用于改善胰岛素抗性的药剂.pdf

公开了可以抑制脂质细胞因子，特别是引起胰岛素抗性的脂质细胞因子的产生的药物或饮料/食品，由此预防与胰岛素抗性有关的病态的发病，或改善所述病态。所述药物或饮料/食品包括作为活性成分的具有环羊毛甾烷骨架的化合物或含有该化合物的属于百合科或禾本科的植物的有机溶剂提取物、热水提取物或其馏分。

权利要求书
1.  用于改善胰岛素抗性的药剂，含有如下通式(1)所示的化合物作为活性成分：

在该通式中，R1代表烷基、或含有1或2个双键的烯基、或含有1或2个羟基和/或羰基的取代烷基或烯基，其为具有6到8个碳原子的直链或支链，R2和R3各自独立地代表氢原子或甲基，并且R4与构成所述环的碳原子形成C＝O，或者是如以下通式中任何一个所示的基团，


2.  根据权利要求1所述的用于改善胰岛素抗性的药剂，其中前述R1如以下通式中任何一个所示，前述R2和R3均为甲基，并且前述R4为羟基
-CH2-CH2-CH2-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRa-C(CH3)2Rb
(其中Ra为氢原子、羟基或甲基中的任何一个，并且Rb为氢原子或者羟基)
-CH2-CH2-CH(CH2CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRc-C(CH3)＝CH2
(其中Rc为氢原子、羟基或甲基中的任何一个)
-CH2-CH2-C(＝O)-C(CH3)＝CH2
-CH2-CH2-C(＝CH2)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CH＝C(CH3)2
-CH2-CH＝C(CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-C(＝CHCH3)-CH(CH3)2。

3.  根据权利要求2所述的用于改善胰岛素抗性的药剂，其中前述化合物是9，19-环羊毛甾-3-醇或者24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇。

4.  根据权利要求1至3中任何一项所述的用于改善胰岛素抗性的药剂，其含有至少0.001质量％的前述化合物。

5.  用于改善胰岛素抗性的药剂，其包括含有以下通式(1)所示化合物的植物有机溶剂提取物或热水提取物或其馏分，其中前述植物的有机溶剂提取物或热水提取物或其馏分含有一组合物作为活性成分，该组合物含有至少0.001干燥质量％的以下通式(1)所示的化合物，


6.  根据权利要求5所述的用于改善胰岛素抗性的药剂，其中前述植物是百合科或禾本科植物。

7.  根据权利要求5或6所述的用于改善胰岛素抗性的药剂，其中前述R1如以下通式中任何一个所示，前述R2和R3均为甲基，并且前述R4为羟基
-CH2-CH2-CH2-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRa-C(CH3)2Rb
(其中Ra为氢原子、羟基或甲基中的任何一个，并且Rb为氢原子或者羟基)
-CH2-CH2-CH(CH2CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRc-C(CH3)＝CH2
(其中Rc为氢原子、羟基或甲基中的任何一个)
-CH2-CH2-C(＝O)-C(CH3)＝CH2
-CH2-CH2-C(＝CH2)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CH＝C(CH3)2
-CH2-CH＝C(CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-C(＝CHCH3)-CH(CH3)2。

8.  根据权利要求7所述的用于改善胰岛素抗性的药剂，其中前述化合物是9，19-环羊毛甾-3-醇或者24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇。

9.  含有权利要求1至8中任何一个所述用于改善胰岛素抗性的药剂的食品或饮料。

10.  根据权利要求9所述的食品或饮料，其含有0.0001质量％或更多的如通式(1)所示的前述化合物。

11.  如下通式(1)所示化合物、或含有至少0.001干燥质量％的所述化合物的植物有机溶剂提取物、热水提取物或其馏分在用于改善胰岛素抗性的药剂生产中的用途，


12.  根据权利要求11所述的用途，其中前述植物是百合科或禾本科植物。

13.  根据权利要求11或12所述的用途，其中前述R1如以下通式中任何一个所示，前述R2和R3均为甲基，并且前述R4为羟基
-CH2-CH2-CH2-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRa-C(CH3)2Rb
(其中Ra为氢原子、羟基或甲基中的任何一个，并且Rb为氢原子或者羟基)
-CH2-CH2-CH(CH2CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRc-C(CH3)＝CH2
(其中Rc为氢原子、羟基或甲基中的任何一个)
-CH2-CH2-C(＝O)-C(CH3)＝CH2
-CH2-CH2-C(＝CH2)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CH＝C(CH3)2
-CH2-CH＝C(CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-C(＝CHCH3)-CH(CH3)2。

14.  根据权利要求13所述的用途，其中前述化合物是9，19-环羊毛甾-3-醇或者24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇。

15.  改善胰岛素抗性的方法，包括向需要改善胰岛素抗性的个体给予如下通式(1)所示的化合物、或者含有至少0.001干燥质量％的所述化合物的植物有机溶剂提取物或热水提取物或其馏分，


16.  根据权利要求15所述的方法，其中前述植物是百合科或禾本科植物。

17.  根据权利要求15或16所述的方法，其中前述R1如以下通式中任何一个所示，前述R2和R3均为甲基，并且前述R4为羟基
-CH2-CH2-CH2-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRa-C(CH3)2Rb
(其中Ra为氢原子、羟基或甲基中的任何一个，并且Rb为氢原子或者羟基)
-CH2-CH2-CH(CH2CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRc-C(CH3)＝CH2
(其中Rc为氢原子、羟基或甲基中的任何一个)
-CH2-CH2-C(＝O)-C(CH3)＝CH2
-CH2-CH2-C(＝CH2)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CH＝C(CH3)2
-CH2-CH＝C(CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-C(＝CHCH3)-CH(CH3)2。

18.  根据权利要求17所述的方法，其中前述化合物是9，19-环羊毛甾-3-醇或者24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇。

说明书用于改善胰岛素抗性的药剂
技术领域
本发明涉及用于改善胰岛素抗性的药剂，以及含有该药剂的食品或饮料，所述药剂含有作为活性成分的具有环羊毛甾烷(cyclolanostane)骨架的化合物。具体地，本发明涉及用于改善胰岛素抗性的药剂，并且涉及含有它的食品或饮料，所述药剂具有控制诸如游离脂肪酸、纤溶酶原激活因子抑制剂、肿瘤坏死因子、单核细胞趋化蛋白-1和抵抗素的脂质细胞因子(adipocytokines)生成的作用，这些脂质细胞因子参与了胰岛素抗性发挥作用的病态的发病和恶化。
背景技术
胰岛素是由胰腺的胰岛中的β细胞产生的一种激素，并且借助存在于诸如骨骼肌、肝脏和脂肪的胰岛素靶组织中的胰岛素受体，通过影响脂类代谢、蛋白质代谢以及糖类代谢而在保持生物体的体内平衡中起重要作用。胰岛素在各靶组织中的作用的例子包括促进葡萄糖从血液吸收入肌细胞和脂细胞中，促进肝脏和肌肉组织中的糖原生成，抑制肝脏中的糖原异生，促进脂细胞中的葡萄糖消耗和脂肪酸合成，以及抑制脂质的降解。
胰岛素抗性指细胞、器官或个体需求的胰岛素量大于通常为了获得胰岛素的相应作用所需量的状态，即胰岛素敏感性降低、胰岛素作用削弱的状态。根据过去的流行病学研究结果，高血压、糖尿病、高脂血症(高甘油三酯血症和低-HDL-血胆固醇症)、肥胖症等等被视为基于胰岛素抗性的病态。胰岛素抗性导致胰岛素在糖类代谢中的作用不足，引起用于维持血糖水平的补偿性的血胰岛素增多，从而出现高血糖和葡萄糖耐受不良，且由于胰腺β细胞的耗竭引起糖尿病。此外，血胰岛素增多加强了交感神经的活化并促进肾脏的钠吸收进而引起高血压，同时还诱导餐后高脂血症和高尿酸血症，纤溶酶原激活因子抑制剂-1(PAI-1)增多等等。
同时，胰岛素抗性诱导由胰岛素的作用不足引起的脂类代谢异常，并且肝脏中脂细胞释放的游离脂肪酸(FFA)增加促进了甘油三酯(TG)的合成，引起高甘油三酯血症。此外，在胰岛素抗性状态下通常具有高胰岛素敏感性的脂蛋白脂肪酶(LPL)的活性降低，因而TG的降解减少而高甘油三酯血症更加恶化。而且，随着糖尿病的加剧，出现由血管疾病引起的诸如视网膜病、肾病和坏疽的并发症，从而属于动脉硬化类疾病的心肌梗塞和脑梗塞加重，并且高血压使心血管疾病更加恶化。如上所述，胰岛素抗性被认为相当程度地参与了复合(complicated)病态的加剧(非专利文献1)。
近年来，从器官特异性基因表达的分析结果中发现，从脂肪组织中分泌出多种生理活性物质，因此已经认识到脂肪组织不仅仅是贮能组织也是生物体中最大的内分泌器官。来源于脂肪组织的内分泌因子通常称为脂质细胞因子，并且在维持代谢作用的体内平衡中起重要作用。然而，研究者认为在肥胖症的情况(即脂肪积累的状态)下，产生和分泌了过多或太少量的脂质细胞因子，并且脂质细胞因子的平衡被破坏，导致胰岛素抗性。
脂质细胞因子分为两类：一类加强胰岛素敏感性；而另一类引起胰岛素抗性，前一类的典型例子包括脂联素(adiponectin)、瘦素(leptin)、AMPK(AMP-依赖的蛋白激酶)等等。特别地，据报道脂联素具有消除胰岛素抗性的作用，以及抑制肝脏中的糖原异生的作用(非专利文献2)。
同时，除上述的FFA和PAI-1之外，引起胰岛素抗性的脂质细胞因子的例子还包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)(一种炎性趋化因子)和抵抗素。特别地，据报道TNF-α具有引起胰岛素抗性的作用，其通过抑制胰岛素信号转导机制中的胰岛素受体和IRS1的酪氨酸磷酸化，从而削弱胰岛素的作用。而且，据报道在胰岛素抗性状态，生物体中的MCP-1水平升高，而葡萄糖运输载体GLUT4(葡萄糖运载体-4)的mRNA，核内受体PPARγ(过氧物酶体增殖子-活化的受体γ)，脂细胞的一种β型儿茶酚胺受体β3AR(β3-肾上腺素能受体)，和脂肪酸结合蛋白aP2(脂细胞脂肪酸结合蛋白2)减少。因此，MCP-1被认为是降低胰岛素敏感性的致病因素(非专利文献3、4和5)。
作为用于提高胰岛素抗性的药剂，已经开发了抑制主要在肝脏中的糖原异生的双胍药剂，和提高肌肉和脂肪组织的胰岛素敏感性的噻唑烷衍生物。那些药剂已经被许可作为糖尿病药品，同时也被用来治疗动脉硬化症。以曲格列酮和匹格列酮为代表的噻唑烷衍生物均被考虑过作为过氧物酶体增殖子活化的受体(PPAR)的配体，从而改善胰岛素抗性，其中所述PPAR为促进脂细胞分化的核内的受体型转录因子。
此外，已经公开了多种药剂作为用于改善胰岛素抗性的药剂，如包含脂联素或者其基因(genes)作为活性成分的用于改善胰岛素抗性的药剂(专利文献1)，包含对铃蟾素受体亚型3(BRS-3)具有亲合性的物质作为活性成分的用于由胰岛素抗性引起的疾病的预防性和/或治疗性试剂(专利文献2)，包含吡咯衍化物作为活性成分的减少游离脂肪酸的药剂(专利文献3)等等。此外，已经公开了多种药剂作为包含来源于食品或饮料的物质作为活性成分的药剂，如包含乙酸和其离子或盐作为活性成分的用于改善胰岛素抗性的组合物(专利文献4)，包含含有特定甘油二酯和/或单酸甘油酯的脂肪油的用于改善胰岛素抗性的药剂(专利文献5)等等。
已经知道诸如β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇的植物甾醇通过抑制胆固醇的吸收而具有降低血胆固醇的作用，并且已经通过将其作为脂肪组合物加入食用油中尝试了他们的实际应用。此外，已经公开了含有胆甾烯酮化合物作为活性成分的抗肥胖症药剂和脂类代谢-改善剂，该胆甾烯酮化合物通过以诸如β-谷甾醇和菜油甾醇的植物甾醇作为原料人工合成(专利文献6到8和非专利文献6)。
此外，已经公开了一种脂联素分泌促进剂，其含有米糠、真姬菇(shimeji mushroom)、菊花、黑麦、白桦和西班牙茉莉(艳山姜(Alpiniazeumber))中至少一种的提取物，和环木菠萝烷(cycloartane)型三萜烯或作为环木菠萝烷型三萜烯衍生物的环木菠萝烯醇和/或(24S)-24，25-二羟基环木菠萝烷醇(专利文献9)。
属于百合科植物的芦荟属是包括库拉索芦荟(Aloe vera)(Aloebarbadenisis Miller)、木立芦荟(Aloe arborescens Miller var.natalensisBerger)等等在内的一组植物，根据经验知道他们具有多种效力。例如，公开了含有芦荟提取物的丁醇馏分(fraction)或芦荟素的免疫抑制改善药剂(专利文献10)，与改善血糖水平相关的药剂(专利文献11到14)，用于肥胖症的预防性和改善性药剂(专利文献15)等等，但是没有报道芦荟属植物对胰岛素抗性的改善作用。
[专利文献1]公开号WO2003/63894的国际公开小册子
[专利文献2]日本专利公开NO.10-298100
[专利文献3]日本专利公开NO.08-12573
[专利文献4]日本专利公开NO.2002-193797
[专利文献5]日本专利公开NO.2001-247473
[专利文献6]日本专利公开NO.07-165587
[专利文献7]日本专利公开NO.11-193296
[专利文献8]日本专利公开NO.2001-240544
[专利文献9]日本专利公开NO.2005-68132
[专利文献10]日本专利公开NO.08-208495
[专利文献11]日本专利公开NO.59-214741
[专利文献12]日本专利公开NO.2003-286185
[专利文献13]美国专利No.4598069
[专利文献14]美国专利申请公开No.2003/0207818
[专利文献15]日本专利公开NO.2000-319190
[非专利文献1]Insulin Resistance and lifestyle-related diseases(胰岛素抗性和生活方式-相关的疾病)，主编Kazuaki Shimamoto，Shindan toChiryosha，2003，1-5页
[非专利文献2]Adiposcience(脂肪科学)，第1卷，第3期，2004，247-257页
[非专利文献3]Proceedings of the National Academy of Sciences(美国科学院论文集)，第100卷，2003，7265-7270页
[非专利文献4]Nature(自然)，第389卷，1997，610-614页
[非专利文献5]The Netherlands Journal of Medicine(荷兰医药杂志)，第6卷，第6期，2003，194-212页
[非专利文献6]Hormone Metabolism Research(激素代谢研究)，第37卷，2005，第79-83页
发明内容
当使用用于改善胰岛素抗性的常规药剂双胍药剂时，可能会出现胃肠功能失调或稀发性乳酸性酸中毒。此外，作为相同类型药剂的噻唑烷衍生物有时可能会引起严重的副作用，例如体液潴留(fluid retention)、体重增加和肝脏机能障碍，因此其使用需要额外的注意。此外，对于除糖尿病或高血糖之外的其它状态下的胰岛素抗性，事实上非常难以使用抗糖尿病药剂。在这种情况下，渴望开发安全性优秀且可以每日摄取的，能以尽可能小的痛苦有效改善胰岛素抗性的功能性材料。
考虑到上述的问题，本发明的发明人已经研究了由胰岛素抗性引起的生活方式-相关疾病的机理，例如高血压、糖尿病、高脂血症(高甘油三酯血症和低-HDL-血胆固醇症)和肥胖症，并且已经研究了与所述生活方式-相关疾病的预防、改善等等有关的药剂，即用于改善胰岛素抗性的药剂。本发明的发明人注意到参与胰岛素抗性发病和恶化的脂质细胞因子，并且勤勉地研究了能够通过控制上述因子来改善胰岛素抗性的新型功能性材料。结果，本发明发明人发现具有环羊毛甾烷骨架的化合物具有控制诸如游离脂肪酸、TNF-α和MCP-1的脂质细胞因子生成的作用，特别具有有效降低引起胰岛素抗性的脂质细胞因子生成的作用，从而改善所述胰岛素抗性。
关于本发明的前述作用，专利文献9仅仅描述了所述植物提取物对培养的脂细胞分化的预防作用，环木菠萝烷型三萜烯衍生物的合成路线，以及麦角固醇对脂联素分泌的促进作用，而没有描述所述环木菠萝烷型三萜烯或其衍生物环木菠萝烯醇(cycloartenol)对脂联素分泌的促进作用。此外，它根本没有描述和公开本发明活性成分对胰岛素抗性的改善作用。
此外，除作为评价胰岛素抗性的常规方法--葡糖钳方法、稳态血浆葡萄糖(SSPG)方法和最小模型法外，进一步通过使用胰岛素耐量试验(胰岛素负荷试验)进行调查，本发明发明人发现具有环羊毛甾烷骨架的化合物直接改善胰岛素抗性而不会干扰胰岛素分泌特性等等。
在前述专利文献1到5中并未进行这类胰岛素耐量试验。本发明的发明人发现了比改善胰岛素抗性的常规作用更有利的改善胰岛素抗性的作用，而不受胰岛素分泌特性的影响，并且完成了本发明。
本发明的目的是提供用于改善胰岛素抗性的药剂，其含有具有所述环羊毛甾烷骨架的化合物作为活性成分。此外，本发明的另一目的是提供含有所述用于改善胰岛素抗性的药剂的生理学功能性食品或饮料，例如用于特定保健用途的食品。
本申请解决前述问题的第一发明是用于改善胰岛素抗性的药剂，其含有如下通式(1)所示的化合物作为活性成分。

(在该通式中，R1代表烷基、或具有1或2个双键的烯基、或含有1或2个羟基和/或羰基的取代烷基或烯基，其为具有6到8个碳原子的直链或支链，R2和R3各自独立地代表氢原子或甲基，并且R4与构成所述环的碳原子形成C＝O，或者是如以下通式中任何一个所示的基团。)

并且，以下(1)到(3)为本发明的优选实施方案。
1)前述R1如以下通式中任何一个所示，前述R2和R3均为甲基，并且前述R4为羟基。
-CH2-CH2-CH2-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRa-C(CH3)2Rb
(其中Ra为氢原子、羟基或甲基中的任何一个，并且Rb为氢原子或者羟基)
-CH2-CH2-CH(CH2CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRc-C(CH3)＝CH2
(其中Rc为氢原子、羟基或甲基中的任何一个)
-CH2-CH2-C(＝O)-C(CH3)＝CH2
-CH2-CH2-C(＝CH2)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CH＝C(CH3)2
-CH2-CH＝C(CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-C(＝CHCH3)-CH(CH3)2
2)根据1)所述的前述化合物为9，19-环羊毛甾-3-醇(9，19-cyclolanostan-3-ol)或者24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇(24-methylene-9，19-cyclolanostan-3-ol)。
3)根据1)或者2)所述的前述化合物的质量含量至少为0.001％。
本申请解决前述问题的第二发明为用于改善胰岛素抗性的药剂，其包括含有如下通式(1)所示化合物的植物有机溶剂提取物或热水提取物、或其馏分作为活性成分，其中所述植物有机溶剂提取物或热水提取物、或其馏分含有至少0.001干燥质量％的如下通式(1)所示的化合物。

(在该通式中，R1代表烷基、或具有1或2个双键的烯基、或具有1或2个羟基和/或羰基的取代烷基或烯基，其为具有6到8个碳原子的直链或支链，R2和R3各自独立地代表氢原子或甲基，并且R4与构成所述环的碳原子形成C＝O，或者是如以下通式中任何一个所示的基团。)

此外，以下4)到6)为本发明的优选实施方案。
4)前述植物为百合科(Liliaceae)或禾本科(Gramineae)植物。
5)前述R1如以下通式中任何一个所示，前述R2和R3均为甲基，并且前述R4为羟基。
-CH2-CH2-CH2-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRa-C(CH3)2Rb
(其中Ra为氢原子、羟基或甲基中的任何一个，并且Rb为氢原子或者羟基)
-CH2-CH2-CH(CH2CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CHRc-C(CH3)＝CH2
(其中Rc为氢原子、羟基或甲基中的任何一个)
-CH2-CH2-C(＝O)-C(CH3)＝CH2
-CH2-CH2-C(＝CH2)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-CH＝C(CH3)2
-CH2-CH＝C(CH3)-CH(CH3)2
-CH2-CH2-C(＝CHCH3)-CH(CH3)2
6)根据5)所述的前述化合物为9，19-环羊毛甾-3-醇或者24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇。
本申请用来解决前述问题的第三发明为含有根据第一或第二发明所述用于改善胰岛素抗性的药剂的食品或饮料。
并且，以下7)为本发明的优选实施方案。
7)所述食品或饮料含有0.0001干燥质量％或更多的如前述通式(1)所示的化合物。
本申请用来解决前述问题的第四发明为如前述通式(1)所示的化合物、或者含有至少0.001干燥质量％的所述化合物的植物有机溶剂提取物或热水提取物或其馏分，在用于改善胰岛素抗性的药剂生产中的用途。
本申请用来解决前述问题的第五发明为改善胰岛素抗性的方法，所述方法包括向需要改善胰岛素抗性的个体给予如前述通式(1)所示的化合物、或者含有至少0.001干燥质量％的所述化合物的植物有机溶剂提取物或热水提取物或其馏分。
在本发明的前述用途和方法中，前述通式(1)所示化合物的优选实施方案与本发明第二发明优选的那些相同。
本发明用于改善胰岛素抗性的药剂和含有该药剂的食品或饮料能安全地给药或摄取，并且对被认为是由胰岛素抗性引起的生活方式-相关疾病具有预防作用。此外，能够容易地从诸如库拉索芦荟(Aloebarbadensis Miller)的百合科植物生产本发明用于改善胰岛素抗性的药剂的活性成分，从经验的角度看这些植物用于食用能安全地摄取并且容易得到。
附图说明
图1为显示胰岛素耐量试验中血糖水平变化的图表。
发明的最佳实施方式
下文将详细说明本发明的优选实施方案。然而，本发明不局限于以下优选实施方案，并且可在本发明范围内自由地修改。并且，除非另作说明本文使用的百分数指质量百分数。
用作本发明用于改善胰岛素抗性的药剂(以下也称为″本发明药剂″)的活性成分的化合物，包括具有前述通式(1)所示结构、并且具有改善胰岛素抗性作用的任何化合物和衍生物(以下也称为″本发明化合物″)。
最优选地，用作本发明用于改善胰岛素抗性的药剂的活性成分的本发明化合物的纯度为100％。然而，纯度可以在使所述药剂具有改善胰岛素抗性作用的范围内适当调整。
此外，用作本发明改善胰岛素抗性的药剂的活性成分的组合物(以下也称为″本发明组合物″)为百合科或禾本科植物的提取物、或者其馏分，其含有至少0.001干燥质量％，优选0.01干燥质量％或更高，更优选0.1干燥质量％或更高的通式(1)所示的前述化合物。本发明化合物的含量上限没有特别限制，其可以是，例如优选10质量％，或者50质量％，70质量％或90质量％。
本发明中，干燥质量是指化合物在用由″干燥损失测试″所定义的干燥方法干燥后测得的质量，所述″干燥损失测试″是日本药典(JapanesePharmacopoeia)第14版(2001年3月30日，日本厚生劳动省，部长通告第111号)中所描述的常规试验方法。例如，可以用如下方式来测定本发明化合物的质量：量出大约1g的本发明化合物，并在105℃干燥4小时；通过在干燥器中静置而冷却所得生成物；以及用天平称重所述化合物的质量。
根据一个实施方案，本发明所述用于改善胰岛素抗性的药剂以及含有该药剂的食品或饮料均含有具有环羊毛甾烷骨架的化合物作为活性成分，该化合物具有改善胰岛素抗性的作用。所述环羊毛甾烷骨架为如下通式(2)所示的化合物。

具有环羊毛甾烷骨架的化合物的具体例子包括如前述通式(1)所示的化合物。所述具有环羊毛甾烷骨架的化合物中的双键数目没有特别限制。此外，所述环中的双键数目也没有特别限制。当存在两个或更多双键时，他们可形成共轭。本发明药剂以及食品或饮料可能含有两种或更多种本发明化合物。
在前述通式(1)的本发明化合物中，R1为具有6到8个碳原子的直链或支链的烷基或具有1或2个双键的烯基，或者其中一个或两个氢原子被羟基和/或羰基取代的取代烷基或烯基，R2和R3各自独立地代表氢原子或甲基，并且R4与构成所述环的碳原子形成C＝O、或者是如以下通式中任何一个所示的基团。

在前述通式(1)中，R1优选为任何一个如以下通式所示的基团。
(i)-CH2-CH2-CH2-CH(CH3)2
(ii)-CH2-CH2-CHRa-C(CH3)2Rb
(其中Ra为氢原子、羟基或甲基中的任何一个，并且Rb为氢原子或者羟基)
(iii)-CH2-CH2-CH(CH2CH3)-CH(CH3)2
(iv)-CH2-CH2-CHRc-C(CH3)＝CH2
(其中Rc为氢原子、羟基或甲基中的任何一个)
(v)-CH2-CH2-C(＝O)-C(CH3)＝CH2
(vi)-CH2-CH2-C(＝CH2)-CH(CH3)2
(vii)-CH2-CH2-CH＝C(CH3)2
(viii)-CH2-CH＝C(CH3)-CH(CH3)2
(ix)-CH2-CH2-C(＝CHCH3)-CH(CH3)2
此外，在前述通式(1)中，优选R2和R3均为甲基，且前述R4为羟基。前述化合物中最优选的化合物为如以下通式所示的化合物，
9，19-环羊毛甾-3-醇(通式(3))和
24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇(通式(4))。

即，9，19-环羊毛甾-3-醇为前述通式(1)所示的化合物，其中R2和R3为甲基，R4为羟基，且R1为前述通式(i)所示的基团。此外，24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇为前述通式(1)所示的化合物，其中R2和R3为甲基，R4为羟基，且R1为前述通式(vi)所示的基团。
本发明化合物可以是环木菠萝烯醇(通式(5))或24-甲基环木菠萝烷醇(通式(7))。这两个化合物均为前述通式(1)所示的化合物，其中R2和R3为甲基，R4为羟基，且R1在环木菠萝烯醇中为前述通式(vii)所示的基团，在24-甲基环木菠萝烷醇中为前述通式(ii)所示的基团(Ra＝CH3，Rb＝H)。
本发明化合物可以通过公知的生产方法来化学合成。例如，在日本专利公开57-018617中已经公开了生产环木菠萝烯醇(通式(5))和24-亚甲基环木菠萝烷醇(常用名24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇)(通式(4))的方法，并且在日本专利公开2003-277269中已经公开了从γ-谷维素(oryzanol)生产环木菠萝烯醇阿魏酸酯(通式(6))的方法和用化合物水解产物作为原料人工合成该化合物的方法。此外，当所述通式(1)的R1部分含有双键时，通过使用各种技术可以生产多种衍生化合物，如通过臭氧分解反应将所述双键部分变为醛并向其上结合膦酸酯的技术，向双键部分加氢的技术，或者用臭氧氧化所述双键部分以将其转化为醛或酸的技术。此外，所述生产方法不局限于化学合成方法，并且所述化合物可以通过使用微生物等等进行生物合成。可选择地，他们可以通过使用来源于微生物的酶来生产。

本发明用于改善胰岛素抗性的药剂及含有该药剂的食品或饮料可能含有一种、两种或更多种任意类型的前述化合物。
公知地，在百合科、豆科、禾本科、茄科、芭蕉科等等植物中含有具有环羊毛甾烷骨架的化合物(参看Phytochemistry(植物化学)，美国，1977，第16卷，140-141页；Handbook of phytochemical constituents ofGRAS herbs and other economic plants(GRAS药草及其他经济植物的植物化学组分手册)，1992，美国，CRC出版社；Hager′s Handbuch derPharmazeutischen Praxis，2-6卷，1969-1979，德国，Springer-Verlag Berlin)。因此，所述化合物可以通过从这些植物、其部分或匀浆中提取并浓缩来生产，所述提取采用诸如有机溶剂提取法或热水提取法的方法来进行。
特别地，所述植物的例子属于百合科，包括属于芦荟属或葱属的植物。芦荟属植物的例子包括库拉索芦荟(Aloe barbadensis Miller)，好望角芦荟(Aloe ferox Miller)，非洲芦荟(Aloe Africana Miller)，木立芦荟，穗花芦荟(Aloe spicata Baker)等等。在本发明化合物或含有该化合物的组合物的生产中，虽然可以使用整株前述植物，但优选使用其叶肉(透明的凝胶部分)。使用均质器等等将这类植物或其部分破碎从而变成液态，通过使用有机溶剂或热水从所述破碎后的产物中提取本发明化合物或含有该化合物的组合物。所述有机溶剂的例子包括诸如甲醇，乙醇和丁醇的醇类；诸如乙酸甲酯，乙酸乙酯，乙酸丙酯和醋酸丁酯的酯类；诸如丙酮和甲基异丁基酮的酮类；诸如二乙醚和石油醚的醚类；诸如己烷，环己烷，甲苯和苯的烃类；诸如四氯化碳，二氯甲烷和氯仿的卤代烃类；诸如吡啶的杂环化合物；诸如乙二醇的二醇类；诸如聚乙二醇的多元醇类；诸如乙腈的腈溶剂，这些溶剂的混合物等等。此外，这些溶剂可以是无水或含水的。在这些溶剂之中，乙酸乙酯/丁醇混合物(3∶1)和氯仿/甲醇混合物(2∶1)是优选的。
可以使用用于常规植物成分提取的方法来作为本发明的提取方法。通常使用的方法，例如，通过在等于或低于溶剂沸点的温度下加热并搅拌或摇动、将1-300质量份的有机溶剂与1质量份的新鲜植物或干燥植物回流的方法，或者在室温下通过超声破碎进行提取的方法。通过使用适当的诸如过滤或离心的方法从所述提取液中分离不溶物质，可以获得粗提物。
可以通过诸如正相或反相硅胶柱色谱法的各种类型的色谱法来纯化所述粗提物。当在正相硅胶柱色谱法中使用氯仿/甲醇的梯度混合物作为洗脱溶剂时，使用混合比为约25∶1的氯仿∶甲醇来洗脱本发明的化合物。此外，当在反相硅胶柱色谱法中使用己烷/乙酸乙酯混合物(4∶1)作为洗脱剂时，在早期洗脱的馏分中洗脱得到本发明的化合物。可通过HPLC等等方法进一步纯化所得馏分。
此外，也可以通过化学合成法，或者借助微生物、酶等等的生物或酶方法来生产本发明所用的化合物。
可通过例如质谱(MS)，核磁共振(NMR)谱等等的方法来确认通过如上方法获得的化合物或组合物是否确实含有本发明的化合物。
本发明化合物本身可作为活性成分用于本发明改善胰岛素抗性的药剂，以及含有该药剂的食品或饮料。此外，含有本发明化合物的植物的有机溶剂提取物或热水提取物，或其馏分(下文称为“提取物等”)也可作为活性成分用于本发明改善胰岛素抗性的药剂，以及含有该药剂的食品或饮料。此外，当使用百合科植物中的库拉索芦荟时，优选芦荟素和芦荟泻素的总含量为5ppm或更低，这些成分在库拉索芦荟的叶子表皮中含有很多。
用于改善胰岛素抗性的药剂中所含的前述提取物等含有至少0.001％干燥质量，更优选0.01-1％干燥质量，特别优选0.05-1％干燥质量的本发明化合物。此外，食品或饮料中所含的前述提取物等中含有至少0.0001％干燥质量，更优选0.001-1％干燥质量，特别优选0.005-1％干燥质量的本发明化合物。前述提取物等可以含有两种或更多种类型的本发明化合物。此外，前述提取物等可以是溶液，也可以常规方式冻干或喷雾干燥，并以粉末形式储存或使用。
作为本发明用于改善胰岛素抗性的药剂、本发明化合物或含有其的组合物例如提取物等本身，或者与药物可接受载体组合的提取物可以通过口服或者肠胃外途径给药给哺乳动物，包括人。在本发明药剂中，本发明化合物可以是药物可接受的盐的形式。药物可接受盐的例子包括金属盐类(无机盐类)和有机盐类，包括例如″Remington′s PharmaceuticalSciences″，第17版，1418页，1985中所列的那些。其具体的例子包括但不限于，无机酸盐如盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、二磷酸盐(diphosphate)和氢溴酸盐，和有机酸盐如苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对-甲苯磺酸盐、双羟萘酸盐、水杨酸盐和硬脂酸盐。此外，所述盐还可以是与金属如钠、钾、钙、镁和铝的盐，或与氨基酸如赖氨酸的盐。并且，前述化合物或其药物可接受盐的溶剂化物如水合物，也包括在本发明的范围内。
本发明改善胰岛素抗性的药剂的剂量形式没有特别限制，可根据治疗目的适当选择。具体例子包括药片、药丸、粉末、溶液、悬浮液、乳剂、颗粒、胶囊剂、糖浆、栓剂、注射剂、油膏、贴剂、滴眼液、滴鼻剂等等。在制备中，可使用通常用于改善胰岛素抗性的常规药剂的添加剂作为药物载体，例如赋形剂、结合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、调味剂、稀释剂、表面活性剂和用于注射剂的溶剂等等。此外，只要不降低本发明的效果，本发明化合物或含有其的提取物等可与其他具有改善胰岛素抗性作用的药剂联合使用。
尽管本发明用于改善胰岛素抗性的药剂中本发明化合物或含有其的提取物等的含量没有特别限制并可适当选择，但是以本发明化合物计，该含量可以是例如至少0.001质量％，优选0.01-1质量％，特别优选0.05-1质量％。
在本发明中，改善胰岛素抗性的作用(增强胰岛素敏感性的作用)指预防或改善由胰岛素敏感性下降引起的对健康的各种负面作用，例如生活方式-相关的疾病。具体地，本发明药剂有效抑制引起胰岛素抗性的脂质细胞因子的增长或生成，这类脂质细胞因子例如血纤蛋白溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)、游离脂肪酸(FFA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、MCP-1和抵抗素，并具有降低胰岛素抗性相关疾病的风险，以及预防、改善和治疗这类的作用。因此，本发明改善胰岛素抗性的药剂可定义为增强胰岛素敏感性的药剂，或者控制脂质细胞因子产生的药剂，特别是控制引起胰岛素抗性的脂质细胞因子产生的药剂。
已经有评估胰岛素抗性的方法，例如葡糖钳测试、稳态血浆葡萄糖(SSPG)方法、最小模型法、通过计算体内平衡模型从空腹(fasting)血糖水平和血胰岛素浓度评定胰岛素抗性(HOMA-IR)的评估胰岛素抗性的方法，和胰岛素耐量试验。可使用前述方法中的任意方法来评估胰岛素抗性，然而，在本发明中优选采用借助动物进行的胰岛素耐量试验，因为该试验不会受到胰岛素分泌特性等等的影响，因而可以直接分析胰岛素敏感性。
本发明化合物具有提高胰岛素敏感性的作用，因而能够预防或改善由胰岛素抗性引起的病态。因此，该化合物可作为活性成分用于改善胰岛素抗性的药剂或含有该药剂的食品或饮料。并且，可通过测量胰岛素给药后血糖水平的降低来评估胰岛素敏感性。
本发明用于改善胰岛素抗性的药剂可预防、改善或治疗由胰岛素抗性引起的各种疾病、并发症等等，并可降低这类疾病、并发症等等的风险。此外，优选地，本发明用于改善胰岛素抗性的药剂可用于胰岛素抗性比正常人更为恶化的患者。并且，胰岛素抗性通常指空腹血浆胰岛素水平为10-15μU/ml或更高，且HOMA指数为1.73或更高的状态。
由胰岛素抗性引起的各种疾病的例子包括高血压、高脂血症、糖尿病、异常葡糖耐量、动脉硬化症、高胰岛素血症和肥胖症。由这类疾病引起的并发症的例子包括(a)由高血压所引起的脑卒中(cerebral stroke)、肾硬化和肾衰竭，(b)由高脂血症所引起的动脉硬化症和胰腺炎，(c)由糖尿病所引起的糖尿病性视网膜病、肾病、神经病和糖尿病性坏疽，和(d)由动脉硬化所引起的脑卒中、脑梗死，心血管疾病如心绞痛和心肌梗塞，肾病如尿毒症、肾硬化和肾衰竭。此外，本发明的发明人还发现本发明化合物具有降低血色素Alc水平和改善高血糖症(WO2006/035525)的作用。优选应用本发明改善胰岛素抗性的药剂的疾病未伴随有血色素Alc水平高于健康人的状态。
此外，预期具有改善胰岛素抗性作用的本发明药剂具有抑制引起胰岛素抗性的诸如TNF-α、MCP-1和FFA的脂质细胞因子的产生和增长的作用。因此，本发明药剂具有预防和/或改善由前述脂质细胞因子增多引起的疾病的作用，这类疾病包括自身免疫疾病如类风湿性关节炎、克罗恩氏病，各种器官中的炎性疾病如肾炎、胰腺炎、肝炎和肺炎，血管病，败血症，癌症恶病质。因此，优选地，本发明用于改善胰岛素抗性的药剂用于脂质细胞因子生成得到加强的患者，特别是，引起胰岛素抗性的脂质细胞因子生成得到加强的患者。
本发明药剂的给药时间没有特别限制，可根据治疗目标疾病的方法来适当选择。此外，优选根据剂量形式、年龄、性别和患者的其他状况、患者症状的严重性等等来确定给药途径。根据给药方案、年龄、性别、疾病严重程度、患者的其他状况等等来适当选择本发明药剂的剂量。作为试用剂量，作为活性成分的本发明化合物的量通常选自如下范围，优选0.001-50mg/kg/天，更优选0.01-1mg/kg/天。并且，作为试用量，当使用含有本发明化合物的提取物等时，所述提取物等的干重选自如下范围，优选0.1-1000mg/kg/天，更优选1-100mg/kg/天。在任意情况下，所述剂量可按日，一次摄入或分多份多次摄入。
本发明的化合物或含有该化合物的组合物可加入食品或饮料(饮品或食品)中，以产生具有改善胰岛素抗性作用的食品或饮料。所述食品或饮料的形式和性质没有特别限制，只要活性成分的效果没有下降，且该食品或饮料可通过口服摄取，且除加入前述活性成分外，可使用通常用于食品或饮料的原料以常规方式生产。并且，本发明食品或饮料中所含的本发明化合物或含有其的提取物等的量没有特别限制，可适当选择。例如，以本发明化合物计，食品或饮料中所含的本发明化合物或含有其的提取物等的量为至少0.0001质量％，优选0.001-1质量％，更优选0.005-1质量％。
本发明的食品或饮料可用于各种需要改善胰岛素抗性作用的应用中。例如，其可用作用于降低或消除由胰岛素抗性引起的生活方式相关疾病的风险因素的食品或饮料。此外，本发明的食品或饮料可预防由胰岛素抗性引起的疾病，例如高血压、高脂血症、糖尿病等等，并可降低这些疾病的风险。此外，本发明的食品或饮料可预防由胰岛素抗性引起的各种并发症，例如由高血压所引起的脑卒中、肾硬化和肾衰竭，由高脂血症所引起的动脉硬化症、胰腺炎等等，由糖尿病所引起的糖尿病性视网膜病、肾病、神经病和糖尿病性坏疽，由动脉硬化症所引起的脑卒中、脑梗死，心血管病如心绞痛和心肌梗塞，肾病如尿毒症、肾硬化和肾衰竭，并可以减少这些疾病的风险。
此外，预期本发明食品或饮料具有抑制引起胰岛素抗性的诸如TNF-α、MCP-1和FFA的脂质细胞因子的产生和增长的作用。因此，本发明药剂具有预防由前述脂质细胞因子增多引起的疾病，及降低这些疾病风险的作用，这类疾病包括自身免疫疾病如类风湿性关节炎、克罗恩氏病，各种器官中的炎性疾病如肾炎、胰腺炎、肝炎和肺炎，血管病，败血症，癌症恶病质。因此，优选地，本发明食品或饮料由前述脂质细胞因子生成得到加强的患者摄入，特别是，引起胰岛素抗性的脂质细胞因子生成得到加强的患者。
本发明的食品或饮料优选以带有标识的食品或饮料形式上市，该标识表明该食品或饮料用于改善胰岛素抗性，例如“含有具有改善胰岛素抗性作用的化合物的食品或饮料标示为‘用于改善胰岛素抗性’”，“含有植物提取物的食品或饮料标示为‘用于改善胰岛素抗性’”，或“含有库拉索芦荟提取物的食品或饮料标示为‘用于改善胰岛素抗性’”等等。并且，由于本发明化合物，以及含有该化合物的组合物具有改善胰岛素抗性的作用，因而“改善胰岛素抗性”的标识被认为具有“提高胰岛素敏感性”的含义。因此，本发明的食品或饮料也可标示为“用于提高胰岛素敏感性”。换而言之，“用于改善胰岛素抗性”的标识可以替换为“用于提高胰岛素敏感性”的标识。
用于上述这类标识的措辞不必限于“用于改善胰岛素抗性”或“用于提高胰岛素敏感性”的表达，任何其他表达用于提高胰岛素敏感性作用、或预防和改善胰岛素抗性作用的措辞显然也包括在本发明的范围内。作为这类措辞，例如，也可以是基于各种能让消费者意识到改善胰岛素抗性作用、或者提高胰岛素敏感性作用的用途的标识。例子包括如下标识“适用于倾向于具有胰岛素抗性的人群”以及“适用于降低或消除生活方式相关疾病的风险因素(风险)”。
前述术语“标识”包括所有告知消费者前述用途的行为，且任何提醒或暗示前述用途的标识都包括在本发明的“标识”的范围内，而不管该标识的目的、内容、目标物、介质等等。然而，优选该标识制成带有能让消费者直接意识到前述用途的表述。具体例子包括在与本发明食品或饮料相关的物品或物品包装上指示前述用途的行为，为了转让或运输或进口标示了前述用途的产品或产品包装而进行的转让、运输、展示的行为，展示或分发与标示有前述用途的产品相关的广告、报价单或工商业票据的行为，或者通过电磁方式(网络等)提供包括标示前述用途的内容的信息的行为等等。所述标识优选为管理机构等认可使用的标识(例如基于许可形式的标识，其经过管理机构提供的各种法律体系中任意体系的验证合格)，特别优选在销售点的广告材料上的标识，例如包装、容器、目录、宣传册和POP，其他文件等等。
标识的例子还包括如健康食品、功能食品、肠道营养食品、专门饮食用途的食品、具有营养功能声明的食品、类药物等等，以及日本厚生劳动省许可的标识，例如根据专门健康用途食品体系或类似体系许可的标识。后者的例子包括用于特定保健用途的食品标识、用于特定保健用途具有经认证保健声明的食品标识、对身体结构和技能影响的标识、降低疾病风险声明的标识等等，更具体地，典型例子包括保健促进法(Health Promotion Law)(日本厚生劳动省，第86号部长令，2003年4月30日)实施细则中提供的用于专门健康用途的食品标识(特别是用于保健用途的标识)，以及类似标识。
参照以下实施例对本发明进行更详细的说明。然而，本发明的范围并不局限于以下实施例。
以下描述具有环羊毛甾烷骨架的化合物的制备实施例。
[制备实施例1]
通过如下所述的方法制备了9，19-环羊毛甾-3-醇(通式(3))、24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇(通式(4))、环木菠萝烯醇(通式(5))和24-甲基环木菠萝烷醇(通式(7))。


向8.0g的γ-谷维素(Oryza Oil & Chemical Co.，Ltd.)中加入250ml的蒸馏水、50g的氢氧化钠、150ml的异丙醇、150ml的乙醇和150ml的甲醇，用覆套式电阻加热器(mantle heater)将混合物在加热下回流两小时。反应后，将反应混合物倾入1300ml水中，通过抽滤分离产生的白色沉淀。为了洗去残余的碱，将过滤得到的残余物悬浮在1000ml水中，随后再次通过抽滤收集。该过程重复两次，最终获得的残余物在减压下冻干，得到5.91g的谷维素水解产物。通过HPLC纯化该水解产物得到2435mg的9，19-环羊毛甾-3-醇和1543mg的24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇。
将所得的9，19-环羊毛甾-3-醇用于合成环木菠萝烯醇。将302mg的9，19-环羊毛甾-3-醇、150ml的异丙醇和1.0g的5％钯/碳催化剂粉末加入密封的高压釜中，内部气氛用氮气置换，然后通过应用3kg/cm2的压力引入氢气。搅拌下加热混合物，当温度达到50℃时，将氢气压力调节至5kg/cm2。通过为被吸附的氢气补充氢气以维持压力，让反应进行6小时。过滤反应混合物除去催化剂，浓缩并随后通过硅胶柱色谱纯化(展开剂：100％氯仿)，得到275mg环木菠萝烯醇。通过使用24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇作为原料合成了24-甲基-环木菠萝烷醇。将78mg的24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇、150ml的异丙醇和1.0g的5％钯/碳催化剂粉末加入密封的高压釜中，内部气氛用氮气置换，然后通过应用3kg/cm2的压力引入氢气。然后，在搅拌下加热混合物，当温度达到50℃时，将氢气压力调节至5kg/cm2。为被吸附的氢气补充氢气以将压力维持在5kg/cm2，让反应进行6小时。过滤反应混合物除去催化剂，浓缩并通过硅胶柱色谱纯化(展开剂：100％氯仿)，得到69mg的24-甲基环木菠萝烷醇。
以下描述了使用属于百合科植物的库拉索芦荟(Aloe barbadensisMiller)作为原料制备含有具有环羊毛甾烷骨架的化合物的提取组合物的制备实施例。
[制备实施例2]
使用均化器使100kg带壳的库拉索芦荟(Aloe barbadensis Miller)的液化，加入100L的乙酸乙酯/丁醇混合物(3∶1)并搅拌。将混合物放置过夜以分离乙酸乙酯/丁醇混合物和水层，回收乙酸乙酯/丁醇混合物。提取的组合物含有具有环羊毛甾烷骨架的化合物，其通过在减压下浓缩乙酸乙酯/丁醇混合物得到，重13.5g。该组合物的LC-MS检测显示，9，19-环羊毛甾-3-醇的含量为10mg，而24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇的含量为70mg。
[制备实施例3]
向1kg的库拉索芦荟粉末中加入10L的氯仿/甲醇(2∶1)混合物，并在室温下在混合物中浸泡过夜，然后回收氯仿/甲醇混合物。在28℃从混合物中完全除去有机溶剂，得到83g含有具有环羊毛甾烷骨架的化合物的组合物。该组合物的LC-MS检测显示，9，19-环羊毛甾-3-醇的含量为25.8mg，而24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇的含量为24mg。
实施例1
通过使用AKR小鼠进行该实施例来评估通过应用本发明改善胰岛素抗性药剂引起的血清自由脂肪酸(FFA)水平的变化，所述AKR小鼠通过喂食高脂食物诱发胰岛素抗性。
(1)样品制备
将制备实施例3中生产的9，19-环羊毛甾-3-醇和24-亚甲基-9，19-环羊毛甾-3-醇中的每一种溶于DMSO中，且各自浓度用蒸馏水调节至1μg/毫升，从而制备试样1和2。在这种情况下，最后的DMSO浓度调节至0.2％。此外，制备不含试样的溶液作为阴性样品。
(2)试验方法
对6周龄的雄性AKR小鼠(购自杰克逊实验室，美国)预先喂食高-脂饮食(Research Diet，Inc.)2个月以诱导胰岛素抗性。将这些小鼠分组，每组包括8只小鼠。每天用探棒给每组小鼠按每40g体重1ml的剂量(25μg/kg体重)口服给药试样1、2或阴性样品，一天一次。在开始给药样品后的第60天，从禁食的小鼠中收集血液，使用NEFA C-测试Wako(Wako Pure ChemicalIndustries，Ltd.)测量血清中的游离脂肪酸水平。
(3)结果(血液中的游离脂肪酸水平)
表1显示了开始给药后60天的小鼠血清中的游离脂肪酸水平。同给药阴性样品的组比较，可以看出给药试样1或2的组中游离脂肪酸水平趋向于减少到81.1％。因此，这显示给药本发明改善胰岛素抗性的药剂降低了游离脂肪酸的系统水平，从而显示出对引发胰岛素抗性的预防作用。
                     表1

实施例2
通过使用AKR小鼠进行了这个实施例以评价本发明改善胰岛素抗性的药剂对每一脂肪组织细胞中TNF-α和MCP-1产生量的作用，其中所述小鼠通过喂食高脂饮食引起胰岛素抗性。
(1)样品制备
在实施例2中，使用与实施例1中制备的那些相同的试样1、2和阴性样品。
(2)试验方法
对6周龄的雄性AKR小鼠(购自杰克逊实验室，美国)预先喂食高-脂饮食(Research Diet，Inc.)2个月以诱导胰岛素抗性。将这些小鼠分组，每组包括8只小鼠。每天用探棒给每组小鼠按每40g体重1ml的剂量(25μg/kg体重)口服给药试样1、2或阴性样品，一天一次。在开始给药样品后的第60天，从禁食的小鼠中收集附睾脂肪组织，将1g每一脂肪加入1.5ml含有0.5％胎牛血清白蛋白的D-MEM/F12介质中，随后在37℃培养。培养1小时后，收集培养上清，通过ELISA法(Biosource)测量培养上清液中的TNF-α和MCP-1浓度。
(3)结果(TNF-α和MCP-1的产生量)
表2显示了脂肪组织的TNF-α产生量。表3显示了脂肪组织的MCP-1产生量。从结果中可以明显看出，与给药阴性样品的组相比，在给药试样1或2的组中观察到对TNF-α和MCP-1的产生都有显著的抑制作用。本实施例的结果显示，给药本发明改善胰岛素抗性的药剂降低了脂肪组织中加剧胰岛素抗性的脂质细胞因子的产生，并防止引发胰岛素抗性。此外，表中的p值表示Tukey-Kramer′s检验的显著性概率。
                       表2

表中，“*”表示对TNF-α的生成有统计学显著的抑制作用。
                       表3

表中，“*”表示对MCP-1的生成有统计学显著的抑制作用。
实施例3
通过使用AKR小鼠进行胰岛素耐量测试进行了这个实施例，以评价本发明改善胰岛素抗性的药剂对胰岛素敏感性的增强作用，其中所述小鼠通过喂食高脂饮食引起胰岛素抗性。
(1)样品制备
在实施例3中，使用与实施例1和2中制备的那些相同的试样1、2和阴性样品。
(2)试验方法
对6周龄的雄性AKR小鼠(购自杰克逊实验室，美国)预先喂食高-脂饮食(Research Diet，Inc.)2个月以诱导胰岛素抗性。将这些小鼠分组，每组包括8只小鼠。每天用探棒给每组小鼠按每40g体重1ml的剂量(25μg/kg体重)口服给药试样1、2或阴性样品，一天一次。在开始给药样品后的第45天，进行胰岛素耐量试验。在本实施例中，所述胰岛素耐量试验以如下方式进行：将小鼠禁食4小时，然后腹膜内给药0.75U/Kg体重的人胰岛素(Eli Lily and Company)；从开始给药胰岛素时起至60分钟后，测量血糖水平随时间的变化。
(3)结果(胰岛素耐量试验)
本实施例的结果如图1所示。图1显示了胰岛素耐量试验的结果。从图1中可以明显看出，在给药试样1或2的组中，在开始给药胰岛素后立即观察到血糖水平迅速降低，而对于给药阴性样品的组，开始给药胰岛素15分钟后仍未观察到血糖水平降低。本实施例结果显示，给药本发明改善胰岛素抗性的药剂增强了胰岛素敏感性。
工业应用性
本发明提供了改善胰岛素抗性的药剂，其安全没有副作用，且能够提高胰岛素敏感性，并且可提供生理功能食品或饮料，例如用于专门保健用途的含有改善胰岛素抗性药剂的食品。本发明用于改善胰岛素抗性的药剂，以及含有该药剂的生理功能性食品或饮料对于由胰岛素敏感性降低引起的疾病、并发症等等具有改善或预防作用，例如生活方式相关的疾病，如高血压、糖尿病、高脂血症和动脉硬化，并且具有降低这些疾病、并发症等等的风险的作用。