罗汉果苷V含量≥40的罗汉果提取物及其制备方法.pdf

本发明提供了罗汉果苷V≥40％、罗汉果苷≥98％的牛奶白色罗汉果提取物，公开了该提取物的制备方法，它以鲜罗汉果为原料，经水提取→浓缩→酶解→大孔吸附树脂精制→离子交换树脂脱色→浓缩→喷雾干燥制得，本发明的优点在于：找到了适合工业化生产的各步骤的工艺参数，使罗汉果提取物的产量和质量都明显提高，有明显的经济效益和社会效益。

权利要求书
1.  罗汉果苷V含量≥40％的罗汉果提取物，其特征在是：以鲜罗汉果为原料，经水提取→浓缩→酶解→大孔吸附树脂精制→离子交换树脂脱色→浓缩→喷雾干燥制得的罗汉果苷≥98％、罗汉果苷V≥40％，颜色为牛奶白色结晶性粉末产品。

2.  罗汉果苷V含量≥40％的罗汉果提取物的制备方法，包括破碎、水提、浓缩、酶解、抽滤、大孔吸附树脂精制、离子交换树脂脱色、回收乙醇、浓缩、喷雾干燥等步骤，其特征是：
(1)提取：水提取3次，每次加水量为鲜果重量的3-4倍，第一次浸提1.5h，第二次、第三次各1h；
(2)水浸提液浓缩倍数为原料重的4-5倍；
(3)酶解：加入的酸为枸橼酸或柠檬酸，调节的pH值为3.3-3.8之间，加入的酶为果胶酶和蛋白酶，加入量分别为鲜果重的0.02-0.05％，0.01-0.03％，果胶酶水解时间为60min，蛋白酶水解时间为40min；
(4)大孔吸附树脂精制：所用树脂为D-101大孔吸附树脂或AB-8大孔吸附树脂柱，解吸乙醇的度数为50～65°之间。
(5)离子交换树脂脱色：所用树脂为D-280强碱性阴离子交换树脂或LSA-700强碱性阴离子交换树脂，洗脱溶剂，用50～60°乙醇或纯化水；
(6)再浓缩：将洗脱液浓缩到14-17波美度，再喷雾干燥即可得到罗汉果苷V≥40％，罗汉果苷≥98％的牛奶白色结晶性粉末状的高品质罗汉果提取物。

说明书罗汉果苷V含量≥40%的罗汉果提取物及其制备方法
技术领域
本发明涉及罗汉果有效成分及其提取方法，具体是罗汉果苷V含量≥40％的罗汉果提取物及其制备方法。
背景技术
罗汉果提取物中的主要有效成分是罗汉果苷，其中罗汉果苷V(MogrosideV)是罗汉果苷类化合物中的主要甜味成分，也是对罗汉果提取物进行含量测定时的检定物质。它不仅具有高甜度、低热量、口感好的特点，还具有多种医药与保健作用。目前罗汉果苷V的提取方法很多，但多处在实验室阶段，没有应用到工业化生产。另外，罗汉果苷V的提取物产品含量也不高，市场销售的只有两种规格，一种是罗汉果苷80％，罗汉果苷V25％，另一种是罗汉果苷95％，罗汉果苷V30％，尚未见有罗汉果苷≥98％、罗汉果苷V≥40％的罗汉果提取物为产品的报导。
发明内容
本发明的目的是提供一种罗汉果苷V≥40％、罗汉果苷≥98％的牛奶白色罗汉果提取物及这种提取物的制备方法。
一种罗汉果苷V含量≥40％的罗汉果提取物，以鲜罗汉果为原料，经水提取→浓缩→酶解→大孔吸附树脂精制→离子交换树脂脱色→浓缩→喷雾干燥制得的罗汉果苷≥98％、罗汉果苷V≥40％，颜色为牛奶白色结晶性粉末产品。
产品经测试，甜度为蔗糖的300倍以上，比目前市售上的罗汉果提取物产品甜度高，口感好。
罗汉果苷V含量≥40％的罗汉果提取物的制备方法，包括：鲜罗汉果破碎、提取、浓缩、酶解、大孔吸附树脂精制，离子交换树脂脱色，再浓缩、喷雾干燥等步骤，其特征是：
(1)提取：水提取3次，每次加水量为鲜果重的3-4倍，第一次浸提1.5h，第二次、第三次各1h；
(2)水浸提液浓缩倍数为原料重的4-5倍；
(3)酶解：加入的酸为枸橼酸或柠檬酸，调节的pH值为3.3～3.8之间，加入的酶为果胶酶和蛋白酶，加入量分别为鲜果重的0.02-0.05％，0.01-0.03％，果胶酶水解时间为60min，蛋白酶水解时间为40min；
(4)大孔吸附树脂精制：所用树脂为D-101大孔吸附树脂或AB-8大孔吸附树脂柱，解吸乙醇的度数为50-65°之间。
(5)离子交换树脂脱色：所用树脂为D-280强碱性阴离子交换树脂或LSA-700强碱性阴离子交换树脂，洗脱溶剂，用50-60°乙醇或纯化水；
(6)再浓缩：将洗脱液浓缩到14-17波美度，再喷雾干燥即可得到罗汉果苷V≥40％，罗汉果苷≥98％的乳白色结晶性粉末。
本发明的优点在于：
1.找到了提取高含量罗汉果苷V与罗汉果苷的罗汉果提取物工业化生产的工艺参数与方法；
2.制备了罗汉果苷V含量≥40％，罗汉果苷含量≥98％的高含量罗汉果提取物产品；
3.浓缩缩短了生产周期，减少了后期上柱的进料量，避免以往直接进料所导致的生产周期长；
4.将生物技术与中药化学技术有机结合起来，实现了工业化大生产；
5.酶解去除了果胶、蛋白质等影响过滤以及产生大量泡沫的物质，将这些物质沉淀或者酶解成小分子物质，使得后面的离心及抽滤极为容易，浓缩减少泡沫，解决了以往极难过滤，经常堵塞滤孔而难以进入下道生产工序的问题；纯化了进大孔吸附树脂的料液，延长了大孔吸附树脂的使用寿命；提高了半成品纯度，明显提高了罗汉果苷V的含量；
6、酶解一步放在层析之前，使得浓缩液过滤容易，解决常规方法导致的浓缩液极难过滤的问题；
7.用大孔树脂层析经过酶解后的上柱液，明显提高了罗汉果苷V的含量，比以往工艺提高10％以上，解决大孔树脂精制罗汉果苷V难以超过32％的问题；
8.用阴离子交换树脂进行大孔吸附树脂解吸液的脱色，使酚酸性色素等小分子物质被离子交换树脂交换吸附，而分子状态的罗汉果苷未被吸附，从而提高了产品的色泽和罗汉果苷V的含量，使得罗汉果提取物由淡黄色至棕黄色变成牛奶白色的色泽好的产品；同时罗汉果苷V的含量提高了8％以上；用这两种树脂时，大孔树脂解吸液不需要经过浓缩回收乙醇，可以直接上柱，再用乙醇洗脱或者纯化水洗脱，这样就明显缩短了生产周期和生产步骤，节约时间，避免操作烦琐；
9.为罗汉果的深加工创出了一条新路，具明显经济效益和社会效益。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明的具体实施方式作进一步的描述：
实施例1：
罗汉果苷≥98％、罗汉果苷≥40％，颜色为牛奶白的高含量罗汉果提取物制备方法，包括如下步骤：
1.提取：将鲜罗汉果1000Kg破碎后投入提取罐中(以不打碎籽为宜)，用纯化水于微沸状态下提取3次，每次均加入4000Kg的纯化水，提取时间分别为1.5h、1h、1h，每次过滤后的滤渣进入下一次提取；
2.浓缩：将3次罗汉果提取液合并后浓缩至鲜果：浓缩液为1∶4，即4000L；
3.酶解：将浓缩液冷却至45～50℃，然后开通蒸汽保持温度在此范围之内，加入枸橼酸调节pH值为3.4，再加入鲜果重量0.03％的果胶酶0.3Kg，在此温度下酶解1h；升温至90℃，将果胶酶灭活，再降温至45～50℃，继续保持温度在此范围之内；加入鲜果重量0.02％的蛋白酶0.2Kg，在此温度下酶解40min；升温至90℃，将蛋白酶灭活；抽滤，滤液即为上柱液；
4.大孔吸附树脂精制：将上柱液进D-101大孔吸附树脂柱，以流出液无甜味且上料液颜色下降至树脂床高4/5时为上料终点；进完料液后，先用纯化水洗至无色透明，然后用50度乙醇解吸，自有甜味开始收集，共收集解吸液2400L；
5.离子交换树脂脱色：将解吸液通过D-280强碱性阴离子交换树脂，然后用60度乙醇或纯化水洗脱，自有甜味起开始收集，收集至无甜味时为止，得洗脱液；
6.回收乙醇浓缩：回收乙醇后将洗脱液浓缩，制成15波美度的稠膏；
7.将稠膏喷雾干燥得成品7.2Kg，成品为牛奶白的结晶性粉末，罗汉果苷≥98％、罗汉果苷V≥40％。
实施例2：
按实施例1的方式实施，不同的是：
1.酶解，加入柠檬酸调PH值为3.4，加入鲜果重量0.05％的果胶酶，水解60min，90℃灭活后加入加入鲜果重量0.05％的蛋白酶，水解40min；
2.抽滤并用AB-8大孔吸附树脂精制，60度乙醇解吸，收集2400L；
3.用LSA-700强碱离子交换树脂柱脱色，50度乙醇解吸；
4.回收乙醇，并浓缩为17波美度；
5.喷雾干燥得牛奶白色成品6.5Kg。
虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是本领域技术人员应当理解，这些仅是举例说明，可以在所附权利要求的范围内做出多种变更或修改，而不背离本发明的实质。