减肥组成物.pdf

本发明提供一种包括蜜蜂花提取物作为活性成分的减肥组成物、蜜蜂花提取物的用法，以及一种使用该组成物来抑制肥胖的方法。此外，本发明提供一种包括蜜蜂花提取物和桑叶提取物作为活性成分的减肥组成物、蜜蜂花提取物和桑叶提取物的混合物的用法，以及一种使用该组成物来抑制肥胖的方法。此外，本发明提供一种包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物作为活性成分的减肥组成物、蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物的混合物的用法，以及一种使用该组成物来抑制肥胖的方法。当将本发明的组成物给予转基因肥胖老鼠和高脂肪导致的肥胖老鼠时，本发明的组成物可以减少体重、体内脂肪和性腺脂肪，并降低血胆固醇水平和与肥胖有关的血糖水平。此外，本发明的组成物通过减小脂质液泡的大小和数量，从而可以抑制脂肪细胞肥大，并抑制肝脏中的脂质积累。此外，在人体临床试验中，本发明的组成物表明体重、PIBW、体内脂肪(尤其是内脏脂肪)、载脂蛋白B浓度、总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比率和低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比率显著减小，并且动脉硬化指数得到改善，肌肉质量得到了增强。因此，本发明的组成物可有效地用作减肥成分，用于减轻体重和抑制腹部脂肪，特别是内脏脂肪。

权利要求书
1.  一种减肥组成物，包括蜜蜂花提取物作为活性成分。

2.  如权利要求1所述的组成物，其中相对于100份按重量计的组成物，该组成物包括0.1～100份按重量计的蜜蜂花提取物。

3.  一种减肥组成物，包括蜜蜂花提取物和桑叶提取物作为活性成分。

4.  如权利要求3所述的组成物，其中相对于100份按重量计的组成物，该组成物包括0.1～99份按重量计的蜜蜂花提取物和0.1～99份按重量计的桑叶提取物。

5.  一种减肥组成物，包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物作为活性成分。

6.  如权利要求5所述的组成物，其中相对于100份按重量计的组成物，该组成物包括0.1～99份按重量计的蜜蜂花提取物、0.1～99份按重量计的蒿提取物和0.1～99份按重量计的桑叶提取物。

7.  如权利要求5所述的组成物，其中该减肥组成物按1～3∶0.1～1∶1～3的净重比率包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物。

8.  如权利要求1至7中任何一项所述的组成物，其中该组成物进一步包括食用纤维、绿茶或人参中的至少一种。

9.  如权利要求8所述的组成物，其中食用纤维是洋车前子壳、纤维素、半纤维素、结晶纤维素、木质素、果胶、褐藻酸、海藻酸、果阿胶、阿拉伯树脂、阿拉伯半乳聚糖、魔芋甘露聚糖、菊糖、果聚糖、聚葡萄糖、不消化的聚葡萄糖和不消化的麦芽糖糊精中的至少一种。

10.  如权利要求8所述的组成物，其中绿茶为绿茶粉、绿茶提取液或绿茶提取液粉末。

11.  如权利要求8所述的组成物，其中人参为人参粉、人参提取液或人参提取液粉末。

12.  一种将蜜蜂花提取物用于生产减肥组成物的用法。

13.  如权利要求12所述的用法，其中相对于100份按重量计的组成物，该组成物包括0.1～100份按重量计的蜜蜂花提取物。

14.  一种将蜜蜂花提取物和桑叶提取物的混合物用于生产减肥组成物的用法。

15.  如权利要求14所述的用法，其中相对于100份按重量计的组成物，该组成物包括0.1～99份按重量计的蜜蜂花提取物和0.1～99份按重量计的桑叶提取物。

16.  一种将蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物的混合物用于生产减肥组成物的用法。

17.  如权利要求16所述的用法，其中相对于100份按重量计的组成物，该组成物包括0.1～99份按重量计的蜜蜂花提取物、0.1～99份按重量计的蒿提取物和0.1～99份按重量计的桑叶提取物。

18.  如权利要求12所述的用法，其中该减肥组成物按1～3∶0.1～1∶1～3的净重比率包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物。

19.  如权利要求12至18中任何一项所述的用法，其中该组成物进一步包括食用纤维、绿茶或人参中的至少一种。

20.  如权利要求19所述的用法，其中食用纤维是洋车前子壳、纤维素、半纤维素、结晶纤维素、木质素、果胶、褐藻酸、海藻酸、果阿胶、阿拉伯树脂、阿拉伯半乳聚糖、魔芋甘露聚糖、菊糖、果聚糖、聚葡萄糖和不消化的麦芽糖糊精中的至少一种。

21.  如权利要求19所述的用法，其中绿茶为绿茶粉、绿茶提取液或绿茶提取液粉末。

22.  如权利要求19所述的用法，其中人参为人参粉、人参提取液或人参提取液粉末。

23.  一种抑制肥胖的方法，其包括给予接受治疗者所需的有效量的减肥组成物，该组成物包含蜜蜂花提取物。

24.  如权利要求23所述的方法，其中相对于100份按重量计的组成物，该组成物包括0.1～100份按重量计的蜜蜂花提取物。

25.  一种抑制肥胖的方法，其包括给予接受治疗者有效量的减肥组成物，该组成物包括蜜蜂花提取物和桑叶提取物。

26.  如权利要求25所述的方法，其中相对于100份按重量计的组成物，该组成物包括0.1～99份按重量计的蜜蜂花提取物和0.1～99份按重量计的桑叶提取物。

27.  一种抑制肥胖的方法，其包括给予接受治疗者有效量的减肥组成物，该组成物包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物。

28.  如权利要求27所述的方法，其中相对于100份按重量计的组成物，该组成物包括0.1～99份按重量计的蜜蜂花提取物、0.1～99份按重量计的蒿提取物和0.1～99份按重量计的桑叶提取物。

29.  如权利要求27所述的方法，其中该减肥组成物按1～3∶0.1～1∶1～3的净重比率包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物。

30.  如权利要求23至29中任何一项所述的方法，其中该组成物进一步包括食用纤维、绿茶或人参中的至少一种。

31.  如权利要求30所述的方法，其中食用纤维是洋车前子壳、纤维素、半纤维素、结晶纤维素、木质素、果胶、褐藻酸、海藻酸、果阿胶、阿拉伯树脂、阿拉伯半乳聚糖、魔芋甘露聚糖、菊糖、果聚糖、聚葡萄糖和不消化的麦芽糖糊精中的至少一种。

32.  如权利要求30所述的方法，其中绿茶为绿茶粉、绿茶提取液或绿茶提取液粉末。

33.  如权利要求30所述的方法，其中人参为人参粉、人参提取液或人参提取液粉末。

说明书减肥组成物
技术领域
本发明涉及一种包括蜜蜂花提取物作为活性成分的减肥组成物、蜜蜂花提取物的用法，以及一种使用该组成物来抑制肥胖的方法。此外，本发明涉及一种包括蜜蜂花提取物和桑叶提取物作为活性成分的减肥组成物、蜜蜂花提取物和桑叶提取物的混合物的用法，以及一种使用该组成物来抑制肥胖的方法。此外，本发明涉及一种包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物作为活性成分的减肥组成物、蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物的混合物的用法，以及一种使用该组成物来抑制肥胖的方法。
背景技术
肥胖被视为世界上曾经出现过的最糟糕的麻烦，世界卫生组织于1997年将其宣布为一种疾病。自从20世纪60年代以来，超重和肥胖现象一直呈不断增长之势，并且这样的趋势几乎从来没有下降过。
在美国，超重或肥胖的人数正在不断增加。目前，在20岁以上的成年人中，分别有65％和30％的人体重超标或肥胖。即使在发展中国家，经济发达地区的肥胖率也不亚于高度发达的国家的肥胖率。目前，美国和日本的肥胖人数多达大约3亿。每年，死于肥胖的人超过30万，与肥胖相关的开支合计达到大约1千亿美元。
纵观世界，随着经济发展、现代化和城市化所推动的环境变化，肥胖人口迅猛增长。男性人口的超重率高于女性人口，但是男性人口的肥胖率则一般低于女性人口。发达国家和高度发达国家的青年儿童肥胖率都非常高。
目前使用的肥胖疗法包括食疗、体育锻炼、行为疗法、药物疗法、综合治疗手术(胃切除术)等等。
大多数广泛用于控制肥胖的食物都是食物纤维，并且市场上销售的有些食物还没有在医学上证实其疗效。
作为经过FDA批准的减肥药，现在可以使用下列药物：奥利司他(商标：Xenical)、苯丁胺(商标：Fastin、Zantryl等等)和西布曲明(商标：Reductil、Meridia等等)。
最新批准的奥利司他(Xenical)具有阻止吸收从食物摄取的脂肪的30％的功效，从而减轻体重。另一方面，苯丁胺和西布曲明具有抑制食欲的功效。
奥利司他(Xenical)在消化道中与脂肪酶结合，然后减少在小肠中的脂解，从而阻止脂肪吸收。然而，残留在肠中的未退化脂肪会引起若干副作用，例如腹部不适或疼痛、直肠不适或疼痛、排脂肪状或油状大便、呕吐、抑郁、腿疼、脚肿胀等等。如果摄取更多脂肪，此类副作用可能会更严重。
苯丁胺改变大脑中的血清素含量，从而抑制食欲。但是它可能增高血压和心率，并刺激中枢神经系统，这些也是安非他明所具有相同副作用。
西布曲明可以抑制去甲肾上腺素、血清素和多巴胺等神经传递素的再吸收，从而在大脑中引起食欲抑制。然而，它可能导致大量的副作用，包括腹部疼痛、焦虑、便秘、抑郁、头痛、失眠、关节痛、反胃、神经过敏、胃痛等等。此外，最近一份关于西布曲明(Reductil)与心脏死亡有关的报告使安全问题成为一个关键问题。
相应地，理想的肥胖治疗应该能够选择性地仅减少体内脂肪，而不影响肌肉和骨骼，在成功的体重下降后能够维持体重，并且最重要的是，没有长期用药所致的副作用。
为了开发能够解决上述问题并且同时还减少体内脂肪和体重的减肥药物，本发明的发明人研究了历史悠久的中草药的减肥效果。
关于中草药的减肥效果，韩国专利第10-2004-0065427 A1号公开了包含万年蒿寡糖、AIP1(万年蒿多糖组分1)的生物健康产品，用于改进肥胖的内分泌生理代谢能力，并且韩国专利第10-2005-83066 A1号描述了一种减肥食物，其包括杜仲提取物或桑树提取物。
作为辛苦研究的结果，一种包含蜜蜂花提取物的组成物、一种包含蜜蜂花提取物和桑叶提取物的组成物、一种包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物的组成物对于减少体重和体内脂肪具有显著的效果，从而完成了本发明。
发明内容技术问题
本发明的一个目的是提供一种包含蜜蜂花提取物作为活性成分的减肥组成物、蜜蜂花提取物的用法，以及一种使用该组成物来抑制肥胖的方法。本发明的另一个目的是提供一种包括蜜蜂花提取物和桑叶提取物作为活性成分的减肥组成物、蜜蜂花提取物和桑叶提取物的混合物的用法，以及一种使用该组成物来抑制肥胖的方法。本发明的再一个目的是提供一种包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物作为活性成分的减肥组成物、蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物的混合物的用法，以及一种使用该组成物来抑制肥胖的方法。技术方案
本发明提供一种包含蜜蜂花提取物作为活性成分的减肥组成物。
在本发明的一个实施例中，相对于100份按重量计的组成物，上述减肥组成物可以包括0.1～100份按重量计的蜜蜂花提取物。
此外，本发明提供一种包含蜜蜂花提取物和桑叶提取物作为活性成分的减肥组成物。
在本发明的一个实施例中，相对于100份按重量计的组成物，上述减肥组成物可以包括0.1～99份按重量计的蜜蜂花提取物和0.1～99份按重量计的桑叶提取物。
此外，本发明提供一种包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物作为活性成分的减肥组成物。
在本发明的一个实施例中，相对于100份按重量计的组成物，上述减肥组成物可以包括0.1～99份按重量计的蜜蜂花提取物、0.1～99份按重量计的蒿提取物和0.1～99份按重量计的桑叶提取物。
在本发明的另一个实施例中，上述减肥组成物可以按1～3∶0.1～1∶1～3的净重比率包括蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物。
以上或以下使用的术语“组成物”应该包括由特定成分的混合物直接或间接形成的任何产物，以及包含特定成分的产物。
“蜜蜂花”是一种唇形科多年生草本植物，其通称或俗称又名为柠檬香薄荷、香脂草、抗水肿植物等等。蜜蜂花提取物包括类黄酮、萜酸、精油、醇糖苷和酚类化合物等等、咖啡酸的衍生物等。迷迭香酸是一种非挥发性成分，是一种主要的蜜蜂花黄酮。已知迷迭香酸具有非常强的消炎和解热特性，并且蜜蜂花香精油具有丰富的药物特性，尤其是对于抑郁、神经性头痛、记忆力下降、神经痛、发热等等。此外，已知蜜蜂花香精油还可应用于镇静、抗菌、抗病毒、抗氧化和抗激素。目前，蜜蜂花的干提取物被用作血液循环促进剂成分。
对于本发明，术语“蜜蜂花”可以包含任何类型的蜜蜂花物种，包括香蜂草。
“蒿”是一种菊科多年生草本植物。其具有解热、消炎、镇痛、去湿等疗效，并一直用于治疗黄疸、排尿紊乱、脓肿和疥疮，以及妇科病。蒿包含多种成分，包括滨蒿内酯、毛蒿素、茵陈烯酮、茵陈烯、茵陈素等等。特别是，已知滨蒿内酯能够增加胆汁分泌，并促进胆红素排泄，改善肝功能，可用于酒精解毒、抗氧化、抗菌和抗癌。
对于本发明，术语“蒿”可以包含任何种类的蒿物种，包括茵陈蒿、万年蒿、魁蒿、黄花蒿、青蒿、苦艾、牡蒿、蛔蒿等等。
“桑叶”是桑物种的叶子，其具有预防脑溢血、解热、改善视觉灵敏度的功效，并且可用于发热、头痛、红眼病、多饮等的治疗。桑叶包含黄酮类化合物，包括芸香苷、槲皮苷、异槲皮苷和桑甙；以及昆虫变态激素，包括牛膝蜕皮酮、蜕皮甾酮等等。已知桑叶提取物可用于实现降低血糖的功效(韩国专利第10-1998-0021670 A1号)。)
对于本发明，术语“桑叶”可以包含任何种类的桑物种的叶子，包括桑树叶子。
本发明的组成物可以包括其他减肥成分，以及一种或多种上述草本提取物。
此外，本发明的组成物可进一步包含至少一种符合一般标准和规范的卫生保健物质或成分，包括食用纤维、绿茶、人参等等，或其他安全的食物添加剂，例如适量的维生素、矿物质等等。
上述食用纤维可以是洋车前子壳、纤维素、半纤维素、结晶纤维素、木质素、果胶、褐藻酸、海藻酸、果阿胶、阿拉伯树脂、阿拉伯半乳聚糖、魔芋甘露聚糖、菊糖、果聚糖、聚葡萄糖和难消化的麦芽糖糊精中的至少一种纤维。
上述绿茶可以是绿茶粉、绿茶提取液或绿茶提取液粉末。
此外，上述人参可以是人参粉、人参提取液或人参提取液粉末。
此外，本发明的组成物可进一步包括诸如维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B6、维生素B12、叶酸、维生素C、维生素D3、维生素E中的至少一种维生素；诸如铜、钙、铁、镁、钾、锌等矿物质；以及适量的其他安全食物添加剂。
然而，除活性成分以外的成分含量并没有特别的限制，相对于100份按重量计的组成物，这些成分的含量范围一般在0～98份的范围内。
在制备本发明的组成物时，可以购买或使用传统方法来制备草本提取物。
提取过程中可以使用任何干燥、非干燥或干燥和非干燥草本的混合物。
本领域中的技术人员可以将上述草本的提取物用作提取液或提取液粉末。对于提取，可以根据传统干燥方法对草本进行干燥、干燥并切片或干燥并研成粉末，然后通过传统方法进行提取，例如热水浸提法或有机溶剂提取法。还可以使用市场上可以买到的提取液粉末。
例如，可以将草本切成细片，使用草本的3～20倍的水、低级醇或其混合溶剂或者有机溶剂，在室温～100℃下浸泡大约6小时～10天，重复提取切片的草本1～5次，然后将提取液在真空中过滤和浓缩或冷冻干燥，从而制备草本提取物。可以通过传统方法来处理提取，例如冷水浸软提取、超声波降解提取或回流提取。
上述低级醇可以包括C1-4醇，上述有机溶剂可以包括非极性溶剂，例如乙酸乙酯、氯仿、己烷和二氯甲烷。为了获得适当的提取结果，最好使用草本的3倍以上的溶剂。但是如果溶剂量超过草本的20倍，相比于提取物量，很可能会过度消耗溶剂。
本发明的组成物可以根据该组成物的用途以任何形式使用，例如，用于减少体重和体内脂肪的药物成分或保健品成分。
本发明的医药组成物可以制备为任何形式，例如颗粒、粉末、片剂、包衣片剂、胶囊、药丸、糖浆、滴剂、溶液、混悬剂和乳剂，或者活性成分的缓释制剂。
本发明的组成物可进一步包括一种或多种医药或生理上可接受的载体，这些载体将适当配制以便于给药。例如，医药或生理上可接受的载体可以是盐水、热压水、林格氏液、缓冲盐水、葡萄糖、麦芽糖糊精、甘油、乙醇及其混合物。如有必要，本发明的组成物可以包括传统添加剂，例如抗氧剂、缓冲剂和抗菌反腐物质。本发明的组成物还可以包括医药或生理上可接受的添加剂，例如稀释剂、分散剂、表面活性剂、溶剂、崩解剂、甘味剂、粘合剂、涂层剂、发泡剂、滑润剂、助流剂或芳香剂。通过使用传统方法或Remington s PharmaceuticalScience(Mack Publishing Company出版，Easton PA)的书面文本，本发明的组成物可以根据疾病或成分配制成任何所需的形式。
本发明的组成物可以根据传统方法来通过各种途径给药，包括口服、静脉内、动脉内、腹腔内、胸腔内、透皮、鼻腔、吸入、直肠、眼部和皮下导入。
本发明的保健食品组成物可以采用任何食物形式。例如，可以根据本领域中的传统方法，将其与载体一起干燥，然后制作为胶囊，或者加工为片剂、颗粒、粉末、饮料、粥等等。
包含本发明的组成物的食物示例包括肉类、茶、饮料、快餐、点心、面条、糖果、巧克力、冰淇淋、口香糖、维生素组合、功能食品等等。
本发明的组成物可用于抑制体重和体内脂肪的增加以实现减肥。
本发明提供一种抑制肥胖的方法，其包括给予接受治疗者所需的有效量的减肥组成物，该组成物包含蜜蜂花提取物。此外，本发明提供一种抑制肥胖的方法，其包括给予接受治疗者有效量的减肥组成物，该组成物包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物。在这些方法中，有关减肥组成物的说明与上面相同。
将本发明的组成物给予转基因肥胖老鼠和高脂肪食物导致的肥胖老鼠5周以后，可以发现老鼠的体内脂肪和性腺脂肪减少了。此外，进一步包括诸如食用纤维、绿茶、人参等辅助成分的本发明的组成物表现出对减肥作用的协同效应，例如体重减少和体内脂肪及性腺脂肪减少。
此外，当将本发明的组成物给予转基因肥胖老鼠和高脂肪食物导致的肥胖老鼠时，血液胆固醇水平和与肥胖有关的血糖水平降低了。
此外，在给予本发明的组成物时，不存在脂肪细胞增生的迹象，相反，脂肪细胞的大小和度量减小了，并且肝脏中的脂质液泡数量和大小减小了，从而降低了肝脏中的脂质积累。
此外，在人体临床试验中，体重、体内脂肪百分比、内脏脂肪、载脂蛋白B浓度、总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比率和低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比率显著减少，并且动脉硬化指数得到改善，肌肉质量得到了增强。
本发明的活性成分(蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物)本身具有很少的毒性和副作用，从而使本发明的组成物可长期安全用药。
在决定本发明的组成物的用量时，蜜蜂花、蒿和桑叶提取物的优选每日用量分别为0.1～200毫克/千克、0～200毫克/千克和0～200毫克/千克。用量可通过各种因素确定，例如病人症状的种类和严重性、活性成分的含量、其他成分的含量和种类、配方类型、病人的参数(年龄、体重、健康状况、性别)、食物、服药时间、给药途径、组成物比率、治疗时间和其他同服药物。
如上所述，蜜蜂花提取物具有突出的减肥效果，包含蜜蜂花提取物、桑叶提取物的混合物和包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物的混合物对蜜蜂花提取物本身具有优异的效果。因而，本发明提供一种将蜜蜂花提取物用于生产减肥组成物的新颖用法、一种将蜜蜂花提取物和桑叶提取物的混合物用于生产减肥组成物的新颖用法，以及一种将蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物的混合物用于生产减肥组成物的新颖用法。在这些用法中，减肥组成物的说明与上面相同。
从下面详细描述的示例中，可以明显看出本发明的优点和特性以及揭示这些优点和特性的方法。然而，应该清楚理解的是，本发明并不限于此，而是可以以各种其他方式实施。显而易见，以下示例旨在完善本发明内容，以及向技术人员完整指出发明的范围，本发明的范围仅由权利要求书限定。
以下示例旨在提供本发明的进一步说明，不应理解为对本发明范围的限制。
图1是显示转基因肥胖老鼠在服用本发明的组成物之后的体重降低情况图；
图2是显示高脂肪食物导致的肥胖老鼠在服用本发明的组成物之后的体重降低情况图；
图3是显示本发明的组成物对与肥胖有关的血糖水平影响的效果图；
图4是显示本发明的组成物对皮下脂肪细胞影响的效果图；
图5是显示本发明的组成物对转基因肥胖老鼠肝脏中的脂质积累影响的效果图；
图6是显示临床试验中服用本发明的组成物前后，人体的体重、体内脂肪和无脂肪体重的变化情况图；
图7是显示临床试验中服用本发明的组成物前后，人体的内脏脂肪和皮下脂肪的变化情况图。
示例1.配方1的制备
包含活性成分的胶囊的制作方法如下。
将25克香蜂草提取物制备为胶囊配方(以下根据传统封装方法将其称为“示例1”)。
该胶囊的成分如下。
香蜂草提取物25克
符合质量标准的辅料
示例2.配方2的制备
包含活性成分的胶囊的制作方法如下。
将10克香蜂草提取物和10克桑树叶子提取物混合，并将该混合物制备成胶囊配方(以下根据传统封装方法称为“示例2”)。
该胶囊的成分如下。
香蜂草提取物10克
桑树叶子提取物10克
符合质量标准的辅料
示例3.配方3的制备
包含活性成分的胶囊的制作方法如下。
将10克香蜂草提取物、5克茵陈蒿提取物和10克桑树叶子提取物混合，并将该混合物制备成胶囊配方(以下根据传统封装方法将其称为“示例3”
该胶囊的成分如下。
香蜂草提取物10克
茵陈蒿提取物5克
桑树叶子提取物10克
符合质量标准的辅料
示例4.配方4的制备
包含活性成分的液体制剂的制作方法如下。
将0.1克香蜂草提取物、0.05克茵陈蒿提取物和0.1克桑树叶子提取物溶解在蒸馏水中以产生1000单位的配方(以下称为“示例4”)。
香蜂草提取物10克
茵陈蒿提取物5克
桑树叶子提取物10克
符合质量标准的蒸馏水
示例5.配方5的制备
包含活性成分和食用纤维的配方的制作方法如下。
将6克香蜂草提取物、4克茵陈蒿提取物、6克桑树叶子提取物和84克食用纤维(魔芋甘露聚糖、难消化的麦芽糖糊精)混合以产生该配方(以下称为“示例5”)。
香蜂草提取物6克
茵陈蒿提取物4克
桑树叶子提取物6克
魔芋甘露聚糖12克
不消化的麦芽糖糊精72克
示例6.配方6的制备
包含活性成分和绿茶提取物的配方的制作方法如下。
将6克香蜂草提取物、4克茵陈蒿提取物、6克桑树叶子提取物和84克绿茶提取物(包括20％的儿茶素)混合以产生该配方(以下称为“示例6”)。
香蜂草提取物6克
茵陈蒿提取物4克
桑树叶子提取物6克
绿茶提取物84克
示例7.配方7的制备
包含活性成分和人参提取物的配方的制作方法如下。
将6克香蜂草提取物、4克茵陈蒿提取物、6克桑树叶子提取物和4克人参提取物粉末(人参含量：110毫克/克)混合以产生该配方(以下称为“示例7”)。
香蜂草提取物6克
茵陈蒿提取物4克
桑树叶子提取物6克
人参提取物粉末4克
比较示例：包含蒿提取物和桑叶提取物的配方的制备。
包含活性成分的胶囊的制作方法如下。
将5克茵陈蒿提取物和10克桑树叶子提取物混合以产生该配方(以下称为“比较示例”)。
胶囊的成分如下。
茵陈蒿提取物5克
桑树叶子提取物10克
实验示例1.转基因肥胖老鼠的减肥效果(ob/ob老鼠)
通过向转基因肥胖老鼠口服给药来观察上述配方的减肥效果。
将五周大的雄性肥胖老鼠(B6.V-Lep<ob>，Jackson Laboratory)用于实验，经过几天的调整期后，向对照组给予食用盐溶液，而向治疗组给予溶解在盐溶液中的上述示例1～7中的每一种示例。
对于比较配方，将25毫克比较示例溶解在10毫升盐溶液中，在5周的时间内，每天以口服的方式将该溶液的0.4单位给予每只老鼠，该溶液设计为包含50毫克/千克的活性成分。
对于配方1、2和3，将25毫克每种示例溶解在10单位的盐溶液中，并在5周时间内每天以口服方式给予每只老鼠0.4单位的溶液，该溶液设计为包含50毫克/千克的活性成分。
对于配方4，将40毫克的示例4溶解在160单位的盐溶液中，并在5周时间内作为饮用水提供给老鼠，该溶液设计为包含40毫克/千克的活性物质。
对于配方5，将1.56克的示例5溶解在100单位的盐溶液中，并在5周时间内每天以口服方式给予每只老鼠0.4单位的溶液，该溶液设计为包含50毫克/千克的活性成分。
对于配方6，使用100单位的盐溶液悬浮1.56克的示例6，并在5周时间内每天以口服方式给予每只老鼠0.4单位的溶液，该溶液设计为包含50毫克/千克的活性成分。
对于配方7，使用100单位的盐溶液悬浮312.5毫克的示例7，并在5周时间内每天以口服方式给予每只老鼠0.4单位的溶液，该溶液设计为包含50毫克/千克的活性成分。
从示例用药的那一天开始每天测量体重，并通过估计老鼠在整个治疗期间消耗的食物量来确定食物摄入量。
在5周之后，收集血样以测量血糖，通过颈部脱臼牺牲动物，获取、称量并在液态氮中快速冷冻脂肪组织，并在-80℃下保存直至使用。下面的表1描述了测量结果。
表1.转基因肥胖老鼠中的减肥效果(ob/ob老鼠)
如表1所示，与对照组相比，使用示例1的治疗组平均体重减少了6％，体增重减少了20％，尤其是皮下脂肪减少了7％，性腺脂肪减少了5％。
与对照组相比，使用示例2的治疗组平均体重减少了7％，体增重减少了21％，尤其是皮下脂肪减少了10％，性腺脂肪减少了6％。
与对照组相比，使用示例3的治疗组平均体重减少了8％，体增重减少了27％，尤其是皮下脂肪减少了15％，性腺脂肪减少了7％。
与使用包含蒿提取物和桑叶提取物的比较示例的治疗组的皮下脂肪减少比率相比，使用包含蜜蜂花提取物的示例1和2的治疗组的减肥效果得到了增强。
此外，实验表明，包含蜜蜂花提取物、蒿提取物和桑叶提取物的组成物具有突出的减肥效果，可以显著减少体内脂肪。
特别是，当将保持其活性成分含量的示例3与诸如食用纤维、绿茶或人参等功能食物成分相结合时，可以提高减肥效果。
至于体内脂肪(皮下脂肪和性腺脂肪)的减少，在示例3的基础上，包含食用纤维的示例5减少了135％，包含绿茶提取物的示例6减少了124％，包含人参提取物粉末的示例7减少了112％，从而证明了减肥效果的增强。
此外，图3描述了将示例3用药35天的体重变化情况，与对照组相比，治疗组的体重减少了。
因此，可以验证本发明的组成物对于通过减少体重(尤其是体内脂肪)来实现减肥是非常有效的。
实验示例2.高脂肪食物导致的肥胖老鼠的减肥效果
观察本发明的组成物对于高脂肪食物导致的肥胖老鼠的减肥效果。
使用六周大的雄性老鼠(C57BL/6J小鼠，Jackson Laborator)来进行实验，高脂肪食物(15％[wt/wt]的脂肪)由日本的Oriental Yeast公司生产。在经过几天的调整期后，在16周的时间内，仅给对照组喂养高脂肪食物，而对治疗组则喂养分别补充了示例1～7的高脂肪食物。
从示例用药的那一天开始每天测量体重，并通过估计老鼠在整个治疗期间消耗的食物量来确定食物摄入量。
在16周之后，收集血样并通过颈部脱臼牺牲动物，获取、称量并在液态氮中快速冷冻脂肪组织，并在-80℃下保存直至使用。结果在表2中说明。
表2.高脂肪食物导致的肥胖老鼠(C57BL/6J小鼠)的减肥效果
与对照组相比，使用示例1的治疗组平均体重减少了4％，体增重减少了13％，特别是皮下脂肪减少了20％，性腺脂肪减少了16％。
与对照组相比，使用示例2的治疗组平均体重减少了4％，体增重减少了13％，特别是皮下脂肪减少了22％，性腺脂肪减少了20％。
与对照组相比，使用示例3的治疗组平均体重减少了6％，体增重减少了16％，特别是皮下脂肪减少了24％，性腺脂肪减少了27％。
这些结果证明，包含蜜蜂花提取物的本发明的组成物明显减少了体内脂肪，增强了减肥效果。
至于体内脂肪(皮下脂肪和性腺脂肪)的减少，在示例3的基础上，包含食用纤维的示例5减少了132％，包含绿茶提取物的示例6减少了123％，包含人参提取物粉末的示例7减少了107％，从而证明了如实验示例1所示的增强减肥效果。
此外，图2显示了将示例3用药16周的过程中的体重变化情况，证明了治疗组的体重增长率比对照组的体重增长率慢。
因此，可以验证本发明的组成物对于通过减少体重(尤其是体内脂肪)来实现减肥是非常有效的。
实验示例3.血液和组织学分析
使用本发明的组成物进行口服用药，分析转基因肥胖老鼠中的血液和组织变化。
首先，在5周时间内将示例3给予转基因肥胖(ob/ob)老鼠，并收集其血液以测量血胆固醇水平的变化。
对于组织学分析，将皮下脂肪冷冻切片，并使用四氧化锇染色，以测量脂肪细胞的大小和数量。将肝脏固定在4％的戊二醛中，并以日常方法加工以进行石蜡切片。切成片并使用2％的四氧化锇染色。
3-1)血胆固醇分析
使用示例3来给药的治疗组的血胆固醇水平为128±15.2mg/dl，而仅接收盐溶液(赋形剂)的对照组的血胆固醇水平为140±17.6mg/dl，因此，本发明的组成物可以将血胆固醇减少9％。
3-2)血糖分析
如图3所示，使用示例3来给药的治疗组的血糖水平为244.4±115.2mg/dl，而对照组的血糖水平为362.1±129.7mg/dl，证明治疗组的血糖水平减少了33％。
因此，验证了本发明的组成物可以减少与肥胖有关的血胆固醇水平和血糖。
3-3)给予本发明的组成物的肥胖老鼠的组织学分析
在染色后分析对照组和治疗组的皮下脂肪细胞大小。
如图4所示，与治疗组相比，对照组的脂肪细胞变得肥厚，通过使用图像分析仪计算脂肪细胞的大小发现，可以发现其大小显著减小了46％，从11.2±2.9减小到6.1±1.5。
此外，与对照组相比，通过四氧化锇染色的肝脏中的黑色脂质液泡的大小和数量显著减小了，如图5所示。脂质液泡的面积从5.4±0.5显著减小83％，减至0.92±0.1(表3)，从而验证示例3抑制了肝脏中的脂肪积累。
表3.示例3 细胞和脂质液泡大小的影响  对照组  治疗组  减少比率 脂肪细胞(面积，  11.2±2.9  6.1±1.5  46％ 积累) 脂质液泡(占面积 百分比)  5.4±0.5  0.92±0.1  83％
相应地，实验证明本发明的组成物具有减小脂肪细胞大小和抑制肝脏中的脂质积累的减肥效果。
因此，本发明的组成物可有效地用作减肥组成物，以抑制体增重和体内脂肪增加。
实验示例4.本发明的组成物的减肥效果临床试验
本发明的组成物的减肥效果已通过临床试验进行了验证。
4-1.人体收集和试验方法
人体是从志愿者公开收集的，这些志愿者年龄为19～60周岁，具有110％以上的PIBW(理想体重百分比)，或具有男性腰围大于90厘米、女性腰围大于80厘米腹部肥胖。
任何具有严重病史、不可控制的中/高血压或甲状腺疾病或者当前正处于治疗过程中、妊娠期、计划怀孕或处于泌乳期、诊断为糖尿病并使用药物疗法治疗、或服用会影响体重的药物(Xenical、Reductil、Deuretics、抗抑郁药、食欲抑制药等等)的志愿者、AngioLab，Inc.的员工、研究参与人员和学生及其熟人已排除在外。
在此初步研究中，仅包括试验组以评估干预前后的效果，而没有包括安慰剂组。总共有25个主体参与该试验12周，并使用统计分析对结果进行了处理(表4)。
在12周时间内，每个主体每天服用两粒胶囊三次，其中包含250毫克示例3。
完成12周试验的参与者的男女比率为3∶22，平均年龄为31.8±1.51(19-47)，平均PIBW为133.3±3.17％，平均体重指数(BMI)为28.4±0.67kg/m2(23.5-34.7)，平均体内脂肪为39.4±1.46％。此外，当前吸烟和饮酒的人数比率分别占20％和72％。
4-2.人体测量指标和血压变化
如表4所示，当开始此研究时，平均体重为75.2±2.11公斤，12周以后，平均体重降至74.0±2.18公斤(p＜0.05)，这表明了平均PIBW和平均BMI同时减少的统计显著性。
12周以后，体重从39.4±1.46％减轻至37.2±1.38％(p＜0.01)，而无脂肪体重从45.3±1.40千克增至46.2±1.40千克(p＜0.05)，从而证明身体构成得到显著改善。
12周以后，平均腰围发生了某种程度的减小，臀围则显著减小(p＜0.01)。此外，12周以后，平均舒张血压在正常范围内增高(p＜0.01)。
表4.服用本发明的组成物前后的人体测量指标和血压变化
4-3.CT扫描仪分析的脂肪和肌肉面积变化
通过计算机体层成像(CT)分析服用本发明的组成物前后的四个不同身体部位的脂肪和肌肉面积变化。
如表5所示，CT在第一腰椎处扫描的上腹部中的脂肪没有表明任何显著变化，但是CT在第四腰椎处扫描的下腹部中的脂肪减少了。内脏脂肪显著减少了9.5％(p＜0.01)，并且内脏脂肪和皮下脂肪的比率急剧下降(p＜0.01)(图7、表5)。
表5.四个不同身体部位的脂肪和肌肉面积变化
4-4.血脂、脂蛋白、空腹血糖和胰岛素浓度的变化
如表6所示，甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇的浓度没有变化，但是载脂蛋白B显著减少了(p＜0.05)。
然而，总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇的比率(p＜0.05)和低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇的比率(p＜0.05)显著下降，证明动脉硬化指数(p＜0.05)得到了显著改善。
表6.服用本发明的组成物前后脂质、载脂蛋白和空腹血糖的血清深度变化
4-5.血清、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素氮和肌酸酐、血红蛋白和血小板浓度变化
作为肝功能指数的谷草转氨酶和谷丙转氨酶浓度，以及作为肾功能指数的尿素氮和肌酸酐浓度在正常范围内，在使用本发明的配方后没有变化，如表7所示。
然而，红血球(p＜0.05)和白血球(p＜0.001)浓度在12周以后在正常范围内升高了。没有观察到血红蛋白浓度和血细胞比容以及血小板数量的变化(表7)。
表7.服用本发明的组成物前后的血液生化指标变化
4-6.膳食摄入和能量消耗分析
表8表明膳食摄入、营养素摄入和能量消耗的0周和12周值之间没有显著区别。
表8.每日的热量摄入和总的能力消耗
4-7.氧化低密度脂蛋白和脂类过氧化物的浓度变化
使用本发明的组成物以后，氧化低密度脂蛋白、丙二醛(血液中的脂类过氧化物)和8-epi-PGF2(尿液中的脂类过氧化物)的浓度没有变化(表9)。
表9.氧化低深度脂蛋白和脂类过氧化物的浓度变化
4-8.异常反应状态
在参与此临床试验的25个主体中，没有观察到与摄入示例3有关的异常反应。
工业适用性
如上所述，本发明的组成物可以减少体重和体内脂肪。本发明的组成物可以降低血胆固醇水平和与肥胖有关的血糖水平。
此外，本发明的组成物通过减小脂质液泡的大小和数量，从而可以抑制脂肪细胞肥大和肝脏中的脂质积累。
在人体临床实验中，本发明的组成物表明体重、PIBW、体内脂肪(尤其是内脏脂肪)、载脂蛋白B浓度、总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比率和低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比率显著减少，并且动脉硬化指数得到改善，肌肉质量得到增强。
因此，本发明的组成物可有效地用作减肥成分，用于减轻体重和抑制腹部脂肪，特别是内脏脂肪。