一种蜂毒注射液制备方法.pdf

蜂毒注射液为蜂毒的灭菌水溶液，用于风湿、类风显性关节炎，周围神经炎及神经痛的治疗。本发明介绍了其制备方法，其过程为水溶解后用乙醚萃取，挥尽乙醚，经葡聚糖凝胶G-50分离，再过10万分子量超滤柱超滤。除菌过滤，灌封，灭菌即得。其优点在于除去了蜂毒中5-羟色胺等致炎物质及大分子蛋白，从而减弱了蜂毒注射液的刺激性和过敏性，提高了其疗效和稳定性。

权利要求书
1.   一种蜂毒注射液制备方法，其过程是：
(1)、溶解：取蜂毒按一定重量比例，加水溶解，若含脂较多用50％(V/V)乙醚脱脂二次，加热挥尽残留乙醚，过滤，除去不溶性杂质。若含脂不多亦可不脱脂。
(2)、分离提取：将葡聚糖凝胶G-50用注射用水浸泡12小时后，用注射用水反复清洗3次(除去细小微粒)，装入层析柱中，接好给水系统，用注射用水冲洗2小时备用。
(3)、将药液加入葡聚糖凝胶中，使药液在葡聚糖凝胶柱中进行分离提取。出液口用紫外监测记录仪监测收集(控制流速每分钟5ml)，在波长280nm处有吸收成份，即收集到玻璃瓶中，至蛋白峰流尽为止。
(4)、将上述流出液过10万分子量超滤柱过滤。
(5)、制剂：上述过滤液测定含量后，稀释至规定的浓度，除菌过滤，灌封灭菌即得蜂毒注射液。
其特征是：
(1)、做为一个完整的工艺过程，能保证制造出合格的蜂毒注射液。
(2)、除去了小分子致炎物质和大分子蛋白，改善了蜂毒注射液的刺激性和过敏性。

说明书一种蜂毒注射液制备方法
技术领域：
本发明发属于医药技术领域。
背景技术：
蜂毒注射液是蜂毒的灭菌水溶液，具有抗炎和镇痛作用，用于治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎，周围神经炎及神经痛等。在实践中我们认识到蜂毒注射液刺激性较严重，偶有过敏反应发生。由于其含有高分子蛋白和其致炎物质如透明脂酸酶、5-羟色胺等相对较小的物质。本专利利用葡聚糖凝胶的分子筛分离的原理，将较小的致炎物质与蜂毒有效成份相分离，以减少刺激性。利用10万分子量的超滤柱将高分子物质与蜂毒有效成份分离，减弱了制剂的过敏性。
发明内容：
为了使蜂毒注射液成为工艺稳定，刺激性较小，过敏性较低的优良制剂，特设计了如下制备工艺。
a.溶解及脱脂：取蜂毒按1∶10比例加入注射用水溶解。若含脂较多，可用50％(V/V)乙醚或氯仿脱脂二次，除去上层，水层加热至沸，持续30分钟，挥尽残存乙醚等。过滤，除去不溶性杂质，若含脂不多亦可不脱脂。
b.分离提取：将葡聚糖凝胶G-50或其他型号的分子筛凝胶，用注射用水浸泡数小时后，用注射水反复清洗数次，装入层析柱中，接好给水系统，用注射用水冲洗数小时后备用。
c.将药液加入葡聚糖凝胶中，使药液在葡聚糖凝胶柱中进行分离提取。出液口用紫外监测记录仪监测收集(控制流速每分钟5毫升左右)，在波长280nm处有吸收成份，收集到玻璃瓶中，至无成份流出为止。
d.将蜂毒溶液过滤至清后，再用10万分子量超滤柱超滤。
e.制剂：上述过蜂毒溶液测定浓度后，用注射用水稀释至所要求浓度，除菌过滤，灌封，灭菌即得蜂毒注射液。
本发明优点：
1、除去了小分子刺激性物质和大分子致敏物质，使制剂更优良。
2、整个工艺过程简单、稳定，保证了注射液的质量。
实例：
a.取蜂毒20g，用注射用水200ml溶解，加入500ml分液漏斗中，加入100ml乙醚萃取2次。将水层放出，加热至沸，保持30分钟，蒸出残存乙醚，补加水至200ml。
b.取葡聚糖凝胶G-50约200g，用100倍注射用水浸泡12小时后，用注射用水反复清洗3次(除去细小微粒)，装入层析柱中，接好给水系统，用注射用水冲洗2小时，备用。
c.将蜂毒水溶液加入葡聚糖凝胶柱中进行分离提取，出液口用紫外监测记录仪监测，控制流速每分钟5ml，监测波长280nm，待有组分流出即开始接收，收集大约28小时，至监测仪无吸收峰为止。
d.过滤、超滤：将上述蜂毒溶液过10万分子量超滤柱，得蜂毒溶液约8000毫升。
e.检测：按蜂毒注射液国家药品标准WS1-XG-016-2001方法检测，含量为1.5mg/ml，收率大约600mg/g。
f.制剂：将上述溶液用注射用水稀释至0.25mg/ml，PH5.0，除菌过滤，灌封，灭菌得蜂毒注射液，均符合蜂毒注射液国家标准。