所述稀释剂为水。
11.根据权利要求9所述的组合物,其中壳寡糖的浓度为约0.6%,有机酸的浓度为约
0.6%,氨基酸的浓度为约0.5%且矿物质的浓度为约1.68%。
12.根据权利要求11所述的组合物,其中所述浓度按重量计。
13.一种制备根据权利要求1所述的组合物的方法,包括:
提供壳寡糖;
添加有机酸;
添加氨基酸;和
添加矿物质。
14.根据权利要求13所述的方法,其中所述有机酸为乳酸。
15.根据权利要求13所述的方法,其中所述氨基酸为蛋氨酸。
16.根据权利要求13所述的方法,其中所述矿物质包含氮、磷、钾、硫、锰、锌、钙、硅、亚
铁和铁。
17.一种制备稀释的壳寡糖组合物的方法,包括将根据权利要求1所述的组合物与水混
合。
18.一种刺激植物产生物质的方法,包括将根据权利要求1所述的组合物施用给下列任
一者:植物、植物的种子和植物的茎。
19.根据权利要求18所述的方法,其中所述植物为观叶植物。
20.根据权利要求18所述的方法,其中所述植物为果树。
21.根据权利要求18所述的方法,其中所述植物为开花植物。
22.根据权利要求18所述的方法,其中所述植物为罗勒。
23.根据权利要求18所述的方法,其中所述植物为辣椒。
24.根据权利要求18所述的方法,其中所述植物为水稻。
25.根据权利要求18所述的方法,其中所述物质为类黄酮。
26.根据权利要求18所述的方法,其中所述物质为酚类物质。
27.根据权利要求18所述的方法,其中所述物质为生物碱。
28.根据权利要求18所述的方法,其中所述物质为萜类化合物。
29.根据权利要求18所述的方法,其中所述物质为蛋白质。
30.根据权利要求18所述的方法,其中所述物质为酶。
31.根据权利要求18所述的方法,其中所述物质为类胡萝卜素。
32.根据权利要求18所述的方法,其中所述物质为辣椒素类物质。
33.根据权利要求18所述的方法,其中所述物质为脂肪酸。
34.根据权利要求18所述的方法,其中所述组合物在已建立所述植物的栽培之前或之
后施用,且所述施用包括在一定面积的地带上喷洒一定量的所述组合物,喷洒比率以组合
物的立方厘米数(cc)/1rai表示。
35.根据权利要求34所述的方法,其中每三天喷洒所述组合物。
36.根据权利要求34所述的方法,其中每六天喷洒所述组合物。
37.根据权利要求34所述的方法,其中每十二天喷洒所述组合物。
38.根据权利要求34所述的方法,其中所述比率为40cc/1rai。
39.根据权利要求34所述的方法,其中所述比率为80cc/1rai。
40.根据权利要求34所述的方法,其中所述比率为120cc/1rai。
41.根据权利要求34所述的方法,其中所述比率为160cc/1rai。
42.一种用于刺激植物产生物质的套装,包含一定量的根据权利要求1的组合物及其使
用说明手册。

说明书

新的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂及其制备、配制、稀释和使用方法

背景技术

光合陆生和水生植物的栽培是全世界主要的经济活动且为大多数人提供大部分
卡路里需求。除了农业生产外,许多类型的光合陆生和水生植物(诸如花卉)的生产还用于
其他用途。这些光合物种的栽培常常因植物疾病和病症复杂化,这些植物疾病和病症可显
著降低农场的生产率。收获作物期间的损害(例如水果或块茎上的伤口)是疾病或致病有机
体可不利地影响生产者的另一个时机。因此,农民使用多种方法来限制植物病症和疾病,包
括化学处理,这些化学处理涉及增加的成本并可能破坏环境、当地的生物多样性和农民及
其他食用该农产品或与该农产品相互作用的人的健康。这些化学处理以及基因工程被广泛
用来提升植物抵抗疾病的能力并作为疾病的治疗措施,但现代农业过度依赖于这些化学处
理已导致广泛的抗药性并导致需要更自然的方式来促进植物的健康免疫功能。

当植物因诸如生物(真菌、细菌、病毒)和非生物(环境因素—缺乏营养素、干旱、缺
氧、高温、日照或污染)的任何原因而被破坏、受到攻击或受到影响时,植物出现疾病抵抗力
(Freeman和Beattie,2008)。在不适当的条件下,产生次级代谢物,包括例如萜类、酚类、生
物碱类、蛋白质类和酶类。

根据以往的研究,据发现,植物的免疫系统可使用各种激发剂来促进或刺激。使用
不同的激发剂还会影响不同种类的物质的产生,例如碳水化合物聚合物、脂质、糖肽和糖蛋
白。这些物质的产生用来抵抗微生物的破坏并支持植物的许多过程,诸如活性氧物种
(AOS)、植物抗毒素(phytoalexin)的生物合成、起源于类苯基丙烷(phenyl propanoid)的
细胞壁强度、胼胝质(callose)累积、其他抗性酶的合成和PR蛋白累积(Van Loon和Van
Strien,1999)。

壳聚糖(chitosan)可刺激萜类的活性。据发现,西红柿中的壳聚糖可诱导西红柿
叶中产生倍半萜烯(sesquiterpene)(Walker-Simmon等人,2001)。另外,使用马铃薯中的低
分子量壳聚糖可诱导马铃薯芽产生倍半萜烯和产生植物抗毒素(Vasyukova等人,2001)。此
外,不同的分子量和乙酰化程度会影响抗菌素耐药性的反应活性。分子量比乙酰化程度的
影响更大(Sekiguchi等人,1994)。根据蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、大肠杆菌
(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、绿脓杆菌(Pseudomonas
aeruginosa)、肠道沙门氏菌(Salmonella enteric)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,)
和肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)的生长抑制实验,结果表明该低分子量壳聚
糖可提供比较高分子的壳聚糖更好的对微生物的生长抑制(Jing等人,2007;Jung等人,
2002;Omura等人,2003)。这是因为较小的分子可比较大的分子移动得更快(Kumar,2005)。

此外,寡壳聚糖可促进植物对细菌、病毒和真菌的超敏反应。被破坏的细胞将迅速
死亡,而蛋白质和植物抗毒素会累积以防止扩散到其他正常细胞。500微克寡壳聚糖/ml的
浓度可在72小时内引起40.6%的烟草细胞死亡(Wang等人,2008)。可以说,与壳聚糖聚合物
相比,寡壳聚糖是更好的激发剂,因为据发现寡壳聚糖可以更好地刺激豆类产生豌豆素
(pisatin)植物抗毒素(Kendra和Hadwiger,1984;Hadwiger等人,1994)。这与另一项对葡萄
叶开展的研究一致,该研究揭露与高分子量的寡壳聚糖(3和10kDa)相比,使用低分子量的
寡壳聚糖(1.5kDa)可激活产生更多的植物抗毒素(Aziz等人,2006)。

因此,本领域对于用于刺激植物产生物质(包括对提升植物的免疫力和植物生长
而言重要的物质)的组合物和方法仍有需要。

发明内容

使用植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂(Nano Vacc-Fertiliceutical
for Plant)来刺激植物(观叶植物、果树和开花植物)产生重要物质。一升的植物功能性经
活化的纳米免疫性肥料药剂含有:

1.壳寡糖0.6重量%;

2.有机酸0.6重量%;

3.氨基酸0.5重量%;和

4.矿物质1.68重量%。

用于刺激植物(观叶植物、果树和开花植物)产生重要物质的植物功能性经活化的
纳米免疫性肥料药剂的制造过程由以下这些步骤组成:

1.使壳寡糖与有机酸反应;

2.产物为纳米生物壳寡糖溶液;

3.使纳米生物壳寡糖溶液与氨基酸反应;

4.产物为纳米氨基生物壳寡糖物质;

5.使纳米氨基生物壳寡糖物质与矿物质螯合;

6.产品为植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂;以及

7.包装产品。

用于刺激植物(观叶植物、果树和开花植物)产生重要物质的植物功能性经活化的
纳米免疫性肥料药剂的使用说明如下:

用于刺激观叶植物产生重要物质的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的
使用说明:

1.制备20ml的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂并与1升水混合。然后混
合在一起并将用于栽种在1rai中的种子/茎浸泡在该溶液中6小时。

2.将浸泡过的种子/茎带至准备好的地块栽种。

3.幼苗生长14天后,制备40ml的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂以与20
升水混合。然后,将所有成分混合在一起以使用喷雾器喷洒在该地块上。该混合物的量为每
1rai 20升。每7-15天喷洒该溶液,直到收获。如果移动了幼苗,则在移动后14天开始再次喷
洒。

用于刺激果树产生重要物质的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的使用
说明:

1.制备40ml的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂并与20升水混合(以用于
喷洒1rai)。然后全部混合在一起并每15至30天喷洒在植物上,直到开花。将80ml的植物功
能性经活化的纳米免疫性肥料药剂与20升水混合(以喷洒1rai)。喷洒后15天,制备40ml的
植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂并与20升水混合(以喷洒1rai)。然后每15至30天
喷洒在植物上,直到开花。

用于刺激开花植物产生重要物质的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的
使用说明:

1.制备40ml的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂并与20升水混合(以喷洒
1rai)。然后混合在一起并将用于栽种在1rai中的种子/茎浸泡在该溶液中6小时。

2.将浸泡过的种子/茎带至所提供的地块栽种。

3.幼苗生长14天(幼苗期)后,制备40ml的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药
剂以与20升水混合。然后,将所有成分混合在一起以使用喷雾器喷洒在该地块上。该混合物
的量为每1rai 20升。每7至15天喷洒该溶液,直到出现花蕾。之后,制备80ml的植物功能性
经活化的纳米免疫性肥料药剂以与20升水混合。将它们混合在一起并且每15至30天使用喷
雾器喷洒在该地块上,直到供收获的开花阶段。然后,将40ml的植物功能性经活化的纳米免
疫性肥料药剂与20升水混合以每15至30天喷洒在该地块上,直到出现花蕾。

检查植物(观叶植物、果树和开花植物)产生重要物质的方法:

1.激活植物(观叶植物、果树和开花植物)产生重要物质

—随机从每一组的1-rai地块收集植物。然后,蒸馏或萃取样品以找出重要物质诸
如类黄酮、酚类、生物碱类等(取决于各植物的植物学特性)的量。之后,比较使用和未使用
植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂之间的数据。

在一个实施方案中,本发明为包含壳寡糖、有机酸、氨基酸和矿物质的组合物。在
一个实施方案中,该有机酸是乳酸。在一个实施方案中,该氨基酸为蛋氨酸。在一个实施方
案中,该矿物质包含氮、磷、钾、硫、锰、锌、钙、硅、亚铁和铁。在一个实施方案中,该壳寡糖具
有可变的分子量和可变的脱乙酰化程度。在一个实施方案中,该壳寡糖的分子量在约2.0×
102至约2.0×103的范围内,且脱乙酰化程度在约84%至约96%的范围内。在另一个实施方
案中,该壳寡糖的分子量在约4.0×104至约4.0×105的范围内,且脱乙酰化程度在约81%至
约92%的范围内。在另一个实施方案中,该壳寡糖的分子量在约3.0×106至约3.0×107的范
围内,且脱乙酰化程度在约75%至约85%的范围内。

在一个实施方案中,本发明为包含壳寡糖、有机酸、氨基酸、矿物质和稀释剂的组
合物。在一个实施方案中,该稀释剂为水。在一个实施方案中,壳寡糖的浓度为约0.6%,有
机酸的浓度为约0.6%,氨基酸的浓度为约0.5%,且矿物质的浓度为约1.68%。在另一个实
施方案中,该浓度按重量计。

在一个实施方案中,本发明为制备根据权利要求1所述的组合物的方法,包括:提
供壳寡糖;添加有机酸;添加氨基酸;和添加矿物质。在一个实施方案中,该有机酸为乳酸。
在另一个实施方案中,该氨基酸为蛋氨酸。在另一个实施方案中,该矿物质包含氮、磷、钾、
硫、锰、锌、钙、硅、亚铁和铁。

在一个实施方案中,本发明为制备稀释的壳寡糖组合物的方法,包括将壳寡糖、有
机酸、氨基酸和矿物质与水混合。

在一个实施方案中,本发明为刺激植物产生物质的方法,包括将包含壳寡糖、有机
酸、氨基酸和矿物质的组合物施用给以下任一者:植物、植物的种子和植物的茎。在一个实
施方案中,该植物为观叶植物。在另一个实施方案中,该植物为果树。在另一个实施方案中,
该植物为开花植物。在另一个实施方案中,该植物为罗勒。在另一个实施方案中,该植物为
辣椒。在另一个实施方案中,该植物为水稻。在一个实施方案中,该物质为类黄酮。在另一个
实施方案中,该物质为酚类物质。在另一个实施方案中,该物质为生物碱。在另一个实施方
案中,该物质为萜类。在另一个实施方案中,该物质为蛋白质。在另一个实施方案中,该物质
为酶。在另一个实施方案中,该物质为类胡萝卜素。在另一个实施方案中,该物质为辣椒素类
物质(capsaicinoid)。在另一个实施方案中,该物质为脂肪酸。在一个实施方案中,该组合
物在已建立植物的栽培之前或之后施用,且该施用包括在一定面积的地带上喷洒一定量的
该组合物,喷洒比率以组合物的立方厘米数(cc)/1rai表示。在一个实施方案中,每三天喷
洒该组合物。在另一个实施方案中,每六天喷洒该组合物。在另一个实施方案中,每十二天
喷洒该组合物。在一个实施方案中,该比率为40cc/1rai。在另一个实施方案中,该比率为
80cc/1rai。在另一个实施方案中,该比率为120cc/1rai。在另一个实施方案中,该比率为
160cc/1rai。

在一个实施方案中,本发明为用于刺激植物产生物质的套装,其包含一定量的含
有壳寡糖、有机酸、氨基酸和矿物质的组合物和使用该组合物的说明手册。

具体实施方式

本发明涉及包含壳寡糖的组合物及其制备和使用方法。本发明的组合物用于刺激
植物产生某些物质。出于多种原因,期望增加这些物质在各种植物中的产生。在一个方面,
增加物质的产生与提升植物的免疫力有关。在另一个实施方案中,增加物质的产生与增进
植物生长有关。在另一个实施方案中,期望增加物质的产生,因为该物质本身是植物生长的
原因。本发明的目的是使用植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂刺激植物(例如观叶
植物、果树和开花植物)产生物质,这通过以下方式进行:准备植物的种子或茎,并将溶液喷
洒在栽培该植物的地块上,以激活较平常更多的物质产生。由该植物产生的这些重要物质
有利于:1)生长—防止由阳光(直接和间接)造成的危险、促进生长、增加出产的色素、抑制
真菌、细菌和病毒生长、产生对昆虫和害虫的毒性等等,2)出产质量—出产的重要物质的
量、抗氧化剂、色素浓度和储存期。使用植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂来促进和
刺激重要物质的产生对植物和承包人具有重要意义。在植物方面,其有助于抵抗疾病、出产
质量(诸如颜色)、延长储存、预防收获后的疾病和出产伤害减少。此外,使用植物功能性经
活化的纳米免疫性肥料药剂可增进植物的特定特性。例如,罗勒的强烈气味是由β-30石竹
烯(β-30Caryophyllene)、β-榄烯(β-elemene)、metyleugenol和甲基胡椒酚(methyl
chavicol)造成。由罗勒产生的几种类型的物质诸如维生素C、酚类和类黄酮在作为抗氧化
剂上发挥着重要作用。此外,从罗勒提取的甲醇可用作抗氧化剂,并包括超氧化物阴离子、
羟基自由基、超氧化物自由基和铁捕获(Hakkim等人,2007)。

定义

如本文所使用的下列各术语具有本章节中与其相关的含义。除非另外定义,否则
本文所使用的所有技术和科学术语通常具有本发明所属领域中普通技术人员所通常理解
的相同含义。一般而言,本文所使用的命名法以及农业、化学和配制科学中的实验室和田间
程序为本领域众所周知且常用的。

本文所使用的词语“一个(种)”是指一个(种)或多于一个(种)(即,至少一个(种))
该词语的语法对象。例如,“要素”意指一个要素或多于一个要素。

当指可测量的值(诸如量、时间长度等)时,本文所使用的“约”意在包含从指定值
±20%、±10%、±5%、±1%或±0.1%的变化,因为这些变化在执行所公开的方法时是适
当的。

除非明确指示仅指替代项或这些替代项相互排斥,否则本文所使用的术语“或”意
指“和/或”,虽然本公开支持仅指替代项和“和/或”的定义。

如本文所使用的词语“包含”(和包含的任何形式,诸如“含有“)、“具有”(和具有的
任何形式,诸如“带有”)或“包括”(和包括的任何形式,诸如“囊括”)为包含在内的或开放式
的且不排除另外的、未列举的要素或方法步骤。

本文所使用的术语“免疫性肥料药剂”是指这样一种组合物,其增加植物产生物
质,并因此赋予植物增加的免疫力和/或增加的生长特性,并使植物免受自然压力条件的影
响,包括但不限于受伤和病原感染,诸如病毒、细菌、真菌或昆虫,但也包括热、寒冷或干旱。
免疫力一般可指植物对环境因素的抵抗力,无论是有生命的环境因素(例如各种害虫、微生
物等)或无生命的环境因素(例如高温或低温、高湿度或低湿度等)。增加的生长特性一般可
指该植物的任何物理属性,例如增加刺激物质本身的产生、增加其他物质的产生或增加植
物各部分(叶、果实、根、茎、种子等)的产生。

如本文所使用的术语“寡糖”是指糖化合物,其分子由连续的少量或具体地讲2至
10个串联的单糖单元形成。

本文所使用的术语“分子量”或者“分子质量”是指分子的质量,其由各构成原子的
质量乘以分子中该种原子的数目计算出。当用于聚合物质(诸如糖或寡糖)的背景下时,其
中该物质包含具有可变长度的分子,“分子量”可既指分子量的范围或又指平均分子量。

本文所使用的术语“脱乙酰化”是指从分子中的乙酰氨基部分移除乙酰基,但使氨
基基团保留在原处。

本文所使用的术语“DD”或“脱乙酰化程度”是指消除或减少乙酰基基团(CH3CO)
(其指示甲壳素和壳聚糖)的过程。如果该数值低,则甲壳素的量高。另一方面,如果该数值
高,则壳聚糖的量高。

本文所使用的术语“有机酸”是指具有酸性性质的有机化合物,其实例包括但不限
于羧酸和磺酸。

本文所使用的术语“氨基酸”是指同时包含至少一个羧基基团和至少一个氨基基
团的有机化合物。

本文所使用的术语“纳米氨基生物壳寡糖”是指包含氨基酸、壳聚糖和糖的化合
物。通过生物过程,可提供达到纳米级的较小分子。

本文所使用的术语“矿物质”是指来自有壳虾(shell shime)、有壳蟹、鱼和腐殖质
的矿物质提取物。通过生物技术方法改变结构,直到化合物的改变在植物中具有独特的递
送机制,类似于药物在人体中的递送。

本文所使用的术语“rai”是指相当于1600平方米或0.3954英亩的面积单位。

本文所使用的术语“kD”意指千道尔顿,且指统一原子质量单位或道尔顿(符号:
Da),其为用于指示原子或分子尺度的质量(原子质量)的标准单位。一个统一原子质量单位
约为一个单一质子或中子的质量且相当于1g/mol。

本文所使用的术语“增加”、“刺激”和这些术语的变型包括任何可测量的增加。

“疾病”是这样一种植物健康状态,其中该植物无法保持体内平衡,并且其中如果
该疾病没有改善则植物的健康将持续恶化。相反地,植物中的“病症”是这样一种健康状态,
其中该植物能够保持体内平衡,但其中该植物的健康状态较不存在该病症时不利。如果不
治疗,则病症不一定会使植物的健康状态进一步变差。本文中,疾病和病症可互换使用。

本文所使用的“治疗疾病或病症”意指降低植物经历该疾病或病症的症状的频率。
如果该疾病或病症的症状的严重性降低、患者经历的这种症状的频率降低或这两种情况,
则该疾病或病症“缓解”。

化合物的“有效量”或“治疗有效量”是足以为施用该化合物的受试者(诸如植物)
提供有益效果的化合物的量。递送载剂的“有效量”是足以有效地结合或递送化合物的量。

本文所使用的短语“水性溶剂”是指包含至少水,能够溶解、悬浮或者说是分散壳
寡糖的任何和所有溶剂体系。

本文所使用的术语“局部”是指将本发明的组合物施用到植物的任何暴露区域或
植物的种子上。将本发明的组合物施加到植物的根、茎、叶或果实上均为局部施用的实例。

本文所使用的短语“有效量”是指足以或有效预防或治疗(延迟或预防发作、防止
进展、抑制、减少或逆转)与植物相关的疾病或病况(包括刺激植物产生物质和刺激植物的
免疫力)的量。

本文所使用的术语“另外的成分”包括但不限于以下一种或多种:赋形剂;表面活
性剂;分散剂;惰性稀释剂;制粒剂和崩解剂;结合剂;润滑剂;甜味剂;调味剂;着色剂;防腐
剂;生理上可降解的组合物,诸如明胶;水性载剂和溶剂;油性载剂和溶剂;悬浮剂;分散剂
或润湿剂;乳化剂;缓和剂(demulcent);缓冲剂;盐;增稠剂;填充剂;乳化剂;抗氧化剂;抗
生素;抗真菌剂;稳定剂;和农业上可接受的聚合性或疏水性物质。

本文所使用的“说明性材料”包括可用来传代本发明的组合物于其指定用途的用
处的出版物、记录、图表或任何其他表现媒体。本发明的套装的说明性材料可例如被固定在
含有该组合物的容器上或与含有该组合物的容器一起运送。或者,该说明性材料可与容器
分开运送,但希望接收者能配合使用该说明性材料和组合物。

在本公开的全文中,本发明的各方面可以范围格式呈现。应当理解的是,以范围格
式给出的描述仅是为了方便和简洁的目的,而不应被解释为硬性限制本发明的范围。因此,
对范围的描述应被视为已具体公开了所有可能的子范围和在该范围内的各个数值。例如,
对诸如1至6的范围的描述应被视为已具体公开了诸如1至3、1至4、1至5、2至4、2至6、3至6等
子范围,以及该范围内的各个数值和分数,例如1、2、3、4、5、5.5和6。不论范围的广度如何,
这均适用。

描述

在一个方面,本发明涉及植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂。本发明部分
地涉及以下出人意料的发现:该功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂可增加植物产生重要
物质,例如包括但不限于与植物免疫力有关的物质。

在一个实施方案中,植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂包含两种类型的物
质:1)刺激剂或激发剂,和2)前体。这两部分为可供植物快速吸收的纳米粒子。其激活作用
类似于加强该植物的免疫力的疫苗。添加前体以立即完成植物过程,而不用等待光合作用。
此外,其有助于促进所述过程按预期发生。

本发明的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂可通过刺激植物产生免疫力
和若干物质的过程来促进重要物质的产生。

本发明的组合物

在一个方面,本发明涉及包含壳寡糖的组合物。在一个实施方案中,该壳寡糖衍生
自壳聚糖。壳聚糖是通过甲壳素脱乙酰化而产生的多糖,甲壳素为含有乙酰化氨基基团的
天然多糖。壳聚糖包含乙酰化和脱乙酰化氨基基团。该比率可通过核磁共振(NMR)光谱来测
量且以%脱乙酰化程度(%DD)表示。市售壳聚糖中的DD在约60%至约100%的范围内。壳聚
糖经加工成具有可变的长度和质量的大分子的混合物,称为壳寡糖。在本发明的一个实施
方案中,壳寡糖的分子量在约2.0×102至约2.0×103的范围内,且脱乙酰化程度在约84%至
约96%的范围内。在另一个实施方案中,壳寡糖的分子量在约4.0×104至约4.0×105的范围
内,且脱乙酰化程度在约81%至约92%的范围内。在另一个实施方案中,壳寡糖的分子量在
约3.0×106至约3.0×107的范围内,且脱乙酰化程度在约75%至约85%的范围内。

甲壳质和壳聚糖为真菌的细胞壁以及昆虫和甲壳类动物的外骨骼的主要组分。甲
壳质化合物包括甲壳素(IUPAC:N-[5-[[3-乙酰氨基-4,5-二羟基-6-(羟甲基)氧杂环己-2
基]甲氧基甲基-1]-2-[[5-乙酰氨基-4,6-二羟基-2-(羟甲基)氧杂环己-3-基]甲氧基甲
基]-4-羟基-6-(羟甲基)氧杂环己-3-基]乙酰胺)和壳聚糖(IUPAC:5-氨基-6-[5-氨基-6-
[5-氨基-4,6-二羟基-2(羟甲基)氧杂环己-3-基]氧基-4-羟基-2-(羟甲基)氧杂环己-3-
基]氧基-2(羟甲基)氧杂环己-3,4-二醇)。这些化合物可商购获得,例如从Sigma-Aldrich
商购获得,或从昆虫、甲壳类动物壳或真菌细胞壁制备。用于制备甲壳素和壳聚糖的方法为
本领域已知的且已例如在美国专利No.4,536,207(从甲壳类动物的壳制备)、
Pochanavanich等人,Lett.Appl.Microbiol.35:17-(2002)(从真菌细胞壁制备)和美国专
利No.5,965,545(从蟹壳和水解商品壳聚糖制备)中进行了描述。可获得的脱乙酰化的甲壳
素和壳聚糖的脱乙酰化程度在低于约35%至高于约90%的范围内,且涵盖宽泛的分子量,
例如小于15kD的低分子量壳聚糖低聚物和0.5至2kD的甲壳素低聚物;分子量为约150kD的
“实用级”壳聚糖;和高达约700kD的高分子量壳聚糖。

在另一方面,本发明涉及包含壳寡糖和有机酸的组合物。有机酸为具有酸性性质
的有机化合物,比如羧酸或磺酸。本发明的实施方案例如包括诸如甲酸、醋酸、丙酸、丁酸
(butyric acid或butanoic acid)、戊酸(valeric acid或pentanoic acid)、己酸(caproic
acid或hexanoic acid)、草酸、乳酸、葡糖酸、戊二酸、谷氨酸、富马酸、柠檬酸、苹果酸、马来
酸、苯甲酸的酸,以及它们的混合物。在一些实施方案中,该有机酸具有6个或更少的碳原
子,而在其他实施方案中,该有机酸具有4个或更少的碳原子。在一个实施方案中,该有机酸
为乳酸。

在另一方面,本发明涉及包含氨基酸的组合物。氨基酸为同时包含羧基和氨基基
团的有机化合物。本发明的实施方案例如包括诸如组氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、精氨酸、亮氨
酸、天冬酰胺、赖氨酸、天冬氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺、
色氨酸、甘氨酸、缬氨酸、吡咯赖氨酸、脯氨酸、硒代半胱氨酸、丝氨酸和酪氨酸的氨基酸。在
一个实施方案中,该氨基酸为蛋氨酸。

在另一方面,本发明涉及包含矿物质的组合物。在一个实施方案中,该矿物质为矿
物质提取物。在另一个实施方案中,该矿物质提取物从有壳虾、有壳蟹、鱼和腐殖质获得。在
另一个实施方案中,该矿物质选自氮、磷、钾、硫、锰、锌、钙、硅和亚铁或铁。在另一个实施方
案中,该矿物质包含氮、磷、钾、硫、锰、锌、钙、硅和亚铁或铁。

在一个方面,本发明涉及植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂,其为包含壳
寡糖、有机酸、氨基酸和矿物质的浓缩组合物。在一个实施方案中,该组合物配制成纳米粒
子。在另一个实施方案中,该组合物以稀释剂稀释以产生即用型植物功能性经活化的纳米
免疫性肥料药剂的制剂。在一个实施方案中,该稀释剂为包含水和至少一种可与水混溶的
其他溶剂的水性稀释剂,该可与水混溶的其他溶剂的实例包括但不限于醇和二醇。在一个
实施方案中,该稀释剂为水。在一个实施方案中,在该即用型制剂中的壳寡糖的浓度为约
0.6重量%。在另一个实施方案中,在该即用型制剂中的有机酸的浓度为约0.6重量%。在另
一个实施方案中,在该即用型制剂中的氨基酸的浓度为约0.5重量%。在另一个实施方案
中,在该即用型制剂中的矿物质的浓度为约1.68重量%。

在另一方面,该植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂组合物也可包含具有杀
真菌、杀细菌或杀病毒活性的另外的活性剂或适合激活该植物本身的防御系统的其他化合
物。此类化合物为本领域众所周知的且该第一类型的化合物的实例包括但不限于杀虫剂、
杀真菌剂、杀菌剂、杀线虫剂、除草剂、杀软体动物剂,而该第二类型的化合物的实例包括但
不限于氯代烟酰(chloronicotinyl)或苯并噻二唑衍生物(US 2009/0018019或美国专利
No.4,931,581)或若干这些活性剂的混合物。适合与本发明的植物保护组合物组合的常用
活性剂的另外实例包括但不限于戊唑醇(tebuconazol)、咯菌腈(fludioxonil)、环戊唑菌
(metconazol)、甲基硫菌灵(thiophanat-methyl)、氟嘧菌酯(fluoxastrobin)、丙硫菌唑
(prothioconazol)、咪鲜胺(prochloraz)、氟喹唑(fluquinconazol)、螺环菌胺
(spiroxamine)、苯醚甲环唑(difenoconazol)、氟环唑(epoxiconazol)、丙硫菌唑
(prothioconazol)、灭菌唑(triticonazol)、醚菌胺(dimoxystrobin)、乐果(dimethoat)、λ
氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)、噻虫嗪(thiamethoxam)、甲基嘧啶磷(pirimiphos-
methyl)、氰氟虫胺(metaflumizone)、噻虫啉(thiacloprid)、β-氟氯氰菊酯(beta-
cyfluthrin)、吡虫啉(imidacloprid)、多杀菌素(spinosad)、氯虫苯甲酰胺
(chlorantraniliprole)、噻虫胺(clothianidin)、溴氰菊酯(deltamethrin)、除虫脲
(diflubenzuron)、螺螨酯(spirodiclofen)、α-氯氰菊酯(alpha-cypermethrin)、ζ-氯氰菊
酯(zeta-cypermethrin)、啶酰菌胺(boscalid)、醚菌胺(dimoxystrobin)、环戊唑菌
(metconazol)、助壮素(mepiquat)或三唑醇(triadimenol)。

在一个实施方案中,本发明的组合物为溶液。在另一个实施方案中,本发明的组合
物为乳液。在另一个实施方案中,本发明的组合物可配制成脂质体和微滴。

如本领域的技术人员将理解的是,乳液由两种或更多种不混溶的液体的混合物组
成,即,含有多个相。乳液与溶液不同,溶液含有一个或基本上仅一个相。乳液中的液体之一
为分散相且分散在另一相中,所述另一相为连续相。在一种类型的乳液中,连续液相围绕水
滴,即油包水乳液。在另一种类型的乳液中,油分散在连续的水相内,即水包油乳液。如本领
域的技术人员将理解的是,短语“油包水”和“水包油”仅用于举例说明目的,因为乳液通常
可由任何两种不混溶的液体形成,包括两种非水性的不混溶液体。乳化为制备乳液的过程。
在一个实施方案中,本发明的组合物为乳液(诸如油包水或水包油乳液,包括但不限于脂质
乳液,诸如大豆油乳液)的组分。例如,包含溶解在溶液(其包含水性溶剂)中的壳寡糖的组
合物也可包含脂质乳液或水包油乳液。

在某些实施方案中,本发明的乳液可具有脂质组分。在多种实施方案中,该脂质组
分的量的范围可占乳液的约1%至99%、约5%至约75%、约10%至约60%、约20%至约50%
或约30%至约40%(体积/体积)。在多种实施方案中,该乳液的脂质组分可为大豆油、长链
甘油三酯、蓖麻油、玉米油、棉籽油、橄榄油、花生油、薄荷油、红花油、芝麻油、大豆油、氢化
大豆油、氢化植物油、中链甘油三酯椰子油、棕榈籽油和衍生物、中链(C8/C10)甘油单酯和
甘油二酯、d-α-生育酚、大豆脂肪酸或它们的组合。

在某些实施方案中,本发明的乳液包含壳寡糖和水性溶剂,且还可以包含乳化剂。
乳化剂为稳定乳液的物质。乳化剂(emulsifier)也可称为乳化剂(emulgent)。乳化剂也可
以为表面活性剂。在多种实施方案中,乳化剂可为卵磷脂、纯化的卵磷脂、聚氧乙烯35蓖麻
油(Cremophor EL)、聚氧乙烯40氢化蓖麻油(Cremophor RH 40)、聚氧乙烯60氢化蓖麻油
(Cremophor RH 60)、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、琥珀酸d-α-生育酚聚乙二醇1000酯、
Solutol HS-15、丙二醇或它们的组合。各种浓度的乳化剂可用于本发明。例如,本发明的包
含壳寡糖的组合物可包含约0.1%-99%、0.1%-60%、5%-50%、10%-40%、5%-25%、
10%-30%、10%-25%、25%-50%、10%-75%、25%-75%、10%-65%、25%-65%、10%-
60%、25%-60%、0.1%、1%、5%、10%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、
60%、65%、70%、75%、80%或其中可推导出的任何范围的乳化剂。

在其他实施方案中,本发明的乳液具有全氟化碳组分。在多种实施方案中,该全氟
化碳组分的量的范围可占乳液的约0.1%至99%、约5%至约75%、约10%至约60%、约20%
至约50%、或约30%至约40%(体积/体积)。在多种实施方案中,由于全氟化碳的有限毒性,
其可提供额外的优点。在一个实施方案中,本发明的乳液包含壳寡糖、全氟化碳和乳化剂。

在多种实施方案中,本发明的组合物可为脂质体悬浮液的组分。脂质体(例如多
层、单层和/或多囊脂质体)是一种微观、球形的流体填充的结构,其壁包含一层或多层在物
理和/或化学性质上类似于构成哺乳动物细胞膜的那些的磷脂和分子。通过非限制性实例
说明,脂质体可由多种天然膜组分形成,诸如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱,比如美国专利
No.5,120,561和6,007,838(其各自全文以引用方式并入本文)中所描述的,或由纯表面活
性剂组分比如DOPE(二油酰磷脂酰-乙醇胺,dioleoylphosphatidyl-ethanolamine)形成。
脂质体可被配制成包含多种作为有效载荷的物质,无论是在水性隔室中或在脂质隔室中,
或在这两种隔室中。一般而言,亲脂性活性物质溶解在双层中,两亲性物质变成与磷脂膜相
关联,而亲水性物质则以溶液出现在封闭的水性空间中,比如Artmann等人,1990,Drug
Res.40(Ⅱ)12:1363-1365(其全文以引用方式并入本文)所述。

本发明的脂质体组合物可根据本文所提出的方法和详细描述包含任何范围的脂
质体和壳寡糖组分。通过非限制性实例说明,本发明的组合物的脂质体组分可包括约0.1%
至约99.9%的脂质体组分,或更优选地,约0.1%至约50%的脂质体组分,甚至更优选地,约
0.1%至约30%的脂质体组分。在多种实施方案中,本发明的脂质体包含胆固醇、硬脂胺、磷
脂酰胆碱、二油酰磷脂酰乙醇胺或它们的组合。

在多种实施方案中,本发明的组合物也可以为微滴的组分。本发明的微滴由直径
在约200埃至约10,000埃的范围内的有机液相的球体组成,所述球体被合适的脂质的单层
所覆盖。优选的脂质为磷脂,其为生物膜的天然成分,并因此为生物相容的。可用于制备微
滴的化合物包括磷脂酰胆碱(卵磷脂)、鞘磷脂、磷脂酸、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、双磷脂
酰甘油和磷脂酰甘油。微滴可通过超声波处理(包括探头式或水浴式超声波处理)、均质化、
微流化或通过高强度机械搅拌来制备。制备本发明的微滴的优选方法是使用探头超声波仪
通过超声波处理来进行。或者,可在水浴超声波仪中制备微滴。

在多种实施方案中,本发明的组合物也可为液体悬浮液的组分。液体悬浮液可使
用常规方法制备以得到在水性或油性载剂中的活性成分的悬浮液。水性载剂包括例如水和
等渗盐水。油性载剂包括例如杏仁油、油酯、乙醇、植物油,诸如花生油、橄榄油、芝麻油或椰
子油、分馏的植物油和矿物油,诸如液体石蜡。液体悬浮液还可包含一种或多种另外的成
分,包括但不限于悬浮剂、分散剂或润湿剂、乳化剂、缓和剂、防腐剂、缓冲剂、盐、调味剂、着
色剂和甜味剂。油性悬浮液还可包含增稠剂。已知的悬浮剂包括但不限于山梨糖醇糖浆、氢
化食用脂肪、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶、阿拉伯胶和纤维素衍生物,诸如羧甲基纤维
素钠、甲基纤维素和羟丙基甲基纤维素。已知的分散剂或润湿剂包括但不限于天然存在的
磷脂,诸如卵磷脂、烯化氧与脂肪酸、与长链脂族醇、与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯、或与
衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(例如分别为聚氧乙烯硬脂酸酯、十七乙烯氧
基鲸蜡醇(heptadecaethyleneoxycetanol)、聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯
(polyoxyethylene sorbitol monooleate)和聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯
(polyoxyethylene sorbitan monooleate))。已知的乳化剂包括但不限于卵磷脂和阿拉伯
胶。已知的防腐剂包括但不限于对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正
丙酯、抗坏血酸和山梨酸。已知的甜味剂包括例如甘油、丙二醇、山梨糖醇、蔗糖和糖精。已
知的用于油性悬浮液的增稠剂包括例如蜂蜡、硬石蜡和鲸蜡醇。

本发明的方法

在一个方面,本发明涉及制备植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的方法。
在一个实施方案中,该方法包括提供壳寡糖的步骤。在另一个实施方案中,该方法包括添加
有机酸的步骤。在另一个实施方案中,该壳寡糖与有机酸反应。在一个实施方案中,将有机
酸加入壳寡糖的产物为纳米生物壳寡糖溶液。在一个实施方案中,该方法包括将氨基酸加
入纳米生物壳寡糖溶液的步骤。在另一个实施方案中,纳米生物壳寡糖溶液与氨基酸发生
反应。在一个实施方案中,将氨基酸加入纳米生物壳寡糖溶液的产物为纳米氨基生物壳寡
糖物质。在一个实施方案中,该方法包括将矿物质加入纳米氨基生物壳寡糖物质的步骤。在
另一个实施方案中,该矿物质为螯合矿物质。

在一个方面,本发明涉及以稀释剂稀释该植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药
剂,以便制备即用型制剂的方法。在一个实施方案中,该稀释剂为水。在一个实施方案中,植
物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂与水的比率可根据特定的最终用途的范围来确定。
例如,稀释可根据所需的即用型制剂的最终体积来确定。在一个实施方案中,可将20立方厘
米(cc)的功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂添加到1升水中。在其他实施方案中,可将
40cc、80cc、120cc或160cc添加到1升水中。在另一个实施方案中,稀释可根据需要喷洒该即
用型制剂的土地表面积和希望施加到该相同面积的功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂
的量来确定。在一个实施方案中,以足够的水稀释40cc的功能性经活化的纳米免疫性肥料
药剂以喷洒1rai的土地(1rai=1600平方米)。在另一个实施方案中,以足够的水稀释80cc
的功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂以喷洒1rai的土地。在另一个实施方案中,以足够
的水稀释120cc的功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂以喷洒1rai的土地。在另一个实施
方案中,以足够的水稀释160cc的功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂以喷洒1rai的土地。
在一个实施方案中,制备用于喷洒1rai的土地的即用型制剂所需的水为20升。

在一个方面,本发明涉及刺激植物产生物质的方法。在一个实施方案中,该植物的
实例包括但不限于观叶植物、果树和开花植物。在一个实施方案中,该植物为辣椒。在另一
个实施方案中,该植物为罗勒。起源于植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的罗勒与
原始的罗勒不同,因为其味道强烈、颜色较深且具有更大量的精油。在另一个实施方案中,
该植物为水稻。在另一个实施方案中,该植物选自单子叶植物和双子叶植物。术语“单子叶
植物”是指特征在于具有一个种子叶(子叶)的一组植物,而术语“双子叶植物”是指特征在
于具有二个胚叶的第二组植物。单子叶植物的非限制性实例包括小麦、燕麦、小米、大麦、黑
麦、玉米、水稻、高粱、小黑麦、斯佩尔特小麦(spelt)和甘蔗,而双子叶植物的非限制性实例
包括拟南芥属(Arabidopsis)、纤维植物(棉花、亚麻、大麻、黄麻)、荞麦、葡萄树、茶、啤酒
花、开心果、水芹、亚麻籽、油树(油菜、芥菜、罂粟、橄榄、向日葵、椰子、蓖麻油植物、可可豆、
花生)、蔬菜(例如菠菜、生菜、芦笋、卷心菜、胡萝卜、洋葱、西红柿、马铃薯、辣椒、芸苔)、茄
子、玉米、烟草、万寿菊、金盏菊、黄瓜植物(诸如黄瓜、食用葫芦、甜瓜)、无核小水果(例如苹
果、梨、李子、桃子、杏仁、樱桃、草莓、覆盆子和黑莓)、柑橘类水果(诸如橙、柠檬、葡萄柚、柑
橘)、南瓜/小果南瓜、西葫芦、甜菜(例如糖用甜菜和饲料甜菜)、核果(例如咖啡、大枣、芒
果、棕榈树,比如椰枣)、樟科(例如鳄梨、肉桂、樟脑)、观赏植物(例如花、灌木、落叶乔木和
针叶树)和豆科植物(诸如豆类、小扁豆、豌豆、大豆)。根据本发明,该植物可为传统的作物
植物或为通过常规方法培育、诱变或通过重组DNA技术获得的具有新特性的植物品种。因
此,该植物可包括转基因植物和杂交植物。

在一个实施方案中,其产生经过刺激的物质为重要物质,其实例包括但不限于类
黄酮、酚类物质、生物碱、萜类、蛋白质和酶。在一个实施方案中,该物质与植物免疫力有关。
在另一个实施方案中,增加该物质的产生增强植物的免疫力。在另一个实施方案中,该物质
为农业目的所需的物质,比如但不限于:该物质、植物本身或这两者适合且适宜供人食用或
使用。在一个实施方案中,该物质为倍半萜烯。在另一个实施方案中,该物质为类胡萝卜素。
在另一个实施方案中,该物质为辣椒素类物质。在一个实施方案中,该物质选自β-30石竹
烯、β-榄烯、metyleugenol、甲基胡椒酚和辣椒素。在一个实施方案中,该物质为脂肪酸。在
另一个实施方案中,该物质为挥发性脂肪酸。

在一个实施方案中,该方法包括将本发明的组合物施用至植物的种子或植物本
身,比如但不限于植物的根、茎、叶、果实等。在一个实施方案中,刺激植物产生物质的方法
在已建立植物的栽培之前实行。在另一个实施方案中,刺激植物产生物质的方法在已建立
植物的栽培之后实行。在一个实施方案中,将本发明的组合物喷洒在一定面积的包含该植
物的栽培的地带上。在一个实施方案中,每三天喷洒该组合物。在另一个实施方案中,每六
天喷洒该组合物。在另一个实施方案中,每十二天喷洒该组合物。在一个实施方案中,该组
合物以40cc/1rai的比率喷洒。在另一个实施方案中,该组合物以80cc/1rai的比率喷洒。在
另一个实施方案中,该组合物以120cc/1rai的比率喷洒。在另一个实施方案中,该组合物以
160cc/1rai的比率喷洒。

在一个实施方案中,植物可通过本领域已知的任何方法与本发明的组合物接触。
在另一个实施方案中,植物通过选自以下的任一种方法接触:喷洒、散布、倾倒、涂覆和撒
粉。在一个实施方案中,可提供包含将液体形式的本发明组合物分散在气体或蒸气中从而
形成该组合物的小液滴的喷雾剂。然后,该喷雾剂使得能够将组合物分布在一定表面积上,
比如单株植物或包含多株植物的田间。将组合物分散在气体或蒸气中也称为雾化。液体状
态的组合物也可被散布在植物或田间上或可被倾倒在植物或田间上。此外,可将植物的部
分或整株植物涂上本发明的组合物,例如通过将植物浸入组合物中或用组合物刷涂植物或
其部分。或者,或此外,可通过撒粉施加该组合物,即,(空中)施加粉末形式的组合物。此外,
也可将该组合物引入植物生长的土壤中,例如以液体、颗粒、小丸或能够随着时间崩解以便
释放本发明的组合物的棒的形式引入。上述施加方式导致施加于叶面、施加于茎或芽、在施
加于土壤的情况下施加于根(和通过根摄取)或施加于种子。本领域的技术人员将认识到,
特定的施加方法必须根据相应的环境和治疗目标进行选择。

在一个实施方案中,施用的量为有效刺激植物产生物质(包括但不限于有效增加
植物免疫力)的量。在一个实施方案中,该治疗方法包括向植物递送稀释的水性壳寡糖组合
物。在一个实施方案中,当局部施用给植物时,该稀释的壳寡糖组合物具有在约0.1重量%
至约1.0重量%范围内的壳寡糖浓度。在另一个实施方案中,该稀释的壳寡糖组合物的壳寡
糖浓度为约0.1重量%。在另一个实施方案中,该稀释的壳寡糖组合物的壳寡糖浓度为约
0.2重量%。在另一个实施方案中,该稀释的壳寡糖组合物的壳寡糖浓度为约0.3重量%。在
另一个实施方案中,该稀释的壳寡糖组合物的壳寡糖浓度为约0.4重量%。在另一个实施方
案中,该稀释的壳寡糖组合物的壳寡糖浓度为约0.5重量%。在另一个实施方案中,该稀释
的壳寡糖组合物的壳寡糖浓度为约0.6重量%。在另一个实施方案中,该稀释的壳寡糖组合
物的壳寡糖浓度为约0.7重量%。在另一个实施方案中,该稀释的壳寡糖组合物的壳寡糖浓
度为约0.8重量%。在另一个实施方案中,该稀释的壳寡糖组合物的壳寡糖浓度为约0.9重
量%。在另一个实施方案中,该稀释的壳寡糖组合物的壳寡糖浓度为约1.0重量%。

欲施用的本发明组合物的量取决于特定的植物和/或特定的物质。例如,该剂量将
取决于植物的类型。例如,如果该植物为观叶植物、果树或开花植物,则该剂量可以不同。该
剂量也可取决于施用该组合物的植物面积。例如,如果该组合物施用至植物的种子,则该剂
量可以不同,并且如果该组合物施用至植物的根、茎、叶或果实,则该剂量也可不同。该剂量
也可取决于组合物中的壳寡糖的浓度或壳寡糖的MW和DD。例如,如果壳寡糖的分子量在2.0
×102至2.0×103的范围内且脱乙酰化程度在84%至96%的范围内,或者壳寡糖的分子量在
4.0×104至4.0×105的范围内且脱乙酰化程度在81%至92%的范围内,或者壳寡糖的分子
量在3.0×106至3.0×107的范围内且脱乙酰化程度在75%至85%的范围内,则该剂量可以
不同。

本发明的方法可包括单独施用本发明的制剂,或与其他调节或增强植物免疫力、
刺激植物产生物质或者说是有利地影响植物的农业生产的其他作用剂组合。例如,在一个
实施方案中,构成本发明的制剂的作用剂可与一种或多种肥料组合施用。在另一个实施方
案中,构成本发明的制剂的作用剂可与下列一种或多种作用剂组合施用:杀虫剂、除草剂、
杀真菌剂、杀昆虫剂、昆虫生长调节剂、杀线虫剂、杀白蚁剂(termiticide)、杀软体动物剂、
杀鱼剂(piscicide)、杀鸟剂、杀鼠剂、毒杀药(predacide)、杀菌剂、昆虫驱逐剂、动物驱逐
剂、抗微生物剂、消毒剂或抗微生物剂和消毒杀菌剂。如本文所使用,当两种作用剂同时施
用或以使所述作用剂同时作用的方式独立施用时,这两种药剂被说成是组合施用。

本发明的套装

本发明还涉及用于刺激植物产生物质的套装。在一个实施方案中,该套装包括一
定量的本发明的组合物和使用说明手册。本发明的组合物可连同说明性材料提供给负责将
组合物施用给植物的专业人员。在一个实施方案中,该说明性材料为套装的一部分。该说明
性材料包括可用于传达在套装中的组合物和/或化合物在实行本发明时的用处的出版物、
记录、图表或任何其他表现媒体。该套装的说明性材料可例如固定在含有用于实行本发明
的化合物和/或组合物的容器上或与含有该化合物和/或组合物的容器一起运送。或者,该
说明性材料可与容器分开运送,但希望接收者配合使用该说明性材料和化合物。该说明性
材料的提供可例如通过实体提供传达该套装的用处的出版物或其他表现媒体来实现,或者
可通过电子传输,例如通过计算机,诸如通过电子邮件或从网站下载来实现。

可以想到的是,本说明书中所讨论的任何实施方案可关于本发明的任何方法或组
合物实施,反之亦然。此外,本发明的组合物可用来实现本发明的方法。

本发明的其他目的、特征和优点将从本文的详细描述中变得显而易见。然而,应当
理解的是,该详细描述和具体实例尽管指出了本发明的具体实施方案,但其仅通过举例说
明的方式给出,因为在本发明的精神和范围内的各种变化和修改将通过该详细描述对本领
域的技术人员变得显而易见。

实验性实施例

本发明通过参考下列实验性实施例进一步详细说明。除非另外规定,否则这些实
施例仅用于举例说明而无意进行限制。因此,本发明不应以任何方式被解释为限于下列实
施例,而应解释为涵盖任何和所有由于本文所提供的教导而变得显而易见的变型。

材料和方法

准备种植用的土壤后,将该面积划分成13组且各组由1rai组成。然后,将种子或茎
浸泡在与1升水混合的20ml植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂中6小时。随后,将该
种子或茎种植在这13组的地块中并在幼苗生长14天后喷洒植物功能性经活化的纳米免疫
性肥料药剂。另外的细节提供如下。

第1组:对照组(未喷洒)。

第2组:每3天通过使用每1rai 40cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免疫
性肥料药剂。

第3组:每3天通过使用每1rai 80cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免疫
性肥料药剂。

第4组:每3天通过使用每1rai 120cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免疫
性肥料药剂。

第5组:每3天通过使用每1rai 160cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免疫
性肥料药剂。

第6组:每6天通过使用每1rai 40cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免疫
性肥料药剂。

第7组:每6天通过使用每1rai 80cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免疫
性肥料药剂。

第8组:每6天通过使用每1rai 120cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免疫
性肥料药剂。

第9组:每6天通过使用每1rai 160cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免疫
性肥料药剂。

第10组:每12天通过使用每1rai 40cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免
疫性肥料药剂。

第11组:每12天通过使用每1rai 80cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免
疫性肥料药剂。

第12组:每12天通过使用每1rai 120cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免
疫性肥料药剂。

第13组:每12天通过使用每1rai 160cc的比率来喷洒植物功能性经活化的纳米免
疫性肥料药剂。

然后收集数据并如下收获植物。

植物(观叶植物、果树和开花植物)产生重要物质的检查方法:

随机从各组的1-rai地块收集植物。然后,将样品蒸馏或萃取以找出重要物质诸如
类黄酮、酚类、生物碱等(取决于各植物的植物学特性)的量。之后,比较使用和不使用植物
功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂之间的数据。

方差分析:使用99%可靠性水平下的邓肯新多范围检验(Duncan's new multiple
range test,DMRT)和SPSS,关于完全随机设计(randomized completely design,RCD)进行
ANOVA以比较各组平均值的差异。

用于刺激观叶植物产生重要物质的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的
使用说明:

1.制备20ml的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂并与1升水混合。然后,混
合在一起并将欲栽种在1rai中的种子/茎浸泡在该溶液中6小时。

2.将浸泡好的种子/茎栽种在准备好的地块中。

3.当幼苗生长14天后,制备40ml的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂以与
20升水混合。然后,将所有成分混合在一起并使用喷雾器喷洒在该地块上。该混合物的量为
每1rai 20升。每7至15天喷洒该溶液,直到收获。如果移动了幼苗,则在移动后14天开始再
次喷洒。

用于刺激果树产生重要物质的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的使用
说明:

1.制备40ml的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂并与20升水混合(以喷洒
1rai)。然后,将所有成分混合在一起并每15至30天喷洒在植物上,直到开花。将80ml的植物
功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂与20升水混合(以喷洒1rai)。喷洒15天后,制备40ml
的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂并与20升水混合(以喷洒1rai)。然后,每15至
30天喷洒在植物上,直到开花。

用于刺激开花植物产生重要物质的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的
使用说明:

1.制备40ml的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂并与20升水混合(以喷洒
1rai)。然后,混合在一起并将欲栽种在1rai中的种子/茎浸泡在该溶液中6小时。

2.将浸泡好的种子/茎栽种在所提供的地块中。

3.在幼苗生长14天(幼苗期)后,制备40ml的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料
药剂以与20升水混合。然后,将所有成分混合在一起以使用喷雾器喷洒在该地块上。该混合
物的量为每1rai 20升。每7至15天喷洒该溶液,直到出现花蕾。然后,制备80ml的植物功能
性经活化的纳米免疫性肥料药剂以与20升水混合。将它们混合在一起并每15至30天使用喷
雾器喷洒在该地块上,直到供收获的开花阶段。然后,将40ml的植物功能性经活化的纳米免
疫性肥料药剂与20升水混合以每15至30天喷洒在该地块上,直到出现花蕾。

实施例1:用于刺激植物(观叶植物、果树和开花植物)产生重要物质的植物功能性
经活化的纳米免疫性肥料药剂

一升的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂含有:

1.壳寡糖0.6重量%;

2.有机酸0.6重量%;

3.氨基酸0.5重量%;和

4.矿物质1.68重量%。

实施例2:用于刺激植物(观叶植物、果树和开花植物)产生重要物质的植物功能性
经活化的纳米免疫性肥料药剂的制造过程

该制造过程由以下这些步骤组成:

1.使壳寡糖与有机酸反应;

2.产物为纳米生物壳寡糖溶液;

3.使纳米生物壳寡糖溶液与氨基酸反应;

4.产物为纳米氨基生物壳寡糖物质;

5.使纳米氨基生物壳寡糖物质与矿物质螯合;

6.产品为植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂;以及

7.包装产品。

实施例3:使用植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂刺激罗勒产生精油的结

根据所有比率的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的使用,结果显示从罗
勒提取的精油的量比对照组高。此外,还发现具有统计显著性的差异。特别是,每12天每
1rai使用40cc的植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂使每单位重量的罗勒具最高含
量的精油,即倍半萜烯。

实施例4:使用植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂刺激辣椒产生辣椒素和
类胡萝卜素的结果

对于在辣椒种植系统中从浸泡种子到收获时使用所有比率的植物功能性经活化
的纳米免疫性肥料药剂,结果证明与对照组相比较,使用植物功能性经活化的纳米免疫性
肥料药剂,每15天以40cc的溶液和20升水的混合物处理植物,并在辣椒完全变成红色时收
获可刺激产生更多的类胡萝卜素,结果具有统计显著性。

提取辣椒中的辣椒素证明:使用植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂能影响
辣椒产生更高含量的辣椒素,结果具有统计显著性。然而,该结果与另一对照组不同,因为
刺激植物的免疫系统可激励并诱导酚类和生物碱的产生(Freeman和Beattie,2008)。

实施例5:使用植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂刺激水稻产生叶毛的结

该研究调查水稻叶毛的长度,该叶毛长度可代表产生更高量的角质。将未使用任
何植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的对照组与使用植物功能性经活化的纳米免
疫性肥料药剂的组进行比较。每15天,每1rai施加40cc溶液和20升水的混合物以喷洒地块。
然后,通过随机选择20片播种后60天的水稻叶子来收集数据。之后,检查叶毛以测量其长
度。研究结果表明:使用植物功能性经活化的纳米免疫性肥料药剂的组具有最长的叶毛(15
微米),与对照组(6微米)的差异具有统计显著性。

本文所引用的每一专利、专利申请和出版物的公开内容据此全文以引用方式并入
本文。

本文所公开并受权利要求书保护的所有组合物和方法可根据本公开内容产生并
执行,而无需过度实验。虽然本发明的组合物和方法已就优选的实施方案进行了描述,但对
本领域的技术人员将显而易见的是,可对本文所描述的组合物和方法、方法的步骤或步骤
顺序作出变化,而不偏离本发明的概念、精神和范围。更具体地讲,将显而易见的是,某些既
为化学相关也为生理学相关的作用剂可取代本文所描述的作用剂,而仍将实现相同或相似
的结果。对本领域的技术人员显而易见的所有这些相似的替代和修改被认为在由所附权利
要求书限定的本发明的精神、范围和概念内。

虽然本发明已参考具体实施方案进行了公开,但显而易见的是,其他本领域的技
术人员可设计出本发明的其他实施方案和变型,而不偏离本发明的精神和范围。所附的权
利要求书意在被解释为包括所有此类实施方案和等效变型。

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