腰息痛胶囊的质量控制方法.pdf

腰息痛胶囊可以治疗舒筋活络，祛瘀止痛，活血驱风。用于风湿性关节炎，肥大性腰椎炎，肥大性胸椎炎，颈椎炎，坐骨神经痛，腰肌劳损。由于该制剂中含有毒性药草乌，其临床使用上需要非常谨慎。现行的腰息痛胶囊的质量标准尚不能完全达到监督药品安全的目的。本发明的目的在于从定性和定量方面提供更加完善的质量控制方法。

权利要求书
1.  一种腰息痛胶囊的质量控制方法，其特征在于采用以下方法：取腰息痛胶囊内容物6.0克，置500毫升具塞锥形瓶中，加浓氨试液60毫升，使湿润，加乙醚200毫升，超声处理40分钟，放冷，分取乙醚液，挥干，残渣加无水乙醇使溶解并定容至2毫升，作为供试品溶液，另精密称取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液，照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-浓氨试液按照40∶2∶0.3的比例配成展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，在色谱相应的位置上出现的斑点小于对照品的斑点。

2.  一种腰息痛胶囊的质量控制方法，其特征在于采用以下方法：取腰息痛胶囊内容物6.0克，置500毫升具塞锥形瓶中，加浓氨试液60毫升，使湿润，加乙醚200毫升，超声处理40分钟，放冷，分取乙醚液，挥干，残渣加无水乙醇使溶解并定容至2毫升，作为供试品溶液，另精密称取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液，照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-浓氨试液按照40∶2∶0.3的比例配成展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，在色谱相应的位置上不出现斑点。

3.  根据权利要求1或2任一所述的质量控制方法，其特征在于所述腰息痛胶囊每粒胶囊中芍药苷不少于0.3毫克。

4.  根据权利要求3所述的质量控制方法，其特征在于所述芍药苷采用高效液相色谱法测定。

5.  根据权利要求4所述的质量控制方法，其特征在于所述高效液相色谱法的方法为：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.05％磷酸水溶液按照14∶86的比例配成流动相，检测波长230nm，流速：1.0毫升/分钟，理论板数按芍药苷峰计算，应不低于3000；
对照品溶液的制备，取减压干燥至恒重的芍药苷对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成每1毫升含60微克的溶液；
供试品溶液的制备，取腰息痛胶囊装量差异项下的内容物适量，研细，取约3克，精密称定，置具塞锥形瓶中；精密加50％甲醇50毫升，密塞，称定重量；超声处理30分钟，放冷，称定重量，加50％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过；
测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10微升，注入液相色谱仪，测定。

说明书腰息痛胶囊的质量控制方法
【技术领域】
本发明属于中药技术领域，具体涉及腰息痛胶囊的质量控制方法。
【背景技术】
腰息痛胶囊的功能主治包括舒筋活络，祛瘀止痛，活血驱风。用于风湿性关节炎，肥大性腰椎炎，肥大性胸椎炎，颈椎炎，坐骨神经痛，腰肌劳损。其用法用量为口服，一次2粒，一日3次，饭后服。
腰息痛胶囊临床上应注意以下3项：
1、心脏病及胃肠不适者慎服。
2、若出现恶心、呕吐、腹痛、头昏眼花，口舌、四肢及全身发麻，胃寒，继之瞳孔散大，视觉模糊，呼吸困难，手足抽搐，躁动及大小便失禁应停服，迅速去医院就诊。
3、腰息痛胶囊不宜大量、长期服用。
目前本发明涉及的腰息痛胶囊的处方、制法、形状和鉴别方法如下：
【处方】白芷  78克    草乌(制)    52克    独活    52克
        桑寄生26克    续断        52克    牛膝    52克
        三七  47克    当归        26克    防风    52克
        威灵仙52克    秦艽        52克    骨碎补  26克
        川加皮52克    防己        78克    海风藤  52克
        红花  52克    杜仲        46克    土萆薢  26克
        何首乌46克    千年健      52克    赤芍    78克
        桂枝  52克    对乙酰氨基酚100克
【制法】以上二十三味，除对乙酰氨基酚外，取当归、三七及白芷39克、制草乌26克粉碎成粗粉，剩余白芷、制草乌及其余独活等十八味，加水煎煮二次，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.3～1.35(80℃测)的稠膏，与上述粗粉混合均匀，烘干，粉碎成细粉，加入对乙酰氨基酚，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。
【性状】腰息痛胶囊为胶囊剂，内容物为灰棕色的粉末；味苦、甘。
【鉴别】(1)取腰息痛胶囊，置显微镜下观察：石细胞单个散在或2-5个成群，类方形、长方形或椭圆形，胞腔大，壁稍厚，纹孔明显，胞腔内偶见有淀粉粒。树脂道碎片黄色，直径60-128微米，腔道中含滴状或块状分泌物。
(2)取腰息痛胶囊内容物0.6克，置50毫升锥形瓶中，加无水乙醇20毫升，在水浴上微沸3分钟，滤过，滤液挥尽乙醇，加稀盐酸10毫升，置水浴中加热30分钟，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠液数滴，加碱性β-萘酚试液数滴，即生成猩红色沉淀。
(3)取腰息痛胶囊内容物3克，加乙醚30毫升浸渍1小时，时时振摇，倾去乙醚，残渣挥干乙醚，加甲醇30毫升超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30毫升使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30毫升，合并正丁醇提取液，用氨试液50毫升洗涤，正丁醇层再用正丁醇饱和的水50毫升洗涤，分取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶液。
另取人参皂苷Rg1对照品适量，加甲醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，在105℃下加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取腰息痛胶囊内容物5克，加乙醚30毫升，水浴回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1毫升使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材0.5克，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明涉及胶囊含有的草乌为毛茛科植物北乌头Aconitumkusnezoffii Reichb.的块根，含乌头碱(aconitine)和阿替新碱(atisine)等毒性生物碱。草乌中均含有多种生物碱，其中乌头碱毒性最大。其毒性表现如下：
1.血管系统：胸闷、心悸，血压下降(甚至测不出)和各种类型的心律失常，包括窦性心动过速、窦性停博、房颤、多源性室性早博、频发室性早博呈二联律、三联律、室性心动过速、室颤、房性传导阻滞、左束支传导阻滞，并可导致休克，甚至死亡。
2.神经系统：对神经末梢及中枢神经系统均有先兴奋后抑制作用。表现为口舌、四肢及全身麻木，口腔或全身烧灼感，头晕、面色苍白，出汗，四肢厥冷，烦燥不安，继而四肢抽搐，强直，嗜睡，谵妄，神志不清。个别病例出现四肢瘫痪。
3.消化系统：流涎，吞咽困难，恶心呕吐，甚至口吐白沫，或呕吐咖啡样胃内容物，解黑色稀便；腹痛，腹泻，里急后重，类似痢疾的表现。有报道引起中毒性肝炎继发肝硬化腹水。
4.呼吸系统：气短，呼吸困难，紫绀等，最终可因呼吸麻痹而死亡。
5.泌尿系统：尿少，排尿困难，尿闭，甚至急性肾功能衰竭。
因而控制成品胶囊中的乌头碱含量非常重要。目前现行的腰息痛胶囊的质量标准只用显微鉴别方法控制其质量，在实验检验或加工等方面的原因，有时个别药材组织的显微特征无法看到，很难对其下定不符合规定判断，由于草乌是剧毒药物，成品胶囊中指标成分乌头碱没有适宜的检测方法，而且质量标准中也没有定性的检测方法；这都是当前标准中的不足。
原来腰息痛胶囊的质量标准中只有定性方法，没有定量的分析方法，这也是一个目前存在的不足。
【发明内容】
本发明的目的在于提供控制腰息痛胶囊中乌头碱定性方法并和芍药苷定量的质量控制方法。
具体而言本发明的质量控制方法为：取腰息痛胶囊内容物6.0克，置500毫升具塞锥形瓶中，加浓氨试液60毫升，使湿润，加乙醚200毫升，超声处理40分钟，放冷，分取乙醚液，挥干，残渣加无水乙醇使溶解并定容至2毫升，作为供试品溶液，另精密称取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液，照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-浓氨试液(40∶2∶0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点。
具体而言本发明的质量控制方法为：取腰息痛胶囊内容物6.0克，置500毫升具塞锥形瓶中，加浓氨试液60毫升，使湿润，加乙醚200毫升，超声处理40分钟，放冷，分取乙醚液，挥干，残渣加无水乙醇使溶解并定容至2毫升，作为供试品溶液，另精密称取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液，照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-浓氨试液按照40∶2∶0.3的比例配成展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，在色谱相应的位置上不出现斑点。
上述质量控制方法还采用以下方法：
本发明涉及的腰息痛胶囊每粒含赤芍以芍药苷(C23H28O11)计不少于0.3毫克。
上述质量控制方法优选采用以下方法：
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.05％磷酸水溶液(14∶86)为流动相，检测波长230nm，流速：1.0毫升/分钟，理论板数按芍药苷峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备：取减压干燥至恒重的芍药苷对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成每1毫升含60微克的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取腰息痛胶囊装量差异项下的内容物适量，研细，取约3克，精密称定，置具塞锥形瓶中。精密加50％甲醇50毫升，密塞，称定重量。超声(功率200W，频率26.5KHz)处理30分钟，放冷，称定重量，加50％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10微升，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明的质量控制方法提供腰息痛胶囊的有关乌头碱的定性检测方法，为这种广泛用于风湿性关节炎，肥大性腰椎炎，肥大性胸椎炎，颈椎炎，坐骨神经痛，腰肌劳损的药物提供了更加安全有效的鉴定方法，为药品实际生产、流通领域质量监控和临床应用提供了有效保障。
此外，本发明的质量控制方法还首次提供腰息痛胶囊的定量检测方法，为这种广泛用于风湿性关节炎，肥大性腰椎炎，肥大性胸椎炎，颈椎炎，坐骨神经痛，腰肌劳损的药物提供了更加安全有效的鉴定方法，为药品实际生产、流通领域质量监控和临床应用提供了有效保障。
【具体实施方式】
                               实验例1
随机挑选5个批号的腰息痛胶囊(批号为：20070712-1、20070824-1、20070911-1、20071015-1、20071112-1)。
取以上5个批号胶囊的内容物6.0g，置500毫升具塞锥形瓶中，加浓氨试液60毫升，使湿润，加乙醚200毫升，超声处理40分钟，放冷，分取乙醚液，挥干，残渣加无水乙醇使溶解并定容至2毫升，作为供试品溶液。另精密称取乌头碱对照品适量，加无水乙醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各5微升，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-浓氨试液(40∶2∶0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点或不出现斑点。具体实验结果见下表1。
             表1腰息痛胶囊中乌头碱的检测结果

本发明的质量控制方法提供腰息痛胶囊的有关乌头碱的定性检测方法，为这种广泛用于风湿性关节炎，肥大性腰椎炎，肥大性胸椎炎，颈椎炎，坐骨神经痛，腰肌劳损的药物提供了更加安全有效的鉴定方法，为药品实际生产、流通领域质量监控和临床应用提供了有效保障。
                            实验例2
随机挑选5个批号的腰息痛胶囊(批号为：20070712-1、20070824-1、20070911-1、20071015-1、20071112-1)。
照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.05％磷酸水溶液(14∶86)为流动相，检测波长230nm，流速：1.0毫升/分钟，理论板数按芍药苷峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备  取减压干燥至恒重的芍药苷对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成每1毫升含60微克的溶液，即得。
供试品溶液的制备  取腰息痛胶囊装量差异项下的内容物适量，研细，取约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中。精密加50％甲醇50毫升，密塞，称定重量。超声(功率200W，频率26.5KHz)处理30分钟，放冷，称定重量，加50％甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，即得。
测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10微升，注入液相色谱仪，测定，即得。具体实验数据见下表2。
               表2腰息痛胶囊中芍药苷的检测结果

本发明的质量控制方法首次提供腰息痛胶囊的定量检测方法，为这种广泛用于风湿性关节炎，肥大性腰椎炎，肥大性胸椎炎，颈椎炎，坐骨神经痛，腰肌劳损的药物提供了更加安全有效的鉴定方法，为药品实际生产、流通领域质量监控和临床应用提供了有效保障。