吡喃并吲唑类化合物及其用于治疗青光眼的用途 本申请有获得于2001年6月1日提交的美国临时专利申请60/295,429利益的权利，并且在此整体引入作为参考。
【发明背景】
本发明涉及各种吡喃并吲唑类化合物(pyranoindazoles)，这些新化合物可以用于降低和调节正常或升高的眼内压(IOP)，并且用来治疗青光眼。
由于视觉神经的不可逆损伤，被称做青光眼的疾病状态突出地表现为视觉功能的持久丧失。青光眼几个形态学的或机能的显著表征就是表现为典型地眼压升高，它被认为是涉及该疾病病理进程的原因。眼高压是眼内压升高但并不会出现视觉功能的明显丧失的状态；由于病程的最终进展是与青光眼相联系的视觉丧失，因而这类病人被认为是高度危险的。如果能及早发现青光眼或眼高压并且及时应用有效降低高眼内压的药物治疗，那么视觉功能的丧失或其进行性恶化通常会被改善。已经证明对降低眼内压有效的药物，包括减少房水生成的试剂和使房水流出更加容易的试剂。这类治疗一般通过两种可能的途径之一给药，即局部(直接应用于眼)或口服给药。
当用某些目前的青光眼疗法治疗时，一些个体的反应不好。因此，需要其他的局部治疗剂来控制IOP。
已经报道5-羟色胺能5-HT1A激动剂在动物模型中有神经保护作用，而且这些试剂中许多已经被用来评估其他适应症中急性发作的治疗。这类化合物已经被提到用来治疗青光眼(降低和调节IOP，参见例如，WO98/18458(DeSantis等)和EP0771563A2(Mano等)。Osborne等(Ophthalmologica，第210卷：308-314，1996)教导指出8-羟基二丙基氨基四氢萘(8-OH-DPAT)(5-HT1A激动剂)降低兔子的IOP。Wang等(Current EyeResearch，第16卷第8期：769-775，1997年8月，以及IVOS，第39卷第4期，S488，1998年3月)指出α1A拮抗剂5-甲基乌拉地尔和5-HT1A激动剂可以降低猴子的IOP，不过是由于它地α1A受体活性。同样的，已经公开5-HT1A拮抗剂对青光眼的治疗(升高的IOP)是有用的(例如，WO 92/0338，Mclees)。此外，DeSai等(WO 97/35579)和Macor等(US 5,578,612)涉及应用5-HT1和5-HT1样激动剂治疗青光眼(升高的IOP)。这些抗偏头痛的化合物，例如，舒马曲坦和那拉曲坦以及相关的化合物是5-HT1B、D、E、F激动剂。
已经发现含血清素的化合物在5-HT2受体方面具有激动剂活性，它可以有效地降低以及调节正常和升高的IOP，对治疗青光眼是有用的，参见共同拥有的悬而未决的申请PCT/US99/19888，在此整体引入作为参考。作为5-HT2受体激动剂的化合物是众所周知的，并且已经显示出种种用途，主要用于与中枢神经系统(CNS)有关的疾病和状态。美国专利5,494,928涉及某些2-(吲哚-1-基)-乙胺衍生物，它们是5-HT2c激动剂，用于治疗强迫行为与观念的疾病以及其他CNS诱导的人格障碍。美国专利5,571,833涉及为5-HT2c激动剂的色胺衍生物，用于治疗门静脉高压和偏头痛。美国专利5,874,477涉及一种使用5-HT2A/2c激动剂治疗疟疾的方法。美国专利5,902,815涉及使用5-HT2A激动剂以阻止NMDA受体功能减退所带来的副作用。WO 98/31354涉及用于治疗抑郁以及其他CNS疾病的5-HT2B激动剂。WO 00/12475涉及二氢吲哚衍生物，WO 00/12510和WO 00/44753涉及作为5-HT2B和5-HT2c受体激动剂的吲哚衍生物，用于治疗种种中枢神经系统疾病，不过尤其用于肥胖症的治疗。WO00/35922涉及作为5-HT2C激动剂的吡嗪并[1，2-a]喹喔啉衍生物，用于治疗强迫行为与观念疾病、抑郁、饮食障碍以及其他牵涉CNS的疾病。WO 00/77002和WO 00/77010涉及作为5-HT2C激动剂的取代四环吡啶并[4，3-b]吲哚类化合物，用于治疗中枢神经系统疾病，包括肥胖、焦虑、抑郁、睡眠障碍、头痛、以及其社会恐怖症。有报道称在5-HT2A受体方面的激动剂反应是引起幻觉活动的主要活性反应，与5-HT2C受体的联系可能更少(Psychopharmacology，第121卷：357，1995)。
少数包含熔合吲唑的的呋喃和吡喃已有报道。7-甲基和1，7-二甲基-1H-呋喃并[2，3-g]吲唑[Gazz.Chim Ital.106，1083(1976)]以及3-甲基-和1-(4-氨基苯基)-3-甲基-1H-苯并[b]呋喃并[2，3-g]吲唑[An.Asoc.Quim.Argent.59，69(1971)]的化学合成已有报道，但没有讨论它们的用途。欧洲专利申请EP 990,650(国际公开号WO 98/56768)涉及取代的2-(呋喃并[2，3-g]吲哚-1-基)-乙胺类化合物，例如(S)-2-(呋喃并[2，3-g]吲哚-1-基)-1-甲基乙胺，据报道它对5-HT2C受体具有高选择性和亲和力，而且可能对治疗种种中枢神经系统疾病有用。9-甲基-1H-吡喃并[2，3g]吲唑-7-酮以及相应的非-甲基化化合物的化学合成已有报道[Indian J.Chem.26B，436(1987)，但没有提到用途。
美国专利5,561,150和5,646,173涉及某些三环吡唑衍生物的化合物，它们被确认为是用于治疗CNS疾病的5-HT2c激动剂，并且是首先指定的具有高入脑概率的亲脂性类似物。类似地，WO 98/56768涉及用于治疗CNS疾病的三环5-HT2c激动剂。上面提到的所有专利和出版物在此整体引入作为参考。
5-羟基色胺(5-羟色胺)无法穿过血-脑屏障进入脑。然而，为了增加大脑的5-羟色胺水平，可以施用5-羟基-色氨酸。5-羟基-色氨酸可迅速转运进入大脑，而且一旦大脑中的5-羟基-色氨酸被迅速地脱羧，就可提供5-羟色胺。
因此，有必要提供避免上述缺点的新化合物，其化学稳定性提高，具有所需的治疗活性范围，例如，降低眼内压和治疗青光眼。
发明概述
本发明的一个特征是提供为5-HT2激动剂的新型化合物。
本发明的另一个特征是提供化学稳定性提高，并且可以用于降低和调节正常或升高的眼内压和/或治疗青光眼的化合物。
本发明的另一个特征是提供在降低和调节正常或升高的眼内压和/或治疗青光眼方面中具有所需治疗活性水平的化合物。
本发明的其它特征和优点将在随后的描述中部分阐明，并且从描述来看部分将是显而易见的，或者可以通过本发明的实施而了解。本发明的目的和其他优点将通过在说明书和附加的权利要求中特别指出的成分和组合而实现和达到。
为了达到这些和其他优点，并且与本发明的目的相适应，在此作为具体和明白的描述，本发明涉及式I的化合物：
或式I化合物的可药用盐、溶剂化物或前体药物形式。在此式中，R1和R2独立地选自氢或烷基，例如C1-4烷基；
R3和R4独立地选自氢或烷基，例如C1-4烷基，或者，
R3和R4以及与它们相连的碳原子可形成环烷基环，或者，
R2和R3一起可以是(CH2)m以形成饱和杂环；
R5选自氢、卤素、烷基，例如被卤素取代的C1-6烷基或C1-4烷基；
R6和R7独立地选自氢、卤素、氰基、烷硫基例如C1-4烷硫基、烷基例如C1-4烷基、或者取代烷基例如以卤素取代的C1-4烷基；
R8和R9独立地选自氢、羟基、烷基例如C1-6烷基、烷氧基例如C1-6烷氧基、＝O、NR10R11、OC(＝O)NR1R2、OC(＝O)C1-4烷基、烷巯基(alkylthiol)例如C1-6烷巯基、取代烷基例如以卤素、羟基或NR10R11取代的C1-6烷基；
R10和R11独立地选自氢、烷基例如C1-4烷基、C(＝O)C1-4烷基、C(＝O)OC1-4烷基、C(＝O)NR1R2、或者取代烷基例如以卤素、羟基、NR1R2取代的C1-6烷基，或者，R10和R11一起可形成饱和的5元或6元杂环，当该杂环是6元环时，可包括选自N、O或S的其它杂原子；
A是(CH2)n、C＝O或CHC1-4烷基；
B是单键或双键，其中当B是双键时，R8和R9选自氢、或者取代或未取代的烷基；
m＝2-4；
n＝0-2；
X和Y是N或者C，其中X和Y彼此不同；而且虚键表示合适地指定的单键和双键。
本发明进一步涉及包含至少一种式I化合物的药物组合物。
本发明进一步涉及通过施用有效量的包含上述式I化合物的组合物以降低和/或调节正常或升高的眼内压的方法。
本发明还涉及一种治疗青光眼的方法，它包括施用有效量的包含上述式I化合物的组合物。
应当理解，前面的一般性描述和下面的详细描述都仅仅是示范性的和解释性的，而且旨在为要求专利保护的本发明提供进一步的解释。
发明详述
本发明涉及按照本发明所说是有用的种种化合物。这些化合物通常以下列的式I表示：
在此式中，R1和R2独立地选自氢或烷基，例如C1-4烷基；
R3和R4独立地选自氢或烷基，例如C1-4烷基，或者，
R3和R4以及与它们相连的碳原子可形成环烷基环(例如环丙基环)，或者，
R2和R3一起可以是(CH2)m以形成一个饱和杂环；
R5选自氢、卤素、取代或未取代的烷基，例如以卤素取代的C1-6烷基或C1-4烷基；
R6和R7独立地选自氢、卤素、氰基、烷硫基例如C1-4烷硫基、烷基例如C1-4烷基、或者取代的烷基例如以卤素取代的C1-4烷基；
R8和R9独立地选自氢、羟基，烷基例如C1-6烷基、烷氧基例如C1-6烷氧基、＝O、NR10R11、C(＝O)NR1R2、OC(＝O)C1-4烷基、烷巯基例如C1-6烷巯基、取代的烷基例如以卤素、羟基或NR10R11取代的C1-6烷基；
R10和R11独立地选自氢、烷基例如C1-4烷基、C(＝O)C1-4烷基、C(＝O)OC1-4烷基、C(＝O)NR1R2、或者取代的烷基例如以卤素、羟基或者NR1R2取代的C1-6烷基，或者，R10和R11一起可形成饱和的5元或6元杂环，当该杂环是6元环时，可包括选自N、O或S的其它杂原子；
A是(CH2)n、C＝O或CHC1-4烷基；
B是单键或双键，其中当B是双键时，R8和R9选自氢、烷基例如C1-4烷基或者取代的烷基，例如以卤素、羟基或NR10R11取代的C1-4烷基；
m＝2-4；
n＝0-2；
X和Y是N或者C，其中X和Y彼此不同；而且虚键表示适当指定的单键和双键。
式I化合物的可药用盐、溶剂化物和前体药物形式也是本发明的一部分。
优选的化合物是：
其中R1和R2独立地选自氢或C1-4烷基；
R3和R4独立地选自氢、C1-4烷基，或者R2和R3一起可以是(CH2)m以形成饱和的杂环；
R5选自氢、卤素或者C1-6烷基；
R6和R7独立地选自氢、卤素、氰基、C1-4烷硫基、C1-4烷基或者以卤素取代的C1-4烷基；
R8和R9选自氢、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、NR10R11、或者以卤素、羟基或NR10R11取代的C1-6烷基；
R10和R11独立地选自氢、C1-4烷基、C(＝O)C1-4烷基、C(＝O)OC1-4烷基、C(＝O)NR1R2，或者R10和R11一起可形成饱和的6-元杂环，它包括选自N、O或S的其它杂原子；
A是(CH2)n或者CHC1-4烷基；
B是单键或双键，其中当B是双键时，R8和R9选自氢、C1-4烷基、或者以卤素、羟基、或NR10R11取代的C1-4烷基
m＝3-4；
n＝1-2；
X和Y是N或者C，其中X和Y不相同；而且虚键表示适当指定的单键和双键。
最优选的化合物是：
其中R1和R2独立地选自氢或C1-4烷基；
R3是C1-2烷基，或者R2和R3一起可以是(CH2)3以形成吡咯烷；
R4是氢；
R5选自氢或者C1-6烷基；
R6和R7独立地选自氢、卤素或C1-4烷基；
R8和R9独立地选自氢、羟基、C1-6烷氧基、NR10R11或者以羟基或NR10R11取代的C1-6烷基；
R10和R11独立地选自氢、C1-4烷基、C(＝O)C1-4烷基，或者，R10和R11一起可形成饱和的6-元杂环，它可包括选自N、O或S的其它杂原子；
A是(CH2)n；
B是单键；
n＝1；
X是C而且Y是N；并且
虚键表示适当指定的单键和双键。
优选的式I化合物的代表性实例是：
1-(2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇；
1-((S)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇；
(R)-1-((S)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇；
(S)-1-((S)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇；
1-((S)-2-氨基丙基)-3-甲基-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇；
1-((S)-1-吡咯烷-2-基甲基-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇；
1-((S)-2-氨基丙基)-5-氟-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇；
(R)-1-((S)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-基胺；
[1-((S)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-基]-二甲基胺；
[1-((S)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-基]-甲醇；
1-((S)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8，9-二醇；
1-((S)-2-氨基丙基)-9-甲氧基-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇；
1-(2-氨基丙基)-3，7，8，9-四氢-吡喃并[3，2-e]吲唑-8-醇；
1-(吡咯烷-2-基甲基)-3，7，8，9-四氢-吡喃并[3，2-e]吲唑-8-醇；
1-((S)-2-氨基丙基)-3，7，8，9-四氢-吡喃并[3，2-e]吲唑-8-醇；
1-((S)-2-氨基丙基)-3-甲基-3，7，8，9-四氢-吡喃并[3，2-e]吲唑-8-醇；或其组合。
式I的某些化合物可包含一个或多个手性中心。本发明包括所有的对映体、非对映体及其混合物。
在上述的定义中，一个取代基中的碳原子总数是通过Ci-j前缀表示的，此处数字i和j限定了碳原子的数目。本定义包括直链、支链以及环烷基或(cyclic alyky)烷基。当包含在所示的结构单元中时，取代基可以是单个或多个存在的。例如，取代基卤素，它指氟、氯、溴或碘，表示它所连接的单元被一个或多个相同或不同的卤素原子所取代。
合成
式I化合物可通过使用几个合成步骤中的一个来制备。例如1-(2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇类化合物可从一个适当保护的1-(6-羟基吲唑-1-基)-丙烷-2-醇(方案1中的1)按照方案1来制备。Pg表示一个合适的保护基团以确保特定原子在所示的化学反应过程中不会被修饰。
方案1
式I的其他化合物可从12通过本领域公知的选择性官能团的转化来制备。例如，先初步保护主要的氨基，接着通过形成磺酸酯例如甲磺酰酯活化羟基基团，然后与所需的亲核试剂例如烷基胺类化合物、二烷基胺类化合物、芳基或烷硫醇类化合物等反应，得到式I的化合物14。另外，用合适的氧化剂例如过共价(hypervalent)碘试剂如邻碘酰基苯甲酸[J.Org.Chem60，7272(1995)]直接氧化13，得到酮16，它被改变官能团还可得到式I的其他化合物，例如通过还原性的烷基化得到17，通过格氏加成(Grignardaddition)得到15。
方案2
或者，式I化合物可从适当取代的5-炔丙氧基-吲唑类化合物19经过初步的克莱森重排反应(Tetrahedron Lett.33，2179(1992)，ibid.35，45(1994)，ibid.41，3541(2000))得到中间体——取代的吡喃并[2，3-g]吲唑中间体20(方案3)。对20进行进一步的合成操作，例如，如方案3-5中所描绘的，使用公知的官能团转化还可得到其他所需的式I化合物。
方案3
方案4
对于式I化合物的制备有密切关系的1-(羟基烷基)-吲唑类化合物可按照方案6和共同悬而未决的美国专利申请60/295,427(在此整体引入作为参考)中所描绘的制备。活化的氟苯酚30和适当的氨基醇31反应，当A是腈时，它被还原得到相应的醛32，亚硝化得到33，接着通过还原环化得到1-(羟基烷基)-吲唑化合物34。
方案6
中间体吡喃并吲唑类化合物34还可以通过用所需的环氧化物，例如1，2-环氧丙烷，将适当的O-保护的6-羟基-吲唑(35)通过本领域公知的方法和方案7(美国专利5,494,928(1997)，WO98/30548(1998))进行环化而制备，其中合适的O-保护基为例如甲基或苄基。或者，使用氯丙酮烷基化35，接着通过中间体酮的还原(使用例如NaBH4)获得中间体34。
方案7
从适当取代的1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑，例如方案8中所描绘的36，制备特定的式I化合物是有利的。例如，按照上述方案4中所描述的条件烷基化36，然后适当活化羟基基团，接着通过形成磺酸酯(J.Chem.Soc.，Perkins第一卷：1479，1981)例如甲磺酰基酯、甲苯磺酰基酯、溴苯磺酰基酯或硝基苯基磺酰基酯，和与所需的胺反应，进行亲核胺化，得到式I化合物38。
方案8
另外，如方案9所示，吲唑类化合物36和活化的丙氨醇39反应得到40，然后去保护得到的式I化合物38。用例如活化的磺酸酯，或者相应的卤化物，或者N-保护的(例如以叔丁氧基羰基、苄氧基羰基保护的)吡咯烷-3-甲醇取代方案9中的39，然后除去胺保护基团，得到其它的式I化合物。更进一步地，以N-(2-羟基-1，1-二甲基-乙基)-邻苯二甲酰亚胺(J.Amer.Chem.Soc.，第108卷：3811，1986)、2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-甲基丙醇(J.Amer.Chem.Soc.，第113卷：8879，1991)、1-(叔丁氧基羰基)氨基]-环丙基-1-甲醇(J.Med.Chem.，第31卷：1694，1988)或2-甲基-2-硝基-丙烷-1-醇(J.Amer.Chem.Soc.，第68卷：12，1946)活化磺酸酯取代方案9中的39，然后去掉前三个中的N-保护基团或者还原第四个中的硝基，得到式I的其他实例38
方案9
特定所需的取代1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑类化合物可从适当取代的1H-吲唑-6-醇(41)，按照方案10中所描述的合成步骤制备。吲唑类化合物41以烯丙基碘烷基化，接着在克莱森重排条件下进行处理得到43。通过转化成例如酯(如乙酰基酯)阻止羟基进一步反应，并在氮原子上类似引入保护基团，例如通过和合适的异腈反应生成酰脲，从而得到所需的烯丙基吲唑45。用例如3-氯-过苯甲酸将烯烃环氧化，然后在碱性条件下环化，得到吡喃并吲唑中间体47。可通过本领域公知的官能团转化将吡喃并吲唑47的羟基基团转化成其它与式I一致的官能团。
方案10
所需的式I的吡喃并[3，2-e]吲唑-3-乙胺类化合物49(方案11)可从适当取代的3-(2-羟基丙基)-1H-吲唑-5-醇48通过方案1和3以及国际专利申请PCT/US00/31143(在此整体引入作为参考)中所描述的方法制备。
方案11
本发明的化合物可用于降低和调节IOP，包括温血动物(包括人)中与压力正常的青光眼、眼部高压和青光眼相关的IOP。自从优选用不进入CNS的化合物治疗青光眼后，是5-HT2激动剂的相对极性化合物引起了特别关注。所述化合物优选配制成适合病人眼部局部给药的药物组合物。
本发明的式I化合物可被包含到各种类型的药物组合物中，例如用于眼部给药的眼用制剂(例如，局部、眼房内(intracamerally)或经由植入)。这类化合物优选包含到用于眼部给药的局部眼用制剂中。这类化合物可与眼科上可接受的防腐剂、增粘剂、促渗剂、缓冲剂、氯化钠和水制成含水的灭菌眼用混悬液或溶液。眼用溶液制剂可通过将化合物溶解在生理上可接受的等渗缓冲水溶液中而制备。进一步地，眼用溶液可包含眼科上可接受的表面活性剂，以促进化合物的溶解。另外，眼用溶液可包含增粘剂，例如羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等，以改善制剂在结膜囊中的保留。也可使用胶凝剂，包括但不限于胶凝糖和黄原胶。为了制备灭菌眼用软膏制剂，将活性成分与防腐剂在合适的载体中混合，例如，矿物油、液体羊毛脂或白凡士林。灭菌眼用凝胶制剂可通过将活性成分混悬于由例如卡伯姆-974(carbopol-974)等组合制备的亲水基质中，按照公开的类似眼用制剂的配制方法制备，可加入防腐剂和张度剂。
该化合物优选配制成pH约为5至8的局部眼用混悬液或溶液。该化合物按重量计算一般以0.01％至5％的量包含于这些制剂中，但是优选0.25％至2％的量。因而，对于局部应用，按照熟练临床医师的处理，这些制剂可被每天1至4次，每次1至2滴滴于眼睛表面。
这类化合物还可与其它试剂组合用于治疗青光眼，例如但不限于，β-阻滞剂(例如，噻吗洛尔、倍他洛尔、左旋倍他洛尔、卡替洛尔、左旋布诺洛尔、普萘洛尔)、碳酸酐酶抑制剂(例如，布林唑胺和多佐胺)、α1拮抗剂(尼普地洛)、α2激动剂(例如，阿可乐定和溴莫尼定)、缩瞳剂(例如，皮罗卡品和肾上腺素)、前列腺素类似物(例如，拉坦前列素、特拉前列素(travaprost)、乌诺前列酮以及在美国专利5,889,052、5,296,504、5,422,368以及5，151,444中公开的化合物，“降血压脂类化合物(hypotensive lipids)”(例如lumigan以及在5,352,708中公开的化合物)，以及神经保护剂(neuroprotectants)(例如，来自于美国专利4,690,931的化合物，特别是悬而未决的申请U.S.S.N.06/203,350中公开的依利罗地和R-依利罗地，以及来自于WO94/13275的合适化合物，包括美金刚。)
在上述结构式中，烷基可是直链、支链或环状链等。卤素包括氯、溴、氟或碘。烷氧基被理解为烷基与氧原子键合而成。
本发明的化合物优选作为5-HT2激动剂起作用并且优选不进入CNS，更详细地，本发明的特定化合物在其结构中引入酚羟基，它被认为可比得上5-羟色胺，因而本发明化合物优选不通过血-脑屏障进入脑。具有5-HT2激动剂功能的化合物对调节IOP有利，也对国际公开专利申请WO00/16761(在此整体引入作为参考)公开的青光眼的治疗有利。
本发明的化合物优选提供更高的化学稳定性，并且优先达到所需的治疗活性水平，包括IOP的降低或调节。
本发明的化合物可用于调节或降低温血动物的IOP，包括人。优选地，给与病人有效量的所述化合物，使IOP调节或降低至可接受的水平。另外，本发明的化合物可用于治疗温血动物的青光眼，包括人。通过给予需要这样治疗的病人有效量的化合物来治疗青光眼。本发明化合物的适当的药学可接受的量的例子包括实施例中所示的量。
本发明的另一个实施方案是一个阻断或结合5-羟色胺受体的方法，包括给与病人有效量的至少一种本发明的化合物，所使用的量可有效地阻断或结合5-羟色胺受体，例如但不限于此处所描述的剂量水平。
下列给出的实施例是为了举例说明是本发明主题的化合物的制备，但是不应被解释为暗示对权利要求任何限定。式I的优选化合物在实施例4和5中被描述。最优选的化合物是实施例4。实施例中每一个化合物的核磁共振光谱与指定的结构一致。
方法1
5-HT2受体结合测定
为了确定5-羟色胺能化合物对5-HT2受体的亲和力，将文献方法(Neuropharmacology，26，1803(1987))稍作修改，如下测定它们对脑5-HT2受体激动剂放射性配体[125I]DOI的竞争性结合能力：将死后的大鼠或人的等份大脑皮层匀浆物试样(400μL)分散于50mM的TrisHCl缓冲剂中(pH7.4)，在有或没有美赛西平(methiothepin)(最终10μM)的条件下用[125I]DOI(最终80pM)温育，在0.5mL的总体积下分别确定总结合和非特异性结合。待测的混合物在23℃下在聚丙烯试管中孵育1小时，然后使用冰冷的缓冲液在事先用0.3％的聚乙烯亚胺中浸泡过的Whatman GF/B玻璃纤维过滤器上快速真空过滤终止测定。受试化合物(在不同的浓度下)以美赛西平代替。过滤器-结合的放射性(Filter-bound radioactivity)在β计数器上通过闪烁光谱测定。数据使用非线性的，与重复曲线相配的(iterative curve-fitting)计算机程序进行分析(Trends Pharmacol.Sci.，16，413(1995))，以确定化合物的亲和参数。抑制[125I]DOI最大结合的50％所需的化合物浓度称为IC50或Ki值。
方法2
5-HT2功能的测定：[Ca2+]i流通
在细胞内钙([Ca2+]i)上的受体-介导的流通通过使用荧光成像底片读数(Fluorescence Imaging Plate Reader，FLIPR)仪器测定。大鼠血管平滑肌细胞A7r5，在DMEM/10％FBS和10μg/mL庆大霉素的标准培养基中培养。融合的细胞单层受胰蛋白酶作用，成团，然后重新混悬于标准培养基中。以20,000细胞/孔的密度以50μL的体积将细胞接种在一个黑板(black wall)(96孔的组织培养平皿)上，然后培养2天。
在实验当天，将一小瓶FLIPR钙测定试剂盒染色剂重新混悬于50mLFLIPR缓冲剂中，所述缓冲剂由HANKs平衡盐溶液(HBSS)、20mM HEPES以及2.5mM丙磺舒组成，pH＝7.4。通过向96孔平皿中的每一个孔中添加等体积(50μL)染料溶液，使细胞负载钙敏性染色剂，并在23℃下孵育1小时。
典型地，受试化合物以25μM保存于50％DMSO/50％乙醇溶剂中。化合物在20％DMSO/20％乙醇中被稀释到1∶50。对于“碰撞”筛选，化合物在FLIPR缓冲液中被进一步稀释到1∶10，并且以最终10μM的浓度测定。对于剂量-反应实验，化合物在FLIPR缓冲液中被稀释到1∶50并且连续被稀释到1∶10而得到一条5个点或8个点的剂量-反应曲线。
化合物平皿和细胞平皿放置于FLIPR仪器中。在实验运行开始时，先进行信号测试，以检查来自于染色剂-负载的细胞的基础荧光信号以及通过平皿信号的一致性。通过修改曝光时间、照相机F-光圈(F-stop)或者激光器功率，基础荧光被调节至8000-12000计数之间。典型测试的仪器设置如下：激光器功率为0.3-0.6W，照相机F-光圈为F/2，曝光时间为0.4秒。等份受试化合物(25μL)以50μL/秒的施与速度加到现成的100μL染色剂-负载细胞上。荧光数据在第一个60秒每隔1.0秒实时收集，而在另外的120秒每隔6秒实时收集。反应以峰荧光强度减去基础荧光强度衡量，合适时以最大5-HT-诱导反应的百分数表示。当化合物作为拮抗10μM的5-HT拮抗剂被测试时，它们在添加5-HT前和细胞一起孵育15分钟。
上述方法得到表1中所示的数据。
表1
5-HT2A受体结合和功能数据 实施例 IC50，nM EC50，nM 效能(Emax，％) 3 2.19 145 85 4 2.25 65.3 92 5 3.44 226 70 6 6.56 175 87 7 3.73 194 85 8 0.686 90 85 9 0.274 41.4 91 5-HT 0.941 64.2 101
表2
清醒短尾猴的IOP反应 实施例 剂量 μg 基线IOP (mmHg) IOP降低百分率±SEM 服药后的时间 1 3 6 4 300 35.1 7.68± 2.91 25.8 ±3.53 30.2 ±4.48 5 300 34.3 7.9± 4.06 17.3 ±3.87 25.1 ±4.76
(R)-DOI 100 31.9 11.0± 4.98 35.3 ±2.97 34.4 ±4.98
制备1
1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
步骤A：6-烯丙氧基-1H-吲唑
向1H-吲唑-6-醇(20.0g，150mmol)的丙酮(450mL)溶液中加入粉碎的碳酸钾(22.4g，162mmol)、碳酸铯(2.00g，5.7mmol)和烯丙基碘(14.63mL，160mmol)，然后将混合物在室温下搅拌18小时。再添加碳酸钾(5.00g，36mmol)和烯丙基碘(1.4mL，15mmol)并将混合物搅拌2小时，接着过滤。将水(200mL)加到滤液中，在真空状态下将混合物的体积大约减少一半，然后用二氯甲烷(2×100mL)萃取。合并的萃取物干燥(MgSO4)并蒸发得到一残渣，该残渣用色谱法(硅胶，20％至50％的乙酸乙酯/己烷)纯化得到一黄色固体(14.7g，56％)：mp 110-112℃；LC/MS(+APCI)m/z 175(M+H)。未反应的起始原料被回收(4.71g)
步骤B：7-烯丙基-1H-吲唑-6-醇
将步骤A的产品(14.2g，82mmol)的1，2-二氯苯(90mL)溶液回流(fluxed)6小时，蒸发反应混合物得到一残渣，该残渣用色谱法(硅胶，乙酸乙酯)纯化得到黄褐色固体在下一步骤中使用：LC/MS(+APCI)m/z 175(M+H)。
步骤C：7-烯丙基-1H-吲唑-6-基乙酸酯
将步骤B的产品(6.35g，37mmol)在包含三乙胺(7.6ml，55mmol)的THF(100mL)中的溶液在室温下搅拌5分钟，冷却到0℃(冰浴)，然后加入乙酰氯(2.63mL，37mmol)。将混合物在0℃搅拌2小时，加入另一份乙酰氯(0.26mL，3.7mmol)，混合物搅拌至10分钟时加入另外一份乙酰氯(0.26ml，3.7mmol)并继续搅拌15分钟。用三乙胺(1mL)和饱和碳酸氢钠溶液(100mL)终止反应，然后以乙酸乙酯(100mL)萃取。萃取物干燥(MgSO4)并蒸发成油(9.27g)。该油用色谱法(硅胶，10％至50％的乙酸乙酯/己烷)纯化得到白色固体(3.50g，44％)：LC/MS(+APCI)m/z 217(M+H)。
步骤D：7-烯丙基1-乙基氨基甲酰基-1H-吲唑-6-基乙酸酯
向步骤C的产品(2.5g，11.6mmol)的THF(10mL)溶液中加入乙基异氰酸酯(1.01ml，13mmol)，并将混合物在70℃下加热18小时。反应混合物蒸发得到一残渣，该残渣用色谱法(硅胶，10％至50％的乙酸乙酯/己烷)纯化得到无色的油(2.70g，81％)：LC/MS(+APCI)m/z 288(M+H)。
步骤E：1-乙基氨基甲酰基-7-环氧乙烷基甲基-1H-吲唑-6-基乙酸酯
向步骤D的产品(2.70g，9.4mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入3-氯-过苯甲酸(2.31g，10.3mmol，纯度77％)，并将混合物在室温下搅拌1小时。再添加3-氯-过苯甲酸(0.2g，0.9mmol)并且继续反应3 小时。用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)终止反应，然后以二氯甲烷(50mL)萃取。萃取物干燥(MgSO4)并蒸发得到一白色固体(1.59g，56％)：mp 110-111℃；LC/MS(+APCI)m/z 304(M+H)。
步骤F：1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
向步骤E的产品(1.44g，4.75mmol)的甲醇(100mL)溶液中加入饱和碳酸钾水溶液(10mL)，然后将混合物在室温下搅拌18小时。向反应混合物中加入水(200mL)并用浓盐酸调至pH为7，接着通过乙酸乙酯萃取(5×100mL)。合并的萃取物干燥(MgSO4)并蒸发得到一黄褐色固体(0.84g，93％)：1HNMR(DMSO-d6)δ12.77(s，1H)，7.94(s，1H)，7.49(d，J＝6.0Hz，1H)，6.66(d，J＝6.0Hz，1H)，5.02(t，J＝6.0Hz，1H)，4.85-4.95(m，1H)，3.62(m，2H)，2.9-3.4(m，2H)；LC/MS(+APCI)m/z 191(M+H)。
制备2
1-(6-苄氧基吲唑-1-基)-丙烷-2醇
步骤A：(6-苄氧基-吲哚-1-基)-丙烷-2-醇
向搅拌的、冷却的(10℃)氢化钠(以60％分散于矿物油中的分散体80.7g，2.02mol)的无水THF(1.9L)混悬液中加入6-苄氧基吲哚(375g，1.68mol)的无水THF(1.9L)溶液并使温度保持在25℃以下。在10℃下反应2小时后滴加环氧丙烷(140mL，2.0mol)同时保持温度在25℃以下。在10℃下反应48小时后，加入环氧丙烷(71mL，1.0mol)。在10℃下反应96小时后，小心加入饱和磷酸二氢钾水溶液(3.8L)以及乙酸乙酯(3.8L)，分层并用3.8L乙酸乙酯萃取水溶液。合并的有机萃取物用硫酸钠干燥并真空浓缩得到一固体(520g，110％，包含矿物油)。
步骤B：N-(5-苄氧基-2-甲酰基苯基)-N-(2-羟基丙基)-甲酰胺
将步骤A的产品(172g)在1.5L二氯甲烷中的溶液冷却至-78℃并以臭氧处理(氧中含4％的臭氧)。过量臭氧以氧置换5分钟，接着添加二甲硫(78mL)并加温至25℃。溶液被浓缩至一半体积，通过硅酸镁载体洗脱用乙醚-乙酸乙酯冲洗然后真空浓缩。这个步骤重复4次：一批每批172g，3批每批58g。合并的产品通过硅胶(2.5kg)以10％-80％的乙酸乙酯-己烷梯度洗脱，真空浓缩后生成油(351g，70％)。
步骤C：4-苄氧基-2-(2-羟基-丙基氨基)苯甲醛
将步骤B的产品(298g，0.95mol)的冰冷THF(3L)溶液用1M氢氧化钠水溶液(1.95L，1.9mol)处理同时保持温度在8℃以下。在起始原料被消耗完以后，混合物用盐水稀释并以乙醚萃取两次。有机溶液用水冲洗直至中性，然后用盐水冲洗，用硫酸钠干燥，用活性炭处理然后用乙醚以及1∶1的乙酸乙酯-己烷使其流过二氧化硅(1kg)，真空浓缩后生成一黄色固体(207g，76％)。
步骤D：1-(6-苄氧基-吲唑-1-基)-丙烷-2醇
将步骤C的产品(202.7g，0.71mol)按照制备3的步骤C及D中所描述的方法处理。在亚硝胺中间体已经被转化成所需的吲唑产物和未反应的起始原料(5∶1)的混合物后，再加入亚硝酸钠(29.5g，0.43mol)重新亚硝化起始原料。如上所述在冷却下同时分批加入锌粉(84g，1.28mol)。当起始原料被消耗完以后，反应混合物按照所描述的方法进行处理并与另一批以176g步骤C的产品作为起始的产品合并。合并的粗产品用色谱法(BiotageKiloprep-250)纯化，得到一固体(226g，60％)：通过HPLC纯化得到的纯度为99％。
制备3
(R)-1-(6-苄氧基吲唑-1-基)-丙烷-2-醇
步骤A：4-苄氧基-2-氟苯甲腈
将苄基溴(467mL，3.93mol)和碳酸钾(1.4kg，10.1mol)加入到2-氟-4-羟基苯甲腈(490g，3.57mol)的丙酮(3.4L)溶液中。搅拌的混合物在60℃下加热20小时，然后冷却并过滤。滤液浓缩，然后将得到的固体用10％乙酸乙酯-己烷(5L)研磨，然后在35℃下真空干燥，得到所需的产品(787g，97％)。
步骤B：4-苄氧基-2-((R)-2-羟基-丙基氨基)苯甲腈
将(R)-(-)-1-氨基-丙烷-2-醇(389g，5.19mol)的二甲亚砜(600mL)溶液加入到步骤A的产品(786g，3.46mol)、碱式氧化铝(786g)以及4 A分子筛(131g)的溶液中。搅拌的混合物在110-140℃下加热24小时，然后冷却并过滤。助滤剂以10L 4∶1的乙醚-乙酸乙酯洗涤，接着以4L 3∶2的乙酸乙酯-己烷洗涤。有机洗液用水(5L)萃取，然后将水相用25％乙酸乙酯-己烷(4×2L)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩至大约3L，然后静置48小时。沉淀的固体通过过滤收集，用己烷洗涤，真空干燥，分两批得到所需的产品(619g和86g)。浓缩的上清液被放置在5kg的硅胶垫上并用10-50％的乙酸乙酯-己烷梯度洗脱，真空浓缩后得到副产物(119g)：总产率为791g(81％)。
步骤C：4-苄氧基-2-((R)-2-羟基-丙基氨基)苯甲醛
将次磷酸钠水合物(986g，11.2mol)和阮内镍(50％的水混悬液500g)加入到步骤B的产品在吡啶-乙酸-水(2∶1∶1)(7L)混合物中的溶液中。混合物于45℃下搅拌7小时，然后冷却至25℃过夜，然后通过助滤剂过滤用水和乙酸乙酯洗涤。滤液用饱和磷酸二氢钠洗涤至pH为5，用水以及盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。在浓缩期间，加入4L庚烷共沸除去吡啶。当8L溶剂被除去后产品凝固。加入庚烷(5L)并研磨固体，通过过滤分离并在35℃下真空干燥，生成所需的产品(722g，90％)。
步骤D：(R)-1-(6-苄氧基-吲唑-1-基)-丙烷-2-醇
以25分钟的时间将亚硝酸钠(209g，3.03mol)加入到搅拌着的步骤C的产品(720g，0.2.53mol)在乙酸(5.6L)和水(1.4L)中的溶液中，保持温度在25℃以下。将生成的亚硝胺中间体溶液冰浴冷却，然后以3.5小时的时间将锌粉(595g，9.10mol)按每份25g分批加入，并保持温度在35℃以下。加入乙酸乙酯(7L)然后将稠的混悬液通过烧结玻璃漏斗过滤，用乙酸乙酯(7.5L)洗涤。向包含所需的吲唑产品和再生的起始原料(5∶1)的混合物的滤液中加入基拉德试剂T(Girard’s Reagent T)(98g，0.58)。在25℃下搅拌1天后，再加入另外一份基拉德试剂T(150g，0.90mol)。在3天时间以后，所有的起始原料被消耗完。混合物用水萃取两次，用磷酸氢二钠水溶液除去乙酸、水和盐水，用硫酸钠干燥，通过硅酸镁载体过滤，然后浓缩。用1∶1的乙酸乙酯-己烷使残余物通过5kg的二氧化硅。特定的级分被合并浓缩，然后加入庚烷(4L)沉淀吲唑产品。固体通过过滤来收集，用1∶1的乙酸乙酯-己烷洗涤并在35℃下真空干燥，得到一黄色固体(417g，58％)：HPLC分析：(R)-占96.7％；(S)-占0.3％；起始化合物占3％。浓缩上清液得到了另外141g(20％)所需的产品。
制备4
(S)-1-(6-苄氧基吲唑-1-基)-丙烷-2-醇
方法1.S立体异构体按照上述的外消旋1-(6-苄氧基吲唑-1-基)-丙烷-2-醇的制备方法制备，不过使用(S)-1-氨基-2-丙烷代替外消旋的氨基醇。
方法2.步骤A：4-苄氧基-2-氟-苯甲腈
2-氟-4-羟基苯甲腈(15.0g，115mmol)、碳酸钾(21.0g，152mmol)以及苄基溴(19.6g，115mmol)在丙酮(150mL)中的混合物在氮气的保护下在50℃加热过夜。过滤除去固体并将滤液蒸发得到一残渣，该残渣与乙酸乙酯混合(500mL)。将溶液用盐水洗涤，干燥，蒸发得到一无定形固体：(24.9g，100％)。
步骤B：4-苄氧基-2((S)-2-羟基-丙基氨基)-苯甲腈
将步骤A的产品(24.8g，109mmol)、(S)-1-氨基-2-丙醇(12.3g，164mmol)，4埃分子筛(4.0g)以及碱式氧化铝(32g)在无水二甲亚砜(100mL)中的混合物在氮气保护下在95℃加热40小时。混悬液冷却至室温，通过助滤剂过滤，并以乙酸乙酯(2×300mL)及水(300mL)洗涤助滤剂。滤液含水层用乙酸乙酯萃取(2×300mL)并将合并的有机物用盐水洗涤(200mL)，干燥(MgSO4)，然后通过色谱法纯化(硅胶，乙酸乙酯/己烷)得到一粘性油(24.9g，81％)。
步骤C：4-苄氧基-2-((S)-2-羟基-丙基氨基)苯甲醛
0℃在氮气保护下向步骤B的产品(19.3g，68.3mmol)在无水环己烷和THF(200M1，40mL)混合物中的溶液以30分钟的时间加入氢化二异丁基铵(1M己烷溶液，239mL，239mmol)。在室温下搅拌混合物18小时，再加入另外的氢化二异丁基铵(40mL，40mmol)，并将混合物再搅拌24小时。反应的混合物在冰浴上冷却，然后反应通过加入另外的MeOH(放热)和保持pH为1的2N的HCl所终止。混合物用乙酸乙酯萃取(3×300mL)，然后将萃取物干燥并浓缩成一棕色油(18.5g)。粗制的油用乙酸乙酯/己烷研磨，过滤得到一油(16.1g，83％粗产率)。该原料的一小部分通过色谱法纯化(硅胶，20％至50％的乙酸乙酯/己烷)得到一固体；mp 68-69℃
步骤D：(S)-1-(6-苄氧基吲唑-1-基)-丙烷-2-醇(4)
在0℃下向步骤C(16.0g，56.1mmol)的产品在乙酸乙酯/水(150mL/30mL)中的混合物中，以40分钟的时间分批加入亚硝酸钠(7.75g，112mmol)。将混合物搅拌50分钟，冷却(冰浴)，然后分批加入锌(14.7g，224mmol)。1小时后，将混悬液温热至室温并再加入锌(14.7g，224mmol)。搅拌混合物1小时，浓缩后用乙酸乙酯萃取(2×300mL)。萃取物通过助滤剂过滤，将滤液用饱和的磷酸氢二钠水溶液洗涤(至pH＝8)，然后用盐水洗涤，用色谱法(硅胶，25％乙酸乙酯/己烷)纯化得到一油(7.01g，44％)。
实施例1
1-(2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
步骤A：6-苄氧基-1-[2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑
向1-(6-苄氧基吲唑-1-基)-丙烷-2-醇(10g，35.5mmol)在THF(100mL)和咪唑(3.4g，50mmol)中的混合物中加入叔丁基-氯-二甲基-硅烷(6.42g，42.6mmol)，并将混合物在室温下搅拌15分钟。反应混合物被倾入到饱和醋酸铵水溶液(300mL)中，然后用乙酸乙酯萃取(2×150mL)。用色谱法纯化(硅胶，乙酸乙酯/己烷)得到一黄色固体(10.6g，76％)：mp 56-58 C；LC/MS(+APCI)m/z 397(M+H)。
步骤B：1-[2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑-6-醇
氢气氛围下，将步骤A的产品(10.6g，27mmol)和钯-碳(palladium-on-carbon)(10％，0.26g)在甲醇中(250mL)的混合物搅拌6小时，加入二氯甲烷(100mL)然后将混合物过滤。将滤液蒸发得到一灰白色固体(7.0g，85％)：mp169-174℃；LC/MS(+APCI)m/z 307(M+H)。
步骤C：7-溴-1-[2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑-6-醇
0℃下将N-溴代琥珀酰亚胺(3.49g，19.6mmol)分10次在以20分钟的时间加入到步骤B的产品(6.00g，19.6mmol)的无水THF(300mL)溶液中。将混合物倾入到饱和硫酸氢钠水溶液(300mL)中，然后用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。将合并的萃取物干燥(MgSO4)并蒸发得到一残渣(6.39g)。色谱法纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷)得到一固体(4.95g，66％)：LC/MS(+APCI)m/z385，387(M+H)。
步骤D：7-溴-1-[2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-6-环氧乙烷基甲氧基-1H-吲唑
将步骤C的产品(4.47g，11.6mmol)、碳酸钾(2.25g，16mmol)以及表溴代醇(1.59mL，19mmol)在丙酮中的混悬液(230mL)加热回流20小时。再添加表溴代醇(epibromohydrine)(1.5mL，17.9mmol)并将混合物加热回流18小时。固体通过过滤除去并将滤液浓缩成油然后在乙酸乙酯(150mL)中溶解。该溶液用饱和的醋酸铵水溶液(150mL)洗涤，干燥(MgSO4)，然后蒸发成残渣，用色谱法纯化(硅胶，2％至10％的乙酸乙酯/己烷)得到一油(3.77g，74％)：LC/MS(+APCI)m/z 441，443(M+H)。
步骤E：1-溴-3-[7-溴-1-[2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑-6-基氧]-丙烷-2醇
在氮气保护下将二溴代乙烷(1.09mL，12.6mmol)滴加到镁粉(0.81g，33.5mmol)在无水THF(150mL)中的混悬液中。在此期间将混合物在大约50℃下加热直至观察到气体放出，然后冷却至40℃。再添加二溴代乙烷(0.05mL)，并将混合物加热回流20分钟然后将其置于冰浴中。向冷却的混合物中加入步骤D的产品(3.70g，8.38mmol)在THF(50mL)中的溶液。在室温搅拌20分钟后，用饱和的氯化铵水溶液(200mL)终止反应并将混合物用乙酸乙酯萃取(2×150mL)。萃取物蒸发得到一粗制的油(3.78g，86％)：LC/MS(+APCI)m/z 521，523，525(M+H)。
步骤F：7-溴-6-[3-溴-2-(1-乙氧乙氧基)-丙氧基]-1-[2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑
在0℃向步骤E的产品(3.78g，7.2mmol)和对甲苯磺酸(0.14g)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入乙基乙烯基醚(2.75mL，28.8mmol)。反应30分钟后用饱和的碳酸氢钠溶液(50mL)终止并将该混合物用二氯甲烷萃取(3×80mL)。蒸发并用色谱法纯化(硅胶，1％至8％的乙酸乙酯/己烷)得到一粘性油(3.30g，77％)：LC/MS(+APCI)m/z 593，595，597(M+H)。
步骤G：1-[8-(1-乙氧乙氧基)-8，9-二氢-7H-吡喃并[2，3-g]吲唑-1-基]丙烷-2-醇
在-78℃氮气保护下向步骤F的产品(3.3g，5.5mmol)在无水THF(100mL)中的溶液中加入正丁基锂锂(2.5M于己烷中，2.76mL，6.90mmol)。反应30分钟后用饱和的碳酸氢钠溶液(200mL)终止并将该混合物用乙酸乙酯萃取(2×150mL)。合并的萃取物干燥(MgSO4)然后蒸发得到一残渣，色谱法纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷)得到一油(1.06g)，将其溶解于THF中(50mL)；在此溶液中加入氟化四丁基铵(1M于THF中，3.84mL，13.8mmol)。在室温下将该混合物搅拌过夜，倾入饱和的碳酸氢钠溶液(200mL)中，然后用乙酸乙酯萃取(2×100mL)。合并的萃取物干燥(MgSO4)，蒸发，并用色谱法纯化(硅胶，20％至50％的乙酸乙酯/己烷)得到一油(0.52g，29％)：LC/MS(+APCI)mz321(M+H)。
步骤H：1-(2-叠氮丙基)-8-(1-乙氧乙氧基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑
0℃下向步骤G的产品(0.52g，1.6mmol)和三乙胺(1.12mL，8.1mmol)在无水THF(75ml)中的溶液中加入甲磺酸酐(0.71g，4.05mmol)。将混合物搅拌20分钟然后将叠氮化钠(2.11g，32.4mmol)和DMSO(20mL)一起加入。除去THF(真空)然后将反应混合物在90℃下加热3小时。混合物冷却，倾入饱和的碳酸氢钠溶液中(150mL)，然后用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。合并的萃取物用盐水洗涤(100mL)，干燥(MgSO4)，并蒸发得到残渣，通过色谱法纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷)得到一油(0.40g，72％)：LC/MS(+APCI)mz346(M+H)。
步骤I：1-(2-叠氮丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
向步骤H的产品(0.40g，1.1mmol)在THF(60mL)中的混合物加入1N的HCl(26mL)。搅拌40分钟后加入饱和的碳酸氢钠溶液(150mL)并将混合物用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。合并的萃取物干燥然后蒸发得到一残渣，色谱法纯化(硅胶，50％乙酸乙酯/己烷)得到一油(0.29g，92％)：LC/MS(+APCI)m/z374(M+H)。
步骤J：1-(2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇盐酸盐
在氢气氛围下，将步骤I的产品(0.27g，0.99mmol)和钯-碳(10％，0.03g)在乙醇中(250mL)的混合物室温下搅拌18小时，混合物过滤并将滤液蒸发得到一残渣，将其溶于乙酸乙酯/己烷(1∶1)(10mL)中。静置18小时后收集沉淀得到一无色固体(0.14g，57％)：mp 124-125℃；LC/MS(+APCI)mz248(M+H)。对C13H17N3O2·0.33H2O计算值：C，61.64；H，7.03；N，16.59。实测值：C，61.62；H，6.83；N，16.43。
实施例2
1-((R)-(2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇盐酸盐
步骤A：6-苄氧基-1-[(S)-2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑
在氮气保护下向(S)-1-(6-苯甲基氧吲唑-1-基)-丙烷-2-醇(2.03g，7.20mmol)在无水THF/DMF(100mL/35mL)的混合物中加入氢化钠(60％于矿物油中，0.40g，10.0mmol)。30分钟后加入叔丁基-氯-二甲基-硅烷(1.52g，10mmol)和催化量的NaI并将混合物在室温下搅拌过夜。再添加NaH(5mmol)和叔丁基-氯-二甲基-硅烷(5mmol)至反应混合物中，将其搅拌6小时。反应混合物蒸发得到一残渣并与饱和的碳酸氢钠水溶液混合，然后用乙酸乙酯萃取(2×200mL)。色谱法纯化(硅胶，乙酸乙酯/己烷)得到一油(2.81g，99％)。
步骤B：1-[(S)-2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑-6-醇
在氢气氛围下，将步骤A的产品(5.44g，13.7mmol)和钯-碳(10％，0.50g)在甲醇(200mL)中的混合物搅拌18小时，过滤然后蒸发得到一灰白色固体(3.80g，90％)：mp 171℃-172℃。
步骤C：7-溴-1-[(S)-2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑-6-醇
0℃下将N-溴代琥珀酰亚胺(2.20g，12.4mmol)分成3批以10分钟的时间加入到步骤B的产品(3.79g，12.4mmol)的无水THF(300mL)溶液中。20分钟后将混合物倾入到饱和的硫酸氢钠水溶液(100mL)中，然后用乙酸乙酯萃取(3×200mL)。将合并的萃取物干燥(MgSO4)并蒸发得到一残渣(4.79g)。色谱法纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷)得到一固体(3.66g，77％)：mp 103-105℃。
步骤D：7-溴-1-[(S)-2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-6-环氧乙烷基甲氧基-1H-吲唑
将步骤C的产品(3.66g，9.51mmol)、碳酸钾(1.92g，1.46mmol)以及表溴代醇(1.32mL，1.60mmol)在丙酮(230mL)中的混悬液加热回流30小时。通过过滤除去固体后将滤液浓缩成油并用色谱法纯化(硅胶，2％至10％的乙酸乙酯/己烷)，得到一油(3.33g，79％)：LC/MS(+APCI)m/z 441，443(M+H)。
步骤E：1-溴-3-[7-溴-1-[(S)-2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑-6-基氧]-丙烷-2醇
在氮气保护下将二溴代乙烷(2.13g，0.98mL，11.3mmol)以大约30分钟的时间分批加入到镁粉(0.73g，30.2mmol)在无水THF(50mL)中的混悬液中。在此期间将混合物在大约50℃下加热直至观察到气体放出。再将混合物继续搅拌1小时，将其置于冰浴室中，然后加入步骤D的产品(3.33g，7.55mmol)在THF中的溶液(10mL)。在室温搅拌1小时后，用饱和的氯化铵水溶液(100mL)终止反应，然后用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。萃取物蒸发得到一粗制的油(3.76g，95％)：LC/MS(+APCI)m/z 441，443(M+H-HBr)。
步骤F：7-溴-6-[3-溴-2-(1-乙氧乙氧基)-丙氧基]-1-[(S)-2-(叔丁基二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑
在0℃向步骤E的产品(1.85g，3.54mmol)和对甲苯磺酸(0.01g)在二氯甲烷(50mL)中的溶液加入乙基乙烯基醚(1mL，10.5mmol)。反应30分钟后用饱和的碳酸氢钠溶液(50mL)终止，然后用乙酸乙酯萃取(3×80mL)。蒸发并用色谱法纯化(硅胶，1％至8％的乙酸乙酯/己烷)得到一粘性油(1.79g，81％)：LC/MS(+APCI)m/z 595(M+H)。
步骤G：(S)-1-[8-(1-乙氧乙氧基)-8，9-二氢-7H-吡喃并[2，3-g]吲唑-1-基]-丙-2-醇
在-78℃和氮气保护下向步骤F的产品(0.90g，2.07mmol)在无水THF(50mL)中的溶液以3分钟的时间加入正丁基锂化锂(n-butyllithiumlithium)(2.5M于己烷中，1.56mL，3.90mmol)。反应30分钟后用饱和的碳酸氢钠溶液(80mL)终止然后将该混合物用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。合并的萃取物干燥(MgSO4)然后蒸发得到一油(1.30g)并将其溶解于THF中(50mL)；向此溶液中加入氟化四丁基铵(1M于THF中的溶液)。在室温下将该混合物搅拌过夜，倾入到饱和的碳酸氢钠溶液(80mL)中，然后用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。合并的萃取物蒸发并色谱法纯化(硅胶10％至40％的乙酸乙酯/己烷)得到一油(0.35g，53％)：LC/MS(+ES)m/z321(M+H)。
步骤H：1-((R)2-叠氮丙基)-8-(1-乙氧乙氧基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑
0℃下向步骤G的产品(0.35g，1.09mmol)和三乙胺(0.55g，5.47mmol)在无水THF(50ml)中的溶液中加入甲磺酸酐(0.47g，4.05mmol)。将混合物搅拌1小时然后加入叠氮化钠(0.71g，10.9mmol)。反应混合物蒸发得到一残渣并将其溶于无水DMF中(80mL)，然后在95℃下加热3小时。冷却混合物，倾入饱和的碳酸氢钠溶液(80mL)中，然后用乙酸乙酯萃取(3×80mL)。合并的萃取物干燥(MgSO4)，蒸发得到一残渣并用色谱法纯化(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷)得到一油(0.30g，80％)：LC/MS(+APCI)m/z 346(M+H)。
步骤I：1-((R)2-叠氮丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
向步骤H的产品(0.30g，0.87mmol)在THF(60mL)中的混合物中加入1N的HCl(20mL)。搅拌40分钟后加入饱和的碳酸氢钠溶液(80mL)，然后将混合物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并的萃取物干燥并蒸发得到一残渣，色谱法纯化(硅胶，20％至50％的乙酸乙酯/己烷)得到一油(0.22g，92％)。
步骤J：1-((R)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇盐酸盐
在氢气氛围下，将步骤I的产品(0.21g，0.77mmol)和钯-碳(10％，0.02g)在甲醇(30mL)中的混合物室温下搅拌18小时，混合物过滤然后将滤液与氯化氢的乙醇溶液(2N，1mL)混合；在60℃下将该溶液高真空蒸发得到一固体(0.13g，59％)：mp 82-86℃；LC/MS(+APCI)m/z 248(M+H)。对C13H17N3O2·HCl·0.1H2O·0.4C3H7NO计算值：C，54.17；H，6.72；N，15.12。实测值：C，54.06；H，6.76；N，14.98。
实施例3
1-((S)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
步骤A：1-((S)-2-叠氮丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
该化合物通过在实施例2步骤I中所描述的下列步骤制备，但使用1-((S)2-叠氮丙基)-8-(1-乙氧乙氧基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑，它是由(S)-1-(6-苯甲基氧吲唑-1-基)-丙烷-2-醇代替(R)-1-(6-苯甲基氧吲唑-1-基)-丙烷-2-醇按照所描述的步骤制备而成：油(0.45g，79％)；LC/MS(+APCI)m/z 274(M+H)。
步骤B：1-((S)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
步骤A的产品在甲醇中的溶液按照实施例2，步骤J所描述的方法处理得到游离碱，为一无定形固体(0.36g，88％)：mp 46-51℃；GCMS(Cl+)m/z248(M+H)。对C13H17N3O2·0.1H2O计算：C，62.68；H，6.96；N，16.97。实测值：C，62.55；H，7.03；N，16.64。
实施例4
(R)-1-((S)-2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
步骤A.1-[2-(R)-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-6-丙-2-炔基氧-1H-吲唑
向1-[(R)-2-叔丁基二甲基硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑-6-醇(10.93g，35.7mmol，由(R)-1-(6-苄氧基吲唑-1-基)丙烷-2-醇通过实施例2步骤B的方法制备而成)在丙酮(250mL)中的溶液中加入碳酸钾(6.90g，35.7mmol)和炔丙基溴(5.19mL，46.4mmol)，然后将混合物加热回流18小时。再添加碳酸钾(1.97g，14mmol)和炔丙基溴(1.2mL，10.7mmol)然后混合物回流2小时。固体通过过滤除去，然后将滤液浓缩成油并将其用色谱法纯化(硅胶，5％乙酸乙酯于己烷中)得到一油(1.40g，96％)：LCMS(+APCI)m/z 345(M+H)。
步骤B.1-[(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1，7-二氢-吡喃并[2，3-g]吲唑
将步骤A产品(10.9g，31.8mmol)的1，3，5-三甲基苯(60mL)溶液置于耐压试管中并真空脱气。将试管封闭并在190℃下加热20小时。溶液冷却然后用色谱法纯化(硅胶，10％乙酸乙酯于己烷中)得到一固体(9.53g，87％)：熔点：58-59℃；LC/MS(+APCI)m/z 345(M+H)。
步骤C.(R)-1-[(R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
在氮气保护和搅拌下向步骤B的产品(1.00g，2.91mmol)中加入9-BBN(0.5M于THF中，13mL，6.4mmol)同时搅拌。溶液于70℃下加热2小时，冷却至室温并以甲醇(5mL)和过氧化氢(30％，5mL)终止反应。搅拌30分钟后将混合物蒸发得到一残渣，将其与饱和的碳酸氢钠溶液(50mL)混合，然后用乙酸乙酯(3×50mL)萃取该混合物。合并的萃取物蒸发得到一残渣将其用色谱法纯化(硅胶，10％至30％的乙酸乙酯于己烷中)得到所需的非对映体，为一粘性油(0.56g，75％)和一无法分离的非对映体的混合物(0.22g)：LCMS(+APCI)m/z 363(M+H)。
步骤D：(R)-1-((S)2-叠氮基-丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
在0℃和氮气保护下将步骤C的产品(0.56g，1.55mmol)，吡啶对甲苯磺酸盐(50mg)和乙基乙烯基醚(1mL)在无水二氯甲烷(50mL)中的溶液搅拌1小时。撤去冷却浴后将混合物搅拌1小时，然后加入三乙胺(10mL)。蒸发混合物得到一残渣，并与THF(10mL)和氟化四丁基铵(1M于THF中的溶液，3.1mL，3.1mmol)合并，然后搅拌1小时。蒸发反应混合物得到一残渣并用色谱法纯化(硅胶，10％至30％的乙酸乙酯于己烷中)，得羟基-醚中间体，为一油(0.47g，96％)。在0℃向该油(0.46g，1.44mmol)在无水THF(50mL)中的溶液中加入三乙胺(0.726g，7.19mmol)和甲磺酸酐(0.50g，2.88mmol)，然后将混合物搅拌30分钟。加入叠氮化钠(0.936g，14.4mmol)并通过蒸发除去溶剂。加入DMF(50mL)并将混悬液在100℃下加热4小时，冷却并用乙酸乙酯萃取(3×80mL)。合并的萃取物用水洗涤，干燥然后用色谱法纯化(1％至10％的乙酸乙酯于己烷中)得到叠氮-醚，为一油(0.38g，77％)。将油溶于甲醇中(10mL)，然后加入对甲苯磺酸(50mg)；将溶液搅拌1小时。加入三乙胺(0.1mL)并将混合物蒸发得到一残渣，将其用色谱法纯化(10％至35％的乙酸乙酯于己烷中)得到所需的叠氮-醇，为一固体(0.27g，99％)：LCMS(+APCI)m/z 274(M+H)。
步骤E：(R)-1-((S)2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
将步骤D的产品按照实施例2步骤J中所描述的方法处理，得到所需的化合物，为一淡黄色固体(0.26g，65％)：mp 126-128℃；[α]D＝+47.7°(c0.352，CH3OH)；[α]405＝+115°(c 0.352，CH3OH)；LC/MS(+APCI)m/z 248(M+H)；对C13H17N3O2计算值：C，63.14；H，6.93；N，16.99。实测值：C，63.37；H，6.79；N，16.93。
实施例5
(S)-1-((S)2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
步骤A：(S)-1-((S)2-叠氮-丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
将实施例3步骤A的产品(1.35g)置于填充手性吸附剂(Chiracel OJ)的色谱柱上。用己烷和2-丙醇的混合物(9∶1)洗脱，把该混合物分离成两个非对映体：S，8S-非对映体(0.68g)和S，8R-非对映体(0.65g)。
步骤B：(S)-1-((S)2-氨基丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
步骤A的S，8S-非对映体(0.23g)在甲醇中的溶液按照实施例3步骤B中所描述的方法处理，得到一油(0.18g，87％)：[α]D＝-6.21°(c 0.467，CH3OH)；[α]405＝-3.5°(c 0.467，CH3OH)；对C13H17N3O2·0.2H2O计算值：C，62.22；H，7.03；N，16.74。实测值：C，62.36；H，7.06；N，16.93。
实施例6
(R)-1-((S)-2-氨基-丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-基胺三盐酸盐
步骤A：(S)-8-叠氮-1-((R)-2-叠氮-丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑
0℃下向实施例5，步骤A的S，8S-非对映异构体(0.44g，1.61mmol)和三乙胺(0.90mL，6.44mmol)的无水THF(50mL)溶液中加入甲磺酸酐(0.56g，3.22mmol)；搅拌混合物30分钟，撤去冰浴器，然后将混合物再搅拌20分钟。反应混合物蒸发得到一残渣并向该残渣中加入DMSO(50mL)和叠氮化钠(1.05g，16.1mmol)，接着在90℃下加热5小时。混合物冷却，倾入到水中，然后用乙酸乙酯萃取(3×60mL)。合并的萃取物干燥，过滤，然后蒸发至干。用色谱法纯化(硅胶，5％至25％的乙酸乙酯于己烷中)，得到一油(0.19g，66％)：LC/MS(+APCI)m/z 299(M+H)。
步骤B：(R)-1-((S)-2-氨基-丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑8-基胺三盐酸盐
步骤A产品在甲醇中的溶液按照实施例2，步骤J所描述的方法处理，得到一淡黄色固体(0.16g，78％)：mp＞300℃；LC/MS(+APCI)m/z 247(M+H)。对C13H21Cl3N4O·0.33C2H5OH·0.5H2O计算值：C，43.14；H，6.35；N，14.72。实测值：C，43.52；H，6.39；N，14.51。
实施例7
(8R*，9S*)-1-((S)-2-氨基-丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8，9-二醇
步骤A：(S)-2-(6-羟基-1H-吲唑-1-基)-1-甲基乙基氨基甲酸苄酯
向1-((S)-2-氨基-丙基)-1H-吲唑-6-醇(2.00g，10.5mmol)在THF(20mL)中的混悬液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)和氯甲酸苄酯(1.50mL，1.5mmol)。搅拌混合物直至所有的固体起始胺溶解。在室温下搅拌45分钟后，加入饱和碳酸氢钠(150mL)水溶液，混合物用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。合并的萃取物干燥(MgSO4)并蒸发得到一黄褐色泡沫状物(2.65g，78％)：LC/MS(+APCI)m/z 326(M+H)。
步骤B：(S)-1-甲基-2-(6-丙-2-炔基氧-吲唑-1-基)-1-乙基氨基甲酸苄酯
将步骤A的产品(2.88g，8.86mmol)的丙酮(100mL)的溶液通过低压和氮气脱气。粉末状的碳酸钾(1.35g，9.75mmol)和炔丙基溴(按重量计算以80％于甲苯中，0.99mL，8.86mmol)加入到混合物中并回流24小时。过滤冷却的反应混合物并将滤液蒸发得到一黄色油(3.15g)，将其用色谱法纯化(硅胶，20％至50％的乙酸乙酯于己烷中)得到一白色的固体(2.37g，74％)：mp104-106℃；LC/MS(+APCI)m/z 364(M+H)。
步骤C：((S)1-甲基-2-(7H-吡喃[2，3-g]吲唑-1-基)-乙基氨基甲酸苄酯
将步骤B的产品(2.37g，6.53mmol)以与实施例4步骤B中所描述的方法相似的方式在1，3，5-三甲基苯(40mL)中加热，接着纯化(硅胶，20％至50％的乙酸乙酯于己烷中)得到一油(1.01g，43％)：LC/MS(+APCI)m/z 364(M+H)。
步骤D：(S)-2-((8R*，9S*)-8，9-二羟基-8，9-二氢-7H--吡喃并[2，3-g]吲唑-1-基)-1-甲基-8，9-乙基氨基甲酸苄酯
在室温下将步骤C的产品(1.01g，2.78mmol)在叔丁基醇(20mL)和水(20mL)混合物中的溶液加入到叔丁基醇(25mL)、水(25mL)、AD-mix-α(4.2g)和甲磺酰胺(0.26g，2.8mmol)的混合物中。搅拌反应混合物24小时，接着再添加粉末状的亚硫酸钠(5g)并再搅拌1小时。将饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)加入到混合物中后，用乙酸乙酯萃取(3×150mL)。合并的萃取物干燥(MgSO4)并蒸发得到一油(1.03g)，将其用色谱法纯化(硅胶，从50％的乙酸乙酯的己烷溶液至乙酸乙酯)得到两个产品。产品A为一白色泡沫状物(0.16g，15％)：非对映体的比例为4∶1；LC/MS(+APCI)m/z 398(M+H)。产品B为一无色无定形固体(0.18g，16％)：mp 64-67℃；非对映体的比例为1∶4；.LC/MS(+APCI)m/z 398(M+H)。
步骤E：(8R*，9S*)-1-[(2S)-2-氨基-丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑8，9-二醇
将步骤D的产品A(0.14g，0.354mmol)的THF(20mL)溶液按照实施例2步骤J所描述的方法处理，得到游离碱，为一无色固体(50mg，54％)：：mp115-117℃：[α]D-79.3°(c 0.27，THF)，非对映体的比例为4∶1；LC/MS(+APCI)m/z 264(M+H)和246(M+H-H20)。
步骤8
(S)-2-(8，9-二氢-7H-吡喃并[2，3-g]吲唑-1-基)-1-甲基-乙胺二盐酸盐
步骤A：(R)-1-(7H-吡喃并[2，3-g]吲唑-1-基)-吡喃-2-醇
将实施例4步骤B的产品(0.26g，0.76mmol)和氟化四丁基铵(1M，1.52mmol)在THF(3mL)中的混合物在室温下搅拌4小时。将反应混合物加入到饱和的碳酸氢钠水溶液(10mL)中，然后将混合物用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。合并的萃取物干燥然后蒸发得到一残渣并将其用色谱法纯化(硅胶，10％至40％的乙酸乙酯于己烷中)得到醇，为一油(0.14g，81％)：LC/MS(+APCI)m/z231(M+H)。
步骤B：1-((S)-2-叠氮-丙基)-1，7-二氢-吡喃并[2，3-g]吲唑
在0℃向步骤A(0.14g，0.61mmol)和三乙胺(0.18g，1.8mmol)在无水THF(50ml)中的溶液加入甲磺酸酐(0.16g，0.92mmol)。混合物搅拌10分钟后加入叠氮化钠(0.40g，6.1mmol)；蒸发溶剂，然后加入无水DMF(50mL)，接着在110℃加热3小时。冷却混合物；倾入饱和的碳酸氢钠溶液(80mL)中，然后用乙酸乙酯萃取(3×60mL)。合并的萃取物干燥，过滤，然后蒸发得到一残渣，将其用色谱法纯化(硅胶，10％乙酸乙酯于己烷中)得到一油(0.06g，39％)：LC/MS(+APCI)m/z 256(M+H)。
步骤C：(S)-2-(8，9-二氢-7H-吡喃并[2，3-g]吲唑-1基)-1-甲基-乙胺二盐酸盐
将步骤B的产品在甲醇中的溶液按照实施例2步骤J所述方法处理，得到一淡黄色油(0.07g，77％)：mp＞120℃；LC/MS(+APCI)m/z232(M+H)。得到游离碱形式，为一无色固体：mp 95-98℃；[α]D-66.7°(c 0.445，THF)。C13H17N3O计算值：C，67.51；H，7.41；N，18.17。实测值：C，67.47；H，7.51；N，17.91。
实施例9
(S)-1-甲基-2-(7H-吡喃并[2，3-g]吲唑-1基)-乙胺
在0℃向实施例8步骤B的产品(0.10g，0.39mmol)在干的THF(20ml)中的溶液中加入氢化铝锂(1M在THF中的溶液0.39mL，1.56mmol)，并将混合物温热至室温(1小时)同时搅拌。将氢氧化钾水溶液(2M，0.02mL)加入到反应混合物中，然后将得到的固体过滤除去。滤液蒸发成一黄色油(0.05g，56％)：LC/MS(+APCI)m/z230。C13H15N3O·H2O计算值：C，67.26；H，6.60；N，18.10。实测值：C，67.35；H，6.45；N，17.76。
实施例10
1-((S)2-氨基-丙基)-1H-吡喃并[2，3-g]吲唑-7-酮三氟乙酸酯
将1-((S)2-氨基-丙基)-1H-吲唑-6-醇(1.00g，5.23mmol)和苹果酸(0.74g，5.5mmol)在浓硫酸(3mL)中的混悬液在80℃下加热48小时，然后在90℃下加热24小时。反应混合物用磷酸钠中和(磷酸氢二钠，至pH＝7)，然后加入盐水(100mL)，接着用THF(3×100mL)萃取。合并的萃取物干燥(MgSO4)，然后蒸发得到一黄色残渣(0.54g)，将其用反相色谱法纯化(C-18，水/乙腈，0.1％三氟乙酸)得到一黄色油(70mg)LC/MS(+APCI)m/z244(M+H)。
实施例11
9-氨基-1-((S)2-氨基-丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
步骤A：(S)-2-(8-溴-9-羟基-8，9-二氢-7H-吡喃并[2，3-g]吲唑-1-基)-1-甲基乙基氨基甲酸苄酯
在0℃向实施例7步骤C的产品(1.35g，3.71mmol)在二甲亚砜和水(20mL∶2mL)混合物中的溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(0.69g，3.89mmol)。该混合物搅拌2小时，与水(100mL)混合，然后用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。合并的萃取物干燥并浓缩得到一残渣，将其用色谱法纯化(硅胶，20％乙酸乙酯于己烷中)得到一油(1.18g，69％)：LC/MS(+APCI)m/z460，462(M+H)。
步骤B：(S)-2-(9-叠氮-8-溴-8，9-二氢-7H-吡喃并[2，3-g]吲唑-1-基)-1-甲基乙基氨基甲酸苄酯
将步骤A的产品(0.31g，0.67mmol)和叠氮化钠(0.65g，10mmol)在二甲亚砜(20mL)中的混合物在80℃下加热3小时，冷却至室温，然后用乙酸乙酯萃取。干燥合并的萃取物并浓缩得到一残渣，将其用色谱法纯化(硅胶，30％乙酸乙酯于己烷中)得到一油(0.26g，68％)：LC/MS(+APCI)m/z423(M+H)。
步骤C：9-氨基-1-((S)2-氨基-丙基)-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
将步骤B的产品(0.26g，0.30mmol)和Pd/C(10％，0.026g)与甲醇(5mL)混合然后在氢气氛围下放置18小时。过滤混合物并浓缩得到一淡黄色固体(0.155g，96％)：mp 84-88℃；LC/MS(+APCI)m/z 263(M+H)。
实施例12
1-((S)2-氨基-丙基)-9-甲氧基-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
步骤A：((S)-2-(8-羟基-9-甲氧基-8，9-二氢-7H-吡喃并[2，3-g]吲唑-1-基)-1-甲基乙基氨基甲酸苄酯
向实施例11步骤A的产品(0.46g，1.12mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入2N的氢氧化钠(6mL)。搅拌10分钟后，加入甲醇(10mL)并搅拌1小时，接着通过蒸发得到一残渣，将其与水(50mL)混合然后用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并的萃取物用硫酸镁干燥，过滤后蒸发得到一残渣，将其用色谱法纯化(硅胶，20至35％的乙酸乙酯于己烷中)得到一油(0.45g)：LC/MS(+APCI)m/z 378(M+H)。
步骤B：1-((S)2-氨基-丙基)-9-甲氧基-1，7，8，9-四氢-吡喃并[2，3-g]吲唑-8-醇
向步骤A的产品(0.22g，0.58mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入三氟乙酸(5mL)，然后将混合物在室温下搅拌2天。蒸发混合物得到一残渣，并将其与2N盐酸的乙醇溶液一起搅拌，然后蒸发得到一固体(0.21g)：mp 105-108℃；LC/MS(+APCI)m/z 278(M+H)。
按照熟练临床医师的判断以1-4次/天的施用频率，下列局部用眼制剂是有用的。
实施例13 组分 含量(重量％) 实施例3的化合物 0.01-2％ 羟丙基甲基纤维素 0.5％ 磷酸氢二钠(无水) 0.2％ 氯化钠 0.5％ EDTA二钠(乙二胺四乙酸二钠) 0.01％ 聚山梨醇酯80 0.05％ 苯扎氯铵 0.01％ 氢氧化钠/盐酸 调pH至7.3-7.4 纯净水 适量至100％
实施例14 组分 含量(wt.％) 实施例3的化合物 0.01-2％ 甲基纤维素 4.0％ 磷酸氢二钠(无水) 0.2％ 氯化钠 0.5％ EDTA二钠(乙二胺四乙酸二钠) 0.01％ 聚山梨醇酯80 0.05％ 苯扎氯铵 0.01％
氢氧化钠/盐酸 调pH至7.3-7.4 纯净水 适量至100％
实施例15 组分 含量(wt％) 实施例3的化合物 0.01-2％ 瓜尔胶 0.4-6.0％ 磷酸氢二钠(无水) 0.2％ 氯化钠 0.5％ EDTA二钠(乙二胺四乙酸二钠) 0.01％ 聚山梨醇酯80 0.05％ 苯扎氯铵 0.01％ 氢氧化钠/盐酸 调pH至7.3-7.4 纯净水 适量至100％
实施例16 组分 含量 实施例3的化合物 0.01-2％ 白凡士林和矿物油和羊毛脂 调节软膏稠度的量 磷酸氢二钠(无水) 0.2％ 氯化钠 0.5％ EDTA二钠(乙二胺四乙酸二钠) 0.01％ 聚山梨酸酯80 0.05％ 苯扎氯铵 0.01％ 氢氧化钠/盐酸 调pH至7.3-7.4
基于此处所公开的本发明的详细说明以及实验，本发明的其他实施方案对本领域的技术人员来说是显而易见的。要指出的的是，本发明的详细说明和实施例被认为仅仅是示范性的，发明的真实范围和要旨通过下列的权利要求及其等同物而表示出来。