低乳糖部分水解的婴儿食品配方.pdf

本发明涉及低乳糖，部分水解的婴儿食品配方。婴儿食品配方的碳水化合物成分包括0％至60％的乳糖且婴儿食品配方的蛋白质成分包括部分水解的乳清蛋白和酪蛋白，该蛋白质成分具有特定的分子量。

权利要求书
1.  一种婴儿食品配方，包括：
碳水化合物成分，其包括约0％至60％的乳糖，基于婴儿食品配方中存在的碳水化合物的总重；和
蛋白质成分，其包括部分水解的乳清蛋白和酪蛋白，其中乳清蛋白与酪蛋白的比例为约50∶50至70∶30，且其中蛋白质水解产物具有的肽覆盖以下作为其摩尔质量的函数的分子量分布范围：
    摩尔质量(以道尔顿计)    ％分子量分布    ＜500    11-20    500-1000    25-38    1000-2000    27-30    2000-3000    8-16    3000-5000    3-10    ＞5000    2-11

2.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中蛋白质水解产物具有的肽覆盖以下作为其摩尔质量的函数的分子量分布：
    摩尔质量(以道尔顿计)    ％分子量分布    ＜500    17    500-1000    35.1    1000-2000    30.9    2000-3000    9.6    3000-5000    4.2    ＞5000    2.8

3.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中乳清蛋白：酪蛋白的比例为约60∶40。

4.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中碳水化合物成分包括约15％至55％的乳糖。

5.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中碳水化合物成分包括约20％至30％的乳糖。

6.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中碳水化合物成分包括约25％重量百分比的乳糖和约75％重量百分比的玉米糖浆固体。

7.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中蛋白质成分的水解程度为约4％至10％。

8.  根据权利要求6的婴儿食品配方，其中蛋白质成分的水解程度为约6％至9％。

9.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中婴儿食品配方另外包括至少一种益生菌。

10.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中婴儿食品配方另外包括至少一种益生元。

11.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中婴儿食品配方另外包括LCPUFA。

12.  根据权利要求11的婴儿食品配方，其中LCPUFA包括DHA或ARA。

13.  根据权利要求11的婴儿食品配方，其中LCPUFA包括约3mg/kg体重/天至约150mg/kg体重/天含量的DHA。

14.  根据权利要求11的婴儿食品配方，其中LCPUFA包括约5mg/kg体重/天至约150mg/kg体重/天含量的ARA。

15.  根据权利要求10的婴儿食品配方，其中LCPUFA包括DHA和ARA。

16.  根据权利要求14的婴儿食品配方，其中ARA∶DHA的比例为约1∶3至约9∶1。

17.  根据权利要求14的婴儿食品配方，其中ARA∶DHA的比例为约1∶2至约4∶1。

18.  根据权利要求14的婴儿食品配方，其中ARA∶DHA的比例为约2∶3至约2∶1。

19.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中婴儿食品配方是粉末状形式。

20.  根据权利要求1的婴儿食品配方，其中婴儿食品配方是液体形式。

21.  预防受试者过敏症发作的方法，该方法包括给予受试者根据权利要求1的婴儿食品配方。

说明书低乳糖部分水解的婴儿食品配方
发明领域
本发明涉及低乳糖部分水解的婴儿食品配方。

背景
食物过敏是食品摄入后产生的免疫介导的临床综合征。伴随食物过敏的不良反应通常是速发型免疫球蛋白E(IgE)介导的反应，也称为食物蛋白过敏。Host，A.等，Dietary Products Used in Infants forTreatment and Prevention of Food Allergy(用于治疗和预防婴儿食物过敏的食品)，Arch.Dis.Child 81：80-84(1999)。食物蛋白过敏的症状包括血管性水肿、荨麻疹、湿疹、哮喘、鼻炎、结膜炎、呕吐或过敏症。
牛奶过敏是幼儿中最常见的食物蛋白过敏并在全部婴儿的大约2％至3％中发生。Sampson，H.A.，Food Allergy.Part 1：Immunopathogenesis and Clinical Disorders(食物过敏。第一部分：免疫发病机理和临床疾病)，J Allergry Clin Immunol.103：717-728(1999)。对于婴儿中牛奶过敏发病率的一种可能的解释是在大部分常规婴儿食品配方中找到的完整牛奶蛋白是婴儿遇到的最早和最常见的食物过敏原。此外，婴儿特别易于对牛奶过敏，因为他们的肠粘膜对不完全消化的大分子比成人具有更大的通透性。Moran R.，Effectsof Prolonged Exposure to Partially Hydrolyzed Milk Protein，J.Pediatr.121：S90-S4(1992)。
尽管不存在可以完全治愈牛奶过敏的已知治疗，但可以通过食用水解蛋白质的食品配方来预防或降低婴儿中的牛奶和其他过敏。已经表明食用含有部分和大量水解蛋白质的婴儿食品配方替代只含有完整蛋白质的常规食品配方可以降低婴儿将来过敏的风险。同前。因此，如果婴儿具有过敏家族史，食用水解蛋白质食品配方可以降低儿童在将来产生过敏的风险。
水解蛋白质食品配方的特征在于大量水解或部分水解。含有大量水解蛋白质的婴儿食品配方(EHF)基于牛奶，但是蛋白质已经用酶处理来分解大部分引起过敏相关症状的蛋白质。可购的EHF的一个实例是EnfamilNutramigen。这是一种基于酪蛋白的低变应原婴儿配方奶粉，用于对牛奶和大豆食品配方中的完整蛋白敏感的足月婴儿。另一方面，含有部分水解蛋白质的婴儿食品配方(PHF)，已经用酶处理，以仅仅分解一些牛奶蛋白。
理想地，任何婴儿食品配方，包括PHF，应当尽可能接近地模拟人乳。在人乳中，存在两种主要的蛋白质，乳清蛋白和酪蛋白。乳清蛋白通常构成人乳中约60％的蛋白，而酪蛋白通常构成约40％。Lonnerdal，B.，Biochemistry and Physiological Functions of Human MilkProteins，Am.J.Clin.Nutr.42：1299-1317(1985)。
除了模拟人乳的蛋白含量，PHF应当不会引起或加重碳水化合物吸收的困难。基于牛奶的婴儿食品配方中的主要碳水化合物是乳糖。乳糖是葡萄糖和半乳糖的二糖，且对于身体需要乳糖酶来消化乳糖。如果位于肠上皮细胞表面膜上的乳糖酶没有存在足够的含量，身体可能不会完全消化乳糖。这种情况，通常称为乳糖不耐受性，可以导致如腹胀、产气、腹绞痛和腹泻的症状。
避免婴儿中乳糖不耐受性的不利副作用的一种方式是提供低乳糖婴儿食品配方，用于补充营养或替代人乳。低乳糖婴儿食品配方通常含有少量百分比的包括乳糖的碳水化合物。剩余的碳水化合物内含物源自另一种来源，如玉米糖浆固体。
已经公开了各种婴儿配方奶粉，但是没有一种提供本发明的综合益处。例如，Martinez等的U.S.专利No.5,405,637涉及乳蛋白部分水解产物和含有其的婴儿食品配方。然而，该专利没有公开含有约0％至60％的乳糖含量的婴儿食品配方。此外，尽管该参考文献公开了约6至9％的水解程度，Martinez参考文献的蛋白水解产物没有公开具有本发明中所用蛋白水解产物的分子量。
Kratky等的U.S.专利No.6,777,931涉及具有低苏氨酸含量的婴儿食品配方组合物。尽管该参考文献讨论了使用乳清蛋白和酪蛋白，但所用的乳清蛋白是被修饰过的，使得已经除去了caseino-glyo-巨肽(cGMP)。此外，该参考文献没有公开包括具有和本发明中一样的特定分子量谱的部分水解产物的婴儿食品配方。
Griffin等的U.S.专利No.6,162,472涉及包括酪蛋白和乳清蛋白并含有低于20％的乳糖含量的婴儿食品配方，但是没有公开部分水解产物食品配方。
Braun等的U.S.专利No.6,171,621，Bindels等的U.S.专利No.6,863,918和Kamarel的U.S.专利No.6,194,009，全部涉及各种基于蛋白质水解产物的婴儿食品配方和营养产品。然而，这些专利没有公开含有约50∶50至70∶30乳清蛋白∶酪蛋白比例的补充剂或食品配方。此外，各种专利的部分水解产物没有公开具有本申请中所用分子量的水解产物。
发明概述
简而言之，本发明涉及新的婴儿食品配方，其含有包括约0％至60％的乳糖的碳水化合物成分，其中所述百分比基于配方中存在的碳水化合物的总重；和部分水解的乳清蛋白和酪蛋白的蛋白质成分，其中乳清蛋白与酪蛋白的比例约50∶50至70∶30且其中蛋白质水解产物具有的肽覆盖如表1中所示的作为它们摩尔质量的函数的分子量分布范围。
表1
    摩尔质量(道尔顿)    ％分子量分布    ＜500    11-20    500-1000    25-38    1000-2000    27-30    2000-3000    8-16    3000-5000    3-10    ＞5000    2-11
在发现的通过本发明获得的几种优势中，乳蛋白部分水解产物具有与人乳相似的蛋白质组成、改善的口味和提高的乳化特性。此外，本发明诱导的IgG抗体应答的引发效应低于完整牛奶所诱导的。因此，本发明可具有降低的免疫原性可能性。
优选实施方案的详述
现在详细地参照本发明的实施方案，以下列出了其中的一个或多个实施例。通过本发明的解释提供了每个实施例，但不是限制本发明。实际上，本领域技术人员清楚可以在本发明中形成各种改进和改变而没有脱离本发明的范围和精神。例如，作为一个实施方案的一部分说明或描述的特征可以用于另一个实施方案来产生再一个的实施方案。
因此，确定本发明涵盖这样的改进和改变，如在所附权利要求及其等价物的范围内一样。本发明的其他目的、特征和方面公开于以下的详述中或从以下的详述看是显而易见的。本领域技术人员将理解本发明的讨论只是示例实施方案的描述，不是作为本发明更宽方面的限制。
定义
如在此所用的，术语“低乳糖”意思是低于100％的乳糖含量，包括0％的乳糖。
术语“水解程度”意思是肽键通过酶水解反应破坏的程度。测量显示出水解中破坏的特异性肽键的数量，作为完整蛋白中存在的特异性肽键总数的百分数。
术语“益生菌(probiotic)”意思是对宿主的健康呈现出有益效果的微生物。
如在此所用的，术语“益生元(prebiotic)”意思是通过选择性刺激结肠中可以提高宿主健康的一种或有限数量的细菌的生长和/或活性而有益地影响宿主的不可消化的食品成分。
术语“受试者”意思是任何哺乳动物，优选人。
如在此所用的，术语“婴儿”是小于约一岁大的人。
如在此所用的，术语“婴儿食品配方”意思是作为人乳替代品满足婴儿营养需求的组合物。在美国，婴儿食品配方的内含物通过21C.F.R.部分100、106和107列出的联邦法规来规定。这些法规限定了努力刺激人乳营养和其他特性的大量营养元素、维生素、矿物质和其他配料含量。
发明
根据本发明，已经发现了新的婴儿食品配方。该婴儿食品配方具有低乳糖含量并包括部分水解酪氨酸和乳清蛋白的混合物。婴儿食品配方的蛋白质部分水解产物具有形成不同于现有技术产品的特定和独特的分子量分布。
本发明提供了与人乳中发现的相似的乳清蛋白∶酪蛋白比例。在特定的实施方案中，乳清蛋白∶酪蛋白的比例为约50∶50至70∶30。在另一个实施方案中，酪蛋白∶乳清蛋白的比例为约60∶40。
本发明中所用的乳清蛋白可以源自本领域已知的任何来源。在一个实施方案中，乳清蛋白可以来源于获自甜干酪制造的未加工乳清、来自通过超滤(UF乳清)、离子交换和/或电泳(ED乳清)获得的乳清蛋白浓缩物(WPC)，或从已经处理降低乳清的乳糖含量的乳清分离物获得。
本发明中所用的酪蛋白还可以源自本领域已知的任何来源。例如，酪蛋白可以是酸酪蛋白或无脂乳固体(NFM)。
可以将乳清蛋白和酪蛋白稀释或重建成含有约20％至25％总固体和以干基计约40％至50％蛋白质的溶液。
在本发明中，碳水化合物成分包括约0％至60％的乳糖。在本发明的另一个实施方案中，碳水化合物成分包括约15％至55％的乳糖。在本发明的另一个实施方案中，碳水化合物成分包括约20％至30％的乳糖。在本发明的特定实施方案中，碳水化合物成分包括约1％至25％的乳糖。在这些实施方案中，碳水化合物的剩余来源可以是本领域已知的任何碳水化合物来源，如乳糖、葡萄糖、玉米糖浆固体、麦芽糖糊精、蔗糖、淀粉、大米糖浆固体等。在特定的实施方案中，碳水化合物成分包括约25％的乳糖和约75％玉米糖浆固体。
可以将乳糖加入婴儿食品配方中或可以天然存在婴儿食品配方的成分中。在本发明的一个实施方案中，乳糖天然存在于干的水解产物中。在这个实施方案中，干燥水解产物的约30％至70％可构成碳水化合物。在特定的实施方案中，约50％的干燥水解产物构成碳水化合物。
在本发明的一个实施方案中，乳糖含量可以为0％。在这个实施方案中，可以使用本领域已知的任何方法处理水解产物来除去乳糖内含物。或者，可以使用无乳糖的乳蛋白成分来制备婴儿食品配方。
在本发明中，使用蛋白水解酶，蛋白酶N来水解蛋白质。蛋白酶N“Amano”从Amano Enzyme U.S.A.Co.，Ltd.，Elgin，IL.可购得。蛋白酶N是源自细菌种枯草芽胞杆菌(Bacilllus subtilis)的蛋白水解酶制剂。规定蛋白酶粉末为“不低于150,000单位/g”，意思是一单位的蛋白酶N是在7.0的pH持续60分钟产生等于100微克酪氨酸的氨基酸的酶含量。为了生产本发明的婴儿食品配方，可以使用待水解总蛋白重量的约0.5％至约1.0％的蛋白酶N。
通过蛋白酶N的蛋白水解通常在约50℃至约60℃的温度进行。将水解进行一定的时间段，使得获得约4％至约10％的水解程度。在特定的实施方案中，将水解进行一定的时间段，使得获得约6％至9％的水解程度。在另一个实施方案中，将水解进行一定时间段，使得获得约7.5％的水解程度。这种水解水平需要花费约半小时至约3小时。
在水解过程中应当维持恒定的pH。在本发明的方法中，将pH调节并维持于约6.5至8。在特定的实施方案中，将pH维持于约7.0。
为了维持乳清蛋白、酪蛋白、水和蛋白酶N溶液的最佳pH，可以使用氢氧化钠和/或氢氧化钾的苛性碱溶液来调节水解过程中的pH。如果用氢氧化钠来调节pH，那么加入溶液中的氢氧化钠的含量应当控制至构成低于最终蛋白质水解产物中约0.3％总固体的水平。也可以使用10％氢氧化钾溶液来调节溶液的pH至所需的值，在加入酶之前或在水解过程中，以便维持最佳pH。
通过pH-stat或通过连续和按比例加入苛性碱溶液来控制蛋白水解过程中加入溶液中的苛性碱溶液含量。通过标准分批方法或通过连续方法来制造水解产物。
为了更好确保蛋白质部分水解产物的恒定质量，使水解产物接受酶灭活来终止水解过程。酶灭活步骤可以包括在约82℃的温度至少处理约10分钟。或者，可以通过将溶液加热至约92℃的温度约5秒钟来灭活酶。完成酶灭活后，可以将水解产物以液体状态存储于低于10℃的温度。
在本发明的实施方案中，根据在此所述的方法制得的液体部分蛋白水解产物可以按原样使用并和其他配料混合来制备婴儿食品配方。或者，可以通过喷雾干燥液体水解产物产生粉末形式的部分水解产物。然后可以将喷雾干燥的水解产物掺入婴儿食品配方中。在另一个实施方案中，可以通过蒸发来浓缩液体部分水解产物，然后喷雾干燥。再次，可以将喷雾干燥的水解产物掺入婴儿食品配方中。可以使用本领域已知的任一种婴儿食品配方配制方法来配制含有所述部分水解蛋白质的婴儿食品配方。
本发明的婴儿食品配方可以在营养上是完全的并通常含有合适类型和含量的脂质、碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质。脂质或脂肪的含量通常为约3至约7g/100千卡。脂质来源可以是本领域任何已知的，包括植物油，如棕榈油、大豆油、棕榈精(palmolein)、椰子油、中链甘油三酯油、高油酸向日葵油、高油酸红花油等。蛋白质的含量通常可为约1至约5g/100千卡。碳水化合物的含量通常可为约8至约12g/100千卡。
婴儿食品配方可以包括益生菌。本领域已知的任何益生菌在这个实施方案中是可接受的。在特定的实施方案中，益生菌选自乳杆菌(Lactobacillus)和双歧杆菌(Bifidobacterium)。
在本发明的另一个实施方案中，婴儿食品配方可以含有一种或多种益生元。本领域已知的任何益生元在这个实施方案中是可接受的。本发明的益生元可以包括乳果糖、低聚半乳糖、低聚果糖、低聚异麦芽糖、低聚大豆糖、乳蔗糖、低聚木糖和低聚龙胆糖。
在本发明的其他实施方案中，婴儿食品配方可以含有其他成分，如长链多不饱和脂肪酸(LCPUFA)。合适的LCPUFA包括，但不限于，α-亚油酸、γ-亚油酸、亚油酸、亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)、花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA)。在一个实施方案中，婴儿食品配方含有DHA。另一个实施方案中，婴儿食品配方含有ARA。再一实施方案中，本发明的婴儿食品配方含有DHA和ARA。
在一个实施方案中，将DHA和ARA掺入本发明的婴儿食品配方中。在该实施方案中，ARA∶DHA的重量比通常为约1∶3至约9∶1。或者，该比例可以为约1∶2至约4∶1。在另一个可替换的实施方案中，比例为约2∶3至约2∶1。在一个特定的实施方案中，比例为约2∶1。
本发明实施方案中的DHA有效量通常为约3mg/kg体重/天至约150mg/kg体重/天。在本发明的一个实施方案中，DHA的含量为约6mg/kg体重/天至约100mg/kg体重/天。在另一个实施方案中，含量为约10mg/kg体重/天至约60mg/kg体重/天。再一实施方案中，含量为约15mg/kg体重/天至约30mg/kg体重/天。
供本发明使用的婴儿食品配方中的DHA含量通常为约5mg/100千卡至约80mg/100千卡。在本发明的一个实施方案中，DHA的含量为约10mg/100千卡至约50mg/100千卡；在另一个实施方案中，为约15mg/100千卡至约20mg/100千卡。在本发明的特定实施方案中，DHA的含量为约17mg/100千卡。
本发明实施方案中的ARA有效量通常为约5mg/kg体重/天至约150mg/kg体重/天。在本发明的一个实施方案中，ARA的含量为约10mg/kg体重/天至约120mg/kg体重/天。在另一个实施方案中，含量为约15mg/kg体重/天至约90mg/kg体重/天。再一实施方案中，含量为约20mg/kg体重/天至约60mg/体重/天。
本发明中所用婴儿食品配方中的ARA含量通常为约10mg/100千卡至约100mg/100千卡。在本发明的一个实施方案中，ARA的含量为约15mg/100千卡至约70mg/100千卡。在另一个实施方案中，ARA的含量为约20mg/100千卡至约40mg/100千卡。在本发明的特定实施方案中，ARA的含量为约34mg/100千卡。
可以使用本领域已知的标准技术将DHA和ARA补充至本发明中。例如，可以通过替换等量的通常存在于食品配方中的油如高油酸向日葵油，将DHA和ARA加入补充剂或食品配方中。作为另一个实施例，可以通过替换等量的通常存在于没有DHA和ARA的食品配方中的剩余的全部脂肪混合物，将含有DHA和ARA的油加入补充剂或食品配方中。
DHA和ARA的来源可以是本领域已知的任何来源。在本发明的实施方案中，DHA和ARA的来源是单细胞油，如U.S.专利No.5,374,567；5,550,156；和5,397,591中所教导的，在此将其公开内容全部引入作为参考。然而，本发明不仅限于这样的油。DHA和ARA可以是天然或精制形式的。
在一个实施方案中，DHA和ARA的来源基本上没有二十碳五烯酸(EPA)。例如，在本发明的一个实施方案中，婴儿食品配方含有低于约16mg EPA/100千卡；在另一个实施方案中，低于约10mgEPA/100千卡；再一实施方案中，低于约5mg EPA/100千卡。一个特定实施方案基本上不含有EPA。另一个实施方案是无EPA，因为甚至痕量EPA也不存在于配方中。
本发明的婴儿食品配方具有特定的分子量分布。与现有技术中发现的其他部分水解产物相比较，分子量分布具有证实的可接受乳化和口味特性。此外，已经表明特定的分子量分布诱导比完整的乳蛋白少的血清IgG抗体效应。
在本发明的一个实施方案中，根据在此公开的方法制得的部分蛋白水解产物可以掺入营养补充剂中。可以以液体形式使用部分蛋白水解产物并和其他配料混合来制得液体营养补充剂。或者，可以将部分蛋白水解产物喷雾干燥并掺入粉末状营养补充剂中。可以使用本领域已知的任一种营养补充剂配制方法来配制含有所述部分水解蛋白的营养补充剂。
使用大小排阻色谱(SEC)来测定通过之前所述的水解方法形成的水解产物肽的分子量分布。具体地，称出足够量的粉末状婴儿食品配方来提供0.5克蛋白质至50ml圆锥形离心管中。加入水使试管至45ml的体积。将混合物置于Sarstedt D-5223混合机中并混合一小时。混合后，将另外5ml水加入试管中来形成1％的蛋白质溶液。制备储液标准物，并且也混合一小时。
分开地，将14.91克氯化钾(KCl)加入1000ml烧杯中。将700ml水加入烧杯中来溶解KCl。然后将250ml乙腈和1.0ml三氟乙酸加入KCl溶液中(洗脱液)。使用0.2M K2HPO4溶液将pH调节至3.0。
将HPLC试剂瓶装满并用洗脱液洗涤瓶子，留出约50ml用于样品和标准的稀释。用洗脱液清洗Hitachi L-6200A Intelligent Pumplines，并用洗脱液将柱子平衡一小时。
将样品混合一小时后，将5.0ml每种样品移至玻璃螺帽管中。还将5.0ml二氯甲烷移至每个管中。将管盖上塞子并通过倒置四次来混合。然后将样品在200Xg离心五分钟。
在样品离心的时候，用洗脱液(800μl+3200μl)稀释储备标准品1-5。或者，将大约1ml每种标准品移至两个自动取样器小瓶中的每一个并盖上塞子。
用洗脱液(100μl+900μl)稀释离心样品1-10的上层(含水)。如下将小瓶装入自动取样器盘中：空白、标准、样品和第二标准。将盘置于Hitachi自动取样器中。使用自动取样器前面的键(key)将全部待运行的小瓶送入自动取样器程序中，样品得到运行。结果表明了蛋白质的分子量谱。
在一个实施方案中，本发明的部分水解产物具有2000的平均分子量，具有以上表1中所示的分子量分布范围。
在另一个实施方案中，本发明的部分水解产物具有表2中所示的分子量分布。
表2
    摩尔质量(以道尔顿计)    ％分子量分布    ＜500    17    500-1000    35.1    1000-2000    30.9    2000-3000    9.6    3000-5000    4.2    ＞5000    2.8
以下实施例描述了本发明的各种实施方案。在此权利要求范围内的其他实施方案对于本领域技术人员在考虑在此公开的本发明的说明或实施后而言将是显而易见的。说明书，和实施例一起，被认为只是示例性的，本发明的范围和精神通过实施例后的权利要求来确定。在实施例中，以重量基给出所有百分比，除非另外指出。
实施例1
该实施例说明了生产蛋白质部分水解产物的方法。最初，将60.3kg非乳固体(奶粉)和37.4kg乳清蛋白浓缩物(60％)在含有54℃水的罐中混合。浆液具有20％至23％的总固体含量。然后测量浆液的pH。将氢氧化钠和氢氧化钾加入浆液中，将浆液的pH调节至7.0。调节pH后，将0.5kg Amano N酶加入浆液中。在Amano N加入浆液中之后，使用氢氧化钠和氢氧化钾继续将pH调节至7.0。加入浆液中的氢氧化钠总量为0.3kg。加入浆液中的氢氧化钾总量为1.5kg。
使水解进行90分钟，时间从Amano N酶加入浆液中开始。90分钟结束时，将浆液热处理使酶灭活。热处理由将浆液的温度升高至82℃持续10分钟组成。该实施例中获得的水解程度为6％至9％。然后将浆液冷却并喷雾干燥来获得粉末状水解产物。
实施例2
该实施例说明了可以用于制备本发明婴儿食品配方的配料的一个实施方案。
表3：水解产物的一个实施方案的配制方案
配料Kg/100kg干燥的水解产物脱脂乳固体60.3乳清蛋白浓缩物37.4氢氧化钾1.5酶(Amano N)0.5氢氧化钠0.3
可以将维生素加入表3的配料中。可以加入食品配方中的维生素实例包括维生素A、维生素D3、维生素E、维生素K1、硫胺素、核黄素、盐酸维生素B6、维生素B12、烟酰胺、叶酸、泛酸钙、生物素和抗坏血酸。
还可以将矿物质加入表3的配料中。可以加入食品配方中的矿物质实例包括磷酸钙、甘油磷酸钙、葡糖酸钙、柠檬酸钠、氯化钾、柠檬酸钾、磷酸钾、磷酸镁、硫酸亚铁、硫酸锌和硫酸铜。
实施例3
该实施例说明了实施例1中获得的蛋白质部分水解产物的IgG抗体应答的引发效应。在位于整个美国的七个小儿科实践中研究了三百二十三名婴儿。受试者是出生后不久登记的健康足月婴儿。
将其母亲表示愿意母乳喂养的婴儿分为A组。以双盲的方式将其母亲选择不母乳喂养的那些婴儿随机分成B组或C组。B组中的婴儿接受含有实施例1中获得的蛋白质部分水解产物的婴儿食品配方。C组中的婴儿接受可购得的基于乳清蛋白为主要物的奶的食品配方(Enfamil，从Mead Johnson Co.，Evansville，IN获得)。两种配方含有相同含量的蛋白质、碳水化合物和脂肪。
在所有地点以月为间隔评价直至4个月的婴儿，在七个地点中的三个评价6个月和8个月龄的婴儿。接受时和3、6和8个月大时进行抽血，用于检测对奶的血清抗体。通过生物素-抗生物素蛋白酶联免疫吸附测定定量IgE抗乳蛋白抗体；使用Burks等，Burks，A.W.，等，Antibody Response to Milk Protein in Patients with Milk ProteinIntolerance Documented by Challenge，J.Allergy Clin.Immunol.85：921-927(1990)中所述的酶联免疫吸附测量来测定IgG抗-乳蛋白抗体。抽取另外的血来测量铁蛋白和血红蛋白的血清水平并测定在8个月大检测的婴儿的血细胞比容。
在允许进入研究时所有组中对奶的IgG抗体的平均血清浓度是相当的。然而，喂养食品配方C的婴儿组中对奶的血清IgG抗体的提高显著大于喂养母乳(组A)或食品配方B的那些。B组中这种对奶的IgG抗体的较低浓度表明了完整的牛奶蛋白对IgG抗体应答(组C)具有较大的引发效应。因此，B组的部分水解奶蛋白具有降低的免疫原可能性。
在登记时，三个组中对奶的IgE抗体的平均血清浓度没有发现显著差异。此外，在整个研究中的喂养方案中，IgE水平不存在显著差异。8个月大时的平均血清铁蛋白、血细胞比容和血红蛋白值在正常范围内，在三个组中没有发现显著差异。
实施例4
该实施例说明了补充根据本发明的方法制得的蛋白质部分水解产物的婴儿食品配方的特定实施方案。在该实施例中，乳糖构成约23.5％的碳水化合物成分。
表4：婴儿食品配方的营养信息
配料    每100kg玉米糖浆固体    44.256kg部分水解的NFM和WPC固体    26.865kg脂肪混合物    26.628kg单细胞ARA和DHA油混合物    0.709kg碳酸钙    0.400kg磷酸钙，三价的    0.200kg氯化钾    0.200kg氯化胆碱    0.134kg磷酸镁    0.100kgL-肉毒碱    0.010kg抗坏血酸    162.900g肌醇    39.887g牛磺酸    33.875g醋酸生育酚    25.278g维生素A    7.871g烟酰胺    6.475g维生素K1    5.454g泛酸钙    3.299g维生素B12    2.122g生物素研制品    1.608g维生素D3    0.969g核黄素    0.755g盐酸硫胺素    0.601g盐酸吡哆醇    0.518g叶酸    0.122g硫酸亚铁，七水合物    49.600g乳糖    138.017g硫酸锌    16.422g亚硒酸钠    0.018g硫酸铜    1.688g硫酸镁    0.239g
在该实施例中，乳糖是天然存在于部分水解的NFM和WPC固体中。更特别地，约50％的部分水解NFM和WPC固体构成乳糖。因此，那些NFM和WPC固体中存在的乳糖含量大约为13.433kg。组合物中另外存在138.017g乳糖。婴儿食品配方中总计大约13.571kg乳糖。
婴儿食品配方中存在44.256kg的玉米糖浆固体。总的碳水化合物含量为57.827kg，乳糖只构成总的13.571kg。因此，乳糖构成婴儿食品配方中总碳水化合物含量的大约23.5％。
本说明书中引用的所有参考文献，包括但不限于，所有论文、出版物、专利、专利申请、讲座、教科书、报告、手稿、小册子、书本、互联网登入、杂志文章、期刊等，在此以其整体引入本说明书中作为参考。确定在此的参考文献的讨论只是概括其作者形成的主张而没有承认形成任何参考文献构成现有技术。申请人保留置疑所引用参考文献的准确性和相关性的权利。
尽管已经使用特定的术语、装置和方法描述了本发明的优选实施方案，这样的描述只是用于说明的目的。所用的词语是描述性词语而不是限制。理解本领域技术人员可以形成改变和变化而没有脱离列于以下权利要求中的本发明的精神或范围。此外，应当理解各种实施方案的各方面可以全部或部分相互交换。例如，尽管已经举例说明了根据那些方法形成的无菌液体婴儿食品配方的生产方法，但包括其他用途。因此，所附的权利要求的精神和范围不限于其中所含的优选形式的描述。